專利名稱：用于神經(jīng)元再生和功能恢復(fù)的σ配體的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及達(dá)成具有神經(jīng)退化性病癥的受治療者中神經(jīng)元再生的治療方法。本發(fā)明特別涉及σ受體配體在神經(jīng)退化性疾病之后的受治療者中促進神經(jīng)元再生和功能恢復(fù)的用途。
背景技術(shù)：
Martin等人的(1976)J.Pharmacol.Exp.Ther.197517-532提到σ受體配體的存在以解釋苯并嗎吩酚(benzomorphan)的擬精神病作用。起初認(rèn)為σ受體為新穎類鴉片受體。然而，苯并嗎吩酚與σ受體的結(jié)合不受典型類鴉片受體拮抗劑納洛酮(naloxone)拮抗。此外，苯并嗎吩酚結(jié)合到N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受體復(fù)合物上不同于苯環(huán)己哌啶受體的位點。因此，確認(rèn)所述σ受體為一種獨特的受體。
所述σ受體由兩種命名為σ-1和σ-2的亞型組成。Hellewell和Bowen(1990)Brain Res.，527224-253首次對兩種假定σ受體亞型的特征下了定義。在這兩種位點之間的主要藥理區(qū)別為苯并嗎吩酚鴉片劑(+)異構(gòu)體對結(jié)合位點的親和力。這些諸如(+)SKF 10,047(NANM)和(+)戊唑星的化合物顯示對σ-1位點的親和力與σ-2位點相比高接近兩個數(shù)量級。苯并嗎吩酚(-)異構(gòu)體在這兩種位點之間幾乎不顯示選擇性。在所述兩種位點之間所注意到的其它區(qū)別為σ-2部位在諸如NCB-20、PC12和NG 108-15細(xì)胞的細(xì)胞株中占優(yōu)勢(Hellewell和Bowen；Quirion，R.，等人，(1992)Trends inPharmacological Sciences，13.85-86)。已鑒定且克隆σ-1受體，但是σ-2受體還沒有達(dá)成(Langa等人，European Journal of Neuroscience，第18卷，2003，第2188-2196頁)。σ受體的內(nèi)源性配體尚不為人所知。
σ-1受體在大腦中的亞細(xì)胞分布包括海馬狀突起、皮層和嗅球。σ-1為26kDa蛋白，且已對編碼受體的基因進行克隆。水療法分析提出σ-1受體具有兩個跨膜片段。此外，σ-1受體和任何其它已知哺乳動物蛋白不具有同源性。
兩種類型的σ受體于中樞神經(jīng)系統(tǒng)和周圍組織中表達(dá)。因此，所述受體的配體可用于治療和預(yù)防神經(jīng)退化性疾病。為此，腦部σ受體已成為集中調(diào)查的主題(Sonders等人，(1988)Trends Neurosci.，137-40)。通常顯現(xiàn)σ受體雜亂地結(jié)合到多種諸如精神病藥物、抗抑郁藥和神經(jīng)類固醇的配體。已證明其在健忘癥的動物模型和抑郁癥的行為模型中對學(xué)習(xí)和記憶起著重要作用。眾多研究已證明σ受體配體在腦缺血動物模型中的強大神經(jīng)保護特性。因為已報道NMD A受體通道復(fù)合物的σ受體和苯環(huán)己哌啶(PCP)兩結(jié)合位點有助于這些作用，所以若干這些σ配體的神經(jīng)保護機理已引起爭議。
神經(jīng)退化性疾病的特征在于神經(jīng)元的功能失調(diào)和死亡，其導(dǎo)致受大腦、脊髓和周圍神經(jīng)系統(tǒng)調(diào)節(jié)的功能喪失。這些病癥對社會具有嚴(yán)重影響。舉例來說，約4到5百萬美國人罹患稱為阿茲海默氏癥(Alzheimer′s disease)的慢性神經(jīng)退化性疾病。慢性神經(jīng)退化性疾病的其它實例包括糖尿病性周圍神經(jīng)病、多發(fā)性硬化、肌萎縮性側(cè)索硬化、創(chuàng)傷性腦損傷、脊髓損傷、亨廷頓氏疾病和帕金森氏癥。正常大腦老化也與正常神經(jīng)元功能喪失相關(guān)且可引起某些神經(jīng)元的耗盡。
中風(fēng)在美國是第三大死亡原因，且占神經(jīng)病學(xué)住院患者的一半。視大腦受損區(qū)域而定，中風(fēng)可導(dǎo)致昏迷、癱瘓、言語問題和癡呆。腦梗塞的主要原因是血管血栓癥、腦栓塞、低血壓、高血壓性腦出血和缺氧癥/低氧癥。然而，成人大腦在整個生命期中即使在中風(fēng)或者大腦缺血之后仍然保持可塑性和功能性重組的能力。連續(xù)重新塑造神經(jīng)元連接。大腦補償大腦受損部分的潛在能力與中風(fēng)康復(fù)有關(guān)。中風(fēng)患者中的神經(jīng)成像暗示著一些功能重組。因此，大腦可塑性的一個方面在于在中風(fēng)患者中，可通過感覺輸入、經(jīng)驗和學(xué)習(xí)來修改神經(jīng)元連接，且大腦可通過功能和結(jié)構(gòu)重組、對事件的神經(jīng)響應(yīng)的上調(diào)或下調(diào)和通過側(cè)枝發(fā)芽和補償性突觸發(fā)生以及神經(jīng)發(fā)生建立新功能和結(jié)構(gòu)連接來作出響應(yīng)。
然而，除環(huán)境因素對大腦可塑性的作用以外，藥物和藥物與環(huán)境因素之間的相互作用是另一個有待考慮的方面。因此，仍然存在對治療中樞神經(jīng)系統(tǒng)病癥和其它病癥的新藥物和新方法的需要，所述藥物和方法利用大腦可塑性來幫助神經(jīng)元再生和功能恢復(fù)。本發(fā)明實現(xiàn)這些和其它需要。
已在用于測試藥物神經(jīng)保護活性的預(yù)測模型中發(fā)現(xiàn)幾個σ受體配體是神經(jīng)保護性的(也就是說，防止神經(jīng)元細(xì)胞死亡和因此而引起的功能喪失)。舉例來說，發(fā)現(xiàn)σ受體配體奧匹哌醇(opipramol)保護沙鼠免患缺血癥且發(fā)現(xiàn)其調(diào)節(jié)NMDA型谷氨酸受體。另外，其它包括BMY-14802、卡拉米芬(caramiphen)和氟呱啶醇(haloperidol)的σ配體在活體內(nèi)模型中展現(xiàn)與提供對抗NMDA誘發(fā)的毒性和癲癇發(fā)作的保護作用相一致(M.Pontecorvo等人，(1991)Brain Res.Bull.，26461-465)的特性，且發(fā)現(xiàn)幾個σ配體在活體外抑制缺血誘發(fā)的谷氨酸從海馬狀突起切片制備物釋放(D.Lobner等人，(1990)Neuroscience Lett.，117169-174)。
美國專利第5,736,546號揭示某些為σ受體配體的1，4-(二苯基烷基)哌嗪衍生物。其中一種化合物1-(3，4-二甲氧基苯乙基)-4-(3-苯丙基)哌嗪現(xiàn)同樣已知為SA4503。Nakazawa等人的Neurochem.Int.，32(1998)，337-343報道SA4503是選擇性σ-1激動劑且發(fā)現(xiàn)其有效抑制大鼠原始神經(jīng)元培養(yǎng)物中缺氧癥/低血糖癥誘發(fā)的神經(jīng)毒性。這種神經(jīng)保護行為使得作者們提議σ-1受體可適用于治療神經(jīng)退化癥(參見第342頁)。Senda等人的EuropeanJournal of Pharmacology，342(1998)，105-111進一步報道發(fā)現(xiàn)SA4503在培養(yǎng)的大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)元中呈現(xiàn)對抗谷氨酸神經(jīng)毒性的活性。作者們提議σ-1受體激動劑可適用于對抗由于缺血癥所引起的伴隨神經(jīng)元細(xì)胞死亡的視網(wǎng)膜疾病，諸如中心和分枝視網(wǎng)膜動脈閉塞、糖尿病、老化相關(guān)的黃斑退化性、血紅蛋白病和各種類型的青光眼。目前SA4503經(jīng)歷治療抑郁癥的臨床發(fā)展階段且也注意到其在治療癡呆和藥物依賴性中具有潛在用途。
美國專利第5,665,725號揭示某些為σ受體配體的哌啶衍生物。據(jù)說所述化合物適用于治療焦慮癥、精神病、癲癇癥、驚厥、動作失調(diào)、運動障礙、健忘癥、腦血管疾病、阿茲海默氏類型的老年性癡呆和帕金森氏癥。其中一種化合物1′-[4-[1-(4-氟苯基)-1H-吲哚-3-基]-1-丁基]螺[異苯并呋喃-1(3H)，4′-哌啶]同樣已知為Lu 28-179或司勞美辛(siramesine)。它是選擇性σ-2激動劑且也顯現(xiàn)對σ-1受體的活性(Perregaard J.，等人，J.Med.Chem.，1995，38，第1998-2008頁)。國際專利申請公開案第WO 99/24436號進一步揭示所述化合物的氫鹵酸鹽、尤其是鹽酸鹽具有良好的生物利用度。
因此，所述技術(shù)提議σ配體在治療具有神經(jīng)退化性疾病的受治療者中可適用作神經(jīng)保護劑。
出乎意料的是，現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)某些σ配體在罹患神經(jīng)退化性疾病的受治療者中促進功能恢復(fù)。因此，σ配體在治療神經(jīng)元損傷之后的神經(jīng)退化性疾病中適用作神經(jīng)保護劑。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供用于治療神經(jīng)退化性疾病的方法和組合物。本發(fā)明的σ受體配體增進功能恢復(fù)和神經(jīng)元再生。這些分子可單獨遞送或與其它藥劑組合遞送，且用作治療諸如那些由缺血性中風(fēng)或其它破壞神經(jīng)元的損傷而造成的疾病的神經(jīng)退化性疾病的神經(jīng)元再生劑。
因此，一方面，本發(fā)明是針對于一種在對其有需要的受治療者中治療或預(yù)防神經(jīng)退化性疾病的方法。所述方法包含對受治療者投與醫(yī)藥有效量的σ受體配體。
本發(fā)明因而提供在對其有需要的哺乳動物受治療者中治療神經(jīng)退化性疾病以便在神經(jīng)退化性疾病之后促進導(dǎo)致功能恢復(fù)的神經(jīng)元再生的方法，所述方法包含對所述受治療者投與醫(yī)藥有效量的σ受體配體。
另一方面，本發(fā)明提供σ配體在制造一藥物中的用途，所述藥物用于在神經(jīng)退化性疾病之后的哺乳動物受治療者中促進導(dǎo)致功能恢復(fù)的神經(jīng)元再生。
另一方面，本發(fā)明提供一種醫(yī)藥醫(yī)藥組合物，其包含用于治療哺乳動物受治療者以在神經(jīng)退化性疾病之后促進導(dǎo)致功能恢復(fù)的神經(jīng)元再生的σ配體。
所述神經(jīng)退化性疾病可為缺血性中風(fēng)、阿茲海默氏癥、糖尿病性周圍神經(jīng)病、癌癥治療誘發(fā)的神經(jīng)病、多發(fā)性硬化、肌萎縮性側(cè)索硬化、創(chuàng)傷性腦損傷、脊髓損傷、亨廷頓氏疾病或帕金森氏癥，但是優(yōu)選的是缺血性中風(fēng)、創(chuàng)傷性腦損傷或脊髓損傷。此外，本發(fā)明提供投與額外活性劑的方法。本發(fā)明配體可以含有醫(yī)藥上可接受的賦形劑的醫(yī)藥組合物來投與。所述賦形劑可適合于經(jīng)口投藥。因此，所述組合物可呈錠劑、膠囊或軟凝膠膠囊的形式。
或者，所述賦形劑可為適合靜脈內(nèi)、肌肉內(nèi)或皮下投藥的液體。或者，所述賦形劑可適合于經(jīng)皮投藥或經(jīng)頰投藥。所述σ受體配體優(yōu)選為1-(3，4-二甲氧基苯乙基)-4-(3-苯丙基)哌嗪(SA 4503)或者其醫(yī)藥上可接受的鹽或溶劑合物。
本發(fā)明提供用于使患有中樞神經(jīng)系統(tǒng)病癥的患者康復(fù)的方法和組合物，所述中樞神經(jīng)系統(tǒng)病癥諸如中風(fēng)、脊髓缺血、脊髓損傷和創(chuàng)傷性腦損傷。本發(fā)明是基于以下發(fā)現(xiàn)當(dāng)將優(yōu)選為SA-4503的σ受體配體在中風(fēng)之后約48小時內(nèi)投與患者且持續(xù)1至3個月的時段、優(yōu)選投與高達(dá)一年或者更優(yōu)選為連續(xù)投藥時使得患者從功能失調(diào)狀態(tài)恢復(fù)過來。所述配體可單獨遞送或與額外藥劑組合遞送。SA-4503在治療過程期間例如可每日投與。
因此，一方面，本發(fā)明是針對于一種在受治療者中用于治療中風(fēng)的方法，其包含在中風(fēng)事件之后立即對所述受治療者投與醫(yī)藥有效量的σ受體配體且持續(xù)1至3個月的時段。所述σ受體配體優(yōu)選為1-(3，4-二甲氧基苯乙基)-4-(3-苯丙基)哌嗪(SA 4503)或其醫(yī)藥上可接受的鹽或溶劑合物，諸如SA4502的鹽酸鹽或二鹽酸鹽。
本發(fā)明另一方面，在神經(jīng)退化性疾病之后，尤其是在缺血性中風(fēng)、創(chuàng)傷性腦損傷或脊髓損傷之后，將σ配體投與受治療者開始不少于24小時，諸如不少于48小時、一周或1到3個月。從治療開始，可重復(fù)投與σ配體，例如每日投與σ配體，歷時一周、兩周、一個月、三個月、一年或更長的時段。舉例來說，在缺血性中風(fēng)、創(chuàng)傷性腦損傷或脊髓損傷之后可開始治療至少24個小時或至少48個小時、至少一周且持續(xù)治療一個月、三個月、六個月或一年。
對受治療者的治療可在醫(yī)生的指示下進行。在治療過程中，醫(yī)生可對受治療者的神經(jīng)元再生跡象進行評估。所述跡象可為大腦或脊髓中功能恢復(fù)或結(jié)構(gòu)變化的跡象。因此，醫(yī)生可緊接在治療之前或開始治療時和再次在治療之后測量受治療者的一或多種功能響應(yīng)。因此，治療可連續(xù)進行直到獲得神經(jīng)元再生(或功能恢復(fù))跡象。
如下文中更詳細(xì)的描述，所述功能恢復(fù)跡象可例如為運動技能、認(rèn)知技能、言語或感官感知和功能的恢復(fù)?？商貏e提及的是運動技能的恢復(fù)和認(rèn)知技能的恢復(fù)。神經(jīng)元再生跡象也可為大腦或脊髓中結(jié)構(gòu)變化的跡象。
本發(fā)明另一方面，對患者提供用于治療神經(jīng)退化性疾病以促進神經(jīng)元再生(或功能恢復(fù))的包裝套組。所述套組包括SA-4503或其鹽或溶劑合物的醫(yī)藥配方、一在儲存期間且在投藥之前容納所述醫(yī)藥配方的容器和用于以有效治療所述神經(jīng)退化性疾病來促進神經(jīng)元再生(或功能恢復(fù))的方式進行藥物投與的說明書，例如寫在包裝插頁或標(biāo)簽上的書面說明書。所述醫(yī)藥配方可為本文中所述的任何配方，例如含有一單位劑量σ受體配體的經(jīng)口劑型，所述單位劑量為用于治療所述疾病的治療有效劑量。
在參考下列詳細(xì)描述之后，本發(fā)明的這些和其它方面將變得顯而易見。另外，本文陳述更詳細(xì)地描述某些程序或組合物的各種參考文獻，且因此將這些文獻以引用的方式全部并入本文中。
具體實施例方式
I.定義除非另外陳述，否則包括說明書和權(quán)利要求范圍的本申請案中所使用的下列術(shù)語具有下文給定的定義。必須注意的是，除非本文另外清楚規(guī)定，否則如說明書和附加權(quán)利要求中所使用的單數(shù)形式“一(a、an)”和“所述(the)”包括復(fù)數(shù)個指示物。標(biāo)準(zhǔn)化學(xué)術(shù)語的定義可在參考文獻著作中找到，包括Carey和Sundberg(1992)″Advanced Organic Chemistry第3版″第A卷和第B卷，Plenum Press，New York。除非另外指示，否則本發(fā)明的實施將采用所屬領(lǐng)域內(nèi)常規(guī)的質(zhì)譜分析、蛋白質(zhì)化學(xué)、生物化學(xué)、重組DNA技術(shù)和藥理學(xué)方法。
術(shù)語“激動劑”意謂一種增強其它分子活性或σ受體位點活性的諸如化合物、藥物、酶活化劑或激素的分子。
術(shù)語“拮抗劑”意謂一種減小或防止其它分子作用或σ受體位點活性的諸如化合物、藥物、酶抑制劑或激素的分子。
無論什么原因，術(shù)語“中風(fēng)”廣泛是指與減少血液流入大腦相關(guān)的神經(jīng)病學(xué)缺陷的發(fā)展。潛在原因包括(但不限于)血栓癥、出血和栓塞。血栓、栓子和全身性低血壓是腦缺血事件的最普遍原因。其它損傷可由高血壓、高血壓性腦血管病、動脈瘤破裂、血管瘤、血液病、心力衰竭、心搏停止、心源性休克、感染性休克、頭部外傷、脊髓外傷、癲癇中風(fēng)、腫瘤出血或其它失血而引起。
“缺血事件”意謂任何導(dǎo)致組織血液供給不足的情形。當(dāng)所述缺血與中風(fēng)相關(guān)聯(lián)時，其可為下文所定義的全面性缺血和病灶性缺血。術(shù)語“缺血性中風(fēng)”更明確地是指一種有限程度的且由于血液流動受阻所引起的中風(fēng)。術(shù)語“缺血性中風(fēng)”包括心搏停止之后的腦缺血、中風(fēng)和多發(fā)梗塞性癡呆，包括那些由手術(shù)引起的缺血性中風(fēng)。腦缺血事件由大腦血液供給不足引起。同樣為中樞神經(jīng)系統(tǒng)一部分的脊髓一樣地容易由于血液流動減少而引起缺血。
如本文中參考中樞神經(jīng)系統(tǒng)所使用的術(shù)語“病灶性缺血”意謂由于將血液供給大腦或脊髓的個別動脈受阻而引起的病癥，其導(dǎo)致?lián)p害所述動脈供應(yīng)區(qū)的細(xì)胞。
如本文中參考中樞神經(jīng)系統(tǒng)所使用的術(shù)語“全面性缺血”意謂由于流入整個大腦、前腦或脊髓的血液全面性減少而引起的病癥，其導(dǎo)致在遍及這些組織各處的選擇性易損區(qū)域中神經(jīng)元的死亡。如與臨床相聯(lián)系，每一這些病例中的病理學(xué)很不相同。將病灶性缺血的模型應(yīng)用于病灶性腦梗塞患者，而全面性缺血的模型類似于心博停止和全身性低血壓的其它原因。
如本文中所使用的術(shù)語“神經(jīng)保護劑”意謂有效減少神經(jīng)元細(xì)胞死亡的化合物，其包括抑制神經(jīng)元損害從初始損傷部位擴展開來的能力。
術(shù)語“微陣列”是指以所要密度合成或粘附或沉積在諸如紙、尼龍或其它類型膜、過濾器、晶片、載玻片、珠子或任何其它合適固體支撐物的基質(zhì)上的獨特的多核苷酸或寡核苷酸陣列。
術(shù)語“有效量”或“醫(yī)藥有效量”是指藥劑提供所要生物學(xué)效果的無毒但足夠的量。所述效果可為征兆、癥狀或病因的減少和/或緩和或者任何其它生物學(xué)系統(tǒng)的所要變化。舉例來說，治療用途的“有效量”為包含本文所揭示的σ受體配體的組合物在臨床上顯著減少諸如那些由缺血性中風(fēng)引起的神經(jīng)退化性疾病而所需的量。在任何個別狀況中的恰當(dāng)“有效”量可由所屬領(lǐng)域的技術(shù)人員使用常規(guī)實驗來判定。
如本文中所使用的“治療(treat)”或“治療(treatment)”可互換使用且意指延緩神經(jīng)退化性疾病的發(fā)展和/或降低將要發(fā)展或預(yù)期發(fā)展的所述癥狀的嚴(yán)重性。所述術(shù)語進一步包括改善神經(jīng)退化性當(dāng)前癥狀，防止額外癥狀和改善或防止癥狀的潛在代謝原因。
“醫(yī)藥上可接受”或“藥理學(xué)上可接受”意謂一種無生物學(xué)上不良性或其它不良性的物質(zhì)，也就是說可將所述物質(zhì)投與個體而不引起任何不良生物效果或以有害方式與其所含有的任何組合物組份發(fā)生相互作用。
術(shù)語“生理學(xué)上的pH值”或“生理學(xué)上可接受范圍內(nèi)的pH值”意謂在約7.2到8.0在內(nèi)的范圍內(nèi)、更通常在約7.2到7.6在內(nèi)的范圍內(nèi)的pH值。
如本文中所使用的術(shù)語“受治療者”涵蓋哺乳動物和非哺乳動物。哺乳動物的實例包括(但不限于)任何哺乳動物綱成員人類、諸如黑猩猩的非人類靈長目和其它猿與猴種；農(nóng)場動物，諸如牛、馬、綿羊、山羊、豬；家畜，諸如兔、狗和貓；實驗室動物，包括嚙齒動物，諸如大鼠、小鼠和豚鼠等。非哺乳動物的實例包括(但不限于)鳥、魚等。所述術(shù)語并不表示特定年齡和性別。
術(shù)語化合物的“醫(yī)藥上可接受的鹽”意謂醫(yī)藥上可接受且具有母體化合物的所要藥理學(xué)活性的鹽。所述鹽例如包括(1)酸式加成鹽，其由諸如鹽酸、氫溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等的無機酸來形成；或由諸如乙酸、丙酸、己酸、環(huán)戊烷丙酸、乙醇酸、丙酮酸、乳酸、丙二酸、丁二酸、蘋果酸、順丁烯二酸、反丁烯二酸、酒石酸、檸檬酸、苯甲酸、3-(4-羥基苯甲酰基)苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、甲磺酸、乙磺酸、1，2-乙二磺酸、2-羥基乙磺酸、苯磺酸、2-萘磺酸、雙環(huán)-[2.2.2]辛-2-烯-1-羧酸4-甲酯、葡庚糖酸、4，4′-亞甲基雙-(3-羥基-2-烯-1-羧酸)、3-苯基丙酸、乙酸三甲酯、乙酸第三丁酯、硫酸月桂酯、葡糖酸、谷氨酸、羥基萘甲酸、水楊酸、硬脂酸、粘康酸等有機酸來形成；(2)當(dāng)存在于母體化合物中的酸性質(zhì)子由例如堿金屬離子、堿土離子或鋁離子的金屬離子置換或者與有機堿配位時所形成的鹽?？山邮艿挠袡C堿包括乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、氨基丁三醇、N-甲基葡萄胺等?？山邮艿臒o機堿包括氫氧化鋁、氫氧化鈣、氫氧化鉀、碳酸鈉、氫氧化鈉等。應(yīng)了解醫(yī)藥上可接受的鹽的參考包括其溶劑加成形式或晶體形式，尤其是溶劑合物和多晶型物。溶劑合物含有化學(xué)計量或非化學(xué)計量量的溶劑，且經(jīng)常在結(jié)晶期間形式。當(dāng)溶劑是水時形成水合物，或者當(dāng)溶劑是醇時形成醇化物。多晶型物包括化合物的相同元素組成的不同晶體堆積排列。多晶型物通常具有不同的X-光衍射圖、紅外光譜圖、熔點、密度、硬度、晶體形狀、光學(xué)和電學(xué)特性、穩(wěn)定性和溶解性。諸如再結(jié)晶溶劑、結(jié)晶速率和存儲溫度的各種因素可使得單晶體形式占優(yōu)勢。
術(shù)語“視情況”或“視情況地”意謂隨后描述的事件或情形可發(fā)生或不發(fā)生且所述描述包括其中所述事件或情形發(fā)生的情況和其中所述事件或情形不發(fā)生的情況。舉例來說，短語“視情況另一藥物”意謂可給予或可不給予患者除σ受體配體之外的藥物。如本文中所使用的“另一藥物”意謂任何適合投與哺乳動物、優(yōu)選人類的化學(xué)物質(zhì)或化合物，其包括所要的局部或全身性效果。通常，這包括消瘦劑；諸如抗菌劑和抗病毒劑的抗感染劑，包括許多青霉素和頭孢菌素；止痛藥與鎮(zhèn)痛藥的組合；抗節(jié)律不齊藥；抗關(guān)節(jié)炎藥；抗咳喘劑；抗膽堿能藥；抗驚厥藥；抗糖尿病劑；止瀉藥；驅(qū)蠕蟲劑；抗組胺劑；消炎藥；抗偏頭痛制劑；止惡心藥；抗腫瘤藥；抗帕金森氏病藥；止癢藥；抗精神病藥；解熱藥；抗致敏劑；解痙藥；包括鈣通道阻斷劑和β阻斷劑的心血管制劑，諸如心得靜；抗高血壓藥；中樞神經(jīng)系統(tǒng)興奮劑；咳嗽和感冒制劑，包括減充血劑；利尿劑；腸胃藥物，包括H2-受體拮抗劑；擬交感神經(jīng)藥；諸如雌二醇和其它類固醇的激素，包括皮質(zhì)類固醇；安眠藥；免疫抑制劑；肌肉馳緩藥；副交感神經(jīng)阻斷藥；精神刺激劑；鎮(zhèn)靜劑；安定藥；溶解血栓劑；神經(jīng)保護劑；自由基凈化劑和血管擴張劑。
如本文中所使用的術(shù)語“功能康復(fù)”意謂物理療法、工作療法等。其希望藥物治療從康復(fù)開始著手。
II.σ受體根據(jù)豐富環(huán)境實驗的微陣列分析來鑒定σ受體。本發(fā)明進一步提供用于鑒定調(diào)節(jié)σ受體表達(dá)以用于治療中樞神經(jīng)系統(tǒng)病癥且用于刺激神經(jīng)退化性病癥受治療者中神經(jīng)細(xì)胞存活和再生的化合物的方法。已鑒定且描述了經(jīng)微陣列分析鑒定的基因，相對于其在正?；蚍秦S富環(huán)境中的表達(dá)來說，所述基因在皮層缺血和后缺血環(huán)境豐富大腦組織之后分化表達(dá)。
另外，本發(fā)明提供治療在上述基因表達(dá)中展現(xiàn)變化的受治療者的方法，其中治療介入引起大腦中的細(xì)胞生殖和隨后增強功能恢復(fù)。發(fā)明者已發(fā)現(xiàn)，在標(biāo)準(zhǔn)條件下于中大腦動脈閉塞(MCAO)之后，σ受體表達(dá)在易損區(qū)域內(nèi)減少，而當(dāng)受治療者暴露在豐富環(huán)境條件下時，MCAO之后σ受體表達(dá)在易損區(qū)域內(nèi)增加。同樣在腦部抵抗區(qū)域內(nèi)在MCAO之后檢測到σ受體表達(dá)增加。因此，對于罹患病灶性或全面性腦缺血的受治療者在損傷之后投與σ受體配體且持續(xù)足夠的時段來促進功能恢復(fù)。醫(yī)藥介入使得功能恢復(fù)更快。
一方面，可使用陣列或微陣列來獲得有關(guān)基因表達(dá)。通常將探針寡核苷酸固定在固體支撐物上且接著使其在雜交條件下與含有經(jīng)標(biāo)記的目標(biāo)寡核苷酸的樣品接觸來產(chǎn)生雜交圖。在雜交之后，諸如用于原位雜交的33P的熒光性或放射性，分析測量結(jié)果來判定目標(biāo)與探測器的雜交水平。所述信息可用于判定基因功能、基因剪接，用于理解疾病的遺傳基礎(chǔ)，診斷疾病，且用于發(fā)展和監(jiān)測治療劑活性，檢測多晶型現(xiàn)象的存在或缺少等(Heller，R.等人.(1997)Proc.Natl.Acad.sci.942150-55)?？蓮纳飿悠返腞NA或DNA中獲得探針和目標(biāo)寡核苷酸。寡核苷酸通常為DNA，其已從通常源自天然存在源的RNA反轉(zhuǎn)錄，其中所述RNA可為總RNA、多A+mRNA、擴增RNA等。初始mRNA樣品可源自包括諸如酵母的單細(xì)胞生物的生理學(xué)來源、源自真核生物源或多細(xì)胞生物，所述多細(xì)胞生物包括植物和動物，尤其是哺乳動物和器官、組織以及源自所述哺乳動物(諸如源自任何體液(諸如血液、尿液、唾液、痰、胃液等))的細(xì)胞、已培養(yǎng)的細(xì)胞、活組織檢查或其它組織制備。所屬領(lǐng)域的技術(shù)人員已知從細(xì)胞、組織、器官或整個生物體分離出RNA的方法且已于Sambrook，F(xiàn)ritsch & Maniatis(1989)MolecularCloningA Laboratory Manual(Cold Spring Harbor Press)中進行了描述。詳細(xì)來說，將來自受治療者腦部(諸如來自中間區(qū)域、嘴喙區(qū)域、前額區(qū)域、海馬狀突起區(qū)域和紋狀體區(qū)域)RNA純化和克隆以供微陣列實驗使用。
雜交圖可用于判定關(guān)于樣品中核酸遺傳概況的定量信息，其中所述樣品與陣列接觸以產(chǎn)生雜交圖以及得到經(jīng)標(biāo)記的樣品核酸的生理學(xué)來源。數(shù)據(jù)特別以定量術(shù)語來提供關(guān)于生理學(xué)來源(得到樣品核酸)、諸如各種表達(dá)于組織或細(xì)胞(其為生理學(xué)來源)中的基因以及每一基因的表達(dá)水平的信息。
已發(fā)現(xiàn)遭受MCAO且接著暴露于豐富環(huán)境中的大鼠證明1型σ受體mRNA在紋狀體和前額皮層中的上調(diào)以及所述受體在中間皮層中的下調(diào)。前額皮層暗示著控制感官運動功能。因此在后缺血的康復(fù)階段介入藥理學(xué)作用。因此，投與諸如σ受體激動劑的σ受體配體可改善受治療者在中風(fēng)之后的功能恢復(fù)。另外，藥物與環(huán)境因素(諸如豐富環(huán)境)的相互作用可用于改善功能恢復(fù)。
無需從理論上來加以限定，據(jù)信通過模仿豐富環(huán)境或刺激性環(huán)境的作用σ配體可促進神經(jīng)元再生和功能恢復(fù)。
III.σ受體配體σ受體配體可用于用以治療神經(jīng)退化性疾病和用以改善神經(jīng)退化性疾病中功能恢復(fù)的方法和組合物中。
已知幾種可供本發(fā)明方法使用的σ受體配體。舉例來說，Manallack，D.T.等人，Eur.J.Pharmacol.，144231-235(1987)揭示對σ結(jié)合位點具有親和力的苯環(huán)己哌啶化合物，且顯示所述σ位點親和力可通過例如芐基或苯乙基等大N-烷基取代基來增強。Largent，B.L.等人，Mol.Pharmacol.，32772-784(1987)教示了若干哌啶和哌嗪衍生物具有σ受體活性，且提到含有較多親油性取代基的化合物提供更大的σ受體結(jié)合位點親和力。Sharkey，J.等人，Eur.J.Pharmacol.，149171-174(1988)顯示了與可卡因相關(guān)的化合物具有σ受體結(jié)合活性。歐洲專利申請案362,001描述對σ受體具有專一親和力的經(jīng)α，α-二取代的N-環(huán)烷基烷基胺且歐洲專利申請案445,013描述對σ受體具有專一親和力的N-環(huán)烷基烷基胺。在這兩個歐洲申請案中所描述的σ受體配體適用于治療精神病和腸胃病。PCT公開案WO91/03243包括關(guān)于對σ受體具有專一拮抗活性且適用于治療精神病和運動障礙的1-環(huán)烷基哌啶的描述。PCT公開案WO 93/09094包括對源自烷基哌啶或吡咯啶的醚(其為抗精神病藥)的描述。在PCT公開案WO 94/24116中揭示了作為σ受體配體的額外的經(jīng)取代哌啶和哌嗪。在美國專利第5,736,546號中描述了1，4-(二苯基烷基)哌嗪衍生物的σ受體親和力和其用于治療諸如癡呆、抑郁癥和精神分裂癥等腦功能病癥的用途。美國專利第6,087,346號揭示某些苯基烷基-胺、胺基四氫化萘、哌嗪、哌啶和相關(guān)化合物可結(jié)合至σ受體且其可用于治療中樞神經(jīng)系統(tǒng)病癥、神經(jīng)學(xué)病癥、腸胃病、藥物濫用、咽峽炎、偏頭痛、高血壓和抑郁癥。其它σ受體配體包括BMY-14802卡拉米芬(caramiphen)和氟哌啶醇，已發(fā)現(xiàn)其對NMDA誘發(fā)的毒性和癲癇發(fā)作具有活體內(nèi)保護作用(M.Pontecorvo等人，(1991)Brain Res.Bull.，26461-465)。額外的σ受體配體包括例如3PP-HCl、氟哌啶醇、烯丙基-去甲美他佐辛(normetazocine)(也稱為SKF 10047)、去甲美他佐辛、U-50488酒石酸鹽、托可拉斯(carbetapentane)、環(huán)佐辛(cyclazocine)、艾芬地爾(ifenprodil)、DTG(1，3-二2甲苯胍)、L693，409、PTPP、4PPBP(順丁烯二酸4-苯基-1-(4-苯基丁基)哌啶)、BD 1063、IPAB碘苯甲酰胺、SM-21、BD1008。
IV.用于鑒定σ受體配體的方法在此項技術(shù)中已知用于鑒定為σ受體配體的化合物的方法。一種用于鑒定為σ受體配體的化合物的方法涉及到將含有σ受體的細(xì)胞、組織或優(yōu)選細(xì)胞提取物或者其它制取物與幾個已知濃度的測試化合物于與受體活性相容的緩沖液中接觸且分析配體結(jié)合和/或受體活性。所述方法可按序或以多元化格式進行。如Langa F.(2003)Eur.J.Neuroscience，182188-2196中所述，對已知特定配體使用活體外結(jié)合分析可允許判定對σ-1或σ-2受體的配體親和力。如所屬領(lǐng)域的技術(shù)人員基于本文中的揭示內(nèi)容所顯而易見，可采用其它用于判定為σ受體配體的化合物的方法σ配體優(yōu)選為SA-4503(下文為化合物IV)或其鹽或溶劑合物。然而，所有下列化合物都是σ受體配體 (1)氟伏沙明 (II)4-IBP (III)PRE-084 (IV)SA 4503
(V)司勞美辛(VI)伊格美新(VII)OPC-14523(VIII)BD-737 (IX)BHDP
在另一方法中，基于上文鑒定的σ受體配體和已知配體或其類似物的分子形狀的結(jié)構(gòu)研究，可使用合理的藥物設(shè)計來鑒定化合物，所述化合物的三維結(jié)構(gòu)為σ受體的活性位點的結(jié)構(gòu)的補充。這些化合物可通過多種技術(shù)來判定，包括分子力學(xué)計算、分子動力學(xué)計算、限制分子動力學(xué)計算(其中限制由NMR光譜學(xué)來判定)、距離幾何學(xué)(其中距離矩陣部分通過NMR光譜學(xué)來判定)、x-光衍射或中子衍射技術(shù)。在所有這些技術(shù)的狀況下，可在任何已知與σ受體相互作用的配體存在或缺少的情況下來判定結(jié)構(gòu)。
隨后對因此鑒定或設(shè)計的σ受體配體測試其治療和/或預(yù)防神經(jīng)退化性疾病的能力。在一種方法中，對所述化合物測試其調(diào)節(jié)諸如(例如)σ-1(入藏登記號NM-005866、NM-147157、NM-147158、NM-147159和NM-147160)、σ-2或重組σ受體的σ受體的能力。這些篩選期間鑒定的導(dǎo)向化合物可充當(dāng)合成更多活性類似物的基礎(chǔ)?？蓪?dǎo)向化合物和/或由其所產(chǎn)生的活性類似物配制成有效治療諸如中風(fēng)、癲癇和神經(jīng)退化性病癥的神經(jīng)學(xué)病癥的醫(yī)藥組合物。
V.合成σ受體配體一些σ受體配體在市場上可購得。在專利和科學(xué)文獻中描述了制備許多σ受體配體的方法，例如氟伏沙明(US 4,085,225)、4-IBD(John等人(1999)Nuclear Medicine & Biology 26377-382)、Pre-084(US 5,223,530)、SA4503(US 5,736,546)、司勞美辛(US 5,665,725)、OPC-1452(US 5,556,857)、BD-737(US 5,130,330和US 5,739,158)、伊格美新(US 5,034,419)。
VI.神經(jīng)元再生和功能恢復(fù)本發(fā)明一方面提供治療受治療者的方法，其中在中風(fēng)之后投與σ受體配體I-IX或其鹽或溶劑合物且持續(xù)治療所必需的足夠一段時間，諸如從約1周到約1個月或到約12個月，或者連續(xù)投藥直到觀察到所要的治療效果。所述σ受體配體優(yōu)選為SA-4503或其鹽或溶劑合物。本發(fā)明另一方面提供治療受治療者的方法，其中在中風(fēng)之后投與σ受體配體SA-4503或其鹽或溶劑合物且持續(xù)治療所必需的足夠一段時間，諸如從約1周到約1個月或到約12個月，或者連續(xù)投藥直到觀察到所要的治療效果且其中也將受治療者暴露于富含刺激的環(huán)境(諸如豐富環(huán)境)中來使其功能康復(fù)，從而使得患者從中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷的不利后果中的功能恢復(fù)得到改善。
當(dāng)神經(jīng)組織受損區(qū)域的功能被早先在那特別功能中一般不起作用的其它區(qū)域所接管且神經(jīng)功能的變化導(dǎo)致行為和行為能力變化時出現(xiàn)功能恢復(fù)。功能恢復(fù)也稱為神經(jīng)可塑性。因此，腦的功能恢復(fù)指的是功能和結(jié)構(gòu)重組、對事件的神經(jīng)響應(yīng)的上調(diào)或下調(diào)和借助側(cè)枝發(fā)芽和補償性突觸發(fā)生以及神經(jīng)發(fā)生建立新功能和結(jié)構(gòu)連接。
可對患者功能恢復(fù)的改善進行評估，例如通過使用功能/行為測試來對由于投與根據(jù)本發(fā)明的σ受體配體而引起的患者運動技能(諸如姿勢、平衡度、抓握或步態(tài))、認(rèn)知技能、言語和/或包括視覺能力、味覺、嗅覺和本體感覺的感官感知和功能改善的感覺運動和反射功能進行評估。另一方面，可通過組織分析來判定患者的功能恢復(fù)，所述組織分析包括判定軸突束的長度、損傷部位神經(jīng)元再生的增加，評估樹突形態(tài)和脊柱數(shù)量等。另一方面，患者功能恢復(fù)的改善可通過使用非入侵式技術(shù)來判定，其判定引起神經(jīng)功能變化的腦部結(jié)構(gòu)變化。因此，可使用電生理學(xué)(腦電圖儀(EEG)和誘發(fā)響應(yīng)電位(ERP))、肌電圖(EMG)、神經(jīng)化學(xué)(CSF代謝物)、外周(循環(huán)的β內(nèi)啡肽水平)、放射線學(xué)(CT掃描，MRI)和臨床(瞳孔對光反射、姿勢、味覺)測量來測量患者的功能恢復(fù)。另外，以上技術(shù)可用于選擇可能成功響應(yīng)本發(fā)明治療的患者。
投與σ受體配體SA-4503來模擬豐富或刺激性環(huán)境的作用。已知處于豐富或刺激性環(huán)境中的后缺血可改善大鼠在腦缺血之后的功能結(jié)果。在實驗性腦梗塞之后，處于豐富環(huán)境中的具有各種活動和與其它大鼠相互作用的機會的大鼠比處于標(biāo)準(zhǔn)實驗室環(huán)境中的大鼠恢復(fù)的更好。允許自由活動與社會相互作用的豐富環(huán)境在不改變梗塞體積的情況下產(chǎn)生最佳的效能。豐富環(huán)境可刺激提高病灶性腦缺血之后的大腦可塑性的機理。已顯示處于刺激性環(huán)境中的大鼠顯著增加完整和受損大腦中表面皮層內(nèi)的脊柱密度。
本發(fā)明一方面，刺激性環(huán)境包含社會相互作用、運動活動、腦電刺激、住所變化等。舉例來說，可鼓勵受治療者使用受損肢部來改善感覺運動功能，可使其進行每日常規(guī)的身體活動，諸如行走、伸展、舉重等，或鼓勵其玩游戲，諸如棒球、曲棍球、足球或棋盤游戲。另外，可改變受治療者的住所來刺激大腦活動，諸如通過改變房間的顏色、提供紋理材料、提供由諸如木頭、鋼等的不同材料制成的物品。對特定患者定制刺激性環(huán)境的知識已為物理療法和工作療法技術(shù)領(lǐng)域內(nèi)的技術(shù)人員所知。
另一方面，刺激性環(huán)境包含大腦或腦區(qū)域的直接刺激。舉例來說，如美國專利第6,339,725號和第5,611,350號所描述，可將電脈沖應(yīng)用于大腦，且可利用此項技術(shù)中已知的其它方法?；蛘?，可通過局部投與以下藥物來刺激大腦或腦區(qū)域諸如乙酰膽堿、神經(jīng)生長因子、所述神經(jīng)刺激劑、神經(jīng)元或神經(jīng)膠質(zhì)生長因子和其它神經(jīng)元調(diào)節(jié)藥物。
如所屬領(lǐng)域的技術(shù)人員所公認(rèn)，投與含有σ配體的劑量的時間選擇可變化。本發(fā)明的一方面，在中風(fēng)之后投與σ受體配體。配體的投與可在癥狀發(fā)作的第一周內(nèi)開始，優(yōu)選在癥狀發(fā)作的至少24小時內(nèi)或至少48小時內(nèi)開始。本發(fā)明的另一方面，在暴露于刺激性環(huán)境的同時將σ受體配體投與患者。優(yōu)選在使患者處于刺激性環(huán)境中時在中風(fēng)之后投與σ受體配體且投與所述配體歷時約1個月到約3個月來促進功能恢復(fù)。優(yōu)選的是投與所述配體和包含所述配體的組合物直到約12個月或更長時間，或者甚至更優(yōu)選的是連續(xù)投藥。
VII.醫(yī)藥配方和投藥模式本文所述的方法使用包含上述分子(其中所述分子優(yōu)選為SA-4503)連同一或多種醫(yī)藥上可接受的賦形劑或媒劑以及視情況其它治療和/或預(yù)防成份的醫(yī)藥組合物。所述賦形劑包括液體，諸如水、鹽水、甘油、聚乙二醇、透明質(zhì)酸、乙醇等。適合于非液體配方的賦形劑同樣為所屬領(lǐng)域的技術(shù)人員所知。醫(yī)藥上可接受的鹽可用于本發(fā)明的組合物中且例如包括諸如鹽酸鹽、氫溴酸鹽、磷酸鹽、硫酸鹽等的無機酸鹽；和諸如乙酸鹽、丙酸鹽、丙二酸鹽、苯甲酸鹽等的有機酸鹽。在Remington′s Pharmaceutical Sciences，第18版(Easton，PennsylvaniaMack Publishing Company，1990)中對醫(yī)藥上可接受的賦形劑進行了徹底的討論。
另外，諸如潤濕劑或乳化劑、生物緩沖物質(zhì)、表面活性劑等的輔助物質(zhì)可存在于所述媒劑中。生物緩沖液實際上可為任何藥理學(xué)上可接受且提供具有所要pH值(也就是在生理學(xué)上可接受的范圍內(nèi)pH值)的配方的溶液。緩沖溶液的實例包括鹽水、磷酸鹽緩沖鹽水、Tris緩沖鹽水、Hank’s緩沖鹽水等。
視所希望的投藥模式而定，醫(yī)藥組合物可呈固體、半固體或液體劑型形式，諸如錠劑、栓劑、藥丸、膠囊、粉劑、液體、懸浮液、乳膏、軟膏、洗劑等，優(yōu)選呈適合于單次投與精確劑量的單位劑型。所述組合物包括有效量與醫(yī)藥上可接受的載劑相組合的選定藥物，且另外可包括其它醫(yī)藥上可接受的藥劑、佐劑、稀釋劑、緩沖液等。
本發(fā)明包括一種醫(yī)藥組合物，其包含包括異構(gòu)體、異構(gòu)體的外消旋或非外消旋混合物的本發(fā)明化合物或其醫(yī)藥上可接受的鹽或溶劑合物連同一或多種醫(yī)藥上可接受的載劑以及視情況其它治療和/或預(yù)防成份。
通常，本發(fā)明的化合物通過任何已接受的投藥模式以治療有效量來投與。合適的劑量范圍取決于眾多因素，諸如待治療疾病的嚴(yán)重性、受治療者的年齡和相對健康狀況、所用化合物的效力、投藥途徑和形式、投藥所針對的適應(yīng)癥以及有關(guān)醫(yī)藥實踐者的偏好和經(jīng)驗。熟悉治療所述疾病的一般技術(shù)人員無需過度實驗且依賴于個人知識和本申請案揭示內(nèi)容即能夠確定本發(fā)明化合物對于給定疾病的治療有效量。
通常，本發(fā)明化合物作為醫(yī)藥調(diào)配物(包括那些適合于經(jīng)口(包括經(jīng)頰和經(jīng)舌下)、經(jīng)直腸、經(jīng)鼻、經(jīng)局部、經(jīng)肺、經(jīng)陰道或非經(jīng)腸(包括經(jīng)肌肉內(nèi)、經(jīng)動脈內(nèi)、經(jīng)鞘內(nèi)、經(jīng)皮下和經(jīng)靜脈內(nèi))投藥的醫(yī)藥調(diào)配物)或以適合于通過吸入或吹入投藥的形式來投藥。優(yōu)選的投藥方式是使用可根據(jù)罹患程度來調(diào)整的方便的每日劑量療法經(jīng)靜脈內(nèi)或經(jīng)口投藥。
對于固體組合物來說，習(xí)用的無毒固體載劑包括例如醫(yī)藥級甘露醇、乳糖、淀粉、硬脂酸鎂、糖精鈉、滑石粉、纖維素、葡萄糖、蔗糖、碳酸鎂及諸如此類?？赏ㄟ^例如將本文所述的活性化合物和可選醫(yī)藥佐劑溶解或分散于諸如(例如)水、鹽水、水性右旋糖、甘油、乙醇及諸如此類的賦形劑中以由此形成溶液或懸浮液來制備液體型醫(yī)藥上可投與的組合物。如果需要，那么待投與的醫(yī)藥組合物也可含有微量的無毒輔助物質(zhì)，諸如潤濕劑或乳化劑、pH緩沖劑及諸如此類，例如乙酸鈉、山梨糖醇單月桂酸酯、三乙醇胺乙酸鈉、三乙醇胺油酸酯等。所屬領(lǐng)域的技術(shù)人員已知或?qū)⒚髁酥苽渌鰟┬偷膶嶋H方法；例如參見上文提及的Remington′s PharmaceuticalSciences。
對于經(jīng)口投藥來說，組合物通?？刹捎缅V劑、膠囊、軟凝膠膠囊形式或可為水溶液或非水溶液、懸浮液或漿液。錠劑和膠囊為優(yōu)選的經(jīng)口投藥形式。經(jīng)口使用的錠劑和膠囊通常包括一或多種普遍使用的載劑，諸如乳糖或玉米淀粉。通常也添加諸如硬脂酸鎂的潤滑劑。通常，本發(fā)明化合物可與經(jīng)口、無毒、醫(yī)藥上可接受的惰性載劑相組合，所述載劑諸如乳糖、淀粉、蔗糖、葡萄糖、甲基纖維素、硬脂酸鎂、磷酸二鈣、硫酸鈣、甘露醇、山梨糖醇等。此外，當(dāng)需要或有必要時，也可將合適的粘合劑、潤滑劑、崩解劑和著色劑并入混合物中。合適的粘合劑包括淀粉、明膠、諸如葡萄糖或β-乳糖的天然糖、玉米甜味劑、諸如阿拉伯膠、黃蓍膠或海藻酸鈉的天然和合成膠、羧甲基纖維素、聚乙二醇、蠟等。這些劑型中所使用的潤滑劑包括油酸鈉、硬脂酸鈉、硬脂酸鎂、苯甲酸鈉、乙酸鈉、氯化鈉等。崩解劑包括(但不限于)淀粉、甲基纖維素、瓊脂、膨潤土、黃原膠等。
因此，例如可通過常規(guī)程序制備膠囊以使劑量單位為100mg本發(fā)明化合物、100mg纖維素和10mg硬脂酸鎂。同樣也可通過填充標(biāo)準(zhǔn)兩片型硬明膠膠囊來制備大量單位膠囊，其各自具有100mg粉末狀活性成份、150mg乳糖、50mg纖維素和10mg硬脂酸鎂?；蛘?，可通過常規(guī)程序來制備錠劑以使劑量單位為100mg本發(fā)明化合物、150mg乳糖、50mg纖維素和10mg硬脂酸鎂。同樣也可通過常規(guī)程序來制備大量錠劑以使劑量單位為100mg本發(fā)明化合物且其它成份可為0.2mg膠質(zhì)二氧化硅、5mg硬脂酸鎂、250mg微晶纖維素、10mg淀粉和100mg乳糖。可應(yīng)用恰當(dāng)?shù)耐苛蟻碓黾涌煽谛曰蜓泳徫铡?br> 當(dāng)使用液體懸浮液時，可將活性劑與諸如乙醇、甘油、水等的任何經(jīng)口、無毒、醫(yī)藥上可接受的惰性載劑組合且與乳化劑和懸浮劑組合。如果需要，那么也可添加調(diào)味劑、著色劑和/或甜味劑。其它視情況并入本文中的經(jīng)口配方中的組份包括(但不限于)防腐劑、懸浮劑、增稠劑等。
非經(jīng)腸配方可制備為如液體溶液或懸浮液的常規(guī)形式、適合于在注射之前溶解于或懸浮于液體中的固體形式或乳液。優(yōu)選地，根據(jù)此項技術(shù)中已知的技術(shù)使用合適的載劑、分散劑或潤濕劑和懸浮劑來調(diào)配無菌的可注射懸浮液。所述無菌的可注射配方也可為在無毒性非經(jīng)腸可接受的稀釋劑或溶劑中的無菌可注射溶液或懸浮液。在可接受的媒劑和溶劑之中，可采用水、林格氏溶液(Ringer′s solution)和等張的氯化鈉溶液。另外，常規(guī)可采用無菌不揮發(fā)性油、脂肪酸酯或多元醇作為溶劑或懸浮媒體。另外，非經(jīng)腸投藥可涉及使用緩慢釋放或持續(xù)釋放系統(tǒng)以維持恒定的劑量水平。
非經(jīng)腸投藥包括經(jīng)關(guān)節(jié)內(nèi)、經(jīng)靜脈內(nèi)、經(jīng)肌肉內(nèi)、經(jīng)皮內(nèi)、經(jīng)腹膜內(nèi)和經(jīng)皮下途徑，且包括水性和非水性等張無菌注射溶液(其可含有抗氧化劑、緩沖液、抑菌劑和使配方與預(yù)期接受者的血液等張的溶質(zhì))以及水性和非水性無菌懸浮液(其可包括懸浮劑、增溶劑、增稠劑、穩(wěn)定劑和防腐劑)。經(jīng)由某些非經(jīng)腸途徑的投藥可涉及通過無菌注射器或一些其它諸如連續(xù)灌輸系統(tǒng)的機械裝置推進來經(jīng)由針頭或?qū)б汗軐⒈景l(fā)明配方引入患者體內(nèi)。本發(fā)明提供的配方可使用注射器、針管、泵或任何其它在此項技術(shù)認(rèn)可用于非經(jīng)腸投藥的裝置。
優(yōu)選地，根據(jù)此項技術(shù)中已知的技術(shù)使用合適的載劑、分散劑或潤濕劑和懸浮劑來調(diào)配無菌的可注射懸浮液。所述無菌的可注射配方也可為在無毒性非經(jīng)腸可接受的稀釋劑或溶劑中的無菌可注射溶液或懸浮液。在可接受的媒劑和溶劑之中，可采用水、林格氏溶液(Ringer′s solution)和等張的氯化鈉溶液。另外，常規(guī)采用無菌不揮發(fā)性油、脂肪酸酯或多元醇作為溶劑或懸浮媒體。另外，非經(jīng)腸投藥可涉及使用緩慢釋放或持續(xù)釋放系統(tǒng)以維持恒定的劑量水平。
根據(jù)本發(fā)明用于非經(jīng)腸投藥的制劑包括無菌的水性或非水性溶液、懸浮液或乳液。非水性溶劑或媒劑的實例為丙二醇、聚乙二醇、諸如橄欖油和玉米油的植物油、明膠和諸如油酸乙酯的可注射有機酯。所述劑型也可含有諸如防腐劑、潤濕劑、乳化劑和分散機的佐劑。其可通過以下方式來滅菌例如通過細(xì)菌過濾器過濾；將殺菌劑并入組合物中；照射所述組合物；或加熱所述組合物。其也可在立即使用之前使用無菌水或一些其它無菌可注射媒體來制造。
所述配方可視情況含有等張劑。所述配方優(yōu)選含有等張劑，且甘油為最佳的等張劑。甘油的濃度(當(dāng)其使用時)在此項技術(shù)中已知的范圍內(nèi)，諸如(例如)約1mg/mL到約20mg/mL。
非經(jīng)腸配方的pH值可由諸如磷酸鹽、乙酸鹽、TRIS或L-精氨酸的緩沖劑來控制。緩沖劑的濃度優(yōu)選為足以在存儲期間提供對所述pH值的緩沖以使所述pH維持在目標(biāo)pH±0.2pH單位處。當(dāng)在室溫下測量時，優(yōu)選的pH值在約7與約8之間。
可視情況將諸如醫(yī)藥上可接受的增溶劑的其它添加劑添加到配方中，所述增溶劑例如Tween 20聚氧化乙烯(20)山梨糖醇單月桂酸酯)、Tween 40(聚氧化乙烯(20)山梨糖醇單棕櫚酸酯)、Tween 80(聚氧化乙烯(20)山梨糖醇單油酸酯)、Pluronic F68(聚氧化乙烯-聚氧化丙烯嵌段共聚物)和PEG(聚乙二醇)，且如果所述配方接觸塑性物質(zhì)，那么這些添加劑可適用。另外，非經(jīng)腸配方可含有各種抗細(xì)菌劑和抗真菌劑，例如對羥基苯甲酸酯、氯代丁醇、苯酚、山梨酸、硫柳汞等。
通過將一或多種本發(fā)明化合物以所需的量并入具有各種其它上文列舉成份(如需要)的恰當(dāng)溶劑中、接著過濾殺菌來制備無菌的可注射溶液。通常通過將各種無菌活性成份并入含有堿性分散媒體和所需的其它來自那些上文所列舉的成份的無菌媒劑中來制備分散液。在用于制備無菌可注射溶液的無菌粉末的狀況下，優(yōu)選的制備方法為真空干燥和冷凍干燥技術(shù)，其從其先前無菌過濾的溶液中產(chǎn)生活性成份加上任何額外所要成份的粉末。因此，舉例來說，通過在10體積％的丙二醇和水中攪拌1.5重量％的活性成份來制備適合于通過注射投藥的非經(jīng)腸組合物。使所述溶液與氯化鈉等張且將其殺菌。
或者，本發(fā)明的醫(yī)藥組合物可以用于經(jīng)直腸投藥的栓劑形式來投與。這些組合物可通過將藥劑與合適的無刺激性賦形劑混合來制備，所述賦形劑在室溫下為固體，但在直腸溫度下為液體，且因此在直腸中融化以釋放藥物。所述物質(zhì)包括可可油、蜂蠟和聚乙二醇。
本發(fā)明的醫(yī)藥組合物也可通過鼻孔噴霧劑或吸入劑來投藥。根據(jù)醫(yī)藥調(diào)配技術(shù)中熟知的技術(shù)來制備所述組合物，且其可采用苯甲醇或其它合適的防腐劑、提高生物利用度的吸收促進劑、諸如碳氟化合物或氮的推進劑和/或其它常規(guī)增溶劑或分散劑來制備為鹽水中的溶液。
用于局部藥物遞送的優(yōu)選配方為軟膏和乳膏。軟膏為通常是以凡士林或其它石油衍生物為主的半固體制劑。如此項技術(shù)中所知，含有選定活性劑的乳膏為水包油型或油包水型的粘性液體或半固體乳液。乳膏底物可溶于水且含有油相、乳化劑和水相。有時也稱為“內(nèi)”相的油相通常包含凡士林和諸如鯨蠟醇或硬脂醇的脂肪醇；水相通常(雖然并不是必須)在體積上超過油相，且通常含有保濕劑。乳膏配方中的乳化劑通常為非離子型、陰離子型、陽離子型或兩性表面活性劑。如所屬領(lǐng)域的技術(shù)人員所了解，待使用的特定軟膏或乳膏底物為提供用于最佳藥物遞送的軟膏或乳膏底物。與其它載劑或媒劑一樣，軟膏底物應(yīng)為惰性、穩(wěn)定、無刺激性和無致敏性。
用于經(jīng)頰投藥的配方包括錠劑、含片、凝膠等。或者，可使用所屬領(lǐng)域的技術(shù)人員所知的經(jīng)粘膜遞送系統(tǒng)來實現(xiàn)經(jīng)頰投藥。本發(fā)明化合物也可使用常規(guī)的經(jīng)皮藥物遞送系統(tǒng)(也就是說經(jīng)皮“貼片”)通過皮膚或muscosal組織來遞送，其中藥劑通常含在充當(dāng)粘附到體表上的藥物遞送裝置的層狀結(jié)構(gòu)中。在這樣的一個結(jié)構(gòu)中，藥物組合物通常含在上背襯層下面的層或“貯器”中。層狀裝置可含有單個貯器，或者其可含有多個貯器。在一實施例中，所述貯器包含用于使系統(tǒng)在藥物遞送期間粘附到皮膚的醫(yī)藥上可接受的接觸粘性物質(zhì)的聚合基質(zhì)。合適的皮膚接觸粘性物質(zhì)的實例包括(但不限于)聚乙烯、聚硅氧烷、聚異丁烯、聚丙烯酸酯、聚胺基甲酸酯等?；蛘?，含有藥物的貯器和皮膚接觸粘附劑可作為獨立和獨特的層存在，同時粘附劑在貯器的下面，在這種狀況下，所述層可為上文所述的聚合基質(zhì)，或其可為液體或凝膠貯器，或可采用一些其它形式。在這些層壓結(jié)構(gòu)中充當(dāng)裝置上表面的背襯層可作為層壓結(jié)構(gòu)的主要結(jié)構(gòu)元件且給裝置提供更多的靈活性。選定用于背襯層的物質(zhì)應(yīng)大體上不能滲透活性藥劑和所存在的任何其它物質(zhì)。
將醫(yī)藥或治療有效量的組合物遞送給受治療者。精確有效量將隨著受治療者的不同而變化且其依賴于以下因素物質(zhì)、年齡、受治療者的大小和健康狀況、正治療的病癥的性質(zhì)和程度、治療醫(yī)生的建議和選定用于投藥的療法或療法組合。因此，對于給定病況的有效量可通過常規(guī)實驗來判定。為了本發(fā)明的目的，治療量在至少一個劑量中通常在約0.01mg/kg到約40mg/kg體重、更優(yōu)選約0.1mg/kg到約10mg/kg的范圍內(nèi)。在較大的哺乳動物中，所指定的每日劑量可為約1mg到300mg，每日一或多次，更優(yōu)選在約10mg到200mg的范圍內(nèi)?？赏杜c受治療者減少且/或緩和跡象、癥狀或病癥疑似病因或者致使生物系統(tǒng)產(chǎn)生任何其它所要的改變所要求的劑量。
本發(fā)明化合物可調(diào)配用于噴霧投藥，尤其是呼吸道的噴霧投藥且包括經(jīng)鼻內(nèi)投藥。化合物通常具有例如約5微米或更小的小粒徑。這樣的小粒徑可通過此項技術(shù)中已知的方法(例如微粉化)來獲得。以具有合適推進劑的加壓包裝來提供活性成份，所述推進劑諸如氯氟碳化物(CFC)，例如二氯二氟甲烷、三氯氟甲烷或二氯四氟乙烷、二氧化碳或其它合適氣體。所述噴霧劑也可方便地含有諸如卵磷酯的表面活性劑。藥物劑量可通過計量閥來控制?；蛘?，可以干燥粉末的形式來提供活性成份，例如化合物在合適粉末底物中的粉末混合物，所述粉末底物諸如乳糖、淀粉、如羥丙基甲基纖維素的淀粉衍生物和聚乙烯吡咯啶(PVP)。粉末載體在鼻腔中形成凝膠。粉末組合物可以單位劑型存在于(例如)膠囊或濾筒(例如明膠)或發(fā)泡包裝中，其中粉末可借助于吸入器來投與。
當(dāng)需要時，可以適合于活性成份持續(xù)或受控釋放投藥的腸溶衣來制備配方。
醫(yī)藥制劑優(yōu)選為單位劑型。在所述劑型中，所述制劑細(xì)分為含有適當(dāng)數(shù)量活性組份的單位劑量。單位劑型可為包裝制劑，所述包裝含有分散數(shù)量的制劑，諸如已包裝的錠劑、膠囊和小瓶或安瓿中粉末。同樣地，單位劑型本身可為膠囊、錠劑、扁囊劑或含片，或者其在包裝形式中可為適當(dāng)數(shù)量的任何這些形式。
VIII.套組另一方面，本發(fā)明涉及套組形式的醫(yī)藥組合物。所述套組包含用于容納組合物的容器構(gòu)件，諸如瓶、箔包裝或其它類型的容器。通常，所述套組進一步包含用于組合物投藥的指示說明。
另一方面，提供包裝套組，其含有待投與的醫(yī)藥調(diào)配物，也就是含有用于治療神經(jīng)退化性疾病以促進神經(jīng)元再生或功能恢復(fù)的σ受體配體的醫(yī)藥調(diào)配物；優(yōu)選密封的容器，其用于在儲存期間或在使用之前容納配方；和說明書，其用于以有效治療疾病的方式進行藥物投藥。所述說明書通常是包裝插頁和/或標(biāo)簽上的書面說明。所述配方可為本文中所述的任何合適的配方。舉例來說，配方可為含有單位劑量的σ受體配體的經(jīng)口劑型。所述套組可含有不同劑量的相同藥劑的多個配方。所述套組也可含有不同活性藥劑的多個調(diào)配物。
舉例來說，用于非經(jīng)腸投藥的套組可包含a)包含上述SA-4503和醫(yī)藥上可接受的載劑、媒劑或稀釋劑的醫(yī)藥組合物；以及視情況b)說明書，其描述使用醫(yī)藥組合物用于治療或預(yù)防疾病的方法。所述套組可進一步包括用于投與配方的裝置(例如注射器、導(dǎo)液管等)。用于經(jīng)口投藥的套組可包含容納于容器中的劑量配方，所述容器諸如紙盒或紙板盒、玻璃瓶或塑料瓶或罐、可再密封的袋子或具有個別劑量的發(fā)泡包裝。發(fā)泡包裝通常由一較硬的物質(zhì)薄片組成，所述物質(zhì)薄片優(yōu)選經(jīng)較透明的塑性物質(zhì)的箔覆蓋。在包裝過程期間，在塑料箔中形成與錠劑或膠囊的尺寸和形狀相符合的凹槽。隨后，將錠劑或膠囊放入所述凹槽處且對著箔面處的塑料箔從形成凹槽處的相反方向?qū)⑤^硬物質(zhì)薄片密封。結(jié)果將錠劑或膠囊個別密封。優(yōu)選地，薄片的強度可使得膠囊或錠劑可通過用手對凹槽處施加壓力、借以在凹槽位置處的薄片中形成開口而從發(fā)泡包裝中移除。接著可經(jīng)由開口將所述錠劑或膠囊移除。
可希望在套組中提供記憶幫助，例如以錠劑或膠囊附近的數(shù)字形式來提供記憶幫助，由此數(shù)字與應(yīng)投與指定劑型的療法天數(shù)相一致。這種記憶幫助的其它實例是印在卡片上的日程表。例如如下述“第一周，星期一，星期二，......等，第二周，星期一，星期二，......”。記憶幫助的其它改變將易于為我們所了解，諸如，指示每日已分配劑量數(shù)量的機械計數(shù)器，與液晶讀數(shù)器或可聽式提醒信號器耦接的微晶片記憶器，其例如讀出已采用最后日劑量的日期和/或當(dāng)下一劑量要開始采用時提供提醒等。
實例以下是進行本發(fā)明的特定實施例的實例。所提供的實例僅用于說明性目的，其并不想以任何方式限制本發(fā)明。為確保所使用的相關(guān)數(shù)字的準(zhǔn)確度(例如數(shù)量，溫度等)已作了各種努力，但是當(dāng)然應(yīng)允許一些實驗誤差和偏差。
實例1神經(jīng)元再生的動物模型(功能恢復(fù))將雄性3月齡SHR(自發(fā)性高血壓)大鼠用于誘發(fā)MCA閉塞性中風(fēng)。因為大多數(shù)中風(fēng)患者是高血壓患者，所以這是優(yōu)選的種類。用美索比妥(Methohexital)麻醉動物且在zygmotic弓上進行小顱骨切除術(shù)以暴露大腦中動脈，在紋狀體分枝起點的遠(yuǎn)端處用10-0單絲尼龍線使中大腦動脈閉塞。未對大鼠插管且未插入導(dǎo)液管。在MCA閉塞之后，獲得大量且可再現(xiàn)的梗塞，導(dǎo)致強健感官活動不足。在不給予食物和水的情況下，對動物進行6小時光照/18小時黑暗的循環(huán)作用。在MCAO之后兩天，將大鼠用化合物I、II、III、IV、V、VI、VII、VIII或IX(0.03-10mg/kg)s.c.或p.o.處理且給予對照組鹽水歷時2-8周。在2、4、6和8周時在旋轉(zhuǎn)棒或圓柱體測試物中測試動物。
旋轉(zhuǎn)棒這個測試如早先所描述(Johansson和Ohlsson，(1995)Stroke26644-649)，允許通過大鼠橫穿旋轉(zhuǎn)棒的能力來快速評估運動移動的協(xié)調(diào)性和完整性。所述棒具有約1500mm的長度，提高到地面以上750mm且以10rpm分別向右或向左旋轉(zhuǎn)。
對于各方向給定6-0的分?jǐn)?shù)6，動物穿過棒，沒有腳滑脫現(xiàn)象；5，動物穿過棒，有少量的腳滑脫現(xiàn)象；4，動物穿過棒，有50％腳步滑脫；3，動物穿過棒，50％以上的腳步滑脫；2，動物略有走動且接著繞著棒旋轉(zhuǎn)；1，動物繞著棒旋轉(zhuǎn)，未能穿過棒；0，動物從棒上掉下來。
前肢使用在自發(fā)性直立中的不對稱使用的圓柱體測試圓柱體測試(從Schallert和Tillerson(Innovative models of CNSdiseasefrom molecule to therapy.Clifton，NJ，Humana，1999)修改)用來將直立于圓柱壁上的前肢使用定量。當(dāng)大鼠在20cm寬的透明玻璃圓柱中自由活動時對其監(jiān)視。由隱蔽觀察者對大鼠直立時由每一前肢進行的與圓柱體壁的接觸記分。對于每個動物總共記錄20次接觸，且將受損前肢(左邊)和未受損前肢接觸數(shù)計算為總接觸數(shù)的百分比?？赏ㄟ^測量MCAO之后由每一前肢進行的接觸來獲得大鼠的基線。
當(dāng)使用旋轉(zhuǎn)棒或圓柱體測試時，給予化合物I、II、III、IV、V、VI、VII、VIII或IX的動物組比1組對照動物進行的好。因此，當(dāng)對罹患中樞神經(jīng)系統(tǒng)病癥的動物投與σ受體配體時，其顯示功能恢復(fù)提高。
實例2用SA4503治療的大鼠中神經(jīng)再生的跡象1.旋轉(zhuǎn)棒將三十五只自發(fā)性高血壓大鼠暴露于恒定的中大腦動脈閉塞(MCAO)，接著分為三個治療組。在閉塞之后兩天開始且在閉塞之后連續(xù)每日直到28天以0.3mg/kg(12只大鼠)或1.0mg/kg(12只大鼠)的劑量s.c.投與SA4503。在對照組(11只大鼠)中，僅僅投與媒劑。在治療開始之后和在測試期間的幾個時間點，評估大鼠在旋轉(zhuǎn)棒模型中的能力。在實例1中描述了這種模型。它要求大鼠穿過具有1m長度的水平懸置的旋轉(zhuǎn)棒。這項任務(wù)測量動物的感官運動能力。使用攝影機記錄動物的行為且隨后由專門訓(xùn)練過的技術(shù)師對其進行分析和評分。分?jǐn)?shù)范圍為0-6，0表示能力最差而6反映健康動物(未患MCAO)的能力。在表1中給出結(jié)果。
表1

用0.3mg/kg SA4503處理的組顯示在第30天時5.2的總平均得分，這和健康動物的預(yù)期得分接近。
為此，這項測試證明當(dāng)在缺血性中風(fēng)模式中在中風(fēng)之后兩天直到中風(fēng)之后28天歷時28天對大鼠投藥時，σ-1選擇性拮抗劑SA4503在運動技能的特定恢復(fù)中促進功能恢復(fù)。
2.圓柱體測試將四十三只自發(fā)性高血壓大鼠暴露于持久的中大腦動脈閉塞(MCAO)，接著分成三個治療組。在閉塞之后兩天開始和每曰連續(xù)歷時14天，以0.1mg/kg(14只大鼠)或0.3mg/kg(14只大鼠)的劑量p.o.投與SA4503。在對照組中(15只大鼠)僅僅投與媒劑。在治療開始之后和在測試期間的幾個時間點，評估大鼠在圓柱體測試中的能力。在持久MCAO之后一天、接著14天、28天和59天時評估大鼠在測試中的能力。當(dāng)大鼠在20cm寬的透明玻璃圓柱體中自由活動時對其進行監(jiān)視。由隱蔽觀察者對大鼠直立時由每一前肢進行的與圓柱體壁的接觸記分。對于每個動物總共記錄20次接觸，且將受損前肢(左邊)和未受損前肢接觸數(shù)計算為總接觸數(shù)的百分比。在表2中給出結(jié)果。
表2

前肢的不對稱使用(％差值左/右)是持久MCAO的結(jié)果。MCAO之前的動物并不顯示任何不對稱行為。在整個觀察期間媒劑治療的動物保持不對稱性。用0.3mg/kg SA4503治療的動物在所有測量時間點具有降低到MCAO之前水平的前肢使用的不對稱性。
因此，這項測試證明當(dāng)在缺血性中風(fēng)模式中在中風(fēng)之后兩天歷時14天對大鼠每日投藥時，σ-1選擇性拮抗劑SA4503在運動技能的特定恢復(fù)中促進功能恢復(fù)。
實例3基因表達(dá)研究The Ethics Committee for Animal Research at Lund University核準(zhǔn)實驗方案。將獲自Mollegard Breeding Center，Ejby，Denmark，起先2個月和外科手術(shù)前養(yǎng)在標(biāo)準(zhǔn)籠子(550×350×200mm，每個籠子3到4只大鼠)中的六個月大的雄性SHR(自發(fā)性高血壓大鼠)用美索比妥鈉(Brietal，37℃)50mg/kg腹膜內(nèi)麻醉。經(jīng)由小顱骨切開術(shù)評估右MCA且在紋狀體動脈末梢處綁扎動脈以導(dǎo)致新腦皮層梗塞。平均手術(shù)時間為約20分鐘且將體溫維持在接近于37℃。手術(shù)后，將大鼠在單獨籠子中保持24小時。將遭受MCA閉塞(MCAO)的大鼠轉(zhuǎn)到標(biāo)準(zhǔn)環(huán)境中(SE)，或者放入大的、立式豐富環(huán)境(EE)的籠子(815×610×1,280mm)中，其配備水平和垂直板、鏈條、秋千、木塊和不同尺寸的物件和物質(zhì)。板與可移動物件之間的距離一周改變兩次。在未經(jīng)MCAO的情況下使模擬組經(jīng)受模擬手術(shù)且將其放入標(biāo)準(zhǔn)環(huán)境中。在所有分析組中，選定恢復(fù)的12天和60天作為基因表達(dá)的最終分析時間點。使用六個實驗組，每組由6-8個動物組成來進行研究。
在12天和60天之后犧牲來自每個實驗組的動物且將來自大腦中間、嘴喙和前額皮層以及海馬狀突起和紋狀體區(qū)域的組織分離以用于RNA純化和靶標(biāo)制備。將由來自大鼠皮層cDNA庫的50,000個克隆細(xì)胞組成的cDNA矩陣與獲自對照組、標(biāo)準(zhǔn)MCAO和豐富環(huán)境動物的經(jīng)標(biāo)記的靶標(biāo)核酸雜交。在所得基因發(fā)現(xiàn)矩陣數(shù)據(jù)的生物信息分析之后選定約3400個上調(diào)基因。對于每一個別矩陣過濾器，通過中值無意義的適當(dāng)值將原始克隆數(shù)據(jù)正?；?。接著將這些值轉(zhuǎn)換(log2+1)為接近正態(tài)性。全部復(fù)制，接著進行隨后的統(tǒng)計分析。在三個實驗條件(豐富環(huán)境、中風(fēng)和對照)的時間點通過主要組份分析(PCA)來分析對大腦每一區(qū)域(前額、中間、嘴喙、海馬狀突起和紋狀體)。從數(shù)據(jù)組中移除偏離的數(shù)據(jù)點。其次在給定大腦區(qū)域和時間點內(nèi)在實驗條件中對于克隆形式進行ANOVA。過濾掉ANOVA結(jié)果中p值小于0.05的克隆。接著用Tukey HSD測試分析經(jīng)過濾的ANOVA列表來判定克隆的表達(dá)模式。
基于＝1.8倍的表達(dá)上調(diào)和＜0.2的變化系數(shù)進行選擇。挑選選定的克隆，通過PCR放大且接著翻印在壓型陣列的尼龍膜上。從不同的皮層和皮層下區(qū)域以及12和60天的恢復(fù)時間用探針探測壓型陣列。選擇上調(diào)克隆以用于進一步分析。
來自發(fā)現(xiàn)和壓型陣列的數(shù)據(jù)分析用于在缺血性中風(fēng)病理學(xué)中的潛在機械通道和豐富環(huán)境之后功能恢復(fù)的細(xì)胞內(nèi)機理的鑒定。這個分析包括調(diào)整克隆的主要組份分析和具有相似表達(dá)概況的調(diào)整基因的分組。主要組份分析獲得在基因簇組之中的因果關(guān)系。作為中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)病癥潛在介入靶標(biāo)的上調(diào)基因的選擇包括一系列標(biāo)準(zhǔn)，這些標(biāo)準(zhǔn)包括(但不限于)序列注解、表達(dá)概況、基因在CNS病癥病理學(xué)中生物相關(guān)聯(lián)的機械通道內(nèi)的置換、針對調(diào)節(jié)特定基因(即藥力)發(fā)展藥物的技術(shù)可行性、基因在CNS或其它器官病理中的已知生物作用。
EE矩陣數(shù)據(jù)的分析證明當(dāng)將動物置于豐富環(huán)境中時，比較于標(biāo)準(zhǔn)環(huán)境，在中間皮層中，1型σ受體mRNA下調(diào)。因此，通過施加豐富環(huán)境刺激大腦引起1型σ受體在大腦區(qū)域中的表達(dá)主要用于控制感官運動功能。
實例4制備錠劑將式IV化合物(10.0g)與乳糖(85.5g)、羥丙基纖維素HPC-SL(2.0g)、羥丙基纖維素L-HPC、LH-22(2.0g)和純凈水(9.0g)混合，將所得混合物經(jīng)受造粒、將其干燥和分級，且將因此獲得的顆粒與硬脂酸鎂(0.5g)混合并使其經(jīng)受錠劑制造，進而獲得每錠劑含有10mg式IV化合物的錠劑。
實例5對受治療者投藥在0時間將實例4中制得的錠劑提供給受治療者。每24小時提供一片錠劑，持續(xù)一周的時間。在投與第三片錠劑之后，將受治療者暴露于神經(jīng)退化性事件中。經(jīng)治療的受治療者展示與未治療的受治療者相比嚴(yán)重程度較小的神經(jīng)學(xué)病癥癥狀。
在本申請案中所參考的所有印制專利和公開案以引用的方式全部并入本文中。
雖然已說明和描述本發(fā)明的優(yōu)選實施例，但應(yīng)了解在不脫離本發(fā)明的精神和范疇的情況下可對其進行各種改變。
權(quán)利要求
1.一種在神經(jīng)退化性疾病發(fā)作之后治療哺乳動物受治療者以促進神經(jīng)元再生的方法，其包含對所述受治療者投與一有效量的SA-4503或其鹽或溶劑合物。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其進一步包含評估所述受治療者的神經(jīng)元再生跡象。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其中所述神經(jīng)元再生跡象是所述受治療者中的功能恢復(fù)。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其中所述功能恢復(fù)是運動技能、認(rèn)知技能、言語、感官知覺或感覺功能的恢復(fù)。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法，其中所述功能恢復(fù)是運動技能的恢復(fù)。
6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法，其中所述功能恢復(fù)是認(rèn)知技能的恢復(fù)。
7.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其中所述神經(jīng)元再生跡象是所述受治療者大腦或脊髓中的結(jié)構(gòu)變化。
8.根據(jù)權(quán)利要求2至7所述的方法，其中對所述受治療者重復(fù)地投與SA-4503直到發(fā)現(xiàn)神經(jīng)元再生跡象。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的方法，其中每日投與SA-4503。
10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述神經(jīng)退化性疾病選自缺血性中風(fēng)、創(chuàng)傷性腦損傷和脊髓損傷。
11.根據(jù)權(quán)利要求10所述的方法，其中在所述缺血性中風(fēng)、創(chuàng)傷性腦損傷或脊髓損傷之后至少24小時開始所述治療。
12.根據(jù)權(quán)利要求10所述的方法，其中在所述缺血性中風(fēng)、創(chuàng)傷性腦損傷或脊髓損傷之后至少48小時開始所述治療。
13.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其進一步包含將所述受治療者暴露于一刺激性環(huán)境中。
14.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述哺乳動物受治療者是人類。
15.一種醫(yī)藥組合物，其包含用于在神經(jīng)退化性疾病發(fā)作之后治療哺乳動物受治療者以促進神經(jīng)元再生的SA-4503或其鹽或溶劑合物和一醫(yī)藥上可接受的賦形劑。
16.根據(jù)權(quán)利要求15所述的醫(yī)藥組合物，其進一步包含評估所述受治療者的神經(jīng)元再生跡象。
17.根據(jù)權(quán)利要求16所述的醫(yī)藥組合物，其中所述神經(jīng)元再生通過功能恢復(fù)來證明。
18.根據(jù)權(quán)利要求17所述的醫(yī)藥組合物，其中所述功能恢復(fù)是運動技能、認(rèn)知技能、言語、感官知覺或感覺功能的恢復(fù)。
19.根據(jù)權(quán)利要求18所述的醫(yī)藥組合物，其中所述功能恢復(fù)是運動技能的恢復(fù)。
20.根據(jù)權(quán)利要求18所述的醫(yī)藥組合物，其中所述功能恢復(fù)是認(rèn)知技能的恢復(fù)。
21.根據(jù)權(quán)利要求16所述的醫(yī)藥組合物，其中所述神經(jīng)元再生通過所述受治療者大腦或脊髓中的結(jié)構(gòu)變化來證明。
22.根據(jù)權(quán)利要求15至21所述的醫(yī)藥組合物，其中對所述受治療者重復(fù)地投與SA-4503直到發(fā)現(xiàn)神經(jīng)元再生跡象。
23.根據(jù)權(quán)利要求22所述的醫(yī)藥組合物，其中每日投與SA-4503。
24.根據(jù)權(quán)利要求15所述的醫(yī)藥組合物，其中所述神經(jīng)退化性疾病選自缺血性中風(fēng)、創(chuàng)傷性腦損傷和脊髓損傷。
25.根據(jù)權(quán)利要求24所述的醫(yī)藥組合物，其中在所述缺血性中風(fēng)、創(chuàng)傷性腦損傷或脊髓損傷之后至少24小時開始所述治療。
26.根據(jù)權(quán)利要求24所述的醫(yī)藥組合物，其中在所述缺血性中風(fēng)、創(chuàng)傷性腦損傷或脊髓損傷之后至少48小時開始所述治療。
27.根據(jù)權(quán)利要求15所述的醫(yī)藥組合物，其進一步包含將所述受治療者暴露于一刺激性環(huán)境中。
28.根據(jù)權(quán)利要求15至21所述的醫(yī)藥組合物，其中所述哺乳動物受治療者是人類。
29.一種用于在神經(jīng)退化性疾病發(fā)作之后在有其需要的哺乳動物受治療者中促進功能恢復(fù)的方法，其包含對所述受治療者投與一醫(yī)藥有效量的SA-4503或其鹽或溶劑合物。
30.根據(jù)權(quán)利要求29所述的方法，其進一步包含將所述受治療者暴露于一刺激性環(huán)境中。
31.根據(jù)權(quán)利要求30所述的方法，其中所述神經(jīng)退化性疾病是選自由缺血性中風(fēng)、創(chuàng)傷性腦損傷和脊髓損傷組成的群組。
32.根據(jù)權(quán)利要求31所述的方法，其中所述神經(jīng)退化性疾病是缺血性中風(fēng)。
33.根據(jù)權(quán)利要求31所述的方法，其中在中風(fēng)期間或剛剛中風(fēng)之后投與所述配體。
34.根據(jù)權(quán)利要求31所述的方法，其中在所述疾病發(fā)作24小時之內(nèi)投與SA-4503。
35.根據(jù)權(quán)利要求31所述的方法，其中在所述疾病發(fā)作48小時之內(nèi)投與SA-4503。
36.根據(jù)權(quán)利要求34或35所述的方法，其中SA-4503至少投與2周。
37.根據(jù)權(quán)利要求34或35所述的方法，其中SA-4503投與1個月。
38.根據(jù)權(quán)利要求34或35所述的方法，其中SA-4503投與3個月。
39.根據(jù)權(quán)利要求34或35所述的方法，其中SA-4503投與3個月或更長。
40.根據(jù)權(quán)利要求34或35所述的方法，其中連續(xù)投與SA-4503。
41.根據(jù)權(quán)利要求31到40所述的方法，其中所述受治療者是人類。
42.一種SA-4503在制造一藥物中的用途，所述藥物用于在神經(jīng)退化性疾病發(fā)作之后促進哺乳動物受治療者的神經(jīng)元再生。
43.根據(jù)權(quán)利要求42所述的用途，其進一步包含評估所述受治療者的神經(jīng)元再生跡象。
44.根據(jù)權(quán)利要求43所述的用途，其中所述神經(jīng)元再生通過功能恢復(fù)來證明。
45.根據(jù)權(quán)利要求44所述的用途，其中所述功能恢復(fù)是運動技能、認(rèn)知技能、言語、感官知覺或感覺功能的恢復(fù)。
46.根據(jù)權(quán)利要求45所述的用途，其中所述功能恢復(fù)是運動技能的恢復(fù)。
47.根據(jù)權(quán)利要求45所述的用途，其中所述功能恢復(fù)是認(rèn)知技能的恢復(fù)。
48.根據(jù)權(quán)利要求43所述的用途，其中所述神經(jīng)元再生通過所述受治療者大腦或脊髓中的結(jié)構(gòu)變化來證明。
49.根據(jù)權(quán)利要求42至48中任一項所述的用途，其中對所述受治療者重復(fù)地投與SA-4503直到發(fā)現(xiàn)神經(jīng)元再生跡象。
50.根據(jù)權(quán)利要求50所述的用途，其中每日投與SA-4503。
51.根據(jù)權(quán)利要求42所述的用途，其中所述神經(jīng)退化性疾病選自缺血性中風(fēng)、創(chuàng)傷性腦損傷和脊髓損傷。
52.根據(jù)權(quán)利要求51所述的用途，其中在所述缺血性中風(fēng)、創(chuàng)傷性腦損傷或脊髓損傷之后至少24小時開始所述治療。
53.根據(jù)權(quán)利要求52所述的用途，其中在所述缺血性中風(fēng)、創(chuàng)傷性腦損傷或脊髓損傷之后至少48小時開始所述治療。
54.根據(jù)權(quán)利要求42所述的用途，其進一步包含將所述受治療者暴露于一刺激性環(huán)境中。
55.根據(jù)權(quán)利要求42至54中任一項所述的用途，其中所述哺乳動物受治療者是人類。
全文摘要
本發(fā)明揭示適用于促進神經(jīng)退化性疾病中神經(jīng)元再生和功能恢復(fù)的方法和組合物。所述方法和組合物利用σ受體的配體，其中所述配體優(yōu)選為SA－4503或其鹽或溶劑合物。這些分子可單獨遞送或者與治療或預(yù)防諸如那些由以下疾病所引起的神經(jīng)退化性疾病的藥劑組合遞送缺血性中風(fēng)、糖尿病性周圍神經(jīng)病變、癌癥治療誘發(fā)的神經(jīng)病變、多發(fā)性硬化、肌萎縮性側(cè)索硬化、創(chuàng)傷性腦損傷、脊髓損傷、亨廷頓氏疾病(Huntington′s disease)或帕金森氏疾病(Parkinson′s disease)。在其它方法中，在中風(fēng)之后投與所述σ受體配體來促進功能恢復(fù)。所述σ受體配體的所述投藥可實現(xiàn)更快的功能恢復(fù)。
文檔編號A61K31/485GK1802168SQ200480016103
公開日2006年7月12日 申請日期2004年6月14日 優(yōu)先權(quán)日2003年6月12日
發(fā)明者唐娜·奧克森伯格, 羅曼·厄弗 申請人:阿吉治療有限公司