專利名稱：注射用前列腺素凍干乳劑及其制備方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種列腺素制劑，特別涉及一種注射用前列腺素凍干制劑。
背景技術：
前列腺素，(簡稱PGE1)是人體內的一種具有多種生理活性的化合物，其化學名稱為11(α)-15(s)-雙羥基-9-酮-13-反前列烯酸。其直接作用于血管平滑肌，能擴張動脈血管，抑制血小板聚集。國際上將之作為內源性的心血管藥物而廣泛使用。
PGE1的劑型有凍干制劑，注射乳劑，塞入用微栓等。目前的PGE1制劑有三個主要缺點，即注射劑對血管壁的刺激作用，病人反映注射處疼痛，制劑穩(wěn)定性差，一些注射劑甚至在室溫幾個月，PGE1的HPLC峰消失。
為克服上述缺點，有采用γ-環(huán)糊精包合PGE1的凍干針劑，有采用右旋糖酐的凍干劑，也有利用脂肪乳劑為載體的PGE1注射乳劑，除γ-環(huán)糊精包合物未取到樣品進行檢測外，其它均不能有很穩(wěn)定的質量。為達到穩(wěn)定的目的有用大豆磷脂、膽固醇將PGE1制成脂質體(公開號CN1449759A)的報告。

發(fā)明內容
本發(fā)明需要解決的技術問題是公開一種注射用前列腺素凍干乳劑，以克服現(xiàn)有技術存在的刺激性大，在室溫下不穩(wěn)定的缺陷。
本發(fā)明的技術構思是這樣的本發(fā)明的原理是使PGE1分子進入到卵磷脂的雙分子的親水親油部分中，形成分子包衣，使其注入血管時，因為卵磷脂包裹，對生物膜具有良好的親和作用，不直接與血管壁作用，而減少刺激作用。在卵磷脂分子的親水基團外用甘露醇或山梨醇和右旋糖酐或海藻酸鈉結合，親油基外用包維生素E等包合，從而使制劑具有優(yōu)良的穩(wěn)定作用。
本發(fā)明凍干乳劑的組分包括治療有效量的前列腺素和載體，所說的載體包括卵磷脂、維生素、甘露醇、山梨醇或右旋糖酐中的一種或一種以上，以載體的總重量計，各個組分的重量百分比含量為卵磷酯20～60％維生素0.05～1％右旋糖酐 0～40％甘露醇或山梨醇14～75％所說的維生素選自維生素E或維生素C；以所說的載體的總重量計，優(yōu)選的前列腺素的重量百分比含量為0.001～1.0％。
本發(fā)明的制備方法如下將注射用卵磷脂、維生素E、PGE1用乙醇溶解，攪拌下注入甘露醇、山梨醇或右旋糖酐中的一種或一種以上的水溶液中，然后加入pH調節(jié)劑，使溶液的pH為4～7，采用常規(guī)的方法進行乳化后，經0.2μ微孔濾膜無菌過濾，在-10～-20℃下冷凍干燥，即獲得本發(fā)明的凍干乳劑。
本發(fā)明的注射用前列腺素凍干乳劑具有擴張動脈血管，抑制血小板聚集的功能，可用于治療慢性動脈閉塞癥(血栓閉塞性脈管炎、閉塞性動脈硬化癥)引起的四肢潰瘍以及小血管循環(huán)降所引起的四肢靜息疼痛，其劑量約為0.083～2.0μg/天.公斤，具體可根據(jù)患者的年齡，性別決定。
本品使用時，可于5％的葡萄糖溶液配伍，其配比一般為10ml 5％的葡萄糖溶液加16～160mg本發(fā)明的注射用前列腺素凍干乳劑，搖勻即成粒徑小于500nm的乳劑，供臨床滴注(稀釋于葡萄糖輸液中)或靜脈注射用。
本發(fā)明的注射用前列腺素凍干乳劑，對血管壁的刺激作用小，病人反映注射處不疼痛，制劑穩(wěn)定性好，在室溫12個月，PGE1的HPLC峰不消失。


圖1為復溶后的粒徑分布圖。
具體實施例方式
實施例1處方PGE10.05g卵磷脂 30,000g維生素E 0.1g甘露醇 90,000g檸檬酸 0.049g將注射用卵磷脂、維生素E、PGE1用乙醇溶解，攪拌下注入甘露醇的水溶液中，然后加入pH調節(jié)劑檸檬酸，使溶液的pH為4，采用常規(guī)的方法進行乳化后，經0.2μ微孔濾膜無菌過濾，在-40℃下冷凍干燥，即獲得本發(fā)明的凍干乳劑。
將凍干乳劑于不同溫度不同時間放置后，用HPLC方法測定PGE1含量，外觀符合要求，含量見下表。

由表可見，在4℃下放置18個月，PGE1含量為98.65％，這是由于磷脂的親水親油部分均為穩(wěn)定劑包覆以致PGE1不易分解所致。
實施例2處方PGE10.08g卵磷脂48,000g
右旋糖酐 30,000g甘露醇 115g維生素C0.1g檸檬酸 0.064g制備方法與實施例1相同。
將凍干乳劑在8℃放置18個月，外觀符合要求，用HPLC方法測定PGE1含量為98.55％。
實施例3處方PGE10.06g卵磷脂 36,000g維生素E 0.8g右旋糖酐20,000gL-精氨酸0.05g山梨醇 88,000g檸檬酸 0.048g制備方法與實施例1相同。
將凍干乳劑在25℃放置3個月，外觀符合要求，用HPLC方法測定PGE1含量為92.36％。。
對比實施例1采用國內市場購得的產品進行穩(wěn)定性測定，結果如下

由表可見，1號產品的PGE1的主峰已消失，2號產品的略佳，說明右旋糖酐有穩(wěn)定作用，3號產品雖用大豆磷脂和油來穩(wěn)定PGE1，但因為是液體制劑，有大量水存在，容易促進PGE1的分解。
實施例4采用臨床學研究指導原則中的方法對實施例1的凍干乳劑復溶后的動物刺激試驗，結果如下對家兔耳緣靜脈血管刺激試驗，采用推薦上臨床的1μg/ml/kg的劑量，每天一次，連續(xù)3天，由試驗結果可見，本品幾乎無刺激作用。
復溶后的粒徑分布見圖1，由圖1可見，復溶后的粒徑分布在100nm，極少有大于1μm的粒子。
實施例5采用離心(5萬分子量的離心管)對實施例1的凍干乳劑進行包封率測試，PGE1的包封率達90％以上，也即游離于水相中能刺激血管內膜的藥物僅10％，說明可能在很大程度上降低了其刺激性。
實施例6對家兔耳緣靜脈局部刺激試驗試驗方法試驗組及參照組各取家兔3只，分別在左右耳靜脈部位各注射一定量上述藥液和相應溶劑(按每公斤1ml試液)，即試驗組為注射用前列腺素E1凍干乳劑及空白凍干乳劑；參照品為注射用前列腺素E1及生理鹽水，每天一次，連續(xù)三天。末次給藥后次日觀察注射部位刺激狀況，并解剖動物取相應的耳緣靜脈血管段(取耳最遠端1cm處開始，每隔1cm切下0.5cm寬一段)，從遠端開始分別標以A～F六段，以10％福爾馬林固定，經乙醇逐級脫水，石蠟包埋，切片，作HE染色。鏡檢應無變性或壞死等顯著刺激性反應。
試驗結果注射用前列腺素E1凍干乳劑應用于靜脈注射時對家兔耳緣靜脈血管刺激試驗，采用推薦上臨床的1μg/1ml/kg的劑量(1μg/1m)，每天一次，連續(xù)三天后，實驗顯示注射用前列腺素E1凍干乳劑對家兔耳緣靜脈血管無明顯的與藥物相關的刺激反應；與參照品注射用前列腺素E1比較也無明顯差異。
過敏試驗試驗方法豚鼠30只隨機分成5組。第一組注射用前列腺素E1凍干乳劑、第二組空白凍干乳劑、第三組陽性對照(0.5％雞卵清蛋白)；第四組參比組注射用前列腺素E1、第五組參比組相應溶劑生理鹽水。每組隔日腹腔注射相應試液0.5ml/只，連續(xù)天共致敏注射3次。然后每組再分成兩小組，分別在第三次致敏注藥后14天及21天，從脛靜脈注射相應試液1ml。在給藥后15分鐘內，觀察動物不得有抓鼻、咳嗽、興奮不安、呼吸困難、窒息死亡等癥狀。
試驗結果見下表1表1.注射用前列腺素E1脂質體對豚鼠過敏反應結果

試驗結論注射用前列腺素E1凍干乳劑注射液對豚鼠過敏試驗中，當激發(fā)劑量給藥后15分鐘內均未見明顯過敏反應。參比組注射用前列腺素E1也未見過敏反應，兩者相似。
溶血試驗方法取出纖維蛋白家兔血10ml，加生理鹽水10ml，離心，棄上清液，如是反復離心洗滌2次，使上清液不呈紅色止。然后按血球體積，用生理鹽水配成2％的混懸液即可。
實驗各取試管7支按下表2排列并先后加入各種溶液，第6管不加供試液作為空白對照管；第7管仍不加供試液，用蒸餾水代替生理鹽水，作為溶血的陽性對照管，各管搖勻，放置37℃恒溫箱中，保溫1小時，取出后按下表次序與相應的溶劑管進行比較，觀察和記錄各管是否產生溶血。然后除第7管陽性對照管外，各管每分鐘1000轉離心5min后，分別取下沉的紅血球置于載玻片上，加少量生理鹽水于顯微鏡下觀察，是否出現(xiàn)凝集現(xiàn)象或紅血球形態(tài)變化。
試驗結果注射用前列腺素E1各組與相應空白凍干乳劑溶劑組比較，觀察至1小時，1000轉離心5min均出現(xiàn)紅血球全部下沉，上層液體無色澄明；除陽性對照管有紅染外，各試驗管與對照管相比均未出現(xiàn)紅染現(xiàn)象。各管紅血球沉淀置于顯微鏡下加少許生理鹽水后，紅血球易于分散，未見凝集現(xiàn)象，紅血球形態(tài)也未見明顯異常。參照組注射用前列腺素E1及相應溶劑生理鹽水對照組也未見溶血現(xiàn)象，紅血球形態(tài)也未見明顯異常。
權利要求
1.一種注射用前列腺素凍干乳劑，特征在于，包括治療有效量的前列腺素和載體，所說的載體包括卵磷脂、維生素、甘露醇或山梨醇和右旋糖酐或海藻酸鈉，其中以卵磷脂、維生素、甘露醇或山梨醇和右旋糖酐或海藻酸鈉的總重量計，各個組分的重量百分比含量為卵磷酯 20～60％維生素 0.05～1％右旋糖酐 0～40％甘露醇或山梨醇 14～75％。
2.根據(jù)權利要求1所述的注射用前列腺素凍干乳劑，特征在于，所說的維生素選自維生素E或維生素C。
3.根據(jù)權利要求1或2所述的注射用前列腺素凍干乳劑，特征在于，以載體的總重量計，前列腺素的重量百分比含量為0.001～1.0％。
4.制備權利要求1、2或3所述的注射用前列腺素凍干乳劑的方法，其特征在于，將注射用卵磷脂、維生素、前列腺素用乙醇溶解，攪拌下注入甘露醇或山梨醇和右旋糖酐的水溶液中，然后加入pH調節(jié)劑，使溶液的pH為4～7，采用常規(guī)的方法進行乳化后，微孔濾膜無菌過濾，冷凍干燥，即獲得注射用前列腺素凍干乳劑。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種注射用前列腺素凍干乳劑，包括治療有效量的前列腺素和載體，所說的載體包括卵磷脂、維生素、甘露醇或山梨醇和右旋糖酐，本發(fā)明使前列腺素分子進入到卵磷脂的雙分子的親水親油部分中，形成分子包衣，使其注入血管時，因為卵磷脂包裹，對生物膜具有良好的親和作用，不直接與血管壁作用，而減少刺激作用。在卵磷脂分子的親水基團外用甘露醇或山梨醇和右旋糖酐結合，親油基外用包維生素E等包合，從而使制劑具有優(yōu)良的穩(wěn)定作用。本發(fā)明的注射用前列腺素凍干乳劑，對血管壁的刺激作用小，病人反映注射處不疼痛，制劑穩(wěn)定性好，在室溫12個月，前列腺素的HPLC峰不消失。
文檔編號A61P7/02GK1732954SQ20041005357
公開日2006年2月15日 申請日期2004年8月9日 優(yōu)先權日2004年8月9日
發(fā)明者賀芬, 侯惠民 申請人:上海現(xiàn)代藥物制劑工程研究中心有限公司