專利名稱：白首烏多糖的提取及其口含片制備的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及白首烏多糖的提取及其口含片的制備技術(shù)。
背景技術(shù)：
植物多糖，特別是滋補(bǔ)類中藥來源的植物多糖，具有多種生理功能。因而，這類多糖倍受重視，藥物和保健品開發(fā)市場前景良好。
中藥白首烏主要來源于蘿摩科鵝絨藤屬3種植物的塊根。其一為白首烏(Cynanchum bungei Decne)，又名泰山何首烏、戟葉牛皮消等，為泰山四大名藥之首，以白首烏正品收入中華人民共和國藥典；其二為耳葉牛皮消(C.auriculatum Royle ex Wight)，市場中以此種白首烏為主要產(chǎn)品；其三為隔山消(C.wifordii Hemsl)，在朝鮮、韓國、日本亦作白首烏。白首烏具有烏發(fā)養(yǎng)顏、延緩衰老、養(yǎng)血益肝、固腎益精的作用，強(qiáng)壯筋骨的作用優(yōu)于蓼科的何首烏，近年來研究發(fā)現(xiàn)白首烏還具有抗腫瘤、調(diào)節(jié)免疫等功能。三種白首烏市場需求不斷增加，并出口日、韓、東南亞、北美等國家和地區(qū)。
目前，市場上白首烏主要以原料和白首烏粉為主，深加工較少。關(guān)于白首烏多糖的提取工藝、生理功能、產(chǎn)品制備等屬于空白。

發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明目的是從白首烏中提取白首烏多糖和開發(fā)有關(guān)產(chǎn)品，如白首烏口含片。
多糖的提取中脂溶性成分和色素較難除去，本辦法采用先用乙醇提取的辦法去脂溶性成分和色素。白首烏中淀粉較多，在水提取過程中與多糖一同提取，本發(fā)明采用酶法水解淀粉，在經(jīng)過乙醇沉淀多糖的辦法，除去淀粉。白首烏多糖提取條件，如溶劑、溫度、料液比、提取時間和次數(shù)等，經(jīng)過單因素實(shí)驗(yàn)和多因素正交實(shí)驗(yàn)獲得，并根據(jù)生產(chǎn)實(shí)際制定。
經(jīng)動物體外和體內(nèi)實(shí)驗(yàn)證明白首烏粗多糖和總多糖都具有免疫調(diào)節(jié)作用。粗多糖和總多糖可以作為功能成分制成藥物或保健品，如口含片等。
具體

發(fā)明內(nèi)容
為1、白首烏多糖的制備工藝前處理與提取白首烏去外栓皮，洗凈，切片后烘干或曬干。用粉碎機(jī)將白首烏粉碎得白首烏粉，顆粒以＜4mm為好，用3～10倍于白首烏粉的75％～95％乙醇回流提取2～3次，每次1～3h。乙醇提取液經(jīng)濃縮回收乙醇，濃縮物另作它用。提取后固體殘?jiān)匆欢纤?∶8～20、溫度80℃～100℃、時間1～3h，提取1～3次，合并水提取液，即為多糖水提取液。
白首烏粗多糖制備所得水提取液經(jīng)濃縮后，按濃縮液3～5倍體積加入80％～95％乙醇，沉淀多糖，減壓過濾或離心，并用85％～95％乙醇洗滌2次，沉淀用真空烘干法(50℃～70℃)或真空冷凍干燥法干燥，得白首烏粗多糖。白首烏粗多糖中含有淀粉和蛋白質(zhì)等非多糖成分，顏色為淡褐色固體。
白首烏總多糖制備所得水提取液，按18U/g加入液化酶，在pH6，85℃條件下處理1.5h，用I2/KI溶液檢驗(yàn)直到碘液不變色，接著按200U/g加入糖化酶，在pH6，溫度60℃處理1h，抽濾去掉酶渣，這樣淀粉變成了醇溶性的低分子糖，可在下面乙醇沉淀多糖的過程中除去。真空濃縮提取液至小體積，按體積比1∶2～4加入氯仿-正丁醇混合物(1∶4)，充分搖勻后放置，使蛋白質(zhì)沉淀，離心除去蛋白質(zhì)，收集上清液，用氯仿-正丁醇混合物進(jìn)一步除去蛋白質(zhì)，至無蛋白質(zhì)沉淀，約需重復(fù)6～10次。除去蛋白質(zhì)后的上清液濃縮，按濃縮液3～5倍體積加入85％～95％乙醇，沉淀多糖，減壓過濾或離心，并用85％～95％乙醇洗滌2次，沉淀用真空烘干法(50℃～70℃)或真空冷凍干燥法干燥，得白首烏總多糖。白首烏總多糖中不含淀粉和蛋白質(zhì)等非多糖成分，顏色為淡褐色或白色固體。
2、白首烏多糖的免疫調(diào)節(jié)功能評價(jià)說明按照常規(guī)的免疫調(diào)節(jié)功能評價(jià)方法，經(jīng)動物體外和體內(nèi)實(shí)驗(yàn)證明粗多糖和總多糖都具有免疫調(diào)節(jié)作用。這些實(shí)驗(yàn)有白首烏多糖體外對兔子T淋巴細(xì)胞的作用、對小白鼠免疫器官(胸腺、脾臟)的影響、對小白鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞功能的影響、對綿羊紅細(xì)胞誘導(dǎo)小鼠DTH-足趾增厚實(shí)驗(yàn)的影響(遲發(fā)型超敏反應(yīng))、對小鼠碳廓清實(shí)驗(yàn)的影響。
3、口含片制備粗多糖和總多糖可以作為功能成分制成藥物或保健品，如口含片型、膠囊型、口服液型等。
口含片的制備按5～20份多糖粉，糊精40～60份，蔗糖30～60份，水分80～100份，風(fēng)味物質(zhì)若干份，混勻、壓片、烘干、包裝。其中風(fēng)味物質(zhì)可以根據(jù)需要添加，制成不同風(fēng)味類型。如檸檬酸型，則加檸檬酸2～4份；如薄荷風(fēng)味則加薄荷醇0.2～0.4份；因?yàn)榘资诪醵嗵菬o特殊異味，所以也可以不添加風(fēng)味物質(zhì)。


圖1 白首烏多糖提取工藝流程圖1中1是白首烏粉，2是乙醇，3是加熱回流，4是過濾，5是固體殘?jiān)?濾液，7是水，8是加熱提取，9是過濾，10是提取的多糖水溶液。
圖2 白首烏粗多糖的制備流程圖2中10是圖1中提取的多糖水溶液，11是減壓濃縮，12是濃縮液，13是乙醇，14是計(jì)量，15是離心，16是多糖沉淀，17是乙醇洗滌二次，18是多糖沉淀，19是真空干燥，20是粉碎，21是粗多糖粉。
圖3 白首烏總多糖的制備流程圖3中10是圖1中提取的多糖水溶液，22是液化酶，23是計(jì)量，24是調(diào)pH6，25是85℃下處理，26是糖化酶，27是計(jì)量，28是調(diào)pH6，29是60℃下處理，30是過濾，31是濾液，32是真空濃縮，33是氯仿-正丁醇法沉淀蛋白質(zhì)(數(shù)次)，34是離心，35是上清液，36是乙醇，37是計(jì)量，38離心，39是沉淀，40是干燥，41是粉碎，42是白首烏總多糖粉。
圖4 檸檬酸型白首烏多糖口含片制備圖4中43是是圖2中的21或圖3中的42，44是糊精，45是蔗糖，46是水分，47是檸檬酸，48是混勻，49是壓片，50是烘干，51是包裝，52是口含片成品。
具體實(shí)施方式
1、白首烏粗多糖制備取白首烏粉100g(1)，用500ml 95％乙醇(2)回流提取2次，每次2h，減壓過濾，固體殘?jiān)铀?000ml、在100℃下提取2h，提取1次。提取液在60℃下經(jīng)減壓濃縮至60ml，加入250ml 95％乙醇，4000r/min離心，得多糖沉淀，沉淀用95％乙醇洗滌2次，沉淀用真空烘干法60℃干燥至干(19)，粉碎(20)后得白首烏粗多糖粉(21)，提取率9％，收率82％。
2、白首烏總多糖制備取白首烏粉100g，用500ml 95％乙醇回流提取2次，每次2h，減壓過濾；固體殘?jiān)铀?000ml、在100℃下提取2h；稍冷，按18U/g加入液化酶(22)，調(diào)pH6，85℃條件下處理2h，用I2/KI溶液檢驗(yàn)不變色，接著按200U/g加入糖化酶(26)，調(diào)pH6，溫度60℃處理1h，抽濾去掉酶渣。在60℃下真空濃縮提取液至80ml，加入30ml氯仿-正丁醇混合物(1∶4)(33)，充分搖勻，使蛋白質(zhì)沉淀，4000r/min離心除去蛋白質(zhì)，重復(fù)去蛋白質(zhì)8次。除蛋白質(zhì)后的上清液濃縮至30ml，加入120ml 95％乙醇沉淀多糖，4000r/min離心，用95％乙醇80ml洗滌沉淀2次，沉淀在-56℃下冷凍，真空冷凍干燥法干燥(40)，粉碎后得白首烏總多糖粉，提取率6％。
3、檸檬酸型口含片制備取白首烏總多糖粉10份(43)，糊精60份(44)，蔗糖60份(45)，水分100份(46)，檸檬酸2份(48)，混勻、壓片(49)、烘干(50)、包裝(51)。
權(quán)利要求
1.一種白首烏多糖的提取方法，其特征在于用粉碎機(jī)將白首烏粉碎得白首烏粉，顆粒大小＜4mm，用3～10倍的75～95％乙醇回流提取2～3次，每次1～3h，提取后固體殘?jiān)戳纤?∶8～20、溫度80℃～100℃、時間1～3h，提取1～3次，得白首烏多糖水提取液。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述白首烏多糖的提取方法，其特征在于將白首烏多糖水提取液經(jīng)濃縮后，按濃縮液3～5倍體積加入80～95％乙醇，沉淀多糖，減壓過濾或離心，并用85～95％乙醇洗滌2次，沉淀物用真空烘干法，保持50～70℃，或真空冷凍干燥法干燥，得白首烏粗多糖。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述白首烏多糖的提取方法，其特征在于將白首烏多糖水提取液，按18U/g加入液化酶，在pH6，溫度85℃條件下處理1.5h，用I2/KI溶液檢驗(yàn)直到碘液不變色，再按200U/g加入糖化酶，在pH6，溫度60℃處理1h，抽濾去掉酶渣，真空濃縮提取液至小體積，按體積比1∶2～4加入氯仿-正丁醇混合物，充分搖勻后，離心除去蛋白質(zhì)，收集上清液，重復(fù)6～10次至無蛋白質(zhì)沉淀，除去蛋白質(zhì)后的上清液濃縮，按濃縮液3～5倍體積加入85～95％乙醇，沉淀多糖，減壓過濾或離心，再用85～95％乙醇洗滌2次，沉淀物用真空烘干法，溫度50～70℃，或真空冷凍干燥法干燥，得白首烏總多糖。
4.一種白首烏多糖口含片，含有白首烏粗多糖或總多糖和糊精、蔗糖，其特征在于白首烏粗多糖或總多糖與糊精、蔗糖重量比為5-20∶40-50∶30-40。
5.根據(jù)權(quán)利4所述的白首烏多糖口含片，其特征在于添加2-4份檸檬酸或0.2-0.4份薄荷醇，可制成風(fēng)味白首烏多糖口含片。
全文摘要
本發(fā)明涉及白首烏多糖的提取及其口含片的制備技術(shù)。用粉碎機(jī)將白首烏粉碎(顆粒＜4mm)，用3～10倍乙醇回流提取2～3次。乙醇提取液經(jīng)濃縮回收乙醇，濃縮物另作它用。提取后固體殘?jiān)匆欢纤?∶8～20、溫度80℃～100℃、時間1～3h，提取1～3次，合并水提取液。水提取液經(jīng)濃縮、乙醇沉淀和干燥得白首烏粗多糖；水提取液經(jīng)酶法去除淀粉、氯仿－正丁醇法去蛋白質(zhì)、乙醇沉淀和干燥等步驟，得白首烏總多糖。經(jīng)動物體外和體內(nèi)實(shí)驗(yàn)證明粗多糖和總多糖都具有免疫調(diào)節(jié)作用。粗多糖和總多糖可以作為免疫調(diào)節(jié)功能成分制成藥物或保健品，如口含片型、口服液型等。
文檔編號A61K31/715GK1583799SQ200410024269
公開日2005年2月23日 申請日期2004年6月11日 優(yōu)先權(quán)日2004年6月11日
發(fā)明者王建華, 高麗君 申請人:山東農(nóng)業(yè)大學(xué)