專利名稱：一種活性寡糖衍生物及其制備方法
硫酸酯化的多糖具有為人所知的抗愛滋病病毒活性，其中硫酸酯化的β-D-(1→4)-木吡喃聚糖[Antiviral Res.，1998，916，335-343；Antiviral Chem.Chemother.，1990，11，41-46；J.Viral.，1991，65，1543-1550]和硫酸酯化的β-D-(1→3)-吡喃葡萄寡糖[Macromolecules，1990，23，3717-3722]都具有較強(qiáng)的體外抗愛滋病毒活性，目前已進(jìn)入一期臨床試驗；硫酸酯化的α-L-巖藻吡喃聚糖具有很好的抗凝血和抗腫瘤活性[Biochem.Pharm.，2003，65，173-179]；硫酸酯化的β-D-(1→3)-半乳吡喃聚糖具有抗凝血活性[Carbohydr.Res.，2002，337，2231-2238]?；谖覀円郧霸诳鼓[瘤寡糖合成的經(jīng)驗(中國專利申請?zhí)?01078356)，我們設(shè)計了硫酸化葡萄吡喃寡糖為目標(biāo)化合物，通過分子表面巨大的負(fù)電荷密度實現(xiàn)其生物活性。所以我們的目標(biāo)化合物為甲基2，3，4，6-四-硫酸酯-β-D-葡萄吡喃糖基-(1→6)-[2，3，4，6-四-硫酸酯-β-D-葡萄吡喃糖基-(1→3)]-2，4-二-硫酸酯-β-D-葡萄吡喃糖基-(1→6)-2，3，4-三-硫酸酯-β-D-葡萄吡喃糖基-(1→6)-[2，3，4，6-四-硫酸酯-β-D-葡萄吡喃糖基-(1→3)]-2，4-二-硫酸酯-α-D-葡萄吡喃糖苷(如下圖)。我們采用“3+3”的合成策略，以1位硫苷衍生物三糖為供體[見文獻(xiàn)Org.Lett.，2000，2，3793-3800]，1位甲基苷，6’位硅烷化的三糖衍1生物為受體，制備了硫酸化六糖目標(biāo)化合物。
本發(fā)明的目的是提供一種新設(shè)計的非天然產(chǎn)物分子，提出了一種可行的合成方法來制備目標(biāo)分子，其核心是使用適當(dāng)修飾過的三糖硫苷為構(gòu)筑模塊，使之成為可重復(fù)使用的糖基供體。
下面結(jié)合實施例對本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)地說明。
一般方法結(jié)構(gòu)檢定所需的1HNMR，13CNMR，1H-1HCOSY和1H-13CCOSY譜用Bruker ARX400在CDCl3中測得?；瘜W(xué)位移以Me4Si為內(nèi)標(biāo)，以ppm為單位表示。質(zhì)譜用MALTI-TOF-MS，用CCA做基質(zhì)。薄層色譜(TLC)由HF254硅膠板上用30％(v/v)的硫酸甲醇溶液活紫外檢測器檢測。柱色譜采用100-200目的硅膠，以乙酸乙酯-石油醚為淋洗液。
苯基2，3，4-三-氧-乙?；?6-氧-二甲基叔丁基硅基-β-D-葡萄吡喃糖基-(1→6)-[2，3，4，6-四-氧-乙?；?β-D-葡萄吡喃糖基-(1→3)]-2，4-二-氧-乙酰基-1-硫-β-D-葡萄吡喃糖苷(9) 將化合物6(2g，我們以前的工作Org.Lett.，2000，2，3793-3800)和1個當(dāng)量的7(按文獻(xiàn)Tetrahedron，1993，49，7301-7316和J.Am.Chem.Soc.，1999，121，12196-12197)溶于10mL無水二氯甲烷中，-42℃下加入三甲基硅基三氟甲磺酸酯(0.1當(dāng)量)，反應(yīng)2小時后，將8(Org.Lett.，2000，2，3793-3800)滴加入該體系。升溫至零度，補(bǔ)加0.1當(dāng)量的催化劑，繼續(xù)反應(yīng)1小時，原料消失后，減壓濃縮，硅膠柱純化，乙酸乙酯∶石油醚(1∶1)洗脫，得到泡狀物9(71％)。
甲基2，3，4-三-氧-乙?；?6-氧-二甲基叔丁基硅基-β-D-葡萄吡喃糖基-(1→6)-[2，3，4，6-四-氧-乙?；?β-D-葡萄吡喃糖基-(1→3)]-2，4-二-氧-乙?；?β-D-葡萄吡喃糖苷(3)
將化合物9(5g)溶于無水甲醇中(20mL)。零度下加入氮-碘代琥珀酰亞胺(1.5當(dāng)量)和三甲基硅基三氟甲磺酸酯(0.1當(dāng)量)，反應(yīng)2小時后，三乙胺中和，減壓蒸干溶劑，得到α，β混合的、以α為主的油狀物3。
甲基2，3，4，6-四-氧-乙?；?β-D-葡萄吡喃糖基-(1→6)[2，3，4，6-四-氧-乙?；?β-D-葡萄吡喃糖基-(1→3)]-2，4-二-氧-乙?；?β-D-葡萄吡喃糖基-2，3，4-三-氧-乙?；?β-D-葡萄吡喃糖基-(1→6)-[2，3，4，6-四-氧-乙?；?β-D-葡萄吡喃糖基-(1→3)]-2，4-二-氧-乙?；?α-D-葡萄吡喃糖苷(4) 化合物3(5g)溶于少量二氯甲烷(10mL)中，加入1個當(dāng)量的三氟乙酸，室溫下反應(yīng)14小時。將化合物2(5g)和氮碘代琥珀酰亞胺(3個當(dāng)量)溶于另一反應(yīng)器的二氯甲烷(10mL)中，于零度下，將含化合物3的溶液滴加至于內(nèi)，4小時后用三乙胺中和，減壓蒸干溶劑，硅膠柱分離純化，乙酸乙酯∶石油醚(3∶2)洗脫，得到泡狀物4(63％)[α]D25+26°(c1，CHCl3)；部分核磁1H NMR(500MHz，CDCl3)1.935，1.941，1.942，1.958，1.966，1.972，1.980，1.980，1.991，1.991，2.003，2.009，2.009，2.027，2.047，2.056，2.056，2.134，2.148(19s，19x3H，19CH3CO)，3.349(s，3H，OCH3)，4.295(d，1H，J8.0Hz，H-1)，4.488(d，1H，J8.0Hz，H-1)，4.511(d，1H，J8.0Hz，H-1)，4.576(d，1H，J8.0Hz，H-1)，4.612(d，1H，J8.0Hz，H-1)，4.780(d，1H，J3.5Hz，H-1I)。
甲基β-D-葡萄吡喃糖基-(1→6)-[β-D-葡萄吡喃糖基-(13)]-β-D-葡萄吡喃糖基-β-D-葡萄吡喃糖基-(1→6)-[β-D-葡萄吡喃糖基-(1→3)]-α-D-葡萄吡喃糖苷(5) 將化合物4(3.7g)溶于甲醇中(150ml)，加入0.5N NaOMe(15mL)至pH10，繼續(xù)反應(yīng)24小時，樹脂中和，蒸干溶劑后得到泡沫狀固體物5(95％)13CNMR(CDCl3)55.05，60.46(3C)，67.57，67.70，68.37，68.61，69.18，69.33(2C)，69.38，70.20，70.47，72.56，72.85(2C)，73.22(3C)，74.39，74.63，75.30(3C)，75.41，75.67，75.73，75.7781.99，84.04，98.99，102.46，102.59(3C)，102.71。
甲基2，3，4，6-四-硫酸酯-β-D-葡萄吡喃糖基-(1→6)-[2，3，4，6-四-硫酸酯-β-D-葡萄吡喃糖基-(1→3)]-2，4-二-硫酸酯-β-D-葡萄吡喃糖基-(1→6)-2，3，4-三-硫酸酯-β-D-葡萄吡喃糖基-(1→6)-[2，3，4，6-四-硫酸酯-β-D-葡萄吡喃糖基-(1→3)]-2，4-二-硫酸酯-α-D-葡萄吡喃糖苷(1) 將化合物5溶于吡啶中，加入三氧化硫-吡啶復(fù)合物(六糖的10個當(dāng)量)，55℃下攪拌2天，蒸干溶劑，加入3N NaOH溶液攪拌20分鐘，用二氯甲烷洗去吡啶，水相用LH20過柱分離，冷凍干燥得到目標(biāo)化合物1。13C NMR(CDCl3)14.17，22.76，25.74，29.10，29.16，29.41，31.83，59.53，60.07(3C)，60.18(2C)，60.85(2C)，62.31，62.67(2C)，62.70，69.41，71.18，73.40，74.97，75.57，75.80，75.86，76.03，78.36，78.45，78.52，78.70，78.81，78.90，81.30，81.45，81.54，81.61，81.86，99.08，100.77，100.85，100.89，100.96，101.47。
權(quán)利要求
1.一種如圖所示的具有潛在藥用價值的化合物。
2.一種制備上述化合物的方法。其特征在于三糖供體制成1位硫苷的衍生物2，三糖受體制成1位甲基苷，6’位硅烷化的衍生物3。
3.一種制備上述化合物的方法。其特征在于由2和3在催化劑存在下，制成六糖甲基苷4，4用堿處理得游離寡糖5，5與三氧化硫-吡啶反應(yīng)得硫酸化的目標(biāo)六糖苷1。
4.權(quán)力要求3中的催化劑為氮碘代琥珀酰亞胺、氮溴代琥珀酰亞胺與三甲基硅基三氟甲磺酸酯或三氟化硼乙醚混合物。溶劑為無水二氯甲烷、乙腈等。反應(yīng)溫度為-42到零度。
5.權(quán)力要求1的化合物在醫(yī)藥中的應(yīng)用。如作為抗艾滋病病毒的藥物組分或藥物組合物。
6.權(quán)力要求1的化合物在醫(yī)藥中的應(yīng)用。如作為抗凝血的藥物組分或藥物組合物。
7.權(quán)力要求1的化合物在醫(yī)藥中的應(yīng)用。如作為抗腫瘤的藥物組分或藥物組合物。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種具有潛在藥用價值的活性寡糖衍生物及其制備方法。已顯示出的活性包括抗艾滋病病毒、抗凝血、抗腫瘤等活性。本發(fā)明公開該化合物的結(jié)構(gòu)及其制備方法。該化合物是一種硫酸化寡糖類化合物，具有上圖所示的結(jié)構(gòu)。
文檔編號A61K31/715GK1569902SQ0315025
公開日2005年1月26日 申請日期2003年7月23日 優(yōu)先權(quán)日2003年7月23日
發(fā)明者杜宇國, 華玉夏, 魏國華, 顧國鋒 申請人:中國科學(xué)院生態(tài)環(huán)境研究中心