專利名稱：門冬氨酸洛美沙星粉劑及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種西藥抗生素，具體地說，本發(fā)明涉及一種吡酮酸類抗菌藥的劑型以及制備方法。
背景技術(shù)：
洛美沙星是近年來上市的第三代吡酮酸類抗菌藥，它除了具有吡酮酸類品種所共有的抗菌譜廣、抗菌作用強(qiáng)、毒副作用小等特點(diǎn)外，還具有半衰期長、與茶堿無相互作用等優(yōu)點(diǎn)。門冬氨酸洛美沙星是門冬氨酸與洛美沙星形成的水溶性鹽，具有機(jī)體適應(yīng)性好、水溶性好、毒副作用小、抗菌作用強(qiáng)而廣等特點(diǎn)，1998年6月18日經(jīng)衛(wèi)生部批準(zhǔn)為國家四類新藥，根據(jù)中國藥典2000版門冬氨酸的通用名，將天門冬氨酸洛美沙星修訂為門冬氨酸洛沙星。其化學(xué)名為1-乙基-6，8-二氟-1，4-二氫-7-(3-甲基-1-哌嗪基)-4-氧代-3-喹啉羧酸門冬氨酸鹽；分子式(C17H19F2N3O3)(C4H7NO4)；英文名Lomefloxacin Aspartate。該藥于1998年6月獲準(zhǔn)上市后，其制劑包括注射液及氯化鈉輸液。
據(jù)報(bào)道鹽酸洛美沙星對(duì)小鼠感染肺炎桿菌的沙雷氏菌的治療效果，比氧氟沙星、諾氟沙星強(qiáng)2～3倍，比依諾沙星強(qiáng)14倍；對(duì)小鼠或大鼠的尿路感染變形桿菌和綠濃桿菌以及呼吸道感染肺炎桿菌，療效比諾氟沙星強(qiáng)2～8倍。門冬氨酸洛美沙星對(duì)臨床分離的菌株與標(biāo)準(zhǔn)菌株一樣具有廣譜活性。門冬氨酸洛美沙星MIC實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明門冬氨酸洛美沙星對(duì)格蘭氏陽性菌的MIC為0.5～16ug/ml；對(duì)格蘭氏陰性菌的MIC為0.063～8.0ug/ml，與鹽酸洛美沙星相近。門冬氨酸洛美沙星體內(nèi)有優(yōu)異的保護(hù)效果，對(duì)小鼠感染金葡菌的保護(hù)療效，本發(fā)明藥物粉劑成品與氧氟沙星相似；對(duì)小鼠感染大腸桿菌，本發(fā)明藥物粉劑成品療效稍強(qiáng)于氧氟沙星；門冬氨酸洛美沙星雖然體外抗菌活性與諾氟沙星等相當(dāng)，但由于藥物動(dòng)力學(xué)性質(zhì)優(yōu)越，半衰期長，所以在體內(nèi)的療效與氧氟沙星、環(huán)丙沙星相當(dāng)或更優(yōu)，而遠(yuǎn)優(yōu)于諾氟沙星。
國內(nèi)有醫(yī)院采用門冬氨酸洛美沙星用于臨床治療105例細(xì)菌性感染患者，其中呼吸系統(tǒng)疾病51例，病種15種，泌尿系統(tǒng)疾病35例，病種10種，消化系統(tǒng)疾病9例，病種8種，淋病5例，其它感染5例，均取得滿意臨床效果，總有效率達(dá)90.5％，細(xì)菌轉(zhuǎn)陰率92.3％，細(xì)菌消除率95.6％，不良反應(yīng)輕微，發(fā)生率為6.7％。該藥對(duì)心、肝、腎及造成血系統(tǒng)無影響，與諾氟沙星葡萄糖注射液的對(duì)照組50例總有效率76％、細(xì)菌轉(zhuǎn)陰率65.1％、細(xì)菌消除率65.1％相比明顯優(yōu)于對(duì)照組藥品，其不良反應(yīng)發(fā)生率10％，二者相比無顯著性差異，門冬氨酸洛美沙星對(duì)重度感染、敗血癥、肝硬化腹水感染、綠膿桿菌感染，治療效果較好，臨床上值得推廣應(yīng)用。此外，洛美沙星和氧氟沙星治療細(xì)菌感染性疾病各100例，洛美沙星治療組有效率為92％，清除率為93.3％，其細(xì)菌清除率與對(duì)照藥氧氟沙星無顯著性差別，洛美沙星開放組治療細(xì)菌性疾病20例，有效率為93.5％，細(xì)菌清除率為90.1％。體外藥敏試驗(yàn)結(jié)果顯示洛美沙星對(duì)G-菌有較強(qiáng)的體外抗菌活性。而門冬氨酸洛美沙星與鹽酸洛美沙星相比，由于是氨基酸鹽，氨基酸酸性較弱，刺激性小，所以具有毒副作用小，機(jī)體適應(yīng)性好等特點(diǎn)，因此臨床應(yīng)用更安全，療效更可靠。一日一～二次給藥，即達(dá)滿意療效，尤其是對(duì)治療呼吸道感染，門冬氨酸洛美沙星是一個(gè)十分有價(jià)值的品種。
門冬氨酸洛美沙星注射液上市后，較好地滿足了急、危重病人、不宜口服病人的需求，然而在原有注射液制備過程中，需要采用流通蒸汽滅菌，結(jié)果滅菌用高溫對(duì)產(chǎn)品質(zhì)量產(chǎn)生了副作用注射液成品澄明度超標(biāo)、貯藏中注射液易析晶等質(zhì)量問題；冬季貯藏時(shí)，注射液顏色超標(biāo)、析晶等現(xiàn)象更為嚴(yán)重。而且在門冬氨酸洛美沙星注射液銷售、使用中，由于液體制劑本身的缺陷，不便運(yùn)輸，小針在工業(yè)化生產(chǎn)中，由于安瓿易破損、拉絲封口不嚴(yán)，成品收得率平均只有80～90％。

發(fā)明內(nèi)容針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的上述缺點(diǎn)，本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是要提供一種劑型理化性質(zhì)穩(wěn)定、便于儲(chǔ)存/運(yùn)輸?shù)拈T冬氨酸洛美沙星粉劑，本發(fā)明所要解決的另一技術(shù)問題是要提供一種更高效率地制備所述的門冬氨酸洛美沙星粉劑的工藝方法。
為此，本發(fā)明的技術(shù)解決方案是一種門冬氨酸洛美沙星粉劑，其特征在于所述的粉劑包括門冬氨酸洛美沙星與賦形劑，所述的賦形劑是選自于具有n個(gè)羥基的醛、酮、醇中的一種或多種，其中所述的醛、酮、醇的碳原子數(shù)為m，m＝3～8，羥基數(shù)目n為(m-2)、(m-1)或m。本發(fā)明的賦形劑單體狀態(tài)下多為一種水溶性的碳水化合物結(jié)晶，這種賦形劑一般對(duì)人體有益無害、不會(huì)與門冬氨酸洛美沙星藥物本身及其活性成分發(fā)生有害的化學(xué)副反應(yīng)、但能與門冬氨酸洛美沙星之間發(fā)生某種表面化學(xué)作用，和/或形成溶劑化物，利用這些水溶性的碳水化合物的相變、結(jié)晶和表面能等特點(diǎn)，通過適當(dāng)工藝處理后，可以提高原藥成品收得率、并與原藥共同形成固體粉劑。由于固體粉劑便于嚴(yán)密包裝，在貯藏過程中，相對(duì)液體制劑不宜受到環(huán)境的溫度、濕度等外界因子的干擾，從而提高了原料藥活性成分的理化穩(wěn)定性，也方便商業(yè)應(yīng)用中的儲(chǔ)藏、運(yùn)輸。
本發(fā)明的藥物粉劑中，所述的醛、酮、醇的碳原子數(shù)為m優(yōu)選為5或6。一般人們已比較熟悉、可作藥用的多元羥基的醛、酮、醇，多為單糖類或單糖的某些衍生物如多元醇、糖苷等，這些單糖類或單糖衍生物的碳數(shù)m在5～6之間，具有優(yōu)良的醫(yī)用價(jià)值和低廉的成本，因而是本發(fā)明的賦形劑的優(yōu)選品種。其中最為優(yōu)選的賦形劑是葡萄糖、甘露醇、右旋糖苷中的一種或幾種的組合物，而根據(jù)目前實(shí)驗(yàn)證實(shí)，葡萄糖在技術(shù)、經(jīng)濟(jì)指標(biāo)上更優(yōu)于甘露醇、右旋糖苷，因而成為首選賦形劑；當(dāng)然上述的粉劑中，還可以包括其它的可與門冬氨酸洛美沙星一起使用的藥劑或輔料。
根據(jù)人類的生理特征以及長期的醫(yī)療臨床實(shí)踐，所述的門冬氨酸洛美沙星與葡萄糖類賦形劑的重量配比為0.5∶1～7.2∶1，重量配比優(yōu)選為1.0∶1～5.4∶1。
本發(fā)明的技術(shù)解決方案包括所述的門冬氨酸洛美沙星粉劑的制備方法，該制備方法是采用門冬氨酸洛美沙星與所述的水溶性碳水化合物結(jié)晶作為原料，經(jīng)過溶解、除菌過濾、真空冷凍干燥諸基本工序而制得；而原料中，門冬氨酸洛美沙星的重量是水溶性碳水化合物結(jié)晶的0.5～7.2倍，根據(jù)實(shí)驗(yàn)篩選，組成配比(W/W)優(yōu)選為1.0∶1～5.4∶1。
為了使藥用活性成份與賦形劑充分混勻，所述的溶解工序是在純凈可醫(yī)用的極性溶劑中進(jìn)行，所述的極性溶劑重量為所述門冬氨酸洛美沙星的0.5～6.0倍。極性溶劑可采用低級(jí)直鏈醇或醫(yī)用純凈水如注射用水等，而醫(yī)用純凈水如注射用水當(dāng)然是為首選的極性溶劑，其中，最優(yōu)配比也可參照輸液規(guī)范。
根據(jù)實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)，所述的除菌過濾工序包括吸附步驟，該吸附步驟包括采用注射用活性炭加入溶解工序所得的溶液中進(jìn)行攪拌吸附，從而將一些有機(jī)或無機(jī)的熱源體從溶液中去除，然后再將溶液經(jīng)過除菌過濾工序處理所述的除菌過濾工序包括一或多次的過濾步驟，該過濾步驟是采用相同或不同直徑的微孔濾膜過濾前述吸附步驟所得的溶液以濾除自由的或被吸附在注射用活性炭上的有機(jī)或無機(jī)的熱源體。實(shí)際中采用滅菌濾器粗濾脫炭，先用0.45μm微孔濾膜過濾，最后用0.22μm微孔濾膜過濾。
所述的真空冷凍干燥工序依序包括常壓深冷、低溫抽真空、加溫升華脫水諸步驟，制得所述的門冬氨酸洛美沙星粉劑。由于前述工序所得的藥液的共晶點(diǎn)約為-18℃，故將常壓深冷溫度降至藥液共晶點(diǎn)以下，直至-35℃左右才開始抽真空，預(yù)凍溫度低于共晶點(diǎn)可防止藥品在升華過程中飛濺，利于得到外觀較好、溶解速度較快的產(chǎn)品；達(dá)到預(yù)期低溫后，干燥箱內(nèi)的真空度又成為保證升華效果的關(guān)鍵，應(yīng)在干燥箱內(nèi)的真空度達(dá)到約13.33Pa以下時(shí)才開始升溫升華。升溫、再干燥過程應(yīng)能確保有較好的升華效果和較低的凍干品含水量，故升溫、保溫過程應(yīng)有足夠長的時(shí)間?；谝陨峡紤]，還需專門設(shè)計(jì)本發(fā)明藥品的真空冷凍干燥工序的凍干曲線。
本發(fā)明的制備方法是在無菌的條件下，采用上述微孔濾膜二次過濾除去溶液中細(xì)菌，在13.33Pa真空度下，經(jīng)冷凍干燥而制成本發(fā)明藥品的無菌粉體制劑，從而避免了原有注射液制備技術(shù)中采用流通蒸汽滅菌，以致高溫對(duì)產(chǎn)品質(zhì)量造成的影響如注射液澄明度超標(biāo)、貯藏中注射液易析晶等質(zhì)量問題；同時(shí)解決了安瓿易破損、拉絲封口不嚴(yán)導(dǎo)致的平均收得率徘徊在80～90％的現(xiàn)象，成品收得率提高并穩(wěn)定在95％以上；而且，本發(fā)明的門冬氨酸洛美沙星粉劑為小水針劑與粉針劑之間相互改變劑型的四類新藥，給藥方法、劑量均一致，按新藥審批辦法的規(guī)定，可免臨床研究，故可直接報(bào)生產(chǎn)，減少了新藥投產(chǎn)的周折；當(dāng)然，本發(fā)明的藥物粉劑也可配伍其它輔料制成其它劑型如葡萄糖片劑、甘露醇水劑等。
以下結(jié)合具體實(shí)施例和附圖
對(duì)本發(fā)明的技術(shù)方案作進(jìn)一步說明。
具體實(shí)施方式實(shí)施例1，按照0.1g/支產(chǎn)品規(guī)格1000支用量，以洛美沙星計(jì)為50mg/ml設(shè)定表1處方?，F(xiàn)選取葡萄糖作賦形劑，制備門冬氨酸洛美沙星粉劑即在無菌條件下，稱取表1處方量的門冬氨酸洛美沙星以及葡萄糖，置于滅菌容器中，加注射用水適量，攪拌使溶解，加注射用水至全量，攪勻；加0.02％注射用活性炭攪拌5～10分鐘，滅菌濾器粗濾脫炭，用0.45μm微孔濾膜過濾，最后0.22μm微孔濾膜過濾，濾液檢測合格后，分裝于模制瓶中，規(guī)格為0.1g的每瓶灌裝2ml，真空冷凍干燥-30℃條件以下預(yù)凍，約經(jīng)2～3hr，冷凝器溫度下降-45℃以下→啟動(dòng)真空泵，待真空度達(dá)到13.33Pa以下后，緩緩打開蝶閥，當(dāng)干燥箱內(nèi)真空度達(dá)到0.1mmHg以下關(guān)閉冷凍機(jī)；緩慢加溫使凍結(jié)產(chǎn)品的溫度逐漸升高至約-20℃(比最低共熔點(diǎn)低幾度)，藥液中的水分便可升華除去→品溫達(dá)35℃～40℃后保溫再干燥3～4hr，然后出箱、加塞、軋蓋，成品檢驗(yàn)合格后包裝即得。0.1g規(guī)格產(chǎn)品整個(gè)凍干過程約耗時(shí)26小時(shí)左右。
參照中華人民共和國衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)(試行)[WS-046(X-042)-98]天門冬氨酸洛美沙星注射液質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)和中國藥典2000版的有關(guān)規(guī)定，以凍干制品的外觀性狀、酸度值、澄清度與顏色、制品溶解速度為指標(biāo)考察本發(fā)明藥物粉劑成品處方的可行性。
表1門冬氨酸洛美沙星與葡萄糖賦形劑制得粉劑的性狀實(shí)驗(yàn)。
結(jié)果顯示處方A不加葡萄糖，凍干制品萎縮，溶解速度較慢；處方B、C、D加入賦形劑葡萄糖后，性狀有所改善；而且葡萄糖用量增加，樣品越飽滿，外觀越理想，且溶解速度加快。
實(shí)驗(yàn)證明葡萄糖作為賦形劑，可保證凍干制品疏松，加速制品的溶解。
實(shí)施例2，按照0.1g/支產(chǎn)品規(guī)格1000支用量，以洛美沙星計(jì)為50mg/ml設(shè)定表2處方?，F(xiàn)選取甘露醇作賦形劑，制備門冬氨酸洛美沙星粉劑即在無菌條件下，稱取表2處方量的門冬氨酸洛美沙星以及甘露醇，置于滅菌容器中，加注射用水適量，攪拌使溶解，加注射用水至全量，攪勻；加0.02％注射用活性炭攪拌5～10分鐘，滅菌濾器粗濾脫炭，用0.45μm微孔濾膜過濾，最后0.22μm微孔濾膜過濾，濾液檢測合格后，分裝于模制瓶中，規(guī)格為0.1g的每瓶灌裝2ml，真空冷凍干燥-30℃條件以下預(yù)凍，約經(jīng)2～3hr，冷凝器溫度下降-45℃以下→啟動(dòng)真空泵，待真空度達(dá)到13.33Pa以下后，緩緩打開蝶閥，當(dāng)干燥箱內(nèi)真空度達(dá)到0.1mmHg以下關(guān)閉冷凍機(jī)；緩慢加溫使凍結(jié)產(chǎn)品的溫度逐漸升高至約-20℃(比最低共熔點(diǎn)低幾度)，藥液中的水分便可升華除去→品溫達(dá)35℃～40℃后保溫再干燥3～4hr，然后出箱、加塞、軋蓋，成品檢驗(yàn)合格后包裝即得。0.1g規(guī)格產(chǎn)品整個(gè)凍干過程約耗時(shí)26小時(shí)左右。
參照中華人民共和國衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)(試行)[WS-046(X-042)-98]天門冬氨酸洛美沙星注射液質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)和中國藥典2000版的有關(guān)規(guī)定，以凍干制品的外觀性狀、酸度值、澄清度與顏色、制品溶解速度為指標(biāo)考察本發(fā)明藥物粉劑成品處方的可行性。
表2門冬氨酸洛美沙星與甘露醇賦形劑制得粉劑的性狀實(shí)驗(yàn)。
結(jié)果顯示加入甘露醇的處方E、F、G溶解速度較加入葡萄糖的處方C、D溶解速度要慢。
實(shí)驗(yàn)證明由于加入葡萄糖的處方C、D的凍干品的疏松性明顯增加，且溶解速度快，已符合設(shè)計(jì)要求。考慮到生產(chǎn)成本的問題，故生產(chǎn)實(shí)際中選擇處方C為0.1g及0.2g產(chǎn)品的最終處方。
實(shí)施例3，一、細(xì)菌內(nèi)毒素檢查1)供試品本發(fā)明藥物粉劑，樣號(hào)20000401，20000402，20000403，規(guī)格0.2g/瓶。
2)試劑鱟試劑0.1ml/支，樣號(hào)0012132，靈敏度0.125EU/ml，湛江安度斯生物有限公司生產(chǎn)；0.1ml/支，樣號(hào)010701，靈敏度0.125EU/ml，福州新北生化工業(yè)有限公司生產(chǎn)，靈敏度復(fù)核均符合規(guī)定。細(xì)菌內(nèi)毒素檢查用水2ml/支，樣號(hào)0103060，湛江安度斯生物有限公司生產(chǎn)。
3)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)細(xì)菌內(nèi)毒素工作標(biāo)準(zhǔn)品，每支含70單位，樣號(hào)2001-3，中國藥品生物制品檢定所。
4)漩渦混合器XW-80A，上海醫(yī)科大學(xué)儀器廠；細(xì)菌內(nèi)毒素檢查儀，天津藥典標(biāo)準(zhǔn)儀器廠。
5)測試經(jīng)過鱟試劑靈敏度復(fù)核試驗(yàn)、確定本發(fā)明藥物粉劑細(xì)菌內(nèi)毒素限值(L)及最大有效稀釋倍數(shù)(MVD)根據(jù)公式L＝K/M計(jì)算，其中注射劑K＝5.0EU/(kg·h)，M為人用每公斤體重每小時(shí)最大劑量，本品M＝200mg/(60kg.h)＝3.33mg/(kg.h)，計(jì)算得L＝1.5gU/mg；最大有效稀釋倍數(shù)(MVD＝CL/λ)，當(dāng)λ＝0.125EU/ml，C＝50mg/ml時(shí)，則MVD＝50mg/ml*1.5EU/mg/0.125EU/ml＝600倍。按最大有效稀釋倍數(shù)稀釋的供試品溶液濃度為C有效＝λ/L＝0.125EU/ml/1.5EU/mg＝0.083mg/ml。
隨后測定干擾試驗(yàn)ES、Et值、進(jìn)行干擾試驗(yàn)，最后確認(rèn)可采用細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法測定本發(fā)明藥物粉劑，然后進(jìn)行測試取0.1ml/支規(guī)格的鱟試劑安瓿5支(靈敏度為0.125EU/ml)復(fù)溶后，其中2支加入0.1ml按最大有效稀釋倍數(shù)稀釋的供試品溶液作為供試品管，1支加入0.1ml細(xì)菌內(nèi)毒素檢查用水將細(xì)菌內(nèi)毒素工作標(biāo)準(zhǔn)品制成的0.25EU/ml內(nèi)毒素溶液作為陽性對(duì)照管，1支加入0.1ml細(xì)菌內(nèi)毒素檢查用水作為陰性對(duì)照管，1支加入0.1ml用供試品溶液將同一支細(xì)菌內(nèi)毒素工作標(biāo)準(zhǔn)品制成0.25EU/ml的內(nèi)毒素溶液作為供試品陽性對(duì)照管。將各安瓿中溶液輕輕混勻后，封閉瓶口，垂直放入細(xì)菌內(nèi)毒素檢查儀中，37℃±1℃恒溫保溫60分鐘±2分鐘，結(jié)果見表3。
表3供試品細(xì)菌內(nèi)毒素檢查結(jié)果
三批樣品含內(nèi)毒素的量均符合限度值(L＝1.5EU/mg)。
二、無菌檢查依據(jù)中國藥典2000年版二部附錄XIH規(guī)定方法檢查，取本發(fā)明藥物粉劑，分別加入100ml 0.9％無菌氧化鈉溶液中使溶液，用薄膜過濾法處理后，結(jié)果見表4。
表4無菌檢查結(jié)果
注“-”表示無菌生長，“+”表示有菌生長，以金黃色葡萄球菌CMCC(B)26003為陽性菌對(duì)照。
結(jié)果三批樣品均無菌，符合規(guī)定。
上述實(shí)驗(yàn)表明本發(fā)明的制備方法合乎要求。
實(shí)施例4，參照中華人民共和國衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)(試行)[WS-046(X-042)-98]天門冬氨酸洛美沙星注射液質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)和中國藥典2000版以及《新藥審批為法》的有關(guān)規(guī)定，以實(shí)施例1的處方C為樣品，對(duì)本發(fā)明藥物粉劑產(chǎn)品有關(guān)物質(zhì)、穩(wěn)定性、異常毒性、等作如下系列檢驗(yàn)如下。
一、物質(zhì)鑒別根據(jù)《新藥審批辦法》及有關(guān)附件要求，對(duì)本發(fā)明藥物粉劑的性狀、鑒別、檢查和含量等指標(biāo)進(jìn)行了如下測定1)取本發(fā)明藥物粉劑樣品三批適量(樣號(hào)20000401，20000402，20000403)，三批樣品性狀均為微黃色的疏松塊狀物，加入0.4％氫氧化鈉溶液制成每1ml中含洛美沙星6ug的溶液，照分光光度法(中國藥典2000年版二部附錄IVA)測定，在282nm的波長處有最大吸收，而不含主藥的空白輔料溶液無吸收。
2)取含量測定項(xiàng)下的溶液，按照高效液相色譜法(中國藥典2000版二部附錄VD)進(jìn)行鑒別測定，供試品峰的保留時(shí)間與對(duì)照品峰的保留時(shí)間一致，本發(fā)明藥物粉劑含量測定項(xiàng)下記錄的色譜圖中，供試品溶液主峰保留時(shí)間與對(duì)照品一致。
上述測試表明本發(fā)明藥物粉劑符合天門冬氨酸洛美沙星注射液質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。
二、配伍穩(wěn)定性試驗(yàn)性狀肉眼觀察溶液的外觀。
pH值取本發(fā)明藥物粉劑溶液依法檢查(中國藥典2000年版二部附錄)。
吸收度值測定精密量取混合溶液1ml，置100ml量瓶中，用0.4％氫氧化鈉溶液稀釋至刻度，搖勻，照分光光度法(中國藥典2000年版二部附錄)測定混合溶液的吸收度。
試液的配制取本發(fā)明藥物粉劑3瓶(樣號(hào)20000401，規(guī)格0.2g)，將內(nèi)容物分別置三個(gè)250ml量瓶中，各用5％葡萄糖注射液、0.9％氯化鈉注射液、碳酸氫鈉注射液添加至刻度。分別考察混合前輸液的性狀、pH值，以及混合后0小時(shí)、2小時(shí)、4小時(shí)各混合液的性狀、pH值及吸收度值的變化，結(jié)果見表5。
表5本發(fā)明藥物粉劑與常用大輸液配伍穩(wěn)定性考察結(jié)果
結(jié)論通過上述配伍穩(wěn)定性試驗(yàn)，表明本發(fā)明藥物粉劑與常用葡萄糖注射液及氯化鈉注射液無配伍禁忌，而與堿性輸液有配伍禁忌。通過以上研究表明，本發(fā)明藥物粉劑處方設(shè)計(jì)基本可行。
三、有關(guān)物質(zhì)與分解產(chǎn)物1)光分解實(shí)驗(yàn)取本發(fā)明藥物粉劑(樣號(hào)20000401，規(guī)格0.2g)，除去外包裝和標(biāo)簽，置太陽光下強(qiáng)光照射2天后，用水溶解稀釋制成2.0mg/ml溶液，作為含光分解物溶液(溶液為黃色)。精密量取2ml置10ml量瓶中，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，取20ul注入液相色譜儀，記錄色譜圖。樣品經(jīng)光照射后，有關(guān)物質(zhì)明顯增加，試驗(yàn)結(jié)果見表6。
2)酸破壞試驗(yàn)取本發(fā)明藥物粉劑1瓶，置50ml比色管中，加水適量使溶解，滴加2ml1mol/L硫酸溶液，產(chǎn)生白色絮狀物，置水浴中加熱10分鐘，產(chǎn)生的白色絮狀物逐步溶解，加4ml.1mol/L氫氧化鈉溶液中和，放冷，用水稀釋至50ml，量取2ml置10ml量瓶中，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，取20ul注入液相色譜儀，記錄色譜圖。試驗(yàn)結(jié)果見表6。
3)堿破壞試驗(yàn)取本發(fā)明藥物粉劑1瓶，置50ml比色管中，加水適量使溶解，滴加2ml1mol/L氫氧化鈉溶液，置水浴中加熱10分鐘，加1ml.1mol/L硫酸溶液中和，放冷，用水稀釋至50ml，量取2ml置10ml量瓶中，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，取20ul注入液相色譜儀，記錄色譜圖。試驗(yàn)結(jié)果見表6。
表6樣品分別經(jīng)強(qiáng)光、酸、堿破壞試驗(yàn)及三批樣品測定結(jié)果 結(jié)果顯示樣品經(jīng)光照射后，有關(guān)物質(zhì)均值相對(duì)試驗(yàn)前明顯增加，而經(jīng)酸、堿處理后，有關(guān)物質(zhì)均值相對(duì)試驗(yàn)前增加很少，表明本發(fā)明藥物粉劑對(duì)光不穩(wěn)定，對(duì)酸、堿穩(wěn)定。
四、影響因素試驗(yàn)1)高溫試驗(yàn)將本發(fā)明藥物粉劑(樣號(hào)20000401、規(guī)格0.2g、模擬上市包裝)置于60℃恒溫箱中，分別于5天、10天取樣分析，結(jié)果見表7。
表7本發(fā)明藥物粉劑60℃高溫試驗(yàn)結(jié)果
各項(xiàng)指標(biāo)與0天數(shù)據(jù)比較，結(jié)果表明本發(fā)明藥物粉劑在60℃高溫下穩(wěn)定。
2)高濕度試驗(yàn)取本發(fā)明藥物粉劑(樣號(hào)20000401、規(guī)格0.2g)，開啟瓶蓋，露置于25℃、RH92.5％(干燥器底部放置飽和硝酸鉀溶液)和25℃、RH75％(干燥器底部放置飽和氯化鈉溶液)的恒溫箱中，并于5、10天取樣，與0天數(shù)據(jù)比較，結(jié)果見表8及表9。
表8本發(fā)明藥物粉劑于25℃、RH92.5％條件下試驗(yàn)結(jié)果
表9本發(fā)明藥物粉劑于25℃、RH75％條件下試驗(yàn)結(jié)果
試驗(yàn)結(jié)果表明本發(fā)明藥物粉劑敞口高濕度試驗(yàn)中，除吸濕率增加外，其他各項(xiàng)檢測指標(biāo)均無明顯變化，提示本應(yīng)密封保存。
3)光照試驗(yàn)取本發(fā)明藥物粉劑(樣號(hào)20000401、規(guī)格0.2g)，脫去外包裝，開啟瓶蓋，置澄明度測定儀下，調(diào)節(jié)與燈管距離使光強(qiáng)達(dá)額定值(4500Lx)，連續(xù)光照十天，分別于5、10天取樣測定，結(jié)果如表10所示。
表10本發(fā)明藥物粉劑光照試驗(yàn)結(jié)果
試驗(yàn)結(jié)果表明本發(fā)明藥物粉劑經(jīng)光照射后，外觀色澤變黃，有關(guān)物質(zhì)略有增加，其他各項(xiàng)指標(biāo)無明顯變化，表明本發(fā)明藥物粉劑對(duì)光不穩(wěn)定，提示本發(fā)明藥物粉劑應(yīng)避光貯藏。
4)加速試驗(yàn)取本發(fā)明藥物粉劑規(guī)格為0.2g樣品三批(樣號(hào)20000401、20000402、20000403，模擬上市包裝)和規(guī)格為0.1g的樣品三批(樣號(hào)20000501、20000502、20000503，模擬上市包裝)置于相對(duì)濕度為75％(干燥器下部放置飽和氯化鈉溶液)，溫度為40℃的恒溫恒濕條件下六個(gè)月，分別在第1、2、3、6個(gè)月時(shí)取樣分析，試驗(yàn)結(jié)果表明本發(fā)明藥物粉劑在加速試驗(yàn)中穩(wěn)定性良好，各項(xiàng)指標(biāo)無明顯變化，有效期可暫定為二年。
5)長期試驗(yàn)將本發(fā)明藥物粉劑規(guī)格為0.2g樣品三批(樣號(hào)20000401、20000402、20000403，模擬上市包裝)和規(guī)格為0.1g樣品三批(樣號(hào)20000501、20000502、20000503，模擬上市包裝)，置于相對(duì)濕度為60％(干燥器下部放置飽和亞硝酸鈉溶液)，溫度為25℃的生化培養(yǎng)箱中，分別于0、3、6、9、12個(gè)月取樣分析，試驗(yàn)結(jié)果表明本發(fā)明藥物粉劑在長期試驗(yàn)中穩(wěn)定性良好。
五、異常毒性試驗(yàn)依據(jù)中國藥典2000年版二部附錄XIC規(guī)定方法檢查，取本發(fā)明藥物粉劑適量，加5％葡萄糖注射液制成每1ml中含洛美沙星1mg的溶液，按靜脈注射法給藥，結(jié)果三批樣品(樣號(hào)20000401，20000402，20000403)試驗(yàn)共15只小鼠分為5批，在給藥后48小時(shí)內(nèi)均未死亡。結(jié)果見表11。
表11樣品異常毒性試驗(yàn)結(jié)果
結(jié)果表明本發(fā)明藥物粉劑異常毒性符合規(guī)定。
六、全身用藥的過敏性、溶血性、 血管刺激性等試驗(yàn)按照《新藥審批為法》的要求，進(jìn)行了本發(fā)明藥物粉劑豚鼠全身過敏性試驗(yàn)、溶血性試驗(yàn)、血管刺激性等試驗(yàn)研究，試驗(yàn)如下1)豚鼠全身過敏性試驗(yàn)試驗(yàn)材料1.動(dòng)物選用健康白色豚鼠30只，雌雄各半，體重250～300g，由武漢大學(xué)醫(yī)學(xué)院試驗(yàn)動(dòng)物中心提供，動(dòng)物合格證號(hào)為鄂動(dòng)字19-025號(hào)。動(dòng)物自由進(jìn)食與飲水，實(shí)驗(yàn)室溫度18～25℃，相對(duì)濕度50～65％。
2.受試物本發(fā)明藥物粉劑，樣號(hào)20000401，規(guī)格0.2g/瓶。臨用前用注射用生理鹽水配制成0.8mg/ml、2.4mg/ml、8.0mg/ml的溶液使用。
3.陽性對(duì)照物10％卵蛋清溶液∶由生理鹽水配成1∶10的濃度。
試驗(yàn)方法取上述豚鼠，依體重將動(dòng)物隨機(jī)分為5組，即門冬氨酸洛美沙星高、中、低劑量組，10％蛋清溶液陽性對(duì)照組、及生理鹽水陰性對(duì)照組共5組，每組6只豚鼠。①～③組每只豚鼠隔日ip0.8mg/ml、2.4mg/ml、8.0mg/ml門冬氨酸洛美沙星0.5ml，第④組ip10％蛋清溶液0.5ml，第⑤組ip相同體積的生理鹽水，共3次進(jìn)行腹腔致敏。在首次致敏后的第14天和21天，每組各取3只豚鼠，分別由下肢外側(cè)靜脈(表面皮膚切開)注射相應(yīng)濃度的門冬氨酸洛美沙星，10％蛋清溶液及生理鹽水2ml/只進(jìn)行靜脈攻擊。
觀察指標(biāo)及判斷標(biāo)準(zhǔn)觀察腹腔致敏給藥后1hr及靜脈攻擊給藥后0.5hr內(nèi)動(dòng)物是否有抓鼻、豎毛、呼吸困難、痙孿、休克、甚至死亡等過敏癥狀。記錄結(jié)果并按豚鼠過敏反應(yīng)級(jí)數(shù)表來判斷受試物是否合格。反應(yīng)級(jí)數(shù)達(dá)2級(jí)以上(包括2級(jí))，則認(rèn)為該受試物不合格。
表12豚鼠過敏反應(yīng)級(jí)數(shù)表
試驗(yàn)結(jié)果門冬氨酸洛美沙星高、中、低3個(gè)劑量組動(dòng)物，在腹腔致敏及靜脈攻擊后活動(dòng)自如，末見抓鼻、豎毛、呼吸困難、痙孿、休克等過敏癥狀，按豚鼠過敏反應(yīng)級(jí)數(shù)表判斷，其反應(yīng)級(jí)數(shù)均為0級(jí)。而陽性對(duì)照組的動(dòng)物，在首次致敏后第14天、21天進(jìn)行攻擊注射后，所有豚鼠均出現(xiàn)煩躁不安、抓鼻、大小便失禁、抽搐等過敏癥狀，并于3min內(nèi)死亡，反應(yīng)級(jí)數(shù)均為4級(jí)。
小結(jié)本發(fā)明藥物粉劑給藥后未見豚鼠有過敏反應(yīng)，可判斷其注射給藥無過敏性，而陽性對(duì)照物10％蛋清溶液對(duì)豚鼠有強(qiáng)過敏性。
2)溶血性試驗(yàn)試驗(yàn)材料1.動(dòng)物日本大耳白兔，體重2.6Kg，由武漢大學(xué)醫(yī)學(xué)院試驗(yàn)動(dòng)物中心提供，動(dòng)物合格證號(hào)為鄂動(dòng)字19-016號(hào)。
2.受試物本發(fā)明藥物粉劑，樣號(hào)20000401，規(guī)格0.2g/瓶。臨用前用注射用生理鹽水配制成0.8mg/ml的溶液使用。
試驗(yàn)方法1.血球浮液的制備取家兔一只，自心臟取血約10ml，置入含有玻璃珠的三角燒瓶中，用玻棒攪拌以去除纖維蛋白，然后將去纖維蛋白血移入刻度離心管內(nèi)，加入生理鹽水5～10ml，混勻后離心15min(1000r/min)，去除上清液，沉淀的紅細(xì)胞再加生理鹽水混勻離心，反復(fù)洗2～3次，至上清液不呈紅色為止。將所得紅細(xì)胞按其容積，用生理鹽水稀釋成2％的混懸液供試驗(yàn)用。
2.加樣方法取試管7支，編號(hào)排列于試管架上，按表13加入各種溶液，第6管不加供試品溶液，作為空白對(duì)照管；第7管仍不加供試品溶液，并用蒸餾水代替生理鹽水，作為溶血的陽性對(duì)照，將各管輕輕搖勻，置37℃恒溫水浴中保溫，觀察并按下述方法記錄判斷溫浴0.5、1、2、3h的結(jié)果。
表13 各試管加試液紀(jì)錄
注“-”表示不加該試液3.判斷標(biāo)準(zhǔn)
全溶血溶液澄明紅色，管底無細(xì)胞殘留。
部分溶血溶液澄明紅色或棕色，管底有少量紅細(xì)胞殘留。
無溶血紅細(xì)胞全部下沉，上層液體無色澄明。
凝集雖不溶血，但出現(xiàn)紅細(xì)胞凝集，振搖后不能分散。
實(shí)測結(jié)果在各觀察時(shí)間點(diǎn)，可見1～6號(hào)管紅細(xì)胞逐漸下沉，上層液體無色澄明。第七管于溫浴0.5h后，溶液呈澄明紅色，管底無細(xì)胞殘留。按判斷標(biāo)準(zhǔn)可知，本發(fā)明藥物粉劑對(duì)各觀察時(shí)間點(diǎn)紅細(xì)胞均無溶血反應(yīng)，而蒸餾水具有溶血性。結(jié)果如表14所示。
表14各管溶血試驗(yàn)結(jié)果
注溶血用“+”表示，不溶血用“-”表示小結(jié)各樣品管溫浴0.5、1、2、3h后，均末出現(xiàn)溶血反應(yīng)；本發(fā)明藥物粉劑可供臨床使用。
3)血管刺激性試驗(yàn)試驗(yàn)材料1.動(dòng)物日本大耳白兔，體重2.0～3.0Kg，由武漢大學(xué)醫(yī)學(xué)院試驗(yàn)動(dòng)物中心提供，動(dòng)物合格證號(hào)為鄂動(dòng)字19-016號(hào)。動(dòng)物單籠飼養(yǎng)，自由進(jìn)食與飲水，實(shí)驗(yàn)室溫度18～25℃，相對(duì)濕度50～65％。
2.受試物本發(fā)明藥物粉劑，樣號(hào)20000401，規(guī)格0.2g/瓶。臨用前用注射用生理鹽水配制成0.8mg/ml、2.4mg/ml、8.0mg/ml的溶液使用。
3.試驗(yàn)儀器LDB-M電子蠕動(dòng)泵，浙江象山定山儀器廠。
試驗(yàn)方法取上述家兔12只，依體重將動(dòng)物隨機(jī)分為3組，每組4只。各組家兔右耳靜脈緩慢滴注相應(yīng)濃度的門冬氨酸洛美沙星溶液10ml/只，滴速為2.5ml/min，左耳靜脈滴注等體積生理鹽水作為對(duì)照。每天給藥一次，連續(xù)給藥3天，肉眼觀察注射部位血管的局部反應(yīng)。放血將動(dòng)物處死，剪取注射部位近心端處血管組織，10％甲醛溶液固定，石臘包埋切片，HE染色，觀察血管壁是否有變性壞死等病理改變。
試驗(yàn)結(jié)果各組動(dòng)物在緩慢滴注過程中，均安靜少動(dòng)。肉眼觀察所有動(dòng)物注射部位末見水腫、壞死等改變。病理組織學(xué)檢查各組動(dòng)物耳靜脈內(nèi)皮完整，管壁無炎癥反應(yīng)，管腔內(nèi)無血栓。末見血管內(nèi)皮細(xì)胞變性、壞死等病理改變。
小結(jié)在上述試驗(yàn)條件下，門冬氨酸洛美沙星靜脈給藥，對(duì)家兔血管無明顯刺激性。
總結(jié)(1)本發(fā)明藥物粉劑豚鼠全身過敏性試驗(yàn)中，動(dòng)物在腹腔致敏及靜脈攻擊后活動(dòng)自如，末見抓鼻、豎毛、呼吸困難、痙孿、休克等過敏癥狀，其反應(yīng)級(jí)數(shù)均為0級(jí)；過敏試驗(yàn)結(jié)果均為陰性，表明該藥對(duì)豚鼠無致敏作用。
(2)本發(fā)明藥物粉劑溶血性試驗(yàn)中，各樣品管溫浴0.5、1、2、3h后，均末出現(xiàn)溶血反應(yīng)；未見對(duì)紅細(xì)胞有明顯溶血和凝聚作用。
(3)在血管刺激性試驗(yàn)中，所有組別的動(dòng)物在靜脈滴注過程中均安靜少動(dòng)。肉眼觀察所有動(dòng)物注射部位均末見水腫、壞死等改變。血管內(nèi)皮完整，耳緣血管不擴(kuò)張，無血栓形成，病理組織學(xué)檢查各組動(dòng)物均末見血管內(nèi)皮細(xì)胞變性、壞死等病理改變。故對(duì)靜脈血管無明顯刺激作用。
上述結(jié)果表明本發(fā)明藥物粉劑全身給藥無過敏性、無溶血反應(yīng)及無血管刺激性表現(xiàn)等。提示在本試驗(yàn)條件下，本發(fā)明藥物粉劑是安全的。
權(quán)利要求
1.一種門冬氨酸洛美沙星粉劑，其特征在于所述的粉劑包括門冬氨酸洛美沙星與賦形劑，所述的賦形劑是選自于具有n個(gè)羥基的醛、酮、醇中的一種或多種，其中所述的醛、酮、醇的碳原子數(shù)為m，m＝3～8，羥基數(shù)目n為(m-2)、(m-1)或m。
2.如權(quán)利要求1所述的門冬氨酸洛美沙星粉劑，其特征在于所述的醛、酮、醇的碳原子數(shù)為m優(yōu)選為5或6。
3.如權(quán)利要求1或2所述的門冬氨酸洛美沙星粉劑，其特征在于所述的賦形劑是葡萄糖和/或甘露醇和/或右旋糖苷。
4.如權(quán)利要求3所述的門冬氨酸洛美沙星粉劑，其特征在于所述的門冬氨酸洛美沙星與賦形劑的重量配比為0.5∶1～7.2∶1。
5.如權(quán)利要求4所述的門冬氨酸洛美沙星粉劑，其特征在于所述的門冬氨酸洛美沙星與賦形劑的重量配比優(yōu)選為1.0∶1～5.4∶1。
6.一種制備如權(quán)利要求1～5所述的門冬氨酸洛美沙星粉劑的方法，其特征在于所述的制備方法是采用門冬氨酸洛美沙星與所述的賦形劑作為原料，經(jīng)過溶解工序、除菌過濾工序、真空冷凍干燥工序而制得；所述原料中，門冬氨酸洛美沙星與所述的賦形劑的重量比是0.5～7.2倍。
7.如權(quán)利要求6所述的門冬氨酸洛美沙星粉劑的制備方法，其特征在于所述的溶解工序是在純凈可醫(yī)用的極性溶劑中進(jìn)行，所述的極性溶劑重量為所述門冬氨酸洛美沙星的0.5～6.0倍。
8.如權(quán)利要求6所述的門冬氨酸洛美沙星粉劑的制備方法，其特征在于所述的除菌過濾工序還包括吸附步驟，該吸附步驟包括采用注射用活性炭加入溶解工序所得的溶液中進(jìn)行攪拌吸附。
9.如權(quán)利要求8所述的門冬氨酸洛美沙星粉劑的制備方法，其特征在于所述的除菌過濾工序包括一或多次的過濾步驟，所述的過濾步驟是采用相同或不同直徑的微孔濾膜過濾所述吸附步驟所得的溶液。
10.如權(quán)利要求9所述的門冬氨酸洛美沙星粉劑的制備方法，其特征在于所述的真空冷凍干燥工序依次包括常壓深冷步驟、低溫抽真空步驟、加溫升華脫水步驟。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種門冬氨酸洛美沙星粉劑及其制備工藝方法，其特征在于所述的粉劑包括門冬氨酸洛美沙星與賦形劑，該賦形劑是水溶性的碳水化合物，具有n個(gè)羥基的醛、酮、醇；所述的醛、酮、醇的碳數(shù)m＝3～8，而n＝(m－2)、(m－1)或m。本發(fā)明提供一種劑型理化性質(zhì)穩(wěn)定、能減少臨床應(yīng)用中的配制環(huán)節(jié)、便于儲(chǔ)存/運(yùn)輸?shù)拈T冬氨酸洛美沙星粉劑以及一種制備所述的門冬氨酸洛美沙星粉劑的相應(yīng)的工藝方法。
文檔編號(hào)A61P31/00GK1488349SQ0314020
公開日2004年4月14日 申請(qǐng)日期2003年8月19日 優(yōu)先權(quán)日2003年8月19日
發(fā)明者郭德, 郭 德 申請(qǐng)人:洋浦華海醫(yī)藥物資有限公司