專利名稱：用于抑制細(xì)胞增殖的取代的雙吲哚基馬來酰亞胺的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明專利申請是依據(jù)1996年7月29日提交的國際申請?zhí)枮镻CT/EP97/03889、國際公開號為WO 98/04552的發(fā)明專利申請，即為于1999年1月25日在中國提交的申請?zhí)枮?7196776.8、發(fā)明名稱為“用于抑制細(xì)胞增殖的取代的雙吲哚基馬來酰亞胺”的發(fā)明專利申請的分案申請。本發(fā)明涉及取代的吡咯。更具體地說，本發(fā)明涉及下式的取代的吡咯 其中R1和R1’各自為烷基、芳基、鏈烯基或炔基；R2和R2’各自為氫或烷基；R4、R5、R6和R7每個獨(dú)立為CH2OC(O)R8、CO2R9、CH2OR10、CHO、CH2NR11R12、CON(R13)2、氫、鹵素、氰基、烷基、羥基、烷氧基、芳氧基、鹵代烷基、硝基、氨基、酰氨基、芳烷氧基、一烷基氨基、二烷基氨基、烷硫基、烷基亞磺?；蛲榛酋；?，其條件是R4、R5、R6或R7的至少一個是氰基、CH2OC(O)R8、CO2R9、CH2OR10、CH2NR11R12、CHO或CON(R13)2；R8為烷基、芳烷基或芳基；R9為烷基、芳烷基或芳基；R10為氫、烷基、芳烷基或芳基；
R11和R12各自為氫、烷基、芳基、芳烷基或酰基；R13為氫、烷基、芳基或芳烷基；以及X和Y之一表示O，另一個表示O、S、(H，OH)或(H，H)；及其藥學(xué)上可接受的前藥，或者式I的酸性化合物與堿、或式I的堿性化合物與酸所形成的藥學(xué)上可接受的鹽。
式I化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽是抗增殖劑，可用于治療或控制癌癥，特別是用于治療或控制實(shí)體瘤。本發(fā)明化合物尤其可用于治療或控制乳房腫瘤和結(jié)腸腫瘤。
這里所用的“烷基”一詞，在單獨(dú)或結(jié)合使用時(shí)均指最多含有10個碳原子、優(yōu)選最多含有5個碳原子的直鏈或支鏈飽和烴基，例如甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、仲丁基、叔丁基和戊基，該烴基是未取代的，或者被一個或多個取代基取代，取代基選自由羥基、烷氧基、氨基、鹵素、硫代烷基、氰基、羧基或羧酸衍生物、或烷基亞磺?；M成的組。術(shù)語“烷氧基”所表示的基團(tuán)中烷基部分是如上定義的，例如甲氧基、乙氧基、丙氧基、異丙氧基、丁氧基和叔丁氧基等等。鹵代烷基可以攜帶一個或多個鹵原子，這樣的基團(tuán)的實(shí)例是氯甲基和三氟甲基。單獨(dú)或結(jié)合使用時(shí)的術(shù)語“?；敝竵碜宰疃嗪?0個碳原子、優(yōu)選最多含有5個碳原子的未取代或取代的鏈烷酸的基團(tuán)，例如乙?；?、丙?；?、丁?；?、三氟乙?；?、氯乙酰基、三氯乙?；?、氨基乙?；?-氨基-丙酰基等等，或者是來自未取代或取代的芳族羧酸的基團(tuán)，例如苯甲?；?。鏈烷酸上的取代基實(shí)例包括下列之一或多個羥基、烷氧基、氨基、鹵素、硫代烷基、氰基、羧基、羧酸衍生物或烷基亞磺酰等等。芳族羧酸上的取代基實(shí)例包括下列之一或多個鹵素、烷基、羥基、苯甲氧基、烷氧基、鹵代烷基、硝基、氨基、氰基等等。單獨(dú)或結(jié)合使用時(shí)的術(shù)語“芳基”指未取代的苯基或攜帶一個或多個、優(yōu)選一至三個取代基的苯基，取代基實(shí)例為鹵素、烷基、羥基、苯甲氧基、烷氧基、鹵代烷基、硝基、氨基和氰基。術(shù)語“鹵素”指氟、氯、溴或碘。術(shù)語“羧酸衍生物”指酯、酰胺、氰基、酰氯等等。術(shù)語“鏈烯基”指具有至少一條雙鍵的2至5個碳原子(優(yōu)選3至5個碳原子)的直鏈或支鏈烴基。術(shù)語“炔基”指具有至少一條叁鍵的2至5個碳原子(優(yōu)選3至5個碳原子)的直鏈或支鏈烴基。
這里所用的“藥學(xué)上可接受的前藥”指一種在生理學(xué)條件下或通過溶劑分解作用可以轉(zhuǎn)化為式I化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽的化合物。
在上式I中，R1和R1’優(yōu)選為烷基。在一個特別優(yōu)選的實(shí)施方式中，R1和R1’優(yōu)選為甲基。
優(yōu)選地，R4、R5、R6和R7之一為氰基、 CO2R9、CH2OR10、CH2NR11R12、CHO或CON(R13)2，其他為氫。
在一個特別優(yōu)選的實(shí)施方式中，R6為氰基、 CO2R9、CH2OR10、CH2NR11R12、CHO或CON(R13)2，R4、R5和R7為氫。
特別優(yōu)選的式I化合物是，其中R1為甲基，R2為氫，R1’為甲基，R2’為氫，R4、R5、R7為氫，R6為氰基、 CO2R9、CH2OR10、CH2NR11R12、CON(R13)2或CHO。
在特別優(yōu)選的化合物中，R1為甲基，R2為氫，R1’為甲基，R2’為氫，R4、R5、R7為氫，R6為氰基、 CO2R9、CH2OR10、CH2NR11R12、CON(R13)2和CHO，其中R8和R9為烷基、優(yōu)選為甲基，R10為烷基、優(yōu)選為甲基、或氫，R11、R12和R13為氫。
其中X和Y都表示O的式I化合物是按照下列流程I進(jìn)行制備的。

其中R1、R1’、R2、R2’、R4、R5、R6和R7是如上定義的；其條件是若任一個R1、R1’、R2、R2’、R4、R5、R6或R7是與酰氯反應(yīng)的取代基，例如若任一個R1、R1’、R2、R2’、R4、R5、R6或R7是羥基、羥基烷基、氨基、一烷基氨基或氨基烷基，則這樣的取代基被一種慣用的保護(hù)基團(tuán)保護(hù)起來。
如流程I所述，式II化合物是一種已知的化合物或者是按照已知方法制備的化合物，按照常規(guī)方法，使式II化合物與草酰氯反應(yīng)，反適宜在一種惰性有機(jī)溶劑中進(jìn)行，例如鹵代脂肪烴，反應(yīng)溫度為約0℃至溶劑的回流溫度，反應(yīng)生成相應(yīng)的式III化合物。
在約0至25℃的溫度下，在二氯甲烷等一種溶劑中，使式III化合物與式IV化合物和三乙胺反應(yīng)，該式IV化合物是一種已知的化合物或者是按照已知方法制備的化合物，然后在約25℃的溫度下，在甲苯等一種溶劑中，用對甲苯磺酸處理，得到相應(yīng)的式Ia化合物。如果在式III化合物與式IV化合物的反應(yīng)過程中使用了一種保護(hù)基團(tuán)，此時(shí)用已知方法除去之。
用一種復(fù)合金屬氫化物還原其中X和Y都表示O的式I(即式Ia)化合物，藉此制備其中X和Y之一表示O、另一個表示(H，OH)的式I化合物。
該還原反應(yīng)可以用一種已知方式進(jìn)行，包括按照已知方法在還原前保護(hù)吲哚環(huán)上的取代基，還原后去保護(hù)。氫化鋰鋁等一種堿金屬鋁的氫化物優(yōu)選用作復(fù)合金屬氫化物，不過也能使用其他氫化物，例如氫化二異丁基鋁和二氫-雙(2-甲氧基-乙氧基)鋁酸鈉。適合在其中進(jìn)行該還原反應(yīng)的惰性有機(jī)溶劑包括脂肪族醚和環(huán)醚，例如二乙醚或四氫呋喃(THF)，還包括烴類，例如己烷、苯和甲苯。該還原反應(yīng)宜在室溫下進(jìn)行。
催化氫化其中X和Y之一表示O、另一個表示(H，OH)的式I化合物，藉此可制備其中X和Y之一表示O、另一個表示(H，H)的式I化合物。
在進(jìn)行催化氫化反應(yīng)時(shí)可以采用常規(guī)方法，包括按照已知方法保護(hù)和去保護(hù)吲哚環(huán)上的取代基。
因此該催化氫化反應(yīng)可以在鈀或鉑催化劑等一種貴金屬催化劑(例如鈀/碳(Pd/C)催化劑)和鏈烷醇等一種惰性有機(jī)溶劑(例如甲醇或乙醇)的存在下進(jìn)行。該催化氫化反應(yīng)適宜在約室溫下和大氣壓下進(jìn)行。
使其中X和Y都表示O的式I化合物與一種硫化劑反應(yīng)，藉此制備其中X和Y之一表示O、另一個表示S的式I化合物。
進(jìn)行硫化反應(yīng)可以采用常規(guī)方法，包括硫化反應(yīng)前取代基的保護(hù)和硫化反應(yīng)后的去保護(hù)，這對本領(lǐng)域的技術(shù)人員來說是已知的。在進(jìn)行該硫化反應(yīng)時(shí)宜使用五硫化磷、Lawesson試劑(2，4-雙(4-甲氧基苯基)-1，2-二硫代-1，3，2，4-dithiaphosphetane《比利時(shí)化學(xué)會通報(bào)》87(1978)229-238)或Davy試劑(2，4-雙(甲硫基)-1，3，2，4-dithiadiphosphetane《硫快報(bào)》1983，1，167)。該反應(yīng)宜在諸如脂肪醚或環(huán)醚(例如二甲氧基乙烷)、或芳族烴等一種惰性有機(jī)溶劑中進(jìn)行，該芳族烴可以是鹵代的(例如苯、甲苯或氯苯)，并且宜在高溫下進(jìn)行，尤其是在反應(yīng)混合物的回流溫度下。
如果需要的話，可以用一種堿將式I的酸性化合物轉(zhuǎn)化為藥學(xué)上可接受的鹽，或者可以用一種酸將式I的堿性化合物轉(zhuǎn)化為藥學(xué)上可接受的鹽。
按照已知方法，通過一種適當(dāng)?shù)膲A的處理，可以進(jìn)行式I的酸性化合物向藥學(xué)上可接受的鹽的轉(zhuǎn)化。適當(dāng)?shù)柠}不僅來源于無機(jī)堿、如鈉鹽、鉀鹽或鈣鹽，也來源于有機(jī)堿、如乙二胺、一乙醇胺或二乙醇胺。按照已知方法，通過一種適當(dāng)?shù)乃岬奶幚?，可以進(jìn)行式I的堿性化合物向藥學(xué)上可接受的鹽的轉(zhuǎn)化。適當(dāng)?shù)柠}不僅來源于無機(jī)酸、如氫氯酸鹽、氫溴酸鹽、磷酸鹽或硫酸鹽，也來源于有機(jī)酸、如乙酸鹽、檸檬酸鹽、富馬酸鹽、酒石酸鹽、馬來酸鹽、甲磺酸鹽或?qū)妆交撬猁}。
式I的吡咯及其藥學(xué)上可接受的鹽抑制細(xì)胞活動，例如細(xì)胞增殖，因此可用于治療或控制諸如關(guān)節(jié)炎等炎癥、免疫疾病以及器官移植和腫瘤。
從ATCC(美國典型培養(yǎng)物保藏中心)購得乳癌上皮細(xì)胞系MDA-MB435和結(jié)腸癌細(xì)胞系SW480，在ATCC推薦的培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)。為了分析不同化合物對這些細(xì)胞生長的作用，將細(xì)胞置于96池組織培養(yǎng)皿(“供試皿”)中，濃度為1500個細(xì)胞/池。放置細(xì)胞后的第二天，將所要分析的化合物溶于100％DMSO(二甲基亞砜)，得到10mM儲備溶液。每種化合物在H2O中稀釋至1mM，加入到96池主皿第一排含有培養(yǎng)基的三重池中，得到最終濃度為40μM。然后將化合物連續(xù)稀釋在“主皿”培養(yǎng)基中。然后將稀釋了的化合物轉(zhuǎn)移至含有細(xì)胞的供試皿中。一排作為媒介物的“對照細(xì)胞”接受DMSO。每池中DMSO的最終濃度為0.1％。在藥物加入后第5天，如下對含有MDA-MB435細(xì)胞的培養(yǎng)皿進(jìn)行分析。在藥物加入后第7天，如下對含有SW480細(xì)胞的培養(yǎng)皿進(jìn)行分析。
向每池中加入MTT([溴化3-(4，5-二甲基噻唑-2-基)-2，5-二苯基-2H-四唑鎓]；噻唑基藍(lán))，得到最終濃度為1mg/ml。然后在37℃下將培養(yǎng)皿培養(yǎng)2 1/2-3小時(shí)。然后除去含有MTT的培養(yǎng)基，向每池中加入50μl100％乙醇，以溶解甲。然后用自動培養(yǎng)皿讀數(shù)器(Bio-tek微量培養(yǎng)皿讀數(shù)器)讀取吸收率。用Reed與Munsch方程計(jì)算IC50，見《美國衛(wèi)生學(xué)雜志》27卷493-497頁，1938。
結(jié)果如下表I所述。
表I抗增殖活性細(xì)胞系
*兩次獨(dú)立實(shí)驗(yàn)的平均值式I的吡咯及其上述鹽可被用作藥物，例如以藥物制劑的形式，可以口服給藥，例如以片劑、包衣片、糖衣丸、硬膠囊或軟膠囊、溶液、乳液或混懸液的形式。它們也能通過直腸給藥，例如以栓劑的形式，或者通過胃腸外給藥，例如以注射溶液的形式。
在制備藥物制劑時(shí)，可以將這些化合物與治療學(xué)上惰性的無機(jī)或有機(jī)載體進(jìn)行配制。乳糖、玉米淀粉或其衍生物、滑石、硬脂酸或其鹽可被用作這樣的載體，用來制備片劑、包衣片、糖衣丸和硬膠囊。適用于制備軟膠囊的載體為植物油、蠟、脂、半固態(tài)或液態(tài)多元醇。不過根據(jù)活性物質(zhì)的性質(zhì)，在制備軟膠囊時(shí)一般不需要載體。適用于制備溶液和糖漿的載體為水、多元醇、蔗糖、轉(zhuǎn)化糖和葡萄糖。適用于制備注射溶液的載體為水、醇、多元醇、甘油和植物油、蠟、脂和半液態(tài)多元醇。適用于制備栓劑的載體為天然或硬化油、蠟、脂和半液態(tài)多元醇。
藥物制劑也可以含有防腐劑、增溶劑、穩(wěn)定劑、潤濕劑、乳化劑、甜味劑、著色劑、矯味劑、改變滲透壓的鹽、緩沖劑、包衣劑或抗氧化劑。它們也還可以含有其他有治療學(xué)價(jià)值的物質(zhì)。
如上所述，式I的吡咯及其上述鹽可用于治療或控制腫瘤、炎癥、免疫學(xué)疾病、支氣管肺疾病和心血管疾病。劑量可以在較寬的限度內(nèi)變化，當(dāng)然在特定情況中要根據(jù)個體需要來進(jìn)行調(diào)整。一般來說，在對成年人口服給藥的情況下，約5mg至5000mg的每日劑量應(yīng)當(dāng)是適當(dāng)?shù)?，不過在需要時(shí)可以超過該上限。每日劑量可以單劑量給藥，也可以分劑量給藥。
下列實(shí)施例舉例說明本發(fā)明。
實(shí)施例11-甲基-3-[4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)-2，5-二氧-2，5-二氫-1H-吡咯-3-基]-1H-吲哚-6-腈將已知化合物1-甲基-1H-吲哚-6-腈(1.0g，6.4mmol)溶于乙醚(Et2O，25ml)，在冰浴中冷卻，用草酰氯(0.95ml，10.9mmol，1.7當(dāng)量)處理。除去冰浴后，很快有黃色固體沉淀出來。該混合物在室溫下攪拌過夜，然后收集固體，用乙醚洗滌，并在真空下干燥30分鐘，得到1.53g(96％)的(6-氰基-1-甲基-1H-吲哚-3-基)-氧-乙酰氯。將該物質(zhì)(1.53g，6.2mmol)連同鹽酸2-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)-乙酰亞胺酸異丙酯(1.66g，6.2mmol，1當(dāng)量)混懸在CH2Cl2(100ml)中，在冰浴中冷卻?；旌衔镉肊t3N(3.5ml，24.8mmol，4當(dāng)量)處理，在0℃下攪拌30分鐘，然后另外在室溫下攪拌3小時(shí)。反應(yīng)混合物然后用CH2Cl2(150ml)稀釋，用H2O(50ml)洗滌，再用0.5N HCl(50ml)洗滌。有機(jī)部分經(jīng)MgSO4干燥，過濾并蒸發(fā)，得到一深色油狀物。將殘余物溶于甲苯(30ml)，在冰浴中冷卻，然后用pTsOH(1.3g，6.8mmol，1.1當(dāng)量)處理，然后在室溫下攪拌2小時(shí)。收集所沉淀出來的紅色固體，用少量甲苯、己烷、H2O洗滌，然后使其在500ml CH2Cl2和75ml飽和NaHCO3之間分配。有機(jī)層經(jīng)MgSO4干燥，過濾并蒸發(fā)，得到2g紅色固體。該固體用冷CH2Cl2洗滌，然后從丙酮/己烷中重結(jié)晶，得到938mg的1-甲基-3-[4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)-2，5-二氧-2，5-二氫-1H-吡咯-3-基]-1H-吲哚-6-腈。
實(shí)施例21-甲基-3-[4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)-2，5-二氧-2，5-二氫-1H-吡咯-3-基]-1H-吲哚-5-腈將已知化合物1-甲基-1H-吲哚-5-腈(0.4g，2.55mmol)溶于乙醚(25ml)，在冰浴中冷卻，用草酰氯(0.35ml，4.0mmol，1.6當(dāng)量)處理?；旌衔镌谑覝叵聰嚢柽^夜，然后蒸發(fā)除去溶劑，再次從CH2Cl2中蒸發(fā)。將該殘余物連同鹽酸2-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)-乙酰亞胺酸異丙酯(0.68g，2.55mmol，1當(dāng)量)混懸在CH2Cl2(50ml)中，在冰浴中冷卻?；旌衔镉萌野稥t3N(1.4ml，10mmol，4當(dāng)量)處理，在0℃下攪拌30分鐘，然后另外在室溫下攪拌3小時(shí)。反應(yīng)混合物然后用CH2Cl2(100ml)稀釋，用H2O(25ml)洗滌，再用0.5N HCl(25ml)洗滌。有機(jī)部分經(jīng)MgSO4干燥，過濾并蒸發(fā)，得到一深色油狀物。將殘余物溶于甲苯(50ml)，在冰浴中冷卻，然后用pTsOH(0.53g，2.8mmol，1.1當(dāng)量)處理，然后在室溫下攪拌過夜。蒸發(fā)甲苯，將殘余物溶于CH2Cl2(100ml)，然后用飽和NaHCO3(30ml)、H2O(30ml)和鹽水(30ml)洗滌。有機(jī)層經(jīng)MgSO4干燥，過濾并蒸發(fā)，然后用閃蒸柱色譜法精制(己烷中含10％乙酸乙酯(EtOAc))。產(chǎn)物進(jìn)一步用冷CH2Cl2洗滌精制，得到0.43g的1-甲基-3-[4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)-2，5-二氧-2，5-二氫-1H-吡咯-3-基]-1H-吲哚-5-腈。
實(shí)施例3乙酸1-甲基-3-[4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)-2，5-二氧-2，5-二氫-1H-吡咯-3-基]-1H-吲哚-6-基甲酯a)乙酸1-甲基-1H-吲哚-6-基甲酯將N，N-二甲基甲酰胺(DMF)(20ml)中的NaH(8.2mM)冷卻至0℃，然后用已知的1H-吲哚-6-甲醇(1g，6.8mM)的DMF(8ml)溶液處理。在0℃下攪拌1小時(shí)后，加入溶于DMF(2ml)中的甲基碘(MeI，.51ml，8.2mM)，混合物在0℃下攪拌過夜，然后傾入冰/H2O(250ml)中，用EtOAc萃取(50ml×3)。有機(jī)部分經(jīng)MgSO4干燥，過濾，蒸發(fā)，并用閃蒸柱色譜法精制，得到1-甲基-1H-吲哚-6-甲醇(.82g，75％)。將該產(chǎn)物(1-甲基-1H-吲哚-6-甲醇，1g，6.2mM)溶于吡啶(5ml)與乙酸酐(Ac2O，5ml)的混合物，在室溫下攪拌過夜。蒸發(fā)溶劑，殘余物用閃蒸柱色譜法精制，得到1.09g乙酸1-甲基-1H-吲哚-6-基甲酯。
b)將乙酸1-甲基-1H-吲哚-6-基甲酯(1.09g，5.7mM)溶于Et2O(30ml)，冷卻至0℃，用草酰氯(0.87ml，10mm)處理?；旌衔飻嚢柽^夜，同時(shí)使溫度升至室溫。收集黃色沉淀，用Et2O洗滌并干燥，得到1.5g乙醛酰氯加合物乙酸3-氯碳羰基-1-甲基-1H-吲哚-6-基甲酯。將乙醛酰氯加合物(1.5g，5mM)和鹽酸2-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)-乙酰亞胺酸異丙酯(1.3g，5mM)與CH2Cl2(30ml)混合，冷卻至0℃，用Et3N(2.84ml，20mM)處理。使溫度升至室溫過夜后，反應(yīng)混合物用CH2Cl2稀釋，用H2O(50ml)和0.5M HCl(50ml)萃取。有機(jī)層經(jīng)MgSO4干燥，過濾并蒸發(fā)，得到一紅色固體。將該物質(zhì)與甲苯(70ml)混合，用對甲苯磺酸(pTsOH，1g，5.5mM)處理，然后攪拌三小時(shí)。過濾后，不溶物用甲苯洗滌，然后溶于CH2Cl2(250ml)，用NaHCO3萃取(2×200ml)。有機(jī)層經(jīng)MgSO4干燥，過濾并蒸發(fā)，得到一紅色殘余物。該殘余物進(jìn)一步用乙酸乙酯和冷丙酮洗滌精制，得到乙酸1-甲基-3-[4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)-2，5-二氧-2，5-二氫-1H-吡咯-3-基]-1H-吲哚-6-基甲酯；熔點(diǎn)271℃。
實(shí)施例4下列化合物按照類似于例3b的方法制備。
a)從1-甲基-1H-吲哚-6-羧酸甲酯制得1-甲基-3-[4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)-2，5-二氧-2，5-二氫-1 H-吡咯-3-基]-1H-吲哚-6-羧酸甲酯，熔點(diǎn)245℃。
b)從1-甲基-1H-吲哚-6-羧醛制得1-甲基-3-[4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)-2，5-二氧-2，5-二氫-1H-吡咯-3-基]-1H-吲哚-6-羧醛，熔點(diǎn)241℃。
c)從6-甲氧基甲基-1-甲基-1H-吲哚制得3-(6-甲氧基甲基-1-甲基-1H-吲哚-3-基)-4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)-吡咯-2，5-二酮，熔點(diǎn)216-217℃。
6-甲氧基甲基-1-甲基-1H-吲哚是按照下列方法制備的在0℃下，將已知的1H-吲哚-6-甲醇(0.5g，3.4mM)的DMF(30ml)溶液用NaH(8.16mM)處理。攪拌1小時(shí)后，混合物用MeI(0.5ml，8.1mM)的DMF(2ml)溶液處理。使混合物溫度升至室溫過夜，然后傾入H2O(150ml)中，用CH2Cl2萃取(50ml×3)。有機(jī)層經(jīng)MgSO4干燥，過濾并蒸發(fā)。經(jīng)過閃蒸柱色譜法精制，得到0.28g的6-甲氧基甲基-1-甲基-1H-吲哚。
實(shí)施例53-(6-羥甲基-1-甲基-1H-吲哚-3-基)-4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)-吡咯-2，5-二酮將乙酸1-甲基-3-[4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)-2，5-二氧-2，5-二氫-1H-吡咯-3-基]-1H-吲哚-6-基甲酯(0.87g，2mM)與Et3N/H2O/甲醇(MeOH)(5∶4∶1)溶液混合，在～50℃下加熱，直至薄層色譜法顯示原料已消失。蒸發(fā)溶劑后，將殘余物溶于CH2Cl2(150ml)，用H2O(50ml)、0.05M HCl(50ml)和飽和NaHCO3溶液(50ml)萃取。有機(jī)層經(jīng)MgSO4干燥，過濾并蒸發(fā)。從EtOAc中結(jié)晶，得到0.35g的3-(6-羥甲基-1-甲基-1H-吲哚-3-基)-4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)-吡咯-2，5-二酮；熔點(diǎn)245-246℃。
實(shí)施例61-甲基-3-[4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)-2，5-二氧-2，5-二氫-1H-吡咯-3-基]-1H-吲哚-6-羧酸酰胺在氬氣下，將0.7g(1.84mmol)1-甲基-3-[4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)-2，5-二氧-2，5-二氫-1H-吡咯-3-基]-1H-吲哚-6-腈、15ml水中的2.4g(15.6mmol)過硼酸鈉四水合物和250ml甲醇的混合物在50℃下加熱2天。在真空下除去大部分溶劑后，殘余物用水稀釋，用乙酸乙酯萃取。有機(jī)相用鹽水洗滌，經(jīng)MgSO4干燥并濃縮，得到0.6g紅色固體物質(zhì)，將其在乙酸乙酯中回流。將混懸液置于冰箱中，過濾收集紅色固體，得到154.3mg(21％)純1-甲基-3-[4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)-2，5-二氧-2，5-二氫-1H-吡咯-3-基]-1H-吲哚-6-羧酸酰胺；熔點(diǎn)176-182℃(分解)。
實(shí)施例71-甲基-3-[4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)-2，5-二氧-2，5-二氫-1H-吡咯-3-基]-1H-吲哚-6-羧酸乙酯a) 將1-甲基-6-氰基吲哚(3.12g，21.9mmol)在含有15g氫氧化鉀的180ml乙醇/水(8∶1)中回流加熱，得到3.0g的1-甲基-1H-吲哚-6-羧酸，為一白色固體。
b)在室溫下，一邊攪拌一邊向1.905g(10mmol)鹽酸1-乙基-3-(3-二甲基-氨基丙基)-碳二亞胺、1.20g(10mmol)4-二甲氨基吡啶的20ml亞甲基氯溶液中加入1.05g(6.0mmol)1-甲基-1H-吲哚-6-羧酸的15ml亞甲基氯溶液。加入乙醇，反應(yīng)混合物攪拌15h。反應(yīng)混合物用乙酸乙酯萃取，有機(jī)相用鹽水洗滌，在無水硫酸鎂上干燥。色譜法精制該物質(zhì)，得到1.08g(89％)1-甲基-1H-吲哚-6-羧酸乙酯，為一淡黃色油狀物。
c)用類似于例3b所述的方法，從1-甲基-1H-吲哚-6-羧酸乙酯制得1-甲基-3-[4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)-2，5-二氧-2，5-二氫-1H-吡咯-3-基]-1H-吲哚-6-羧酸乙酯，熔點(diǎn)215-216℃。
實(shí)施例83-[1-(2-丙基)-6-甲氧基甲基-1H-吲哚-3-基]-4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)-吡咯-2，5-二酮a)在氬氣下，將10g(55.2mmol)4-甲基-3-硝基-苯甲酸、16.8ml(126.96mmol)N，N-二甲基甲酰胺二甲基乙縮醛的無水N，N-二甲基甲酰胺(50ml)溶液在140℃下加熱17h。反應(yīng)混合物冷卻至室溫并蒸發(fā)，得到一深紅色殘余物，將其溶于70ml熱甲醇，在25℃下保持3h后在4℃下過夜。過濾結(jié)晶產(chǎn)物，晶體用冰冷卻的甲醇洗滌，然后用己烷洗滌。在高真空下干燥，得到10.6g(76.9％)4-(2-二甲氨基-乙烯基)-3-硝基-苯甲酸甲酯。
b)將4-(2-二甲氨基-乙烯基)-3-硝基-苯甲酸甲酯(10.4g，41.5mmol)的160ml甲醇溶液在氬氣下攪拌，滴加12.9ml(101.92mmol)氯三甲硅烷。所得淺紅色溶液回流18h，用己烷/乙酸乙酯(65∶35)的薄層色譜法指示反應(yīng)完全。蒸發(fā)反應(yīng)混合物得到一油狀殘余物，重新溶于100ml乙酸乙酯，用飽和碳酸氫鈉溶液和飽和氯化鈉溶液萃取，有機(jī)層經(jīng)硫酸鎂干燥，蒸發(fā)得到一油狀物。從30ml無水乙醚中結(jié)晶，得到10.8g的4-甲酯基-2-硝基苯基-乙醛二甲基乙縮醛。
c)在氫氣(50psi，0.45g的10％Pd/C)下，將4-甲酯基-2-硝基苯基-乙醛二甲基乙縮醛(8.75g，41.43mmol)在170ml甲醇中還原2.5h。溶液通過硅藻土過濾，蒸發(fā)得到一油狀物。從乙醚與己烷中結(jié)晶，得到6.16g的2-氨基-4-甲酯基-苯乙醛二甲基乙縮醛。
d)在氬氣下，將5.9g(24.66mmol)2-氨基-4-甲酯基-苯乙醛二甲基乙縮醛的160ml乙酸溶液與4.8ml(65.12mmol)丙酮、無水硫酸鈉(46.24g，325.6mmol)攪拌10分鐘。歷時(shí)2分鐘加入三乙酰氧基硼氫化鈉(20.7g，97.68mmol)，反應(yīng)混合物在25℃下攪拌20分鐘。將反應(yīng)混合物緩慢傾入490ml飽和碳酸氫鈉溶液，用乙酸乙酯萃取。有機(jī)層經(jīng)硫酸鎂干燥。溶液過濾后濃縮，得到一油狀殘余物(6g)，用閃蒸色譜法(75％乙酸乙酯/己烷)精制，得到3.8g的4-甲酯基-2-(N-2-丙氨基)-苯乙醛二甲基乙縮醛。
e)將4-甲酯基-2-(N-2-丙氨基)-苯乙醛二甲基乙縮醛(3.7g，13.15mmol)與100ml的1N氫氯酸在甲醇中回流1h。溶液濃縮，將殘余物溶于50ml乙酸乙酯，用飽和碳酸氫鈉溶液洗滌，有機(jī)層經(jīng)硫酸鎂干燥并蒸發(fā)，得到2.78g的6-甲酯基-1-(2-丙基)-吲哚。
f)在氬氣、0℃下，一邊攪拌一邊向氫化鋰鋁(52.4mg，1.38mmol)的7ml無水四氫呋喃漿液中滴加0.250g(1.15mmol)6-甲酯基-1-(2-丙基)-吲哚的2ml無水四氫呋喃溶液，然后在25℃下攪拌45分鐘。溶液冷卻至0℃后，滴加0.340ml甲醇，然后滴加0.58ml的1N氫氧化鈉溶液。漿液在25℃下攪拌15分鐘。通過硅藻土過濾白色沉淀，溶液濃縮。將殘余物混懸在20ml乙酸乙酯和20ml水中。分層。含水層用乙酸乙酯反萃取，合并兩次的乙酸乙酯層，經(jīng)硫酸鎂干燥。濃縮得到6-羥甲基-1-(2-丙基)-吲哚，為一油狀物(214mg)。
g)在0℃、氬氣下，向95％NaH(35.2mg，1.36mmol)的6ml無水N，N-二甲基甲酰胺漿液中滴加6-羥甲基-1-(2-丙基)-吲哚(0.214g，1.13mmol)的2ml N，N-二甲基甲酰胺溶液，反應(yīng)混合物在0℃下攪拌1h，然后加入甲基碘(84.7ml，1.356mmol)。反應(yīng)混合物然后在20℃、氬氣下攪拌17h。傾入冰水(50ml)中，用乙酸乙酯萃取。乙酸乙酯層經(jīng)無水硫酸鎂干燥后蒸發(fā)。用乙酸乙酯(2-5％)/己烷進(jìn)行閃蒸色譜法精制，得到107mg的6-甲氧基甲基-1-(2-丙基)-吲哚。
h)如例3b所述，使6-甲氧基甲基-1-(2-丙基)-吲哚與草酰氯反應(yīng)，然后與鹽酸2-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)-乙酰亞胺酸異丙酯反應(yīng)，得到3-[1-(2-丙基)-6-甲氧基甲基-1H-吲哚-3-基]-4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)-吡咯-2，5-二酮。
實(shí)施例9片劑
化合物A代表一種本發(fā)明的化合物。
制備過程1.將第1、2和3項(xiàng)在一種適當(dāng)?shù)幕旌掀髦谢旌?5分鐘。
2.將來自步驟1的粉末混合物與20％聚維酮K30溶液(第4項(xiàng))造粒。
3.在50℃下干燥來自步驟2的顆粒。
4.使來自步驟3的顆粒通過一種適當(dāng)?shù)难心ピO(shè)備。
5.向來自步驟4的研磨了的顆粒中加入第5項(xiàng)，混合3分鐘。
6.在一種適當(dāng)?shù)膲浩瑱C(jī)上壓制來自步驟5的顆粒。
實(shí)施例10膠囊劑
制備過程1.將第1、2和3項(xiàng)在一種適當(dāng)?shù)幕旌掀髦谢旌?5分鐘。
2.加入第4和5項(xiàng)，混合3分鐘。
3.裝填在一種適當(dāng)?shù)哪z囊中。
實(shí)施例11注射溶液/乳液的制備項(xiàng)目成分 mg/ml1 化合物A 1mg2 PEG400 10-50mg3 卵磷脂 20-50mg4 大豆油 1-5mg5 甘油 8-12mg6 水 適量，加至1ml制備過程
1.將第1項(xiàng)溶于第2項(xiàng)。
2.向第6項(xiàng)中加入第3、4和5項(xiàng)，混合直至分散，然后使之均勻。
3.向來自步驟2的混合物中加入來自步驟1的溶液，并使之均勻，直至該分散系呈半透明。
4.通過0.2μm濾器進(jìn)行除菌過濾，灌裝在小瓶中。
實(shí)施例12注射溶液/乳液的制備項(xiàng)目 成分 mg/ml1化合物A 1mg2葡糖糠醛 10-50mg3卵磷脂20-50mg4大豆油1-5mg5甘油 8-12mg6水適量，加至1ml制備過程1.將第1項(xiàng)溶于第2項(xiàng)。
2.向第6項(xiàng)中加入第3、4和5項(xiàng)，混合直至分散，然后使之均勻。
3.向來自步驟2的混合物中加入來自步驟1的溶液，并使之均勻，直至該分散系呈半透明。
4.通過0.2μm濾器進(jìn)行除菌過濾，灌裝在小瓶中。
權(quán)利要求
1.一種下式化合物 R1和R1’各自為烷基、芳基、鏈烯基或炔基；R2和R2’各自為氫或烷基；R4、R5、R6和R7每個獨(dú)立為CH2OC(O)R8、CH2OR10、CHO、CH2NR11R12、氫、鹵素、氰基、烷基、羥基、烷氧基、芳氧基、鹵代烷基、硝基、氨基、酰氨基、芳烷氧基、一烷基氨基、二烷基氨基、烷硫基、烷基亞磺?；蛲榛酋；?，其條件是R4、R5、R6或R7的至少一個是氰基、CH2OC(O)R8、CH2OR10、CH2NR11R12或CHO；R8為烷基、芳烷基或芳基；R9為烷基、芳烷基或芳基；R10為氫、烷基、芳烷基或芳基；R11和R12各自為氫、烷基、芳基、芳烷基或?；籖13為氫、烷基、芳基或芳烷基；和X和Y之一表示O，另一個表示O、S、(H，OH)或(H，H)；以及其藥學(xué)上可接受的前體藥物，或者式I的酸性化合物與堿、或式I的堿性化合物與酸所形成的藥學(xué)上可接受的鹽。
2.權(quán)利要求1的化合物，其中R1為烷基，優(yōu)選甲基。
3.權(quán)利要求1的化合物，其中R1’為烷基，優(yōu)選甲基，R2’為氫。
4.權(quán)利要求1的化合物，其中R4、R5、R6和R7之一為氰基、CH2OC(O)R8、CH2OR10、CH2NR11R12或CHO，其余為氫；優(yōu)選R6為氰基、CH2OC(O)R8、CH2OR10、CH2NR11R12或CHO，而R4、R5和R7為氫。
5.權(quán)利要求4的化合物，其中R8為烷基，優(yōu)選甲基，R9為烷基，優(yōu)選甲基，R10為氫或烷基，優(yōu)選甲基，R11、R12和R13為氫。
6.權(quán)利要求1的化合物，其中R1為烷基，R2為氫，R1’為烷基，R2’為氫，R4、R5、R7為氫，R6為氰基、CH2OC(O)R8、CO2R9、CH2OR10、CH2NR11R12、CHO、CON(R13)2。
7.權(quán)利要求13的化合物，其中R8為烷基，R9為烷基，R10為氫或烷基，R11、R12和R13為氫，其中所述烷基優(yōu)選為甲基。
8.權(quán)利要求1的化合物，該化合物是1-甲基-3-[4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)-2，5-二氧-2，5-二氫-1H-吡咯-3-基]-1H-吲哚-6-腈；1-甲基-3-[4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)-2，5-二氧-2，5-二氫-1H-吡咯-3-基]-1H-吲哚-5-腈；乙酸1-甲基-3-[4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)-2，5-二氧-2，5-二氫-1H-吡咯-3-基]-1H-吲哚-6-基甲酯；1-甲基-3-[4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)-2，5-二氧-2，5-二氫-1H-吡咯-3-基]-1H-吲哚-6-甲醛；3-(6-甲氧基甲基-1-甲基-1H-吲哚-3-基)-4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)-吡咯-2，5-二酮；或3-(6-羥甲基-1-甲基-1H-吲哚-3-基)-4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)-吡咯-2，5-二酮。
9.一種藥物組合物，該組合物含有如權(quán)利要求1-8中任意一項(xiàng)所要求保護(hù)的式I化合物、或其藥學(xué)上可接受的前藥、或式I的酸性化合物與一種堿或式I的堿性化合物與一種酸所形成的藥學(xué)上可接受的鹽，和一種惰性載體。
10.如權(quán)利要求1-8中任意一項(xiàng)所要求保護(hù)的化合物的用途，用于抑制細(xì)胞增殖或用于制備相應(yīng)的藥物。
全文摘要
式(I)化合物，其中R
文檔編號A61K31/40GK1495182SQ03127540
公開日2004年5月12日 申請日期1997年7月19日 優(yōu)先權(quán)日1996年7月29日
發(fā)明者唐娜·M·赫因, 丹尼斯·D·基思, D 基思, 唐娜 M 赫因 申請人:霍夫曼-拉羅奇有限公司