專利名稱：具有心血管活性的黃楊寧類化合物及以其為活性成分的心腦血管藥物的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及的是對具有心血管活性的植物活性單體環(huán)維黃楊星D進行結(jié)構修飾后所獲得的能在療效和治療安全范圍上更為理想的藥用環(huán)維黃楊星D化合物的衍生物，及以該衍生物為有效活性成分的用于心腦血管疾病防治的藥物。
背景技術：
環(huán)維黃楊星D是由黃楊木有效部位的生物堿部分提取得到的一個植物活性單體化合物，其結(jié)構如式(A)所示 在公開號為CN1064869A的中國專利文獻中，報導了由小葉黃楊中分離提取對該化合物的生產(chǎn)工藝方法及其制品。
有關式(A)化合物藥理作用的研究報導已有不少。如，劉錫玖等“環(huán)維黃楊星D的一些心血管作用”(《中國藥理學報》1982，3[2])；溫業(yè)紹等“環(huán)維黃楊星D對心肌正性肌力效應和細胞膜Na+-K+-ATPase活力的抑制作用”(《生理學報》1982，34[3])；汪永孝等“環(huán)維黃楊星D與哇巴因等藥合用對離體心肌收縮力的影響”(《中國藥學雜志》1994，29[1])；汪永孝等“環(huán)維黃楊星D對豚鼠離體心肌正性肌力作用”(《中國藥理毒理雜志》1989，3[2])；胡式冷等“環(huán)維黃楊星D抗心律失常與誘發(fā)心律失常作用的實驗分析”(《中國藥理學報》1981，2[2])；汪永孝等“環(huán)維黃楊星D抗心房纖顫的作用及其電生理機制”(《藥學學報》1996，31[7])；方泰惠等“黃楊寧對急性實驗性腦缺血的保護作用”(《中草藥》1997，28[7])；徐濟民等“黃楊寧治療冠心病心絞痛臨床評價”(《上海中醫(yī)藥雜志》1992，[3])；楊炳如等“黃楊寧片治冠心病62例臨床分析”(《江蘇中醫(yī)》1996，17[2])；黃楊寧臨床驗證上海協(xié)作組“黃楊寧治療冠心病110例”(《中醫(yī)雜志》1983，24[5])；姚惠琴等“黃楊寧治療冠心病心絞痛100例臨床觀察”(《中國中醫(yī)藥信息雜志》1997，4[10])；周光珉等“黃楊寧對甲襞微循環(huán)作用的觀察”(《中成藥》1992，14[9])等許多文獻報導的研究和臨床驗證表明，該化合物在治療冠心病、心絞痛等缺血性心臟病，各種心律失常，心功能不全；腦動脈硬化癥、腦栓塞、腦血管意外后遺癥、基底動脈供血不足等缺血性腦??；糖尿病血管病變等末梢血管疾??；調(diào)節(jié)血壓、心率及治療耳鳴、頭昏、頭暈、胸悶氣短、疲勞、肺心病等心腦血管疾病中都確有療效。上述的環(huán)維黃楊星D目前已以藥品名稱“黃楊寧”被收入2000年版《中國藥典》，使用劑量為1～2mg/次，1～2次/日。
除上述式(A)結(jié)構形式的天然提取物外，天然存在的該黃楊寧類衍生物還有如CA登記號為864-57-3的式(B)、CA登記號為1257-54-1的式(C)和CA登記號為1056-43-5的式(D)幾種結(jié)構形式。 發(fā)明內(nèi)容根據(jù)上述情況，本發(fā)明首先將提供一類對上述式(A)形式的環(huán)維黃楊星D化合物為基本結(jié)構進行結(jié)構修飾，以得到能具有更為理想的心血管活性，因而可以被應用于心腦血管疾病防治的新的藥用化合物。在此基礎上，本發(fā)明進一步的目的，是提供以這些新化合物作為有效的藥用活性成分而用于心腦血管疾病防治的藥物，這些藥物至少可以使醫(yī)生和/或病員在對心絞痛、心律失常、外周血管性疾病及其他心腦血管疾病的防治時能增加對可供使用藥物的選擇和適用范圍。
本發(fā)明所說的具有心血管活性的黃楊寧類化合物，結(jié)構如式(I)所示 其中，式(I)中的R1、R2和R3可以分別是H、相同或不同的烷基、芳?；?、烷基?；?、與具有心血管活性的酸對應的酰基、或這些取代基的相應堿金屬鹽，如常用的鉀鹽、鈉鹽等，但R1、R2和R3不同時都為H，并且也不同時都為乙?；?。
在上述式(I)結(jié)構的化合物中，所說的烷基一般可以為如甲基、乙基、丙基等C1-C5的小分子烷基；所說的芳?；话憧梢詾楸郊柞；?、苯乙酰基，或是如4-甲氧基苯甲酰基，3，4-二甲氧基苯甲?；?，2，4-二氯等鹵代苯甲?；热〈问降谋郊柞；凰f的烷基?；梢詾槌Ｓ玫募柞；?、乙?；?；所說的與具有心血管活性的酸對應的?；鶠槿夤瘐；⒒蚴侨?-甲氧基肉桂?；?，4-二甲氧基肉桂?；?，2，4-二氯等鹵代肉桂?；热〈问降娜夤瘐；?、乙酰水楊?；?、琥珀酸單?；蜱牾ｂc鹽。
實驗結(jié)果顯示，在上述的式(I)化合物中，可以具有較好藥理活性的化合物的結(jié)構形式可有使結(jié)構中的R1為所說的烷基、芳?；⑼榛；?、與具有心血管活性的酸對應的酰基或是這些取代基的相應堿金屬鹽，R2和R3可以均為H。實驗表明，其中以使R1為乙?；?、琥珀酸單酰基或琥珀酰鈉鹽等取代基團時為佳。
另外，在上述的式(I)化合物中，也可以使結(jié)構中的R1和R2分別為所說的相同或不同的烷基、芳?；?、烷基?；?、與具有心血管活性的酸對應的酰基或這些取代基的相應堿金屬鹽，R3為H；實驗結(jié)果顯示，其中以使R1和R2為相同或不同的苯甲?；⑷夤瘐；?、乙酰水楊?；㈢晁釂熙；蜱牾ｂc鹽等取代基團時為佳。
此外，還可以使上述式(I)結(jié)構中的R1、R2和R3分別都為所說的相同或不同的烷基、芳?；?、烷基?；?、與具有心血管活性的酸對應的酰基、或這些取代基的相應堿金屬鹽，例如可以作為具體參考實例之一的是使R1、R2和R3分別都為相同或不同的苯甲?；蛉夤瘐；热〈鶊F。
除上述式(I)結(jié)構形式的化合物外，本發(fā)明所說的具有心血管活性的另一類黃楊寧類化合物，是如式(II)所示的鹽類結(jié)構的化合物 其中，式(II)中的母體結(jié)構中的R1、R2和R3可以分別是H、相同或不同的烷基、芳酰基、烷基?；?、與具有心血管活性的酸對應的酰基、或這些取代基的相應堿金屬鹽；R是藥學上可以接受的有機酸或其水合物。
在上述式(II)結(jié)構的化合物中，R1、R2和R3各取代基的允許范圍分別與前述式(I)結(jié)構中的對應取代基相同；在具體化合物中，R1、R2和R3的表現(xiàn)形式也與前述相同。所說的藥學上可接受的有機酸R，可以為甲磺酸、對甲苯磺酸、馬來酸、富馬酸、琥珀酸或阿魏酸等。
在以式(A)結(jié)構的環(huán)維黃楊星D為原料合成本發(fā)明上述化合物(I)時，根據(jù)式(I)結(jié)構中各取代基R1、R2和R3的不同，可以有不同的方法。例如，當R1、R2和R3均為烷基時，可以采用下列方式制備
其中，反應時所用的烷基化試劑，可以選用如硫酸二甲酯、二乙酯或是相應的烷基氯化物等常規(guī)的烷基化試劑。通過調(diào)整或改變烷基化試劑的用量和/或反應時所用的堿性環(huán)境、反應時間長短等控制條件，可以分別得到在不同位置和/或取代數(shù)量的烷基化產(chǎn)物(I)。例如，以烷基氯化物為原料，三乙胺為除酸劑，在氯仿、四氫呋喃或二氯甲烷等反應介質(zhì)中與式(A)的環(huán)維黃楊星D加熱反應，即可以得到R1為烷基取代，R2和R3為H的產(chǎn)物(I)；以硫酸二甲酯為烷基化劑，在如二乙胺或三乙胺等堿性條件和室溫條件下，以氯仿、四氫呋喃或二氯甲烷等反應介質(zhì)中與環(huán)維黃楊星D反應，即可以得到R1、R2均被烷基取代而R3為H的二烷基化取代產(chǎn)物(I)；同樣以硫酸二甲酯為烷基化劑，在如氫氧化鈉等強烈的堿性條件下，仍在氯仿、四氫呋喃或二氯甲烷等反應介質(zhì)中與環(huán)維黃楊星D加熱反應數(shù)小時，則可以得到R1、R2和R3均為烷基取代的三烷基化取代產(chǎn)物(I)。
在上述的合成方式中，以酰化試劑替換烷基化試劑后，即可得到R1、R2和R3分別為相應的?；〈漠a(chǎn)物(I)。其中，根據(jù)所用酰化試劑活性的強弱和/或?qū)Ψ磻獥l件的調(diào)整和改變，可以分別得到不同位置和/或不同?；〈漠a(chǎn)物(I)。例如，以略多于等摩爾量的酸酐類化合物為?；噭?，在如吡啶、二甲基氨基吡啶(DMAP)等存在和常溫條件下，以及如干燥的氯仿、四氫呋喃、二氯甲烷等介質(zhì)溶劑中反應，可以得到R1為?；〈琑2和R3為H的產(chǎn)物(I)；以2倍摩爾量的酰氯等酰鹵為酰化試劑，在如三乙胺等有機除酸劑和常溫條件下，同樣在氯仿、四氫呋喃、二氯甲烷等介質(zhì)中反應，則可以得到R1、R2均被?；〈鳵3為H的二?；〈a(chǎn)物(I)；以3倍量的酰鹵為?；瘎┘巴瑯拥某釀┖头磻橘|(zhì)條件下，進行加熱回流反應，則可以得到R1、R2和R3均為?；〈娜；〈a(chǎn)物(I)。以先后不同投料量的?；噭┖头磻獥l件進行反應，則可以得到R1、R2和R3分別為不同?；〈漠a(chǎn)物(I)。實驗結(jié)果顯示，一般情況下，在作為原料的母體化合物(A)的結(jié)構中，R1、R2和R3所在位置的取代反應活性是依次降低。當希望得到R1、R2和R3分別為烷基和?；〈鷷r，一般情況下除進行烷基化和?；瘍深惾〈磻璺謩e進行外，實驗結(jié)果尚未顯示這兩類反應進行的順序先后會對反應結(jié)果有顯著的影響。
本發(fā)明上述化合物(II)的制備，可以用上述的化合物(A)或是上述的化合物(I)為原料，采用常規(guī)的成鹽反應后得到。例如，可供作為具體實施參考方式之一的，是在如氯仿等烴類、四氫呋喃等醚類，或如甲醇、乙醇等醇類等常用的有機介質(zhì)，以及常溫的條件下，與上述相應的有機酸進行反應，即可得到相應的鹽類化合物(II)。
由上述內(nèi)容可以理解，采用上述的合成方式制備本發(fā)明所說的化合物(I)和化合物(II)，路線都十分簡單，成本較低，產(chǎn)物的收率較高，能適合于工業(yè)化和擴大生產(chǎn)的需要。
動物實驗的結(jié)果顯示，本發(fā)明上述的化合物(I)及化合物(II)可以具有加強黃楊寧的心血管活性作用，增強藥效。特別是化合物(II)，由于其具有的鹽類結(jié)構特點，還可以明顯改善其水溶性，對增大其生物利用度有利，同時也為擴大多種藥物劑型品種的開發(fā)提供了便利條件，如口服制劑中的水劑，以及肌肉和靜脈注射劑等多種注射型的制劑，使病員和醫(yī)生由目前只能唯一使用黃楊寧口服片劑而大大增加了在對制劑種類和/或適用范圍上可供選擇的范圍和靈活性。
例如，分別以上述的化合物(I)或化合物(II)作為活性成分，與在口服制劑中可以被接受的如崩解劑、賦形劑、潤滑劑、粘合劑、填充劑等常用的輔助添加成份混合后，按常規(guī)方法即可制成為片劑、丸劑、膠囊劑或多種相應的緩釋劑、控釋劑等固體制劑型的心腦血管病防治藥物；與常用的增溶劑、乳化劑、潤濕劑、起泡或消泡劑等表面活性劑、稀釋劑、防腐劑、穩(wěn)定劑、矯味劑、增稠劑等混合，按相應的常規(guī)方法，即可制成為如水劑、糖漿等液體制劑型的心腦血管病防治口服藥物；與注射劑中常用的適當溶劑和附加劑配合和操作，還可以制備成相應的肌肉或靜脈注射劑型的心腦血管病防治藥物。
按照《新藥臨床前研究指導原則》要求，選定了兩個指標心肌耐缺氧和抗心律失常實驗作為心血管活性篩選指標，對本發(fā)明上述的若干化合物(I)和化合物(II)，與式(A)所示的母體化合物環(huán)維黃楊星D進行了對比試驗。藥理實驗方法根據(jù)《中藥藥理研究方法學》，《中藥新藥研制開發(fā)技術與方法》以及《新藥臨床前研究指導原則》的標準制定。
小鼠的常壓心肌耐缺氧實驗取小白鼠100只(雌雄不拘)，分別稱重，編號，按體重分層分組。分別灌胃給予各組動物相應的藥物，給藥一小時后，將小鼠放入盛有20g鈉石灰的廣口瓶中(每只廣口瓶只放一只小鼠)，用凡士林涂抹瓶口蓋嚴。使之不漏氣，立即計時，以呼吸停止為指標，觀察小鼠因缺氧而死亡的時間，與對照組比較進行t檢驗。實驗結(jié)果如表1所示。
表1 小鼠心肌常壓耐缺氧實驗結(jié)果(X±SD)

注與空白對照組比較，*P＜0.05。
氯仿引起的心律失常實驗取體重25～28g小鼠242只，雌雄各半，隨機按體重分層分組。每組分別提前一小時灌胃相應藥物，一小時后，將小鼠逐個放入含有2ml氯仿棉球的倒置500ml燒杯內(nèi)(每換一次小鼠需加0.5ml氯仿)，讓小鼠吸入氯仿直至呼吸停止，立即將小鼠取出，直接開胸，肉眼觀察心臟活動節(jié)律，心室纖顫發(fā)生率。實驗結(jié)果如表2所示。上述對比實驗結(jié)果顯示，本發(fā)明的黃楊寧類化合物與其母體化合物(A)比較，在心肌耐缺氧、抗心律失常方面即心血管活性上有更好的效果。
按照上述內(nèi)容，在不脫離本發(fā)明上述基本技術思想的前提下，根據(jù)本領域的普通技術知識和慣用手段，對其內(nèi)容還可以有多種形式的修改、替換或變更。
以下通過實施例形式的具體實施方式
，對本發(fā)明的上述內(nèi)容再作進一步的詳細說明。但不應將此理解為本發(fā)明上述主題的范圍僅限于以下的實例。凡基于本發(fā)明上述內(nèi)容所實現(xiàn)的技術均屬于本發(fā)明的范圍。
表2 氯仿引起的心律失常實驗結(jié)果(X2)

注與空白對照組比較，*P＜0.05，**P＜0.01。
具體實施例方式
實例19β，19-環(huán)-16α-羥基-4，4，13，14-四甲基-3-甲基氨基-17-(1-甲基氨基)乙基孕甾烷甲磺酸鹽的制備將0.1克(0.25毫摩爾)環(huán)維黃楊星D溶于15毫升干燥氯仿中，室溫下，滴加32微升(0.5毫摩爾)甲磺酸，反應2小時，蒸去溶劑，得白色固體，甲醇/乙醚重結(jié)晶，得產(chǎn)品0.11克，收率91.7％，熔點282-284℃。
1H NMR(400MHz)(D2O)4.392(1H，septet，16-H)，3.557(1H，m，3-H)，2.973(1H，m，17-H)，2.872(3H，s，CH3SO3H)，2.811(6H，m，2N-CH3)，1.197(3H，s，CH3)，1.167(3H，s，18-CH3)，1.121(6H，S，2CH3)，1.010(3H，s，21-CH3)，0.691(1H，d，19βH)，0.504(1H，d，19αH)；MS402(M+)，395，356，239，143，83，70。所得產(chǎn)品化合物的結(jié)構為 實例29β，19-環(huán)-16α-羥基-4，4，13，14-四甲基-3-甲基氨基-17-(1-甲基氨基)乙基孕甾烷對甲苯磺酸鹽的制備將0.1克(0.5毫摩爾)對-甲苯磺酸溶于15毫升甲醇中，室溫下，滴加0.1克(0.25毫摩爾)環(huán)維黃楊星D氯仿液，反應2小時，蒸去溶劑，得白色固體，甲醇/乙醚重結(jié)晶，得產(chǎn)品0.14克，收率95.2％，熔點172-175℃。
1HNMR(400MHz)(D2O)7.770(2H，d，phH)，7.446(2H，d，phH)，4.394(1H，septet，16-H)，3.511(1H，m，3-H)，2.938(1H，m，17-H)，2.801(6H，m，2N-CH3)，2.462(3H，s，CH3-ph)，1.177(3H，s，CH3)，1.159(3H，s，18-CH3)，1.103(6H，s，2CH3)，0.942(3H，s，21-CH3)，0.651(1H，d，19βH)，0.469(1H，d，19αH)；MS402(M+)，388，329，313，256，191，109，68，43。
所得產(chǎn)品化合物的結(jié)構為 實例39β，19-環(huán)-16α-羥基-4，4，13，14-四甲基-3-甲基氨基-17-[1-(甲基乙?；?氨基]乙基孕甾烷的制備將0.1克(0.25毫摩爾)環(huán)維黃楊星D，30微升(0.32毫摩爾)乙酸酐溶于15毫升干燥氯仿中，室溫反應5小時，蒸去溶劑，柱層析得產(chǎn)品，白色固體0.056克，收率51％，熔點277-279℃。
元素分析C75.48(計算值75.63)，H10.92(計算值10.88)，N6.25(計算值6.30)；1HNMR(400MHz)(CDCl3)5.018(1H，septet，16-H)，4.523(1H，m，3-H)，4.168(1H，m，17-H)，2.944(6H，m，2N-CH3)，2.204(3H，s，CH3CO)，1.132(3H，s，CH3)，1.094(3H，s，18-CH3)，0.918(6H，s，2CH3)，0.838(3H，s，21-CH3)，0.590(1H，d，J＝3 8Hz，19βH)，0.356(1H，d，J＝3.8Hz，19αH)；MS441(M+)，402，387，372，328，131，70，58。
所得產(chǎn)品化合物的結(jié)構為 實例49β，19-環(huán)-16α-羥基-4，4，13，14-四甲基-3-甲基氨基-17-[1-(甲基琥珀?；?氨基]乙基孕甾烷鈉鹽的制備將0.1克(0.25毫摩爾)環(huán)維黃楊星D，0.04克(0.32毫摩爾)丁二酸酐溶于15毫升干燥氯仿中，室溫反應5小時，蒸去溶劑，柱層析得白色固體0.063克，收率51％，熔點338-340℃。
將上述白色固體溶于甲醇，加入50％氫氧化鈉液，攪拌，反應液澄清，后緩慢析出白色固體，抽濾，烘干，得琥珀酰鈉鹽。
元素分析C71.58(計算值71.67)，H10.25(計算值10.02)，N5.42(計算值5.57)；1HNMR(400MHz)(DMSO)11.973(1H，s，COOH)，4.787(1H，septet，16-H)，4.286(1H，m，3-H)，3.791(1H，m，17-H)，2.798(6H，m，2N-CH3)，2.461(4H，q，CH2CH2)，1.180(3H，s，CH3)，1.153(3H，s，18-CH3)，1.121(6H，S，2CH3)，0.903(3H，s，21-CH3)，0.509(1H，d，19βH)，0.358(1H，d，19αH)；MS500(M+)，370，328，200，157，131，100，70。
所得產(chǎn)品化合物的結(jié)構為 實例59β，19-環(huán)-16α-羥基-4，4，13，14-四甲基-3-(甲基苯甲?；?氨基-17-[1-(甲基苯甲酰基)氨基]乙基孕甾烷的制備將0.2克(0.5毫摩爾)環(huán)維黃楊星D，2毫升三乙胺溶于15毫升干燥氯仿中，室溫下，緩慢加入120微升(1.0毫摩爾)苯甲酰氯，反應2小時，依次用2摩爾/升鹽酸，5％碳酸氫鈉，蒸餾水洗滌氯仿液，無水硫酸鈉干燥，蒸去溶劑，氯仿乙酸乙酯重結(jié)晶，得白色固體0.25克，收率81％，熔點285-288℃。
元素分析C78.43(計算值78.65)，H9.01(計算值8.91)，N4.46(計算值4.59)；1HNMR(400MHz)(CDCl3)7.356-7.522(10H，m，phH)，5.160(1H，septet，16-H)，4.699(1H，m，3-H)，4.028(1H，m，17-H)，3.026(6H，m，2N-CH3)，1.186(3H，s，CH3)，1.111(3H，s，18-CH3)，1.026(6H，s，2CH3)，0.715(3H，s，21-CH3)，0.557(1H，d，19βH)，0.377(1H，d，19αH)；MS610(M+)，459，269，162，146，105，40，29。
所得產(chǎn)品化合物的結(jié)構為 實例69β，19-環(huán)-16α-羥基-4，4，13，14-四甲基-3-(甲基肉桂酰基)氨基-17-[1-(甲基肉桂?；?氨基]乙基孕甾烷的制備將0.2克(0.5毫摩爾)環(huán)維黃楊星D，2毫升三乙胺溶于15毫升干燥氯仿中，室溫下，緩慢加入0.16克(1.0毫摩爾)肉桂酰氯，反應2小時，依次用2摩爾/升鹽酸，5％碳酸氫鈉，蒸餾水洗滌氯仿液，無水硫酸鈉干燥，蒸去溶劑，氯仿乙酸乙酯重結(jié)晶，得白色固體0.27克，收率82％，熔點262-265℃。
元素分析C79.68(計算值79.72)，H8.88(計算值8.82)，N4.15(計算值4.23)；1HNMR(400MHz)(CDCl3)7.283-7.913(10H，m，phH)，7.674(2H，m，2CH＝)，6.744-6.993(2H，m，2＝CH)，5.228(1H，septet，16-H)，4.664(1H，m，3-H)，3.778(1H，m，17-H)，3.061(6H，m，2N-CH3)，1.217(3H，s，CH3)，1.167(3H，s，18-CH3)，1.119(6H，s，2CH3)，0.926(3H，s，21-CH3)，0.621(1H，d，19βH)，0.399(1H，d，19αH)；MS663(M+)，531，474，338，162，131，71。
所得產(chǎn)品化合物的結(jié)構為 實例79β，19-環(huán)-16α-羥基-4，4，13，14-四甲基-3-(甲基乙酰水楊酰基)氨基-17-[1-(甲基乙酰水楊?；?氨基]乙基孕甾烷的制備將0.2克(0.5毫摩爾)環(huán)維黃楊星D，2毫升三乙胺溶于15毫升干燥氯仿中，室溫下，緩慢加入0.2克(1.0毫摩爾)乙酰水楊酰氯，反應2小時，依次用2摩爾/升鹽酸，5％碳酸氫鈉，蒸餾水洗滌氯仿液，無水硫酸鈉干燥，蒸去溶劑，氯仿乙酸乙酯重結(jié)晶，得白色固體0.29克，收率80％，熔點190-192℃。
元素分析C72.58(計算值72.70)，H8.26(計算值8.04)，N3.76(計算值3.85)；1HNMR(400MHz)(CDCl3)7.015-8.086(8H，m，phH)，5.073(1H，septet，16-H)，4.613(1H，m，3-H)，3.577(1H，m，17-H)，3.082(6H，m，2N-CH3)，2.261(6H，s，2COCH3)，1.218(3H，s，CH3)，1.200(3H，s，18-CH3)，1.137(6H，s，2CH3)，1.078(3H，s，21-CH3)，0.594(1H，d，J＝3.6Hz，19βH)，0.361(1H，d，J＝3.6Hz，19αH)；MS726(M+)，503，341，218，161，131，71。所得產(chǎn)品化合物的結(jié)構為 實例89β，19-環(huán)-16α-羥基-4，4，13，14-四甲基-3-(甲基琥珀?；?氨基-17-[1-(甲基琥珀?；?氨基]乙基孕甾烷鈉鹽的制備將0.1克(0.25毫摩爾)環(huán)維黃楊星D，0.06克(0.50毫摩爾)丁二酸酐溶于15毫升干燥氯仿中，室溫反應5小時，蒸去溶劑，柱層析得白色固體0.068克，收率45％，熔點352-355℃。
將上述白色固體溶于甲醇，加入50％氫氧化鈉液，攪拌，反應液澄清，后緩慢析出白色固體，抽濾，烘干，得二琥珀酰鈉鹽。
元素分析C67.58(計算值67.74)，H9.22(計算值9.03)，N4.55(計算值4.65)；1HNMR(400MHz)(DMSO)12.048(2H，s，COOH)，4.823(1H，septet，16-H)，4.289(1H，m，3-H)，3.588(1H，m，17-H)，2.762(6H，m，2N-CH3)，2.444(8H，m，2CH2CH2)，1.150(3H，s，CH3)，1.117(3H，s，18-CH3)，0.977(6H，s，2CH3)，0.778(3H，s，21-CH3)，0.529(1H，d，J＝3.6Hz，19βH)，0.366(1H，d，J＝3.6Hz，19αH)；MS601(M+)，501，442，370，216，157，131，100，70。
所得產(chǎn)品化合物的結(jié)構為 實例99β，19-環(huán)-16α-羥基-4，4，13，14-四甲基-3-(二甲基)氨基-17-[1-(二甲基)氨基]乙基孕甾烷的制備將0.2克(0.5毫摩爾)環(huán)維黃楊星D溶于25毫升干燥氯仿中，室溫下滴加0.13克(1.0毫摩爾)硫酸二甲酯，在30-35℃反應30分鐘，再加熱回流3小時，冷卻后加入50％氫氧化鈉溶液，析出固體，過濾，干燥固體，以氯仿乙酸乙酯重結(jié)晶，得白色產(chǎn)品0.16克，收率75％，熔點235-237℃。
元素分析C77.92(計算值78.08)，H11.85(計算值11.70)，N6.43(計算值6.50)；1HNMR(400MHz)(CDCl3)4.352(1H，septet，16-H)，3.757(1H，m，3-H)，2.952(1H，m，17-H)，2.832(12H，m，2N-CH3)，1.193(3H，s，CH3)，1.152(3H，s，18-CH3)，1.116(6H，s，2CH3)，1.020(3H，s，21-CH3)，0.635(1H，d，19βH)，0.495(1H，d，19αH)；MS428(M+)，387，330，251，159，84，58。
所得產(chǎn)品化合物的結(jié)構為 實例109β，19-環(huán)-16α-苯甲酰氧基-4，4，13，14-四甲基-3-(甲基苯甲?；?氨基-17-[1-(甲基苯甲?；?氨基]乙基孕甾烷的制備將0.2克(0.5毫摩爾)環(huán)維黃楊星D，2毫升三乙胺溶于15毫升干燥氯仿中，室溫下，緩慢加入180微升(1.5毫摩爾)苯甲酰氯，室溫反應2小時，再回流反應10小時，停止反應，依次用2摩爾/升鹽酸，5％碳酸氫鈉，蒸餾水洗滌氯仿液，無水硫酸鈉干燥，蒸去溶劑，柱層析得白色固體0.18克，收率50％，熔點296-298℃。
元素分析C78.87(計算值78.95)，H8.22(計算值8.18)，N3.88(計算值3.92)；1HNMR(400MHz)(CDCl3)7.150-8.042(15H，m，phH)，5.457(1H，septet，16-H)，5.242(1H，m，3-H)，4.704(1H，m，17-H)，3.002(6H，m，2N-CH3)，1.169(3H，s，CH3)，1.114(3H，s，18-CH3)，1.069(6H，s，2CH3)，0.981(3H，s，21-CH3)，0.503(1H，d，19βH)，0.313(1H，d，19αH)；MS715(M+)，631，592，442，387，279，174，105。
所得產(chǎn)品化合物的結(jié)構為 實例119β，19-環(huán)-16α-肉桂酰氧基-4，4，13，14-四甲基-3-(甲基肉桂?；?氨基-17-[1-(甲基肉桂?；?氨基]乙基孕甾烷的制備將0.2克(0.5毫摩爾)環(huán)維黃楊星D，2毫升三乙胺溶于15毫升干燥氯仿中，室溫下，緩慢加入180微升(1.5毫摩爾)肉桂酰氯，室溫反應2小時，再回流反應10小時，停止反應，依次用2摩爾/升鹽酸，5％碳酸氫鈉，蒸餾水洗滌氯仿液，無水硫酸鈉干燥，蒸去溶劑，柱層析得白色固體0.20克，收率50％，熔點323-325℃。
元素分析C80.12(計算值80.26)，H8.89(計算值8.13)，N3.26(計算值3.53)；1HNMR(400MHz)(CDCl3)7.230-7.638(15H，m，phH)，6.312-7.178(3H，m，3CH＝)，7.568-7.725(3H，m，3＝CH)，5.237(1H，septet，16-H)，4.683(1H，m，3-H)，3.792(1H，m，17-H)，3.092(6H，m，2N-CH3)，1.210(3H，s，CH3)，1.160(3H，s，18-CH3)，1.108(6H，s，2CH3)，0.911(3H，s，21-CH3)，0.553(1H，d，19βH)，0.323(1H，d，19αH)；MS791(M+)，660，467，131，71。
所得產(chǎn)品化合物的結(jié)構為
實例129β，19-環(huán)-16α-苯甲酰氧基-4，4，13，14-四甲基-3-(二甲基)氨基-17-[1-(二甲基)氨基]乙基孕甾烷的制備按實例9制備的9β，19-環(huán)-16α-羥基-4，4，13，14-四甲基-3-(二甲基)氨基-17-[1-(二甲基)氨基]乙基孕甾烷0.2克(0.5毫摩爾)和2毫升三乙胺溶于15毫升干燥氯仿中，室溫下，緩慢加入120微升(1.0毫摩爾)苯甲酰氯，室溫反應2小時，再回流反應10小時，停止反應，依次用2摩爾/升鹽酸，5％碳酸氫鈉，蒸餾水洗滌氯仿液，無水硫酸鈉干燥，蒸去溶劑，柱層析得白色固體0.12克，收率46％，熔點323-325℃。
元素分析C78.36(計算值78.60)，H10.68(計算值10.18)，N5.02(計算值5.24)；1HNMR(400MHz)(CDCl3)7.150-7.868(5H，m，phH)，5.336(1H，septet，16-H)，5.125(1H，m，3-H)，4.326(1H，m，17-H)，3.006(12H，m，2N-CH3)，1.139(3H，s，CH3)，1.108(3H，s，18-CH3)，1.002(6H，s，2CH3)，0.861(3H，s，21-CH3)，0.493(1H，d，19βH)，0.303(1H，d，19αH)；MS533(M+)，501，470，42，251，159，105。
所得產(chǎn)品化合物的結(jié)構為 實例139β，19-環(huán)-16α-羥基-4，4，13，14-四甲基-3-(二甲基)氨基-17-[1-(甲基乙?；?氨基]乙基孕甾烷的制備按實例3制備的9β，19-環(huán)-16α-羥基-4，4，13，14-四甲基-3-甲基氨基-17-[1-(甲基乙?；?氨基]乙基孕甾烷0.2克(0.5毫摩爾)溶于15毫升干燥氯仿中，室溫下滴加0.11克(0.8毫摩爾)硫酸二甲酯，在30-35℃反應30分鐘，再加熱回流3小時，冷卻后加入50％氫氧化鈉溶液，析出固體，過濾，干燥固體，以氯仿乙酸乙酯重結(jié)晶，得白色產(chǎn)品0.13克，收率55％。熔點276-278℃。
元素分析C75.23(計算值75.93)，H11.86(計算值10.99)，N6.01(計算值6.11)；1HNMR(400MHz)(CDCl3)5.025(1H，septet，16-H)，4.532(1H，m，3-H)，4.176(1H，m，17-H)，2.969(9H，m，2N-CH3)，2.206(3H，s，CH3CO)，1.152(3H，s，CH3)，1.048(3H，s，18-CH3)，0.922(6H，s，2CH3)，0.858(3H，s，21-CH3)，0.596(1H，d，J＝3.8Hz，19βH)，0.375(1H，d，J＝3.8Hz，19αH)MS456(M+)，415，372，328，131，70，58所得產(chǎn)品化合物的結(jié)構為 實例14以上述的黃楊寧類化合物(I)為有效藥用成分的口服片劑的制備將粉狀的上述化合物(I)中的任一種與微晶纖維素和淀粉以重量比0.01∶(1.6-2)∶(0.5-1.4)混合均勻，過60-80目篩，按常規(guī)的片劑加工方式加入適量乙醇，將混合物制成軟材，過22目篩，制成顆粒，再加入占制片顆粒重量3-4％的干淀粉和1-2％的滑石粉，混合均勻，在壓片機上壓成片劑，包薄膜衣，制成每片含有上述有效藥用成分化合物(I)為1mg的片劑型口服制劑。用法與用量口服，一次1～2片，一日3次。
實例15以上述的黃楊寧類化合物(II)為有效藥用成分的注射劑的制備取總體積50％的注射用水置濃配缸中，加入總體積的0.025％上述任一種化合物(II)作為有效藥用成分，加熱至約70℃攪拌使之溶解并混勻，按注射劑制備的常規(guī)方式加入0.025％(W/V)針用活性炭，攪拌，吸附約15分鐘，然后泵壓過濾脫炭，濃配液泵入稀配缸，用處方量約10％的注射用水洗滌濃配缸，洗液過濾后泵入稀配缸中，加注射用水至處方全量，攪勻，粗濾后，再用0.65μm微孔濾膜精濾至澄明，進行半成品檢驗，pH值在4～9，含量合格后，灌封于安瓿中，在115℃下熱壓滅菌30分鐘，檢驗合格后，得到每毫升含有上述有效藥用成分化合物(II)為0.25mg的靜脈或肌肉注射型制劑。用法與用量靜注或肌注給藥，一次0.25mg，一日一次。
權利要求
1.具有心血管活性的黃楊寧類化合物，結(jié)構如式(I)所示 其中，式(I)中的R1、R2和R3可以分別是H、相同或不同的烷基、芳?；?、烷基?；?、與具有心血管活性的酸對應的酰基、或這些取代基的相應堿金屬鹽，但R1、R2和R3不同時為H或同時為乙酰基。
2.如權利要求1所述的具有心血管活性的黃楊寧類化合物，其特征是所說的烷基為C1-C5的烷基。
3.如權利要求1所述的具有心血管活性的黃楊寧類化合物，其特征是所說的芳?；梢詾楸郊柞；⑷〈谋郊柞；虮揭阴；?。
4.如權利要求1所述的具有心血管活性的黃楊寧類化合物，其特征是所說的烷基?；鶠榧柞；蛞阴；?br> 5.如權利要求1所述的具有心血管活性的黃楊寧類化合物，其特征是所說的與具有心血管活性的酸對應的?；鶠槿夤瘐；?、取代的肉桂?；⒁阴Ｋ畻铛；?、琥珀酸單酰基或琥珀酰鈉鹽。
6.如權利要求1至5之一所述的具有心血管活性的黃楊寧類化合物，其特征是所說的R1為所說的烷基、芳?；⑼榛；?、與具有心血管活性的酸對應的酰基、或這些取代基的相應堿金屬鹽，R2和R3均為H。
7.如權利要求6所述的具有心血管活性的黃楊寧類化合物，其特征是所說的R1為乙?；?、琥珀酸單?；蜱牾ｂc鹽。
8.如權利要求1至5之一所述的具有心血管活性的黃楊寧類化合物，其特征是所說的R1和R2為所說的相同或不同的烷基、芳?；?、烷基?；?、與具有心血管活性的酸對應的?；?、或這些取代基的相應堿金屬鹽，R3為H。
9.如權利要求8所述的具有心血管活性的黃楊寧類化合物，其特征是所說的R1和R2為相同或不同的苯甲?；?、肉桂?；?、乙酰水楊?；㈢晁釂熙；蜱牾ｂc鹽。
10.如權利要求1至5之一所述的具有心血管活性的黃楊寧類化合物，其特征是所說的R1、R2和R3均為所說的相同或不同的烷基、芳?；⑼榛；?、與具有心血管活性的酸對應的?；⒒蜻@些取代基的相應堿金屬鹽。
11.如權利要求10所述的具有心血管活性的黃楊寧類化合物，其特征是所說的R1、R2和R3為苯甲?；蛉夤瘐；?。
12.具有心血管活性的黃楊寧類化合物，其結(jié)構如式(II)所示 其中，式(II)中的母體結(jié)構中的R1、R2和R3可以分別是H、相同或不同的烷基、芳?；?、烷基?；?、與具有心血管活性的酸對應的酰基、或這些取代基的相應堿金屬鹽；R是藥學上可以接受的有機酸或其水合物。
13.如權利要求12所述的具有心血管活性的黃楊寧類化合物，其特征是所說的藥學上可接受的有機酸為甲磺酸、對甲苯磺酸、馬來酸、富馬酸、琥珀酸或阿魏酸。
14.如權利要求12或13所述的具有心血管活性的黃楊寧類化合物，其特征是所說母體結(jié)構中的烷基為C1-C5的烷基。
15.如權利要求12或13所述的具有心血管活性的黃楊寧類化合物，其特征是所說母體結(jié)構中的芳?；梢詾楸郊柞；?、取代的苯甲酰基或苯乙?；?。
16.如權利要求12或13所述的具有心血管活性的黃楊寧類化合物，其特征是所說母體結(jié)構中的烷基?；鶠榧柞；蛞阴；?。
17.如權利要求12或13所述的具有心血管活性的黃楊寧類化合物，其特征是所說的與具有心血管活性的酸對應的?；鶠槿夤瘐；?、取代肉桂酰基、乙酰水楊?；?、琥珀酸單?；蜱牾ｂc鹽。
18.如權利要求12或13所述的具有心血管活性的黃楊寧類化合物，其特征是所說母體結(jié)構中的R1為所說的烷基、芳?；?、烷基?；?、與具有心血管活性的酸對應的?；?、或這些取代基的相應堿金屬鹽，R2和R3均為H。
19.如權利要求12或13所述的具有心血管活性的黃楊寧類化合物，其特征是所說母體結(jié)構中的R1和R2為所說的相同或不同的烷基、芳?；?、烷基?；⑴c具有心血管活性的酸對應的?；⒒蜻@些取代基的相應堿金屬鹽，R3為H。
20.如權利要求12或13所述的具有心血管活性的黃楊寧類化合物，其特征是所說母體結(jié)構中的R1、R2和R3均為所說的相同或不同的烷基、芳?；?、烷基?；?、與具有心血管活性的酸對應的?；⒒蜻@些取代基的相應堿金屬鹽。
21.以上述式(I)或(II)化合物為活性成分的心腦血管病防治藥物，由式(I)或(II)化合物與制藥中可以被接受的輔助添加成份混合組成。
22.如權利要求21所述的藥物，其特征是為口服型藥物制劑。
23.如權利要求21所述的藥物，其特征是為注射型藥物制劑。
全文摘要
具有心血管活性的黃楊寧類化合物，其結(jié)構如式(I)和/或式(II)所示。其中，式(I)中的R
文檔編號A61P9/10GK1435429SQ0311740
公開日2003年8月13日 申請日期2003年3月6日 優(yōu)先權日2003年3月6日
發(fā)明者鄧蘭, 黃衡, 徐鳴夏 申請人:四川倍達爾新技術開發(fā)有限公司