一種具有神經(jīng)保護(hù)作用的化合物及醫(yī)用用圖
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明公開一種具有神經(jīng)保護(hù)作用的化合物及醫(yī)用用途，設(shè)及本發(fā)明所述的化合 物和藥學(xué)上可接受的鹽，W及它們?cè)谥委煂?duì)神經(jīng)毒素?fù)p傷的神經(jīng)細(xì)胞系具有明顯的修復(fù) 作用中的用途、W及在制造用于運(yùn)類治療的藥物中的用途，屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002] 帕金森?。≒D)是一種慢性中樞神經(jīng)系統(tǒng)退化性失調(diào)。它會(huì)損害患者的肢體功能， 語言能力等，臨床表現(xiàn)為休息性震顫、僵直、運(yùn)動(dòng)遲緩和姿勢(shì)不穩(wěn)定性與認(rèn)知和情感障礙。 它的病因目前仍不明確，但其主要病理特征為黑質(zhì)致密部中多己胺能神經(jīng)元的損失和被稱 為路易體的胞漿內(nèi)包含體的存在。
[0003] 6-徑基多己胺化-0HDA)是一種廣泛地用于在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中誘導(dǎo)帕金森綜合征的化 學(xué)物質(zhì)化ane&Dunnett，2008)。6-0HDA經(jīng)由多己胺和去甲腎上腺素重吸收轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白進(jìn)入神 經(jīng)元。因此，6-0HDA通常與選擇性去甲腎上腺素重吸收抑制劑（比如地昔帕明）一起使 用W選擇性地僅殺死多己胺能神經(jīng)元。在體外，多己胺的氧化可導(dǎo)致6-0HDA的產(chǎn)生，所 W6-0HDA被認(rèn)為是內(nèi)源性毒素（Jellingeretal.，1995)。確實(shí)的證據(jù)表明6-0HDA產(chǎn)生活 性氧簇，并降低谷脫甘膚和過氧化物歧化酶的活性度etarbetetal.,2002)。在腦內(nèi)注射 6-0HDA之后，紋狀體神經(jīng)元在24小時(shí)內(nèi)開始變性，并且在2-3天后紋狀體多己胺耗盡。
[0004] 近年來，部分合成小分子物質(zhì)被證明具有神經(jīng)保護(hù)的活性。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明目的在于提供了一種具有神經(jīng)保護(hù)作用的化合物。
[0006] 本發(fā)明公開了該化合物的制備方法，可W用于工業(yè)化生產(chǎn)。
[0007] 本發(fā)明進(jìn)一步公開了所述化合物在神經(jīng)保護(hù)作用方面的藥物應(yīng)用。
[0008] 本發(fā)明的具有神經(jīng)保護(hù)作用的化合物，所述化合物具有W下化學(xué)式：
具體化學(xué)式為： 化合物 4a 腳=H,r2 =COzEtr3 =Pli, r4 =H, X=巧 化合物 4b 腳=H,r2 =COzEtr3 =Pli, r4 =Pli, X= S) 化合物 4c 腳=H, r2 =C〇2化，R3 =Pli, r4 = S-MeOCsH*,X=S) 化合物 4e 腳=H, r2 =C〇2化，R3 =Pli, r4 = 2-化CeH*,X=S) 化合物 4e 腳=4-Me,r2 =COzEtr3 = Pli,r4 = Pli, X=巧 化合物 4f 腳=4-Br,r2 =COzEtr3 = Pli,r4 = Pli, X= S) 化合物 4g腳=H,r2 =C〇2化，R3 =A-MeOCsHs,r4 =Pli,X=S) 化合物地腳=H,r2 =COzEtr3 =Pli,r4 =Pli,X=Se)
本發(fā)明的積極效果在于：公開了化學(xué)結(jié)構(gòu)式I在制備神經(jīng)保護(hù)藥物中的新用途，可W對(duì)神經(jīng)毒素?fù)p傷的神經(jīng)細(xì)胞系具有明顯的修復(fù)作用，用于制備神經(jīng)保護(hù)藥物。
【附圖說明】
[0009] 圖1為4a對(duì)6-0HDA損傷的DPC12細(xì)胞的存活率的影響； 圖2為4b對(duì)6-0HDA損傷的DPC12細(xì)胞的存活率的影響； 圖3為4c對(duì)6-0HDA損傷的DPC12細(xì)胞的存活率的影響； 圖4為4d對(duì)6-0HDA損傷的DPC12細(xì)胞的存活率的影響； 圖5為4e對(duì)6-0HDA損傷的DPC12細(xì)胞的存活率的影響； 圖6為4f對(duì)6-0HDA損傷的DPC12細(xì)胞的存活率的影響； 圖7為4g對(duì)6-0HDA損傷的DPC12細(xì)胞的存活率的影響； 圖8為4h對(duì)6-0HDA損傷的DPC12細(xì)胞的存活率的影響。
【具體實(shí)施方式】
[0010] 下面結(jié)合具體實(shí)施例，進(jìn)一步闡述本發(fā)明。應(yīng)理解，運(yùn)些實(shí)施例僅用于說明本發(fā)明 而不用于限制本發(fā)明范圍。此外應(yīng)理解，在閱讀了本發(fā)明的內(nèi)容之后，本領(lǐng)域技術(shù)人員可 W對(duì)本發(fā)明作各種改動(dòng)或修改，運(yùn)些等價(jià)形式同樣落于本申請(qǐng)所附后權(quán)利要求書限定的范 圍。
[0011] W下試驗(yàn)表明本發(fā)明所述化學(xué)式的化合物具有明顯神經(jīng)保護(hù)作用，可在治療或預(yù) 防老年癡呆和帕金森藥物或保健品中應(yīng)用： 實(shí)驗(yàn)例1: 本發(fā)明W細(xì)胞存活率為指標(biāo)，通過MlT法檢測(cè)的結(jié)果，反映4a樣品對(duì)抗神經(jīng)毒素 6-0HDA的毒性作用大小，W說明其神經(jīng)保護(hù)作用。
[0012] 取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的PC12細(xì)胞，用完全培養(yǎng)基稀釋成3*105個(gè)/ml的細(xì)胞懸液，每孔 100y1接種于96孔板，置于37°C，5%C02培養(yǎng)箱中培養(yǎng)2地。移去培養(yǎng)基，加入100y1的 4a溶液(終濃度10ymol/ml，20ymol/ml，由基礎(chǔ)培養(yǎng)基作為溶劑配制)，模型組和對(duì)照組分 別加入100y1基礎(chǔ)培養(yǎng)基，每組4個(gè)復(fù)孔。藥物預(yù)處理化后，在給藥組與模型組分別加入 6-0HDA(終濃度為100ymol/1)，培養(yǎng)2地，加入5mg/ml的MTT10y1，37°C培養(yǎng)箱中培養(yǎng) 4h。棄去上清后每孔加入DMSO150yI，震蕩均勻，于540nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔吸光度值來反 映PC12細(xì)胞的存活率。 陽01引 上述MlT測(cè)定結(jié)果顯示(參考圖1，細(xì)胞由4a(IOyM, 20yM，40yM)預(yù)處理化，而 后加入100ym6-0HDA處理2地。數(shù)據(jù)均W對(duì)照組的百分比呈現(xiàn)，相比對(duì)照組##郵<0. 001， 相比模型組（100ym6-0HDA)卸<0. 05)，在只加入6-0HDA時(shí)，細(xì)胞存活率較對(duì)照組明顯下 降，說明6-0HDA對(duì)PC12細(xì)胞具有明顯的損傷作用；4a與6-0HDA共解育時(shí)，可W明顯抑制 細(xì)胞存活率的下降，說明4a具有顯著的神經(jīng)保護(hù)作用。
[0014] 6-0HDA損傷PC12細(xì)胞模型是研究帕金森病常用的神經(jīng)細(xì)胞模型，結(jié)合W上化學(xué) 分析，可見，4a具有神經(jīng)保護(hù)作用。 陽〇1引 實(shí)驗(yàn)例2: 本發(fā)明W細(xì)胞存活率為指標(biāo)，通過MlT法檢測(cè)的結(jié)果，反映4b樣品對(duì)抗神經(jīng)毒素 6-0HDA的毒性作用大小，W說明其神經(jīng)保護(hù)作用。
[0016] 取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的PC12細(xì)胞，用完全培養(yǎng)基稀釋成3*105個(gè)/ml的細(xì)胞懸液，每孔 100y1接種于96孔板，置于37°C，5%C02培養(yǎng)箱中培養(yǎng)2地。移去培養(yǎng)基，加入100y1的 4b溶液(終濃度10ymol/ml，20ymol/ml，由基礎(chǔ)培養(yǎng)基作為溶劑配制)，模型組和對(duì)照組分 別加入100y1基礎(chǔ)培養(yǎng)基，每組4個(gè)復(fù)孔。藥物預(yù)處理化后，在給藥組與模型組分別加入 6-0HDA(終濃度為100ymol/1)，培養(yǎng)2地，加入5mg/ml的MTT10y1，37°C培養(yǎng)箱中培養(yǎng) 地。棄去上清后每孔加入DMSOISOiil，震蕩均勻，于540nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔吸光度值來反 映PC12細(xì)胞的存活率。
[0017] 上述MlT測(cè)定結(jié)果顯示(參考圖2,細(xì)胞由4b(IOyM, 20yM，40yM)預(yù)處理化，而 后加入100ym6-0HDA處理2地。數(shù)據(jù)均W對(duì)照組的百分比呈現(xiàn)，相比對(duì)照組##郵<0. 001， 相比模型組（100ym6-0HDA)*p<0. 05，***p<0. 001)，在只加入6-0HDA時(shí)，細(xì)胞存活率較對(duì) 照組明顯下降，說明6-0HDA對(duì)PC12細(xì)胞具有明顯的損傷作用；4b與6-0HDA共解育時(shí)，可 W明顯抑制細(xì)胞存活率的下降，說明4b具有顯著的神經(jīng)保護(hù)作用。
[0018] 6-0HDA損傷PC12細(xì)胞模型是研究帕金森病常用的神經(jīng)細(xì)胞模型，結(jié)合W上化學(xué) 分析，可見，4b具有神經(jīng)保護(hù)作用。
[0019] 實(shí)驗(yàn)例3: 本發(fā)明W細(xì)胞存活率為指標(biāo)，通過MlT法檢測(cè)的結(jié)果，反映4c樣品對(duì)抗神經(jīng)毒素 6-0HDA的毒性作用大小，W說明其神經(jīng)保護(hù)作用。
[0020] 取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的PC12細(xì)胞，用完全培養(yǎng)基稀釋成3*105個(gè)/ml的細(xì)胞懸液，每孔 100y1接種于96孔板，置于37°C，5%C02培養(yǎng)箱中培養(yǎng)2地。移去培養(yǎng)基，加入100y1的 4c溶液(終濃度10ymol/ml，20ymol/ml，由基礎(chǔ)培養(yǎng)基作為溶劑配制)，模型組和對(duì)照組分 別加入100y1基礎(chǔ)培養(yǎng)基，每組4個(gè)復(fù)孔。藥物預(yù)處理化后，在給藥組與模型組分別加入 6-0HDA(終濃度為100ymol/1)，培養(yǎng)2地，加入5mg/ml的MTT10y1，37°C培養(yǎng)箱中培養(yǎng) 地。棄去上清后每孔加入DMSOISOiil，震蕩均勻，于540nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔吸光度值來反 映PC12細(xì)胞的存活率。 陽02U 上述MT測(cè)定結(jié)果顯示(參考圖3,細(xì)胞由4c(IOyM，20yM，40yM)預(yù)處理化，而 后加入100ym6-0HDA處理2地。數(shù)據(jù)均W對(duì)照組的百分比呈現(xiàn)，相比對(duì)照組##郵<0. 001， 相比模型組（100ym6-0HDA)***p<0. 001)，在只加入6-0HDA時(shí)，細(xì)胞存活率較對(duì)照組明顯 下降，說明6-OHDA對(duì)PC12細(xì)胞具有明顯的損傷作用；4c與6-OHDA共解育時(shí)，可W明顯抑 制細(xì)胞存活率的下降，說明4c具有顯著的神經(jīng)保護(hù)作用。
[0022] 6-0HDA損傷PC12細(xì)胞模型是研究帕金森病常用的神經(jīng)細(xì)胞模型，結(jié)合W上化學(xué) 分析，可見，4c具有神經(jīng)保護(hù)作用。
[0023] 實(shí)驗(yàn)例4: 本發(fā)明W細(xì)胞存活率為指標(biāo)，通過MlT法檢測(cè)的結(jié)果，反映4d樣品對(duì)抗神經(jīng)毒素6-0HDA的毒性作用大小，W說明其神經(jīng)保護(hù)作用。
[0024] 取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的PC12細(xì)胞，用完全培養(yǎng)基稀釋成3*105個(gè)/ml的細(xì)胞懸液，每孔 100y1接種于96孔板，置于37°C，5%C02培養(yǎng)箱中培養(yǎng)2地。移去培養(yǎng)基，加入100y1的 4d溶液(終濃度10ymol/ml，20ymol/ml，由基礎(chǔ)培養(yǎng)基作為溶劑配制)，模型組和對(duì)照組分 別加入100y1基礎(chǔ)培養(yǎng)基，每組4個(gè)復(fù)孔。藥物預(yù)處理化后，在給藥組與模型組分別加入 6-0HDA(終濃度為10