專利名稱：基因重組人溶菌酶針對抗耐藥菌在制藥中的新用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種基因重組人溶菌酶的新用途，特別是涉及制藥領(lǐng)域中基因重組人溶菌酶在針對耐藥菌的新用途。
背景技術(shù)：
抗生素創(chuàng)造了許多醫(yī)學(xué)奇跡，使許多疾病消失無蹤，如肺炎、腦膜炎、產(chǎn)褥熱、敗血癥、結(jié)核等。21世紀(jì)的今天，耐藥菌的發(fā)展令人觸目驚心。如耐青霉素的肺炎鏈球菌，過去對青霉素、紅霉素、磺胺等藥品都很敏感，現(xiàn)在幾乎“刀槍不入”。肺炎克雷伯氏菌對西力欣、復(fù)達(dá)欣等16種高檔抗生素的耐藥性高達(dá)51.85％-100％。而耐甲氧西林的金黃色葡萄球菌(MRSA)除萬古霉素外已經(jīng)無藥可治。從細(xì)菌的耐藥發(fā)展史可以看出，在某種新的抗生素出現(xiàn)以后，就有一批耐藥菌株出現(xiàn)。開發(fā)一種新的抗生素一般需要10年左右的時間，而一代耐藥菌的產(chǎn)生只要2年的時間，抗生素的研制速度遠(yuǎn)遠(yuǎn)趕不上耐藥菌的發(fā)展速度。目前急需開發(fā)一種針對不同耐藥菌株均有效的“超級抗生素”用于臨床治療。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種基因重組人溶菌酶在針對抗耐藥菌包括對革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌引起的抗耐藥性的新用途。
實(shí)際上，本發(fā)明涉及基因重組人溶菌酶作為制備治療由耐藥菌引起的肺炎或預(yù)防肺炎的藥中的應(yīng)用。
涉及基因重組人溶菌酶作為制備治療由耐藥菌引起的或預(yù)防氣管炎的藥中的應(yīng)用。
涉及基因重組人溶菌酶作為制備治療由耐藥菌引起的或預(yù)防腎炎的藥中的應(yīng)用。
涉及基因重組人溶菌酶作為制備治療由耐藥菌引起的或預(yù)防咽喉炎疾病的藥中的應(yīng)用。
涉及基因重組人溶菌酶作為制備治療由耐藥菌引起的或預(yù)防尿道炎的藥中的應(yīng)用。
涉及基因重組人溶菌酶作為制備治療由耐藥菌引起的或預(yù)防宮腔炎的藥中的應(yīng)用。
涉及基因重組人溶菌酶作為制備治療由耐藥菌引起的或預(yù)防膀胱炎的藥中的應(yīng)用。
涉及基因重組人溶菌酶作為制備治療由耐藥菌引起的或預(yù)防陰道炎的藥中的應(yīng)用。
涉及基因重組人溶菌酶作為制備治療由耐藥菌引起的或預(yù)防扁條腺炎的藥中的應(yīng)用。
涉及基因重組人溶菌酶作為制備治療由耐藥菌引起的或預(yù)防口腔炎的藥中的應(yīng)用。
涉及基因重組人溶菌酶作為制備治療由耐藥菌引起的或預(yù)防中耳炎的藥中的應(yīng)用。
涉及基因重組人溶菌酶作為制備治療由耐藥菌引起的或預(yù)防過敏性皮炎的藥中的應(yīng)用。
涉及基因重組人溶菌酶作為制備治療由耐藥菌引起的或預(yù)防濕疹的藥中的應(yīng)用。
涉及基因重組人溶菌酶作為制備治療或預(yù)防青春痘的藥中的應(yīng)用。
涉及基因重組人溶菌酶作為制備治療由耐藥菌引起的或預(yù)防鼻竇炎的藥中的應(yīng)用為了更好地理解本發(fā)明的實(shí)質(zhì)，下面將用基因重組人溶菌酶的藥理試驗(yàn)及結(jié)果來說明其在制藥領(lǐng)域中的新用途。
基因重組人溶菌酶以配制200毫升培養(yǎng)基為準(zhǔn)，用磷酸6毫升、硫酸鎂3克，硫酸鉀4克，氫氧化鉀1克，硫酸鈣1.5克，加蒸餾水至200毫升，高壓滅菌后接種甘油管種子，搖床轉(zhuǎn)數(shù)為每分鐘250轉(zhuǎn)，培養(yǎng)溫度為20-35℃，在恒溫床上培養(yǎng)36-48小時。進(jìn)行種子罐培養(yǎng)，最后進(jìn)行生產(chǎn)罐培養(yǎng)。將發(fā)酵表達(dá)完成的培養(yǎng)液進(jìn)行提取純化，對提取純化的蛋白濃縮液進(jìn)行凍干，測蛋白測活性保存。將合格的基因重組人溶菌酶凍干粉溶于水中制得針劑30000U/ml備用；制得噴霧劑、滴劑30000U/ml備用；制得膏(霜)劑30000U/g備用。制得干粉顆粒劑30000U/g備用。一對小鼠的模型試驗(yàn)A、耐藥肺炎球菌上呼吸道感染所致小鼠肺炎模型的制備選用健康昆明種小鼠10只，雌雄各半，體重為18-22克，挑取一定量的耐藥肺炎球菌用噴霧方式感染小鼠上呼吸道，致小鼠肺炎10只，感染后即靜脈注射受試藥30000U/ml/20g鼠重，觀察一周，每日三次給藥，記錄小鼠有效率。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明基因重組人溶菌酶對耐藥肺炎球菌上呼吸道感染所致小鼠肺炎有明顯療效。結(jié)果如下表

B、耐藥金葡球菌上呼吸道感染所致小鼠氣管炎、支氣管炎模型的制備選用健康昆明種小鼠20只，雌雄各半，體重為18-22克，分兩組，每組10只，選取一定量的耐藥金葡球菌用噴霧方式感染小鼠上呼吸道致小鼠氣管炎10只、支氣管炎10只，感染后即刻靜脈注射受試藥30000U/ml/20g鼠重，觀察一周，每日三次給藥，記錄小鼠有效率。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明基因重組人溶菌酶對耐藥金葡球菌上呼吸道感染所致小鼠氣管炎、支氣管炎有明顯療效。結(jié)果如下表

C、耐藥大腸桿菌尿道感染所致小鼠腎盂腎炎模型的制備選用健康昆明種小鼠10只，雌雄各半，體重為18-22克，挑取一定量的耐藥大腸桿菌用注射方式感染小鼠腎致小鼠腎腎炎10只，感染后即刻靜脈注射試藥30000U/ml/20g鼠重，觀察一周，每日三次給藥，記錄小鼠有效率。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明基因重組人溶菌酶對耐藥大腸桿菌尿道感染所致小鼠腎盂腎炎有明顯療效。結(jié)果如下表


D、耐藥化膿性鏈球菌上呼吸道感染所致小鼠急慢性化膿性咽喉炎模型的制備選用健康昆明種小鼠10只，雌雄各半，體重為18-22克，挑取一定量的耐藥化膿性鏈球菌用噴霧方式感染小鼠上呼吸道感染所致小鼠急慢性咽喉炎10只，感染后即刻靜脈注射受試藥30000U/ml/20g鼠重，觀察一周，每日三次給藥，記錄小鼠有效率。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明基因重組人溶菌酶對耐藥化膿性鏈球菌上呼吸道感染所致小鼠急慢性化膿性咽喉炎有明顯療效。結(jié)果如下表

E、耐藥大腸桿菌尿道感染所致小鼠尿道炎模型的制備選用健康昆明種小鼠10只，雌雄各半，體重為18-22克，挑取一定量的耐藥大腸桿菌用注射方式感染小鼠尿道致小鼠尿道炎10只，感染后即刻靜脈注射受試藥30000U/ml/20g鼠重，觀察一周，每日三次給藥，記錄小鼠有效率。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明基因重組人溶菌酶對耐藥大腸桿菌尿道感染所致小鼠尿道炎有明顯療效。結(jié)果如下表

F、耐藥大腸桿菌宮腔感染所致小鼠宮腔炎模型的制備選用健康昆明種小鼠10只，雌雄各半，體重為18-22克，挑取一定量的耐藥大腸桿菌用注射方式感染小鼠宮腔致小鼠宮腔炎10只，感染后即刻靜脈注射受試藥30000Uml/20g鼠重，觀察一周，每日三次給藥，記錄小鼠有效率。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明基因重組人溶菌酶對耐藥大腸桿菌宮腔感染所致小鼠宮腔炎有明顯療效。結(jié)果如下表

G、耐藥鏈球菌尿道感染所致小鼠膀胱炎模型的制備選用健康昆明種小鼠10只，雌雄各半，體重為18-22克，挑取一定量的耐藥鏈球菌用針劑方式感染小鼠膀胱致小鼠膀胱炎10只，感染后即刻針劑受試藥30000U/ml/20g鼠重，觀察一周，每日三次給藥，記錄小鼠有效率。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明基因重組人溶菌酶對耐藥鏈球菌尿路感染所致小鼠膀胱炎有明顯療效。結(jié)果如下表

H、耐藥鏈球菌感染所致小鼠陰道炎模型的制備選用健康昆明種小鼠10只，雌雄各半，體重為18-22克，挑取一定量的耐藥鏈球菌用涂抹方式感染小鼠陰道致小鼠陰道炎10只，感染后即靜脈注射受試藥30000U/ml/20g鼠重，觀察一周，每日三次給藥，記錄小鼠有效率。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明基因重組人溶菌酶對耐藥鏈球菌感染所致小鼠陰道炎有明顯療效。結(jié)果如下表

I、耐藥化膿性鏈球菌上呼吸道感染所致小鼠扁條體炎模型的制備選用健康昆明種小鼠10只，雌雄各半，體重為18-22克，挑取一定量的化膿性鏈球菌用噴霧方式感染小鼠上呼吸道致扁條體炎小鼠10只，感染后即靜脈注射受試藥30000u/ml/20g鼠重，觀察一周，每日三次給藥，記錄小鼠有效率。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明基因重組人溶菌酶對化膿性鏈球菌感染所致扁條體炎有明顯療效。結(jié)果如下表

J、厭氧性球菌上呼吸道感染所致小鼠口腔炎模型的制備選用健康昆明種小鼠10只，雌雄各半，體重為18-22克，挑取一定量的厭氧性球菌用噴霧方式感染小鼠上呼吸道致小鼠口腔炎10只，感染后即口腔噴霧受試藥1500μl/20g鼠重，觀察一周，每日六次給藥，記錄小鼠有效率。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明基因重組人溶菌酶對厭氧性球菌上呼吸道感染所致小鼠口腔炎有明顯療效。結(jié)果如下表

K、耐藥化膿性鏈球菌上呼吸道感染所致小鼠中耳炎模型的制備選用健康昆明種小鼠10只，雌雄各半，體重為18-22克，挑取一定量化膿性鏈球菌用噴霧方式感染小鼠上呼吸道致小鼠中耳炎10只，感染后滴定受試藥1500μl/20g鼠重，觀察一周，每日六次給藥，記錄小鼠有效率。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明基因重組人溶菌酶對耐藥化膿性鏈球菌感染所致小鼠中耳炎有明顯療效。結(jié)果如下表

L、對由革蘭氏陽性菌和部分陰性菌引起的濕疹、過敏性皮炎、青春痘等皮膚性感染的療效如下表

噴霧劑直接噴霧作用于病灶局部給藥，每日1-6次，每次1500u，成人與小兒相同，滴劑為每日1-6次，每次1500u-3000u。
膏(霜)劑為1500u-10000u/g外用每日2-3次，每次按病灶部位大小給藥。
以上結(jié)果，可以得出本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于(1)本發(fā)明對基因重組人溶菌酶發(fā)掘了新的醫(yī)療用途，開拓了一個新的應(yīng)用領(lǐng)域。
(2)本發(fā)明基因重組人溶菌酶安全無毒副作用，有很好的藥用前景。
(3)本發(fā)明對基因重組人溶菌酶來源豐富，制備工藝簡單，并可做成注射劑型、片劑、膠囊、噴霧劑、滴劑、膏劑等，使用方便，二用法與用量靜脈注射成人每日1～3次，每次100萬U～300萬U，小兒每日1～3次，每次50萬U～200萬U。
噴霧劑直接噴霧作用于病灶局部給藥，每日1～6次，每次1500u～30000u成人與小兒相同。
滴劑直接作用于病灶局部給藥每日1～6次，每次1500u～30000u。
膏(霜)劑直接作用于病灶局部給藥1500u～30000u/g外用，每日2～3次，每次按病灶部位大小給藥。
片劑、膠囊劑成人每日1～3次，每次100萬u～300萬u。小兒每日1～3次，每次50萬u～150萬u。
權(quán)利要求
1.基因重組人溶菌酶在制備治療由耐藥菌引起的肺炎或預(yù)防肺炎的藥中的應(yīng)用。
2.基因重組人溶菌酶在制備治療由耐藥菌引起的或預(yù)防氣管炎、咽喉炎的藥中的應(yīng)用。
3.基因重組人溶菌酶在制備治療由耐藥菌引起的或預(yù)防腎炎的藥中的應(yīng)用。
4.基因重組人溶菌酶在制備治療由耐藥菌引起的或預(yù)防膀胱炎、尿道炎的藥中的應(yīng)用。
5.基因重組人溶菌酶在制備治療由耐藥菌引起的或預(yù)防陰道炎、宮腔炎的藥中的應(yīng)用。
6.基因重組人溶菌酶在制備治療由耐藥菌引起的或預(yù)防扁條腺炎、口腔炎的藥中的應(yīng)用。
7.基因重組人溶菌酶在制備治療由耐藥菌引起的或預(yù)防中耳炎的藥中的應(yīng)用。
8.基因重組人溶菌酶在制備治療由耐藥菌引起的或預(yù)防過敏性皮炎、濕疹的藥中的應(yīng)用。
9.基因重組人溶菌酶在制備治療由耐藥菌引起的或預(yù)防青春痘的藥中的應(yīng)用。
10.基因重組人溶菌酶在制備治療由耐藥菌引起的或預(yù)防鼻竇炎的藥中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種基因重組人溶菌酶在針對耐藥菌的新用途，作為制備治療由耐藥菌引起的肺炎、氣管炎疾病、尿道炎、膀胱炎等疾病的藥中的應(yīng)用。可做成注射劑型、片劑、膠囊、噴霧劑、滴劑、膏劑等。本發(fā)明對基因重組人溶菌酶發(fā)掘了新的醫(yī)療用途，開拓了一個新的應(yīng)用領(lǐng)域。安全無毒副作用，有很好的藥用前景。并且基因重組人溶菌酶來源豐富，制備工藝簡單，使用方便。
文檔編號A61K38/43GK1439427SQ0311082
公開日2003年9月3日 申請日期2003年1月9日 優(yōu)先權(quán)日2003年1月9日
發(fā)明者張華 , 安米, 安獻(xiàn)祿 申請人:長春奇龍生物技術(shù)研究所