專利名稱：黑色素濃集激素受體的配體:取代的1－芐基－4－芳基哌嗪類似物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明一般性地涉及1-芐基-4-芳基哌嗪和哌啶類似物。此類化合物中的某些是黑色素濃集激素受體的調(diào)控因子。本發(fā)明進(jìn)一步涉及此類化合物在治療多種代謝、進(jìn)食和性疾病中的應(yīng)用，以及作為檢測和定位MCH受體的探針的用途。
背景技術(shù)：
黑色素濃集激素，或MCH，是一種由19個氨基酸組成的環(huán)狀神經(jīng)肽，其功能是作為食物攝取和能量平衡的調(diào)控因子(modulator)。MCH產(chǎn)生于許多脊椎動物，包括人類的下丘腦，并作為下丘腦側(cè)面和后面的神經(jīng)傳遞素。這兩個區(qū)域與某些行為有關(guān)，例如進(jìn)食、飲水、進(jìn)攻(aggression)和性行為。MCH也產(chǎn)生于多種周邊位置，包括胃腸道和睪丸。
與進(jìn)行相同處理的對照動物相比，人們發(fā)現(xiàn)將MCH通過I.C.V注射進(jìn)入下丘腦的側(cè)室，提高了大鼠體內(nèi)的熱量消耗，從而確立了MCH在進(jìn)食行為和體重中的預(yù)先推定作用。進(jìn)一步地，具有ob/ob基因型的大鼠與瘦的ob/+基因型的大鼠相比，在MCHmRNA表達(dá)方面增長了50-80％。由于缺乏食欲(hypophagia)和代謝速度增長，MCH基因敲除(knockout)的小鼠比其生產(chǎn)MCH的同胞更為瘦弱。
通過結(jié)合到特定的受體，可調(diào)節(jié)MCH的活性。Lakaye，等人.(BBA(1998)1401216-220)首先報道了MCH1型的受體(MCHR1)為具有353個氨基酸的，7-橫跨膜的，α螺旋的，G-偶聯(lián)的蛋白質(zhì)受體。MCHR1也被稱為SLC-1。對大鼠腦部的免疫組織化學(xué)研究表明MCHR1受體在大腦內(nèi)被廣泛表達(dá)。人們在嗅結(jié)節(jié)、大腦皮層、黑質(zhì)(substantia nigra)、海馬的基底前腦CA1、CA2、和CA3域、扁桃體以及在下丘腦、丘腦、中腦和后腦的核心處發(fā)現(xiàn)了MCHR1受體表達(dá)。在下丘腦的腹正中和背正中中心處，即在腦部已知與進(jìn)食行為相關(guān)的兩個部分檢測到了強(qiáng)信號。通過結(jié)合MCH，在HEK293細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行表達(dá)的MCHR1受體對細(xì)胞內(nèi)鈣的劑量依賴性釋放進(jìn)行調(diào)節(jié)。已證實表達(dá)MCH受體的細(xì)胞顯示出對毛喉素-提高型環(huán)狀A(yù)MP具有百日咳毒素敏感性劑量-依賴型的抑制作用，這表明了受體與Gi/OG-蛋白質(zhì)α亞單元相偶聯(lián)。
近來，已經(jīng)鑒定出第二種MCH受體(MCHR2)(An等人.，Proc.Natl.Acad.Sci.USA(2001)987576-7581；Sailer等人.，Proc.Natl.Acad.Sci.USA(2001)987564-7569；Hill等人.，J.Biol.Chem.(2001)27620125-20129；Mori等人.，Biochem.Biophys.Res.Commun.(2001)2831013-1018).MCHR2的全部氨基酸中有超過30％的部分與RCHR1中完全相同，且已經(jīng)檢測到MCHR2在腦部的大部分區(qū)域內(nèi)與MCHR1具有相似的表達(dá)方式。
由于MCH是一種食物攝取和能量平衡的重要調(diào)控因子，因此能夠調(diào)節(jié)MCH受體活性的調(diào)控因子特別是MCHR1是特別需要的，其適用于治療肥胖癥、進(jìn)食失調(diào)(如易餓病和厭食癥)、性疾病(如性快感缺失或心理性陽痿)以及代謝疾病如糖尿病。小分子，MCH受體的非肽拮抗劑對于此類治療特別有價值。本發(fā)明實現(xiàn)了這種需要，并提供了進(jìn)一步相關(guān)的優(yōu)點。
發(fā)明概述本發(fā)明提供了MCH與MCH受體相結(jié)合和/或MCH受體活性起抑制或提高作用的MCH受體調(diào)控因子。此類調(diào)控因子包括取代的1-芐基-4-芳基哌嗪或哌啶類似物，其在MCH受體結(jié)合試驗和/或MCH受體-調(diào)節(jié)信號轉(zhuǎn)換試驗(鈣移動試驗)中顯示出1微摩爾或更小的Ki值，且其特征在于下列通式 通式I或其藥學(xué)上可接受的鹽，其中V為單鍵或-(C＝O)-；W為N，CH，COH或CCN；
X為鹵素，羥基，硝基，氰基，-COOH，氧基或式L-M的基團(tuán)；Y和Z分別獨立地為(i)CH，(ii)N，或(iii)與R5相連接成為包括W和V，且具有5到8個環(huán)原子地碳環(huán)或雜環(huán)，條件是Y和Z不都是N；n為1或2；R1和R2分別獨立地選自氫，鹵素，羥基，硝基，氰基，-COOH，氧基或式L-M的基團(tuán)，條件是當(dāng)R1和R2為氫時，V為-(C＝O)-；R3為(i)選自氫，(C1-C6)烷基，(C2-C6)烯基和鹵代(C1-C6)烷基；或(ii)與R6和R10之一或兩者相連接形成具有一個環(huán)或兩個稠合環(huán)的碳環(huán)或雜環(huán)基團(tuán)，其中的每個環(huán)包括5到8個環(huán)原子和0，1或2個獨立選自氧、氮或硫的雜原子。
R4為氫，(C1-C6)烷基或鹵代(C1-C6)烷基；R5為(i)每次出現(xiàn)時都獨立地選自氫，鹵素，羥基，硝基，氰基，氨基，氧基，(C1-C6)烷基，(C2-C6)烯基，(C2-C6)炔基，(C1-C6)烷氧基，鹵代(C1-C6)烷基，鹵代(C1-C6)烷氧基，單-或二-(C1-C6)烷基氨基，以及氨基(C1-C6)烷基；或(ii)與R6，Y或Z相連接形成具有5到8個環(huán)原子的碳環(huán)或雜環(huán)；R6為(i)選自氫，鹵素，羥基，硝基，氰基，氨基，氧基，(C1-C6)烷基，(C2-C6)烯基，(C2-C6)炔基，(C1-C6)烷氧基，鹵代(C1-C6)烷基，鹵代(C1-C6)烷氧基，單-或二-(C1-C6)烷基氨基，以及氨基(C1-C6)烷基；或(ii)與R3或R5相連接形成前述的碳環(huán)或雜環(huán)；R7為(i)選自氫，鹵素，羥基，硝基，氰基，-COOH，氧基；以及式L-M基團(tuán)；或(ii)與R8或R12相連接形成稠合的5-或6-員碳環(huán)或雜環(huán)基團(tuán)；R8為(i)選自氫，鹵素，羥基，硝基，氰基，-COOH，氧基；以及式L-M的基團(tuán)；或(ii)與R7或R11相連接形成稠合的5-到10-員碳環(huán)或雜環(huán)基團(tuán)；U為N，O或CR9；T為N，O或CR10；R9為(i)選自氫，鹵素，羥基，硝基，氰基，-COOH，氧基；以及式L-M的基團(tuán)；或
(ii)與R10或R11相連接形成稠合的5-到10-員碳環(huán)或雜環(huán)基團(tuán)；Ri0為(i)選自氫，鹵素，羥基，硝基，氰基，-COOH，氧基；以及式L-M的基團(tuán)；或(ii)與R3，R8或R9相連接形成碳環(huán)或雜環(huán)基團(tuán)；R11為(i)選自氫，鹵素，羥基，硝基，氰基，-COOH，氧基；以及式L-M的基團(tuán)；或(ii)與R8和R9中之一或全部相連接形成稠合的5-到10-員碳環(huán)或雜環(huán)基團(tuán)；R12為(i)每次出現(xiàn)時都獨立選自氫，鹵素，羥基，硝基，氰基，氨基，氧基，(C1-C6)烷基，(C2-C6)烯基，(C2-C6)炔基，(C1-C6)烷氧基，鹵代(C1-C6)烷基，鹵代(C1-C6)烷氧基，單-或二-(C1-C6)烷基氨基，以及氨基(C1-C6)烷基；或(ii)與R7相連接形成稠合的碳環(huán)或雜環(huán)基團(tuán)；每次出現(xiàn)的L獨立地選自單鍵，-NR11-，-O-，-SO2-，-SO2NH-，C(＝O)NR11-和NR11C(＝O)-，其中每次出現(xiàn)的R11獨立地選自氫，(C1-C6)烷基，(C2-C6)烯基，(C2-C6)炔基和鹵代(C1-C6)烷基；以及每次出現(xiàn)的M獨立地選自氫，(C1-C6)烷基，(C2-C6)烯基，(C2-C6)炔基和鹵代(C1-C6)烷基，氨基(C1-C6)烷基和5到10員碳環(huán)；條件是當(dāng)R11為鹵素且V為單鍵時，至少R10，R3和R4的其中之一不為氫。
本發(fā)明進(jìn)一步提供了MCH受體調(diào)控因子，包括一個或多個上述的化合物，其與至少一個其它的成分，如藥物、目標(biāo)組分或載體相聯(lián)合(即相結(jié)合)。
另一方面，本發(fā)明提供了藥物組合物，包括上述的一種化合物或調(diào)控因子，其與一種生理學(xué)上可接受的載體或賦形劑相結(jié)合。在某些實施方式中，本發(fā)明提供的藥物組合物可進(jìn)一步地包括一種或多種其它的活性劑(即，藥物)。本發(fā)明提供的藥物組合物可被制劑成例如注射性流體，氣霧劑，乳膏，凝膠，丸劑，膠囊，糖漿或經(jīng)皮膚的貼片。
另一方面，本發(fā)明進(jìn)一步提供了治療與MCH受體活化相關(guān)的疾病和失調(diào)的方法，包括對需要此類治療的患者給予有效量的上述的化合物或調(diào)控因子。此類疾病和失調(diào)包括例如進(jìn)食失調(diào)(如肥胖癥和易餓病)，性失調(diào)，糖尿病，心臟疾病和中風(fēng)?；衔锘蛘{(diào)控因子可通過口服給藥，或通過其它方式例如鼻內(nèi)，靜脈內(nèi)或局部方式進(jìn)行給藥。在某些實施方式中，患者為人類，陪伴型動物或牲畜。
更進(jìn)一步，本發(fā)明提供了上述化合物，其中上述化合物是被放射性同位素標(biāo)記的。
在另一方面，本發(fā)明提供了在樣品中測定MCH受體是否存在的方法，包括以下步驟(a)使樣品和含有上述化合物的試劑在允許該試劑和MCH受體相結(jié)合的條件下接觸；以及(b)檢測與MCH受體相結(jié)合的試劑的量。在某些實施方式中，該試劑為放射性同位素標(biāo)記的化合物，且檢測步驟包括(i)將結(jié)合的試劑與未結(jié)合的試劑分離；并(ii)確定樣品中已結(jié)合的試劑的量。檢測可采用例如放射自顯影術(shù)實現(xiàn)。
另一方面，本發(fā)明進(jìn)一步提供了對將配體結(jié)合到MCH受體進(jìn)行調(diào)節(jié)的方法。某些此類方法在體外進(jìn)行，包括使MCH受體和上述的化合物或調(diào)控因子在一定條件下相接觸，其量足以對MCH與MCH受體的結(jié)合進(jìn)行可檢測性地調(diào)節(jié)。另一些此類方法可在體內(nèi)進(jìn)行，包括使表達(dá)MCH受體的細(xì)胞與上述的化合物或調(diào)控因子在其量足以對MCH與在體外表達(dá)克隆MCH受體的細(xì)胞的結(jié)合進(jìn)行可檢測性調(diào)節(jié)的條件下相接觸?？刹捎美绫景l(fā)明所提供的配體結(jié)合試驗檢測到對MCH結(jié)合的調(diào)節(jié)。
本發(fā)明進(jìn)一步提供了在病人中對MCH結(jié)合到MCH受體進(jìn)行調(diào)節(jié)的方法，包括對患者(即人類或非人類動物)給予上述的化合物或調(diào)控因子。例如，患者可包括陪伴型動物如狗。
在上述方法的某些實施方式中，調(diào)節(jié)是抑制和/或MCH受體是人類的MCH受體。
另一方面，本申請?zhí)峁┝苏{(diào)節(jié)MCH受體的信號-轉(zhuǎn)換活性的方法，包括使MCH受體，在適合于MCH結(jié)合到MCH受體的條件下，在體內(nèi)或是體外與足量的MCH受體調(diào)控因子相接觸。優(yōu)選地，MCH受體為存在于下丘腦中的MCH1受體。
本發(fā)明還提供了包裝的藥物制劑，包括(a)包裝內(nèi)的上述藥物組合物；以及(b)對使用組合物對遭受與MCH受體活性相關(guān)的疾病或病癥的患者進(jìn)行治療的說明。此類失調(diào)包括如進(jìn)食失調(diào)(如肥胖癥和易餓病)，性失調(diào)，糖尿病，心臟性疾病和中風(fēng)。
通過以下的詳述，可使本發(fā)明的各方面變得明顯。
發(fā)明詳述如上所述，本發(fā)明提供了MCH受體調(diào)控因子，其含有取代的1-芐基-4-芳基哌嗪和哌啶類似物的小分子MCH受體配體。如下文的進(jìn)一步詳細(xì)討論，此類調(diào)控因子可在體外或體內(nèi)應(yīng)用，以抑制或提高在多種環(huán)境中MCH與MCH受體的結(jié)合。
在詳細(xì)描述本發(fā)明之前，先提供本發(fā)明中所采用的定義和某些術(shù)語是有幫助的。對本發(fā)明的化合物一般采用標(biāo)準(zhǔn)命名法。對于具有不對稱中心的化合物，應(yīng)該理解為涵蓋了所有的光學(xué)異構(gòu)體及其混合物(除非特別指出)。此外，具有碳-碳雙鍵的化合物可能以Z-或E-形式出現(xiàn)，其所有異構(gòu)體形式都包含于本發(fā)明中。當(dāng)化合物以多種互變異構(gòu)體形式存在時，本發(fā)明并不限于任何一種特定的互變異構(gòu)體，而是包括了所有的互變異構(gòu)體形式。本發(fā)明采用包括多個變量的通式對某些化合物進(jìn)行描述。除非特別指出，此類通式中的任何變量相對于其它變量是獨立定義的，且通式I中任何一個多次出現(xiàn)的變量在每次出現(xiàn)時也是獨立定義的。此外很明顯的是，允許對取代基和/或變量進(jìn)行結(jié)合，但條件是結(jié)合生成了穩(wěn)定的化合物。
本發(fā)明中，“(C1-C6)烷基”是指任選取代的、具有1-6個碳原子的直鏈或支鏈烷基基團(tuán)或環(huán)烷基基團(tuán)，例如甲基、乙基、丙基、異丙基、正丁基、仲-丁基、叔-丁基、戊基、2-戊基、異戊基、新戊基、己基、2-己基、3-己基、3-甲基戊基、環(huán)丙基、環(huán)丙基甲基和環(huán)己基。(C1-C6)烷基基團(tuán)可通過(C1-C6)烷基中的任何化學(xué)合適部分與利害相關(guān)的分子內(nèi)的某個原子相結(jié)合。優(yōu)選的烷基基團(tuán)包括甲基、乙基、丙基、丁基、環(huán)丙基、環(huán)丙基甲基、環(huán)戊基和環(huán)己基。特別優(yōu)選的烷基基團(tuán)為(C1-C4)烷基，特別是甲基和乙基。
相似地，“(C2-C6)烯基”是指任選取代的，具有2-6個碳原子的直鏈或支鏈烯基基團(tuán)或環(huán)烯基基團(tuán)，優(yōu)選(C2-C4)烯基。在烯基基團(tuán)中存在一個或多個不飽和碳-碳雙鍵，且碳-碳雙鍵可能存在于沿著鏈長的任何一個穩(wěn)定點(如乙烯基，烯丙基和異丙基)?！?C2-C6)炔基”是指具有2-6個碳原子的直鏈或支鏈炔基基團(tuán)或環(huán)炔基基團(tuán)，優(yōu)選(C2-C4)炔基。在炔基基團(tuán)中存在一個或多個不飽和碳-碳叁鍵，且碳-碳叁鍵可能存在于沿著鏈長的任何一個穩(wěn)定點(如乙炔基和炔丙基)?！胺€(wěn)定點”是一種鍵，當(dāng)其為不飽和鍵時，得到化學(xué)穩(wěn)定的化合物(即，能被分離，表征和測試生物活性的化合物)。
本發(fā)明中“(C1-C6)烷氧基”是指任選取代的，通過氧橋連接的具有1-6個碳原子的線性、支鏈烷基基團(tuán)或環(huán)烷基。(C1-C6)烷氧基包括如甲氧基、乙氧基、丙氧基、異丙氧基、正丁氧基、仲-丁氧基、叔-丁氧基、正戊氧基、2-戊氧基、3-戊氧基、異戊氧基、新戊氧基、己氧基、2-己氧基、3-己氧基、3-甲基戊氧基。一般優(yōu)選(C1-C4)烷氧基，特別是甲氧基和乙氧基。同樣地，“(C1-C6)烷硫基”是指通過一個硫橋連接的具有1-6個碳原子的烷基基團(tuán)。
“(C2-C6)烷?；笔侵冈诰€性、支鏈或環(huán)烷基排列中具有2-6個碳原子的酰基基團(tuán)。一般優(yōu)選(C2-C4)烷?；?。
“(C2-C6)烷酮基”是指在線性、支鏈或環(huán)狀排列中具有2-6個碳原子的酮取代基。一般優(yōu)選(C2-C4)烷酮基。
“(C1-C6)烷氧基羰基”是指通過羰基連接的烷氧基取代基。換句話說，烷氧基羰基取代基具有的通式結(jié)構(gòu)為-C(＝O)-O-烷基。
“(C2-C6)烷基酰胺基”是指通過酰胺基連接的烷基取代基。換句話說，烷基酰胺基取代基具有的通式結(jié)構(gòu)為-C(＝O)-NH-烷基。
“(C2-C6)烷基亞磺酰胺基”是指通過氨磺?；B接的烷基取代基。換句話說，烷基亞磺酰胺基取代基具有的通式結(jié)構(gòu)為-SO2-NH-烷基。
“(C1-C6)烷酰基氧基”是指通過氧橋連接的烷?；鶊F(tuán)。換句話說，烷?；趸哂械耐ㄊ浇Y(jié)構(gòu)為-O-C(＝O)-烷基。一般優(yōu)選(C1-C4)烷?；趸?br> 術(shù)語“(C1-C6)碳酸酯”是指通過氧橋連接的烷氧基羰基基團(tuán)。換句后說，碳酸酯基團(tuán)具有的一般結(jié)構(gòu)為-O-C(＝O)-O-烷基。一般優(yōu)選(C1-C4)碳酸酯基團(tuán)。
同樣地，“(C2-C6)烷基醚”是指通過碳-碳鍵連接的具有2到6個碳原子所取代的醚取代基。優(yōu)選(C2-C6)烷基醚基團(tuán)。
本發(fā)明中所采用的術(shù)語“(C1-C6)氨基甲酸酯基”是指通式結(jié)構(gòu)為-N-C(＝O)-O-烷基。通常優(yōu)選(C1-C4)氨基甲酸酯。
本發(fā)明中所采用的術(shù)語“氧基”是指酮基(C＝O)基團(tuán)。作為非芳香環(huán)取代基的氧基基團(tuán)導(dǎo)致了-CH2-轉(zhuǎn)化為-C(＝O)-。很明顯的是，在芳香環(huán)上引入氧基取代基破壞了芳香性。
術(shù)語“肟”是指下列結(jié)構(gòu)的基團(tuán) 如果指定肟為取代基，則只有加入了＝NOH，碳原子一般為基本結(jié)構(gòu)的一部分。當(dāng)然，肟的碳原子可能為碳環(huán)或雜環(huán)上的一員。在環(huán)為芳香環(huán)的情況下，很明顯的是，引入肟取代基就會破壞芳香性。
術(shù)語“鹵素”包括氟、氯、溴和碘?！胞u代烷基”可以是任選被一個或多個鹵素取代的枝化或直鏈的飽和脂肪烴基團(tuán)?！胞u代(C1-C6)烷基”具有1到6個碳原子；“鹵代(C1-C4)烷基”具有1到4個碳原子。鹵代烷基的例子包括但不限于單-，二-或三-氟甲基；單-，二-或三-氯甲基；單-，二-，三-，四-或五-氟乙基；以及單-，二-，三-，四-或五-氯乙基。典型的鹵代烷基基團(tuán)為三氟甲基和二氟甲基。本發(fā)明的化合物中存在的鹵代烷基優(yōu)選不超過5個，更優(yōu)選不超過3個。術(shù)語“鹵代烷氧基”是指通過氧橋連接的上述鹵代烷基?！胞u代(C1-C6)烷氧基”具有1到6個碳原子。
本發(fā)明中所采用的“取代基”，是指以共價鍵接到相關(guān)分子(amolecular ofinterest)內(nèi)的某個原子上的分子的某一部分。例如，“環(huán)取代基”可為通過共價鍵接到環(huán)的一個原子上(優(yōu)選碳或氮)的鹵素、烷基、烷氧基、鹵代烷基或其它本發(fā)明中所討論的基團(tuán)等部分。術(shù)語“取代”是指以上述的一個取代基代替分子結(jié)構(gòu)中的氫，結(jié)果不超過指定原子的化合價，并由于該取代而獲得了化學(xué)穩(wěn)定的化合物(即，能被分離，表征并對其生物活性進(jìn)行測試的化合物)。
“任選取代”的基團(tuán)是未取代或是在一個或多個可能的位置上，通常為1，2，3或4位上被獨立選自以下的非氫的一個或多個其它取代基所取代鹵素，氰基，硝基，氧基，肟，(C1-C6)烷基，(C2-C6)烯基，(C2-C6)炔基，(C1-C6)烷氧基，(C1-C6)烷硫基，羥基，氨基，單-或二-(C1-C6)烷基氨基，鹵代(C1-C6)烷基，鹵代(C1-C6)烷氧基，(C1-C6)烷酰基，(C1-C6)烷酮基，(C1-C6)烷氧基羰基，(C1-C6)烷酰基氧基，(C1-C6)碳酸酯基，(C1-C6)烷基醚，(C1-C6)氨基甲酸酯基，-COOH，-CONH2，單-或二-(C1-C8)烷基酰胺基，-SO2NH2，單-和二-(C1-C8)烷基亞磺酰胺基，以及下述的碳環(huán)或雜環(huán)基團(tuán)。優(yōu)選地，任選取代的基團(tuán)被0到5個獨立挑選的取代基所取代，更優(yōu)選被0到3個獨立挑選的取代基所取代。取代基可位于任何得到穩(wěn)定化合物的點上。
不位于兩個字母或符號之間的短線(“-”)用于表明取代基的連接點。例如-CONH2通過碳原子進(jìn)行連接。
本發(fā)明中所采用的“雜原子”是指氧，硫或氮。
“碳環(huán)(carbocycle)”或“碳環(huán)基團(tuán)”包括至少一個完全由碳-碳鍵形成的環(huán)(即碳環(huán)(carbocyclic ring))。除非特別指明，此類環(huán)可為芳香性或非芳香性的(不飽和，部分飽和或飽和)，并任選被取代。本發(fā)明中所采用的術(shù)語“碳環(huán)(carbocyclic ring)”包括環(huán)碳原子未被取代或發(fā)生下述取代。碳環(huán)基團(tuán)一般具有1到3個稠合碳環(huán)或懸垂的(pendant)碳環(huán)，優(yōu)選為一個環(huán)或兩個稠合的環(huán)。通常，每個環(huán)包括3到8個(優(yōu)選為5到7個)環(huán)原子；包括稠合或懸垂的環(huán)系統(tǒng)的碳環(huán)基團(tuán)典型具有9到14個環(huán)原子。“環(huán)原子”是構(gòu)成環(huán)一部分并直接鍵接到兩個其它的此類原子上的碳原子或雜原子。例如，無論環(huán)取代基內(nèi)存在多少個原子，苯基或吡啶基基團(tuán)始終具有6個環(huán)原子。碳環(huán)基團(tuán)的代表性例子是任選取代的環(huán)烷基基團(tuán)(如環(huán)戊烷和環(huán)己烷)，以及芳香基團(tuán)如任選取代的苯基，芐基，萘基，苯氧基，芐氧基和苯基乙酮基(phenylethanonyl)。優(yōu)選的取代包括上述所列的取代。如果環(huán)包括一種或多種取代，每一種取代獨立于任何其它取代。含有1個碳環(huán)或2個稠合碳環(huán)(共有5到10個環(huán)原子)的(C5-C10)碳環(huán)基團(tuán)優(yōu)選發(fā)生上述的任選取代。
“雜環(huán)”或“雜環(huán)基團(tuán)”包括至少一個環(huán)，其中至少一個環(huán)原子為雜原子(即，N，O或S)，且其余的環(huán)原子為碳原子(此類環(huán)指雜環(huán))。優(yōu)選地，雜環(huán)基團(tuán)包括1-4個雜原子；在某些實施方式中，優(yōu)選含有1或2個雜原子的基團(tuán)。雜環(huán)基團(tuán)一般具有1到3個稠合或懸垂的環(huán)，優(yōu)選一個環(huán)或兩個稠合環(huán)，其中的每一個被任選取代。本發(fā)明中所采用的術(shù)語“雜環(huán)”包括其中碳環(huán)原子發(fā)生下述取代的環(huán)。雜環(huán)基團(tuán)中的每一個環(huán)獨立地為芳香性或非芳香性的(不飽和，部分飽和或飽和)。通常，每個環(huán)包括3到8個(優(yōu)選為5到7個)環(huán)原子；包括稠合或懸垂的環(huán)系統(tǒng)的雜環(huán)基團(tuán)典型具有9到14個環(huán)原子。雜環(huán)基團(tuán)可任選被1到5個取代基所取代，每一個取代基獨立地選自上述的任意一個取代基。除非特別指明，雜環(huán)基團(tuán)可為芳香性或非芳香性的(例如，雜環(huán)烷基如哌嗪或地西泮(diazepan))。優(yōu)選包括1個雜環(huán)或2個稠合環(huán)(其中至少一個為雜環(huán)，共有3到10個環(huán)原子)的3-到10-員雜環(huán)基團(tuán)，其任選發(fā)生上述的取代；特別優(yōu)選5-到10-員的雜環(huán)基團(tuán)(即具有5到10個環(huán)原子和任意取代基)。
雜環(huán)基團(tuán)的例子包括但不限于吖啶基，吖辛因基，苯并咪唑基，苯并呋喃基，苯并硫代(benzothio)-呋喃基，苯并苯硫基(benzothiophenyl)，苯并噁唑基，苯并噻唑基，苯并三唑基，苯并四唑基，苯并異噁唑基，苯并異噻唑基，苯并咪唑啉基，咔唑基，NH-咔唑基，咔啉基，苯并二氫吡喃基，苯并吡喃基，肉啉基，十氫喹啉基，地西泮基(diazepanyl)，二氧戊環(huán)基，二噻嗪基，二氫氟四氫呋喃基(dihydrofurotrtrahydrofuran)，呋喃基，呋咱基，咪唑烷基，咪唑啉基，咪唑基，吲唑基，假吲唑基(indolenyl)，二氫吲哚基，中氮茚基，吲哚基，異苯并呋喃基，異苯并二氫吡喃基，異吲唑基，異二氫氮茚基，異氮茚基，異喹啉基，異噻唑基，異噁唑基，嗎啉基，萘啶基，八氫異喹啉基，噁二唑基，噁唑烷基，噁唑基，噁唑烷基，嘧啶基，菲啶基，菲咯啉基(phenanthralinyl)，吩嗪基，吩噻嗪基，氧硫雜蒽基(phenoxathiinyl)，吩噁嗪基，酞嗪基，哌嗪基，哌啶基，碟啶基，嘌呤基，吡喃基，吡嗪基，吡唑烷基，吡唑啉基，吡唑基，噠嗪基，吡啶并噁唑基，吡啶并咪唑基，吡啶并噻唑基，吡啶基(pyridinyl)，吡啶基，嘧啶基，吡咯烷基，吡咯啉基，吡咯基，喹唑啉基，喹啉基，喹喔啉基，喹寧環(huán)基，四氫呋喃基，四氫異喹啉基，四氫喹啉基，噻二嗪基，噻二唑基，噻蒽基，噻唑基，噻吩基，噻吩并噻唑基，噻吩并噁唑基，噻吩并咪唑基，苯硫基，三嗪基和呫噸基。在某些實施方式中，優(yōu)選吡啶環(huán)。明顯的是，任何此類的雜環(huán)基團(tuán)都可被一個或多個上述的取代基所取代。
術(shù)語“MCH受體”是指包括任何MCH受體序列的蛋白質(zhì)(即一類細(xì)胞蛋白質(zhì)，其能可檢測性地結(jié)合MCH，并對細(xì)胞內(nèi)鈣的劑量依賴型釋放進(jìn)行調(diào)節(jié))。一般優(yōu)選天然存在的哺乳動物(特別是人類和猴子)的MCH1型和MCH2型受體序列。MCH受體可包括整個內(nèi)源序列，或可包括其它的成分(如N-端前導(dǎo)序列)，其基本不會抑制受體結(jié)合MCH的能力(即，保留了至少50％的受體對MCH的結(jié)合親和力)?？梢允褂帽粍h節(jié)的MCH受體序列或含有氨基酸缺失、取代基、添加或變體的序列(例如嵌合受體)，條件是MCH受體的結(jié)合特性沒有大量消失(即保留了至少50％的內(nèi)源MCH-結(jié)合親和力)。候選MCH受體對MCH的結(jié)合親和力可用本文提供的標(biāo)準(zhǔn)配體結(jié)合試驗評估。
“MCH受體調(diào)控因子”，本發(fā)明中也稱為“調(diào)控因子”，是一種對MCH結(jié)合到一個或多個MCH受體，以及對MCH受體-調(diào)節(jié)的信號轉(zhuǎn)換進(jìn)行調(diào)節(jié)(即增加或降低)的化合物。換句話說，調(diào)控因子可為MCH受體激動劑或拮抗劑。本發(fā)明提供的調(diào)控因子包括取代的1-芐基-4-芳基哌嗪或哌啶類似物的化合物，其具有MCH受體調(diào)節(jié)活性。調(diào)控因子可基本上由這樣的化合物組成，或可進(jìn)一步包括一個或多個附加的部分，條件是活性化合物的調(diào)節(jié)活性基本上沒有減少(即采用本發(fā)明提供的結(jié)合試驗測定而得的增長或降低MCH結(jié)合到MCH受體上的能力的下降幅度不超過50％)。此類其它的部分包括如目標(biāo)部分、其它的活性劑和載體，其中的任何一種可通過多種標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)如直接縮合，或通過雙-或多-官能連接物連接到活性化合物上?；蛘?，在無共價連接的情況下，此類附加的部分可與活性化合物結(jié)合。如果調(diào)控因子以10倍，優(yōu)選100倍，更優(yōu)選為1000倍的Ki值結(jié)合到MCH受體(總結(jié)合減去非特定結(jié)合)，該Ki值小于調(diào)控因子結(jié)合到其它G蛋白質(zhì)-偶聯(lián)受體時所測得的Ki值，則調(diào)控因子“特定地”結(jié)合到MCH受體上。如果在MCH受體上的Ki值小于1微摩爾，優(yōu)選小于500毫微摩爾，100毫微摩爾或10毫微摩爾時，調(diào)控因子以“高親和力”結(jié)合。分別采用本發(fā)明實施例2和3中所提供的結(jié)合以及鈣移動試驗，可對MCH結(jié)合到MCH受體，以及MCH受體-調(diào)節(jié)的信號轉(zhuǎn)換的效果進(jìn)行評估試驗。
本發(fā)明中所采用的“取代的1-芐基-4-芳基哌嗪或哌啶類似物”是任何符合通式I結(jié)構(gòu)的化合物。
“目標(biāo)部分”是增加調(diào)控因子在患者的目標(biāo)位置附近的局部濃度的物質(zhì)(如一種化合物或一個細(xì)胞)。本領(lǐng)域有大量公知的目標(biāo)部分，包括其抗體和片斷，受體，配體和其它結(jié)合到目標(biāo)組織，或與目標(biāo)組織鄰近的細(xì)胞的分子。
“載體”、“載體基團(tuán)”或“載體分子”是在對患者進(jìn)行給藥前可與活性化合物相聯(lián)合的物質(zhì)，其目的一般是控制化合物的穩(wěn)定性或生物利用度。用在此類制劑中的載體一般是生物相容的，并且可能是可生物降解的。載體包括有單價或多價分子，如血清白蛋白(如人的或牛的)，卵白蛋白，蛋白質(zhì)，聚賴氨酸和聚糖如氨基葡聚糖和聚酰胺型胺類。載體也包括固體支持材料如微珠或微粒，包括如聚乙酸酯(polyactate)聚甘醇酸酯，聚(丙交酯-共-乙交酯)，聚丙烯酸酯，乳膠，淀粉，纖維素或葡聚糖。載體可以多種形式支撐化合物，包括共價結(jié)合(直接或通過連接物基團(tuán))，非共價相互作用或混合。
本發(fā)明中“連接物”是不包括有可檢測性調(diào)節(jié)MCH結(jié)合到MCH受體上的化合物的任何分子，以及能共價連接到至少兩個化學(xué)部分的分子。連接物可用來將另一部分連接到調(diào)節(jié)MCH結(jié)合到MCH受體上的化合物。一般來說，連接物為雙官能或多官能的(如枝化結(jié)構(gòu))。本領(lǐng)域中有多種公知的連接物，可采用任何合適的本領(lǐng)域公知的方法結(jié)合到MCH受體調(diào)控因子中。
如果某部分被連接(共價或非共價)到活性化合物或與活性化合物相結(jié)合時，則該部分與活性化合物“締合”。
“前藥”是一種并不完全滿足本發(fā)明提供的化合物結(jié)構(gòu)要求的化合物，但在對患者給藥之后，其能在體內(nèi)變性產(chǎn)生本發(fā)明所述的化合物。例如，前藥可為本發(fā)明提供化合物的?；苌?。前藥包括其中羥基，氨基或巰基被結(jié)合到任何基團(tuán)的化合物，當(dāng)對哺乳動物主體給藥時，這些基團(tuán)分別斷裂開來形成游離的羥基，氨基或巰基基團(tuán)。前藥的例子包括但不限于本發(fā)明提供的化合物中醇或胺官能團(tuán)的乙酸酯、甲酸酯和苯甲酸酯衍生物。
“患者”是指任何用本發(fā)明提供的MCH受體調(diào)控因子治療的個體?；颊甙ㄈ耍约捌渌鼊游锢缗惆樾蛣游锖蜕??；颊呖赡茉馐芘c不希望的MCH受體活性相關(guān)的病癥的折磨，或并未遭受此類病癥(即該治療可能是預(yù)防性的)。
黑色素濃集激素受體調(diào)控因子如上所述，本發(fā)明提供了一種通式I的化合物，優(yōu)選此類化合物為黑色素濃集的激素(MCH)受體調(diào)控因子(即對MCH結(jié)合到MCH受體上以及MCH-調(diào)節(jié)的信號轉(zhuǎn)換進(jìn)行可檢測性調(diào)節(jié)的試劑)。此類調(diào)控因子對特定的MCH受體(如1型或2型)可為特定性的，或可抑制或提高配體結(jié)合到多個MCH受體。MCH受體調(diào)控因子可用于在體內(nèi)調(diào)節(jié)MCH與MCH受體的結(jié)合，特別是在人類、馴養(yǎng)的陪伴型動物和牲畜動物的代謝，進(jìn)食和性疾病治療中。調(diào)控因子也可用于多種體外試驗中，例如受體活性試驗，作為檢測和定位MCH受體的探針，以及作為MCH結(jié)合和MCH-調(diào)節(jié)的信號轉(zhuǎn)換試驗中的標(biāo)準(zhǔn)物。
本發(fā)明提供的MCH受體調(diào)控因子包括多-芳基的(即多個稠合或未稠合的芳基基團(tuán))，非-肽的和不含氨基酸的活性化合物，其能對MCH結(jié)合到毫微摩爾濃度級，優(yōu)選低于毫微摩爾濃度級的MCH受體進(jìn)行可檢測性調(diào)節(jié)。本發(fā)明提供的活性化合物通常是如上定義的1-苯基-4-芳基哌嗪或哌啶類似物。優(yōu)選的化合物以高的結(jié)合親和力特定結(jié)合到MCH受體上。一般來說，本發(fā)明的活性化合物在MCH受體上的Ki值小于1微摩爾。不需要與任何特殊的理論相聯(lián)系，應(yīng)該相信本發(fā)明提供的化合物與MCH受體之間的相互作用導(dǎo)致了MCH受體對這些化合物的活性進(jìn)行調(diào)節(jié)?；钚曰衔锇ㄊ荏w激動劑和拮抗劑。
本發(fā)明部分基于具有通式I的小分子(以及藥學(xué)上可接受的鹽及其前藥)對MCH結(jié)合到MCH受體具有調(diào)節(jié)作用這一發(fā)現(xiàn)。
通式I在通式I中，V為一單鍵或-(C＝O)-且W為N，CH，COH或CCN。變量“n”是1或2，換句話說，包括W的雜環(huán)可為6-員或7-員環(huán)，一般優(yōu)選為6-員環(huán)。
X選自鹵素，羥基，硝基，氰基，-COOH，氧基，以及如下所定義的式L-M的基團(tuán)。如上所述，任何碳環(huán)可為飽和、部分飽和或不飽和的，且可(但可不需要)任選被一個或多個(優(yōu)選從1個到3個)取代基所取代。優(yōu)選地，X為鹵素，(C1-C3)烷基，鹵代(C1-C3)烷基，(C1-C3)烷氧基或鹵代(C1-C3)烷氧基，特別優(yōu)選鹵素，甲氧基和三氟甲基。
Y和Z分別獨立地為(i)CH，(ii)N，或(iii)與R5相連接成為含有W和V，且具有5到8個環(huán)原子的碳環(huán)或雜環(huán)。如上所述，任何這樣形成的碳環(huán)或雜環(huán)可為飽和、部分飽和的或不飽和，及任選被一個或多個(優(yōu)選從1個到3個)上述獨立挑選的取代基所取代。顯然，除了W和V之外，此類碳環(huán)或雜環(huán)還包括與V連接的碳原子以及與W相鄰的碳原子。在某些實施方式中，Y和Z都為CH。在某些實施方式中，Y或Z為N；優(yōu)選Y和Z不都是N。如果Y或Z其中之一與R5相連接，則Y或Z之中的另一個為CH或為N。
R1和R2分別獨立地選自(a)氫，鹵素，羥基，硝基，氰基，-COOH，以及氧基；(b)如下所定義的式L-M的基團(tuán)。優(yōu)選地，R1和R2獨立地選自氫，鹵素，(C1-C3)烷基，鹵代(C1-C3)烷基，(C1-C3)烷氧基和鹵代(C1-C3)烷氧基，特別優(yōu)選氫，鹵素，甲基，甲氧基以及二-和三-氟甲基。在某些優(yōu)選的實施方式中，R1和R2的其中之一為氫。如果R1和R2都為氫，則V優(yōu)選為-(C＝O)-。
R3為(i)選自氫，(C1-C6)烷基，(C2-C6)烯基和鹵代(C1-C6)烷基；或(ii)與r6和R10之一或兩者相連接形成具有一個環(huán)或兩個稠合環(huán)的碳環(huán)或雜環(huán)基團(tuán)，其中的每個環(huán)包括5到8個環(huán)原子和0，1或2個獨立選自氧原子、N或硫原子的雜原子，且其中每個環(huán)發(fā)生上述的任選取代。顯然，任何與R6形成的環(huán)包括與R3和R6相連接的碳原子，以及與這些碳原子相連接的N。類似地，與R10形成的環(huán)包括與R3和R10相連接的碳原子，以及插入的碳原子。優(yōu)選R3基團(tuán)為氫，(C1-C3)烷基(如甲基或乙基)，鹵代(C1-C3)烷基(如三氟甲基)和以下基團(tuán)，該基團(tuán)與R10形成5-員的部分飽和環(huán)，或與R6形成5-員或6-員飽和或部分飽和的環(huán)。
R4為氫，(C1-C6)烷基或鹵代(C1-C6)烷基；優(yōu)選氫，甲基或三氟甲基，特別優(yōu)選是氫。
R5為(i)每次出現(xiàn)時都獨立選自氫，鹵素，羥基，硝基，氰基，氨基，氧基，(C1-C6)烷基，(C2-C6)烯基，(C2-C6)炔基，(C1-C6)烷氧基，鹵代(C1-C6)烷基，鹵代(C1-C6)烷氧基，單-或二-(C1-C6)烷基氨基，以及氨基(C1-C6)烷基；或(ii)與R6，Y或Z相連接形成具有5到8個環(huán)原子的碳環(huán)或雜環(huán)，任選發(fā)生上述的取代。例如，R5可直接鍵接到R6，Y或Z上，或可為任何取代基，當(dāng)該取代基連接到R6，Y或Z時，形成了大小合適的碳環(huán)或雜環(huán)。如上所述，此類碳環(huán)或雜環(huán)包括W和V，以及與V相連接的碳原子和與W相鄰的碳原子。優(yōu)選地，每個R5獨立地為氫或甲基。
R6為(i)選自氫，鹵素，羥基，硝基，氰基，氨基，氧基，(C1-C6)烷基，(C2-C6)烯基，(C2-C6)炔基，(C1-C6)烷氧基，鹵代(C1-C6)烷基，鹵代(C1-C6)烷氧基，單-或二-(C1-C6)烷基氨基，以及氨基(C1-C6)烷基；或(ii)與R3或R5相連接形成前述的碳環(huán)或雜環(huán)。優(yōu)選地，R6為氫或甲基，或與R3相連接形成飽和或部分飽和的5-員或6-員環(huán)。
R7為(a)選自氫，鹵素，羥基，硝基，氰基，-COOH，氧基，以及下述的式L-M的基團(tuán)；或(b)與R8或R12相連接形成稠合的5-或6-員碳環(huán)或雜環(huán)基團(tuán)(飽和的，部分飽和的或不飽和的，且任選被取代)。顯然，任何與R8形成的環(huán)包括與R7和R8相連接的碳原子。類似地，任何與R12形成的環(huán)包括與R7和R12相連接的碳原子。
R8為(a)選自氫，鹵素，羥基，硝基，氰基，-COOH，氧基；以及如下所述的式L-M的基團(tuán)；或(b)與R7或R11相連接形成稠合的5-到10-員碳環(huán)或雜環(huán)基團(tuán)。優(yōu)選地，R8為氫，鹵素，(C1-C3)烷基，鹵代(C1-C3)烷基，(C1-C3)烷氧基或鹵代(C1-C3)烷氧基，或R8與R7或R11相連接形成5-員或6-員環(huán)，或稠合的9-員或10-員的雙環(huán)基團(tuán)。
U為N，O或CR9；且R9為(a)選自氫，鹵素，羥基，硝基，氰基，-COOH，氧基，以及下述的式L-M的基團(tuán)；或(b)與R10或R11相連接形成稠合的5-到10-員碳環(huán)或雜環(huán)基團(tuán)。顯然，任何與R10相連接的環(huán)包括與R9和R10相連接的碳原子。類似地，與R11形成的環(huán)包括與R9和R11相連接的碳原子。優(yōu)選地，R9為氫，鹵素，(C1-C3)烷基(如甲基)或(C1-C3)烷氧基(如甲氧基)，或與R10或R11相連接形成6-員芳香環(huán)。
T為N，O或CR10；R10為(a)選自氫，鹵素，羥基，硝基，氰基，-COOH，氧基；以及下述的式L-M的基團(tuán)；或(b)與R3，R8或R9相連接形成上述的碳環(huán)或雜環(huán)基團(tuán)。
R11為(a)選自氫，鹵素，羥基，硝基，氰基，-COOH，氧基；以及下述的式L-M的基團(tuán)；或(b)與R8和R9的其中之一或兩者相連接形成稠合的5-到10-員碳環(huán)或雜環(huán)基團(tuán)；優(yōu)選地，R11為氫，羥基，鹵素，(C1-C3)烷基，鹵代(C1-C3)烷基(如三氟甲基)或(C1-C3)烷氧基(如甲氧基或乙氧基)。
R12為(i)每次出現(xiàn)時都獨立選自氫，鹵素，羥基，硝基，氰基，氨基，氧基，(C1-C6)烷基，(C2-C6)烯基，(C2-C6)炔基，(C1-C6)烷氧基，鹵代(C1-C6)烷基，鹵代(C1-C6)烷氧基，單-或二-(C1-C6)烷基氨基，以及氨基(C1-C6)烷基；或(ii)與R7相連接形成上述稠合的碳環(huán)或雜環(huán)基團(tuán)。優(yōu)選R12為氫或甲基。
每次出現(xiàn)的L獨立地選自單鍵，-NR11-，-O-，-SO2-，-SO2NH-，C(＝O)NR11-和NR11C(＝O)-，其中每次出現(xiàn)的R11獨立地選自氫，(C1-C6)烷基，(C2-C6)烯基，(C2-C6)炔基和鹵代(C1-C6)烷基。
每次出現(xiàn)的M獨立地選自氫，(C1-C6)烷基，(C2-C6)烯基，(C2-C6)炔基，鹵代(C1-C6)烷基，氨基(C1-C6)烷基或5-到10-員碳環(huán)。
在某些優(yōu)選的實施例中，至少R10，R3和R4的其中之一不為氫。尤其是，如果R11為氫且V為單鍵，則R10，R3和R4不都為氫。
在某些實施方式中，優(yōu)選的化合物為手性的，且滿足下式Ia 式Ia在通式Ia中，R3和R12的其中之一或兩者都不是氫。其它式Ia中的變量的定義如通式I。如果R3不為氫，則與R3相連接的碳原子為R構(gòu)型(設(shè)定與其它與該碳原子相連接的基團(tuán)相比，R3具有較低的優(yōu)先等級)；換句話說，對于具有α-甲基或乙基芐基基團(tuán)(R3為甲基或乙基，R4為氫)的化合物，優(yōu)選R對映體。類似地，如果R12不是氫，則與R12相連接的碳原子為S構(gòu)型(設(shè)定與其它與該碳原子相連接的基團(tuán)，R12具有較低的優(yōu)先等級)。具有手性碳原子的化合物可被指定為R或S對映體；本發(fā)明中R3或R4都不是氫的化合物可被指定為(R，S)對映體。在缺乏此類指定的情況下，本發(fā)明中所特別列舉的化合物應(yīng)該被解釋為涵蓋外消旋和手性形式。此外，本發(fā)明提供的某些結(jié)構(gòu)中采用同寬的黑色實線來表示一個立體中心相對于另一個立體中心的相對立體化學(xué)。此類線并不表示絕對的立體化學(xué)(絕對立體化學(xué)采用標(biāo)準(zhǔn)的楔形線來表示)。
本發(fā)明所提供的某些化合物滿足通式II-IV中的一個或多個，其中多種位置的定義如通式I 通式II通式III通式IV在通式II中，R3和R6連接形成不飽和的、部分不飽和的或飽和的環(huán)，其中該環(huán)包括5到8個環(huán)原子，環(huán)原子中有0，1或2個雜原子(獨立選自氧，氮或硫原子)。類似地，在通式III中，R3和R10連接形成含有5到8個環(huán)原子的不飽和的、部分不飽和的或飽和的環(huán)，環(huán)原子中有0，1或2個雜原子。在通式IV中，R3，R6和R10連接形成兩個稠合環(huán)，其中的每一個獨立為不飽和的，部分飽和或飽和的環(huán)，且包括5到8個環(huán)原子，環(huán)原子中有0，1或2個雜原子。
通式II代表性的例子如下所示 通式IIa
在通式IIa中，A和B分別獨立選自O(shè)、N、S、CR13和CHR13，其中每次出現(xiàn)的R13獨立選自氫、鹵素、氰基、羥基、氧基、肟、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、(C1-C6)烷?；?、(C1-C6)烷?；趸?C1-C6)烷氧基羰基、鹵代(C1-C6)烷基和鹵代(C1-C6)烷氧基。優(yōu)選地，R4是氫或甲基，每次出現(xiàn)的R5獨立地選自氫和甲基，R11為氫、鹵素、甲氧基或羥基，R7，R8和R9分別獨立地選自氫、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基和鹵素。
通式I代表性的化合物包括但不限于其中W為N，R3和R4都是H的化合物。此類化合物包括有例如1-(4-溴-3-甲氧基苯基)-4-(3，4-二甲氧基芐基)哌嗪；1-(4-溴-3-甲氧基苯基)-4-(4-氯芐基)哌嗪；1-[4-氯-3-(三氟甲基)苯基]-4-(3，4-二甲氧基芐基)哌嗪；1-(3，4-二氯苯基)-4-(3，4-二甲氧基芐基)哌嗪；1-(4-溴-3-甲氧基苯基)-4-(4-甲氧基-2，5-二甲基芐基)哌嗪；1-(4-溴-3-甲氧基苯基)-4-(4-甲氧基-2，3-二甲基芐基)哌嗪；1-(3-溴4-甲氧基芐基)-4-(4-溴-3-甲氧基苯基)哌嗪；4-{[4-(4-溴-3-甲氧基苯基)哌嗪-1-基]甲基}-2-甲氧基苯酚；4-({4-[4-氯-3-(三氟甲基)苯基]哌嗪-1-基}甲基)-2-甲氧基苯酚；1-[4-氯-3-(三氟甲基)苯基]-4-(4-甲氧基-2，3-二甲基芐基)哌嗪；1-(3-溴-4-甲氧基苯基)-4-[4-氯-3-(三氟甲基)苯基]哌嗪；1-(4-溴-3-甲氧基苯基)-4-(4-甲氧基-3-甲基芐基)哌嗪；1-[4-氯-3-(三氟甲基)苯基]-4-(4-甲氧基-3-甲基芐基)哌嗪；1-(4-氯-3-三氟甲氧基苯基)-4-[1-(3，4-二甲氧基芐基)]-2-甲基-哌嗪；4-(4-氯-3-三氟甲基-苯基)-1-(3，4-二甲氧基-芐基)]-2-甲基-哌嗪；4-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-1-(3，4-二甲氧基-芐基)]-2-甲基-哌嗪；4-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-[1-(3，4-二甲氧基-芐基)-乙基]-2-甲基-哌嗪；3-{[4-(4-溴-3-甲氧基苯基)哌嗪-1-基]甲基}-9-乙基-9H-咔唑；1-(5-溴-6-甲氧基吡啶-2-基)-4-(3，4-二甲氧基芐基)哌嗪；1-(5-溴-6-甲氧基吡啶-2-基)-4-(4-氯芐基)哌嗪；1-(5-溴-6-甲氧基吡啶-2-基)-4-(4-甲氧基-2，5-二甲基芐基)哌嗪；1-(5-溴-6-甲氧基吡啶-2-基)-4-(4-甲氧基-2，3-二甲基芐基)哌嗪；1-(3-溴-4-甲氧基芐基)-4-(5-溴-6甲氧基吡啶-2-基)哌嗪；4-(5-溴-6-甲氧基吡啶-2-基)-1-(3，4-二甲氧基-芐基)-2-甲基哌嗪；4-(5-溴-6-甲氧基吡啶-2-基)-1-(3，4-二甲氧基-芐基)-2-甲基哌嗪；1-(5-溴-6-甲氧基吡啶-2-基)-4-(4-甲氧基-3-甲基芐基)哌嗪；3-{[4-(5-溴-6-甲氧基吡啶-2-基)哌嗪-1-基]甲基}-9-乙基-9H-咔唑；4-{[4-(5-溴-6-甲氧基吡啶-2-基)哌嗪-1-基]甲基}-2-甲氧基苯酚；以及1-(4-溴-3-甲氧基苯基)-4-(3，4-二甲氧基芐基)-1，4-地西泮(diazepane)。
在其它的優(yōu)選方式中，W是氮且R3不是氫，此類化合物包括有1-(4-溴-3-甲氧基苯基)-4-[1-(3，4-二甲氧基苯基)乙基]哌嗪；1-[4-氯-3-(三氟甲基)苯基]-4-[1-(3，4-二甲氧基苯基)乙基]哌嗪；1-(4-溴-3-甲氧基苯基)-4-[1-(4-甲氧基苯基)乙基]哌嗪；1-(4-氯-3-甲氧基苯基)-4-[1-(3，4-二甲氧基苯基)乙基]哌嗪；1-(4-溴-3-甲氧基苯基)-4-[1-(3，4-二甲氧基苯基)乙基]哌嗪；4-{1-[4-(4-溴-3-甲氧基苯基)哌嗪-1-基]乙基}-2-甲基苯酚；1-(4-溴-3-甲氧基苯基)-4-[1-(4-氟-3-甲氧基苯基)-乙基]哌嗪；1-(4-氯-3-甲氧基苯基)-4-[1-(3，4-二甲氧基苯基)乙基]哌嗪；1-(4-氯-3-甲氧基苯基)-4-[1-(3，4-二甲氧基苯基)乙基]哌嗪；1-(4-溴-3-三氟甲氧基苯基)-4-[1-(3-氟-4-甲氧基苯基)乙基]哌嗪；1-(4-溴-3-三氟甲氧基苯基)4-[1-(3-氟-4-甲氧基苯基)乙基]哌嗪；1-(4-溴-3-三氟甲基苯基)-4-[1-(3-氟-4-甲氧基苯基)乙基]哌嗪；1-(4-甲氧基-苯基)-4-[1-(3，4-二甲氧基苯基)乙基]哌嗪；1-(4-甲氧基苯基)-4-[1-(3，4-二甲氧基苯基)乙基]哌嗪；1-(4-溴-3-甲氧基苯基)-4-[1-(4-氯-苯基)-乙基]-哌嗪；1-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-4-[1-(4-甲氧基-2，3-二甲基-苯基)-乙基]-哌嗪；1-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-4-[1-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-乙基]-哌嗪；1-(4-溴-3-甲氧基-苯基)-4-[1-(4-甲氧基-2，5-二甲基-苯基)-乙基]-哌嗪；1-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-4-[1-(3，4-二甲氧基-苯基)-乙基]-哌嗪；1-(4-溴-3-甲氧基-苯基)-4-[1-(3，4-二甲氧基-苯基)-乙基]-哌嗪；1-(4-氯-3-三氟甲基-苯基)-4-[1-(3，4-二甲氧基-苯基)-乙基]-哌嗪；1-(4-溴-3-甲氧基-苯基)-4-[1-(4-乙氧基-3-甲氧基-苯基)-乙基]-哌嗪；1-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-4-[1-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-乙基]-哌嗪；1-(4-溴-3-甲氧基-苯基)-4-[1-(2，4，5-三甲基-苯基)-乙基]-哌嗪；1-(4-溴-3-甲氧基-苯基)-4-[1-(3-氟-4-甲氧基-苯基)-乙基]-哌嗪；1-(4-氯-3-三氟甲基-苯基)-4-[1-(4-甲氧基-2，3-二甲基-苯基)-乙基]-哌嗪；1-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-4-[1-(3，4-二甲氧基-苯基)-乙基]-哌嗪；1-(4-氯-3-三氟甲基-苯基)-4-[1-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-乙基]-哌嗪；1-(4-氯-3-三氟甲基-苯基)-4-[1-(4-甲氧基-3-甲基-苯基)-乙基]-哌嗪；1-(4-溴-3-甲氧基-苯基)-4-[1-(3-甲氧基-苯基)-乙基]-哌嗪；1-(4-溴-3-甲氧基-苯基)-4-[1-(4-三氟甲基-苯基)-乙基]-哌嗪；4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1-[1-(3，4-二甲氧基-苯基)-乙基]-哌嗪；1-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-4-[1-(3-氟-4-甲氧基-苯基)-乙基]-哌嗪；1-(4-溴-3-甲氧基-苯基)-4-[1-(3-乙氧基-苯基)-乙基]-哌嗪；1-(5-{1-[4-(4-溴-3-甲氧基-苯基)-哌嗪-1-基]-乙基}-2-氟-苯基)-乙基酮；1-(4-氯-3-甲基-苯基)-4-[1-(4-甲氧基-3-甲基-苯基)-乙基]-哌嗪；1-(4-溴-3-甲氧基-苯基)-4-[1-(3，5-二甲氧基-苯基)-乙基]-哌嗪；1-(4-甲氧基-3-甲基-苯基)-4-[1-(4-甲氧基-2，3-二甲基-苯基)-乙基]-哌嗪；1-(4-氯-3-甲基-苯基)-4-[1-(3，4-二甲氧基-苯基)-乙基]-哌嗪；1-(4-溴-3-甲氧基苯基)-4-[1-(3，4-二乙氧基-苯基)-乙基]-哌嗪；1-(4-氯-3-氟-苯基)-4-[1-(4-甲氧基-2，3-二甲基-苯基)-乙基]-哌嗪；1-(4-氯-3-甲基-苯基)-4-[1-(4-甲氧基-2，3-二甲基-苯基)-乙基]-哌嗪；1-(4-氯-3-氟-苯基)-4-[1-(3，4-二甲氧基-苯基)-乙基]-哌嗪；1-(4-甲氧基-3-甲基-苯基)-4-[1-(3-甲基-4-甲氧基-苯基)-乙基]-哌嗪；1-(4-甲氧基-3-甲基-苯基)-4-[1-(3，4-二甲氧基-苯基)-乙基]-哌嗪；1-(3，4-二甲氧基-苯基)-4-[1-(4-甲氧基-2，3-二甲基-苯基)-乙基]-哌嗪；1-(4-氟-3-氟甲基-苯基)-4-[1-(3，4-二甲氧基-苯基)-乙基]-哌嗪；1-(4-溴-3-甲氧基-苯基)-4-{1-[4-(4-溴-苯基)-苯基]乙基}-哌嗪；4-(4-氯-3-三氟甲基-苯基)-[1-(3，4-二甲氧基-芐基)-乙基]-哌嗪；1-(1-苯并[1，3]-二氧戊烯(dioxol)-5-基-乙基)-4-(4-溴-3-甲氧基-苯基)-哌嗪；1-(4-溴-3-甲氧基-苯基)-4-[1-(3，4-二甲氧基-苯基)-乙基]-[1，4]-地西泮；1-(4-溴-3-甲氧基-苯基)-4-[1-(3-氟-4-甲氧基-苯基)-乙基]-[1，4]-地西泮；1-[1-(3，4-二甲氧基-苯基)-乙基]-4-[3-甲氧基-苯基)-哌嗪-2，5-二酮；1-(4-溴-3-甲氧基-苯基)-4-[1-(3，4-二甲氧基-苯基)-丙基]-哌嗪；1-(4-氯-3-三氟甲基-苯基)-4-[1-(3，4-二甲氧基-苯基)-丙基]-哌嗪；1-(5-溴-6-甲氧基吡啶-2-基)-4-[1-(3，4-二甲氧基苯基)-乙基]-哌嗪；1-(5-溴-6-甲氧基吡啶-2-基)-4-[1-(4-三氟甲基-苯基)-乙基]-哌嗪；1-(4-溴-3-甲氧基-苯基)-4-[1-(6-甲氧基-萘-2-基)-乙基]-哌嗪；1-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-4-[1-(3，4-二甲氧基-二甲基-苯基)-乙基]-哌嗪；1-(4-溴-3-甲基-苯基)-4-[1-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-乙基]-哌嗪；以及1-(4-溴-3-甲氧基-苯基)-4-[1-(6-甲氧基-吡啶-2-基)-乙基]-哌嗪。
其中W為C、COH或CCN的代表性化合物包括有4-(4-氯-3-三氟甲基-苯基)-1-[1-(3，4-二甲氧基-苯基)-乙基]-哌嗪；和4-[4-氯-3-(三氟甲基)苯基)-1-[(3，4-二甲氧基芐基)-哌嗪-4-醇。
代表性的式II化合物包括有2-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)-八氫-吡啶并[1，2-α]-吡嗪；2-(4-氯-3-氟甲基-苯基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)-八氫-吡啶并[1，2-α]-吡嗪；2-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-6-(3-氟-4-甲氧基-苯基)-八氫-吡啶并[1，2-α]-吡嗪；2-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)-八氫-吡啶并[1，2-α]-吡嗪；2-(4-氟-3-氟甲基-苯基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)-八氫-吡啶并[1，2-α]-吡嗪；2-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-6-(甲氧基-萘-2-基)-八氫-吡啶并[1，2-α]-吡嗪；2-(4-氯-3-甲基-苯基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)-八氫-吡啶并[1，2-α]-吡嗪；2-(4-甲氧基-3-甲基-苯基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)-八氫-吡啶并[1，2-α]-吡嗪；2-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-6-(3-甲氧基-苯基)-八氫-吡啶并[1，2-α]-吡嗪；2-(2，4-二溴-5-甲氧基-苯基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)-八氫-吡啶并[1，2-α]-吡嗪；2-(3，4-二甲氧基-苯基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)-八氫-吡啶并[1，2-α]-吡嗪；2-(4-氯-3-氟-苯基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)-八氫-吡啶并[1，2-α]-吡嗪；1-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)-八氫-吡啶并[1，2-α]-吡嗪；2-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)-八氫-吡啶并[1，2-α]-吡嗪-8-醇；2-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)-八氫-吡啶并[1，2-a]-吡嗪-8-酮；2-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-6-(3-氟-4-甲氧基-苯基)-八氫-吡啶并[1，2-a]-吡嗪-8-酮；2-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-6-(6-甲氧基-萘-2-基)-八氫-吡啶并[1，2-a]-吡嗪-8-酮；8-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-4-(3，4-二甲氧基-苯基)-八氫-吡嗪并[2，1-c][1，4]-噻嗪；2-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)-八氫-吡咯并[1，2-a]-吡嗪；2-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)-1，3，4，6，9，9a-六氫-2H-吡啶并[1，2-a]-吡嗪；8-溴-3-(3，4-二甲氧基-芐基)-9-甲氧基-2，3，4，4a-四氫-1H，6H-吡嗪并[1，2-a]-喹喔啉-5-酮；7-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-4-(3，4-二甲氧基-苯基)-十氫-萘-2-酚；以及2-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)-8-氟-八氫-吡啶并[1，2-a]-吡嗪；典型的式III化合物包括有1-(4-溴-3-甲氧基苯基)-4-(5，6-二甲氧基-2，3-二氫-1H-茚滿-1-基)-哌嗪；1-(5-溴-6-甲氧基吡啶-2-基)-4-(5，6-二甲氧基-2，3-二氫-1H-茚滿-1-基)-哌嗪；1-(4-氯-3-三氟甲基-苯基)-4-(4，5-二甲氧基-茚滿-1-基)-哌嗪；以及1-(4-溴-3-甲氧基-苯基)-4-(4，5-二甲氧基-茚滿-1-基)-哌嗪。
其中V為-C(＝O)-的典型的化合物包括有(4-氯-苯基)-{4-[1-(2，3-二甲基-苯基)-乙基]哌嗪-1-基}甲酮；(4-氯-苯基)-{4-[1-(4-甲氧基-2，3-二甲基-苯基)-乙基]哌嗪-1-基}甲酮；(4-三氟-甲基-苯基)-{4-[1-(4-甲氧基-2，3-二甲基-苯基)-乙基]哌嗪-1-基}甲酮；(3，4-二氯-苯基)-{4-[1-(4-甲氧基-2，3-二甲基-苯基)-乙基]哌嗪-1-基}甲酮；(4-氯-苯基)-{4-[1-(4-甲基-萘-1-基)-乙基]哌嗪-1-基}甲酮；(4-三氟-甲基-苯基)-{4-[1-(4-甲氧基-2-甲基-苯基)-乙基]哌嗪-1-基}甲酮；(4-三氟甲基-苯基)-{4-[1-(4-甲氧基-2，3-二甲基-苯基)-乙基]哌嗪-1-基}甲酮；(4-三氟甲基-苯基)-{4-[1-(4-甲氧基-3-甲基-苯基)-乙基]哌嗪-1-基}甲酮；(4-氯-苯基)-{4-[1-(4-甲氧基-萘-1-基)-乙基]哌嗪-1-基}甲酮；(4-三氟甲基-苯基)-{4-[1-(4-甲氧基-2，3-二甲基-苯基)-丙基]哌嗪-1-基}甲酮；(4-氯-苯基)-{4-[1-(4-甲氧基-2，3-二甲基-苯基)-烯丙基]哌嗪-1-基}甲酮；(4-氟-苯基)-{4-[1-(4-甲氧基-2，3-二甲基-苯基)-乙基]哌嗪-1-基}甲酮；(4-溴-3-甲基-苯基)-{4-[1-(4-甲氧基-2，3-二甲基-苯基)-乙基]哌嗪-1-基}甲酮；(3，4-二氯-苯基)-{4-[1-(4-甲基-萘-1-基)-乙基]哌嗪-1-基}甲酮；[6-(3，4-二甲氧基-苯基)-八氫-吡啶并[1，2-a]-哌嗪-2-基]-(4-三氟甲基-苯基)-甲酮；(4-氯-苯基)-{4-[1-(4-甲氧基-2，3-二甲基-苯基)-丙基]哌嗪-1-基}甲酮；{4-[1-(4-甲氧基-2，3-二甲基-苯基)-乙基]-[1，4-]苯二氮酌-1-基}-(4-三氟甲基-苯基)-甲酮；以及{5-[1-(4-甲氧基-2，3-二甲基-苯基)-乙基]-2，5-二氮-雙環(huán)[2.2.1]庚-2-基}-(4-三氟甲基-苯基)-甲酮。
其中U為氮或氧原子的典型化合物包括有3-{1-[4-(4-溴-3-甲氧基-苯基)-哌嗪-1-基]-乙基}-6-甲氧基-喹啉；3-{1-[4-(4-溴-3-甲氧基-苯基)-哌嗪-1-基]-乙基}-2-氯-6-甲氧基-喹啉；3-{1-[4-(4-溴-3-甲氧基-苯基)-哌嗪-1-基]-乙基}-喹啉；1-(4-溴-3-甲氧基-苯基)-4-[1-(6-甲氧基-吡啶-3-基)-乙基]-哌嗪；以及3-{1-[4-(4-溴-3-甲氧基-苯基)-哌嗪-1-基]-乙基}-6-氟-4-甲基-2H-苯并吡喃-2-醇。
本發(fā)明中典型的手性化合物包括有(3S)-1-(4-氯-3-三氟甲氧基苯基)-4-[1-(3，4-二甲氧基-芐基)]-2-甲基-哌嗪；(2S)-4-(5-溴-6-甲氧基吡啶-2-基)-1-(3，4-二甲氧基-芐基)]-2-甲基哌嗪；R-1-(4-氯-3-甲氧基苯基)-4-[1-(3，4-二甲氧基苯基)乙基]哌嗪；S-1-(4-氯-3-甲氧基苯基)-4-[1-(3，4-二甲氧基苯基)乙基]哌嗪；R-1-(4-溴-3-三氟甲基苯基)-4-[1-(3-氟-4-甲氧基苯基)乙基]哌嗪；S-1-(4-溴-3-三氟甲基苯基)-4-[1-(3-氟-4-甲氧基苯基)乙基]哌嗪；S-1-(4-甲氧基-苯基)-4-[1-(3，4-二甲氧基苯基)乙基]哌嗪；R-1-(4-甲氧基-苯基)-4-[1-(3，4-二甲氧基苯基)乙基]哌嗪；R-1-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-4-[1-(3，4-二甲氧基苯基)乙基]哌嗪；{5-[1-(4-甲氧基-2，3-二甲基-苯基)-乙基]-(1S，4S)-2，5-二氮-雙環(huán)[2.2.1]庚-2-基}-(4-三氟甲基-苯基)-甲酮；(6R，10S)-2-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)-八氫-吡啶并[1，2-a]-吡嗪-8-酮；R-1-(4-溴-3-甲氧基-苯基)-4-[1-(3，4-二甲氧基苯基)乙基]哌嗪；(2S)-4-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-1-(3，4-二甲氧基芐基)-2-甲基-哌嗪；(2R)-4-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-1-(3，4-二甲氧基芐基)-2-甲基-哌嗪；(3R)-1-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-4-[1-(3，4-二甲氧基苯基)-乙基]-哌嗪；(3S)-1-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-4-[1-(3，4-二甲氧基苯基)-乙基]-哌嗪；(3R)-1-(4-氯-3-三氟甲基-苯基)-4-[1-(3，4-二甲氧基苯基)-乙基]-哌嗪；(3S)-1-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-4-[1-(3，4-二甲氧基苯基)-乙基]-哌嗪；(6R，10S)-2-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)-八氫-吡啶并[1，2-a]-吡嗪；(3R)-1-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-4-[1-(3，4-二甲氧基苯基)-乙基]-哌嗪；(2R)-4-(4-氯-3-三氟甲基-苯基)-[1-(3，4-二甲氧基芐基)-乙基]-哌嗪；(6R，9S)-2-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)-八氫-吡咯并[1，2-a]-吡嗪；(6R，10S)-2-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)-八氫-吡啶并[1，2-a]-吡嗪-8-醇；(6R，10S)-[6-(3，4-二甲氧基-苯基)-八氫-吡啶并[1，2-a]-吡嗪-2-基]-(4-三氟甲基-苯基)-甲酮；(6R，10S)-2-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-6-(3-氟，4-甲氧基-苯基)-八氫-吡啶并[1，2-a]-吡嗪；以及{5-[1-(4-甲氧基-2，3-二甲基-苯基)-乙基]-(1S，4S)-2，5-二氮-雙環(huán)[2.2.1]庚-2-基}-(4-三氟甲基-苯基)-甲酮。
顯然，上述的特定化合物為本發(fā)明的闡釋性的化合物例子，并非用于限定本發(fā)明的范圍。如上所述，本發(fā)明所有的化合物可以游離堿或以藥學(xué)上可接受的酸加成鹽存在。此外，在未指定手性時，盡管可能會優(yōu)選手性形式，但手性化合物和外消旋混合物都涵蓋在本發(fā)明中。
本發(fā)明提供的取代的1-芐基-4-芳基哌嗪和哌啶類似物對MCH結(jié)合到MCHR1和/或MCHR2受體進(jìn)行可測定性地改變(調(diào)節(jié))，如采用標(biāo)準(zhǔn)體外MCH受體結(jié)合試驗和/或鈣移動試驗測定。本發(fā)明所引用的“MCH受體配體結(jié)合試驗”是指實施例2中所提供的體外受體結(jié)合試驗。簡單來說，將MCH受體制劑和標(biāo)記的(如125I)MCH和未標(biāo)記的測試化合物一起培養(yǎng)，從而進(jìn)行競爭試驗。在此處的試驗中，優(yōu)選采用的MCH受體為哺乳動物MCHR1或MCHR2受體，更優(yōu)選的是人類或猴子的MCHR1或MCHR2受體。受體可為重組性表達(dá)的或為天然表達(dá)的，且可包括天然序列或修飾的序列(如被截斷和/或被稠合到非天然的N-端序列上)。MCH受體制劑可為如來自HEK293細(xì)胞的膜制劑，該細(xì)胞重組性表達(dá)人體MCH受體(如Genbank Accession No.Z86090)，猴子MCHR1受體(如SEQ ID No1中的MCHR1序列)，或人類MCHR1/人類β-2-腎上腺素的嵌合受體。
與對MCH與MCH受體的結(jié)合進(jìn)行可測定性調(diào)節(jié)的化合物一起培養(yǎng)，會導(dǎo)致結(jié)合到MCH受體制劑上的標(biāo)記量增長或減少(相對于缺乏化合物時的標(biāo)記結(jié)合量)。優(yōu)選地，在實施例2所述的MCH受體配體結(jié)合試驗中，此類化合物表現(xiàn)出在MCH受體上的Ki值小于1微摩爾，更優(yōu)選小于500nM，100nM，20nM或10nM。如實施例3所提供的標(biāo)準(zhǔn)體外MCH受體調(diào)節(jié)的鈣移動試驗中，一般優(yōu)選的化合物為MCH受體的拮抗劑，且其EC50值為約4微摩爾或更少，更優(yōu)選1微摩爾或更少，更優(yōu)選約100nM或更少，10nM或更少，1nM或更少。
如果希望，可評價本發(fā)明化合物的某些藥學(xué)性質(zhì)，包括但不限于口服生物利用度、毒性、血清蛋白結(jié)合性，以及體外和體內(nèi)的半衰期。此外，對于用于治療CNS疾病，理想的是能滲透血腦屏障的化合物，可優(yōu)選低腦含量的用于治療周邊性疾病的化合物?？刹捎帽绢I(lǐng)域公知的常規(guī)試驗對這些性質(zhì)進(jìn)行測定，并鑒定用于特定用途的優(yōu)質(zhì)化合物。例如，預(yù)測生物利用度的試驗包括運送通過人類腸細(xì)胞單層，該細(xì)胞單層包括Caco-2細(xì)胞單層?？刹捎萌魏螛?biāo)準(zhǔn)的方法測定毒性，如實施例5所提供的檢測細(xì)胞ATP生產(chǎn)的影響的試驗。采用化合物對實驗動物進(jìn)行靜脈給藥，通過化合物在腦中的水平，可預(yù)測人體中化合物的血腦屏障的滲透?？蓮陌椎鞍捉Y(jié)合試驗預(yù)測血清蛋白的結(jié)合性。此類試驗在Oravcova，等人.(Journal of Chromatography B(1996)677卷，1-27頁)的評論文章中有所描述?；衔锇胨テ谂c化合物劑量的頻率成反比?；衔锏捏w外半衰期可通過如Kuhn和Gieschen(Drug Metabolism and Disposition，(1998)volume 26，pages1120-1127)中所描述的微粒體半衰期試驗來預(yù)測。
一般來說，本發(fā)明優(yōu)選的化合物基本上不與多巴胺受體發(fā)生相互作用，特別是人類的多巴胺D2和D4受體?？捎脴?biāo)準(zhǔn)的方法進(jìn)行多巴胺受體結(jié)合試驗，例如實施例4所述的試驗。優(yōu)選地，此類試驗中化合物的Ki值大于1微摩爾。
如上所述，除通式I活性化合物之外，本發(fā)明提供的MCH受體調(diào)控因子還可包括的一種或多種另加的締合部分。該部分可為直接連接(即通過鍵)，或通過連接物進(jìn)行連接，可為非共價連接或可與化合物相結(jié)合。此類另加的部分可用于例如使化合物的傳遞，命中目標(biāo)或檢測變得容易。該部分可直接連接(如通過鍵)或通過連接物連接。例如，當(dāng)上述化合物可充分命中體內(nèi)的某個預(yù)定位置時，對某些應(yīng)用有利的是包括另一個目標(biāo)部分，有助于命中一個或多個特定組織。優(yōu)選的目標(biāo)部分包括如特定地指向與MCH活性相關(guān)的腦區(qū)域的那些。
在某些實施方式中，有利的是同時或選擇性地使藥物和一個調(diào)控因子相締合。此處術(shù)語“藥物”是指任何對哺乳動物進(jìn)行給藥的生物活性劑，以預(yù)防或治療疾病或其它不希望的病癥。藥物包括激素，生長因子，蛋白質(zhì)，肽和其它化合物。例如治療肥胖癥的調(diào)控因子可包括瘦素(leptin)，瘦素受體激動劑，黑皮質(zhì)素(melanocortin)受體4(MC4)激動劑，西布曲明(Sibutramine)，右芬氟拉明(Dexfenfluramine)，生長激素促分泌素，β-3激動劑，5HT-2激動劑，食欲素(Orexin)拮抗劑，神經(jīng)肽Y1或Y5拮抗劑，甘丙素(galanin)拮抗劑，CCK激動劑，GLP-1激動劑和/或促腎上腺皮質(zhì)激素-釋放激素激動劑。促進(jìn)檢測的部分包括放射性核素，發(fā)光基團(tuán)，熒光基團(tuán)以及酶，其中的任何一個可通過標(biāo)準(zhǔn)方法和化合物相連接。
如下所詳細(xì)討論的，為進(jìn)行檢測，可對本發(fā)明所提供的化合物進(jìn)行同位素標(biāo)記或放射性標(biāo)記。此類化合物與通式I的化合物相同，但其中的一個或多個原子被原子量或質(zhì)量數(shù)與大多數(shù)通常天然存在的原子量或質(zhì)量數(shù)所不同的原子所取代。本發(fā)明中可被引入化合物的同位素的例子包括氫，碳，氮，氧，磷，氟和氯的同位素，例如2H，3H，11C，13C，14C，15N，18O，17O，31P，32P，35S，18F和36Cl。此外，以重同位素如氘(即2H)所進(jìn)行的取代帶來了某些治療優(yōu)點，其來自于較高的生物穩(wěn)定性，如體內(nèi)半衰期增加或劑量要求減少，因此，在某些環(huán)境下成為優(yōu)選方式。
另一些與活性化合物締合的部分包括載體。此類物質(zhì)可調(diào)節(jié)化合物的生物利用度或穩(wěn)定性。代表性的載體包括有分子，如白蛋白，聚賴氨酸，聚酰胺型胺類，肽，蛋白質(zhì)，聚苯乙烯，聚丙烯酰胺，脂質(zhì)體，神經(jīng)酰胺和生物素，固體支持材料如微珠或微粒，包括有聚乙酸酯(polyactate)，聚甘醇酸酯，聚(丙交酯-共-乙交酯)，聚丙烯酸酯，乳膠，淀粉，纖維素或葡聚糖。
MCH受體調(diào)控因子的制備本發(fā)明所提供的化合物一般可采用標(biāo)準(zhǔn)的合成方法制備而得。起始原料一般可從商業(yè)途徑獲得，如Sigma-Aldrich Corp.(St.Louis，MO)。例如，一種合成途徑和路線A到K中的任何一個所示的方法相類似。顯然，下列路線中的最終產(chǎn)物以及任何中間體都可被洗提，干燥，過濾和/或濃縮，并可被進(jìn)一步純化(如通過色譜法)。合成代表性化合物的進(jìn)一步的細(xì)節(jié)通過實施例1中的路線表達(dá)。
路線A(還原性胺化) 簡單來說，采用1當(dāng)量的每種取代哌嗪和苯甲醛與過量的NaBH(OAc)3在氮氣氛下進(jìn)行反應(yīng)，直到用TLC檢測不到起始原料。此時，用含水的飽和NaHCO3猝滅反應(yīng)并用乙酸乙酯洗提得到1-芐基-4-芳基哌嗪類似物。洗提物可用無水MgSO4干燥，在真空中濃縮并用色譜法分離。
路線B(還原性胺化) 簡單來說，采用1當(dāng)量的每種取代哌嗪和苯乙酮與Ti(OiPr)4一起加熱(如70℃，2小時)。反應(yīng)溶液冷卻后和NaBH4反應(yīng)生成1-芐基-4-芳基哌嗪類似物。加入1N NaOH猝滅反應(yīng)，可用CH2Cl2進(jìn)行洗提。CH2Cl2洗提物可通過無水MgSO4干燥，在真空下濃縮并用色譜法分離。
路線C(還原性烷基化代替還原性胺化) 簡單來說，加熱含有芳香性羧基醛，苯并三唑和芳香性哌嗪的乙醇/甲苯溶液，然后濃縮溶液。殘留物與甲苯一起蒸發(fā)，然后溶解于THF中，并用溴化甲基鎂的二乙醚溶液處理，得到1-芐基-4-芳基哌嗪類似物。
路線D(乙基哌嗪類似物的非對稱合成)1.旋光拆分
2.Buchwald偶聯(lián) 路線E(從手性烯丙基氨基乙酸合成八氫-吡啶并[1，2-a]哌嗪衍生物)
簡單地說，二碳酸二-叔丁酯和L-2-氨基-戊-4-烯酸在1N NaOH和二噁烷中進(jìn)行反應(yīng)，然后進(jìn)行濃縮(步驟1)。水性殘留物在冰上冷卻，用EtOAc分層并酸化。步驟2中，反應(yīng)產(chǎn)物，氯化1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二亞胺(EDCI)，和苯胺在吡啶中進(jìn)行合并。步驟3中，加入溶于甲苯中的鋁烷-N，N-二甲基乙胺絡(luò)合物。步驟4中加入氯化乙酰氯，并分層。步驟5中，加入三氟乙酸，且在步驟6中加入溶于甲苯中的鋁烷-N，N-二甲基乙胺絡(luò)合物。步驟7中，反應(yīng)產(chǎn)物和二碳酸二叔丁基酯進(jìn)行反應(yīng)。在步驟8中加入氯化鈀(II)和氯化亞銅(I)，并在溶液中鼓入氧氣，形成氣泡。步驟9中，加入三氟乙酸，在冰上攪拌反應(yīng)然后進(jìn)行濃縮。在溶液中加入苯甲醛衍生物和NaOH。對-甲苯磺酰肼，然后加入硼氫化鈉(步驟10)。顯然，在該路線的不同點可能需要進(jìn)行洗提，干燥，過濾，濃縮和提純，如實施例1，分步V所述。
路線F(八氫-吡啶并[1，2-a]哌嗪衍生物的另一種合成)
簡單地說，2-(4-芐基-哌嗪-2-基)-乙醇開始和二碳酸二叔丁酯(BOC酸酐)反應(yīng)，生成4-芐基-2-(2-羥基-乙基)-哌嗪-1-羧酸叔丁基酯(I)。在步驟1中，將I溶解于含有預(yù)先活化的4分子篩和4-甲基嗎啉N-氧化物的無水二氯甲烷中。加入過鐐酸四丙基銨開始反應(yīng)，直到LC/MS分析表明檢測不到殘留的起始原料(通常為1h)。過濾懸浮液，并用5％溶于氯仿中的甲醇溶液洗脫4-芐基-2-(2-氧-乙基)-哌嗪-1-羧酸叔丁酯(II)。步驟2中，將II在氮氣氛中溶解于無水四氫呋喃中，并加入溴化甲基鎂，生成4-芐基-2-(2-羥基-丙基)-哌嗪-1-羧酸叔丁酯(III)。步驟3中，如上所述對III進(jìn)行與I相同的處理，生成4-芐基-2-(2-氧-丙基)-哌嗪-1-羧酸叔丁酯(IV)。步驟4中，向IV的二氯甲烷溶液中加入三氟乙酸。與苯甲醛衍生物(ArCHO)和NaOH進(jìn)行后續(xù)反應(yīng)生成化合物V。在步驟5中，化合物V和對-甲苯磺酰肼的甲醇溶液反應(yīng)。加入硼氫化鈉并使反應(yīng)完成，用TCL分析測定出反應(yīng)完全(如18小時)，得到了化合物VI。在步驟6中，化合物VI和10％的Pd/C以及甲酸銨一起加熱(如回流6小時)?？商砑恿硪徊糠旨姿徜@，在回流下攪拌反應(yīng)(如再進(jìn)行15小時)，得到化合物VII?；衔颲II然后可溶于二氯甲烷中，并和三乙胺以及三氟甲基苯甲酰一起在室溫下攪拌(步驟7a)。有乙酸乙酯洗提，得到化合物VIII，其可在250微分析TLC上被純化?？蛇x擇性地(步驟7b)，化合物VII可用于制備化合物IX。
路線G(硫代嗎啉衍生物的合成)
簡單地說，用氫氧化鉀的甲醇溶液處理2-叔丁氧碳酰胺-3-巰基-丙酸甲酯。向反應(yīng)物中加入2-氯-芳基-乙酮溶液。然后加入三氟乙酸，之后加入三乙酰氧硼氫化物，生成了硫代嗎啉。與三甲基鋁和苯胺反應(yīng)生成酰胺，用鋁烷還原。用二溴乙烷和三乙胺處理，生成八氫-吡嗪并噻嗪衍生物。
路線H(通過Suzuki途徑進(jìn)行八氫-吡啶并[1，2-a]哌嗪衍生物的外消旋合成) 簡單來說，5-溴-吡啶甲酸與亞硫酰氯進(jìn)行反應(yīng)，然后與羥基乙胺反應(yīng)生成酰胺。該酰胺然后與芳基硼酸和三(二芐亞甲基丙酮)-二鈀(0)反應(yīng)，直到TLC表明未檢測到起始原料。用二氧化鈀處理，得到哌啶化合物，用LiAlH4對其進(jìn)行還原。用三苯基膦和偶氮二羧酸二乙酯成環(huán)，直到TLC表明未檢測到起始原料。最后，通過與溴-芳基化合物進(jìn)行反應(yīng)而引入了芳基取代基。
路線I-從酮化合物得到的類似物可從酮化合物開始(如代表性結(jié)構(gòu)A的代表)合成多種化合物，如下所述
簡單地說，酮A到仲醇B的還原可通過本領(lǐng)域公知的多種方法實現(xiàn)，包括(但不限于)與氫氧化鈉的甲醇溶液反應(yīng)，如實施例1所述。仲醇B到仲烷基氟化物C的氟化反應(yīng)可通過本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的多種方法實現(xiàn)，如與二乙基氨基硫三氟化物(diethylaminosulfurtrifluoride)(DAST，Hudlicky，Org.React.1998，35，513)在溶劑如二氯甲烷或氯仿中，于-78到120℃的溫度范圍內(nèi)進(jìn)行反應(yīng)。仲醇B脫氫生成相應(yīng)的烯烴D的反應(yīng)可通過多種本領(lǐng)域公知的方法進(jìn)行，包括(但不限于)與試劑例如OPCl3或PCl5在溶劑例如吡啶中，于0到200℃的溫度范圍內(nèi)進(jìn)行反應(yīng)而得。烯烴D轉(zhuǎn)化為碳-或雜環(huán)例如E的反應(yīng)可通過本領(lǐng)域普通技術(shù)人員所公知的Diels-Alder反應(yīng)實現(xiàn)(如L.W.Butz和A.W.Rytina Org.React 1949，5，136；M.C.Kloetzel，Org.React.1948，4，1)。這些反應(yīng)能通過使D和二烯反應(yīng)而實現(xiàn)，二烯如(但不限于)1，3-丁二烯，2，3-二甲基丁二烯，1，3-環(huán)己二烯，1-甲氧基-3-三甲基硅氧基-1，3-丁二烯(“Danishefsky’s二烯”，S.Danishefsky和T.Kitahara，J.Am.Chem.Soc.1974，96，7807)，o-醌二甲烷，二苯基苯并[c]呋喃，或蒽(antracene)。
酮A轉(zhuǎn)化到通式F的叔醇可通過與合適的有機(jī)金屬試劑在溶劑，如但不限于四氫呋喃，乙醚，甲基-叔丁基醚，二異丙基醚，苯，甲苯或己烷中，在介于-78℃到反應(yīng)混合物的相應(yīng)沸點的溫度范圍內(nèi)反應(yīng)而實現(xiàn)，有機(jī)金屬試劑例如但不限于烷基或芳基鋰，烷基鹵或鹵代芳基鎂，烷基或芳基鈉，烷基或芳基鉀等。叔醇F到相應(yīng)的叔氟化物F’的直接轉(zhuǎn)化反應(yīng)可通過本領(lǐng)域技術(shù)人員所公知的方法實現(xiàn)，包括但不限于與二乙基氨基硫三氟化物在溶劑，如二氯甲烷或氯仿中，于-78℃到120℃的溫度范圍內(nèi)進(jìn)行反應(yīng)。叔醇F到相應(yīng)的烷烴G的脫氧反應(yīng)可通過多種方法實現(xiàn)，例如用三乙基硅烷(或等量的氫氣供體)在Broensted酸(如三氟乙酸)或路易斯酸(如三氟化硼)的存在下，在溶劑如二氯甲烷，己烷或乙基醚中，在介于-78℃到相應(yīng)的反應(yīng)混合物的沸點的溫度范圍內(nèi)處理。酮A轉(zhuǎn)化為通式J表示的多種取代的肟的轉(zhuǎn)化反應(yīng)可通過多種本領(lǐng)域技術(shù)人員所公知的方法實現(xiàn)，包括但不限于A和鹽酸羥基胺，O-甲基鹽酸羥基胺，O-芐基鹽酸羥基胺等，在例如但不限于甲醇，乙醇，吡啶，N，N-二甲基甲酰胺，二甲基亞砜或乙腈的溶劑中，在例如三乙基胺、碳酸鈉或氫氧化鈉等堿的存在下，于-5℃到反應(yīng)混合物的沸點的溫度范圍內(nèi)進(jìn)行反應(yīng)。通過本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的多種方法(如Beckmann重排，L.G.和Heldt，W.Z.Org.React.1960，11，1)，可將相應(yīng)的肟J(R＝H)重新排列為內(nèi)酰胺K或L。此類方法包括但不限于用脫水試劑如PCl5，TsCl，硫酸等進(jìn)行處理。內(nèi)酰胺K和L可然后分別被還原為相應(yīng)的高哌嗪(homopiperazine)O和P，如本領(lǐng)域的技術(shù)人員所公認(rèn)的。用于此類轉(zhuǎn)化的方法包括但不限于用還原劑如氫化鋰鋁，鋁烷，硼烷，氫化二(2-甲氧基乙基)鋁鈉(Vitride，Red-Al)，在合適的溶劑例如四氫呋喃，乙醚，甲苯等中，于-78℃到反應(yīng)混合物的沸點的溫度范圍內(nèi)處理(如M.Hudlicky；Reductions in Organic Chemistry；Ellis Horwood Ltd.；Great Britain，1984，pp 168.)此外，內(nèi)酰胺K和L可能被分別N-烷基化或N-芳基化成為相應(yīng)的N-取代內(nèi)酰胺M和N。這一轉(zhuǎn)化可通過用強(qiáng)堿，例如但不限于氫化鈉，氫化鉀，四甲基哌啶鋰(lithium tetramethylpiperidide)，或叔-丁氧化鉀進(jìn)行處理，然后用合適的烷基鹵、芳基鹵或雜芳基鹵，例如但不限于甲基碘，乙基碘，芐基溴，2-氟硝基苯，2-氯-5-氟甲基哌啶，在催化劑，例如但不限于碘化鈉，碘化鉀或碘化四甲基銨的存在下，在合適的溶劑例如但不限于四氫呋喃，乙腈，二甲基亞砜，N，N-二甲基甲酸胺，叔-丁醇中，在-78℃到相應(yīng)反應(yīng)混合物的沸點的溫度范圍內(nèi)進(jìn)行處理而得。
酮A到取代的烯烴H的烯烴化反應(yīng)可通過多種本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的化學(xué)反應(yīng)實現(xiàn)。其中磷葉立徳(Wittig試劑)可由磷鎓鹽去質(zhì)子化制備而得，而磷鎓鹽由三苯基膦和烷基鹵反應(yīng)制備而得(如F.A.Carey和R.J.Sunderg；Advanced Organic Chemistry，Part B，Plenum Press，NewYork，1983，pp71)。烷基鹵包括但不限于甲基碘，乙基碘，芐基溴，溴代乙酸乙酯，2-溴代丙酸甲酯等等。去質(zhì)子化反應(yīng)所需的堿包括但不限于氫氧化鈉，氫化鈉，二異丙基氨基化鋰(lithium diisopropylamide)，叔-丁氧基鉀，正丁基鋰和叔-丁基鋰。合適于此類反應(yīng)的溶劑包括但不限于水，甲醇，乙醇，四氫呋喃，二甲基亞砜，苯或乙醚。反應(yīng)可在介于-78℃到相應(yīng)的反應(yīng)混合物的沸點的溫度范圍內(nèi)進(jìn)行。
酮A到單-或多烷基化酮I的α-烷基化反應(yīng)可通過用堿和烷基化試劑在合適的溶劑中處理A制備。合適的堿包括但不限于二異丙基氨化鋰，六甲基二硅疊氮烷基鋰(LiHMDS)，叔-丁氧基鉀，甲氧基鈉以及2，2，6，6-四甲基哌啶基鋰。烷基化試劑包括但不限于甲基碘，乙基碘，2-碘代丙烷，原甲酸甲酯，芐基溴，以及苯乙基溴。合適的溶劑包括但不限于四氫呋喃，二甲基亞砜，N，N-二甲基甲酰胺，叔-丁醇和甲醇。反應(yīng)溫度為-78℃到相應(yīng)的反應(yīng)混合物的沸點之間。
酮A到內(nèi)酯Q和R的轉(zhuǎn)化可通過本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的Baeyer-Villiger反應(yīng)實現(xiàn)。該反應(yīng)包括用氧化劑，包括但不限于過氧化氫，過氧化苯甲酸，過氧乙酸或m-氯代過氧化苯甲酸在溶劑，例如但不限于二氯甲烷，氯仿，苯中，于-30℃到反應(yīng)混合物的沸點溫度之間對A處理。
酮A到gem-二氟化物S的轉(zhuǎn)化可通過如用二乙基胺硫三氟化物在溶劑如二氯甲烷或氯仿中，于-78℃到120℃的溫度范圍內(nèi)進(jìn)行處理而得。
酮A到腈T的轉(zhuǎn)化可通過多種本領(lǐng)域公知的方法實現(xiàn)。此類方法的一個例子是與甲苯磺?；谆愲婊镌趬A，例如但不限于叔-丁氧基鉀的存在下，在溶劑例如1，2-二甲氧基乙烷中，于10℃到溶劑沸點之間的溫度范圍內(nèi)進(jìn)行反應(yīng)(參見如.O.H.Oldenziel等人.，J.Org.Chem.1977，42，3114)。
路線J(通過6，5雙環(huán)合成方法合成八氫-吡咯并[1，2-a]吡嗪衍生物) 簡單來說，用1當(dāng)量的芐基溴和2.5當(dāng)量的碳酸鉀將BOC保護(hù)的5-氧-吡咯烷-1，2-二羧酸(dicarboxylatic acid)(1)轉(zhuǎn)化為芐基酯(2)。加入溶解于THF中的溴化芳基鎂格氏試劑(如0℃，2h)，然后進(jìn)行水性反應(yīng)，得到了酮，2-叔-丁氧基碳?；被?5-芳基-5-氧-戊酸芐基酯(3)。用溶于二氯甲烷的三氟乙酸進(jìn)行處理(如在0℃進(jìn)行，然后在超過2小時的時間內(nèi)緩慢加熱到室溫)，從而進(jìn)行解保護(hù)和環(huán)化反應(yīng)。用1N NaOH進(jìn)行堿化至pH為7，進(jìn)行有機(jī)物洗提，得到5-芳基-3，4-二氫-2H-吡咯-2-羧酸芐基酯TFA鹽(4)。用Pd/C催化劑在50psi的壓力下和在甲醇中進(jìn)行氫化反應(yīng)(如進(jìn)行15小時)，得到了5-芳基-吡咯烷-2-碳酸TFA鹽(5)。在二氯甲烷和二異丙基乙胺中用二-叔丁基二碳酸酯進(jìn)行氨基保護(hù)反應(yīng)，然后用pyBrop和二異丙基乙胺偶聯(lián)到芳香胺上，得到酰胺，叔-丁基酯(7)。用三氟乙酸斷開Boc，然后用鋁烷進(jìn)行還原，得到仲胺(9)。用溴代乙酸乙酯進(jìn)行烷基化反應(yīng)，得到氨基酯，該氨基酯可用溶于THF中的氫化鈉環(huán)化，得到內(nèi)酰胺(11)。還原內(nèi)酰胺得到最終產(chǎn)物(12)。
路線K(哌嗪苯甲酰溴的合成) 簡單地說，用1當(dāng)量的任意取代的苯甲醛，哌嗪-1-羧酸叔-丁基酯和苯并三唑反應(yīng)，生成任選取代的苯基-乙基-哌嗪-1-羧酸叔丁酯。與三氟乙酸和二氯甲烷進(jìn)行反應(yīng)，得到任選取代的苯基-乙基-哌嗪。然后與任選取代的苯甲酰氯進(jìn)行反應(yīng)，得到苯甲酰胺。
路線L(烯烴易位) 簡單地說，按照路線K中所述的方法進(jìn)行3-烯丙基-1-(4-芳基)-哌嗪的還原性烷基化反應(yīng)在乙醇和甲苯中將哌嗪類似物、1當(dāng)量的苯并三唑和1當(dāng)量的任選取代的苯甲醛一起進(jìn)行加熱。約20分鐘后濃縮溶液。將殘留物溶解于THF中，然后用2.5當(dāng)量的溴代乙烯基鎂進(jìn)行處理。然后進(jìn)行水性有機(jī)物洗提，并用制備性TLC純化，獲得了二乙烯基產(chǎn)物。將二乙烯基化合物溶解于二氯甲烷中成為0.05M的溶液，加入0.1當(dāng)量的Grubb’s催化劑，苯亞甲基-二(三環(huán)己基膦)二氯化釕。在室溫下攪拌進(jìn)行反應(yīng)(如18小時)，過濾并用制備性TLC純化。
路線M(吡嗪[1，2-a]喹喔啉-5-酮衍生物) 簡單地說，使硝基取代的芳基環(huán)連接到哌嗪酯(1)上，得到化合物2。還原硝基取代基生成胺(3)，然后對其進(jìn)行環(huán)化。加入第二種芳香基，得到了化合物5。任選地，可加入其它的環(huán)取代基(如生成化合物6)。顯然，上述的特定芳香族取代基僅為代表性的，而并非是用于限定可用于本發(fā)明化合物的此類基團(tuán)的范圍。
在某些條件下，本發(fā)明的化合物可包括一個或多個不對稱碳原子，以使化合物能以不同的立體異構(gòu)形式存在。例如，這些化合物可為外消旋或為光學(xué)活性形式。如上所述，所有的立體異構(gòu)體都含蓋在本發(fā)明的范圍內(nèi)。然而，理想的是獲得單一的對映體(即光學(xué)活性形式)。制備單一對映體的標(biāo)準(zhǔn)方法包括不對稱合成和外消旋體的拆分。外消旋體的拆分可采用常規(guī)的方法，如在拆解試劑的存在下結(jié)晶，或采用具有如手性HPLC柱的色譜法來實現(xiàn)。如上所述，對具有α-甲基芐基基團(tuán)(R3為甲基，R4為氫)的化合物，優(yōu)選R對映體。此類化合物的不對稱合成可通過采用路線D和實施例1中所述的方法實現(xiàn)。
如上所述，本發(fā)明涵蓋了此處所述化合物的藥學(xué)可接受的鹽。本發(fā)明中，“藥學(xué)可接受的鹽”是酸式鹽或堿式鹽，本領(lǐng)域內(nèi)通常認(rèn)為其適合用于與人類或動物的組織相接觸，而不產(chǎn)生過度的毒性，刺激性，敏感反應(yīng)或其它問題或并發(fā)癥。此類鹽包括堿性殘留物如胺的有機(jī)酸鹽和無機(jī)酸鹽，以及酸性殘留物如羧酸的堿鹽或有機(jī)鹽類。特定的藥用鹽包括但不限于酸鹽如鹽酸，磷酸，氫溴酸，蘋果酸，羥基乙酸，富馬酸，硫酸，氨基磺酸，對氨基苯磺酸，甲酸，甲基苯磺酸，甲磺酸，乙二磺酸，2-羥基乙基磺酸，硝酸，苯甲酸，2-酰氧基苯甲酸，檸檬酸，酒石酸，乳酸，硬脂酸，水楊酸，谷氨酸，抗壞血酸，棕櫚酸(pamoic)，琥珀酸，富馬酸，馬來酸，丙酸，羥基馬來酸，氫碘酸，苯乙酸，鏈烷酸例如乙酸，n為0-4的HOOC-(CH2)n-COOH等等的鹽類。類似地，藥學(xué)上可接受的陽離子包括但不限于鈉，鉀，鈣，鋁，鋰和銨離子。本領(lǐng)域的技術(shù)人員能進(jìn)一步識別用于本發(fā)明化合物的藥學(xué)上可接受的鹽，包括Remington’s Pharmaceutical Sciences，17thed.，Mack Publishing Company，Easton，PA，p.1418(1985)中所列出的鹽。因此，本公開應(yīng)該被解釋為包括所有特別舉出的化合物的藥學(xué)上的鹽。
可用多種合成方法制備藥學(xué)可接受的鹽。一般來說，可用任何常規(guī)的化學(xué)方法從含有堿或酸部分的母體化合物制備藥學(xué)上可接受的鹽。簡單地說，可通過將這些化合物的游離酸或堿的形式與化學(xué)劑量的合適的堿或酸在水或有機(jī)溶劑，或兩者的混合物中反應(yīng)；通常，優(yōu)選非水性介質(zhì)如醚、乙酸乙酯、乙醇、異丙醇或乙腈。
本發(fā)明中化合物的前藥可通過修飾化合物中的官能團(tuán)這一方法而制備，修飾體可斷裂離開生成母體化合物。前藥包括其中羥基、氨基或巰基連接到任何基團(tuán)的化合物，當(dāng)對哺乳動物患者給藥時，分別斷開形成了游離羥基，氨基或巰基。前藥的例子包括但不限于本發(fā)明化合物內(nèi)的醇或胺官能團(tuán)的乙酸酯、甲酸酯和苯甲酸酯衍生物。優(yōu)選的前藥包括?；难苌铩１绢I(lǐng)域的普通技術(shù)人員能識別多種可用來制備本發(fā)明化合物的前藥的合成方法。
可用任何合適的方法可使其它部分和化合物締合。采用化合物或其它部分上的合適官能團(tuán)(如羥基，羧基，巰基或氨基基團(tuán))，通?？蓪崿F(xiàn)共價連接。舉例來說，親核基團(tuán)如氨基或巰基，可能與一個含有羰基基團(tuán)的化合物如酸酐或酰鹵反應(yīng)，或與另一個具有含良好離去基的烷基基團(tuán)的化合物(如鹵代物)發(fā)生反應(yīng)。雙官能基、多官能基和/或可離去連接物的采用對于某些應(yīng)用也是理想的。此類連接物在本領(lǐng)域中是公知的。與載體相締合的化合物可為共價連接，或優(yōu)選此類締合不包括共價作用而是由混合實現(xiàn)的。
采用含有至少一個放射性同位素原子，如碳(優(yōu)選14C)，氫(優(yōu)選為3H)，硫(優(yōu)選為35S)或碘(優(yōu)選為125I)的前體進(jìn)行合成，可對化合物進(jìn)行放射性標(biāo)記。此類放射性標(biāo)記的化合物的合成可通過放射性同位素供體方便地實現(xiàn)，該類放射性同位素供體專用于放射性標(biāo)記探針化合物的常規(guī)合成中，如Amersham Corporation，Arlington Heights，IL；Cambridge Isotope Laboratories，Inc.Andover，MA；SRI International，Menlo Park，CA；Wizard Laboratories，West Sacramento，CA；ChemSynLaboratories，Lexena，KS；American Radiolabeled Chemicals，Inc.，St.Louis，MO；以及Moravek Biochemicals Inc.，Brea，CA.氚標(biāo)記的化合物也可通過在氚化的乙酸中進(jìn)行鉑催化交換，在氚化的三氟乙酸中進(jìn)行酸催化交換，或用氚氣進(jìn)行的不均勻催化交換方便地制備得到。此類制備也可通過任何上述用化合物作為基質(zhì)的供體進(jìn)行常規(guī)的放射性標(biāo)記而方便地實現(xiàn)。此外，某些前體可用氚氣進(jìn)行氚-鹵素交換，進(jìn)行不飽和鍵的氚氣還原，或采用硼氚化鈉還原。
藥物組合物本發(fā)明還提供了藥物組合物，其包括本文所述的MCH受體調(diào)控因子，以及至少一種生理學(xué)上可接受的載體或賦形劑。藥物組合物可能包括有水，緩沖劑(如中性緩沖鹽或磷酸緩沖鹽)，乙醇，礦物油，植物油，二甲基亞砜，碳水化合物(如葡萄糖，甘露糖，蔗糖或葡聚糖)，甘露醇，蛋白質(zhì)，輔劑，多肽或氨基酸如甘氨酸，抗氧化劑，鰲合劑如EDTA或谷吡啶和/或防腐劑。優(yōu)選的藥物組合物被制成通過口服輸送到人體或其它動物(如陪伴型動物如狗)的形式。
如果需要，也可包括其它活性組分。例如，用于治療進(jìn)食失調(diào)，特別是肥胖癥和易餓病的組合物，可進(jìn)一步包括瘦素，瘦素受體激動劑，黑皮質(zhì)素受體4(MC4)激動劑，西布曲明，右芬氟拉明，生長激素促分泌素，β-3激動劑，5HT-2激動劑，食欲素拮抗劑，神經(jīng)肽Y1或Y5拮抗劑，甘丙素拮抗劑，CCK激動劑，GLP-1激動劑和/或促腎上腺皮質(zhì)激素-釋放激素激動劑。
藥物組合物可被制劑成任何合適給藥的形式，包括如局部、口服、鼻內(nèi)、直腸或非腸道給藥。本發(fā)明中的術(shù)語非腸道包括皮下，皮內(nèi)，血管內(nèi)(如靜脈內(nèi))，肌內(nèi)，脊柱，顱骨內(nèi)，胸內(nèi)和腹膜內(nèi)注射，以及任何相似的注射或灌注技術(shù)。在某些實施方式中，組合物優(yōu)選為適合用于口服的形式。這些形式包括有片劑，錠劑，糖錠，水性或油性懸浮液，可分散的粉末或顆粒，乳液，硬或軟膠囊，或糖漿或酏劑。而在其它實施方式中，本發(fā)明的組合物可制成凍干劑。
用于口服的組合物還可進(jìn)一步包括一種或多種組分，如甜味劑、調(diào)味劑、著色劑和防腐劑，以提供吸引人和可口的制劑。片劑包括與適合于制造片劑的生理學(xué)上可接受的賦形劑預(yù)先混合的活性成分。此類賦形劑包括有惰性稀釋劑(如碳酸鈣，碳酸鈉，乳糖，磷酸鈣或磷酸鈉)，成粒劑和崩解劑(如玉米淀粉或褐藻酸)，粘合劑(如淀粉，明膠或阿拉伯樹膠)以及潤滑劑(如硬脂酸鎂，硬脂酸或滑石)。片劑可為未包衣的，或用公知技術(shù)包衣的，以延緩在胃腸道中的分解和吸收，從而提供長時期的緩釋作用。例如，可采用延時材料如單硬脂酸甘油酯或二硬脂酸甘油酯。
用于口服的制劑可為硬明膠膠囊，其中活性成分與惰性固體稀釋劑(如碳酸鈣，磷酸鈣或高嶺土)相混合，或為軟明膠膠囊，其中活性成分與水或油介質(zhì)(如花生油、液體石蠟或橄欖油)相混合。
水性懸浮液包括與合適于制造水性懸浮液的賦形劑預(yù)先混合的活性材料。此類賦形劑為懸浮劑(如羧甲基纖維素鈉、甲基纖維素、氫化丙基甲基纖維素、藻酸鈉、聚乙烯吡咯烷酮、龍須膠和阿拉伯樹膠)；以及分散或潤濕劑(如天然存在的磷脂如卵磷脂，氧化乙烯和脂肪酸如聚氧乙烯硬脂酸酯的縮合產(chǎn)物，氧化乙烯和長鏈脂肪醇如十七乙烯氧基鯨蠟醇(heptadecaethyleneoxycetanol)的縮合產(chǎn)物，氧化乙烯和由脂肪酸與己糖醇如聚氧乙烯山梨糖醇單油酸酯衍生的部分酯的縮合產(chǎn)物，或氧化乙烯和從脂肪酸與己糖醇酐如聚乙烯山梨糖醇酐單油酸酯衍生的部分酯的縮合產(chǎn)物)。含水懸浮液還可包括一種或多種防腐劑，如p-羥基苯甲酸乙酯或正丙酯，一種或多種著色劑，一種或多種調(diào)味劑，以及一種或多種甜味劑如蔗糖或糖精。
油性懸浮液可通過將活性成分懸浮在植物油(如花生油、橄欖油、芝麻油或椰子油)或礦物油如液體石蠟中制備而得。油性懸浮液可包括增稠劑如蜂蠟、硬石蠟或鯨蠟醇。甜味劑如上述甜味劑，和/或可加入調(diào)味劑以提供可口的口服制劑。此類懸浮液可通過加入抗氧化劑如抗壞血酸加以保存。
適于制備加入水的水性懸浮液的可分散粉末或顆粒，提供了與分散或潤濕劑，懸浮劑和一種或多種防腐劑預(yù)先混合的活性成分。合適的分散劑或潤濕劑及懸浮劑的示例如上述提到的例子。也可存在其它的賦形劑，如甜味劑，調(diào)味劑和著色劑。
藥物組合物也可為水包油的乳液形式。油相可為植物油(如橄欖油或落花生油)或礦物油(如液體石蠟)或其混合物。合適的乳化劑可為天然存在的膠(如阿拉伯樹膠或龍須膠)，天然存在的磷脂(如大豆磷脂，卵磷脂，以及從脂肪酸和己糖醇衍生的酯或部分酯)，酸酐(如山梨糖醇酐單油酸酯)以及從脂肪酸和己糖醇衍生的部分酯和氧化乙烯的縮合產(chǎn)物(如聚氧化乙烯山梨糖醇酐單油酸酯)。乳液可含有甜味劑和/或調(diào)味劑。
糖漿和酏劑可與甜味劑如甘油，丙二醇，山梨糖醇或蔗糖一起制劑。此類制劑可包括一種或多種緩和劑，防腐劑，調(diào)味劑和/或著色劑。
藥物組合物可被制成可無菌注射的水性或油性懸浮液。取決于所采用的載體以及濃度，調(diào)控因子可被懸浮于或被溶于載體中。此類組合物可按照公知技術(shù)，采用合適的分散劑，潤濕劑和/或如上所述的懸浮劑制備而得。能采用的可接受的載體或溶劑為水，1，3-丁二醇，Ringer’s溶劑和等壓氯化鈉溶液。此外，可采用無菌、不易揮發(fā)的油作為溶劑或懸浮介質(zhì)。為此目的可采用無刺激性、不易揮發(fā)的油，包括合成的單-或二甘油酯。此外，制備可注射的組合物中可采用脂肪酸如油酸，且載體中可溶解輔劑如局部麻醉劑，防腐劑和/或緩沖劑。
調(diào)控因子也可制成栓劑的形式(如用于直腸給藥)。此類組合物可通過使藥物和合適的非刺激性賦形劑相混合而制得，所述的賦形劑在常溫下為固體，而在直腸溫度下為液體，因此在直腸處會溶解釋放出藥物。合適的賦形劑包括可可脂和聚乙二醇。
為對非人類的動物給藥，可將組合物加到動物的飼料或飲用水中?？煞奖愕刂苽鋭游镲暳虾惋嬘盟M合物，以使動物隨著食物一起攝取合適量的組合物。將組合物作為添加到飼料或飲用水中的預(yù)混物提供也很方便。
藥物組合物也可被制成緩釋制劑(即例如一種在給藥后緩慢釋放調(diào)控因子的方式作用的制劑)。此類制劑通常采用公知的技術(shù)制備，且通過如口服，直腸或皮下注入，或通過在希望的目標(biāo)位置注入的方式進(jìn)行給藥。在此類制劑中采用的載體是生物相容的，且可為生物可降解的，優(yōu)選制劑提供相對穩(wěn)定水平的調(diào)控因子釋放。緩釋制劑中調(diào)控因子的量取決于注入的位置、速度和預(yù)期的釋放周期，以及被治療或預(yù)防的病癥的性質(zhì)。
藥物組合物中的調(diào)控因子通常以治療有效量存在。治療有效量是指導(dǎo)致可辨別的療效，例如增長與本文中所述的致病MCH受體相關(guān)的疾病或癥狀的愈合。優(yōu)選的濃度為足以抑制體內(nèi)MCH結(jié)合到MCHR1受體的濃度。組合物提供的劑量范圍優(yōu)選每天每公斤體重約0.1mg到約140mg(每天每患者約0.5mg到約7g)。隨著治療主體和給藥特定形式的變化，可與載體材料聯(lián)合形成單劑量形式的活性成分的量可能會有所不同。劑量單位形式一般包括從約1mg到約500mg之間的活性成分。然而應(yīng)該理解，對任何特殊患者的最佳劑量取決于多種因素，包括采用的特定化合物的活性、年齡、體重、健康狀況、性別和病人的胃口、給藥時間和途徑、排泄速度、任何同步的治療如聯(lián)合給藥；以及正在治療的特定疾病的嚴(yán)重程度?？刹捎贸Ｒ?guī)試驗和本領(lǐng)域公知的方法來確定最佳劑量。
藥物組合物可進(jìn)行包裝，治療相應(yīng)于黑色素濃集的激素受體調(diào)節(jié)的病癥(例如，治療代謝失調(diào)如糖尿病，心臟疾病，中風(fēng)，進(jìn)食失調(diào)如肥胖癥或易餓病，或性疾病如性快感缺乏或心理性陽痿)。包裝的藥物組合物包括包裝物，其盛有如本發(fā)明所述的治療有效量的至少一種MCH受體調(diào)控因子，以及指示(如標(biāo)簽)，其表明所含的組合物用于治療與病人的MCH受體調(diào)節(jié)的相關(guān)疾病。
在某一方面，本發(fā)明提供了抑制與致病MCH受體相關(guān)的疾病或病癥的發(fā)展的方法。話句話說，本發(fā)明提供的治療方法可用于治療疾病，或可用于防止或延遲此類疾病在病人中發(fā)生，該病人未患有可檢測到的與致病MCH受體相關(guān)的疾病。無論局部存在的MCH的量為多少，如果特征表現(xiàn)為MCH受體受到不合宜的刺激，則本發(fā)明中的疾病或病癥“與致病性MCH受體相關(guān)”。此類病癥包括有代謝失調(diào)(如糖尿病)，心臟病，中風(fēng)，進(jìn)食失調(diào)(如肥胖癥和易餓病)，或性疾病如性快感缺乏或心理性陽痿。這些病癥可通過采用本領(lǐng)域中己建立的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行診斷。病人包括人類，馴化的陪伴型動物(寵物如狗)以及牲畜，采用上述的劑量和治療法進(jìn)行治療。
劑量頻率隨著采用的化合物和被治療或預(yù)防的特定疾病不同而有所不同。一般來說，為治療大多數(shù)的疾病，優(yōu)選劑量療法為每天4次或更少。為治療包括肥胖癥的進(jìn)食失調(diào)，特別優(yōu)選每天1到2次的劑量療法。為治療陽痿，希望采用能快速達(dá)到有效濃度的單劑量。然而應(yīng)該理解，對于任何特定患者的特定劑量取決于多種因素，包括采用的特定化合物的活性，患者年齡，體重，一般健康狀況，性別，胃口，給藥時間，給藥途徑，排泄速度，聯(lián)合給藥，以及正在治療的特定疾病的嚴(yán)重程度。一般來說，優(yōu)選采用足以提供有效治療的最小劑量?？刹捎帽绢I(lǐng)域普通技術(shù)人員公知的適合于被治療或預(yù)防的病人的方法，可對病人進(jìn)行一般性的監(jiān)測。
在另一方面，本發(fā)明提供了多種本發(fā)明的組合物在體內(nèi)的應(yīng)用。例如，此類化合物可用作檢測和定位存在于如組織部分的樣品中的MCH受體，作為受體活性試驗中的陽性對照物，作為測定候選試劑結(jié)合MCH受體的能力的標(biāo)準(zhǔn)和試劑，或作為正電子發(fā)射段層造影(PET)成像或單光子發(fā)射計算機(jī)化段層造影(SPECT)的放射性示蹤劑。此類試驗可被用于表征活體中的MCH受體。此類化合物也可用作測定潛在藥物結(jié)合到黑色素濃集激素受體的能力的標(biāo)準(zhǔn)和試劑。
為測定樣品中存在或缺乏MCH受體的方法中，樣品應(yīng)和本發(fā)明化合物在允許化合物結(jié)合到MCH受體上的條件下進(jìn)行孵育。然后測定結(jié)合到樣品中MCH受體上的化合物的量。例如，采用多種公知技術(shù)中的一種對化合物進(jìn)行標(biāo)記(例如，用放射性核素如本發(fā)明所述的氚進(jìn)行放射性標(biāo)記)，并與樣品一起孵育(樣品可為培養(yǎng)細(xì)胞的制品，組織制品或其片斷)。適宜的孵育時間通常取決于對一段時間內(nèi)發(fā)生的結(jié)合程度的測試結(jié)果。孵育后，除去未結(jié)合的化合物，并采用任何可用的標(biāo)記方法(如對于放射性標(biāo)記的化合物的放射自顯影術(shù)或閃爍計數(shù)法)檢測結(jié)合的化合物。作為對照，可同時將相符的樣品與放射性標(biāo)記的化合物以及大量的未標(biāo)記的化合物相接觸。然后以相同的方式除去未結(jié)合的標(biāo)記和未標(biāo)記的化合物，檢測結(jié)合的標(biāo)記物。試驗的樣品中可檢測到的標(biāo)記物比對照樣品中的標(biāo)記物多得多，這表明樣品中存在有辣椒素受體。檢測試驗，包括對培養(yǎng)的細(xì)胞或組織樣品中MCH受體的放射自顯影術(shù)(受體作圖)，可按照Kuhar在Current Protocols in Pharmacology(1998)John Wiley&Sons，New York的8.1.1到8.1.9部分的描述方法進(jìn)行。
本發(fā)明提供的調(diào)控因子也可用于多種公知的細(xì)胞培養(yǎng)和細(xì)胞分離方法。例如，調(diào)控因子可連接到組織培養(yǎng)皿或其它細(xì)胞培養(yǎng)物載體的內(nèi)表面，來固定MCH受體-表達(dá)細(xì)胞，用于篩選，分析和在培養(yǎng)物中生長。此類連接可用任何合適的技術(shù)實現(xiàn)，如上述的方法以及其它的標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)。調(diào)控因子也可促進(jìn)在體內(nèi)細(xì)胞的識別和分選，其允許挑選表達(dá)MCH受體的細(xì)胞。優(yōu)選地，用于此類方法中的調(diào)控因子被本發(fā)明所述的方法進(jìn)行標(biāo)記。在一種優(yōu)選實施方式中，連接到熒光標(biāo)記物如熒光素的調(diào)控因子與細(xì)胞相接觸，然后采用熒光活化細(xì)胞分選法(FACA)進(jìn)行分析。
另一方面，本發(fā)明中在體內(nèi)或體外對MCH與MCH受體的結(jié)合進(jìn)行調(diào)節(jié)的方法，包括使MCH受體和足量的本發(fā)明的調(diào)控因子在適于將MCH結(jié)合到受體的條件下相接觸。優(yōu)選地，在此類方法中，MCH與受體的結(jié)合受到調(diào)控因子的抑制。MCH受體可存在于溶液、培養(yǎng)的或離析的細(xì)胞制劑，或患者體內(nèi)。優(yōu)選地，MCH受體為存在于下丘腦中的MCHR1受體。一般來說，例如在實施例2所述的結(jié)合試驗中，與受體相接觸的化合物的量應(yīng)該足以在體內(nèi)調(diào)節(jié)MCH與MCH受體的結(jié)合。用于在體內(nèi)進(jìn)行測定的MCH受體制劑可有多種來源，如此處所述，如來自于被MCH受體表達(dá)載體轉(zhuǎn)染的HEK293細(xì)胞或Chinese Hamster Ovary(CHO)細(xì)胞。
本發(fā)明還提供了通過使體內(nèi)或體外的MCH受體與足量的上述調(diào)控因子在適于使MCH結(jié)合到和受體上的條件下接觸，從而調(diào)節(jié)細(xì)胞的MCH受體的信號-轉(zhuǎn)換活性的方法。優(yōu)選地，在該方法中，信號轉(zhuǎn)換活性受到了調(diào)控因子的抑制。MCH受體可存在于溶液，培養(yǎng)的或離析的細(xì)胞制劑，或患者體內(nèi)。一般來說，例如在實施例3所述的鈣移動試驗中，與受體相接觸的調(diào)控因子的量應(yīng)該足以調(diào)節(jié)體內(nèi)MCH受體信號轉(zhuǎn)換活性?？刹捎脴?biāo)準(zhǔn)技術(shù)，如細(xì)胞內(nèi)的膜片箝記錄或膜片箝記錄，評估信號轉(zhuǎn)換活性結(jié)果，其為細(xì)胞電生理學(xué)變化的指標(biāo)。如果受體存在于動物中，細(xì)胞的電生理學(xué)變化可由于動物進(jìn)食行為的變化被檢測到。
以下提供的實施例是闡釋性，而并非是限定性的。除非特別指出，所有的試劑和溶劑都是標(biāo)準(zhǔn)的商業(yè)級，使用時無需進(jìn)一步提純。
實施例實施例1代表性1-芐基-4-芳基哌嗪的制備本實施例闡述了代表性1-芐基-4-芳基哌嗪的合成方法。顯然，采用多種起始化合物，可通過這些方法制備非常多的此類化合物。本實施例中參照的路線均引自上述的路線A-K。
I.由路線A制備1-(5-溴-6-甲氧基吡啶-2-基)-4-(3，4-二甲氧基芐基)哌嗪 將0.1g(0.4mmol，leq)的1-(5-溴-6-甲氧基吡啶-2-基)哌嗪和0.061g(0.4mmol，leq)的3，4-二甲氧基苯甲醛溶解在5ml無水甲苯中，加入3滴冰醋酸。向溶液中加入過量的NaBH(OAc)3并在氮氣氛中于室溫下攪拌，直到用TLC檢測不到起始原料。此時用飽和NaHCO3溶液猝滅反應(yīng)，并用乙酸乙酯進(jìn)行洗提。用無水MgSO4干燥乙酸乙酯的洗提物，并在真空中進(jìn)行濃縮。殘留物在SiO2上用10％的CH3OH(2M NH3)/CH2Cl2進(jìn)行色譜純化，得到1-(5-溴-6-甲氧基吡啶-2-基)-4-(3，4-二甲氧基芐基)哌嗪(化合物1)。分析1H NMR(400MHz，DMSO)7.71(1H，d)，7.36(1H，s)，7.05(2H，m)，6.39(1H，d)，4.38(4H，m)，3.80(9H，m)，3.39(4H，m)，3.02(2H，m)。MS(LC-MS)C19H24BrN3O3的計算值422.32，測定值436.3424.31(M+2)。
II.由路線B制備1-(4-氯-3-三氟甲基-苯基)-4-[1-(3，4-二甲氧基-苯基)-乙基]-哌嗪 將0.17g(0.6mmol，leq)的1-(4-氯-3-三氟甲基-苯基)-哌嗪和0.1g(0.6mmol，leq)的3，4-二甲氧基苯乙酮以及2ml Ti(OiPr)4一起加熱到70℃達(dá)2小時。反應(yīng)溶液冷卻到室溫，加入20ml無水甲醇，然后加入1.0gNaBH4，并在室溫下攪拌得到的溶液達(dá)2小時。用1N NaOH溶液猝滅反應(yīng)，并用CH2Cl2進(jìn)行洗提。用無水MgSO4干燥CH2Cl2的洗提物，并在真空中進(jìn)行濃縮。具有乙基的殘留物在SiO2上進(jìn)行色譜純化，得到1-(4-氯-3-三氟甲基-苯基)-4-[1-(3，4-二甲氧基-苯基)-乙基]-哌嗪(化合物2)。分析1H NMR(400MHz，CDCl3)7.31(1H，d)，7.19(1H，m)，6.90(4H，m)，3.89(6H，d)，3.38(1H，m)，3.20(4H，m)，2.61(4H，m)。MS(LC-MS)C21H24ClF3N2O2的計算值428.88，測定值429.30(M+)。
III.由路線C制備3-{1-[4-(4-溴-3-甲氧基-苯基)-哌嗪-1-基]-乙基}-喹啉 將含有3-喹啉羧基醛(25mg，0.16mmol，1.0eq)，苯并三唑(19mg，0.16mmol，1.0eq)以及1-(4-溴-3-甲氧基-苯基)-哌嗪(39mg，0.17mmol，1.1當(dāng)量)的乙醇(1ml)和甲苯(2ml)溶液在60℃加熱20分鐘，然后濃縮溶液。殘留物與甲苯一起共蒸發(fā)，然后溶解于THF中并用濃度為3.0M的溴代甲基鎂的二乙醚溶液(0.13ml，0.4mmol，2.5eq)進(jìn)行處理。反應(yīng)物在室溫下攪拌18小時。用醋酸乙酯稀釋反應(yīng)物并用1N NaOH，鹽水洗滌兩次，干燥(MgSO4)，過濾并濃縮。殘留物用制備性TLC純化，得到3-{1-[4-(4-溴-3-甲氧基-苯基)-哌嗪-1-基]-乙基}-喹啉(化合物3)。收率41mg，81％。分析1H NMR(400MHz，CDCl3)8.96(1H，s)，8.08(2H，m)，7.82(1H，d)，7.70(1H，t)，7.56(1H，t)，7.34(1H，t)，6.45(1H，m)，6.36(1H，dd)，3.85(3H，s)，3.68(1H，q)，3.18(4H，m)，2.73(2H，m)，2.60(2H，m)，1.54(3H，d)。MS(LC-MS)C22H24BrN3O的計算值426.11，測定值426.14，M+2。
IV(R)-1-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-4-[1-(3，4-二甲氧基-苯基)-乙基]-哌嗪 將40g(0.22mol，leq)的1-(3，4-二甲氧基-苯基)-乙酮，35g(0.22mol，leq)的哌嗪-1羧酸乙酯和125ml(0.44mol，2.0當(dāng)量)的異丙基鈦(IV)在氮氣氛中于室溫下攪拌過夜。將反應(yīng)混合物冷卻到0℃，加入200ml的MeOH，然后仔細(xì)加入9.1g的NaBH4。室溫下攪拌混合物過夜。用250ml的1N NaOH猝滅反應(yīng)并用二氯甲烷洗提。用鹽水洗滌洗提物，用Na2SO4干燥，并濃縮得到70g黃色油狀物。
將原油和100g KOH溶解在250mL乙醇和125mL水中。將混合物回流加熱過夜。除去溶劑，將殘余物溶解在1N HCl中，然后用乙酸乙酯洗提。用鹽水洗滌洗提物，用Na2SO4干燥，并濃縮得到黃色油狀物(38g，65％)。分析MS(LC-MS)C14H22N2O2的計算值250.17，測定值251.27(M+)。
將39g(0.15mol，leq)的1-[1-(3，4-二甲氧基-苯基)-乙基]-哌嗪溶解于150ml的叔丁基甲醚和150ml的甲醇中，然后加熱到45℃。在該溶液中緩慢加入被加熱至40℃，且溶于50ml叔丁基甲基醚和30ml甲醇的11.7g(.076mol，0.5eq)L-酒石酸。緩慢冷卻并維持在室溫下過夜后，過濾收集白色沉淀物，得到了26g固體產(chǎn)物。固體在300ml 90％的甲醇-水中重結(jié)晶兩次，得到白色固體12g，其被轉(zhuǎn)化為7.4g游離堿(回收率38％)。分析1H NMR(300MHz，CDCl3)6.86(1H，s)，6.79(2H，d)，3.85(6H，d)，3.24(4H，t)，2.84(4H，t)，2.35(4H，m)，1.32(3H，d)。MS(LC-MS)C14H22N2O2的計算值250.17，測定值251.27(M+)。用產(chǎn)物的Mosher’s酰胺衍生物鑒定產(chǎn)品的手性純度為100％，并用手性HPLC進(jìn)行檢測。
將4.2g(17mmol，1.2eq)的(R)-1-[1-(3，4-二甲氧基-苯基)-乙基]-哌嗪和4.4g(20mmol，1.2eq)的5-溴-2-氯-苯甲醚溶解于110ml的無水甲苯中，然后用N2清洗該溶液20分鐘。向溶液中依次加入0.33g(0.5mmol，0.03eq)rac-2，2’-二(二苯基-膦)-1，1’-聯(lián)萘基(binapphtyl)，0.031g(0.34mmol，0.02eq)三(二亞芐基丙酮)-二鈀(0)和2.4g(22mmol，1.3eq)叔-丁氧基鉀?；旌衔镌诘獨夥罩屑訜嶂?0℃過夜。冷卻之后，用硅藻土過濾反應(yīng)物。用1N NaOH和鹽水洗滌有機(jī)溶液，用NaSO4干燥并濃縮。在硅膠上，殘留物用以1∶1乙酸乙酯己烷洗脫的快速色譜法純化，得到棕色的油狀物。將該產(chǎn)品(化合物4)轉(zhuǎn)化為其鹽酸鹽，得到黃色固體(4.1g，53％)。Mp172-6℃。分析1H NMR(400MHz，DMSO)11.8(1H，s)，9.2(1H，s)，7.48(1H，s)，7.21(1H，d)，7.12(1H，dd)，6.99(1H，d)，6.68(1H，d)，6.59(1H，dd)，4.42(1H，t)，3.80(12H，m)，3.39(1H，t)，3.19(1H，t)，2.99(3H，m)，1.73(3H，d)。MS(LC-MS)C21H27ClN2O3的計算值390.90，測定值391.38(M+)。
V.由路線E制備(6R，10S)-2-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)-八氫-吡啶并[1，2-a]吡嗪 將固體的碳酸氫二-叔丁酯(16.68g，76.43mmol，1.10eq)在超過30分鐘的時間內(nèi)以等分試樣加入到溶解于1N NaOH(140ml)和二噁烷(140ml)的L-2-氨基-戊-4-烯酸(8.0g，69.48g，1.0eq)的冰冷溶液中。移去冰浴，在室溫下攪拌反應(yīng)達(dá)4小時。濃縮反應(yīng)溶液。在冰上冷卻水性殘留物，用EtOAc分層，然后用冰冷的1N HCl酸化至pH值為2。用EtOAc洗提含水殘留物兩次。用鹽水洗滌合并的EtOAc提取物兩次，通過MgSO4干燥，過濾并濃縮得到清澈的液體(14.9g，100％收率)。分析1H NMR(400MHz，CDCl3)5.72(1H，m)，5.18(2H，m)，5.06(1H，寬d)，4.38(1H，m)，2.54(2H，m)，1.38(9H，s)。MS(LC-MS)基峰116，M+1-CO2C(CH3)3。
將溶于吡啶(20ml)的L-2-叔丁氧基羰基氨基-戊-4-烯酸(1.55g，7.23mmol.，1.0當(dāng)量)，氯化1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺(EDCI，1.525g，7.95mmol，1.1當(dāng)量)，4-氯-3-甲氧基苯胺(1.135g，7.23mmol，1.0當(dāng)量)的溶液在室溫下攪拌18小時。濃縮反應(yīng)物。用EtOAc稀釋殘留物并用水洗滌。用EtOAc洗提水溶液。用鹽水洗滌合并的EtOAc洗提物，用MgSO4干燥，過濾并濃縮。用二乙基醚研磨殘留物。過濾收集淺褐色的固體(1.85g，5.21mmol，72％收率)。分析1H NMR(400MHz，CDCl3)8.5(1H，寬s)，7.49(1H，d)，7.22(1H，m)，6.79(1H，dd)，5.83(1H，m)，5.23(2H，m)，5.00(1H，寬s)，4.28(1H，m)，3.89(3H，s)，2.57(2H，m)，1.25(9H，s)。MS(LC-MS)C17H23ClN2O4的計算值354.1，測定值355.25(M+)。
向溶于甲苯(112ml)的(S)[1-(4-氯-3-甲氧基-苯基氨基甲?；?-丁-3-烯基]-氨基甲酸叔丁酯(7.75g，22.40mmol，1.0當(dāng)量)的冰冷溶液中加入濃度為0.5M的鋁烷-N，N-二甲基乙基胺絡(luò)合物的甲苯溶液(141ml，70.56mmol，3.13mmol)。添加完畢之后，在室溫下攪拌反應(yīng)達(dá)18小時。在0℃加入1N NaOH猝滅反應(yīng)。用硅藻土過濾混合物，并用EtOAc洗提3次。用鹽水洗滌EtOAc洗提物，用MgSO4干燥，過濾，濃縮并與甲苯一起共蒸發(fā)。通過同樣的方法，采用反應(yīng)粗產(chǎn)物，甲苯(112ml)和濃度為0.5M的鋁烷-N，N-二甲基乙基胺絡(luò)合物的甲苯溶液(70ml，35.0mmol，1.56當(dāng)量)對殘留物重復(fù)鋁烷還原反應(yīng)。經(jīng)過相同的方法獲得的最終產(chǎn)物為油狀物(7.62g，22.35mmol，100％收率)。分析1H NMR(400MHz，CDCl3)7.09(1H，d)，6.21(1H，寬s)，6.14(1H，dd)，5.78(1H，m)，5.18(2H，m)，4.50(1H，寬s)，4.23(1H，寬s)，3.88(3H，s)，3.18(2H，m)，2.32(2H，m)，1.39(9H，s)。MS(LC-MS)C17H25ClN2O3的計算值340.16，測定值341.25(M+)。
向EtOAc(95ml)和飽和碳酸氫鈉(122ml)中含有(S)-{1-[(4-氯-3-甲氧基-苯基氨基)-甲基]-丁-3-烯基}-氨基甲酸叔丁酯(7.00g，20.53mmol，1.0eq)的冰冷兩相溶液中加入氯代乙酰氯(1.96ml，24.64mmol，1.2eq)溶液。添加完畢之后，在室溫下攪拌反應(yīng)30分鐘。分層，用EtOAc洗提溶液。用鹽水洗滌合并的EtOAc提取物，用MgSO4干燥，過濾并濃縮得到油狀物(7.58g，18.22mmol，收率89％)。分析1H NMR(400MHz，CDCl3)7.42(1H，d)，7.02(1H，寬s)，6.82(1H，m)，5.70(1H，m)，5.09(2H，m)，4.80(1H，d)，4.30(1H，m)，3.94(4H，m)，3.80(2H，s)，3.11(1H，m)，2.20(2H，m)，1.42(9H，s)。MS(LC-MS)C19H26Cl2N2O4的計算值416.13，測定值417.19(M+)。
向含有(S)-({1-[(2-氯-乙?；?-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-氨基]-甲基}-丁-3-烯基)-氨基甲酸叔丁酯(7.58g，18.22mmol，1.0eq)的冰冷溶液中滴加三氟乙酸。在冰上攪拌反應(yīng)達(dá)30分鐘。濃縮反應(yīng)物。殘留物溶解于DMF(455ml)和三乙胺(12.75ml，90.91mmol，5.0eq)中，并在50℃下攪拌5小時之后，濃縮反應(yīng)物。通過酸堿洗提除去殘留物中的中性副產(chǎn)物。殘留物在1N HCl和EtOAc之間進(jìn)行分配。用EtOAc洗提水溶液，丟棄EtOAc提取物部分。堿化水溶液，并用二氯甲烷進(jìn)行洗提。用MgSO4干燥二氯甲烷提取物，過濾并濃縮得到油狀物(4.0g，14.28mmol，1.0當(dāng)量，收率78％)。分析1H NMR(400MHz，CDCl3)7.36(1H，d)，6.85(1H，m)，6.77(1H，dd)，5.78(1H，m)，5.19(2H，m)，3.90(3H，s)，3.73(2H，dd)，3.50(2H，m)，3.22(1H，m)，2.29(2H，m)。MS(LC-MS)C14H17Cl2N2O2的計算值280.10，測定值281.15(M+)。
向甲苯(50ml)中含有(S)5-烯丙基-1-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-哌嗪-2-酮(4.00g，14.28mmol，1.0當(dāng)量)的冰冷溶液中滴加入，濃度為0.5M的鋁烷-N，N-二甲基乙胺絡(luò)合物的甲苯溶液(86ml，42.86mmol，3.0當(dāng)量)。滴加完畢之后，在室溫下攪拌反應(yīng)過夜達(dá)18小時。用1N NaOH在0℃猝滅反應(yīng)，用EtOAc洗提兩次，二氯甲烷洗提2次。用MgSO4干燥有機(jī)提取物，過濾并濃縮得到油狀物(3.80g，14.28mmol，收率100％)。分析1H NMR(400MHz，CDCl3)7.20(1H，d)，6.48(1H，m)，6.43(1H，dd)，5.82(1H，m)，5.14(2H，m)，3.88(3H，s)，3.47(2H，d)，3.12(1H，m)，2.96(1H，dt)，2.90(1H，m)，2.89(1H，dt)，2.45(1H，t)，2.26(1H，m)，2.22(1H，m)。MS(LC-MS)C14H19ClN2O的計算值266.12，測定值267.19(M+)。
將含有(S)-3-烯丙基-1-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-哌嗪(3.81g，14.28mmol，1.0eq)和碳酸氫二-叔丁酯(3.428g，15.71mmol，1.1eq)的THF溶液(71ml)在室溫下攪拌達(dá)18小時。然后將溶液濃縮為油狀物(5.23g，14.28mmol，收率100％)。分析1H NMR(400MHz，CDCl3)7.19(1H，d)，6.45(1H，m)，6.38(1H，dd)，5.82(1H，m)，5.11(2H，m)，4.23(1H寬s)，4.00(1H，m)，3.87(3H，s)，3.42(2H，m)，3.19(1H，m)，2.84(1H，dd)，2.74(1H，dt)，2.50(2H，m)，1.48(9H，s)。MS(LC-MS)C19H27ClN2O3的計算值366.17，測定值367.18(M+)。
向DMF(39ml)和水(5.5ml)中含有(S)-2-烯丙基-4-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-哌嗪-1-羧酸叔丁基酯(5.23g，14.28mmol，1.0當(dāng)量)的溶液中加入氯化鈀(II)(2.616g，14.75mmol，1.03當(dāng)量)和氯化亞銅(I)(1.460g，14.75mmol，1.03當(dāng)量)。向溶液中鼓入氧氣氣泡。在氧氣氣泡的存在下于室溫下攪拌反應(yīng)達(dá)18小時。用硅藻土過濾混合物。濾液在EtOAc和水之間進(jìn)行分配。用EtOAc洗提水溶液。用鹽水洗滌EtOAc提取物，用MgSO4干燥，過濾并濃縮。在硅凝膠上，用50％EtOAc己烷洗脫的快速色譜純化殘留物。產(chǎn)物為黃色油狀物(3.45g，9.07mmol，收率63％)。分析1H NMR(400MHz，CDCl3)7.19(1H，d)，6.44(1H，m)，6.36(1H，dd)，4.61(1H，寬s)，3.99(1H，m)，3.87(3H，s)，3.48(2H，m)，3.16(2H，m)，2.93(1H，dd)，2.88(1H，dt)，2.68(1H，m)，2.19(3H，s)，1.60(3H，s)。MS(LC-MS)C19H27Cl2N2O4的計算值382.17，測定值383.17(M+)。用手性HPLC測定手性純度。外消旋的標(biāo)準(zhǔn)表明11的兩個峰的混合物的滯留時間為10.64和12.13分鐘。對從L-烯丙基甘氨酸合成的酮進(jìn)行的分析表明只存在10.64分鐘處的一個峰，而不存在對映體。
向溶于二氯甲烷(4ml)的(S)4-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-2-(2-氧-丙基)-哌嗪-1-羧酸叔丁酯(363mg，0.955mmol，1.0eq)的冰冷溶液中加入三氟乙酸(4ml)。反應(yīng)在冰上攪拌30分鐘后進(jìn)行濃縮。殘余物溶解于甲醇(8ml)中并在冰上冷卻。向該溶液中加入3，4-二甲氧基苯甲醛(206mg，1.24mmol，1.3當(dāng)量)和6N NaOH(0.96ml，5.73mmol，6.0當(dāng)量)。反應(yīng)在55℃攪拌過夜。濃縮反應(yīng)物。殘留物在1N NaOH和二氯甲烷之間進(jìn)行分配。用二氯甲烷洗提水溶液。通過MgSO4干燥有機(jī)提取物，過濾并濃縮。在硅凝膠上，用2.5％甲醇/二氯甲烷洗脫的快速色譜純化殘留物。產(chǎn)物為白色泡沫體(115mg，0.27mmol，收率29％)。分析1H NMR(400MHz，CDCl3)7.19(1H，d)，6.86(3H，m)，6.46(1H，m)，6.41(1H，dd)，3.91(3H，s)，3.89(3H，s)，3.87(3H，s)，3.44(2H，m)，3.30(2H，dd)，2.78(4H，m)，2.50(3H，m)，2.08(1H，td)。MS(LC-MS)C23H27ClN2O4的計算值430.17，測定值431.15(M+)。檢測到了移動相中分解得到的其它片斷產(chǎn)物。
向(6R，10S)2-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)-八氫-吡啶并[1，2-a]吡嗪-8-酮(38g，0.09mmol，1.0當(dāng)量)的溶液中加入p-甲苯磺酰肼(21mg，1.3當(dāng)量)。反應(yīng)在室溫下攪拌達(dá)18小時。加入硼氫化鈉(34mg，0.89mmol，10.0當(dāng)量)。反應(yīng)在65℃回流下攪拌達(dá)4小時。用10％的氯化銨猝滅反應(yīng)，然后在1N NaOH和二氯甲烷之間進(jìn)行分配。用鹽水洗滌有機(jī)提取物，用MgSO4干燥，過濾并濃縮。用1∶1乙酸乙酯∶己烷洗脫的500微米制備性TLC盤上純化殘留物。得到油狀的(6R，10S)2-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)-八氫-吡啶并[1，2-a]吡嗪(化合物5)(25mg，0.06mmol，收率67％)。分析1H NMR(400MHz，CDCl3)7.19(1H，d)，6.90(2H，m)，6.45(1H，m)，6.41(1Hm，dd)，3.91(3H，s)，3.87(3H，s)，3.41(2H，m)，2.97(1H，dd)，2.75(1H，m)，2.62(1H，m)，2.37(1H，m)，2.03(1H，dt)，1.42-1.80(6H，m)。MS(LC-MS)C23H29Cl2N2O3的計算值416.19，測定值417.19(M+)。
VI.(6R，10S)[6-(3，4-二甲氧基-苯基)-八氫-吡啶并[1，2-a]吡嗪-2-基]-(4-三氟甲基-苯基)-甲酮(由路線F制備) 室溫下將(S)2-(4-芐基-哌嗪-2-基)-乙醇(2.2g，10mmol)溶解于無水二氯甲烷(100ml)中。加入碳酸氫二-叔丁酯(BOC酐)(2.20g，11mmol)，并在室溫下攪拌過夜。用鹽水進(jìn)行稀釋以猝滅反應(yīng)。分離有機(jī)相并用二氯甲烷洗滌水相。合并有機(jī)相并用鹽水洗滌(2×50ml)，干燥(MgSO4)，并過濾。減壓除去溶劑得到清澈的油狀物4-芐基-2-(2-羥基-乙基)-哌嗪-1-羧酸叔丁酯(3.13g，收率98％)。MS320(M+)。H-1NMR(400MHz，CDCl3)7.3(5H，br)，4.28(1H，br)，4.0(1H，br)，3.8(1H，br)，3.6(1H，br)，3.5(2H，br)，3.4(1H，m)，3.0(1H，t)，2.6-2.8(2H，br)，2.22(1H，dd，J＝4，11.4Hz)2.02(1H，dt，J＝3.5；11.7Hz)，1.46(s，9H)。
在氮氣氛(氣泡)下，將(S)4-芐基-2-(2-羥基-乙基)-哌嗪-1-羧酸叔丁酯(3.1g，97mmol)溶解于含有預(yù)先活化的4分子篩(1.0g)和4-甲基嗎啉N-氧化物(13mmol，1.5g)的無水二氯甲烷(100ml)中。加入過鐐酸四丙基銨鹽(150mg，0.15mmol)開始反應(yīng)。1小時后，LC/MS分析表明無剩余的起始原料。用硅膠塞過濾黑色懸浮物，用5％甲醇溶于氯仿的溶液洗脫得到的產(chǎn)品，并在減壓下蒸發(fā)溶劑，得到清澈的油狀物4-芐基-2-(2-氧-乙基)-哌嗪-1-羧酸叔丁酯(2.9g，收率94％)。MS318(M+)。H-1NMR明顯的信號(400MHz，CDCl3)9.78(1H，t，J＝13.2Hz)，7.25(5H，s)，3.68(2H，t，3Hz)，3.48(1H，d，J＝13.2Hz)，3.36(1H，d，J＝13.2Hz)，2.2(1H，dd，J＝4；11Hz)，2.08(1H，dt，J＝3.5，11.7Hz)，1.44(9H，s)。
在0℃，氮氣(氣泡)氛下，將(S)4-芐基-2-(2-氧-乙基)-哌嗪-1-羧酸叔丁基酯(2.9g，9.1mmol)溶解于無水四氫呋喃中。滴加溴代甲基鎂(12mmol，3.0M溶于THF中的溶液，4.0ml)并在室溫下反應(yīng)。3小時后，將反應(yīng)物降溫到0℃并滴加入飽和氯化銨溶液以猝滅反應(yīng)。進(jìn)行相分離，用鹽水(2×100ml)洗滌有機(jī)層，干燥(MgSO4)并過濾。減壓下蒸發(fā)溶劑得到4-芐基-2-(2-羥基-丙基)-哌嗪-1-羧酸叔丁基酯粗產(chǎn)物，其為非對應(yīng)異構(gòu)體的混合物(2.8g，收率85％。)MS334(M+)。H-1NMR明顯的信號(400MHz，CDCl3)7.27(5H，s)，1.44(9H，s)，1.17和1.18(d，3H聯(lián)合峰)。
在氮氣氛(氣泡)下，將(S)4-芐基-2-(2-羥基-丙基)-哌嗪-1-羧酸叔丁基酯(2.8g，97mmol)溶解于含有預(yù)先活化的4分子篩(1.0g)和4-甲基嗎啉N-氧化物(13mmol，1.5g)的無水二氯甲烷(100ml)中。加入過釕酸四丙基銨鹽(200mg，0.2mmol)開始反應(yīng)。1小時后，LC/MS分析表明無剩余的起始原料。用硅膠塞過濾黑色懸浮物，并在減壓下蒸發(fā)溶劑，得到棕色的油狀物(2.7g)。用快速色譜法純化，得到1.4g(收率43％)的4-芐基-2-(2-氧-丙基)-哌嗪-1-羧酸叔丁酯。MS318(M+)。H-1NMR明顯的信號(400MHz，CDCl3)7.25(5H，s)，3.38(1H，d，J＝13.2)，3.36(1H，d，J＝13.2Hz)，2.1(3H，s)，1.42(9H，s)。C-13NMR明顯的信號(100Hz，CDCl3)206.8ppm。
向二氯甲烷(4ml)中含有(S)4-芐基-2-(2-羥基-丙基)-哌嗪-1-羧酸叔丁酯(199mg，0.60mmol，1.0eq)的冰冷溶液中加入三氟乙酸(4ml)。在0℃攪拌反應(yīng)30分鐘，濃縮并與甲苯一起蒸發(fā)。殘留物溶解于甲醇(5ml)中。在室溫下向該溶液中加入3，4-二甲氧基苯甲醛(130mg，0.78mmol，1.3當(dāng)量)和6N NaOH(0.6ml，3.6mmol，6.0當(dāng)量)。反應(yīng)物在55℃下加熱15小時。在二氯甲烷和1N NaOH之間分配反應(yīng)物。用二氯甲烷洗提水相。用鹽水洗滌二氯甲烷提取物，用MgSO4干燥，過濾并濃縮。在兩個1000微米的制備性TLC板上，以4％MeOH/二氯甲烷洗脫。得到44mg順式立體異構(gòu)體(0.12mmol，收率19％)和16mg反式立體異構(gòu)體(0.04mmol，收率7％)。分析對順式產(chǎn)物的1H NMR(400MHz，CDCl3)7.29(5H，m)，6.86(3H，m)，3.89(3H，s)，3.87(3H，3H)，3.50(2H，m)，3.25(1H，dd)，2.67(4H，m)，2.44(2H，m)，2.28(m，1H)，2.08(3H，m)。MS(LC-MS)C23H28N2O3的計算值380.21，測定值381.20(M+)。
在室溫下攪拌溶于甲醇(1.0ml)中的2-芐基-6-(3，4-二甲氧基-苯基)-八氫-吡啶并[1，2-a]吡嗪-8-酮(43mg，0.11mmol，1.0當(dāng)量)和p-甲苯磺酰肼(27mg，0.15mmol，1.3當(dāng)量)達(dá)15小時。加入硼氫化鈉(43mg，1.1mmol，10.0當(dāng)量)，在65℃回流下加熱。TLC表明反應(yīng)在5小時后完成，然后加入另一部分硼氫化鈉(52mg，1.37mmol，12當(dāng)量)，在65℃下攪拌反應(yīng)18小時。在1N NaOH和二氯甲烷之間分配反應(yīng)物。水相用二氯甲烷洗提。用鹽水洗滌二氯甲烷提取物，用MgSO4干燥，過濾并濃縮。在用(4％MeOH/二氯甲烷)洗脫的500微米制備性TLC上純化殘留物，得到14mg(6R，10S)-2芐基-6-(3，4-二甲氧基-苯基)-八氫-吡啶并[1，2-a]-吡嗪(0.04mmol，收率38％)。分析1H NMR(400MHz，CDCl3)7.29(5H，m)，6.80(3H，m)，3.88(3H，s)，3.86(3H，s)，3.48(2H，m)，2.89(1H，寬d)，2.65(2H，m)，2.54(1H，寬d)，2.22(1H，m)，2.05(1H，m)，1.96(2H，m)，1.54(6H，m)。MS(LC-MS)C23H30N2O2的計算值366.23，測定值367.26(M+)。
將(6R，10S)-2芐基-6-(3，4-二甲氧基-苯基)-八氫-吡啶并[1，2-a]-吡嗪(14mg，0.04mmol)溶液，10％Pd/C(3mg)以及甲酸銨(12mg，0.19mmol)在回流下加熱6小時。加入另一部分甲酸銨(11mg，0.17mmol)，在回流下攪拌反應(yīng)15小時。用硅藻土過濾，濾液進(jìn)行濃縮。殘余物溶解于二氯甲烷(0.5ml)中，并用三乙基胺(42微升，0.19mmol，5.0當(dāng)量)和三氟甲基苯甲酰氯(4微升，0.03mmol，1.5eq)處理。在室溫下攪拌反應(yīng)1小時。將反應(yīng)物移入管形小瓶中，并與乙酸乙酯和1N NaOH一起搖晃。再次采用乙酸乙酯進(jìn)行洗提。濃縮乙酸乙酯提取物。殘留物用250微米的分析TLC進(jìn)行純化，得到3mg(6R，10S)[6-(3，4-二甲氧基-苯基)-八氫-吡啶并[1，2-a]-吡嗪-2-基]-(4-氟-甲基-苯基)-甲基酮(化合物6；0.007mmol，收率18％)。MS(LC-MS)C24H27N2O3的計算值448.20，測定值449.15(M+)。手性HPLC表明產(chǎn)物含有97％的一種對映體，3％的相反對映體。
VII.(6R，10S)2-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)-八氫-吡啶并[1，2-a]-吡嗪-8-醇 將溶于甲醇(2ml)的(6R，10S)2-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)-八氫-吡啶并[1，2-a]-吡嗪-8-酮(20mg，0.05mmol，1.0當(dāng)量)和硼氫化鈉(9mg，0.24mmol，5.1當(dāng)量)在室溫下攪拌90分鐘。用1N NaOH猝滅反應(yīng)并用二氯甲烷洗提兩次。用鹽水洗滌二氯甲烷提取物，干燥(MgSO4)，過濾并濃縮得到15mg膜。得到2-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)-八氫-吡啶并[1，2-a]-吡嗪-8-醇(化合物7)的收率為75％。分析1H NMR(400MHz，CDCl3)7.19(1H，d)，6.87(3H，m)，6.44(2H，m)，3.89(3H，s)，3.85(s，3H)，3.81(3H，s)，3.35(2H，m)，2.90(1H，dd)，2.71(3H，m)，2.38(1H，t)，2.04(3H，m)，1.58(m，3H)。MS(LC-MS)C23H29ClN2O4的計算值433.18，433.4。
VIII.由路線G合成8-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-4-(3，4-二甲氧基-苯基)-八氫-吡嗪并[1，2-c][1，4]噻嗪
向溶于甲醇(32ml)的氫氧化鉀(655mg，11.68mmol，1.0eq)的冰冷溶液中加入L-2-叔丁氧羰基氨基-3-巰基-丙酸甲酯(2.64ml，12.85mmol，1.1eq)。在冰上攪拌反應(yīng)10分鐘。向反應(yīng)溶液中加入2-氯-1-(3，4-二甲氧基-苯基)-乙酮(2500mg，11.68mmol，1.0當(dāng)量)，然后加入THF(7ml)。在冰上攪拌反應(yīng)達(dá)4小時。濃縮溶液，殘留物用二氯甲烷洗提。用MgSO4干燥二氯甲烷的提取物，過濾并濃縮。在硅膠上，用25％乙酸乙酯∶己烷洗脫的快速色譜法純化殘留物，得到油狀物2-叔丁氧基羰基氨基-3-[2-(3，4-二甲氧基-苯基)-2-氧-乙基巰基(sulfanyl)]-丙酸甲酯(4.72g，收率98％)。分析1H NMR(400MHz，CDCl3)7.55(2H，m)，6.88(1H，d)，5.43(1H，寬d)，4.57(1H，m)，3.95(3H，s)，3.93(3H，s)，3.85(2H，s)，3.73(3H，s)，3.00(2H，dp)，1.41(9H，s)。MS(LC-MS)C19H27NO7S的計算值414.15，測定值414.21。
向溶于二氯甲烷(9ml)的2-叔丁氧基羰基氨基-3-[2-(3，4-二甲氧基-苯基)-2-氧-乙基巰基]-丙酸甲基酯(2.00g，9.34mmol，1.0eq)的冰冷溶液中加入三氟乙酸(9ml)。在冰上攪拌反應(yīng)4小時。濃縮溶液，與甲苯一起共蒸發(fā)。殘留物溶解于二氯甲烷(9ml)中并在冰上冷卻。向該溶液中加入三乙酰氧基硼氫化鈉(2.97g，14.02mmol，1.5eq)，然后加入二氯甲烷(7ml)。在室溫下攪拌反應(yīng)達(dá)18小時。加入飽和碳酸氫鈉，然后用二氯甲烷洗提反應(yīng)混合物。用MgSO4干燥二氯甲烷提取物，過濾濃縮。得到油狀物5-(3，4-二甲氧基-苯基)-硫代嗎啉-3-羧酸甲酯(1.63g，收率59％)。分析1H NMR(400MHz，CDCl3)6.92(2H，m)，6.83(1H，d)，3.95(3H，s)，3.93(3H，s)，3.87(2H，m)，3.85(3H，s)，2.77(3H，m)，2.42(1H，m)。MS(LC-MS)C14H19NO4S的計算值297.10，測定值298.17。
將濃度為2.0M的三甲基鋁(0.39ml，0.78mmol，3.5當(dāng)量)溶液加入5-(3，4-二甲氧基-苯基)-硫代嗎啉-3-羧酸甲基酯(67mg，0.22mmol，1.0當(dāng)量)和4-氯-3-甲氧基苯胺(106mg，0.68mmol，3.0當(dāng)量)的溶液中。得到的溶液在50℃下攪拌達(dá)18小時。用1N NaOH猝滅反應(yīng)并用二氯甲烷進(jìn)行洗提。二氯甲烷提取物用MgSO4干燥，過濾并濃縮。殘留物在1000微米的制備性TCL上純化，得到桃紅色的固體5-(3，4-二甲氧基-苯基)-硫代嗎啉-3-羧酸(4-氯-3-甲氧基-苯基)酰胺(71mg，收率76％)。分析1HNMR(400MHz，CDCl3)8.61(1H，s)，7.58(1H，m)，7.26(1H，m)，6.90(2H，m)，6.78(1H，d)，4.04(1H，m)，3.91(10H，m)，2.98(1H，m)，2.78(2H，m)，2.59(1H，m)。MS(LC-MS)C20H23ClN2O4S的計算值423.11，測定值423.22。
向甲苯(1.5ml)中含有5-(3，4-二甲氧基-苯基)-硫代嗎啉-3-羧酸(4-氯-3-甲氧基-苯基)酰胺(71mg，0.17mmol，1.0當(dāng)量)的冰冷溶液中加入濃度為0.5M的鋁烷溶液(1.6ml，0.8mmol，4.8當(dāng)量)。在室溫下攪拌反應(yīng)達(dá)2小時。用1N NaOH猝滅反應(yīng)并用二氯甲烷洗提三次。二氯甲烷提取物通過MgSO4干燥，過濾并濃縮，得到油狀物(4-氯-3-甲氧基-苯基)-[5-(3，4-二甲氧基-苯基)-硫代嗎啉-3-基甲基]-胺(65mg，收率95％)。分析1H NMR(400MHz，CDCl3)7.11(1H，d)，6.93(2H，m)，6.80(1H，m)，6.19(m，2H)，3.86(10H，m)，3.19(3H，m)，2.80(2H，m)，2.50(2H，m)。(LC-MS)C20H25ClN2O3S的計算值409.13，測定值409.23。
將溶于二甲基乙酰胺(2ml)的(4-氯-3-甲氧基-苯基)-[5-(3，4-二甲氧基-苯基)-硫代嗎啉-3-基甲基]-胺(100mg，0.245mmol，1.0eq)，二溴甲烷(031ml，3.55mmol，14.5eq)和三乙胺(0.15ml，1.09mmol，4.5eq)的溶液在90℃下加熱4小時。加入另一部分二溴甲烷(0.16ml，1.84mmol，7.5eq)和三乙基胺(0.25ml，1.76mmol，7.2eq)，并在90℃下攪拌達(dá)4小時。加入再一部分二溴甲烷(0.14ml，1.62mmol，6.6eq)和三乙基胺(0.10ml，0.71mmol，2.9eq)，并在90℃下攪拌達(dá)18小時。冷卻反應(yīng)物并過濾除去三乙銨的氫溴酸鹽。濃縮濾液，殘留物在1000微米的制備性TLC上進(jìn)行純化。得到34mg 8-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-4-(3，4-二甲氧基-苯基)-八氫-吡嗪并[2，1-c][1，4]噻嗪(化合物8)，以及36mg回收的起始原料。產(chǎn)品收率32％。1H NMR(400MHz，CDCl3)7.19(1H，d)，6.86(3H，m)，6.42(2H，m)，3.89(3H，s)，3.88(3H，s)，3.86(3H，s)，3.50(1H，m)，3.19(2H，dd)，2.92(1H，m)，2.75(5H，m)，2.48(2H，t)，2.15(1H，dt)。MS(LC-MS)C22H27ClN2O3S的計算值435.14，測定值435.24。
IX.由路線H制備2-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)-八氫-吡啶[1，2-a]吡嗪 向懸浮于5ml DCM中的2.2g(0.011mol，1當(dāng)量)5-溴-吡啶甲酸(piconilic acid)的懸浮液中加入4.0mi亞硫酰氯?；旌衔锘亓?.5小時，然后濃縮，并進(jìn)一步與甲苯一起共-蒸發(fā)。殘留物溶解于10ml DCM中。
將2.8g(0.022mol，2.0當(dāng)量)K2CO3和1ml(0.01mol，1.5當(dāng)量)羥基乙基胺溶解于23ml水中，并在冰浴中冷卻。緩慢加入上述制備的DCM溶液，將反應(yīng)物升溫至室溫并攪拌達(dá)2小時。反應(yīng)物用DCM稀釋并分離。有機(jī)層用鹽水洗滌，在Na2SO4上干燥并濃縮得到黃色油狀物6-溴-吡啶-2-羧酸(2-羥基-乙基)-酰胺(2.3g，86％)。分析MS(LC-MS)C8H9BrN2O2的計算值245.07，測定值245.20(M+)和247.20(M+2)。
將0.25g(1.0mmol，1.5當(dāng)量)6-溴-吡啶-2-羧酸(2-羥基-乙基)-酰胺和0.28g(1.5mmol，1.5當(dāng)量)3，4-二甲氧基苯基硼酸與2ml乙醇和2ml濃度為2M的Na2CO3一起加入20ml乙二醇二甲醚中。用N2清洗混合物達(dá)20分鐘，然后加入57mg(0.05mmol，0.05當(dāng)量)的三(二苯亞甲基丙酮)-二鈀(0)。在80℃下加熱反應(yīng)6小時，TLC監(jiān)測表明此時反應(yīng)體系中無起始原料。用硅藻土過濾反應(yīng)物并除去溶劑。用乙酸乙酯溶解殘留物，用Na2CO3和鹽水洗滌，用Na2SO4干燥并濃縮得到黃色油狀物6-(3，4-二甲氧基-苯基)-吡啶-2-羧酸(2-羥基-乙基)-酰胺(2.3g，86％)，無需提純用于下一步驟。分析MSLC-，S)C16H18N2O4計算值為302.33，測定值303.39(M+1)。
將3.0g(10mmol，leq)的6-(3，4-二甲氧基-苯基)-吡啶-2-羧酸(2-羥基-乙基)-酰胺和2.3g(1.0mmol，0.1eq)的二氧化珀加入35ml的乙醇和2.0ml濃HCl中。在室溫下，將懸浮液在50psi的H2下進(jìn)行整夜加氫反應(yīng)。TLC檢測沒有起始原料后，用硅藻土過濾，并除去溶劑。用乙酸乙酯抽提殘留物，永飽和Na2CO3和鹽水洗提，用Na2SO4干燥濃縮得到黃色油狀物6-(3，4-二甲氧基-苯基)-吡啶-2-羧酸(2-羥基-乙基)-酰胺。用乙酸乙酯和己烷粉碎油狀物，得到白色固體(1.6g，52％)。分析1H NMR(400MHz，CDCl3)7.18(1H，t)，6.90(2H，m)，6.82(1H，m)，3.87(6H，d)，3.66(3H，m)，3.39(3H，m)，2.00(2H，m)，1.80(1H，m)和1.22(2H，m)。MS(LC-MS)C16H24N2O4的計算值308.37，測定值309.34(M+1)。
將溶于18ml THF的1.5g(5.0mmol，1當(dāng)量)的6-(3，4-二甲氧基-苯基)-吡啶-2-羧酸(2-羥基-乙基)-酰胺的溶液緩慢加入到15ml，濃度為1M的LiAlH4的THF溶液中。在60℃，N2氛下加熱反應(yīng)6h。TLC監(jiān)測表明此時反應(yīng)體系中無起始原料。在冰浴中冷卻，向反應(yīng)體系中緩慢地順次加入0.5ml水，0.5ml NaOH和1.5ml水。最后，加入一些無水MgSO4，然后用硅藻土過濾反應(yīng)混合物。除去溶劑，殘留物用乙酸乙酯提取，用鹽水洗滌，通過Na2SO4干燥并濃縮得到油狀物2-{[6-(3，4-二甲氧基-苯基)哌啶-2-基甲基]-氨基}-乙醇(1.5g，68％)，其無須純化即可用于下一步驟。分析MS(LC-MS)C16H26N2O3的計算值294.39，測定值295.37(M+1)。
向溶于120ml THF的3.4g(11.6mmol，1當(dāng)量)2-{[6-(3，4-二甲氧基-苯基)哌啶-2-基甲基]-氨基}-乙醇和0.20g(17.5mmol，1.5當(dāng)量)三苯基膦的溶液中加入1.9ml(12.7mmol，1.1當(dāng)量)偶氮二羧酸二乙酯，在室溫下攪拌反應(yīng)過夜。TLC檢測表明此時反應(yīng)體系中無起始原料。除去溶劑，殘留物溶于乙酸乙酯中并用1N HCl洗提。用1N NaOH堿化酸性水溶液至pH為10，然后用二氯甲烷洗提三次。用鹽水洗滌有機(jī)提取物，用Na2SO4干燥并濃縮得到油狀產(chǎn)物，該產(chǎn)物在硅凝膠上以50∶10∶1的DCM∶MeOH∶NH4OH洗脫的快速色譜進(jìn)行純化，得到棕色棒狀固體6-(3，4-二甲氧基-苯基)-八氫吡啶并[1，2a]吡嗪(0.85g，27％)。分析1HNMR(300MHz，CDCl3)6.80(3H，m)，3.87(3H，s)，3.84(3H，s)，3.29(1H，s)，2.92～2.68(4H，m)，2.60(2H，m)，2.13(1H，m)，1.82～1.05(8H，m)。MS(LC-MS)C16H18N2O4的計算值302.33，測定值303.39(M+1)。
將0.85g(3.0mmol，1當(dāng)量)6-(3，4-二甲氧基-苯基)-八氫吡啶并[1，2a]吡嗪和0.76g(3.4mmol，1.1當(dāng)量)5-溴-2-氯-苯甲醚溶解于25ml無水甲苯中，然后用N2清洗該溶液達(dá)20分鐘。向溶液中順次加入0.18g(0.30mmol，0.10當(dāng)量)rac-2，2’-二(聯(lián)苯基-膦基)-1，1’-聯(lián)萘基(dinapphtyl)，0.14g(0.15mmol，0.05當(dāng)量)三(二苯亞甲基丙酮)-二鈀(0)和0.52g(4.6mmol，1.5當(dāng)量)叔丁氧基鋰?；旌衔镌?0℃，N2氣氛中加熱過夜。冷卻之后，用硅藻土過濾反應(yīng)物。用1N NaOH和鹽水洗滌有機(jī)溶液，在Na2SO4上干燥并濃縮。殘留物用硅凝膠上以501二氯甲烷甲醇洗脫的快速色譜進(jìn)行純化，得到棕色棒狀固體2-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)-八氫吡啶并[1，2a]吡嗪(化合物5)(0.85g，68％)。分析1H NMR(300MHz，CDCl3)7.16(1H，d)，6.80(3H，m)，6.40(2H，m)，3.88(3H，s)，3.86(3H，S)，3.85(3H，s)，3.40(2H，m)，2.95(1H，m)，2.70(3H，m)，2.30(1H，m)，2.00(1H，m)，1.82-1.40(6H，m)。MS(LC-MS)C23H29N2O3的計算值416.94，測定值417.23(M+1)。
X.由路線J制備(6R，9S)2-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)-八氫-吡咯并[1，2-a]吡嗪 將DMF(200ml)中含有(2S)5-氧-吡咯烷-1，2-二羧酸1-叔丁酯(10.00g，0.044mol，1.0當(dāng)量)，芐基溴(7.88g，0.046mmol，1.05當(dāng)量)以及碳酸鉀(15.20g，0.11mol，2.5當(dāng)量)的懸浮液在65℃下攪拌過夜。反應(yīng)物冷卻到室溫并用硅藻土過濾該混合物。用乙酸乙酯(100ml)沖洗固體，得到的濾液在乙酸乙酯和飽和的鹽水溶液之間進(jìn)行分配。用飽和的鹽水(3×100ml)洗滌有機(jī)層，用無水Na2SO4干燥并在真空中濃縮。粗產(chǎn)物，無色的油狀物在硅上進(jìn)行色譜純化，得到無色的油狀物5-氧-吡咯烷-1，2-二羧酸2-芐基酯1-叔丁酯(8.20g，0.026mmol。收率59％)。分析1H NMR(400MHz，CDCl3)7.36(5H，寬s)，5.20(2H，d)，4.64(1H，dd)，2.44-1.96(4H，m)，1.41(9H，s)。MS(LC-MS)C17H21NO5的計算值319.14，測定值320.19(M+H)+。
N2氣氛下，在冰浴中將溶于無水THF的(2S)5-氧-吡咯烷-1，2-二羧酸2-芐基酯1-叔丁酯(8.20g，0.026mmol，1.0當(dāng)量)的溶液冷卻到0℃。緩慢加入濃度為0.5M，溶于THF的溴代3，4-二甲氧基苯基鎂溶液(52.1ml，0.026mmol，1.0當(dāng)量)。攪拌反應(yīng)混合物達(dá)2小時。加入飽和NH4Cl溶液(10ml)以猝滅反應(yīng)。混合物在乙酸乙酯和鹽水之間進(jìn)行分配。用鹽水(3×100ml)洗滌有機(jī)提取物。用無水Na2SO4干燥乙酸乙酯層并在真空中進(jìn)行濃縮。得到的粗產(chǎn)物，即藍(lán)色的油狀物用二氧化硅層進(jìn)行過濾。濾液在真空中濃縮，得到2-叔丁氧基羰基氨基-5-(3，4-二甲氧基-苯基)-5-氧-戊酸芐基酯(10.46g，0.023mmol，收率88％)。分析1H NMR(400MHz，CDCl3)7.5-7.3(6H，m)，7.0-6.7(2H，m)，5.2(2H，m)，4.0-3.8(6H，m)，3.0(1H，m)，2.6-1.9(4H，m)，1.4(9H，s)。MS(LC-MS)C25H31NO7的計算值457.21，測定值458.19(M+H)+。
將溶于二氯甲烷(150ml)的(2S)2-叔丁氧基羰基氨基-5-(3，4-二甲氧基-苯基)-5-氧-戊酸芐基酯(10.46g，0.023mmol)的溶液在冰浴中冷卻到0℃。在攪拌的混合物中緩慢加入TFA(40ml)，將反應(yīng)混合物升溫到室溫并維持2小時以上。在真空中濃縮反應(yīng)混合物。將得到的殘留物溶解于乙酸乙酯中，并用1N NaOH調(diào)節(jié)pH至7。用鹽水(100ml)洗滌有機(jī)提取物。用Na2SO4干燥乙酸乙酯提取物，在真空中濃縮得到(2S)5-(3，4-二甲氧基-苯基)-3，4-二氫-2H-吡咯-2-羧酸芐基酯TFA鹽(7.24g，0.021mol，收率91％)。MS(LC-MS)C20H21NO4的計算值339.15，測定值340.16(M+H)+。
將(2S)5-(3，4-二甲氧基-苯基)-3，4-二氫-2H-吡咯-2-羧酸芐基酯(7.24g，0.021mol)溶解于甲醇(100ml)中，并加入到含有Pd/C催化劑(75mg)的氫化瓶中。反應(yīng)物在室溫下，于50psi的壓力下整夜進(jìn)行氫化反應(yīng)。用硅藻土過濾反應(yīng)混合物，并用甲醇/乙酸乙酯(1∶1，100ml)沖洗。濾液在真空中進(jìn)行濃縮。用乙醚和乙酸乙酯粉碎得到的粗殘留物，過濾并干燥得到白色固體(2S，5R)5-(3，4-二甲氧基-苯基)-吡咯烷-2-羧酸TFA鹽(3.00g，0.012mol，收率57％)。分析1H NMR(400MHz，DMSO)7.18(1H，s)，6.98(2H，s)，4.42(1H，d)，4.64(1H，dd)，3.76(7H，寬s)，2.24-2.10(3H，m)，1.74(1H，m)。MS(LC-MS)C13H17NO4的計算值251.12，測定值252.08(M+H)+。
使(2S，5R)5-(3，4-二甲氧基-苯基)-吡咯烷-2-羧酸(3.00g，0.012mol，1.0當(dāng)量)懸浮于二氯甲烷(50ml)和DIEA(2.50ml，0.014mol，1.2當(dāng)量)中，并在冰浴中冷卻到0℃。加入濃度為1.0M，溶于THF的Boc酐的溶液(12.0ml，0.012mol，1.0當(dāng)量)，攪拌反應(yīng)并升溫至室溫過夜。用鹽水(2×50ml)洗滌反應(yīng)混合物。用無水Na2SO4干燥有機(jī)提取物，并在真空中濃縮得到(2S，5R)5-(3，4-二甲氧基-苯基)-吡咯烷-1，2-二羧酸1-叔丁基酯(4.22，0.012mol，收率100％)。分析1H NMR(400MHz，CDCl3)6.95(1H，s)，6.80(2H，s)，4.67(1H，m)，4.50(1H，m)，3.86(6H，s)，2.52-1.89(4H，m)，1.19(9H，寬s)。MS(LC-MS)C18H25NO6的計算值351.17，測定值352.22(M+H)+。
將溶于二氯甲烷(35ml)的(2S，5R)5-(3，4-二甲氧基-苯基)-吡咯烷-1，2-二羧酸1-叔丁基酯(2.50g，7.11mmol，1.0當(dāng)量)，4-氯-3-甲氧基苯胺(1.12g，7.11mmol，1.0當(dāng)量)，PyBrop偶聯(lián)試劑(3.98g，8.54mmol，1.2當(dāng)量)，以及DIEA(1.86ml，10.7mmol，1.5當(dāng)量)的溶液在室溫下攪拌過夜。在真空中濃縮反應(yīng)混合物。將得到的殘留物溶解于乙酸乙酯(100ml)中，并用1N NaOH(3×100ml)洗滌。用無水Na2SO4干燥有機(jī)提取物，并在真空中濃縮。用二氧化硅層過濾粗的油狀物，并用乙酸乙酯∶己烷(1∶1)進(jìn)行洗脫。濾液在真空中濃縮得到(2S，5R)2-(4-氯-3-甲氧基-苯基氨基甲?；?-5-(3，4-二甲氧基-苯基)-吡咯烷-1-羧酸叔丁基酯(3.48g，7.09mmol，收率100％)。分析1H NMR(400MHz，CDCl3)7.59(1H，寬s)，7.23(1H，m)，6.85-6.60(4H，m)，4.64(2H，m)，3.00(3H，s)，3.83(3H，s)，3.56(3H，寬s)，2.62(1H，寬s)，2.36(1H，m)，2.11-1.89(2H，m)，1.22(9H，寬s)。MS(LC-MS)C25H31N2O6的計算值490.19，測定值491.15(M+H)+。
將(2S，5R)2-(4-氯-3-甲氧基-苯基氨基甲?；?-5-(3，4-二甲氧基-苯基)-吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(3.48g，7.09mmol)溶解于二氯甲烷(100ml)中，并在冰浴中冷卻到0℃。然后緩慢加入TFA(30ml)到攪拌的溶液中。攪拌反應(yīng)并升溫到室溫過夜。在真空中濃縮反應(yīng)混合物。用1N NaOH調(diào)節(jié)得到的殘留物的pH至8，用乙酸乙酯洗提產(chǎn)物。然后用鹽水溶液(2×100ml)洗滌提取物，用Na2SO4干燥并在真空中濃縮。粗油狀物通過色譜純化得到(2S，5R)5-(3，4-二甲氧基-苯基)-吡咯烷-2-羧酸(4-氯-3-甲氧基-苯基)-酰胺(2.77g，7.09mmol，收率100％)。分析1H NMR(400MHz，CDCl3)10.02(1H，寬s)，7.59(1H，寬s)，7.21(1H，d)，7.03-6.82(4H，m)，4.52-4.30(2H，m)，3.90(9H，m)，2.70-1.88(5H，m)。MS(LC-MS)C20H23N2O4的計算值390.13，測定值391.16(M+H)+。
將(2S，5R)5-(3，4-二甲氧基-苯基)-吡咯烷-2-羧酸(4-氯-3-甲氧基-苯基)-酰胺溶解于無水THF中，并在冰浴中冷卻到0℃。然后緩慢加入濃度為0.5M，溶解于甲苯中的鋁烷絡(luò)合物(42.6ml，21.3mmol，3.0當(dāng)量)。攪拌反應(yīng)并升溫到室溫過夜。加入乙酸乙酯∶甲醇(1∶1，5ml)猝滅反應(yīng)。用硅藻土過濾得到的漿狀物，并用乙酸乙酯進(jìn)行沖洗。在真空中濃縮濾液，得到(2S，5R)(4-氯-3-甲氧基-苯基)-[5-(3，3-二甲氧基-苯基)-吡咯烷-2-基甲基]-胺(1.80g，4.78mmol，收率67％)。分析1H NMR(400MHz，CDCl3)7.12(1H，d)，6.98-6.90(3H，m)，6.23(1H，s)，6.19(1H，d)，4.39-4.15(2H，m)，3.76-3.53(1H，m)，3.30-2.97(2H，m)，2.34-1.55(6H，m)。MS(LC-MS)C20H25ClN2O3的計算值376.16，測定值377.21(M+H)+。
在室溫下攪拌含有(2S，5R)(4-氯-3-甲氧基-苯基)-[5-(3，3-二甲氧基-苯基)-吡咯烷-2-基甲基]-胺(1.80g，4.78mmol，1.0當(dāng)量)和DIEA(0.87ml，5.02mmol，1.05當(dāng)量)的乙腈溶液過夜(25ml)。在真空中濃縮反應(yīng)混合物。得到的殘留物溶解于乙酸乙酯(50ml)中，并用1N NaOH(2×25ml)洗滌。用Na2SO4干燥乙酸乙酯提取物，并在真空中濃縮得到區(qū)域異構(gòu)體(regioisomer)的2∶1混合物，(2S，5R)[2-[(4-氯-3-甲氧基-苯基氨基)-甲基]-5-(3，4-二甲氧基-苯基)-吡咯烷-1-基]-乙酸乙酯和{(4-氯-3-甲氧基-苯基)-[5-(3，4-二甲氧基-苯基)-吡咯烷-2-基甲基]-氨基}乙酸乙酯(2.21g，4.78mmol，收率100％)。分析1H NMR(400MHz，CDCl3)7.12(1H，d)，6.90(1H，d)，6.82(1H，dd)，6.74(1H，m)，6.25-6.16(2H，m)，4.64-4.50(1H，m)，4.37，3.60(1H，分裂的m)，4.27-3.90(2H，m)，3.87(9H，m)，3.46-3.00(4H，m)，2.40-2.06(2H，m)，1.92-1.66(2H，m)，1.34-1.14(3H，m)。MS(LC-MS)C24H31ClN2O5的計算值462.19，測定值463.21(M+H)+。
將溶于THF(5ml)的(2S，5R)[2-[(4-氯-3-甲氧基-苯基氨基)-甲基]-5-(3，4-二甲氧基-苯基)-吡咯烷-1-基]-乙酸乙酯(125mg，0.27mmol，1.0當(dāng)量)的溶液在冰浴中冷卻到0℃。向攪拌的溶液中緩慢加入NaH(16mg，0.40mmol，1.5當(dāng)量)。攪拌反應(yīng)并升溫至室溫過夜。反應(yīng)混合物冷卻到室溫并在乙酸乙酯和1N NaOH之間進(jìn)行分配。有機(jī)提取物用Na2SO4干燥并在真空中濃縮。將粗油狀物裝載到二氧化硅上，并用己烷沖洗以除去雜質(zhì)。用乙酸乙酯洗脫產(chǎn)物并重新濃縮得到(6R，9S)2-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)-六氫-吡咯并[1，2-a]吡嗪-3-酮(80mg，0.19mmol，收率70％)。分析1H NMR(400MHz，CDCl3)7.39(1H，d)，6.95(1H，s)，6.91(2H，m)，6.83(2H，d)，3.90(9H，m)，3.71(2H，m)，3.58(1H，d)，3.25(1H，t)，2.96(1H，d)，2.84(1H，m)，2.29(1H，m)，2.08(1H，m)，1.88(1H，m)，1.71(1H，m)。MS(LC-MS)C22H25ClN2O4的計算值416.15，測定值417.23(M+H)+。如果擴(kuò)大工藝，需要加熱(50℃)以閉環(huán)。出現(xiàn)差向異構(gòu)?？赏ㄟ^快速色譜法分離順式和反式異構(gòu)體。
將溶于THF(2ml)的2-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)-六氫-吡咯并[1，2-a]吡嗪-3-酮(80mg，0.19mmol，1.0當(dāng)量)的溶液在冰浴中冷卻到0℃。緩慢加入濃度為0.5M，溶于甲苯中的鋁烷絡(luò)合物(1.14ml，0.57mmol，3.0當(dāng)量)，并攪拌反應(yīng)達(dá)1小時。加入乙酸乙酯∶甲醇(1∶1，1ml)以猝滅反應(yīng)。用二氧化硅層過濾得到的漿狀物，并在真空中濃縮得到(6R，9S)2-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)-八氫-吡咯并[1，2-a]吡嗪(化合物9，49mg，0.12mmol，收率63％)。分析1H NMR(400MHz，CDCl3)7.20(1H，d)，6.93(1H，s)，6.90(1H，d)，6.82(1H，d)，6.52(1H，s)，6.49(1H，d)，3.90(9H，m)，3.73(1H，d)，3.51(1H，d)，3.21(1H，t)，2.93(2H，m)，2.68(1H，t)，2.44(1H，m)，2.20(2H，寬t)，1.92(1H，m)，1.65(2H，m)。MS(LC-MS)C22H27ClN2O3的計算值402.17，測定值403.23(M+H)+。手性HPLC分析表明對映體的純度大于98％。
XI.由路線K制備(4-三氟甲基-苯基)-{4-[1-(4-甲氧基-2，3-二甲基-苯基)-乙基]-哌嗪-1-基}-甲酮 將溶于乙醇的2，3-二甲基4-甲氧基-苯甲醛(1g，3.05mmol)，1當(dāng)量的哌嗪-1-羧酸叔丁酯(0.57g，3.05mmol)，1當(dāng)量的苯并三唑的混合物在室溫下攪拌30分鐘。除去溶劑并在真空中干燥。然后在N2氣氛中，-78℃下將此反應(yīng)混合物溶解于無水THF(20ml)中。向溶液中緩慢加入3當(dāng)量(3.05ml)溴代甲基鎂(溶于THF中，濃度為3M)。在此溫度下保持2小時，然后升溫到室溫過夜。用2N NaOH洗滌混合物并用乙酸乙酯(2×30ml)洗提。合并的有機(jī)層用MgSO4干燥。除去有機(jī)溶劑后，殘留物用硅凝膠上依次以1∶1EtOAC己烷和10％溶于二氯甲烷的MeOH(NH3)洗脫的快速色譜柱進(jìn)行純化。得到黃色油狀物4-[1-(4-甲氧基-2，3-二甲基-苯基)-乙基]-哌嗪-1-羧酸叔丁酯(0.59g，56％)。分析1H NMR(400MHz，CDCl3)7.21(1H，d)，6.68(1H，d)，3.8(3H，s)，3.58(1H，q)，3.38(3H，m)，2.45(2H，m)，2.24(3H，s)，2.18(3H，s)，1.43(9H，s)，1.24(3H，d)。MS(LC-MS)C20H32N2O3的計算值348.48，測定值349.29(M+H)+。
向含有4-[1-(4-甲氧基-2，3-二甲基-苯基)-乙基]-哌嗪-1-羧酸叔丁酯(0.4g，1.38mmol)和10ml二氯甲烷的冰冷溶液中滴加入三氟乙酸(2ml)。在室溫下攪拌溶液達(dá)2小時。濃縮反應(yīng)物。在硅凝膠上以10％MeOH(NH3)/二氯甲烷洗脫的快速色譜法純化殘留物，得到黃色油狀物1-[1-(4-甲氧基-2，3-二甲基-苯基)-乙基]-哌嗪(0.16g，47％)。分析1H NMR(400MHz，CDCl3)7.23(1H，d)，6.69(1H，d)，3.8(3H，s)，3.55(1H，q)，3.484(2H，s)，2.838(4H，m)，2.47(2H，m)，2.38(2H，m)，2.271(3H，s)，2.167(3H，s)，1.26(3H，d)。MS(LC-MS)C15H24N2O的計算值248.36，測定值249.25(M+)。
在室溫下，將1-[1-(4-甲氧基-2，3-二甲基-苯基)-乙基]-哌嗪(0.02g，0.081mmol)溶解于無水甲苯和1N NaOH(1∶1)中。將4-三氟甲基苯甲酰氯(0.013ml，0.081mmol)加入反應(yīng)混合物中。在室溫下攪拌反應(yīng)混合物達(dá)30分鐘。用1N NaOH洗滌混合物，并用EtOAC洗提。通過MgSO4干燥合并的有機(jī)層。除去有機(jī)溶劑之后，殘留物用以MeOH和溶解于二氯甲烷中濃度為10％的MeOH(NH3)洗脫的SCX柱進(jìn)行純化。得到淺黃的油狀物(4-三氟甲基-苯基)-{4-[1-(4-甲氧基-2，3-二甲基-苯基)-乙基]-哌嗪-1-基}-甲酮(化合物10)(0.010g，30％)。分析1H NMR(400MHz，CDCl3)7.65(2H，d)，7.495(2H，d)，7.19(1H，d)，6.689(1H，d)，3.764(3H，s)，3.682(1H，q)，3.317(3H，m)，2.506(6H，m)，2.266(3H，s)，2.164(3H，s)，1.286(3H，d)。MS(LC-MS)C23H27N2O2的計算值420.47，測定值421.26(M+)。
XII.{5-[1-(4-甲氧基-2，3-二甲基-苯基)-乙基]-(1S，4S)-2，5-二氮-雙環(huán)[2.2.1]己-2-基}-(4-三氟甲基-苯基)-甲酮(化合物11) 將(1S，4S)-(-)-2，5-二氮-雙環(huán)[2.2.1]己-2-羧酸叔丁酯(0.2M，5％NMM/甲苯，0.100ml，0.020mmol)加入1/2液量打蘭莫錢的管形瓶中，然后加入4-甲氧基-2，3-二甲基-苯甲醛(0.2M甲苯，0.110rnl，0.022mmol)。40℃在減壓下濃縮瓶中物(IR-Dancer)。將得到的殘留物溶解于THF(0.20ml，無水)中，在N2流下蓋上管形瓶，然后用MeMgBr(1.0M THF，0.050ml，0.050mmol)處理。室溫下?lián)u晃管形瓶達(dá)0.5小時，然后用HCl(4.0M二噁烷，0.10ml)進(jìn)行處理。管形瓶在50℃下保持過夜，然后用NaOH(10％水溶液(w/w)，0.50ml)進(jìn)行堿化，并用4-三氟甲基苯甲酰氯(0.2M甲苯，0.15ml，0.03mmol)進(jìn)行處理。短時間地?fù)u晃管形瓶，然后使其在室溫下保持穩(wěn)定達(dá)0.5小時，接著用溶于甲苯的濃度為1％的Et2NH溶液(v/v，0.50ml)進(jìn)行稀釋。猛烈搖晃管形瓶，然后使其保持穩(wěn)定直到完全相分離。除去上部的有機(jī)相，并在SCX SPE柱體(0.5g SCX，3ml柱體)上沉降。丟棄用溶于EtOAc，濃度為25％的MeOH溶液(v/v，3ml)洗脫柱體得到的部分，而收集用EtOAc/MeOH/Et3N(10∶1∶1v/v/v，3ml)洗脫的部分。依次在N2流和減壓下濃縮洗脫溶液，得到深粘稠的黃色油狀產(chǎn)物(化合物11)(0.0057g，66％)。分析1H NMR(400MHz，CDCl3)非對映異構(gòu)體/旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體的混合物，特征共振3.821，3.816，3.791，3.782(3H，(聯(lián)合峰))，S(OCH3)MS(LCMS)C24H27F3N2O2的計算值432.20，測定值433.17(M+H)+。
XIII.(±)-反式-和(±)-順式-2-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)-六氫-吡咯并[1，2-a]吡嗪(化合物12) 將如上述制備的(4-氯-3-甲氧基-苯基)-[5-(3，4-二甲氧基-苯基)-吡咯烷-2-基甲基]-胺(104g，0.276mmol)溶解于CH2Cl2(10ml)和DMAP(74.1mg，0.667mmol)的溶液中。將溶液冷卻到0℃，并滴加入乙二酰氯(0.029ml，0.331mmol)。30分鐘后，加入冰水(10ml)以猝滅反應(yīng)。用1N HCl(20ml)，1N NaOH(20ml)和鹽水(20ml)洗提有機(jī)相。用Na2SO4干燥有機(jī)相并在減壓下除去溶劑。用以己烷/丙酮(2∶1)洗脫的制備性TLC純化粗產(chǎn)物(±)-順式-2-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)-六氫-吡咯并[1，2-a]吡嗪-3，4-二酮，得到玻璃狀無色固體(49.7mg，41.8％)。1H NMR(CDCl3)δ7.39(d，J＝8.7Hz，1H，ArH)，7.08(d，J＝2.1Hz，1H，ArH)，6.85-6.81(m，3H，ArH)，6.75(dd，J＝8.7，2.1Hz，1H，ArH)，5.20(d，J＝9.0Hz，1H)，4.35-4.32(m，1H)，4.16-3.95(m，2H)，3.90(s，3H，OCH3)，3.89(S，3H，OCH3)，3.86(S，3H，OCH3)2.46-2.40(m，1H)，2.17-1.87(m，2H)。LCMS m/z 331(M++1，100，2.07分鐘)。
將(±)-順式-2-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)-六氫-吡咯并[1，2-a]吡嗪-3，4-二酮(49.7mg，0.115mmol)溶解于干燥的THF(10ml)中，并滴加BH3.THF(1ml，1mmol)至混合物中，整夜回流加熱混合物。將溶液冷卻到0℃并滴加入MeOH(2ml)。蒸發(fā)除去溶劑，并將粗產(chǎn)物溶解于MeOH(10ml)和12N HCl(2ml)中。溶液回流4小時。濃縮反應(yīng)混合物(～2ml)，然后用1N NaOH堿化。用CH2Cl2(3×25ml)洗提水溶液。用鹽水洗滌合并的有機(jī)提取物，通過Na2SO4干燥并在減壓下濃縮。用以CH2Cl2/MeOH(97∶3)洗脫的制備性TLC純化粗產(chǎn)物，得到(±)-反式-2-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)-六氫-吡咯并[1，2-a]吡嗪。1H NMR(CDCl3)δ7.20(d，J＝8.7Hz，1H，ArH)，6.89-6.83(m，3H，ArH)，6.47-6.40(m，2H，ArH)，4.16(m，1H)，3.95-3.84(m，1H)，3.90(s，3H，OCH3)，3.88(s，3H，OCH3)，3.58-3.46(m，1H)，3.41-3.36(m.1H)，3.26-3.22(m，1H)，2.99-2.71(m，3H)，2.34-2.20(m，2H)，1.95-1.83(m，1H)，1.64-1.54(m，1H)。LCMS m/z 403(M++1，100，1.90分鐘)。
XIV.化合物13-143表I中所示的化合物13-143由上述的方法A-M制備而得。
表I

































實施例2黑色素濃集的激素受體結(jié)合試驗本實施例闡述了一種黑色素濃集激素受體結(jié)合的標(biāo)準(zhǔn)試驗，可用于測定化合物與MCH受體的結(jié)合親和力。
從食蟹猴(cynomolgus macaque)下丘腦制備總RNA。采用隨機(jī)引物和逆轉(zhuǎn)錄酶按照標(biāo)準(zhǔn)方法制備猴下丘腦的cDNA。采用SEQ ID NO3的正向引物(5’)和SEQ ID NO4的逆向引物(3’)由PCR擴(kuò)增得到編碼猴MCH1受體的cDNA。整個長度的PCR產(chǎn)物一開始就被克隆到載體Pcr 2.1中(Invitrogen，Carlsbad，CA)。采用正向引物對cDNA再擴(kuò)增，該正向引物包括一個最佳轉(zhuǎn)譯開始位點(Kozak序列)。編碼猴的MCH1受體的cDNA表達(dá)框片斷是連接到PCR-SCRIPT載體的平端上(STRATAGENE，La Jolla，CA)。用EcoRI和Not I從該載體上切除受體序列，并將受體序列亞克隆到PCDNA 3.1(INVITROGEN Corp.，Carlsbad，CA)的EcoRI/Not位點上。SEQ ID NO1提供了MCH1受體DNA序列，SEQ IDNO2中提供了被編碼的氨基酸序列。
由標(biāo)準(zhǔn)的磷酸鈣沉淀作用，使HEK 293細(xì)胞(American Type CultureCollection，Manassas，VA)與MCH受體表達(dá)載體進(jìn)行穩(wěn)定的轉(zhuǎn)染，并在DMEM高葡萄糖培養(yǎng)物介質(zhì)中(目錄號#10-017-CV，MEDIATECH，Herndon，VA)生長融匯(接近48-72小時)，其中該DMEM高葡萄糖培養(yǎng)物介質(zhì)用10％胎牛血清和25mM HEPES，以及500μg/ml G418在37℃，5％CO2中補(bǔ)充48-72小時。通過輕度離心使細(xì)胞成為球狀顆粒。用冷的PBS洗滌細(xì)胞球狀顆粒兩次，在含有5mM EDTA的冷PBS中收集細(xì)胞球狀顆粒，并在-80℃下儲存。
試驗時，加入洗滌緩沖液(含有1.0mM CaCl2，5.0mM MgCl2，120mMNaCl的25mM Hepes，pH7.4)融化球狀顆粒，并用BRINKMANPOLYTRON，第5套(setting 5)勻化30秒。在48,000x g下離心細(xì)胞達(dá)10分鐘。丟棄上清液，球狀顆粒在新鮮的洗滌緩沖液中重懸浮，并再次勻化。通過Bradford方法(BIO-RAD蛋白質(zhì)試驗試劑盒，#500-0001，BIO-RAD，Hercules，CA)，用該膜勻漿的等分試樣檢測蛋白質(zhì)濃度。通過這種檢測，測定出1升細(xì)胞培養(yǎng)物通常得到50-75mg的總膜蛋白。為使試驗體積為50μg膜蛋白質(zhì)/150ul結(jié)合緩沖液(洗滌緩沖液+0.1％BSA和1.0μm最終的膦酰二肽)，象前面一樣對勻漿進(jìn)行離心，重懸浮，使結(jié)合緩沖液中蛋白質(zhì)濃度為333μg/ml。膦酰二肽來自于SIGMABIOCHEMICALS，St.Louis，MO(目錄號t#R-7385)。
室溫下于Falcon 96孔圓底聚丙烯盤中進(jìn)行競爭結(jié)合試驗。每一試驗孔中含有150μl MCH受體，該受體含有如前所制備的膜；50μ125I-TyrMCH；50μl結(jié)合緩沖液；以及2μl溶于DMSO中的試驗化合物。125I-TyrMCH(比活性＝2200Ci/mMol)從NEN，Boston，MA購得(目錄號#NEX373)，將其稀釋于結(jié)合緩沖液中以得到30pM的最終試驗濃度。
非特異性結(jié)合的定義為在1μm未標(biāo)記的MCH存在下測定出的結(jié)合。MCH購于BACHEM U.S.A.，King of Rrussia，PA(目錄號#H-1482)。用于測定MCH結(jié)合的試驗孔含有150μl含膜的MCH受體，50μl125I-TyrMCH，25μl結(jié)合緩沖液，以及25μl結(jié)合緩沖液。
在室溫下孵育試驗盤達(dá)1小時。將膜收集至WALLACTM玻璃纖維過濾器(PERKIN-ELMER，Gaithersburg，MD)上，該過濾器在使用前用1.0％PEI(聚乙烯亞胺)預(yù)浸泡2小時。使過濾器干燥過夜，然后在加入WALLAC BETA SCINTTM閃爍流體之后在WALLAC 1205 BETAPLATE計數(shù)器中進(jìn)行計數(shù)。
為進(jìn)行飽和結(jié)合，使125I-Tyr MCH的濃度在7到1,000pM的范圍內(nèi)變化。通常，每一飽和結(jié)合曲線上收集11個濃度點。在計算機(jī)程序FitPTM(BIOSOFT，F(xiàn)erguson，MO)的輔助下，通過使變構(gòu)Hill方程與測定值相適配，從而測定出平衡結(jié)合參數(shù)。對于本發(fā)明中的化合物，Ki值小于1微摩爾，優(yōu)選小于500毫微摩爾，更優(yōu)選低于100毫微摩爾。
實施例3鈣移動試驗本實施例闡述了一種代表性的功能試驗，用于監(jiān)測將黑色素濃集的激素受體表達(dá)到黑色素濃集激素的細(xì)胞的響應(yīng)。該試驗也可用于檢測試驗化合物是否起到黑色素濃集激素受體的激動劑或拮抗劑的作用。
通過磷酸鈣沉淀作用，使中國倉鼠卵巢(CHO)細(xì)胞(American TypeCulture Collection；Manassas，VA)與實施例2中所述的MCH表達(dá)載體一起穩(wěn)定地轉(zhuǎn)染，并在Ham’s F12培養(yǎng)物介質(zhì)中具有FALCONTM黑色壁，清澈底的96-孔盤(#3904，BECTON-DICKINSON，F(xiàn)ranklin Lakes，NJ)內(nèi)生長至密度達(dá)到15,000個細(xì)胞/孔，其中的Ham’s F12培養(yǎng)物介質(zhì)用10％胎牛血清，25mM HEPES和500μg/ml(活性)G418進(jìn)行補(bǔ)充。在進(jìn)行試驗之前，從96孔盤中清空培養(yǎng)物介質(zhì)。將Fluo-3鈣敏感染料(Molecular Probes，Eugene，OR)加入每個孔中(染料溶液1mgFLUO-3 AM，440μl DMSO和440μl溶于DMSO中濃度為20％的普流羅尼酸(pluronicacid)，以1∶4的比例稀釋，每孔有50μl稀釋溶液)。用鋁膜覆蓋盤，然后在37℃下孵育1-2小時。孵育之后，從盤中清空染料，在100μl KRH緩沖液中(0.05mM KCl，0.115M NaCl，9.6mM NaH2PO4，0.01mM MgSO4，25mM HEPES，pH7.4)洗滌細(xì)胞一次以除去過量的染料，洗滌之后，向每個孔中加入80μl KRH。
加入人類MCH受體或試驗化合物，通過在480nM處激發(fā)，在530nM處發(fā)射的FLIPRTM盤讀取裝置(Molecular Devices，Sunnyvale，CA)監(jiān)測熒光響應(yīng)。
為測定試驗化合物對表達(dá)MCH受體到MCH的細(xì)胞響應(yīng)的拮抗能力，首先測定MCH的EC50。將另一部分20μl KRH緩沖液和1μl DMSO加至如上制備的細(xì)胞的每個孔中。100μl溶于KRH緩沖液中的人類MCH通過FLIPR儀自動轉(zhuǎn)移到每個孔中。采用最終MCH最終濃度范圍為1nM到3μM的8點濃度響應(yīng)曲線測定MCH EC50。
將試驗化合物溶解于DMSO中，并在20μl KRH緩沖液中稀釋，然后加入到前述制備的細(xì)胞中。含有制備細(xì)胞和試驗化合物的96孔盤在暗處，于室溫下溫育0.5-6小時。重要的是溫育不宜連續(xù)超過6小時。在即將測定熒光響應(yīng)之前，將100μl在KRH緩沖液中稀釋到2×EC50的人類MCH通過FLIPR儀自動加入到96孔盤的每個孔中，以使最后的樣品體積為200μl，最終的MCH濃度為EC50。試驗孔中的試驗化合物的最終濃度在1μM到5μM之間。通常，曝露于MCH的1個EC50的細(xì)胞表現(xiàn)出的熒光響應(yīng)為約10,000相對熒光單位。采用統(tǒng)計學(xué)意義的參數(shù)測試測定而得的MCH受體的拮抗劑表現(xiàn)出的響應(yīng)明顯小于對照細(xì)胞中的響應(yīng)，達(dá)p≤0.05水平。通常，與相應(yīng)的對照組相比，MCH受體拮抗劑的熒光響應(yīng)下降約20％，優(yōu)選下降約50％，最優(yōu)選下降至少80％。
采用上述方法，在MCH不存在的情況下，可通過測定表達(dá)MCH受體的細(xì)胞的熒光響應(yīng)這一方法，可對化合物作為MCH受體激動劑的能力進(jìn)行測定。導(dǎo)致細(xì)胞在背景上展現(xiàn)熒光的化合物為MCH受體激動劑。
實施例4測定多巴胺D2和D4受體結(jié)合活性本實施例闡述了測定化合物與多巴胺D4和D2受體的結(jié)合親和力的代表性標(biāo)準(zhǔn)試驗。
采用中國倉鼠卵巢(CHO)細(xì)胞的球狀顆粒進(jìn)行試驗，其中該細(xì)胞含有重組表達(dá)靈長類動物D2，人類D4的多巴胺受體。4℃下，在100體積(w/vol)，濃度為0.05M的Tris HCl緩沖液中勻化樣品，其中該Tris HCl緩沖液含有120mM NaCl，5mM MgCl2和1mM EDTA，且pH為7.4。然后樣品在30,000x g下離心，重懸浮和再次勻化。然后將樣品如上述進(jìn)行離心，冷凍最終的組織樣品直至使用。組織在濃度為0.05M，且含有120mM NaCl的Tris HCl中以1∶20(wt/wol)進(jìn)行重懸浮。
在25℃下孵育進(jìn)行多巴胺能的結(jié)合實驗，且1.0ml總的培養(yǎng)物中含有0.4ml組織樣品，0.1nM3H-YM 09151-2(奈莫必利(Nemonapride)，順-5-氯-2-甲氧基-4-(甲基氨基)-N-(2-甲基-2-(苯基甲基)-3-吡咯烷基)苯甲酰胺)和感興趣的化合物。非特異性結(jié)合的定義為在1微摩爾螺環(huán)哌啶酮的存在下測得的結(jié)合；在不存在進(jìn)一步的添加物時，非特異性結(jié)合小于總結(jié)合的20％。
實施例5MDCK細(xì)胞毒性試驗本實施例闡述了采用Madin Darby狗腎(MDCK)細(xì)胞毒性試驗對化合物的毒性進(jìn)行評價的方法。
將1μl試驗化合物加入到具有清潔底部的96孔盤(PACKARMMeriden，CT)的每一個孔中，使試驗化合物的最終濃度為10微摩爾，100微摩爾或200微摩爾。將不含試驗化合物的溶劑加入到對照孔中。
根據(jù)ATCC產(chǎn)品信息頁上的指示，將MDCK細(xì)胞，ATTC no.CCL-34(American Type Culture Collection，Manassas，VA)保存在無菌條件下。使融匯的MDCK細(xì)胞發(fā)生胰蛋白酶化，收集后用溫暖的(37℃)培養(yǎng)基(VITACELL最低必需培養(yǎng)基(Minimum Essential Medium)Eagle，ATTC目錄號#30-2003)稀釋到濃度為0.1×106細(xì)胞/ml。將100μl稀釋的細(xì)胞加入到每個孔中，但不加入含有100μl溫暖培養(yǎng)基的5個標(biāo)準(zhǔn)曲線對照孔中，所述的溫暖培養(yǎng)基中不含細(xì)胞。然后在穩(wěn)定的搖動條件下，使盤在95％O2，5％CO2中于37℃孵育2小時。孵育后，向每個孔中加入50μl哺乳動物細(xì)胞溶菌溶液，每個孔用PACKARD TOPSEAL不干膠貼紙蓋上，并使盤在合適的搖晃器中于約700rpm的轉(zhuǎn)速搖動2分鐘。
相對于未處理的細(xì)胞，產(chǎn)生毒性的化合物將會使ATP的產(chǎn)量降低。PACKARD，(Meriden，CT)ATP-LITE-M發(fā)光ATP檢測試劑盒(產(chǎn)品號為no.6016941)通常按照廠商說明書用于測定處理過的或未處理過的MDCK細(xì)胞中的ATP產(chǎn)量。平衡PACKARD ATP LITE-M試劑至室溫。一旦達(dá)到平衡，在5.5ml基質(zhì)緩沖溶液(來自于試劑盒)中再生凍干基質(zhì)溶液。在去離子水中再生凍干的ATP標(biāo)準(zhǔn)溶液，得到10mM料(stock)。對于5個對照孔，向每個標(biāo)準(zhǔn)曲線對照孔中加入10μl連續(xù)稀釋的PACKARD標(biāo)準(zhǔn)物，得到每個連續(xù)的孔中的最終濃度為200nM，100nM，50nM，25nM以及12.5nM。向所有孔中加入PACKARDA基質(zhì)溶液(50μl)，然后蓋上所有孔，使盤在合適的搖晃器上在約700rpm的轉(zhuǎn)速下?lián)u動2分鐘。在每個盤的底部粘上白色的PACKARD不干膠貼紙，通過將盤包覆于箔內(nèi)并置于黑暗中達(dá)10分鐘，使樣品適應(yīng)黑暗。然后采用發(fā)光計數(shù)儀(如PACKARD TOPCOUNT微盤閃爍和發(fā)光計數(shù)儀或TECANSPECTRAFLUOR PLUS)，在22℃下對發(fā)光進(jìn)行測定，并從標(biāo)準(zhǔn)曲線計算ATP水平。比較試驗化合物處理的細(xì)胞內(nèi)ATP水平與未處理細(xì)胞內(nèi)ATP水平。用10μM優(yōu)選試驗化合物處理的細(xì)胞內(nèi)ATP水平為未處理的細(xì)胞內(nèi)測得的ATP水平的至少80％，優(yōu)選為至少90％。當(dāng)采用濃度為100μM的試驗化合物時，用優(yōu)選試驗化合物處理的細(xì)胞表現(xiàn)出的ATP水平為未處理細(xì)胞內(nèi)檢測到的ATP水平的至少50％，優(yōu)選為至少80％。
從上述內(nèi)容應(yīng)該理解的是，為了達(dá)到闡述的目的，本文描述了本發(fā)明的特定實施方式，但可作出多種不偏離本發(fā)明的精神和范圍的修改。
序列描述
SEQ ID NO1 食蟹猴MCH1R DNA序列SEQ ID NO2 食蟹猴MCH1R氨基酸序列SEQ ID NO3 5’食蟹猴MCH1R引物SEQ ID NO4 3’食蟹猴MCH1R引物序列表SEQUENCE LISTING<110>神經(jīng)原公司<120>黑色素濃集激素受體的配體取代的1-芐基-4-芳基哌嗪類似物<130>PC031007C<150>US 60/292，719<151>2001-05-22<160>4<170>PatentIn version 3.1<210>1<211>1062<212>DNA<213>Macaca fasciculari satggacctgg aagcctcgct gctgcccact ggtcccaaca ccagcaacac ctctgatggc 60cccgataacc tcacctcggc aggatcacct cctcgctcag ggagcgtctc ctacatcaac 120atcatcatgc cttcggtgtt cggcaccatc tgcctcctgg gcatcatcgg gaactccatg 180gtcatcttcg cggtcgtgaa gaagtccaag ctgcactggt gcaacaatgt ccccgacatc 240ttcatcatca acctctcggt ggtggatctc ctctttctcc tgggcatgcc cttcatgatc 300caccagctca tgggcaatgg ggtgtggcac tttggggaga ccatgtgcac cctcatcacg 360gccatggatg ccaatagtca gttcaccagc acctacatcc tgaccgccat ggccattgac 420cgctacctgg ccaccgtcca ccccatctct tccacaaagt tccggaagcc ctctgtggcc 480accctggtga tctgcctcct gtgggccctc tccttcatca gcatcacccc cgtgtggttg 540tatgccagac tcatcccctt cccaggaggt gcagtgggct gcggcatccg cttgcccaac 600ccggacactg acctttactg gttcaccctg taccagtttt tcctggcctt tgccctgccc 660ttcgtggtca tcacggccgc atacgtgagg atcctgcagc gcatgacgtc ctcagtggcc 720cccgcctccc agcgcagcat ccggctgcgg acaaagaggg tgacccgcac agccatcgcc 780atctgcctgg tcttctttgt gtgctgggca ccctactatg tgctacagct gacccagttg 840tccatcagcc gcccgaccct cacctttgtc tacctgtaca atgcggccat cagcttgggc 900tacgccaaca gctgcctcaa cccctttgtg tacattgtgc tctgcgagac gttccgcaaa 960cgcttggtcc tttcggtgaa gcctgcagcc caggggcagc ttcgcgctgt cagcaacgct 1020cagacggctg acgaggagag gacagaaagc aaaggtacct ga1062<210>2<211>353<212>PRT<213>Macaca fascicularis<400>2Met Asp Leu Glu Ala Ser Leu Leu Pro Thr Gly Pro Asn Thr Ser Asn1 5 10 15Thr Ser Asp Gly Pro Asp Asn Leu Thr Ser Ala Gly Ser Pro Pro Arg20 25 30Ser Gly Ser Val Ser Tyr Ile Asn Ile Ile Met Pro Ser Val Phe Gly35 40 45
Thr Ile Cys Leu Leu Gly Ile Ile Gly Asn Ser Met Val Ile Phe Ala50 55 60Val Val Lys Lys Ser Lys Leu His Trp Cys Asn Asn Val Pro Asp Ile65 70 75 80Phe Ile Ile Asn Leu Ser Val Val Asp Leu Leu Phe Leu Leu Gly Met85 90 95Pro Phe Met Ile His Gln Leu Met Gly Asn Gly Val Trp His Phe Gly100 105 110Glu Thr Met Cys Thr Leu Ile Thr Ala Met Asp Ala Asn Ser Gln Phe115 120 125Thr Ser Thr Tyr Ile Leu Thr Ala Met Ala Ile Asp Arg Tyr Leu Ala130 135 140Thr Val His Pro Ile Ser Ser Thr Lys Phe Arg Lys Pro Ser Val Ala145 150 155 160Thr Leu Val Ile Cys Leu Leu Trp Ala Leu Ser Phe Ile Ser Ile Thr165 170 175Pro Val Trp Leu Tyr Ala Arg Leu Ile Pro Phe Pro Gly Gly Ala Val180 185 190Gly Cys Gly Tle Arg Leu Pro Asn Pro Asp Thr Asp Leu Tyr Trp Phe195 200 205Thr Leu Tyr Gln Phe Phe Leu Ala Phe Ala Leu Pro Phe Val Val Ile210 215 220Thr Ala Ala Tyr Val Arg Ile Leu Gln Arg Met Thr Ser Ser Val Ala225 230 235 240Pro Ala Ser Gln Arg Ser Ile Arg Leu Arg Thr Lys Arg Val Thr Arg245 250 255Thr Ala Ile Ala Ile Cys Leu Val Phe Phe Val Cys Trp Ala Pro Tyr260 265 270Tyr Val Leu Gln Leu Thr Gln Leu Ser Ile Ser Arg Pro Thr Leu Thr275 280 285Phe Val Tyr Leu Tyr Asn Ala Ala Ile Ser Leu Gly Tyr Ala Asn Ser290 295 300Cys Leu Asn Pro Phe Val Tyr Ile Val Leu Cys Glu Thr Phe Arg Lys305 310 315 320Arg Leu Val Leu Ser Val Lys Pro Ala Ala Gln Gly Gln Leu Arg Ala325 330 335Val Ser Asn Ala Gln Thr Ala Asp Glu Glu Arg Thr Glu Ser Lys Gly
340 345 350Thr<210>3<211>24<212>DNA<213>Artificial<220>
<223>5’macaque MCH1R primer<400>3gagcaggcga ccggcactgg ctgg 24<210>4<211>28<212>DNA<213>Artificial<220>
<223>3’macaque MCH1R primer<400>4ggaggtgtgc agggtggcag gggaagta 28
權(quán)利要求
1.通式化合物 或其藥學(xué)上可接受的鹽，其中，V為一單鍵或-(C＝O)-；W為N，CH，COH或C-CN；X為鹵素，羥基，硝基，氰基，-CO，氧基或式L-M的基團(tuán)；Y和Z分別獨立地為(i)CH，(ii)N，或(iii)與R5相連接成為包括W和V，且具有5到8個環(huán)原子的碳環(huán)或雜環(huán)，條件是Y和Z不都是N；N是1或2；R1和R2分別獨立地選自氫，鹵素，羥基，硝基，氰基，-CO，氧基或式L-M的基團(tuán)，條件是當(dāng)R1和R2為氫時，V為-(C＝O)-；R3為(i)選自氫，(C1-C6)烷基，(C2-C6)烯基和鹵代(C1-C6)烷基；或(ii)與R6和R10之一或兩者相連接形成具有一個環(huán)或兩個稠合環(huán)的碳環(huán)或雜環(huán)基團(tuán)，其中的每個環(huán)包括5到8個環(huán)原子和0，1或2個獨立選自O(shè)、N或S的雜原子。R4為氫、(C1-C6)烷基或鹵代(C1-C6)烷基；R5為(i)每次出現(xiàn)時都獨立選自氫，鹵素，羥基，硝基，氰基，氨基，氧基，(C1-C6)烷基，(C2-C6)烯基，(C2-C6)炔基，(C1-C6)烷氧基，鹵代(C1-C6)烷基，鹵代(C1-C6)烷氧基，單-或二-(C1-C6)烷基氨基，以及氨基(C1-C6)烷基；或(ii)與R6，Y或Z相連接形成具有5到8個環(huán)原子的碳環(huán)或雜環(huán)；R6為(i)選自氫，鹵素，羥基，硝基，氰基，氨基，氧基，(C1-C6)烷基，(C2-C6)烯基，(C2-C6)炔基，(C1-C6)烷氧基，鹵代(C1-C6)烷基，鹵代(C1-C6)烷氧基，單-或二-(C1-C6)烷基氨基，以及氨基(C1-C6)烷基；或(ii)與R3或R5相連接形成碳環(huán)或雜環(huán)基；R7為(i)選自氫，鹵素，羥基，硝基，氰基，-COOH，氧基；以及式L-M基團(tuán)；或(ii)與R8或R12相連接形成稠合的5-或6-員碳環(huán)或雜環(huán)基團(tuán)；R8為(i)選自氫，鹵素，羥基，硝基，氰基，-COOH，氧基；以及式L-M的基團(tuán)；或(ii)與R7或R11相連接形成稠合的5-到10-員碳環(huán)或雜環(huán)基團(tuán)；U為N，O或CR9；T為N，O或CR10；R9為(i)選自氫，鹵素，羥基，硝基，氰基，-COOH，氧基；以及式L-M的基團(tuán)；或(ii)與R10或R11相連接形成稠合的5-到10-員碳環(huán)或雜環(huán)基團(tuán)；R10為(i)選自氫，鹵素，羥基，硝基，氰基，-COOH，氧基；以及式L-M的基團(tuán)；或(ii)與R3，R8或R9相連接形成碳環(huán)或雜環(huán)基團(tuán)；R11為(i)選自氫，鹵素，羥基，硝基，氰基，-COOH，氧基；以及式L-M的基團(tuán)；或(ii)與R8或R9相連接形成稠合的5-到10-員碳環(huán)或雜環(huán)基團(tuán)；R12為(i)每次出現(xiàn)時都獨立選自氫，鹵素，羥基，硝基，氰基，氨基，氧基，(C1-C6)烷基，(C2-C6)烯基，(C2-C6)炔基，(C1-C6)烷氧基，鹵代(C1-C6)烷基，鹵代(C1-C6)烷氧基，單-或二-(C1-C6)烷基氨基，以及氨基(C1-C6)烷基；或(ii)與R7相連接形成稠合的碳環(huán)或雜環(huán)基團(tuán)；L為單鍵，-NR11-，-O-，-SO2-，-SO2NH-，C(＝O)NR11-或NR11C(＝O)-，其中每次出現(xiàn)的R11獨立地選自氫，(C1-C6)烷基，(C2-C6)烯基，(C2-C6)炔基和鹵代(C1-C6)烷基；以及M為氫，(C1-C6)烷基，(C2-C6)烯基，(C2-C6)炔基，鹵代(C1-C6)烷基，氨基(C1-C6)烷基或5-到10-員碳環(huán)；條件是當(dāng)R11為鹵素且V為單鍵時，至少R10，R3和R4的其中之一不為氫。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的化合物或鹽，其中W是N。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的化合物或鹽，其中n是1。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的化合物或鹽，其中R3為氫，(C1-C3)烷基或鹵代(C1-C3)烷基，且其中R4為氫。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的化合物或鹽，其中R3為甲基，乙基或三氟甲基。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的化合物或鹽，其中R3和R6連接形成碳環(huán)或雜環(huán)。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的化合物或鹽，其中R3和R10連接形成碳環(huán)或雜碳環(huán)。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的化合物或鹽，其中R3，R6和R10連接形成具有兩個稠合環(huán)的碳環(huán)或雜環(huán)。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的化合物或鹽，其中Y為N，Z為CH。
10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的化合物或鹽，其中Y和Z都為CH。
11.根據(jù)權(quán)利要求1所述的化合物或鹽，其中X為鹵素，(C1-C3)烷基，鹵代(C1-C3)烷基，(C1-C3)烷氧基，鹵代(C1-C3)烷氧基或苯基。
12.根據(jù)權(quán)利要求11所述的化合物或鹽，其中R1為氫。
13.根據(jù)權(quán)利要求11所述的化合物或鹽，其中R11為甲氧基或羥基。
14.根據(jù)權(quán)利要求11所述的化合物或鹽，其中R11是鹵素。
15.根據(jù)權(quán)利要求1所述的化合物或鹽，其中U為CR9，R7，R8和R9分別獨立地選自氫，C1-C6烷基，C1-C6烷氧基和鹵素。
16.根據(jù)權(quán)利要求1所述的化合物或鹽，其中R11為鹵素且R8為(C1-C6)烷氧基。
17.根據(jù)權(quán)利要求1所述的化合物或鹽，其中每個R5獨立地是氫或甲基。
18.根據(jù)權(quán)利要求17所述的化合物或鹽，其中R6是氫或甲基，或R6與R3連接形成飽和或部分飽和的5-或6-員碳環(huán)或雜碳環(huán)。
19.根據(jù)權(quán)利要求1所述的化合物或鹽，其中V是單鍵。
20.根據(jù)權(quán)利要求1所述的化合物或鹽，其中V為-(C＝O)-。
21.根據(jù)權(quán)利要求1所述的化合物或鹽，通式為 其中A和B獨立地選自O(shè)，N，S，CR13和CHR13，其中每次出現(xiàn)的R13獨立地選自氫，鹵素，氰基，羥基，氧基，肟，(C1-C6)烷基，(C1-C6)烷氧基，(C1-C6)烷酰基，(C1-C6)烷酰氧基，(C1-C6)烷氧基羰基，鹵代(C1-C6)烷基和鹵代(C1-C6)烷氧基；R4為氫或甲基；每次出現(xiàn)的R5獨立地選自氫或甲基；且R11是氫，鹵素，甲氧基或羥基。
22.根據(jù)權(quán)利要求21所述的化合物或鹽，其中A和B都為CR13。
23.根據(jù)權(quán)利要求21所述的化合物或鹽，其中A是S或O且B是CR13。
24.根據(jù)權(quán)利要求21所述的化合物或鹽，其中R7，R8和R9分別獨立地選自氫，(C1-C6)烷基，(C1-C6)烷氧基和鹵素。
25.根據(jù)權(quán)利要求1所述的化合物或鹽，通式為 其中R3和R12中的至少一個不是氫。
26.根據(jù)權(quán)利要求1所述的化合物或鹽，其中所述的化合物選自1-(4-溴-3-甲氧基苯基)-4-(3，4-二甲氧基芐基)哌嗪；1-(4-溴-3-甲氧基苯基)-4-(4-氯芐基)哌嗪；1-[4-氯-3-(三氟甲基)苯基]-4-(3，4-二甲氧基芐基)哌嗪；1-(3，4-二氯苯基)-4-(3，4-二甲氧基芐基)哌嗪；1-(4-溴-3-甲氧基苯基)-4-(4-甲氧基-2，5-二甲基芐基)哌嗪；1-(4-溴-3-甲氧基苯基)-4-(4-甲氧基-2，3-二甲基芐基)哌嗪；1-(3-溴-4-甲氧基芐基)-4-(4-溴-3-甲氧基苯基)哌嗪；4-{[4-(4-溴-3-甲氧基苯基)哌嗪-1-基]甲基}-2-甲氧基苯酚；4-({4-[4-氯-3-(三氟甲基)苯基]哌嗪-1-基}甲基)-2-甲氧基苯酚；1-[4-氯-3-(三氟甲基)苯基]-4-(4-甲氧基-2，3-二甲基芐基)哌嗪；1-(3-溴-4-甲氧基苯基)-4-[4-氯-3-(三氟甲基)苯基]哌嗪；1-(4-溴-3-甲氧基苯基)-4-(4-甲氧基-3-甲基芐基)哌嗪；1-[4-氯-3-(三氟甲基)苯基]-4-(4-甲氧基-3-甲基芐基)哌嗪；1-(4-氯-3-三氟甲氧基苯基)-4-[1-(3，4-二甲氧基芐基)]-2-甲基-哌嗪；4-(4-氯-3-三氟甲基-苯基)-1-(3，4-二甲氧基-芐基)]-2-甲基-哌嗪；4-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-1-(3，4-二甲氧基-芐基)]-2-甲基-哌嗪；4-(4-氯-3-甲氧氧基-苯基)-[1-(3，4-二甲氧基-芐基)-乙基]-2-甲基-哌嗪；3-{[4-(4-溴-3-甲氧基苯基)哌嗪-1-基]甲基}-9-乙基-9H-咔唑；1-(5-溴-6-甲氧基吡啶-2-基)-4-(3，4-二甲氧基芐基)哌嗪；1-(5-溴-6-甲氧基吡啶-2-基)-4-(4-氯芐基)哌嗪；1-(5-溴-6-甲氧基吡啶-2-基)-4-(4-甲氧基-2，5-二甲基芐基)哌嗪；1-(5-溴-6-甲氧基吡啶-2-基)-4-(4-甲氧基-2，3-二甲基芐基)哌嗪；1-(3-溴-4-甲氧基芐基)-4-(5-溴-6-甲氧基吡啶-2-基)哌嗪；4-(5-溴-6-甲氧基吡啶-2-基)-1-(3，4-二甲氧基-芐基)-2-甲基哌嗪；4-(5-溴-6-甲氧基吡啶-2-基)-1-(3，4-二甲氧基-芐基)-2-甲基哌嗪；1-(5-溴-6-甲氧基吡啶-2-基)-4-(4-甲氧基-3-甲基芐基)哌嗪；3-{[4-(5-溴-6-甲氧基吡啶-2-基)哌嗪-1-基]甲基}-9-乙基-9H-咔唑；4-{[4-(5-溴-6-甲氧基吡啶-2-基)哌嗪-1-基]甲基}-2-甲氧基苯酚；1-(4-溴-3-甲氧基苯基)-4-(3，4-二甲氧基芐基)-1，4-地西泮；和4-[4-氯-3-(三氟甲基)苯基]-1-(3，4-二甲氧基芐基)哌啶-4-醇。
27.根據(jù)權(quán)利要求1所述的化合物或鹽，其中所述的化合物選自1-(4-溴-3-甲氧基苯基)-4-[1-(3，4-二甲氧基苯基)乙基]哌嗪；1-[4-氯-3-(三氟甲基)苯基]-4-[1-(3，4-二甲氧基苯基)乙基]哌嗪；1-(4-溴-3-甲氧基苯基)-4-[1-(4-甲氧基苯基)乙基]哌嗪；1-(4-溴-3-甲氧基苯基)-4-[1-(3，4-二氟苯基)乙基]哌嗪；4-{1-[4-(4-溴-3-甲氧基苯基)哌嗪-1-基]乙基}-2-甲基苯酚；1-(4-溴-3-甲氧基苯基)-4-[1-(4-氟-3-甲氧基苯基)-乙基]哌嗪；1-(4-氯-3-甲氧基苯基)-4-[1-(3，4-二甲氧基苯基)乙基]哌嗪；1-(4-氯-3-甲氧基苯基)-4-[1-(3，4-二甲氧基苯基)乙基]哌嗪；1-(4-溴-3-三氟甲氧基苯基)-4-[1-(3-氟-4-甲氧基苯基)乙基]哌嗪；1-(4-溴-3-三氟甲氧基苯基)-4-[1-(3-氟-4-甲氧基苯基)乙基]哌嗪；1-(4-溴-3-三氟甲基苯基)-4-[1-(3-氟-4-甲氧基苯基)乙基]哌嗪；1-(4-甲氧基-苯基)-4-[1-(3，4-二甲氧基苯基)乙基]哌嗪；1-(4-甲氧基苯基)-4-[1-(3，4-二甲氧基苯基)乙基]哌嗪；1-(4-溴-3-甲氧基苯基)-4-[1-(4-氯-苯基)-乙基]-哌嗪；1-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-4-[1-(4-甲氧基-2，3-二甲基-苯基)-乙基]-哌嗪；1-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-4-[1-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-乙基]-哌嗪；1-(4-溴-3-甲氧基苯基)-4-[1-(4-甲氧基-2，5-二甲基-苯基)-乙基]-哌嗪；1-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-4-[1-(3，4-二甲氧基-苯基)-乙基]-哌嗪；1-(4-溴-3-甲氧基-苯基)-4-[1-(3，4-二甲氧基-苯基)-乙基]-哌嗪；1-(4-氯-3-三氟甲基-苯基)-4-[1-(3，4-二甲氧基-苯基)-乙基]-哌嗪；1-(4-溴-3-甲氧基-苯基)-4-[1-(4-乙氧基-3-甲氧基-苯基)-乙基]-哌嗪；1-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-4-[1-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-乙基]-哌嗪；1-(4-溴-3-甲氧基-苯基)-4-[1-(2，4，5-三甲基-苯基)-乙基]-哌嗪；1-(4-溴-3-甲氧基-苯基)-4-[1-(3-氟-4-甲氧基-苯基)-乙基]-哌嗪；1-(4-氯-3-三氟甲基-苯基)-4-[1-(4-甲氧基-2，3-二甲基-苯基)-乙基]-哌嗪；1-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-4-[1-(3，4-二甲氧基-苯基)-乙基]-哌嗪；1-(4-氯-3-三氟甲基-苯基)-4-[1-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-乙基]-哌嗪；1-(4-氯-3-三氟甲基-苯基)-4-[1-(4-甲氧基-3-甲基-苯基)-乙基]-哌嗪；1-(4-溴-3-甲氧基-苯基)-4-[1-(3-甲氧基-苯基)-乙基]-哌嗪；1-(4-溴-3-甲氧基-苯基)-4-[1-(4-三氟甲基-苯基)-乙基]-哌嗪；4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1-[1-(3，4-二甲氧基-苯基)-乙基]-哌嗪；1-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-4-[1-(3-氟-4-甲氧基-苯基)-乙基]-哌嗪；1-(4-溴-3-甲氧基-苯基)-4-[1-(3-乙氧基-苯基)-乙基]-哌嗪；1-(5-{1-[4-(4-溴-3-甲氧基-苯基)-哌嗪-1-基]-乙基}-2-氟-苯基)-乙基酮；1-(4-氯-3-甲基-苯基)-4-[1-(4-甲氧基-3-甲基-苯基)-乙基]-哌嗪；1-(4-溴-3-甲氧基-苯基)-4-[1-(3，5-二甲氧基-苯基)-乙基]-哌嗪；1-(4-甲氧基-3-甲基-苯基)-4-[1-(4-甲氧基-2，3-二甲基-苯基)-乙基]-哌嗪；1-(4-氯-3-甲基-苯基)-4-[1-(3，4-二甲氧基-苯基)-乙基]-哌嗪；1-(4-溴-3-甲氧基-苯基)-4-[1-(3，4-二乙氧基-苯基)-乙基]-哌嗪；1-(4-氯-3-氟-苯基)-4-[1-(4-甲氧基-2，3-二甲基-苯基)-乙基]-哌嗪；1-(4-氯-3-甲基-苯基)-4-[1-(4-甲氧基-2，3-二甲基-苯基)-乙基]-哌嗪；1-(4-氯-3-氟-苯基)-4-[1-(3，4-二甲氧基-苯基)-乙基]-哌嗪；1-(4-甲氧基-3-甲基-苯基)-4-[1-(3-甲基-4-甲氧基-苯基)-乙基]-哌嗪；1-(4-甲氧基-3-甲基-苯基)-4-[1-(3，4-二甲氧基-苯基)-乙基]-哌嗪；1-(3，4-二甲氧基-苯基)-4-[1-(4-甲氧基-2，3-二甲基-苯基)-乙基]-哌嗪；1-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-4-[1-(3，4-二甲氧基-苯基)-乙基]-哌嗪；1-(4-溴-3-甲氧基-苯基)-4-{1-[4-(4-溴-苯基)-苯基]乙基}-哌嗪；4-(4-氯-3-三氟甲基-苯基)-[1-(3，4-二甲氧基-芐基)-乙基]-哌嗪；1-(1-苯并[1，3]-二氧環(huán)戊烯-5-基-乙基)-4-(4-溴-3-甲氧基-苯基)-哌嗪；1-(4-溴-3-甲氧基-苯基)-4-[1-(3，4-二甲氧基-苯基)-乙基]-[1，4]-地西泮；1-(4-溴-3-甲氧基-苯基)-4-[1-(3-氟-4-甲氧基-苯基)-乙基]-[1，4]-地西泮；1-(4-溴-3-甲氧基-苯基)-4-[1-(3，4-二甲氧基-苯基)-丙基]-哌嗪；1-(4-氯-3-三氟甲基-苯基)-4-[1-(3，4-二甲氧基-苯基)-丙基]-哌嗪；1-[1-(3，4-二甲氧基-苯基)-乙基]-4-[3-甲氧基-苯基)-哌嗪-2，5-二酮；1-(5-溴-6-甲氧基吡啶-2-基)-4-[1-(3，4-二甲氧基苯基)乙基]-哌嗪；1-(5-溴-6-甲氧基-吡啶-2-基)-4-[1-(4-三氟甲基-苯基)-乙基]-哌嗪；1-(4-溴-3-甲氧基-苯基)-4-[1-(6-甲氧基-萘-2-基)-乙基]-哌嗪；4-(4-氯-3-三氟甲基-苯基)-1-[1-(3，4-二甲氧基-苯基)-乙基]-哌嗪；1-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-4-[1-(3，4-二甲氧基-苯基)-乙基]-哌嗪；1-(4-溴-3-甲氧基-苯基)-4-[1-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-乙基]-哌嗪；和1-(4-溴-3-甲氧基-苯基)-4-[1-(6-甲氧基-吡啶-2-基)-乙基]-哌嗪。
28.根據(jù)權(quán)利要求1所述的化合物或鹽，其中所述的化合物選自2-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)-八氫-吡啶并[1，2-α]-吡嗪；2-(4-氯-3-三氟甲基-苯基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)-八氫-吡啶并[1，2-α]-吡嗪；2-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-6-(3-氟-4-甲氧基-苯基)-八氫-吡啶并[1，2-α]-吡嗪；2-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)-八氫-吡啶并[1，2-α]-吡嗪；2-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)-八氫-吡啶并[1，2-α]-吡嗪；2-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-6-(甲氧基-萘-2-基)-八氫-吡啶并[1，2-α]-吡 嗪；2-(4-氯-3-甲基-苯基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)-八氫-吡啶并[1，2-α]-吡嗪；2-(4-甲氧基-3-甲基-苯基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)-八氫-吡啶并[1，2-α]-吡嗪；2-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-6-(3-甲氧基-苯基)-八氫-吡啶并[1，2-α]-吡嗪；2-(2，4-二溴-5-甲氧基-苯基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)-八氫-吡啶并[1，2-α]-吡嗪；2-(3，4-二甲氧基-苯基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)-八氫-吡啶并[1，2-α]-吡嗪；2-(4-氯-3-氟-苯基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)-八氫-吡啶并[1，2-α]-吡嗪；1-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)-八氫-吡啶并[1，2-α]-吡嗪；2-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)-八氫-吡啶并[1，2-α]-吡嗪-8-醇；2-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)-八氫-吡啶并[1，2-α-吡嗪-8-酮；2-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-6-(3-氟-4-甲氧基-苯基)-八氫-吡啶并[1，2-α]-吡嗪-8-酮；2-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-6-(6-甲氧基-萘-2-基)-八氫-吡啶并[1，2-α]-吡嗪-8-酮；8-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-4-(3，4-二甲氧基-苯基)-八氫-吡嗪并[2，1-c][1，4]-噻嗪；2-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)-八氫-吡咯并[1，2-a]-吡嗪；2-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)-1，3，4，6，9，9a-六氫-2H-吡啶并[1，2-a]-吡嗪；8-溴-3-(3，4-二甲氧基-芐基)-9-甲氧基-2，3，4，4a-四氫-1H，6H-吡嗪并[1，2-a]-喹喔啉-5-酮；1-(4-溴-3-甲氧基苯基)-4-(5，6-二甲氧基-2，3-二氫-1H-茚滿-1-基)-哌嗪；1-(5-溴-6-甲氧基吡啶-2-基)-4-(5，6-二甲氧基-2，3-二氫-1H-茚滿-1-基)-哌嗪；1-(4-氯-3-三氟甲基-苯基)-4-(4，5-二甲氧基-茚滿-1-基)-哌嗪；1-(4-溴-3-甲氧基-苯基)-4-(4，5-二甲氧基-茚滿-1-基)-哌嗪；或7-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-4-(3，4-二甲氧基-苯基)-十氫-萘-2-酚。
29.根據(jù)權(quán)利要求1所述的化合物或鹽，其中所述的化合物選自(4-氯-苯基)-{4-[1-(2，3-二甲基-苯基)-乙基]哌嗪-1-基}-甲酮；(4-氯-苯基)-{4-[1-(4-甲氧基-2，3-二甲基-苯基)-乙基]哌嗪-1-基}-甲酮；(4-三氟甲基-苯基)-{4-[1-(4-甲氧基-2，3-二甲基-苯基)-乙基]哌嗪-1-基}-甲酮；(3，4-二氯-苯基)-{4-[1-(4-甲氧基-2，3-二甲基-苯基)-乙基]哌嗪-1-基}-甲酮；(4-氯-苯基)-{4-[1-(4-甲基-萘-1-基)-乙基]哌嗪-1-基}-甲酮；(4-三氟甲基-苯基)-{4-[1-(4-甲氧基-2-甲基-苯基)-乙基]哌嗪-1-基}-甲酮；(4-三氟甲基-苯基)-{4-[1-(4-甲氧基-2，3-二甲基-苯基)-乙基]哌嗪-1-基}-甲酮；(4-三氟甲基-苯基)-{4-[1-(4-甲氧基-3-甲基-苯基)-乙基]哌嗪-1-基}-甲酮；(4-氯-苯基)-{4-[1-(4-甲氧基-萘-1-基)-乙基]哌嗪-1-基}-甲酮；(4-三氟甲基-苯基)-{4-[1-(4-甲氧基-2，3-二甲基-苯基)-丙基]哌嗪-1-基}-甲酮；(4-氯-苯基)-{4-[1-(4-甲氧基-2，3-二甲基-苯基)-烯丙基]哌嗪-1-基}-甲酮；(4-氟-苯基)-{4-[1-(4-甲氧基-2，3-二甲基-苯基)-乙基]哌嗪-1-基}-甲酮；(4-溴-3-甲基-苯基)-{4-[1-(4-甲氧基-2，3-二甲基-苯基)-乙基]哌嗪-1-基}-甲酮；(3，4-二氯-苯基)-{4-[1-(4-甲基-萘-1-基)-乙基]哌嗪-1-基}-甲酮；[6-(3，4-二甲氧基-苯基)-八氫-吡啶并[1，2-a]吡嗪-2-基]-(4-三氟甲基-苯基)-甲酮；(4-氯-苯基)-{4-[1-(4-甲氧基-2，3-二甲基-苯基)-丙基]哌嗪-1-基}-甲酮；{4-[1-(4-甲氧基-2，3-二甲基-苯基)-乙基]-[1，4-]地西泮-1-基}-(4-三氟甲基-苯基)-甲酮；和{5-[1-(4-甲氧基-2，3-二甲基-苯基)-乙基]-(1S，4S)-2，5-二氮-雙環(huán)[2.2.1]庚-2-基}-(4-三氟甲基-苯基)-甲酮。
30.根據(jù)權(quán)利要求1所述的化合物或鹽，其中所述的化合物選自3-{1-[4-(4-溴-3-甲氧基-苯基)-哌嗪-1-基]-乙基}-6-甲氧基-喹啉；3-{1-[4-(4-溴-3-甲氧基-苯基)-哌嗪-1-基]-乙基}-2-氯-6-甲氧基-喹啉；3-{1-[4-(4-溴-3-甲氧基-苯基)-哌嗪-1-基]-乙基}-喹啉；1-(4-溴-3-甲氧基-苯基)-4-[1-(6-甲氧基-吡啶-3-基)-乙基]-哌嗪；和3-{1-[4-(4-溴-3-甲氧基-苯基)-哌嗪-1-基]-乙基}-6-氟-4-甲基-2H-苯并吡喃-2-醇。
31.根據(jù)權(quán)利要求25所述的化合物或鹽，其中所述的化合物選自(3S)-1-(4-氯-3-三氟甲氧基苯基)-4-[1-(3，4-二甲氧基-芐基)]-2-甲基-哌嗪；(2S)-4-(5-溴-6-甲氧基吡啶-2-基)-1-(3，4-二甲氧基-芐基)]-2-甲基哌嗪；R-1-(4-氯-3-甲氧基苯基)-4-[1-(3，4-二甲氧基苯基)乙基]哌嗪；R-1-(4-溴-3-三氟甲氧基苯基)-4-[1-(3-氟-4-甲氧基苯基)乙基]哌嗪；R-1-(4-甲氧基苯基)-4-[1-(3，4-二甲氧基苯基)乙基]哌嗪；R-1-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-4-[1-(3，4-二甲氧基苯基)乙基]哌嗪；{5-[1-(4-甲氧基-2，3-二甲基-苯基)-乙基]-(1S，4S)-2，5-二氮-雙環(huán)[2.2.1]庚-2-基}-(4-三氟甲基-苯基)-甲酮；(6R，10S)-2-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)-八氫-吡啶并[1，2-a]-吡嗪-8-酮；R-1-(4-溴-3-甲氧基-苯基)-4-[1-(3，4-二甲氧基苯基)乙基]哌嗪；(2S)-4-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-1-(3，4-二甲氧基芐基)-2-甲基-哌嗪；(3S)-1-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-4-[1-(3，4-二甲氧基苯基)-乙基]-哌嗪；(3S)-1-(4-氯-3-三氟甲基-苯基)-4-[1-(3，4-二甲氧基苯基)-乙基]-哌嗪；(6R，10S)-2-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)-八氫-吡啶并[1，2-a]-吡嗪；(3R)-1-(4-氟-3-甲氧基-苯基)-4-[1-(3，4-二甲氧基苯基)-乙基]-哌嗪；(2S)-4-(4-氯-3-三氟甲基-苯基)-[1-(3，4-二甲氧基芐基)-乙基]-哌嗪；(6R，9S)-2-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)-八氫-吡咯并[1，2-a]-吡嗪；(6R，10S)-2-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-6-(3，4-二甲氧基-苯基)-八氫-吡啶并[1，2-a]-吡嗪-8-醇；(6R，10S)-[6-(3，4-二甲氧基-苯基)-八氫-吡啶并[1，2-a]-吡嗪-2-基]-(4-三氟甲基-苯基)-甲酮；(6R，10S)-2-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-6-(3-氟，4-甲氧基-苯基)-八氫-吡啶并[1，2-a]-吡嗪；和{5-[1-(4-甲氧基-2，3-二甲基-苯基)-乙基]-(1S，4S)-2，5-二氮-雙環(huán)[2.2.1]庚-2-基}-(4-三氟甲基-苯基)-甲酮。
32.根據(jù)權(quán)利要求1所述的化合物或鹽，其中所述的化合物在MCH受體配體結(jié)合試驗和/或MCH受體-介導(dǎo)的信號轉(zhuǎn)換試驗中表現(xiàn)出的Ki值為1微摩爾或更小。
33.根據(jù)權(quán)利要求32所述的化合物或鹽，其中所述的化合物在MCH受體配體結(jié)合試驗中表現(xiàn)出的Ki值為500毫微摩爾或更小，在多巴胺受體配體結(jié)合試驗中表現(xiàn)出的Ki值至少為1微摩爾。
34.根據(jù)權(quán)利要求32所述的化合物或鹽，其中所述的化合物在MCH受體配體結(jié)合試驗和/或MCH受體-介導(dǎo)的信號轉(zhuǎn)換試驗中表現(xiàn)出的Ki值為100毫微摩爾或更小。
35.根據(jù)權(quán)利要求32所述的化合物或鹽，其中所述的化合物在MCH受體配體結(jié)合試驗和/或MCH受體-介導(dǎo)的信號轉(zhuǎn)換試驗中表現(xiàn)出的Ki值為10毫微摩爾或更小。
36.一種藥物組合物，含有權(quán)利要求1所述的化合物或鹽，其與生理學(xué)上可接受的載體或賦形劑相組合。
37.根據(jù)權(quán)利要求36所述的藥物組合物，其中所述的藥物組合物被制劑成注射液，氣溶膠，乳膏，凝膠，丸劑，膠囊，糖漿或皮膚貼片。
38.一種包裝的藥物制劑，包括(a)裝入包裝物中的根據(jù)權(quán)利要求36所述的藥物組合物，以及(b)采用該組合物治療由MCH受體拮抗作用或激動作用引起的疾病的說明書。
39.根據(jù)權(quán)利要求38所述的藥物制劑，其中所述的患者患有進(jìn)食失調(diào)，性失調(diào)，肥胖癥，糖尿病，心臟病或中風(fēng)。
40.一種對MCH與細(xì)胞的MCH受體的結(jié)合進(jìn)行調(diào)節(jié)的方法，該方法包括使表達(dá)MCH受體的細(xì)胞和權(quán)利要求1所述的化合物或鹽在足以對MCH與體外MCH受體的結(jié)合進(jìn)行可檢測性調(diào)節(jié)的劑量下相接觸，從而對MCH和細(xì)胞內(nèi)MCH受體的結(jié)合進(jìn)行調(diào)節(jié)。
41.根據(jù)權(quán)利要求40所述的方法，其中所述細(xì)胞存在于動物中。
42.根據(jù)權(quán)利要求41所述的方法，其中所述的動物是指人，所述的細(xì)胞是指腦細(xì)胞，所述的流體是指腦脊髓液。
43.根據(jù)權(quán)利要求40所述的方法，其中所述的調(diào)節(jié)是抑制。
44.一種在體外對MCH與MCH受體的結(jié)合進(jìn)行調(diào)節(jié)的方法，該方法包括使MCH受體和根據(jù)權(quán)利要求1所述的化合物或鹽在足以對MCH與MCH受體的結(jié)合進(jìn)行可檢測性調(diào)節(jié)的條件和劑量下相接觸。
45.一種改變細(xì)胞內(nèi)MCH受體的信號-轉(zhuǎn)換活性的方法，該方法包括使表達(dá)MCH受體的細(xì)胞與權(quán)利要求1所述的化合物或鹽在足以可檢測性地改變細(xì)胞的電生理學(xué)特性的條件和劑量下相接觸，從而改變細(xì)胞內(nèi)MCH受體的信號-轉(zhuǎn)換活性。
46.根據(jù)權(quán)利要求45所述的方法，其中所述的細(xì)胞存在于動物中。
47.根據(jù)權(quán)利要求46所述的方法，其中所述的動物是指人，所述的細(xì)胞是指腦細(xì)胞，所述的流體是指腦脊髓液。
48.根據(jù)權(quán)利要求45所述的方法，其中所述的調(diào)節(jié)是抑制。
49.根據(jù)權(quán)利要求45所述的方法，其中所述細(xì)胞電生理學(xué)特性方面的改變表現(xiàn)為動物進(jìn)食行為的變化而被監(jiān)測到。
50.一種治療與致病性MCH受體活化相關(guān)的疾病或失調(diào)的方法，包括對需要此類治療的患者給予有效量的權(quán)利要求1所述的化合物或鹽。
51.根據(jù)權(quán)利要求50所述的方法，其中所述的疾病或失調(diào)是指進(jìn)食失調(diào)，性失調(diào)，糖尿病，心臟病或中風(fēng)。
52.根據(jù)權(quán)利要求50所述的方法，其中所述的化合物或調(diào)控因子通過口服方式給藥。
53.根據(jù)權(quán)利要求50所述的方法，其中所述的化合物或調(diào)控因子通過鼻內(nèi)，靜脈內(nèi)或局部方式給藥。
54.根據(jù)權(quán)利要求50所述的方法，其中所述的患者是指人。
55.根據(jù)權(quán)利要求50所述的方法，其中所述的患者是指狗或貓。
56.一種治療肥胖癥的方法，包括對需要此類治療的病人給予有效量的根據(jù)權(quán)利要求1所述的化合物或鹽。
57.根據(jù)權(quán)利要求56所述的方法，其中所述的化合物或調(diào)控因子通過口服方式給藥。
58.根據(jù)權(quán)利要求56所述的方法，其中所述的患者是指人。
59.根據(jù)權(quán)利要求56所述的方法，其中所述的患者是指狗或貓。
60.根據(jù)權(quán)利要求1所述的化合物或鹽，其中所述的化合物或鹽是被放射性標(biāo)記的。
61.一種檢測樣品中是否存在MCH受體的方法，包括以下步驟(a)，使樣品和包括根據(jù)權(quán)利要求1所述的化合物或鹽的試劑在允許該試劑和MCH受體相結(jié)合的條件下接觸；以及(b)檢測與MCH受體相結(jié)合的試劑的量，從而測定樣品中是否存在MCH受體。
62.根據(jù)權(quán)利要求61所述的方法，其中所述的試劑包括根據(jù)權(quán)利要求60所述的被放射性標(biāo)記的化合物，其中的檢測步驟包括(i)將未結(jié)合的試劑與已結(jié)合的試劑分離；以及(ii)確定樣品中已結(jié)合的試劑的量。
63.根據(jù)權(quán)利要求62所述的方法，其中所述的樣品是組織切片樣品。
64.權(quán)利要求1所述的化合物在制備治療進(jìn)食失調(diào)，性失調(diào)，肥胖癥，糖尿病，心臟病或中風(fēng)的藥物中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明提供了黑色素濃集激素受體的配體(特別是1－芐基－4－芳基哌嗪，1－芐基－4－芳基－哌啶和相關(guān)的化合物)，其能調(diào)節(jié)MCH受體(receptir)的活性。在體內(nèi)或體外，此類配體可用于對MCH結(jié)合到MCH受體上進(jìn)行調(diào)節(jié)，特別用于治療人類、馴養(yǎng)的陪伴型動物和牲畜中的多種代謝，進(jìn)食以及性疾病。本發(fā)明還提供了治療此類疾病的藥物組合物和方法，以及采用此類配體檢測MCH受體的方法(例如受體定位研究法)。
文檔編號A61P3/04GK1703401SQ02814733
公開日2005年11月30日 申請日期2002年5月21日 優(yōu)先權(quán)日2001年5月22日
發(fā)明者艾倫·哈奇森, 約翰·彼得森, 達(dá)里奧·多勒, 琳達(dá)·M·古斯塔夫松, 蒂莫西·考德威爾, 尹泰永, 華萊士·普林格爾, 拉賈戈帕爾·巴克薩瓦切拉姆, 沈依萍, 謝里爾·斯滕斯特拉, 尹華, 羅伯特·德西蒙, 何曉淑 申請人:神經(jīng)原公司