專利名稱：粉末制劑及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及利用載體的粉末制劑，更特別地，涉及通常難以制劑化的肽或蛋白質(zhì)的粉末制劑，可用作良好的吸入制劑。另外，得到的制劑制劑學(xué)上容易處理，并且因分散性和流動(dòng)性提高而可以保持恒定的藥劑含量。
本發(fā)明還涉及利用包括低吸濕性、低附著性的化合物赤蘚醇和/或山梨醇的糖醇作為載體的粉末制劑。
背景技術(shù)：
吸入療法是利用經(jīng)呼吸器的藥劑的方法，用于疾病診斷、經(jīng)支氣管全身給藥、疾病預(yù)防、經(jīng)支氣管免疫減感療法、其它領(lǐng)域以及氣道疾病的治療。但是，上述任一種情況下，都沒有充分考查確定該療法的適用性的方法，并且希望開發(fā)解決這種需要的吸入劑。當(dāng)作為目標(biāo)療法應(yīng)用時(shí)，不僅應(yīng)根據(jù)對疾病的有效性，而且還應(yīng)根據(jù)藥劑粒子的產(chǎn)生方法、藥劑粒子到達(dá)的部位和這些因素與藥劑的基礎(chǔ)性質(zhì)的相關(guān)性來考慮選擇吸入劑的標(biāo)準(zhǔn)方法。目前，這種形式的藥劑廣泛應(yīng)用于霧化吸入療法。實(shí)際使用的藥劑的例子有支氣管擴(kuò)張劑、粘膜溶解劑、抗生素、抗過敏劑、類固醇藥劑、疫苗和生理鹽水。臨床使用這些藥劑時(shí)，吸入劑的作用部位、作用機(jī)理、組成、用法等被認(rèn)為是重要的因素。
近年來，在支氣管哮喘和慢性阻塞性肺病的治療中，干粉吸入劑(DPI)開始引入注目。吸入劑包括上述的使用定量噴霧式吸入器(MDI)的氣霧劑和使用噴霧器的藥劑。這些藥劑具有多種有益的性質(zhì)。例如，作為這些藥劑的目標(biāo)部位的肺具有幾乎與小腸一樣大的表面積，以及吸收后沒有“首過效應(yīng)”。一般的吸入劑的確認(rèn)性質(zhì)的例子為1)藥效迅速顯現(xiàn)，2)副作用逐漸減弱，3)小劑量的充分性，和4)首過效應(yīng)的避免。
如上所述，MDI被廣泛使用，并且仍然在深入研究，但是，它們不得不使用含氯氟烴作為噴射劑。因此，被指出存在環(huán)境問題。盡管為解決該問題已嘗試開發(fā)含氯氟烴的替代品，但開發(fā)DPI的嘗試更為積極，原因是DPI不需要含氯氟烴并且提供優(yōu)良的攜帶性。對于不穩(wěn)定的藥劑，由于必須將藥劑以溶解狀態(tài)保存在裝置中，所以噴霧器也被認(rèn)為不合適。因此，考慮到長期穩(wěn)定性DPI是有用的，因?yàn)樗巹┛梢栽谄渲蟹€(wěn)定保存。
DPI根據(jù)包裝形式分為膠囊型、泡罩型、貯庫型(reservoir)等。使用DPI給藥時(shí)，為取出包在其中的藥劑，通常是通過裝置的操作在膠囊等上設(shè)置吸入孔，通過吸入操作釋放藥劑，然后將它們給用于支氣管、肺或其它部位。
關(guān)于DPI，在患者吸入的藥物粒子的粒徑與藥物在氣道上的沉積之間存在密切關(guān)系(Pharmacia(1997)，33卷，No.6，98-102)。還確認(rèn)了空氣動(dòng)力學(xué)相關(guān)性，即足以沉積在支氣管和肺上的藥物粒子的粒徑。一般，已知可以到達(dá)支氣管和肺泡的部位的藥物粒子的空氣動(dòng)力學(xué)最佳粒徑為約1μm-6μm(Int.J.Pharm.(1994)101，1-13)。
數(shù)μm大小的粒子到達(dá)肺泡，在那里它們通過肺粘膜被有效吸收，然后移動(dòng)到血液中。因此，當(dāng)期待全身作用時(shí)，粒徑特別重要。但是，當(dāng)粒徑減小時(shí)，由于多種因素粒子更可能發(fā)生凝集。這造成粉末的流動(dòng)性惡化，并產(chǎn)生對于制備時(shí)的填充精度和操作性能的低下的擔(dān)心。另外，可以設(shè)想給藥時(shí)粒子附著到裝置或膠囊內(nèi)部。
近來，在粉末制劑的劑型設(shè)計(jì)中，經(jīng)常使用利用載體的制劑。也就是說，用噴射磨機(jī)或多種其它常規(guī)技術(shù)將含有藥劑的組合物微粉化，并將其與載體混合而形成粒徑較大的粒子群。這改善了例如填充入膠囊時(shí)的流動(dòng)性和操作性能。眾所周知的方法的具體例子是將作為載體的粗粒子如乳糖與微粉化的藥劑混合。這之所以可以實(shí)現(xiàn)，是因?yàn)槲⒎刍乃巹┩ㄟ^分子間相互作用吸附在乳糖表面上這一行為可以削弱這些藥劑的凝聚力，并且可以總體上增大粒徑。這增強(qiáng)了制劑的流動(dòng)性。
其它方法包括藥物的造粒、表面改性。例如，在“軟質(zhì)小球狀藥物及其配制方法”(soft-pellet medicaments and processes for formulationthereof)(WO 99/27911)中提出了通過藥物造粒改進(jìn)流動(dòng)性。
與軟質(zhì)小球狀藥物不同，從制劑的化學(xué)性質(zhì)考慮，使用載體的劑型需要均勻的藥物分布。有一些藥物，不論是天然品還是合成品，觀察到被稱為“自凝集”的現(xiàn)象。因此，經(jīng)常難以將藥物與載體均勻混合。
另外，肽和蛋白質(zhì)一般具有極高的吸濕性，當(dāng)將其長時(shí)間放置時(shí)，或根據(jù)化合物類型即使短時(shí)間放置時(shí)，許多肽和蛋白質(zhì)發(fā)生潮解。很容易推測吸濕顯著影響制劑特性。當(dāng)生產(chǎn)制劑時(shí)，吸濕也顯著影響生產(chǎn)效率。因此，如何有效地將肽和蛋白質(zhì)微粉化并且將其保持為干燥粉末是一個(gè)重要因子。
如上所述，肽和蛋白質(zhì)所具有的很多因子使它們不適于DPI。但是，這些肽和蛋白質(zhì)包括很多有用的藥物，并且經(jīng)常以極小的劑量就可以提供顯著的藥理效果。因此，從醫(yī)療經(jīng)濟(jì)學(xué)角度考慮，期待一種有用的劑型設(shè)計(jì)，通過它可將肽和蛋白質(zhì)作成經(jīng)肺藥劑或吸入劑。
相反，實(shí)際上在醫(yī)療領(lǐng)域提供并經(jīng)常用于劑型設(shè)計(jì)的載體，一般容易吸濕。由于與藥劑的附著性高，故藥劑與載體間的解離速度低，并且由于制劑在裝置中沉積，使向肺移動(dòng)的速度降低。此時(shí)，制劑最可能沉積在咽喉，并且一些藥物味道極差。當(dāng)藥物對喉粘膜有刺激作用時(shí)，它們對病人增加了明顯的負(fù)擔(dān)。另外，低的生物利用度導(dǎo)致制劑的給用量增加。這將進(jìn)一步增加病人的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。當(dāng)化合物如乳糖用作載體時(shí)，某些藥物在產(chǎn)生良好的氣霧劑方面存在困難，到達(dá)肺部的速度極低，并且不能避免沉積在咽喉。因此，該制劑開發(fā)對于解決上述問題仍然不充分。因此，從醫(yī)療經(jīng)濟(jì)學(xué)的角度考慮，需要可以解決這些各種問題的劑型設(shè)計(jì)。
本發(fā)明的一個(gè)目的是開發(fā)自凝集型藥物可以與載體均勻混合的劑型設(shè)計(jì)，以及極少量藥物可以與載體均勻混合的藥物形式。另一個(gè)目的是賦予新的給藥形式，它能夠保持各種在溶劑中不穩(wěn)定但很有用的藥物處于干燥狀態(tài)而對其無任何損害。另一個(gè)重要目的是在通過一些有關(guān)劑型的設(shè)計(jì)生產(chǎn)制劑時(shí)，可以維持好的生產(chǎn)效率。
本發(fā)明的再一個(gè)目的是開發(fā)載體與藥劑粒子容易解離，并且可以提高向支氣管和肺等粘膜組織的移動(dòng)速度的藥物形式。這可以防止藥物粒子在粘膜組織中積累，并抑制局部刺激。
發(fā)明的公開為達(dá)到上述目的我們進(jìn)行了認(rèn)真而細(xì)致的研究。結(jié)果，通過在溶液中或空氣動(dòng)力學(xué)粉碎機(jī)(aerodynamic mill)中將合適的賦形劑與藥物混合，使用噴射粉碎機(jī)等粉碎機(jī)制備具有目標(biāo)粒徑的藥物后，將得到的藥物與載體混合，我們成功地得到了極為均勻的制劑。由此完成了本發(fā)明。另外，通過使用乳糖或赤蘚醇作為賦形劑，我們成功地顯著提高了溶解性。這種劑型也可以用作經(jīng)肺藥劑、吸入劑、以及粉狀經(jīng)鼻制劑。
另外，通過混合低吸濕性及低附著性化合物如赤蘚醇作為載體，我們成功地防止了藥物與載體間的強(qiáng)結(jié)合。此時(shí)，通過使用赤蘚醇作為賦形劑，我們進(jìn)一步得到了疊加效果。
具體地，本發(fā)明提供以下(1)-(16)。
(1)一種粉末制劑，通過將含有粉末狀藥劑和賦形劑、平均粒徑不超過20μm的微細(xì)粒子與具有空氣動(dòng)力學(xué)容許的粒徑的載體混合而得到。
(2)根據(jù)上述(1)的粉末制劑，其中藥劑能夠通過分子間相互作用自凝集。
(3)根據(jù)上述(1)的粉末制劑，其中藥劑具有吸濕性和/或潮解性。
(4)根據(jù)上述(1)-(3)任一項(xiàng)的粉末制劑，其中藥劑為肽或蛋白質(zhì)。
(5)根據(jù)上述(1)-(4)任一項(xiàng)的粉末制劑，其中藥劑包封在脂質(zhì)層中。
(6)根據(jù)上述(1)-(5)任一項(xiàng)的粉末制劑，其中賦形劑容易溶于水。
(7)根據(jù)上述(6)的粉末制劑，其中賦形劑為赤蘚醇。
(8)一種粉末制劑，通過將含有藥劑的微細(xì)粒子與具有空氣動(dòng)力學(xué)容許的粒徑的作為載體的糖醇混合而得到。
(9)根據(jù)上述(8)的粉末制劑，其中糖醇為赤蘚醇和/或山梨醇。
(10)根據(jù)上述(1)-(9)任一項(xiàng)的粉末制劑，其中粉末藥劑與賦形劑的比例在1∶5000至10∶1的范圍內(nèi)。
(11)根據(jù)上述(1)-(10)任一項(xiàng)的粉末制劑，其中微細(xì)粒子與載體的比例在1∶100至10∶1的范圍內(nèi)。
(12)根據(jù)上述(1)-(11)任一項(xiàng)的粉末制劑，其中載體的粒徑在10μm-200μm的范圍內(nèi)。
(13)制備粉末制劑的方法，包括下列步驟將粉末狀藥劑溶解或懸浮在賦形劑的溶液中；將所得的溶液或懸浮液進(jìn)行噴霧干燥從而制備微細(xì)粒子制劑或?qū)⑼ㄟ^凍干溶液或懸浮液得到的干燥品進(jìn)行粉碎；和將干燥品與具有空氣動(dòng)力學(xué)容許的粒徑的載體混合。
(14)制備粉末制劑的方法，包括下列步驟使用空氣動(dòng)力學(xué)粉碎機(jī)，同時(shí)粉碎、混合賦形劑和粉末狀藥劑；和將所得的產(chǎn)物與具有空氣動(dòng)力學(xué)容許的粒徑的載體混合。
(15)根據(jù)上述(13)-(14)的制備粉末制劑的方法，其中藥劑能夠通過分子間相互作用自凝集。
(16)根據(jù)上述(13)-(15)任一項(xiàng)的制備粉末制劑的方法，其中載體的平均粒徑不小于10μm。
本說明書包括作為本申請優(yōu)先權(quán)基礎(chǔ)的日本專利申請2000-362704號(hào)、2001-88337號(hào)、及2001-364325號(hào)的說明書和/或附圖中記載的部分或全部內(nèi)容。
附圖簡述

圖1顯示僅含有與載體混合前的乳糖的微細(xì)粒子的粒度分布。
圖2顯示含有與載體混合前的胰高血糖素和乳糖的微細(xì)粒子的粒度分布。
圖3顯示僅載體(Pharmatose 325M)的粒度分布。
圖4顯示微細(xì)粒子與載體(Pharmatose 325M)混合后的復(fù)合體的粒度分布。
圖5顯示通過HPLC測定的各試樣的胰高血糖素峰面積。
圖6顯示微粉化的赤蘚醇與乳糖載體的混合物的階式撞擊取樣器分析結(jié)果。
圖7顯示微粉化的甘露醇與乳糖載體的混合物的階式撞擊取樣器分析結(jié)果。
圖8顯示微粉化的乳糖與乳糖載體的混合物的階式撞擊取樣器分析結(jié)果。
圖9顯示經(jīng)肺給用胰高血糖素-DPI時(shí)血糖值的變化。
(a)與給用前相比，給用沒有包封在脂質(zhì)體中的胰高血糖素-DPI后(15分鐘)的血糖值上升率；(b)與給用前相比，給用包封在脂質(zhì)體中的胰高血糖素-DPI后(15分鐘)的血糖值上升率；
(c)沒有包封在脂質(zhì)體中的胰高血糖素-DPI與包封在脂質(zhì)體中的胰高血糖素-DPI的血糖值變化的比較。
圖10顯示胰高血糖素制劑的階式撞擊取樣器分析結(jié)果。
序列表的說明序列號(hào)1表示本發(fā)明中使用的VIP衍生物的序列。
本發(fā)明的實(shí)施形式以下更詳細(xì)地說明本發(fā)明。
藥劑本發(fā)明中使用的藥劑沒有特別的限制，包括用作或?qū)碛米魉幤返哪切Ｋ巹┌梢苑勰畹玫降哪切?、以及可以通過粉碎或其它處理加工成粉末狀的那些?？捎糜诒景l(fā)明的粉末狀藥劑的形狀及粒徑等沒有特別的限制。當(dāng)藥劑具有通過分子間相互作用自凝集的性質(zhì)、吸濕性、潮解性時(shí)，可以特別有效地使用本發(fā)明。具有通過分子間相互作用自凝集性質(zhì)的藥劑的例子包括胰高血糖素(J.Biol.Chem.(1984)259，7031-7)、FGF(Biochem.J.(1999)341，613-20)、生長激素(Biochemistry(1993)32，1555-62)、內(nèi)皮素(endothelin)(Pept.Res.(1992)5，97-101)、降鈣素(Biochem.Biophys.Res.Commun.(1998)245，344-8)、胰島素(Int.J.Pharm.(1999)191，51-64)、和胰高血糖素樣肽-1(Pharmaceutical Research(1998)15，254-62)。在本發(fā)明中，藥劑優(yōu)選由于劑量極小而對于制劑而言難以均勻混合的那些。本發(fā)明可以應(yīng)用于但不限于，例如，一系列血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑、LH-RH、ACTH、蛙皮素、CCK、鮭魚降鈣素、EGF、G-CSF、GM-CSF、催產(chǎn)素、神經(jīng)降壓素、饑餓激素(ghrelin)、PTH、PTHrP、生長激素釋放抑制因子、VIP、PACAP、后葉加壓素、腦啡肽、內(nèi)啡肽、強(qiáng)啡肽、物質(zhì)P、β-NGF、TGF-β、促紅細(xì)胞生成素、干擾素-α、β或γ、白介素、腫瘤壞死因子、GHRF、c-GRP、ANP、CRF、分泌素、免疫抑制劑如環(huán)孢菌素、α-MSH、和一系列絲氨酸蛋白酶如凝血酶和血纖維蛋白溶酶或含有它們的激動(dòng)劑和拮抗劑的衍生物。本發(fā)明的制劑也可以應(yīng)用于治療肺病，例如肺癌或肺氣腫時(shí)的直接給藥。
盡管肽和蛋白質(zhì)很昂貴，但已確認(rèn)，它們在特定條件如高濃度條件下相互凝集。例如，上述的降鈣素在濃度為50mg/mL或更高濃度時(shí)發(fā)生自凝集。在肽和蛋白質(zhì)化合物的群中觀察到氫鍵、疏水作用、以及其它相互作用。指出了在生產(chǎn)時(shí)產(chǎn)生物理化學(xué)變性如凝集或沉降的可能性。但是，根據(jù)本發(fā)明，這些問題可預(yù)先防止。
另外，本發(fā)明的制劑設(shè)計(jì)對于例如不希望全身作用的類固醇或β-刺激劑、以及希望支氣管局部作用的藥物等也是有效的。該制劑設(shè)計(jì)作為避免首過效應(yīng)且不致痛的簡易給藥方法，可用于希望家庭治療的多種藥物。該制劑設(shè)計(jì)也可廣泛用于非肽和非蛋白質(zhì)藥物。具體例子包括消炎類固醇或非類固醇消炎藥、鎮(zhèn)痛消炎劑、鎮(zhèn)靜劑、抑郁癥治療劑、鎮(zhèn)咳去痰藥、抗組胺藥物、抗過敏藥物、止吐藥、睡眠誘導(dǎo)劑、維生素劑、性類固醇激素、抗癌藥物、抗心律失常藥、高血壓藥、抗不安藥、精神治療藥物、抗?jié)兯?、?qiáng)心藥、鎮(zhèn)痛藥、支氣管擴(kuò)張藥、肥胖治療藥、抗血小板凝結(jié)藥、抗糖尿病藥、肌肉松弛藥、偏頭痛藥及抗風(fēng)濕藥。這些可以單獨(dú)使用或結(jié)合使用。
賦形劑本發(fā)明中，將藥劑與賦形劑一起使用，從而形成含有藥劑的微細(xì)粒子經(jīng)常是有利的。這是因?yàn)楫?dāng)制作藥物含量極低的制劑時(shí)，難以將載體與微細(xì)粒子均勻混合。另外，抑制由藥劑間的相互作用引起的凝集也是可能的，但是當(dāng)制劑含有較大量藥劑并且凝集性低時(shí)這是不可行的。
本說明書中使用的術(shù)語“微細(xì)粒子”指微粉化的藥劑或藥劑與賦形劑的混合物的微粉化物。
通常，加入賦形劑的目的是散劑、片劑等固形制劑的增量、稀釋、填充或成形，賦形劑顯著影響活性化合物的釋放特性。因此，應(yīng)注意賦形劑的選擇或變更。在本發(fā)明中，賦形劑有效增加藥劑的溶解性和/或降低自凝集能力。因此，優(yōu)選的賦形劑容易溶解于水。但是，顯著吸濕的賦形劑在本制劑的性質(zhì)上是不優(yōu)選的。在本發(fā)明，賦形劑的例子有淀粉、乳糖、葡萄糖、蔗糖、結(jié)晶纖維素、硫酸鈣、碳酸鈣、滑石、氧化鈦等本領(lǐng)域通常使用的賦形劑?；蛘?，生物學(xué)惰性、且被期待有某種程度代謝的物質(zhì)也可使用。另外，可以使用赤蘚醇、甘露醇、山梨醇、海藻糖、蔗糖、甲基纖維素、羥丙基纖維素、羥丙基甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉(sodium carmellose)、普魯蘭多糖(pullulan)、糊精、阿拉伯樹膠、瓊脂、明膠、黃耆膠、海藻酸鈉、聚乙烯基吡咯烷酮、聚乙烯醇、脂肪酸如硬脂酸或其鹽、蠟等。本發(fā)明中特別優(yōu)選的賦形劑為乳糖和赤蘚醇。
當(dāng)赤蘚醇用作本發(fā)明的粉末制劑中的賦形劑時(shí)，含有藥劑的微細(xì)粒子與載體的解離更加容易。這考慮是可以通過由赤蘚醇的低附著性改善微細(xì)粒子整體的性質(zhì)而得到的有用效果。
在本發(fā)明的制劑中，上述粉末狀藥劑與賦形劑的比例以重量比計(jì)優(yōu)選在1∶5000至10∶1的范圍內(nèi)。如果藥劑量超過該范圍的上限，可能破壞含量的均勻性。如果增加賦形劑，某些種類的藥劑可能失去它們的藥理活性。
相反，近年來，作為增加DPI中的吸收率的技術(shù)，公知有加入增強(qiáng)劑的技術(shù)、或?qū)⑺幬锓馊胫|(zhì)層中制備制劑的方法。已知的增強(qiáng)劑的例子是有機(jī)酸如檸檬酸和癸酸、酶抑制劑如桿菌肽、和NO發(fā)生劑(Drug Delivery System(2001)16，297；Drug Delivery System(2001)16，299)。作為脂質(zhì)體的基質(zhì)，高分子量聚合物如殼聚糖是公知的。使用這些物質(zhì)的主要目的是改善藥劑的膜透過性，并且到達(dá)目標(biāo)組織(肺或支氣管)的制劑的比率未必增加。盡管吸收率顯著增加，但如果藥劑不能到達(dá)目標(biāo)組織，則臨床應(yīng)用未必可能。因此，將該制備制劑的方法應(yīng)用于為某目的而進(jìn)行設(shè)計(jì)的劑型設(shè)計(jì)可能獲得進(jìn)一步良好的制劑特性。
載體在本發(fā)明中，載體用來避免在給用粉末制劑前藥劑相互凝集。給藥時(shí)，載體用于在使用吸入器進(jìn)行吸入操作時(shí)有效解離藥劑并提高吸收效率。當(dāng)在設(shè)計(jì)DPI制劑時(shí)使用載體時(shí)，優(yōu)選藥劑從膠囊或裝置中確定地放出，并從載體表面高幾率地分離。因此，需要充分考慮后進(jìn)行劑型設(shè)計(jì)。使用載體時(shí)，制劑的流動(dòng)性、藥物凝集的預(yù)防、劑量的增減與否等是重要的。因此，對于選擇載體主要關(guān)心的是處理時(shí)的容易性和作業(yè)性，當(dāng)然不用說毒性和物理化學(xué)穩(wěn)定性。作為對這些問題的解決方案，具有確定的穩(wěn)定性、中性且反應(yīng)性低、有點(diǎn)甜的乳糖在很多方面有用，其作為DPI用的載體的有用性已經(jīng)確認(rèn)(Int.J.Pharm.(1998)172，179-188)。除乳糖外，可用于本發(fā)明中的載體可以舉出糖類如葡萄糖、果糖、甘露醇、蔗糖、麥芽糖和葡聚糖，以及一般的賦形劑如硫酸鈣、碳酸鈣、滑石和氧化鈦，但對此沒有特別限制。
在本發(fā)明中，可以使用低吸濕性和低附著性的化合物如包括赤蘚醇或山梨醇的糖醇作為載體。其它糖醇的例子包括木糖醇、甘露醇、麥芽糖醇、還原異麥芽酮糖(paratinose)和乳糖醇，但本發(fā)明不限于此。
在本發(fā)明中，特別優(yōu)選的載體是赤蘚醇。赤蘚醇可以非常容易地與藥劑解離。這可以得到向目標(biāo)組織的高移動(dòng)率，并且可以減少在咽喉的積累。因此，可以減少由藥物的味道帶給使用者的負(fù)擔(dān)。但是，在該劑型設(shè)計(jì)中，載體殘留在咽喉。此時(shí)，由此引起的異物感是擔(dān)心的問題。赤蘚醇的溶解性極高，這種效果可用于口腔內(nèi)崩解劑(日本未審專利公開平09-316006)。這可以防止或極快地消除殘留在咽喉的載體的不適感。為進(jìn)一步增加制劑向組織的移動(dòng)率，相對于其它形式的制劑中的藥物含量，可以降低藥物含量。這可使制備成本降低，并減少病人的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。本化合物的甜度在許多糖醇中是最高的，即當(dāng)蔗糖的甜度定為100時(shí)，赤蘚醇的甜度為75。這可以改善沉積在咽喉的制劑的味道。通過赤蘚醇的甜度及本發(fā)明確認(rèn)的苦味掩蔽效果(日本未審專利公開平10-306038)，可以進(jìn)一步實(shí)現(xiàn)味道的改善。另外，不引起美拉德反應(yīng)(Maillard reaction)的本發(fā)明化合物被認(rèn)為防止著色等的制劑劣化，且減少制劑外觀的損壞。吸入劑的開發(fā)經(jīng)常是為了與醫(yī)院內(nèi)治療相對照的家庭治療。由于這樣的狀況，其對于糖尿病治療劑的應(yīng)用被考慮到。赤蘚醇的能量值(kcal/100g)幾乎為0，對血糖值的影響極小。因此，赤蘚醇可長時(shí)間連續(xù)用于治療糖尿病。當(dāng)給用吸入劑時(shí)，病人有時(shí)對他們實(shí)際上吸入了制劑與否心存不安。但是，當(dāng)吸入赤蘚醇時(shí)，明顯確認(rèn)有冷涼感。通過這種冷涼感，可確認(rèn)制劑吸入的效果。
使用糖醇作為載體的制劑被認(rèn)為比使用乳糖糖作為載體的那些制劑具有更低的吸濕性，并且能夠不受氣候影響地應(yīng)用于臨床。
本發(fā)明的粉末狀制劑使用吸入器給用。因此，載體具有空氣動(dòng)力學(xué)容許的粒徑。具體地，載體粒徑在10μm-200μm范圍內(nèi)。
當(dāng)劑型設(shè)計(jì)中只想要作為載體的作用時(shí)，已知粒徑變大就足夠了。也已知如果粒徑變大，載體會(huì)留在咽喉或口腔中。因此，當(dāng)載體本身為生物學(xué)惰性，并且期望避免載體達(dá)到肺部時(shí)，充分的粒徑至少為10μm。當(dāng)進(jìn)一步期望最佳條件時(shí)，優(yōu)選考慮例如主成分和與之混合的賦形劑的相容性來選擇原材料。如果不存在大問題，優(yōu)選將載體的材料選擇為與賦形劑同樣的材料。
根據(jù)本發(fā)明，粒子與載體的比例優(yōu)選在1∶100至10∶1的范圍內(nèi)。如果粒子的量超過該范圍的上限，含量的均勻性可能被破壞。如果載體增加，某些種類的藥劑可能會(huì)失去它們的藥理活性。
藥劑與賦形劑的混合、粉碎步驟在制備含有藥劑的微細(xì)粒子時(shí)，應(yīng)首先將藥劑或藥劑與賦形劑進(jìn)行微粉化。當(dāng)制劑中含有藥劑與賦形劑時(shí)，制備過程包括將藥劑與賦形劑混合、粉碎的步驟。粉碎按下述方法進(jìn)行。例如，將藥劑或藥劑與賦形劑的溶液或懸浮液凍干。然后粉碎得到的凍干品?；蛘?，可以使用空氣動(dòng)力學(xué)粉碎機(jī)將藥劑或?qū)⑺巹┡c賦形劑直接混合和粉碎。
制備本發(fā)明的微細(xì)粒子的方法沒有特別的限制，可以適當(dāng)使用本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的任何常規(guī)方法。這樣的方法的例子包括將溶液轉(zhuǎn)變成粉末的噴霧干燥法和使用超臨界液體的方法。前者方法是常規(guī)技術(shù)，后者方法是近來特別引人注目的一種較新概念。使用超臨界液體制備藥物粒子的方法的例子包括使用逆溶劑沉淀(PCA)法、超臨界液體的快速膨脹(RESS)法和氣體逆溶劑(GAS)法。其中，PCA法近來開始引人注目。在該法中，將藥物溶解在二甲亞砜(DMSO)中，然后噴霧到超臨界CO2中，以此制備微粒子粉末。該法也適用于蛋白質(zhì)。例如，Winters等利用PCA法制備了溶菌酶、胰蛋白酶和胰島素的微粒子粉末(15μm)(J.Pharm.Sci.(1996)85，586)。
本發(fā)明中使用的用于制備微細(xì)粒子的方法可以根據(jù)，例如，藥劑及賦形劑的種類或粒子的最終大小適當(dāng)確定?；衔锏慕Y(jié)晶狀態(tài)和附著性、分散性等的制劑特性經(jīng)?；ハ嚓P(guān)聯(lián)。因此，在該步中希望選擇后者的處理方法。應(yīng)該注意，當(dāng)使用赤蘚醇時(shí)，由于化合物的極高的晶體取向，因此可以通過任何方法得到良好的粉碎混合物。
在本發(fā)明中，可以通過一般的干式粉碎法粉碎藥劑或藥劑與賦形劑。使用空氣動(dòng)力學(xué)粉碎機(jī)特別優(yōu)選。具體地，實(shí)驗(yàn)中通常使用有效粉碎少量藥劑或藥劑與賦形劑的裝置如乳缽或球磨機(jī)作為一般的干式粉碎機(jī)。已知的球磨機(jī)的粒子包括旋轉(zhuǎn)球磨機(jī)、離心球磨機(jī)、振動(dòng)球磨機(jī)、行星式球磨機(jī)。這些磨機(jī)可以基于磨碎、旋轉(zhuǎn)、振動(dòng)或沖擊的原理將藥劑或?qū)⑺巹┖唾x形劑粉碎。在工業(yè)上經(jīng)常使用介質(zhì)攪拌型磨機(jī)、高速旋轉(zhuǎn)磨碎和沖擊磨機(jī)、以及噴射磨機(jī)來有效粉碎大量原料。高速旋轉(zhuǎn)磨碎式磨機(jī)包括盤磨機(jī)和輥磨機(jī)。高速旋轉(zhuǎn)沖擊磨機(jī)包括除那些通過旋轉(zhuǎn)沖擊進(jìn)行粉碎的磨機(jī)如切削磨機(jī)(切碎機(jī))、錘磨機(jī)(霧化器)、旋轉(zhuǎn)磨機(jī)和篩磨機(jī)以外的那些通過剪切力進(jìn)行粉碎的磨機(jī)。許多噴射磨機(jī)主要通過沖擊進(jìn)行粉碎。它的例子包括最傳統(tǒng)的粒子-粒子沖擊型、粒子-沖擊板沖擊型、和噴嘴-吸入型(吹出型)磨機(jī)。
在粉碎步驟中，將藥劑或?qū)⑺巹┡c賦形劑微粉化成平均粒徑不超過20μm的微細(xì)粒子。具備了該粒徑，微細(xì)粒子就可以在給藥后容易地與載體分離，并且可以到達(dá)目標(biāo)部位如支氣管或肺泡。
混合載體與微細(xì)粒子的步驟然后，在混合、粉碎步驟中得到的微細(xì)粒子與載體混合，形成給藥前保持穩(wěn)定的復(fù)合物。
可以使用常規(guī)的混合機(jī)將載體與微細(xì)粒子混合?；旌蠙C(jī)的主要類型是間歇式和連續(xù)式。間歇式混合機(jī)進(jìn)一步分為兩類，即旋轉(zhuǎn)式和固定式。旋轉(zhuǎn)式包括水平圓筒型混合機(jī)、V型混合機(jī)、二重圓錐型混合機(jī)、和立方體型混合機(jī)。固定式包括螺旋(垂直、水平)混合機(jī)、旋轉(zhuǎn)螺旋(垂直、水平)混合機(jī)、和帶式(垂直、水平)混合機(jī)。連續(xù)式也分為兩類，即旋轉(zhuǎn)式和固定式。旋轉(zhuǎn)式包括水平圓筒型混合機(jī)和水平圓錐型混合機(jī)。固定式包括螺旋(垂直、水平)混合機(jī)、帶式(垂直、水平)混合機(jī)、和旋轉(zhuǎn)圓盤型混合機(jī)。另外，可以通過使用空氣動(dòng)力學(xué)粉碎機(jī)如介質(zhì)攪拌型磨機(jī)、高速旋轉(zhuǎn)磨碎和沖擊磨機(jī)、以及噴射磨機(jī)的混合法，或通過在尼龍袋或具有以其為標(biāo)準(zhǔn)的性質(zhì)的袋中進(jìn)行攪拌，制備均勻混合的制劑。
吸入器上述步驟中得到的本發(fā)明的粉末狀制劑可以通過經(jīng)肺給用、經(jīng)鼻給用等經(jīng)粘膜給用方式向被檢者給藥。更具體地，當(dāng)給用路徑為經(jīng)肺給用時(shí)，該領(lǐng)域中使用的任何吸入器可用于給藥。
可以使用的吸入器的例子包括但不限于吸入經(jīng)肺用設(shè)備和定量噴霧器如Spinhaler、E-haler、FlowCaps、Jet-haler、Disc-haler、Rotor-haler、Inspir-Ease和Inhalation Aid。
實(shí)施例以下將參照實(shí)施例更具體地說明本發(fā)明，但本發(fā)明不限于此。
賦形劑粉末的制作在本發(fā)明中可以用作賦形劑的化合物中，在下述條件下將乳糖、甘露醇和赤蘚醇微粉化。
(粉碎條件)使用的設(shè)備A-O-Jet Mill(Seishin Enterprise Co.，Ltd.)原料供給方法自動(dòng)喂料機(jī)供給空氣壓力6.0kg/cm2G粉碎空氣壓力6.5kg/cm2G集塵方法集塵袋(聚乙烯)收率如下所示。
乳糖32.0％甘露醇 50.5％赤蘚醇 75.7％這些結(jié)果說明在收率方面糖醇比乳糖更適合用作本發(fā)明的賦形劑。
胰高血糖素粉末的制作使用的設(shè)備Spiral Jet Mill 50 AS(Hosokawa Micron Corporation)
原料供給供給方法手動(dòng)加料供給空氣壓力4.7kg/cm2G噴嘴直徑0.9mm噴嘴位置最后面粉碎條件粉碎空氣壓力 4.5kg/cm2G噴嘴環(huán)直徑 0.9mm噴嘴數(shù) 4個(gè)噴嘴入射角 30度集塵方法集塵袋(聚乙烯)根據(jù)上面的方法，將日本藥典所列的乳糖(吉田制藥)和1％胰高血糖素-乳糖粉末凍干品各約10g進(jìn)行粉碎。當(dāng)處理特定量，即10g時(shí)，各物質(zhì)的收率幾乎與表1所示的相同，在通過目視進(jìn)行性狀確認(rèn)時(shí)，它們具有幾乎相同的外觀。根據(jù)目視，曾經(jīng)引起擔(dān)心的胰高血糖素的凝集問題看來已經(jīng)解決，確認(rèn)了胰高血糖素是表現(xiàn)出與乳糖幾乎相同性狀的粉末。另外，使用激光衍射/散射式粒度分布分析儀(日機(jī)裝公司制)評價(jià)了兩種物質(zhì)的粒度分布。如圖1和2所示，它們在分布范圍方面有一些差別，但是峰位于約3μm，并且基本上100％的粉末具有不超過10μm的粒徑。
表1(乳糖的粉碎)(1％胰高血糖素-乳糖粉末的粉碎)供給量 101.0g 供給量 10.0g回收的粉末 96.8g 回收的粉末 9.4g收率95.8％ 收率94.0％[實(shí)施例3]少量胰高血糖素粉末的制備按照與實(shí)施例1同樣的方式，分別將2g 1％胰高血糖素-乳糖粉末和1％胰高血糖素-赤蘚醇粉末進(jìn)行粉碎。收率如表2所示。從這些結(jié)果明顯可以看出，當(dāng)制備少量粉末時(shí)，許多降低收率的因素如吸附和吸濕以更可見的方式出現(xiàn)。因此，使用赤蘚醇的混合物的收率變得更高。根據(jù)目視，曾經(jīng)引起擔(dān)心的胰高血糖素的凝集問題看來已經(jīng)解決，確認(rèn)了這些粉末表現(xiàn)出與實(shí)施例1制備的賦形劑微細(xì)粒子幾乎相同的性狀。
表2
醋酸布舍瑞林(buserelin acetate)粉末的制作按照與實(shí)施例1同樣的方式，將醋酸布舍瑞林(Itoham FoodsInc.)、醋酸布舍瑞林-乳糖混合物(570倍稀釋的粉末)、醋酸布舍瑞林-甘露醇混合物(570倍稀釋的粉末)、以及醋酸布舍瑞林-赤蘚醇混合物(570倍稀釋的粉末)進(jìn)行微粉化。
收率如下所示。
僅醋酸布舍瑞林 由于潮解未確認(rèn)醋酸布舍瑞林-乳糖混合物27.0％醋酸布舍瑞林-甘露醇混合物 41.7％醋酸布舍瑞林-赤蘚醇混合物 71.7％從這些結(jié)果明顯可以看出，僅粉碎肽是非常難的。另外，證明了加入賦形劑如乳糖或赤蘚醇的效果。與乳糖的混合物具有極強(qiáng)的附著性，因此從袋濾器中回收有時(shí)是困難的。相反，與甘露醇或赤蘚醇的混合物附著性極低，它們的回收率顯著增加。
含有高濃度胰高血糖素的粉末的制作在下面的條件下，使用如實(shí)施例1所述的噴射磨機(jī)，將胰高血糖素與赤蘚醇的混合物(3倍、5倍、10倍和20倍稀釋的粉末)微粉化。具體地，以下表所示的比例將胰高血糖素與赤蘚醇混合，并在如實(shí)施例1規(guī)定的條件下，使用噴射磨將其粉碎成微細(xì)粒子。由此，從粉體捕集用袋濾器回收微粉化的胰高血糖素和赤蘚醇。所有情況下回收率均為約30-40％。通過HPLC定量分析確認(rèn)了粉末中的胰高血糖素含量幾乎與理論值相等。該制備制劑的方法可以制作如此高濃度的肽制劑。
表3
血管活性腸肽(VIP)衍生物粉末的制作在下面的條件下，使用如實(shí)施例1所述的噴射磨機(jī)將VIP與赤蘚醇的混合物(400倍稀釋的粉末)微粉化。具體地，將日本專利公報(bào)(未審申請)平8-333276公開的VIP衍生物His-Ser-Asp-Ala-Val-Phe-Thr-Asp-Asn-Tyr-Arg-Leu-Arg-Arg-Gln-Met-Ala-Val-Arg-Arg-Tyr-Leu-Asn-Ser-Ile-Leu-Asn-Gly-Arg-Arg-NH2(序列號(hào)1)5mg與2g赤蘚醇適當(dāng)混合，然后在實(shí)施例1規(guī)定的條件下，使用噴射磨機(jī)將其粉碎成微細(xì)粒子。由此，從粉體捕集用袋濾器回收微粉化的VIP衍生物-赤蘚醇混合物，回收率約70％。通過HPLC定量分析確認(rèn)了粉末中VIP衍生物的含量幾乎與理論值相等。
胰島素粉末的制作在下面條件下，使用如實(shí)施例1所述的噴射磨機(jī)，將胰島素與赤蘚醇的混合物(20倍稀釋的粉末)微粉化。具體地，將100mg豬胰島素(Itoham Foods Inc.)與1.9g赤蘚醇適當(dāng)混合，然后在實(shí)施例1規(guī)定的條件下使用噴射磨機(jī)將其粉碎成微細(xì)粒子。由此，從粉體捕集用袋濾器回收微粉化的胰島素-赤蘚醇混合物，回收率約60％。通過HPLC定量分析確認(rèn)了粉末中胰島素的含量幾乎與理論值相等。
鮭魚降鈣素粉末的制作在下面條件下，使用如實(shí)施例1所述的噴射磨機(jī)，將鮭魚降鈣素與乳糖的混合物(200倍稀釋的粉末)及鮭魚降鈣素與赤蘚醇的混合物(200倍稀釋的粉末)微粉化。具體地，將15mg鮭魚降鈣素(ItohamFoods Inc.)與約3.0g乳糖或赤蘚醇適當(dāng)混合，然后在實(shí)施例1規(guī)定的條件下使用噴射磨機(jī)將其粉碎成微細(xì)粒子。由此，從粉體捕集用袋濾器回收鮭魚降鈣素的微粉化混合物，回收率分別為約70％(鮭魚降鈣素與乳糖的混合物)和約80％(鮭魚降鈣素與赤蘚醇的混合物)。通過HPLC定量分析確認(rèn)了粉末中鮭魚降鈣素的含量幾乎與理論值相等。
依降鈣素粉末的制作在下面條件下，使用如實(shí)施例1所述的噴射磨機(jī)，將依降鈣素與乳糖的混合物(200倍稀釋的粉末)及依降鈣素與赤蘚醇的混合物(200倍稀釋的粉末)微粉化。具體地，將15mg依降鈣素(Itoham Foods Inc.)與約3.0g乳糖或赤蘚醇適當(dāng)混合，然后在實(shí)施例1規(guī)定的條件下使用噴射磨機(jī)將其粉碎成微細(xì)粒子。由此，從粉體捕集用袋濾器回收微粉化的依降鈣素混合物，回收率約20％(依降鈣素與乳糖的混合物)和約70％(依降鈣素與赤蘚醇的混合物)。通過HPLC定量分析確認(rèn)了粉末中依降鈣素的含量幾乎與理論值相等。
人生長激素(GH)粉末的制作在下面條件下，使用如實(shí)施例1所述的噴射磨機(jī)，將人生長激素與赤蘚醇的混合物(50倍稀釋的粉末)微粉化。具體地，將30mg人生長激素混合物(10mg人生長激素、10mg人白蛋白、和10mg甘氨酸，中國江西進(jìn)出品有限公司)與約470mg赤蘚醇適當(dāng)混合，然后在實(shí)施例1規(guī)定的條件下使用噴射磨機(jī)將其粉碎成微細(xì)粒子。由此，從粉體捕集用袋濾器回收微粉化的人生長激素-赤蘚醇混合物，回收率約50％。通過HPLC定量分析確認(rèn)了粉末中人生長激素的含量幾乎與理論值相等。另外，同時(shí)確認(rèn)了其穩(wěn)定性。由此證明了該制備制劑的方法可以應(yīng)用于被認(rèn)為非常不穩(wěn)定且難以處理的高分子量化合物如人生長激素。
環(huán)孢菌素粉末的制作在下面條件下，使用如實(shí)施例1所述的噴射磨機(jī)，將環(huán)孢菌素與赤蘚醇的混合物(10倍稀釋的粉末)微粉化。具體地，將100mg環(huán)孢菌素A(Wako Pure Chemicals Industries，Ltd.)與約900mg赤蘚醇適當(dāng)混合，然后在實(shí)施例1規(guī)定的條件下使用噴射磨機(jī)將其粉碎成微細(xì)粒子。由此，從粉體捕集用袋濾器回收微粉化的環(huán)孢菌素-赤蘚醇混合物，回收率約60％。通過HPLC定量分析確認(rèn)了粉末中環(huán)孢菌素的含量幾乎與理論值相等。
含有檸檬酸的胰高血糖素粉末的制作在下面條件下，使用如實(shí)施例1所述的噴射磨機(jī)，將胰高血糖素與檸檬酸的混合物及胰高血糖素、檸檬酸和赤蘚醇的混合物微粉化。具體地，將80mg胰高血糖素(Itoham Foods Inc.)與80mg檸檬酸適當(dāng)混合?；蛘邔?0mg胰高血糖素與80mg檸檬酸和約640mg赤蘚醇適當(dāng)混合。然后在實(shí)施例1規(guī)定的條件下使用噴射磨機(jī)將其粉碎成微細(xì)粒子。胰高血糖素與檸檬酸的混合物的粉碎物迅速潮解，非常難以回收。相反，胰高血糖素、檸檬酸和赤蘚醇的混合物沒有因吸濕而潮解，并且極易處理。從粉體捕集用袋濾器進(jìn)行回收時(shí)的回收率為約40％。這說明即使含有潮解添加劑，本發(fā)明的制劑設(shè)計(jì)也是有用的。通過HPLC定量分析確認(rèn)了粉末中胰高血糖素的含量幾乎與理論值相等。
脂質(zhì)體包封的胰高血糖素的制作用0.1％三氟乙酸的水溶液將胰高血糖素(Itoham Foods Inc.)調(diào)制成10mg/mL，并將所得的溶液加入由L-α-二棕櫚酰磷脂酰膽堿、膽固醇和L-α-二棕櫚酰磷脂酰甘油構(gòu)成的干燥中空脂質(zhì)體(粒徑100-300nm，COATSOME EL系列，NOF Corp.)中。將產(chǎn)物振搖數(shù)分鐘后凍干(冷凍干燥機(jī)，Unitop HL，F(xiàn)reeze Mobile 25EL，Virtis)。凍干前取約200μL試樣并使用離心式少量超濾裝置Ultrafree-0.5(除去分子量10000以下的物質(zhì))進(jìn)行離心(12000×g，10分鐘)。對濾液中的胰高血糖素含量進(jìn)行定量，該量被確定為沒有包封在脂質(zhì)體內(nèi)的量。HPLC定量分析條件如下。
(HPLC條件)使用的柱子TSK gel ODS-120T(TOSO)檢測器RF-535(Shimadzu)激發(fā)波長 280nm熒光波長 346nm泵LC-10AD(Shimadzu)流動(dòng)相35％CH3CN(用0.1％TFA酸化)流動(dòng)相流速1.0mL/minHPLC定量的結(jié)果證明胰高血糖素在脂質(zhì)體中內(nèi)的包封率極高，為98％。
脂質(zhì)體包封的胰高血糖素粉末(1％胰高血糖素粉末)的制作將約800mg赤蘚醇與通過實(shí)施例13所述的方法得到的脂質(zhì)體包封的胰高血糖素約200mg適當(dāng)混合，并使用如實(shí)施例1所述的噴射磨機(jī)它們微粉化。從粉體捕集用袋濾器回收微粉化的脂質(zhì)體包封的胰高血糖素-赤蘚醇混合物，回收率約50％。所得的粉末流動(dòng)性高，從制劑特性上說是良好的粒子。通過HPLC定量分析確認(rèn)了粉末中胰高血糖素的含量幾乎與理論值相等。這說明該制備制劑的方法可以應(yīng)用于脂質(zhì)體制劑，并且可以在制備時(shí)藥物不發(fā)生潮解的情況下生產(chǎn)制劑。
粉末與載體的混合將實(shí)施例2得到的乳糖粉末和1％胰高血糖素-乳糖粉末各自在表4所述的條件下迅速與載體(Pharmatose 325M，DMV公司制，平均粒徑50±10μm)混合，并分別干燥、保存在50mL一次性管中。將此時(shí)通過目視得到的粉末性狀也記載在表4中。當(dāng)在載體中加入乳糖粉末和1％胰高血糖素-乳糖粉末時(shí)，它們具有許多共同的性狀，包括其流動(dòng)性。這說明胰高血糖素的不希望的性質(zhì)即自凝集可以被抑制。另一方面，未與載體混合的1％胰高血糖素-乳糖粉末的微粉化物在至少24小時(shí)后形成明顯的凝集體。
從這些結(jié)果明顯可以看出，本發(fā)明的粉末制劑因抑制了自凝集而非常適于給藥。
表4(乳糖)

(1％胰高血糖素-乳糖粉末)
載體與1％胰高血糖素粉碎物的混合物的粒度分布使用SK LASER MICRON SIZER LMS-300(Seishin Enterprise Co.，Ltd.)，考查了載體(Pharmatose 325M)自身及其與1％胰高血糖素粉碎物的混合物的粒度分布(圖3和4)。結(jié)果，如圖4所示，當(dāng)在2.0kg/cm2的壓力下使粉末分散時(shí)，載體與藥物明顯分離。另外，分離的1％胰高血糖素粉末沒有因自凝集而表現(xiàn)出粒徑增大。
從該結(jié)果明顯可以看出，本發(fā)明的粉末制劑不發(fā)生自凝集。給藥時(shí)，藥物容易與載體分離，只有含有藥劑的微細(xì)粒子到達(dá)目標(biāo)部位。
胰高血糖素含量的均勻性評價(jià)推測通過抑制胰高血糖素的自凝集，并且提高了其流動(dòng)性，與載體混合后的藥物含量均勻性得到了極大的提高。因此，從實(shí)施例16得到的粉末中隨機(jī)對藥物取樣，通過HPLC進(jìn)行定量分析，評價(jià)其均勻性。方法如下所示。
含有胰高血糖素的制劑的高效液相色譜法(HPLC)分析條件如下所示。
(HPLC分析條件)使用的柱子TOSO ODS-120T(TOSO)檢測器Jusco 870-UVUV檢測波長220nm流動(dòng)相流速1.0mL/min流動(dòng)相35％CH3CN水溶液(0.1％TFA酸化)泵Jusco 880-PU注射量50μL柱溫箱溫度40℃(方法)
對象試樣胰高血糖素粉末(DPG080700)與Pharmatose的混合物(混合比100％胰高血糖素-乳糖粉末∶載體＝1∶2)將該樣品(容量25mL)在一個(gè)50mL一次性管中基本三等分，并從各部分中隨機(jī)取樣三個(gè)各約10mg的樣品(試樣1-3)。用0.1N HCl將這些樣品調(diào)制成10mg/mL，并進(jìn)行RP-HPLC分析。然后比較各樣品中與胰高血糖素對應(yīng)的峰面積。
圖5顯示了取樣的各部分中胰高血糖素對應(yīng)的峰。
從圖5明顯可以看出，在隨機(jī)取的試樣中檢測出了基本等量的藥劑，本發(fā)明的粉末制劑的流動(dòng)性改善，并且與載體幾乎均勻地混合。
使用階式撞擊取樣器(cascade impactor)評價(jià)胰血糖素和依降鈣素制劑為調(diào)查粉末的空氣動(dòng)力學(xué)粒徑，使用階式撞擊取樣器作為人工氣道和肺的模型進(jìn)行了考查。主體包括重疊放置的8個(gè)級(stage)和1個(gè)最終的過濾器，并與流量計(jì)和抽氣泵結(jié)合。基本采用USP 2000“物理試驗(yàn)和測定/氣霧劑”(Physical Tests and Determinations/Aerosols)中的“多級階式撞擊取樣器裝置”(Multistage Cascade Impactor Apparatus)中記載的方法。具體的條件如下所示。
(方法)裝置Andersen取樣器(AN-200，Sibata Scientific Technology Ltd.)泵流量28.3L/min使用的設(shè)備Jet-haler(UNISIA JECS)樣品胰高血糖素粉末與Pharmatose的混合物(混合比1％胰高血糖素-乳糖粉末∶載體＝1∶2)依降鈣素粉末與Pharmatose的混合物(混合比1％依降鈣素-乳糖粉末∶載體＝1∶2)
將適量制劑填充入日本藥典規(guī)定的2號(hào)膠囊中，并放置在設(shè)備中。
藥物的定量實(shí)施例17所述的HPLC條件(結(jié)果)通過HPLC得到的各定量值如下所示。
表5胰高血糖素制劑

表6依降鈣素制劑

根據(jù)該模型，在級3或以后的級上收集的藥物將移動(dòng)到支氣管和肺部。由于兩種制劑均是在級3或以后的級上收集了約30％-40％的主成分，因此預(yù)期進(jìn)入體內(nèi)的藥物中約30％-40％優(yōu)選生效。
載體與藥物微細(xì)粒子的混合比對制劑特性的影響按照與實(shí)施例1同樣的方法將日本藥典記載的乳糖(YoshidaPharmaceutical Co.，Ltd.)微粉化，并在下面的條件下，使用非帶電袋將所得的粉末與載體(Pharmatose 325M，DMV制)混合，制備DPI用制劑。
表7

使用階式撞擊取樣器分析這些制劑?；镜姆治鰲l件與實(shí)施例18相同。RF值如表8所示。這些RF值是通過稱重各級收集的粉末并用2-5級上收集的總量除以制劑中含有的微粉化物總量得到的。
表8

這些結(jié)果說明賦形劑與粒子的混合比顯著地影響制劑特性，并且優(yōu)選相對于載體的藥物含量少。
脂質(zhì)體包封的胰高血糖素含量的均勻性評價(jià)使用非帶電袋，將實(shí)施例14制備的脂質(zhì)體包封的胰高血糖素的粉末與載體(Pharmatose 325M，DMV制)混合，調(diào)制DPI用制劑。按照實(shí)施例17所述的方法，從三個(gè)部分中稱量一定量的試樣，并通過HPLC對其中的胰高血糖素含量進(jìn)行定量。HPLC條件如下所示。
(HPLC條件)使用的柱子 TOSO ODS-120T(TOSO)檢測器 RF-535(Shimadzu)激發(fā)波長280nm熒光波長346nm流動(dòng)相流速 1.0mL/min流動(dòng)相 35％CH3CN水溶液(用0.1％TFA酸化)泵 LC-10 AD(Shimadzu)柱溫箱溫度 40℃在上面的條件下對從三個(gè)部分中取的樣進(jìn)行定量，結(jié)果，胰高血糖素含量分別為2.32μg/mg制劑、2.43μg/mg制劑和2.41μg/mg制劑，平均含量為2.39μg/mg制劑。即使在本例中使用脂質(zhì)體這樣的可能凝集和結(jié)合的分子，也發(fā)現(xiàn)本發(fā)明的制備制劑的方法能夠提供藥物含量基本均勻的制劑。
鮭魚降鈣素制劑的含量均勻性評價(jià)使用非帶電袋，將實(shí)施例8制備的鮭魚降鈣素粉末與載體(Pharmatose 325M，DMV制)混合，調(diào)制DPI用制劑。按照實(shí)施例17所述的方法，從三個(gè)部分中稱量一定量的試樣，并通過HPLC對其中的鮭魚降鈣素含量進(jìn)行定量。HPLC條件如下所示。
(HPLC條件)使用的柱子 TOSO ODS-120T(TOSO)檢測器 RF-535(Shimadzu)
激發(fā)波長280nm熒光波長320nm流動(dòng)相流速 1.0mL/min流動(dòng)相 38％CH3CN水溶液(用0.1％TFA酸化)泵 Jusco 88-PU柱溫箱溫度 40℃在上面的條件下對從三個(gè)部分中取的樣進(jìn)行定量，結(jié)果，鮭魚降鈣素含量分別為3.95μg/mg制劑、4.29μg/mg制劑和4.05μg/mg制劑，平均含量為4.09μg/mg制劑。即使象在本例中藥物含量極低，也發(fā)現(xiàn)本發(fā)明的制備制劑的方法能夠提供藥物含量基本均勻的制劑。
使用階式撞擊取樣器對胰高血糖素制劑的評價(jià)使用非帶電袋，將通過實(shí)施例3所述的方法制備的胰高血糖素粉末與載體(Pharmatose 325M，DMV制)混合，調(diào)制DPI用制劑。使用階式撞擊取樣器分析這些制劑?；镜姆治鰲l件與實(shí)施例18相同。RF值和膠囊中的殘留情況如表9所示。這些RF值是通過用HPLC定量各級上收集的制劑中的胰高血糖素，并用2-5級上收集的總胰高血糖素量除以膠囊制劑中含有的胰高血糖素總量得到的。HPLC分析條件如下所示。
(對象制劑)1％胰高血糖素-乳糖粉末與乳糖載體的混合物1％胰高血糖素-赤蘚醇粉末與乳糖載體的混合物(HPLC分析條件)使用的柱子ODS-120T(TOSO)檢測器RF-535(Shimadzu)泵LC-10AD(Shimadzu)激發(fā)波長 280nm
熒光波長 346nm流動(dòng)相流速1.0mL/min流動(dòng)相35％CH3CN水溶液(用0.1％TFA酸化)柱溫箱溫度室溫該分析揭示了使用乳糖的制劑和使用赤蘚醇的制劑的從膠囊的釋放特性、隨后的分散性、以及與載體解離的容易性。
表9
使用階式撞擊取樣器對含有高濃度胰高血糖素的制劑的評價(jià)使用非帶電袋，將通過實(shí)施例3所述的方法制備的胰高血糖素-赤蘚醇混合物粉末與載體(Pharmatose 325M，DMV制)混合，調(diào)制DPI用制劑。使用階式撞擊取樣器分析這些制劑?；镜姆治鰲l件與實(shí)施例18相同。RF值如表10所示。這些RF值是通過用HPLC定量各級上收集的制劑中的胰高血糖素，并用2-5級上收集的胰高血糖素總量除以膠囊制劑中含有的胰高血糖素總量得到的。HPLC分析條件同實(shí)施例22。
表10

該結(jié)果證實(shí)了添加賦形劑的效果。確認(rèn)了5倍稀釋的肽粉末作為制劑即使在高濃度條件下也具有良好的制劑特性。如實(shí)施例22所確認(rèn)的，不存在賦形劑時(shí)，極難提供可供臨床使用的制劑。因此，強(qiáng)烈地說明了本發(fā)明制劑的有用性。
使用階式撞擊取樣器對含有檸檬酸的胰高血糖素制劑的評價(jià)使用非帶電袋，將通過實(shí)施例12所述的方法制備的胰高血糖素-檸檬酸-赤蘚醇混合物粉末與載體(Pharmatose 325M，DMV制)混合，調(diào)制DPI用制劑。使用階式撞擊取樣器分析這些制劑。RF值如表11所示。這些RF值是通過用HPLC定量各級上收集的制劑中的胰高血糖素，并用2-5級上收集的胰高血糖素總量除以膠囊制劑中含有的胰高血糖素總量得到的。HPLC分析條件同實(shí)施例17。
表11

除肽和蛋白質(zhì)外，許多化合物作為添加劑在制藥學(xué)上也難以使用。該例中使用的檸檬酸就是這樣的一例，在不存在赤蘚醇時(shí)它迅速潮解。因此，在臨床應(yīng)用上是一個(gè)極其嚴(yán)重的問題。但是，根據(jù)本發(fā)明的制備制劑的方法，即使存在檸檬酸，并且肽藥劑的濃度非常高，本實(shí)施例這樣的例子也顯示了非常良好的制劑特性。
使用階式撞擊取樣器對脂質(zhì)體包封的胰高血糖素制劑的評價(jià)使用非帶電袋，將通過實(shí)施例14所述的方法制備的脂質(zhì)體包封的胰高血糖素粉末與載體(Pharmatose 325M，DMV制)混合，調(diào)制DPI用制劑。使用階式撞擊取樣器分析這些制劑?；痉治鰲l件同實(shí)施例18。測定各級上收集的粉末的重量，結(jié)果是在相對于支氣管或肺的2-5級上收集了約30％的微細(xì)粒子。由脂質(zhì)構(gòu)成的脂質(zhì)體包封的藥劑由于脂質(zhì)的特性容易形成凝集體。但是，如該實(shí)施例所證明的，可以獲得臨床上使用的到達(dá)肺部的藥劑率。
使用階式撞擊取樣器對VIP衍生物制劑的評價(jià)使用非帶電袋，將通過實(shí)施例6所述的方法制備的VIP衍生物-赤蘚醇混合物粉末與載體(Pharmatose 325M，DMV制)混合，調(diào)制DPI用制劑。使用階式撞擊取樣器分析這些制劑?；痉治鰲l件同實(shí)施例18。測定各級上收集的粉末的重量，結(jié)果是在相對于支氣管或肺的2-5級上收集了約40％的微細(xì)粒子。
使用階式撞擊取樣器對胰島素制劑的評價(jià)使用非帶電袋，將通過實(shí)施例7所述的方法制備的胰島素-赤蘚醇混合物粉末與載體(Pharmatose 325M，DMV制)混合，調(diào)制DPI用制劑。使用階式撞擊取樣器分析這些制劑?；痉治鰲l件同實(shí)施例18。HPLC分析條件如下所示。
(HPLC分析條件)使用的柱子ODS-120T(TOSO)檢測器SPD-10A(Shimadzu)泵LC-10AD(Shimadzu)檢測波長 220nm流動(dòng)相流速1.0mL/min流動(dòng)相34％CH3CN水溶液(0.1％TFA酸化)柱溫箱溫度室溫作為分析的結(jié)果，胰島素制劑的RF值為約20％，并且該胰島素吸入制劑對于臨床應(yīng)用是足夠的。
使用階式撞擊取樣器對鮭魚降鈣素制劑的評價(jià)使用非帶電袋，將通過實(shí)施例8所述的方法制備的鮭魚降鈣素-乳糖混合物粉末和鮭魚降鈣素-赤蘚醇混合物粉末與載體(Pharmatose325M，DMV制)混合，調(diào)制DPI用制劑。使用階式撞擊取樣器分析這些制劑。基本分析條件同實(shí)施例18。分析后計(jì)算的RF值如表12所示。這些RF值是通過用HPLC定量各級上收集的制劑中的依降鈣素，并用2-5級上收集的依降鈣素總量除以膠囊制劑中含有的依降鈣素總量得到的。HPLC分析條件如下所示。
12

該分析揭示了使用乳糖的制劑和使用赤蘚醇的制劑的從膠囊的釋放特性、隨后的分散性、以及與載體解離的容易性。
使用階式撞擊取樣器對依降鈣素制劑的評價(jià)使用非帶電袋，將通過實(shí)施例9所述的方法制備的依降鈣素-赤蘚醇混合物粉末與載體(Pharmatose 325M，DMV制)混合，調(diào)制DPI用制劑。使用階式撞擊取樣器分析這些制劑?；痉治鰲l件同實(shí)施例18。測定各級上收集的粉末的重量，結(jié)果是在相對于支氣管或肺的2-5級上收集了約40％的微細(xì)粒子。
使用階式撞擊取樣器對生長激素(GH)制劑的評價(jià)使用非帶電袋，將通過實(shí)施例10所述的方法制備的生長激素(GH)-赤蘚醇混合物粉末與載體(Pharmatose 325M，DMV制)混合，調(diào)制DPI用制劑。使用階式撞擊取樣器分析這些制劑。基本分析條件同實(shí)施例18。測定各級上收集的粉末的重量，結(jié)果是在相對于支氣管或肺的2-5級上收集了約47％的微細(xì)粒子。
使用階式撞擊取樣器對環(huán)孢菌素制劑的評價(jià)使用非帶電袋，將通過實(shí)施例11所述的方法制備的環(huán)孢菌素-赤蘚醇混合物粉末與載體(Pharmatose 325M，DMV制)混合，調(diào)制DPI用制劑。使用階式撞擊取樣器分析這些制劑。基本分析條件同實(shí)施例18。測定各級上收集的粉末的重量，結(jié)果是在相對于支氣管或肺的2-5級上收集了約40％的微細(xì)粒子。
使用階式撞擊取樣器對賦形劑粉碎物的評價(jià)使用非帶電袋，將通過實(shí)施例1所述的方法制備的各種賦形劑(乳糖、甘露醇和赤蘚醇)粉末與載體(Pharmatose 325M，DMV制)混合，調(diào)制DPI用制劑。
根據(jù)美國藥典記載的方法，使用階式撞擊取樣器作為人工氣道和肺的模型分析這些DPI用制劑，以考查各種試樣的分散性及到達(dá)目標(biāo)組織的比率。分析條件同實(shí)施例18。
樣品乳糖粉碎物-乳糖載體的混合物赤蘚醇粉碎物-乳糖載體的混合物甘露醇粉碎物-乳糖載體的混合物使用階式撞擊取樣器對賦形劑微粉化物-載體混合物的分析結(jié)果如圖6-8(直方圖表示各級上的收集量相對于設(shè)備總收集量的百分比，折線圖表示累積量的百分比)所示。
圖6顯示了赤蘚醇混合物的結(jié)果，圖7顯示了甘露醇混合物的結(jié)果，圖8顯示了乳糖混合物的結(jié)果。從這些結(jié)果明顯可以看出，赤蘚醇粉碎物和甘露醇粉碎物與作為載體的乳糖的附著性低，因此容易與載體分離。值得注意的是赤蘚醇的低吸濕性，這可以顯著抑制隨時(shí)間變化出現(xiàn)的重量變化。這被認(rèn)為對制劑特性的改善具有大貢獻(xiàn)。
使用不同賦形劑的醋酸布舍瑞林制劑的特性使用階式撞擊取樣器分析了實(shí)施例4中制備的含有醋酸布舍瑞林的吸入制劑，以比較各制劑的特性?；镜姆治龇椒ㄍ瑢?shí)施例18。
使用的設(shè)備Jet-haler(UNISIA JECS)樣品用乳糖570倍稀釋的布舍瑞林粉碎物-乳糖載體混合制劑用赤蘚醇570倍稀釋的布舍瑞林粉碎物-乳糖載體混合制劑用甘露醇570倍稀釋的布舍瑞林粉碎物-乳糖載體混合制劑將適量制劑填充入日本藥典規(guī)定的2號(hào)膠囊中，并放置在設(shè)備中。
抽吸時(shí)間基本上為10秒。當(dāng)觀察到膠囊中有殘留時(shí)，再次進(jìn)行抽吸10秒。
通過階式撞擊取樣器的分析結(jié)果是，如表13所示，使用赤蘚醇作為賦形劑的制劑從膠囊釋放的能力極高，并表現(xiàn)出極高的RF值。另外，甘露醇流動(dòng)性差，殘留在膠囊中的制劑量較高。因此，推測RF值必然低。
表13
使用不同賦形劑的胰高血糖素制劑的特性使用階式撞擊取樣器分析了通過實(shí)施例3的方法制備的胰高血糖素制劑?；镜姆治鰲l件同實(shí)施例18。RF值和膠囊中的殘留情況如表14所示。這些RF值是通過用HPLC定量各級上收集的制劑中的胰高血糖素，并用2-5級上收集的總高血糖素量除以膠囊制劑中含有的胰高血糖素總量得到的。HPLC分析條件如下所示。
(對象制劑)1％胰高血糖素粉末-乳糖與乳糖載體的混合物[(微粉化物)/(325M)＝0.4]1％胰高血糖素粉末-赤蘚醇與乳糖載體的混合物[(微粉化物)/(325M)＝0.2](HPLC分析條件)使用的柱子 TOSO ODS-120T(TOSO)檢測器 RF-535(Shimadzu)泵 LC-10AD(Shimadzu)激發(fā)波長280nm熒光波長346nm流動(dòng)相流速 1.0mL/min流動(dòng)相 35％CH3CN水溶液(0.1％TFA酸化)柱溫箱溫度 室溫該結(jié)果揭示了使用乳糖的制劑和使用赤蘚醇的制劑的從膠囊的釋放特性、隨后的分散性、以及與載體解離的容易性。
表14
胰高血糖素制劑類通過大鼠肺的吸收率按下面的方法，將實(shí)施例3制作的胰高血糖素DPI用制劑和實(shí)施例14制作的脂質(zhì)體包封的胰高血糖素DPI用制劑對實(shí)驗(yàn)動(dòng)物給用，并經(jīng)時(shí)地監(jiān)控其血糖值。體重300～400g的雄性SD大鼠在戊巴比妥鈉(Nembutal)麻醉下，使用氣道內(nèi)給用設(shè)備向肺內(nèi)給用各種胰高血糖素制劑。給藥后，經(jīng)時(shí)地從頸靜脈采血約1mL，加入4.8mgEDTA(2Na)后，進(jìn)行離心分離處理，得到血漿試樣。立即將血漿儲(chǔ)存在-40℃下。通過酶法計(jì)算血漿中的胰高血糖素濃度。圖9(a)顯示了沒有包封在脂質(zhì)體中的胰高血糖素-DPI制劑的經(jīng)肺給藥中血糖值的變化。圖9(b)顯示了包封在脂質(zhì)體中的胰高血糖素-DPI制劑的給藥結(jié)果。在兩種情況下，與給藥前相比，血糖值均明顯上升。值得進(jìn)一步注意的是，圖9(c)顯示了包封在脂質(zhì)體中的胰高血糖素-DPI制劑的更強(qiáng)有力的效果。
各種化合物的粉末的制作使用空氣動(dòng)力學(xué)粉碎機(jī)，通過相同的方式將所有的化合物微粉化。
粉碎條件使用的設(shè)備 A-O-Jet Mill(Seishin Enterprise Co.，Ltd.)原料供給方法 自動(dòng)進(jìn)料機(jī)供給空氣壓力 6.0kg/cm2G粉碎空氣壓力 6.5kg/cm2G集塵方法 集塵袋(聚乙烯)
在上面的方法中，制作了胰高血糖素、鮭魚降鈣素、胰島素乳糖粉碎物或赤蘚醇粉碎物、或茶堿、曲尼斯特(tranilast)的粉碎物，并使用非帶電袋將其與平均粒徑約70μm的赤蘚醇載體或平均粒徑約50μm的乳糖載體混合([微粉化物]/[325M]＝0.4)。各自的收率約50％-70％。
胰高血糖素制劑的釋放特性使用階式撞擊取樣器分析了實(shí)施例36制作的胰高血糖素制劑，考查了各種試樣的分散性及到達(dá)目標(biāo)組織的比率。
使用階式撞擊取樣器的分析條件裝置Andersen取樣器(AN-200，Sibata Scientific Technology Ltd.)泵流量28.3L/min樣品 胰高血糖素乳糖粉碎物+乳糖載體胰高血糖素乳糖粉碎物+赤蘚醇載體胰高血糖素赤蘚醇粉碎物+乳糖載體胰高血糖素赤蘚醇粉碎物+赤蘚醇載體將這些制劑填充入日本藥典規(guī)定的2號(hào)膠囊中，并使用下面的設(shè)備進(jìn)行分析。
使用的設(shè)備Jet-haler(UNISIA JECS)HPLC分析條件在階式撞擊取樣器分析中，在下面的條件下通過HPLC對各級上收集的胰高血糖素量進(jìn)行定量。
使用的柱子TOSO ODS-120T(TOSO)檢測器RF-535(Shimadzu)泵LC-10AD(Shimadzu)
激發(fā)波長 280nm熒光檢測波長 346nm流動(dòng)相流速1.0mL/min流動(dòng)相35％CH3CN水溶液(0.1％TFA酸化)柱溫箱溫度室溫圖10顯示了使用階式撞擊取樣器的分析結(jié)果(折線圖顯示各級上收集的胰高血糖素量相對于制劑中的胰高血糖素總量的百分比)。根據(jù)圖10，與使用乳糖作為載體和賦形劑的情況相比，使用赤蘚醇作為賦形劑或載體的情況下收集的胰高血糖素量變得更高。另外，當(dāng)使用赤蘚醇作為載體和賦形劑時(shí)，胰高血糖素的收集量最高。該結(jié)果清楚地證明了赤蘚醇載體的有用性。另外，它證明了通過使用赤蘚醇也作為賦形劑，可以進(jìn)一步提高制劑特性。值得注意的是，該模型中相當(dāng)于咽喉的級0(粒徑不低于11μm)的收集量由于赤蘚醇的使用而明顯減少。例如，這可以抑制由在咽喉的積累或可由藥劑引起的局部刺激等。
表15顯示了在該模型中胰高血糖素向肺部的移動(dòng)率。
表15

從表15明顯可以看出，使用乳糖載體的制劑和使用赤蘚醇載體的制劑間在到達(dá)肺部的制劑比率上有明顯差別。使用赤蘚醇作為載體和使用赤蘚醇作為賦形劑均可以發(fā)現(xiàn)這種差別。當(dāng)載體和賦形劑均使用赤蘚醇時(shí)，得到遠(yuǎn)優(yōu)于上述值的更好的結(jié)果?；谠摻Y(jié)果，確認(rèn)了使用赤蘚醇作為載體的有用性以及使用赤蘚醇作為賦形劑時(shí)的疊加效果。
胰島素制劑的釋放特性對于實(shí)施例1制作的胰島素制劑，用階式撞擊取樣器考查了各種試樣的分散性及到達(dá)目標(biāo)組織的比率。
樣品胰島素乳糖粉碎物+乳糖載體胰島素乳糖粉碎物+赤蘚醇載體將兩制劑填充入日本藥典規(guī)定的2號(hào)膠囊中，并使用Jet-haler進(jìn)行了分析。
HPLC分析條件在階式撞擊取樣器分析中，在下面的條件下通過HPLC對各級上收集的胰高血糖素量進(jìn)行了定量。
使用的柱子 TOSO ODS-120T(TOSO)檢測器 SPD-10A(Shimadzu)泵 LC-10AD(Shimadzu)檢測波長220nm流動(dòng)相流速 1.0mL/min流動(dòng)相 34％CH3CN水溶液(0.1％TFA酸化)柱溫箱溫度 室溫通過上述條件進(jìn)行分析的結(jié)果是，計(jì)算出了如表16所示的肺部和支氣管的藥物到達(dá)率。從表16所示的結(jié)果明顯可以看出，當(dāng)使用赤蘚醇作為載體時(shí)，肺部和支氣管的藥物到達(dá)率比使用乳糖作為載體時(shí)高很多。這說明了赤蘚醇作為載體是有用的。
表16
鮭魚降鈣素制劑的釋放特性對于實(shí)施例36制作的鮭魚降鈣素制劑，使用階式撞擊取樣器考查了各種試樣的分散性及到達(dá)目標(biāo)組織的比率。
樣品鮭魚降鈣素-乳糖粉碎物+乳糖載體鮭魚降鈣素-乳糖粉碎物+赤蘚醇載體將兩制劑填充入日本藥典規(guī)定的2號(hào)膠囊中，并使用Jet-haler進(jìn)行了分析。
測定了各級上收集的鮭魚降鈣素制劑量，并計(jì)算了肺部和支氣管的藥物到達(dá)率。結(jié)果，得到了如表17所示的結(jié)果。與實(shí)施例38得到的結(jié)果一樣，當(dāng)使用赤蘚醇作為載體時(shí)，實(shí)現(xiàn)了高的肺部和支氣管的藥物到達(dá)率，也發(fā)現(xiàn)了赤蘚醇載體對于鮭魚降鈣素的有用性。
表17
曲尼斯特制劑的釋放特性對于實(shí)施例36中不使用賦形劑制作的曲尼斯特制劑，按照與實(shí)施例37～39同樣的方式，使用階式撞擊取樣器考查了各種試樣的分散性及到達(dá)目標(biāo)組織的比率。
樣品曲尼斯特粉碎物+乳糖載體曲尼斯特粉碎物+赤蘚醇載體將兩制劑填充入日本藥典規(guī)定的2號(hào)膠囊中，并使用Jet-haler進(jìn)行了分析。
測定了各級上收集的曲尼斯特制劑的量，結(jié)果，計(jì)算出了如表18所示的肺部和支氣管的藥物到達(dá)率。
表18

從表18的結(jié)果明顯可以看出，相對于使用乳糖載體時(shí)有些低的到達(dá)目標(biāo)組織的比率，使用赤蘚醇載體時(shí)，到達(dá)目標(biāo)組織的比率顯著提高。分析中使用的曲尼斯特不是肽或蛋白質(zhì)藥物。具體地，這證明了赤蘚醇對于肽和蛋白質(zhì)藥物以外的藥物也是極為有效的。
工業(yè)實(shí)用性本發(fā)明的粉末制劑通過抑制在生物體內(nèi)非常有用的肽和蛋白質(zhì)在特定條件下的自凝集，可以作為含量均勻的制劑提供。另外，本發(fā)明的制劑可以供臨床用，同時(shí)無損所含的藥物化合物的性質(zhì)。從醫(yī)療經(jīng)濟(jì)學(xué)的角度考慮它們也是有效的。
另外，通過使用包括作為低吸濕性、低附著性化合物的赤蘚醇或山梨醇的糖醇作為載體，可以使含有藥劑的微細(xì)粒子與載體的解離容易，可以改善組織選擇性、生物利用度等的粉末制劑的特性。
本說明書中引用的所有出版物、專利和專利申請均整體引入作為參考。
序列表<110>伊藤火腿株式會(huì)社(ITOHAM FOODS INC.)<120>粉末吸入劑及其制備方法(A POWDER INHALANT AND A METHOD FORPRODUCING THE SAME)<130>PH-1465<160>1<170>PatentIn Ver.2.0<210>1<211>31<212>PRT<213>人工序列<220>
<223>人工序列說明血管活性腸肽衍生物<400>1His Ser Asp Ala Val Phe Thr Asp Asn Tyr Thr Arg Leu Arg Arg Gln1 5 10 15Met Ala Val Arg Arg Tyr Leu Asn Ser Ile Leu Asn Gly Arg Arg20 2權(quán)利要求
1.粉末制劑，通過將含有粉末狀藥劑和賦形劑的平均粒徑不超過20μm的微細(xì)粒子與具有空氣動(dòng)力學(xué)容許的粒徑的載體混合而得到。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的粉末制劑，其中藥劑能夠通過分子間相互作用自凝集。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的粉末制劑，其中藥劑具有吸濕性和/或潮解性。
4.根據(jù)權(quán)利要求1-3的任一項(xiàng)所述的粉末制劑，其中藥劑為肽或蛋白質(zhì)。
5.根據(jù)權(quán)利要求1-4的任一項(xiàng)所述的粉末制劑，其中藥劑被包封在脂質(zhì)層中。
6.根據(jù)權(quán)利要求1-5的任一項(xiàng)所述的粉末制劑，其中賦形劑易溶于水。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的粉末制劑，其中賦形劑為赤蘚醇。
8.粉末制劑，通過將含有藥劑的微細(xì)粒子與具有空氣動(dòng)力學(xué)容許的粒徑的作為載體的糖醇混合而得到。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的粉末制劑，其中糖醇為赤蘚醇和/或山梨醇。
10.根據(jù)權(quán)利要求1-9的任一項(xiàng)所述的粉末制劑，其中粉末狀藥劑與賦形劑的比率在1∶5000至10∶1的范圍內(nèi)。
11.根據(jù)權(quán)利要求1-10的任一項(xiàng)所述的粉末制劑，其中微細(xì)粒子與載體的比率在1∶100至10∶1的范圍內(nèi)。
12.根據(jù)權(quán)利要求1-11的任一項(xiàng)所述的粉末制劑，其中載體的粒徑在10μm至200μm的范圍內(nèi)。
13.制備粉末制劑的方法，包括下列步驟將粉末狀藥劑溶解或懸浮在賦形劑的溶液中；將所得的溶液或懸浮液進(jìn)行噴霧干燥以制備微粉制劑，或?qū)⑼ㄟ^把溶液或懸浮液凍干得到的干燥品粉碎；以及將干燥品與具有空氣動(dòng)力學(xué)容許的粒徑的載體混合。
14.制備粉末制劑的方法，包括下列步驟使用空氣動(dòng)力學(xué)粉碎機(jī)將賦形劑和粉末狀藥劑同時(shí)粉碎和混合；以及將所得的產(chǎn)物與具有空氣動(dòng)力學(xué)容許的粒徑的載體混合。
15.根據(jù)權(quán)利要求13或14所述的制備粉末制劑的方法，其中藥劑能夠通過分子間相互作用自凝集。
16.根據(jù)權(quán)利要求13-15的任一項(xiàng)所述的制備粉末制劑的方法，其中載體的平均粒徑不小于10μm。
全文摘要
本發(fā)明提供粉末制劑，其可以通過將含有粉末狀藥劑和賦形劑的平均粒徑不超過20μm的微細(xì)粒子與具有空氣動(dòng)力學(xué)容許的粒徑的載體混合而得到。該制劑在制藥上容易處理，并且因分散性和流動(dòng)性提高而能夠保持均勻的藥劑含量。
文檔編號(hào)A61K9/00GK1486175SQ01822108
公開日2004年3月31日 申請日期2001年11月29日 優(yōu)先權(quán)日2000年11月29日
發(fā)明者尾上誠良, 遠(yuǎn)藤廣介, 樫本和久, 久, 介 申請人:伊藤火腿株式會(huì)社