專利名稱：興奮性氨基酸前體藥物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及合成的興奮性氨基酸前體藥物(及其藥學(xué)上可接受的鹽)和它們的制備方法。本發(fā)明還涉及使用所述化合物以及包含該化合物的藥用組合物治療神經(jīng)系統(tǒng)疾病和精神病的方法。
神經(jīng)系統(tǒng)疾病或精神疾病(例如焦慮癥)的治療已經(jīng)與代謝性興奮性氨基酸受體的選擇性激活聯(lián)系起來，例如(+)-2-氨基雙環(huán)[3.1.0]己烷-2，6-二羧酸，也稱為L354740，它在1998年5月12日授予的美國專利第5,750,566號(專利’566)中公開，是一種活性MGLUR2受體激動劑，參見CNS Drug Reviews，5，第1-12頁(1999)。
本發(fā)明提供前體藥物型LY354740，其增強LY354740在體內(nèi)的效能，使得母體化合物的口服吸收程度更高。此外，當(dāng)給予本發(fā)明化合物時，由于體外生物轉(zhuǎn)化為母體分子程度高而未檢測到循環(huán)水平的前體藥物。此外，本發(fā)明肽前體藥物在所有的pH范圍穩(wěn)定并且沒有毒性。本發(fā)明化合物代表了既能保持LY354740樣化合物在人體的安全性和有效性，又能提高口服生物利用率的最佳途徑。用本發(fā)明化合物(1S，2S，5R，6S)-2-[(2’S)-(2’-氨基)-丙?；鵠氨基-雙環(huán)[3.1.0]己烷-2，6-二羧酸鹽酸鹽進(jìn)行了臨床前研究，顯示本發(fā)明化合物在治療焦慮癥時大大增強了口服效能，而且沒有伴隨的毒性、在要求的pH范圍不穩(wěn)定以及體內(nèi)轉(zhuǎn)化率低等問題。
因此，本發(fā)明提供式I化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽
其中R13、R14和R17為氫。
發(fā)現(xiàn)本發(fā)明化合物是代謝性谷氨酸受體的選擇性激動劑LY354740的前體藥物，因此可用于中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病如神經(jīng)系統(tǒng)疾病(例如神經(jīng)變性疾病)的藥物治療以及用作抗精神病藥、抗焦慮藥、藥物戒斷藥物、抗抑郁劑、抗驚厥藥、止痛劑以及止吐劑。
人們知道，式(I)化合物包含至少四個不對稱碳原子，其中三個在環(huán)丙烷環(huán)中，一個為氨基酸α-碳原子。因此，本發(fā)明化合物可存在并可分離出其純對映異構(gòu)體形式、外消旋形式或非對映異構(gòu)體混合物。
氨基酸部分優(yōu)選具有天然氨基酸構(gòu)型，即相對于D-甘油醛為L-構(gòu)型。
本發(fā)明包括式I化合物的藥學(xué)上可接受的鹽。這些鹽可以通過與分子中酸性或堿性部分結(jié)合存在，可以為酸加成鹽、伯、仲、叔或季銨鹽、堿金屬鹽、堿土金屬鹽。通常，由酸和式I化合物反應(yīng)制備酸加成鹽。通常由所需要的金屬鹽的氫氧化物形式與式I化合物反應(yīng)制備堿金屬鹽和堿土金屬鹽。
由于其結(jié)晶形式，一些特殊鹽提供某些配制優(yōu)勢?；衔锏姆墙Y(jié)晶形式可能為無定形或吸濕性的。通常用于藥用化合物的結(jié)晶形式有時更需要，因為它們不是無定形的。
式I肽的一種具體藥學(xué)上可接受的鹽為(1S，2S，5R，6S)-2-[(2’S)-(2’-氨基)-丙?；鵠氨基-雙環(huán)[3.1.0]己烷-2，6-二羧酸鹽酸鹽。
式I肽的另一種具體藥學(xué)上可接受的鹽為(1S，2S，5R，6S)-2-[(2’S)-(2’-氨基)-丙酰基]氨基-雙環(huán)[3.1.0]己烷-2，6-二羧酸甲磺酸鹽。
通常用于生成所述鹽的酸包括無機酸，例如鹽酸、氫溴酸、硝酸、硫酸或磷酸，或者有機酸，例如有機羧酸如乙醇酸、馬來酸、丙醇二酸、富馬酸、蘋果酸、酒石酸、檸檬酸、水楊酸(salicyclic)、鄰乙酸基苯甲酸，或有機磺酸，2-羥乙磺酸、甲苯對磺酸、甲磺酸或萘-2-磺酸。
除藥學(xué)上可接受的鹽外，其它鹽也包括在本發(fā)明內(nèi)。它們可在提純化合物或制備其它(例如藥學(xué)上可接受的)酸加成鹽時用作中間體，或者用于鑒定、表征或純化。
已經(jīng)證實多種生理功能與興奮性氨基酸傳遞過量或不恰當(dāng)刺激有關(guān)。相信本發(fā)明式I化合物能夠治療與這種情況相關(guān)的哺乳動物各種神經(jīng)系統(tǒng)疾病，包括急性神經(jīng)系統(tǒng)疾病例如心臟旁路手術(shù)或移植后的大腦缺陷、中風(fēng)、腦缺血、脊髓損傷、頭部外傷、產(chǎn)期低氧癥、心搏停止以及低血糖性神經(jīng)元損害。認(rèn)為本發(fā)明式I化合物能夠治療各種慢性神經(jīng)系統(tǒng)疾病，例如阿耳茨海默氏病、亨廷頓氏舞蹈病、肌萎縮性脊髓側(cè)索硬化、AIDS型癡呆、眼病和視網(wǎng)膜病、認(rèn)知障礙、特發(fā)性以及藥物誘發(fā)性帕金森氏病。本發(fā)明還提供治療這些疾病的方法，所述方法包括給予其需要患者有效量的式I化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽。
本發(fā)明式I化合物治療患者谷氨酸機能障礙相關(guān)性各種其它神經(jīng)系統(tǒng)疾病，包括肌肉痙攣、驚厥、偏頭痛、尿失禁、疼痛、月經(jīng)前焦慮癥(PDD)、精神病(例如精神分裂癥)、藥物耐受性以及戒斷(例如尼古丁、鴉片制劑以及苯并二氮雜庚因)、焦慮癥及相關(guān)疾病、嘔吐、腦水腫、慢性疼痛以及遲發(fā)性運動障礙。式I化合物還用作抗抑郁劑和止痛劑。因此，本發(fā)明還提供治療這些疾病的方法，所述方法包括給予其需要患者有效量的式I化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽。
式I化合物可以通過化學(xué)領(lǐng)域已知的用于制備結(jié)構(gòu)類似的雜環(huán)化合物的類似方法制備，或通過本文介紹的新方法制備。用于制備以上定義的式I化合物的方法和中間體為本發(fā)明進(jìn)一步的特征，通過以下步驟作示例性說明，除非有其它說明，其中常規(guī)基團(tuán)含義同以上定義。
(A)制備其中R13、R14和R17為氫的式I化合物(二酸)按照實施例3和4的一般方法，用酸脫去R17為叔丁氧基羰基或氮保護(hù)基團(tuán)的式I化合物的氨基保護(hù)；
(B)制備其中R13和R14都為氫的式I化合物(二酸)按照流程2介紹的方法脫去R13和R14不同時為氫的式I化合物的保護(hù)；(C)制備其中R13和R14不同時為氫的式I化合物按照實施例1的一般方法，將式II化合物 用相應(yīng)的式III氨基酸酰胺化，HOOCCHCH3NHR17III其中p為0或1-10的任何整數(shù)，R17為叔丁氧基羰基或氮保護(hù)基團(tuán)。
(D)制備其中R13和R14不為氫、R13和R14可為保護(hù)羧基的酯基團(tuán)的式II化合物(二酯)酯化R13和R14都為氫的式II化合物(二酸)。
(E)制備其中R13和R14不為氫的式II化合物(二酯)脫去式IV化合物的保護(hù) 其中Rm為氮保護(hù)基團(tuán)，參見制備2。
(F)制備其中R13和R14不同時為氫的式II化合物(二酯)酯化式IV化合物，參見制備2。
(G)制備其中R13和R14都為氫的式IV化合物(二酸)按照制備1的介紹保護(hù)式II化合物的氨基。
本文使用的術(shù)語“氮保護(hù)基團(tuán)”是指在合成步驟中用于保護(hù)或阻止氮基團(tuán)以避免不需要的反應(yīng)的基團(tuán)。選擇使用合適的氮保護(hù)基團(tuán)取決于在需要保護(hù)的隨后反應(yīng)步驟中使用的條件，它為本領(lǐng)域普通技術(shù)人員所熟知。通常使用的氮保護(hù)基團(tuán)公開于T.W.Greene和P.G.M.Wuts，Protective Groups In Organic Synthesis，第二版(JohnWiley & Sons，New York(1991))。
本文使用的術(shù)語“羧基保護(hù)基團(tuán)”是指羧酸基團(tuán)的一種酯衍生物，通常用于在化合物的其它官能團(tuán)進(jìn)行反應(yīng)時阻止或保護(hù)羧酸。具體基團(tuán)包括例如甲基、乙基、叔丁基、芐基、甲氧基甲基、三甲硅烷基等。這樣的基團(tuán)的更多實例參見T.W.Greene和P.G.M.Wuts，Protecting Groups in Organic Synthesis，第三版(John Wiley & Sons，N.Y.(1999))?？捎贸Ｒ?guī)步驟將所述酯分解，而不會影響分子的其它部分。
其后，對于任何上述步驟，當(dāng)需要式I化合物的藥學(xué)上可接受的鹽時，可通過使式I的酸與生理上可接受的堿反應(yīng)獲得，或者通過使式I的堿性化合物與生理上可接受的酸反應(yīng)獲得，或者通過任何其它常規(guī)步驟獲得。
術(shù)語“C1-C10烷基”表示1-10個碳原子的直鏈、支鏈或環(huán)狀烷基鏈。
術(shù)語“C2-C10鏈烯基”表示含一個或多個碳-碳雙鍵、2-10個碳原子的直鏈或支鏈不飽和烷基鏈，例如二烯和三烯。該基團(tuán)也包括E型異構(gòu)體和Z型異構(gòu)體。
術(shù)語“芳基”表示基團(tuán)如苯基、取代苯基和萘基。術(shù)語“芳基烷基”連接一個或多個芳基的C1-C4烷基。
術(shù)語“影響”是指式I化合物對興奮性氨基酸受體起激動劑作用。術(shù)語“興奮性氨基酸受體”是指代謝性谷氨酸受體，其為一種通過GTP結(jié)合蛋白與細(xì)胞效應(yīng)物偶聯(lián)的受體。術(shù)語“cAMP-結(jié)合的代謝性谷氨酸受體”是指偶聯(lián)抑制腺苷酸環(huán)化酶活性的代謝性受體。
術(shù)語“神經(jīng)系統(tǒng)疾病”是指急性和慢性神經(jīng)變性疾病，包括心臟旁路手術(shù)或移植后的大腦缺陷、腦缺血(例如心搏停止引發(fā)的中風(fēng))、脊髓損傷、頭部外傷、阿耳茨海默氏病、亨廷頓氏舞蹈病、肌萎縮性脊髓側(cè)索硬化、AIDS型癡呆、產(chǎn)期低氧癥、低血糖性神經(jīng)元損害、眼病和視網(wǎng)膜病、認(rèn)知障礙、特發(fā)性以及藥物誘發(fā)性帕金森氏病。本術(shù)語還包括谷氨酸機能紊亂引起的其它神經(jīng)系統(tǒng)疾病，包括肌肉痙攣、偏頭痛、尿失禁、藥物耐受性、戒斷以及中斷(例如鴉片制劑、苯并二氮雜庚因、尼古丁、可卡因或酒精)、戒煙、嘔吐、腦水腫、慢性疼痛、睡眠紊亂、驚厥、Tourette氏綜合癥、注意力不集中癥以及遲發(fā)性運動障礙。
術(shù)語“精神疾病”是指急性或慢性精神疾病，包括精神分裂癥、焦慮癥和相關(guān)疾病(例如恐慌發(fā)作和應(yīng)激性心血管疾病)、抑郁癥、雙相精神病、精神病以及強迫性障礙。
本發(fā)明的一個具體方面包括影響患者的cAMP結(jié)合的代謝性谷氨酸受體的方法，所述方法包括給予需要調(diào)節(jié)興奮性氨基酸神經(jīng)傳遞的患者藥學(xué)有效量的式I化合物。
本發(fā)明的另一具體方面包括給予有效量的R13和R14都為氫的式II化合物(二酸)的方法，所述方法包括給予需要調(diào)節(jié)興奮性氨基酸神經(jīng)傳遞的患者藥學(xué)有效量的式I化合物。
本發(fā)明的另一具體方面包括治療患者精神疾病的方法，所述方法包括給予其需要治療的患者藥學(xué)有效量的式I化合物。
本發(fā)明的另一具體方面包括治療患者神經(jīng)系統(tǒng)疾病的方法，所述方法包括給予其需要治療的患者藥學(xué)有效量的式I化合物。
一種治療患者精神疾病的優(yōu)選方法，其包括給予其需要患者藥學(xué)有效量的式I化合物，其中所述精神疾病為精神分裂癥、焦慮癥和相關(guān)疾病、抑郁癥、雙相精神病、精神病以及強迫性障礙。
一種治療患者神經(jīng)系統(tǒng)疾病的優(yōu)選方法，其包括給予其需要患者藥學(xué)有效量的式I化合物，其中所述神經(jīng)系統(tǒng)疾病為心臟旁路手術(shù)或移植后的大腦缺陷；腦缺血；脊髓損傷；頭部外傷；阿耳茨海默氏病；亨廷頓氏舞蹈??；肌萎縮性脊髓側(cè)索硬化；AIDS型癡呆；產(chǎn)期低氧癥；低血糖性神經(jīng)元損害；眼病和視網(wǎng)膜?。徽J(rèn)知障礙；特發(fā)性以及藥物誘發(fā)性帕金森氏病；肌肉痙攣；偏頭痛；尿失禁；藥物耐受性、戒斷以及中止；戒煙；嘔吐；腦水腫；慢性疼痛；睡眠紊亂；驚厥；Tourette氏綜合癥；注意力不集中癥以及遲發(fā)性運動障礙。
一種治療患者精神疾病的更優(yōu)選方法，其包括給予其需要患者藥學(xué)有效量的式I化合物，其中所述精神疾病為焦慮癥和相關(guān)疾病。
一種治療患者神經(jīng)系統(tǒng)疾病的更優(yōu)選方法，其包括給予其需要患者藥學(xué)有效量的式I化合物，其中所述神經(jīng)系統(tǒng)疾病為藥物耐受性、戒斷以及中斷；戒煙。
本發(fā)明的另一方面是式I化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽用作藥物。
本發(fā)明的另一方面包括式I化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽在制備用于治療神經(jīng)系統(tǒng)疾病和精神疾病的藥物中的用途。
本文使用的術(shù)語“有效量”是指以單劑或多劑給予患者本發(fā)明化合物的用量或劑量，其在診斷或治療情況下的患者產(chǎn)生所需要的作用。
本領(lǐng)熟練技術(shù)人員的主治診斷醫(yī)師可以運用已知技術(shù)以及在類似條件下獲得的觀測結(jié)果可容易地確定有效量。在確定本發(fā)明化合物的有效用量或劑量時，主治診斷醫(yī)師要考慮許多因素，包括(但不限于)哺乳動物種類；其體型、年齡以及總體健康狀況；涉及的具體疾病；疾病的嚴(yán)重程度；各個體患者的反應(yīng)；給予的具體化合物；用藥方式；給予制劑的生物利用率特性；所選擇的劑量方案；同時使用的藥物；以及其它有關(guān)因素。例如，通常每日劑量可包含約25mg～約300mg活性成分。本發(fā)明化合物可以通過各種途徑給藥，包括口服、直腸、透皮、皮下、靜脈內(nèi)、肌內(nèi)、口腔(bucal)或鼻內(nèi)途徑?；蛘撸景l(fā)明化合物可以通過連續(xù)灌注給藥。
本文使用的術(shù)語“患者”是指哺乳動物，例如小鼠、豚鼠、大鼠、狗或人。應(yīng)理解優(yōu)選的患者為人。
本文使用的術(shù)語“治療”包括通常接受的含義，它包括阻止、預(yù)防、抑制、減緩、中止或逆轉(zhuǎn)癥狀發(fā)展。因此，本發(fā)明包括治療性用藥和預(yù)防性用藥。
如果不能市售獲得，上述步驟必需的初始原料可以用各種方法制備，所述方法選自有機雜環(huán)化學(xué)的標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)、合成已知的類似結(jié)構(gòu)化合物的類似技術(shù)或者實施例中介紹的方法(包括新型方法)。
本發(fā)明的又一方面提供給予有效量的R13和R14都為氫的式II化合物(二酸)的方法，所述方法包括給予需要調(diào)節(jié)興奮性氨基酸神經(jīng)傳遞的患者藥學(xué)有效量的式I化合物。
式I化合物通過酶作用或水解作用在體內(nèi)轉(zhuǎn)化形成式II化合物，其中R13和R14都為氫(二酸)，如以下流程1所示。
流程1體內(nèi)轉(zhuǎn)化具體地說，式I化合物的結(jié)晶形式可以根據(jù)以下流程2概述的途徑制備，其中各個R13和R14分別為R13和R14定義基團(tuán)。流程2介紹的方法為制備式I化合物的結(jié)晶鹽酸鹽形式以及式I化合物的甲磺酸鹽形式的合成方法。
流程2制備具體鹽的方法以上流程2中，將R13和R14都為氫的一水合物II(二酸)用亞硫酰氯和甲醇處理獲得相應(yīng)的二酯II?；蛘?，可以用催化鹽酸替代亞硫酰氯。將式II二酯用式III化合物以及偶聯(lián)劑二環(huán)己基碳二亞胺(DCC)、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二亞胺(EDCI)或氯甲酸異丁酯酰胺化獲得式I二酯保護(hù)性肽基化合物。這種轉(zhuǎn)化也可用?；然蛴酶鞣N其它肽偶聯(lián)劑實現(xiàn)，例如氯代磷酸聯(lián)苯酯和2-氯-4，6-二甲氧基-1，3，5-三嗪(CDMT)、雙(2-氧代-3-噁唑烷基)次膦酰氯和苯并三唑-1-基氧基三(二甲基氨基)鏻六氟磷酸鹽。
利用適當(dāng)?shù)膲A(例如氫氧化鋰或氫氧化鈉的THF溶液)水解式I二酯保護(hù)性肽基化合物獲得式I二酸保護(hù)性肽基化合物，其中R13和R14都為氫(二酸)。式I二酸保護(hù)性肽基化合物可以用無機或有機酸在合適溶劑中脫去保護(hù)。這樣的條件可以制備式I二酸肽基化合物的為無定形固體或者直接為結(jié)晶固體的相應(yīng)酸鹽。無定形固體時，接著可以用合適的溶劑結(jié)晶。例如，式I二酸保護(hù)性肽基化合物用氯化氫氣體的乙酸乙酯溶液處理時獲得脫去保護(hù)的無定形固體鹽酸鹽。然后可以將無定形鹽酸鹽用丙酮和水結(jié)晶獲得式I的結(jié)晶鹽酸鹽化合物。在直接形成結(jié)晶的情況下，過濾反應(yīng)混合物可以獲得結(jié)晶鹽。式I的兩性離子化合物通過用氫氧化鈉處理式I的結(jié)晶鹽酸鹽獲得。本領(lǐng)域普通技術(shù)人員知道式I化合物可以用不分離出所述中間體的一步法制備。
化合物調(diào)節(jié)代謝性谷氨酸受體功能的能力可以通過檢測它們對表達(dá)上述各個人類代謝性谷氨酸受體(mGluR)亞型的細(xì)胞cAMP產(chǎn)生(mGluR2、3、4、6、7或8)或磷酸肌醇水解(mGluR1或5)的影響能力來證明。(D.D.Schoepp等，Neuropharmacol.，1996，35，1661-1672和1997，36，1-11)。
式I化合物治療焦慮癥或相關(guān)疾病的能力可以用眾所周知的恐懼增強驚嚇焦慮模型和高舉型十字迷宮焦慮模型證明，分別參見Davis，Psychopharmacology，621；1979和Lister，Psychopharmacol，92180-185；1987。
體外受體結(jié)合為了研究本發(fā)明化合物與LY354740相比影響受體結(jié)合的能力，測定了從人mGluR2、人mGluR3的細(xì)胞膜以及天然大鼠腦組織置換高親合性mGluR2拮抗劑放射性配體[3H]LY341495。(參見Ornstein P.L.，Arnold M.B.，Bleisch T.J.，Wright R.A.，Wheeler W.J.和SchoeppD.D.，[3H]LY341495，a highly potent，selective and novel radioligand forlabeling group II metabotropic receptors。Bioorg.Med.Chem.Lett.81919-1922(1998)；Johnson B.G.，Wright R.A.，Arnold M.B.，WheelerW.J.，Omstein P.L.和Schoepp D.D.，[3H]LY341495 as a novel rapidfiltration antagonist radioligand for group II metabotropic receptorsCharacterization of binding to membranes of mGlu receptor subtypeexpressing cells。Neuropharmacology 381519-1529(1999))如下表1所示，LY354740置換結(jié)合大鼠前腦膜的[3H]LY341495的能力類似于對人重組受體的置換能力。相反，式I化合物達(dá)到10,000nM時沒有顯著置換結(jié)合到大鼠前腦膜的[3H]LY341495。
在恐懼增強驚嚇的焦慮大鼠模型的體內(nèi)作用為了研究對比本發(fā)明化合物與LY354740對有關(guān)治療動物模型的mGlu2/3受體的效能，進(jìn)行大鼠恐懼增強驚嚇實驗的研究。特別選擇這種模型是由于其對mGlu2/3激動劑例如LY354740和本發(fā)明化合物高度敏感。(參見Helton D.R.，Tizzano J.P.，Monn J.A.，SchoeppD.D.和Kallman M.J.，Anxiolytic and side-effect profile of LY354740Apotent，high selective，orally active agonist for group II metabotropicglutamate receptors，J.Pharmacol.Exp.Ther.284651-660(1998))。為了證實在這種模型中mGlu2/3受體介導(dǎo)式I化合物的作用，而以前已經(jīng)證實LY354740具有這種作用(參見Tizzano，J.P.，Griffey K.I.，Omstein P.L.，Monn J.A.，and Schoepp D.D.，Actions of mGlu receptoragonists on fear-conditioning versus fear-expression in rats，Neuropharmacology，38A45(#144)(1999))，還檢測了LY341495(一種mGlu2/3受體拮抗劑)12(1998))阻斷化合物介導(dǎo)性對恐懼增強驚嚇的抑制作用能力(See，Kingston A，E.，Omstein P，L.，Wright R，A.，Johnson B，G.，Mayne N，G.，Burnett J，P.，Belagaje R.，Wu S.，和Schoepp D，D.，LY341495 is a nanomolar potent and selective antagonistfor group II metabotropic glutamate receptors，Neuropharmacology，371-12(1998))。所有實驗使用安定(0.6mg/kg i.p.)作為陽性對照。所有實驗用喂飼大鼠完成。
在恐懼增強驚嚇模型中，大鼠接受中性刺激例如燈光(條件刺激)與厭惡刺激例如電擊(非條件刺激)。準(zhǔn)備好后，當(dāng)先用燈光驚嚇刺激，再給予大鼠強聲音刺激時，將引起更大驚嚇反應(yīng)。
臨床證明安定和鹽酸丁螺環(huán)酮為抗焦慮藥，它們對恐懼增強驚嚇模型燈光性恐懼(增強性驚嚇反應(yīng))可有效減輕，并且減輕高舉型十字迷宮模型對開放空間的恐懼。
雄性Long Evans大鼠(180-400g)或雄性NIH Swiss小鼠(18-35g)購自Harlan Sprague-Dawley，Cumberland，IN，USA，在實驗前讓其適應(yīng)環(huán)境至少3天。大鼠居住于23+2℃(相對濕度30％～70％)，喂飼Purina Certified Rodent Chow，自由飲水。光周期為12小時燈光，12小時黑暗，由黑暗開始進(jìn)行約1800小時。
將受試化合物溶于純水溶媒中，需要時用5N NaOH中和至pH7-8。滴加吐溫80使安定(Sigma Chemical Company，St.Louis，MO)懸浮于純水中。對照動物接受相應(yīng)的溶媒。
SL-LAB(San Diego Instruments，San Diego，CA)箱用于條件作用過程以及制造和記錄驚恐反應(yīng)。標(biāo)準(zhǔn)的條件作用步驟用于產(chǎn)生增強驚恐反應(yīng)。簡單地講，在最初2天，將大鼠放入黑暗驚恐箱，其中安裝了電擊柵板。接著5分鐘的適應(yīng)環(huán)境后，每只大鼠先給予5秒燈光(15瓦特)，燈光持續(xù)保持到電擊，接受1mA的電擊(500ms)。每個條件作用過程給予10次燈光和電擊，大鼠用管飼法給予受試化合物的水溶液，進(jìn)行驚恐測試過程。在測試過程開始時每批連續(xù)給予10次聲音驚恐刺激(110dB，沒有組合燈光)以最小化在適應(yīng)刺激初期快速階段的影響。接著進(jìn)行單獨噪音試驗或燈光后給予噪音的交替試驗20次。排除最初試驗組，各個試驗類型(僅有噪音對燈光+噪音)的驚恐反應(yīng)幅度為各大鼠在整個試驗過程的平均值。
如以下表2第一行所示，當(dāng)口服給予喂飼大鼠時，本發(fā)明化合物在大鼠恐懼增強驚恐試驗中具有活性的劑量為LY354740的1/300。如果此體內(nèi)動物模型直接預(yù)測人的焦慮反應(yīng)，本發(fā)明化合物將以母體化合物1/300的劑量產(chǎn)生抗焦慮效果。此外，與每天兩次用藥的母體化合物相比，本發(fā)明化合物以更低劑量產(chǎn)生更長持續(xù)作用時間，從而本發(fā)明化合物可以每天用藥一次。
由大鼠血漿濃度檢測體內(nèi)持續(xù)作用時間為了研究口服本發(fā)明化合物后(與LY354740相比)LY354740的體內(nèi)作用時間，研究檢測了大鼠的LY354740血漿濃度。
成熟Fischer 344雄性大鼠(190-270g)購自Harlan Sprague-Dawley，Cumberland，IN，USA，讓其在研究箱內(nèi)適應(yīng)3天。在第4天，將受試化合物溶于緩沖水溶液(1mg/ml＝受試化合物/20mM磷酸二氫鉀，pH＝2)，口服給予單次劑量5mg/kg。在0.5小時和1小時，或者1小時和3小時通過眼眶后靜脈竇或心臟穿刺(最后時間點)收集血樣。在分析前將血漿樣品在蛋白酶抑制劑苯基甲基磺酰氟存在下于-20℃貯存。血漿樣品和內(nèi)標(biāo)化合物用固相萃取法預(yù)處理(SAX載體，甲醇/水/稀醋酸)。如下表2第二行所示，各受試化合物的LY354740血漿濃度(ng/ml)用LC/MS/MS測試，列出在0.5小時和1小時或者1小時和3小時取樣時間點的濃度之和。
如上表1和表2所示，體外研究顯示本發(fā)明化合物本身對mGlu2/3受體沒有明顯親合力。表明該化合物在大鼠和人體內(nèi)的藥性很可能反映本發(fā)明前體藥物轉(zhuǎn)化為母體分子LY354740，它再作用于mGlu2/3受體產(chǎn)生治療效果。此外，事實上當(dāng)口服給予大鼠時，顯示本發(fā)明化合物的LY354740血漿濃度為LY354740的15倍。這證明本發(fā)明化合物在體內(nèi)轉(zhuǎn)化為LY354740。
本發(fā)明化合物優(yōu)選配制后用藥。因此，本發(fā)明另一方面為藥用制劑，該制劑包括式I化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽以及藥學(xué)上可接受的載體、稀釋劑或賦形劑。本領(lǐng)域普通技術(shù)人員可以按照眾所周知的步驟制備藥用制劑。在制備本發(fā)明組合物中，活性成分通常與載體混合，或用載體稀釋或封裝于載體內(nèi)，并且可以為膠囊、小藥囊、紙或其它容器形式。當(dāng)載體用作稀釋劑，它可以為固體、半固體或液體材料，它為活性成分起媒介物、賦形劑或介質(zhì)作用。組合物形式可以為片劑、丸劑、粉劑、錠劑、小藥囊、扁囊劑、酏劑、混懸劑、乳劑、溶液劑、糖漿劑、煙霧劑、包含例如最多10％(重量)的活性化合物的軟膏、軟質(zhì)和硬質(zhì)明膠膠囊、栓劑、無菌注射溶液劑以及無菌包裝的粉劑。
合適的載體、賦形劑和稀釋劑的一些實例包括乳糖、葡萄糖、蔗糖、山梨糖醇、甘露糖醇、淀粉、樹膠、阿拉伯膠、磷酸鈣、藻酸鹽、西黃蓍膠、明膠、硅酸鈣、微晶纖維素、聚乙烯吡咯烷酮、纖維素、水糖漿、甲基纖維素、羥基苯甲酸甲酯、羥基苯甲酸丙酯、滑石粉、硬酯酸鎂和礦物油。制劑中還可以包括潤滑劑、潤濕劑、乳化劑和混懸劑、防腐劑、增甜劑或調(diào)味劑。使用本領(lǐng)域眾所周知的方法可以將本發(fā)明組合物配制為在患者用藥后提供快速、持續(xù)或延遲釋放活性成分的組合物。
組合物優(yōu)選配制為單位劑型，每一劑量包含從約5mg～約500mg活性成分，優(yōu)選包含約25mg～約300mg活性成分。本文使用的術(shù)語“活性成分”是指包含在式I范圍的化合物。
術(shù)語“單位劑型”是指完全分散的單元適合以單一劑量用于人類患者和其它哺乳動物，每一單元包含預(yù)先確定數(shù)量并適合產(chǎn)生所需治療效果的活性成分以及合適的藥學(xué)上可接受的載體、稀釋劑或賦形劑。
以下的實施例進(jìn)一步示例性說明本發(fā)明化合物及其合成方法。這些實施例并不是為了在任何方面限制本發(fā)明范圍，因此不應(yīng)該作這樣的解釋。所有實驗是在正壓干燥氮氣或氬氣下進(jìn)行。除非另有說明，所有的溶劑和試劑購自商業(yè)途徑并且原樣使用。無水四氫呋喃(THF)在使用前用鈉或二苯甲酮羰游基鈉蒸餾獲得。質(zhì)子核磁共振(1H NMR)譜用Bruker Avance II bay-500在500MHz、Bruker Avance Ibay-200在200MHz或Varian Inova在500MHz獲得。電霧化質(zhì)譜(ESI)在Agilent MSD/B儀器上用乙腈/醋酸銨水溶液作為流動相完成。自由原子轟擊質(zhì)譜(FABMS)在儀器VG ZAB-2SE上進(jìn)行。場解吸質(zhì)譜(FDMS)用VG 70SE或儀器Varian MAT 731進(jìn)行。旋光性用Perkin-Elmer 241旋光計檢測。在Waters Prep 500 LC的色譜分離通常用本文指出的溶劑的線性梯度完成。監(jiān)測反應(yīng)完成與否用薄層色譜法(TLC)。薄層色譜法用E.Merck Kieselgel 60 F254平板，5cm×10cm，0.25mm厚。斑點檢測結(jié)合使用UV和化學(xué)檢測(平板浸入鉬酸鈰銨溶液[75g鉬酸銨和4g硫酸鈰(IV)的500mL 10％硫酸水溶液]，然后用電烤盤加熱)?？焖偕V法按照Still等，Still，Kahn.和Mitra，J.Org.Chem.，43，2923(1978)的介紹進(jìn)行。碳、氫和氮的元素分析用ControlEquipment Corporation 440 Elemental Analyzer檢測，或由UniversidadComplutense Analytical Centre(Facultad de Farmacia，Madrid，Spain)完成。熔點用開放式玻璃毛細(xì)管在Gallenkamp熱空氣浴熔點儀或在BChi熔點儀檢測，熔點都未修正。
實施例中使用的縮寫、符號以及術(shù)語的含義如下。
Ac＝乙酰基Anal.＝元素分析Bn或Bzl＝芐基Bu＝丁基BOC＝丁氧基羰基calcd＝計算值D2O＝氧化氘DCC＝二環(huán)己基碳二亞胺DIBAL-H＝二異丁基氫化鋁DMAP＝二甲基氨基吡啶DMF＝二甲基甲酰胺DMSO＝二甲基亞砜EDC＝N-乙基-N’N’-二甲基氨基丙基碳化二亞胺Et＝乙基EtOH＝乙醇FAB＝快速原子轟擊(質(zhì)譜法)FDMS＝場解吸質(zhì)譜HOAt＝1-羥基-7-氮雜苯并三唑HOBt＝1-羥基苯并三唑HPLC＝高效液相色譜法HRMS＝高分辨率質(zhì)譜i-PrOH＝異丙醇
IR＝紅外線譜L＝升Me＝甲基MeOH＝甲醇MPLC＝中壓液相色譜Mp＝熔點MTBE＝叔丁基甲醚NBS＝N-溴代丁二酰亞胺NMR＝核磁共振Ph＝苯基p.o.＝口服用藥i-Pr＝異丙基Rochelle’s Salt＝酒石酸鈉鉀SM＝初始原料TBS＝叔丁基二甲硅烷基TEA＝三乙胺Temp.＝溫度TFA＝三氟乙酸THF＝四氫呋喃TLC＝薄層色譜法t-BOC＝叔丁氧基羰基制備和實施例的流程概述
制備1合成(1S，2S，5R，6S)-2-叔丁氧基羰基氨基-雙環(huán)[3.1.0]己烷-2，6-二羧酸 在1L燒瓶中裝入(1S，2S，5R，6S)-2-氨基-雙環(huán)[3.1.0]己烷-2，6-二羧酸一水合物(24.4g，0.12mol，1當(dāng)量)、二噁烷(200mL)和二碳酸二叔丁酯(52.4g，0.24mol，2.0當(dāng)量)。劇烈攪拌懸浮液，同時加入1N氫氧化鈉(420mL，3.5當(dāng)量)。將混合物攪拌2天，然后再加入2.0當(dāng)量二碳酸二叔丁酯，再將反應(yīng)物在室溫下攪拌3天。在反應(yīng)總共5天后，加入水(400mL)以溶解鹽。水層用乙酸乙酯(4×100mL)萃取，用6N鹽酸酸化至pH2。酸性水相用乙醚(6×200mL)萃取。合并的乙醚萃取液用水(250mL)和鹽水(250mL)洗滌。用硫酸鈉干燥后，真空除去溶劑獲得泡沫狀白色固體(26.4g)。
77％收率；mp 100-101℃[α]D25＝-41.1°(C＝1.0，MeOH)。
1H NMR(甲醇-d4)δ4.98(brs，1H)，2.44(dd，1H，J＝6.2，2.6Hz)，2.19-1.92(m，4H)，1.62(t，1H，J＝2.8Hz)，1.43(s，9H)，1.29(m，1H)。
13C NMR(甲醇-d4)δ175.6，175.2，158.2，60.1，34.6，31.9，28.4，27.2，25.6，20.6。
MS(電霧化)285.12。
制備2合成(1S，2S，5R，6S)-2-氨基-雙環(huán)[3.1.0]己烷-2，6-二羧酸二甲酯鹽酸鹽 將(1S，2S，5R，6S)-2-叔丁氧基羰基氨基-雙環(huán)[3.1.0]己烷-2，6-二羧酸(20g，0.07mol，1.0當(dāng)量)溶于210ml無水二甲基甲酰胺，在0℃、氮氣氛下，加入碳酸鉀(21.3g，0.154mol，2.2當(dāng)量)。15分鐘后，加入甲基碘(17.6ml，0.28mol，4.0當(dāng)量)。將反應(yīng)混合物緩慢地升至室溫，并在室溫下攪拌3小時。加入水(200ml)，水相用乙醚(4×75ml/每次)萃取。合并的有機相用冷水(4×50ml)洗滌，將水相再次用乙醚(2×50ml)萃取。有機相用硫酸鈉干燥后，真空蒸發(fā)，獲得泡沫狀固體((1S，2S，5R，6S)-2-叔丁氧基羰基氨基-雙環(huán)[3.1.0]己烷-2，6-二羧酸-2，6-二甲酯)(19.2g，87％收率)。
此化合物用150ml氯化氫氣體的飽和乙酸乙酯溶液稀釋，將混合物劇烈攪拌1小時(15分鐘內(nèi)出現(xiàn)白色沉淀)。濾出固體，用乙醚沖洗后高真空徹底干燥。
73％收率；mp 193-194℃。D25＝+22.2°(c＝1.0，MeOH)。
1H NMR(D2O)δ3.86(s，3H)，3.67(s，3H)，2.31-2.04(m，6H)，1.57(m，1H)。
13C NMR(甲醇-d4)δ171.9，170.2，65.6，52.8，51.2，32.4，29.9，28.5，26.2，20.7。
(1S，2S，5R，6S)-2-氨基-雙環(huán)[3.1.0]己烷-2，6-二羧酸二甲酯鹽酸鹽的備選合成法 溫度保持在2-20℃，在1小時內(nèi)將亞硫酰氯(807mL，11.1mol)加入到甲醇(9.5L)。溶液保持30分鐘，然后加入(1S，2S，5R，6S)-2-氨基-雙環(huán)[3.1.0]己烷-2，6-二羧酸一水合物(1.61kg，7.92mol)。所得溶液加熱至47℃，保持在47-50℃17小時。然后將約7.3L甲醇真空蒸餾(47-50℃，240-275mmHg)除去。剩余甲醇在大氣壓下與叔丁基甲醚(MTBE)共沸蒸餾除去[加入MTBE(10L)，除去8.5L；加入MTBE(10L)，除去8.5L；加入MTBE(8L)，除去5.1L]。在蒸餾期間，一種白色固體開始從溶液析出。完成蒸餾后，在所得漿狀物中加入MTBE(2L)，將漿狀物冷卻至22℃。濾出固體，用MTBE(2L)沖洗，真空干燥獲得1.94kg(98％)白色固體標(biāo)題化合物。
C10H16NO4Cl的元素分析計算值C，48.10；H，6.46；N，5.61；Cl，14.20。實測值C，47.88；H，6.25；N，5.57；Cl，14.52。(1S，2S，5R，6S)-2-氨基-雙環(huán)[3.1.0]己烷-2，6-二羧酸二甲酯鹽酸鹽與N-BOC-(L)-氨基酸的偶合反應(yīng)的一般步驟在氮氣氛下，將初始二甲酯鹽酸鹽(1.0當(dāng)量)、制備2實例的產(chǎn)物懸浮于無水二氯甲烷(0.1M溶液)。一次性加入相應(yīng)的N-BOC-氨基酸(1.5當(dāng)量)、N-乙基-N’，N’-二甲基氨基丙基碳化二亞胺(EDC，1.5當(dāng)量)和1-羥基苯并三唑(HOBt，1.5當(dāng)量)，接著用注射器加入三乙胺(1.0當(dāng)量)，最后加入二甲基氨基吡啶(DMAP，0.1當(dāng)量)。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌過夜，然后加入1N鹽酸(20ml/mmol)水解，用二氯甲烷(10ml/mmol)稀釋。水層用二氯甲烷(5ml/mmol)萃取，合并的有機層用1N鹽酸(10ml/mmol)洗滌兩次，最后用水和鹽水(10ml/mmol每次)洗滌。用硫酸鈉干燥并真空蒸發(fā)后，粗制殘余物用硅膠色譜法(用適當(dāng)?shù)南刺嵋海ǔ榧和?乙酸乙酯的混合物)提純。(1S，2S，5R，6S)-2-氨基-雙環(huán)[3.1.0]己烷-2，6-二羧酸二甲酯鹽酸鹽與N-BOC-氨基酸偶合反應(yīng)的備選方法在約1.5小時內(nèi)，將二環(huán)己基碳二亞胺(DCC)(1.1當(dāng)量)的二氯甲烷(4.0M溶液)溶液加入到攪拌下的制備2(1.0當(dāng)量)、三乙胺(1.0當(dāng)量)和N-叔丁氧基羰基-L-丙氨酸(1.1當(dāng)量)的二氯甲烷(1.0M溶液)混合物中。將所得混合物攪拌1-12小時，然后過濾。濾餅(二環(huán)己基脲)用二氯甲烷沖洗，濾液依次用0.1M NaHCO3、1.0N鹽酸洗滌。干燥(Na2SO4)有機相，過濾后濃縮獲得油狀標(biāo)題化合物。
實施例1合成(1S，2S，5R，6S)-2-[(2’S)-[(2’-叔丁氧基羰基氨基)-丙?；鵠氨基-雙環(huán)[3.1.0]己烷-2，6-二羧酸二甲酯 在氮氣氛下，將初始二甲酯鹽酸鹽(1.0當(dāng)量)、制備2產(chǎn)物懸浮于無水二氯甲烷(0.1M溶液)。一次性加入N-BOC-(L)-丙氨酸(1.5當(dāng)量)、N-乙基-N’，N’-二甲基氨基丙基碳化二亞胺(EDC，1.5當(dāng)量)和1-羥基苯并三唑(HOBt，1.5當(dāng)量)，接著用注射器加入三乙胺(1.0當(dāng)量)，最后加入二甲基氨基吡啶(DMAP，0.1當(dāng)量)。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌過夜，然后加入1N鹽酸(20ml/mmol)水解，用二氯甲烷(10ml/mmol)稀釋。水層用二氯甲烷(5ml/mmol)萃取，合并的有機層用1N鹽酸(10ml/mmol)洗滌兩次，最后用水和鹽水(10ml/mmol每次)洗滌。用硫酸鈉干燥并真空蒸發(fā)后，粗制殘余物用硅膠色譜法(己烷/乙酸乙酯的混合物)提純。
50％收率。泡沫狀白色固體。mp 51-52℃[α]D25＝-27.7(c＝0.52，CHCl3)。
1H NMR(CDCl3)δ7.28(brs，1H)，5.04(brd，1H，J＝7.6Hz)，4.16(m，1H)，3.74(s，3H)，3.66(s，3H)，2.49(dd，1H，J＝13.9，8.3Hz)，2.42(dd，1H，J＝6.3，2.8Hz)，2.18-1.89(m，3H)，1.70(t，1H，J＝2.9Hz)，1.45(s，9H)，1.33(d，3H，J＝7.0Hz)，1.19(m，1H)。
13C NMR(CDCl3)δ172.8，172.6，172.6，155.7，80.2，66.3，52.6，51.8，49.5，34.4，32.0，28.2，28.1，26.6，21.1，17.6。
(1S，2S，5R，6S)-2-[(2’S)-(2’-叔丁氧基羰基氨基)-丙?；鵠氨基-雙環(huán)[3.1.0]己烷-2，6-二羧酸二甲酯的備選合成法在約1.5小時內(nèi)，將二環(huán)己基碳二亞胺(DCC)(1.1當(dāng)量)的二氯甲烷(4.0M溶液)溶液加入到攪拌下的制備2實例(1.0當(dāng)量)、三乙胺(1.0當(dāng)量)和N-叔丁氧基羰基-L-丙氨酸(1.1當(dāng)量)的二氯甲烷(1.0M溶液)混合物中。將所得混合物攪拌1-12小時，然后過濾。濾餅(二環(huán)己基脲)用二氯甲烷沖洗，濾液依次用0.1M NaHCO3、1.0N鹽酸洗滌。干燥(Na2SO4)有機相，過濾后濃縮獲得油狀標(biāo)題化合物。
實施例2合成(1S，2S，5R，6S)-2-[(2’S)-[(2’-叔丁氧基羰基氨基)-丙?；鵠氨基-雙環(huán)[3.1.0]己烷-2，6-二羧酸 將2M NaOH溶液(5.45L，10.9mol)加入到(1S，2S，5R，6S)-2-[(2’S)-(2’-叔丁氧基羰基氨基)-丙?；鵠氨基-雙環(huán)[3.1.0]己烷-2，6-二羧酸二甲酯(4.52mol，粗制)的THF(2.8L)溶液。將所得混合物在室溫下攪拌3小時，然后用CH2Cl2(2×3L)萃取。然后將乙酸乙酯(5L)和四氫呋喃(3L)加入水相。在攪拌下，將濃HCl(970mL)加入混合物直至pH＝2。有機相用硫酸鎂干燥，過濾。然后水相用乙酸乙酯(5L)萃取。有機相用硫酸鎂干燥，過濾，與以前的有機相合并。將合并的有機物濃縮為柔軟固體。然后加入乙酸乙酯，將混合物濃縮為柔軟固體。再次加入乙酸乙酯(3.5L)。將混合物濃縮直至呈現(xiàn)為自由流動的懸浮液。然后加入庚烷(1.8L)，漿狀物在室溫下攪拌15小時。濾出固體，用庚烷(3L)洗滌，然后真空干燥獲得標(biāo)題化合物。
獲得1.36kg(84％)約為85∶15的旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體的白色固體混合物。D2525-24.8(C1.0，MeOH)1H NMR (DMSO-d6)δ12.20(s，2H)，8.40(s，0.85H)，8.36(s，0.15H)，6.69(d，J＝8.2Hz，0.85H)，6.33(br d，0.15H)，3.99(五重峰，J＝7.2Hz，0.85H)，3.84(br m，0.15H)，2.18-2.13(m，2H)，1.91-1.84(m，1H)，1.82-1.75(m，2H)，1.46(br s，0.85H)，1.43(br s，0.15H)，1.35(s，9H)，1.23-1.15(m，1H)，1.13(d，J＝6.9Hz，3H)。
13C NMR(CD3OD)δ176.4，176.0(2C)，157.5，80.5，67.3(次要旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體)，67.2(主要旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體)，50.9，35.6，32.8，29.3，28.7，27.4，22.1，18.5。
MS(EI)C16H28N3O7(M+NH4+)計算值374.20，實測值374.24m/z。
(1S，2S，5R，6S)-2-[(2’S)-(2’-叔丁氧基羰基氨基)-丙酰基]氨基-雙環(huán)[3.1.0]己烷-2，6-二羧酸的備選合成法 將(1S，2S，5R，6S)-2-氨基-雙環(huán)[3.1.0]己烷-2，6-二羧酸一水合物(85g，418mmol)和MeOH(850mL)的溶液冷卻至10℃。以使溫度不超過20℃的速率加入亞硫酰氯(199g，1.67mol)。然后將溶液加熱至50℃，攪拌6小時。一旦反應(yīng)完成，將溶液冷卻至室溫，在減壓下于20-30℃濃縮至約170mL總體積。加入水(850mL)，用1.0N NaOH(300mL)將溶液pH調(diào)節(jié)至約pH2.0。減壓濃縮溶液直至溫度達(dá)到約40℃，然后加入二氯甲烷(850mL)，用1.0N NaOH(180mL)調(diào)節(jié)溶液pH至pH8。分離出各相，水相用CH2Cl2(425ml)萃取。將包含相應(yīng)二甲酯的合并有機相濃縮至約425mL總體積，保存用于進(jìn)一步加工。
在一個單獨反應(yīng)容器中，將N-叔丁氧基羰基-L-丙氨酸(83.2g，439mmol)和4-甲基嗎啉(44.4g，439mmol)的CH2Cl2(712mL)溶液冷卻至-5～-10℃，然后以使溫度不超過-5℃的速率加入氯甲酸異丁酯(59.9g，439mmol)。一旦加入完畢，將溶液攪拌15分鐘。同時，將CH2Cl2(20mL)加入到先前制備的二甲酯溶液，將此溶液冷卻至-5℃。然后將二甲酯溶液(445mL)加入異丁基混合型酸酐(isobutyl mixedanhydride)混合物。除去冷卻浴，將相應(yīng)的混合物攪拌30分鐘。然后加入1.0N HCl溶液(445mL)。分離出各相，有機相用1.0N HCl(445mL)洗滌。將有機相濃縮至約180mL總體積。然后加入THF(450mL)，將所得溶液濃縮至約180mL總體積。在該溶液中加入1.0NNaOH(1.67L，1.67mol)。將所得混合物加熱至40℃，攪拌1.5小時后冷卻至室溫。加入乙酸乙酯(2.4L)，用濃HCl(150mL)調(diào)節(jié)水相pH至pH2.1。分離出各相，水相用乙酸乙酯(800mL)萃取。合并的有機相用硫酸鎂干燥，過濾后用EtOAc(2×320mL)洗滌。然后將所得溶液濃縮至約400mL總體積。加入乙酸乙酯(800mL)，將溶液濃縮至400mL。再次重復(fù)加入乙酸乙酯/濃縮過程，然后加入庚烷(640mL)。將所得混合物攪拌2小時，過濾后用2∶1的庚烷-乙酸乙酯混合物(2×320mL)洗滌獲得115.5g(78％收率)白色固體(1S，2S，5R，6S)-2-[(2’S)-(2’-叔丁氧基羰基氨基)-丙?；鵠氨基-雙環(huán)[3.1.0]己烷-2，6-二羧酸。
實施例3合成(1S，2S，5R，6S)-2-[(2’S)-(2’-氨基)-丙?；鵠氨基-雙環(huán)[3.1.0]己烷-2，6-二羧酸鹽酸鹽 乙酸乙酯(500mL)溶液中加入HCl(79.0g，2.16mol)。然后將所得HCl溶液以使溫度不超過25℃的速率加入(1S，2S，5R，6S)-2-[(2’S)-(2’-叔丁氧基羰基氨基)-丙?；鵠氨基-雙環(huán)[3.1.0]己烷-2，6-二羧酸(100g，281mmol)的乙酸乙酯(500mL)漿狀物。將所得混合物攪拌3.5小時，然后過濾獲得82.6g無定形白色固體(1S，2S，5R，6S)-2-[(2’S)-(2’-氨基)-丙?；鵠氨基-雙環(huán)[3.1.0]己烷-2，6-二羧酸鹽酸鹽。然后將此白色固體加入丙酮(290mL)和水(57mL)。將所得混合物加熱至48-52℃，加入水(6.4mL)直到所有的固體溶解。在約1小時內(nèi)將丙酮(2.2L)加入到所得溶液。當(dāng)開始加入丙酮時，除去加熱外套。加畢，將混合物冷卻至0～-10℃，攪拌4小時。然后過濾混合物，用冷丙酮(75mL)洗滌獲得(1S，2S，5R，6S)-2-[(2’S)-(2’-氨基)-丙?；鵠氨基-雙環(huán)[3.1.0]己烷-2，6-二羧酸鹽酸鹽，將其在40℃真空干燥獲得76.6g(93％收率)白色結(jié)晶固體標(biāo)題化合物。
72％收率。白色結(jié)晶固體。mp＞250℃，分解。D25＝-7.80(C＝1.0，MeOH)。
1H NMR(甲醇-d4)δ3.96(q，1H，J＝7.0Hz)，2.47(dd，1H，J＝6.3，2.7Hz)，2.37(dd，1H，J＝13.6，8.2Hz)，2.18-1.92(m，3H)，1.66(t，1H，J＝3.0Hz)，1.53(d，3H，J＝7.0HZ)，1.46-1.34(m，1H)。
13C NMR(甲醇-d4)δ175.2，174.7，170.2，66.4，49.0，36.6，32.0，28.5，26.3，21.2，16.6。
80％收率。白色固體。
實施例4合成(1S，2S，5R，6S)-2-[(2’S)-(2’-氨基)-丙?；鵠氨基-雙環(huán)[3.1.0]己烷-2，6-二羧酸甲磺酸鹽 將(1S，2S，5R，6S)-2-[(2’S)-(2’-叔丁氧基羰基氨基)-丙?；鵠氨基-雙環(huán)[3.1.0]己烷-2，6-二羧酸(1.07g，3.00mmol)、甲磺酸(584μL，9.00mmol)和二噁烷(10mL)的溶液攪拌48小時。過濾混合物，干燥獲得粗制的白色無定形固體(1S，2S，5R，6S)-2-[(2’S)-(2’-氨基)-丙?；鵠氨基-雙環(huán)[3.1.0]己烷-2，6-二羧酸甲磺酸鹽(1.05g)。將此固體樣品(1.0g)溶于MeOH(10mL)。將溶液濃縮至3.3g總重量，加入晶種。然后在15分鐘內(nèi)將乙酸乙酯(10mL)加入混合物。將混合物攪拌30分鐘，過濾后真空干燥獲得830mg白色結(jié)晶固體的標(biāo)題化合物。
收率78％1H NMR(CD3OD)δ3.96(q，J＝7.1Hz，1H)，2.71(s，3H)，2.45(dd，J＝6.4，2.7Hz，1H)，2.38(dd，J＝13.9，8.4Hz，1H)，2.20-2.08(m，1H)，2.01-1.93(m，2H)，1.67(t，J＝2.9Hz，1H)，1.52(d，J＝7.0Hz，3H)，1.46-1.35(m，1H)13C NMR(CD3OD)δ176.3，175.7，171.2，67.4，50.0，39.5，35.7，33.1，29.5，27.4，22.2，17.6。
C12H20N2O8S元素分析的計算值C，40.90；H，5.72；N，7.95。
實測值C，40.81；H，5.69；N，7.83。
實施例5合成(1S，2S，5R，6S)-2-[(2’S)-(2’-氨基)-丙?；鵠氨基-雙環(huán)[3.1.0]己烷-2，6-二羧酸 將(1S，2S，5R，6S)-2-[(2’S)-(2’-氨基)-丙?；鵠氨基-雙環(huán)[3.1.0]己烷-2，6-二羧酸鹽酸鹽(1.0g，3.42mmol)溶于水(1mL)，加入1.0N NaOH(3.42mL，3.42mmol)。將溶液保存于冰箱24小時。溶液保持澄清。加入丙酮(2mL)，然后將溶液貯存于冰箱16小時。從溶液析出白色固體，不能攪拌混合物。加入丙酮(4mL)，將混合物在室溫攪拌，然后過濾并干燥獲得630mg包含2-4％NaCl的白色結(jié)晶固體標(biāo)題化合物。
收率72％1H NMR(CD3OD)δ3.93(q，J＝7.1Hz，1H)，2.48(dd，J＝6.6，2.9Hz，1H)，2.32(dd，J＝13.5，8.4Hz，1H)，2.20-2.08(m，1H)，2.01-1.90(m，2H)，1.61(t，J＝2.9Hz，1H)，1.51(d，J＝7.0Hz，3H)，1.48-1.33(m，1H)13C NMR(CD3OD)δ176.9(2C)，171.1，68.0，50.1，35.9，33.2，29.7，27.3，22.5，17.6。
權(quán)利要求
1.一種式I化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽， 其中R13、R14和R17為氫。
2.權(quán)利要求1要求保護(hù)的式I化合物的藥學(xué)上可接受的鹽，所述鹽為酸加成鹽，它用提供藥學(xué)上可接受的陰離子的酸制備，或者對于包含酸性部分的化合物來說，所述鹽為用提供藥學(xué)上可接受的陰離子的堿制備的鹽。
3.權(quán)利要求2要求保護(hù)的式I化合物的藥學(xué)上可接受的鹽，它為(1S，2S，5R，6S)-2-[(2’S)-(2’-氨基)-丙?；鵠氨基-雙環(huán)[3.1.0]己烷-2，6-二羧酸鹽酸鹽。
4.權(quán)利要求2要求保護(hù)的式I化合物的藥學(xué)上可接受的鹽，它為(1S，2S，5R，6S)-2-[(2’S)-(2’-氨基)-丙?；鵠氨基-雙環(huán)[3.1.0]己烷-2，6-二羧酸甲磺酸鹽。
5.一種藥用制劑，所述制劑包括權(quán)利要求1-4任一項的式I化合物(或其藥學(xué)上可接受的鹽)和藥學(xué)上可接受的載體、稀釋劑或賦形劑。
6.一種制備權(quán)利要求1-4任一項要求保護(hù)的式I化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽的方法，所述方法包括為了獲得式I化合物，使式IV化合物去保護(hù)， 其中Rm為氮保護(hù)基團(tuán)；R13和R14為羧基保護(hù)基團(tuán)；然后，對于任何以上步驟，當(dāng)官能團(tuán)被保護(hù)基團(tuán)保護(hù)時，除去該保護(hù)基團(tuán)；之后，對于任何以上步驟，當(dāng)需要式I化合物的藥學(xué)上可接受的鹽時，所述鹽通過使堿性形式的所述式I化合物與提供生理上可接受的平衡離子的酸反應(yīng)獲得；或者對于含酸性部分的式I化合物而言，由酸性形式的所述式I化合物與提供藥學(xué)上可接受的陽離子的堿反應(yīng)獲得，或者通過任何其它常規(guī)方法獲得。
7.一種影響患者cAMP結(jié)合的代謝性谷氨酸受體的方法，所述方法包括給予需要調(diào)節(jié)興奮性氨基酸神經(jīng)傳遞的患者藥學(xué)有效量的權(quán)利要求1-4任一項的化合物。
8.一種給予有效量的R13和R14都為氫的式II化合物(二酸)的方法，所述方法包括給予需要調(diào)節(jié)興奮性氨基酸神經(jīng)傳遞的患者藥學(xué)有效量的權(quán)利要求1-4任一項的化合物。
9.一種治療患者神經(jīng)系統(tǒng)疾病的方法，所述方法包括給予其需要治療的患者藥學(xué)有效量的權(quán)利要求1-4任一項的化合物。
10.權(quán)利要求9的方法，其中所述神經(jīng)系統(tǒng)疾病為心臟旁路手術(shù)或移植后的大腦缺陷；腦缺血；脊髓損傷；頭部外傷；阿耳茨海默氏??；亨廷頓氏舞蹈?。患∥s性脊髓側(cè)索硬化；AIDS型癡呆；產(chǎn)期低氧癥；低血糖性神經(jīng)元損害；眼病和視網(wǎng)膜??；認(rèn)知障礙；特發(fā)性以及藥物誘發(fā)性帕金森氏病；肌肉痙攣；偏頭痛；尿失禁；藥物耐受性、戒斷以及中斷；戒煙；嘔吐；腦水腫；慢性疼痛；睡眠紊亂；驚厥；Tourette氏綜合癥；注意力不集中癥或遲發(fā)性運動障礙。
11.權(quán)利要求10的方法，其中所述神經(jīng)系統(tǒng)疾病為藥物耐受性、戒斷以及中斷或戒煙。
12.一種治療患者精神疾病的方法，所述方法包括給予其需要治療的患者藥學(xué)有效量的權(quán)利要求1-4任一項的化合物。
13.權(quán)利要求12的方法，其中所述精神疾病為精神分裂癥、焦慮癥和相關(guān)疾病、抑郁癥、雙相精神病、精神病或強迫性障礙。
14.權(quán)利要求13的方法，其中所述精神疾病為焦慮癥和相關(guān)疾病。
15.一種式IV化合物， 其中Rm為氮保護(hù)基團(tuán)；R11為CO2R14，R12為氫或氟；或者R11為氫或氟，R12為CO2R14；R13和R14為羧基保護(hù)基團(tuán)。
16.權(quán)利要求21要求保護(hù)的式IV化合物，其中Rm為叔丁氧基羰基，R11為CO2R14；R13和R14都為甲基；R12為氫。
17.權(quán)利要求1-4任一項要求保護(hù)的式I化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽用作藥物。
18.式I化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽在制備用于治療神經(jīng)系統(tǒng)疾病或精神疾病的藥物中的用途。
19.一種新型式I化合物，該化合物實質(zhì)上為以上任何實施例介紹的式I化合物。
20.一種影響哺乳動物cAMP結(jié)合的代謝性谷氨酸受體的方法，所述方法包括給予需要調(diào)節(jié)興奮性氨基酸神經(jīng)傳遞的哺乳動物藥學(xué)有效量的式I化合物，該化合物實質(zhì)上為以上任何實施例介紹的式I化合物。
21.一種制備新型式I化合物的方法，所述化合物實質(zhì)上為以上任何實施例介紹的式I化合物。
全文摘要
本發(fā)明涉及合成的根據(jù)式(I)的興奮性氨基酸前體藥物及其制備方法。本發(fā)明還涉及使用所述化合物以及包含該化合物的藥用組合物治療神經(jīng)系統(tǒng)疾病和精神病的方法。
文檔編號A61P1/08GK1486298SQ01821966
公開日2004年3月31日 申請日期2001年12月14日 優(yōu)先權(quán)日2001年1月11日
發(fā)明者D·S·科菲, J·A·蒙, S·W·彼得森, C·佩德雷加爾－特爾切羅, D S 科菲, 呂準(zhǔn)傭 特爾切羅, 彼得森, 蒙 申請人:伊萊利利公司