專利名稱：作為內(nèi)皮肽轉(zhuǎn)化酶抑制劑的吡咯烷衍生物的制作方法
吡咯烷衍生物本發(fā)明涉及這樣一些化合物，它們可用作金屬蛋白酶例如鋅蛋白酶，特別是鋅水解酶的抑制劑，并且它們可有效地預(yù)防和治療與血管收縮的增加的發(fā)生率有關(guān)的疾病。這些疾病的例子是高血壓、冠心病(coronarydisorders)、心機(jī)能不全、腎和心肌缺血、腎機(jī)能不全、透析、腦缺血、心肌梗塞、偏頭疼、蛛網(wǎng)膜下出血、Raynaud綜合癥和肺動(dòng)脈高血壓。另外，該化合物還用作細(xì)胞生長抑制劑和腦保護(hù)劑，用于抑制移植排斥、用于器官保護(hù)和用于治療眼科疾病。
內(nèi)皮素是一類肽，它們存在有三種同種型ET-1，ET-2，和ET-3，每一種均由一種不同的基因編碼。1988年Yanagisawa(Yanagisawa M；Kurihara H；Kimura S；Tomobe Y；Kobayashi M；Mitsui Y；Yazaki Y；Goto K；Masaki T一種新的由血管內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生的強(qiáng)效血管收縮肽[參見注釋].NATURE(1988 Mar 31)，332(6163)，411-5.)最早在豬內(nèi)皮細(xì)胞的條件培養(yǎng)基中發(fā)現(xiàn)它們?；钚訣Ts是具有兩個(gè)分子內(nèi)二硫鍵的21個(gè)氨基酸的肽。它們由203到212個(gè)氨基酸的前原蛋白質(zhì)產(chǎn)生，該前原蛋白質(zhì)經(jīng)弗林蛋白酶樣內(nèi)肽酶加工而形成無生物活性的大-內(nèi)皮素(大-ET)。大-ETs經(jīng)氨基酸21和22之間的水解切割被特異性地加工為成熟ETs，氨基酸21和22在大-ET-1和大-ET-2中是Trp21-Val22，在大-ET-3中是Trp21-Ile22。早在1988年就推測(cè)一種特定的金屬蛋白酶負(fù)責(zé)這種特定的切割。1994年，從牛腎上腺純化和克隆到ECE-1(內(nèi)皮肽轉(zhuǎn)化酶-1)(XuD，Emoto N，Giaid A，Slaughter C，Kaw S，de Witt D，Yanagisawa MECE-1一種催化大內(nèi)皮素-1蛋白水解活化作用的膜結(jié)合金屬蛋白酶.Cell(1994)78473-485.)。
ECE-1是一種II型膜結(jié)合鋅-內(nèi)肽酶，中性pH對(duì)其最適宜，并且具有一個(gè)鋅結(jié)合基元HExxHx(＞20)E。它屬于M13亞家族，具有一個(gè)較大的681個(gè)氨基酸的含有活性位點(diǎn)的胞外域。M13家族的其它成員有NEP24.11(中性內(nèi)肽酶)，PEX，磷酸鹽調(diào)節(jié)的中性內(nèi)肽酶，以及最近才報(bào)道過的作為大-ET-3加工酶的Kell血型蛋白。人源M13家族成員的特征在于較大的分子量(＞80kDa)、若干保守的二硫鍵和復(fù)雜的糖基化模式。NEP的結(jié)構(gòu)最近已有報(bào)道(Oefner等，J.Mol.Biol.2000，296，341-349)。ECE和相關(guān)的人M13蛋白酶的催化域比基質(zhì)金屬蛋白酶(MMPs)的成員明顯要大得多(＞650個(gè)氨基酸)。不象MMPs家族屬于蛋氨酸鋅蛋白(metzincins)，表現(xiàn)典型的HExxHxxGxxH模式，M13家族成員是包含HExxHx(＞20)E模式的谷氨酸鋅蛋白(gluzincins)。這兩個(gè)家族在催化域的大小、結(jié)構(gòu)和配體的鋅配位模式方面明顯不同。這兩個(gè)家族的活性位點(diǎn)表現(xiàn)出明顯的差異，其顯然影響著抑制劑的種類和潛在的選擇性。
本發(fā)明的一方面涉及通式I的化合物 其中R1為氫，烷基羰基，或芳基羰基；R2為烷基，烷基環(huán)烷基，烷基環(huán)烷基烷基，環(huán)烷基，鹵代烷基，羧基烷基，氨基烷基，二烷基氨基烷基，烷氧基烷基，烷氧基羰基烷基，炔基(alkinyl)，芳基，芳基烷基，芳基烷基(烷氧基羰基)烷基，芳基羰基烷基，芳氧基烷基，芳基烯基，芳基(烷氧基羰基)烷基，雜芳基，雜芳基烷基，雜環(huán)基或雜環(huán)基烷基；A為-C(O)-R3，-CH(OH)-R4，或-C(O)-NR5R6，其中R3和R4獨(dú)立地選自(are independently form the group consisting of)烷基，芳基，芳基炔基，芳基烷基，和芳基烯基；R5為氫，烷基，環(huán)烷基，環(huán)烷基烷基，羧基烷基，或芳基烷基；R6為烷基，烷基羰基烷基，氰基烷基，羥基烷基，羥基烷基-(羥基烷基)，烷氧基羰基烷基，芳基烷基，芳基羰基烷基，芳基氨基羰基烷基，芳基(烷基)氨基羰基烷基，氨基羰基烷基，芳基，芳基烷基，雜芳基，雜芳基烷基，雜環(huán)基，環(huán)烷基，環(huán)烷基烷基，或羧基烷基，或R6選自式IIa，IIb，和IIc； 或者A的-C(O)-NR5R6中的-NR5R6代表5或6元飽和環(huán)，任選被以下基團(tuán)取代羧基，烷基氧羰基，羥基，烷氧基羰基烷氧基，苯基烷基，或苯基烷氧基羰基；R7為氫，烷基，烯基，烷基硫烷基，芳基，雜芳基，羧基烷基，羧基，烷氧基羰基烷基，芳基烷基，或雜芳基烷基；或式III的化合物 R7A為氫或烷基；R8為-OR9或-NR10R11，其中R9為氫，烷基，芳基烷基；R10為氫或烷基；R11為烷基，芳基，雜芳基，芳基烷基，或-NR10R11代表5或6元環(huán)，任選被以下基團(tuán)取代羧基，烷基氧羰基，羥基，烷氧基羰基烷氧基，苯基烷基，或苯基烷氧基羰基；R12為烷基，芳基，或芳基烷基；Y為-O-，-O-S(O2)-，-O-C(O)-或-O-C(O)-NH-；m為0，1，或2；X為-SO2，-CO-，-C(O)O-，-SO2NH-，或-C(O)NR13-其中R13為氫，烷基，芳基、或羧基烷基；
以及其二聚體形式，和/或其藥用酯，和/或其藥用鹽。
術(shù)語″烷基″，單獨(dú)或組合，指含有最多7個(gè)，優(yōu)選最多4個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基，例如甲基，乙基，n-丙基，2-甲基丙基(異-丁基)，1-甲基乙基(異-丙基)，n-丁基，和1，1-二甲基乙基(t-丁基)。
術(shù)語″羧基″指-C(O)OH基團(tuán)。
術(shù)語″羰基″指-C(O)-基團(tuán)。
術(shù)語″鹵素″指基團(tuán)氟，溴，氯和碘。
術(shù)語″烯基″指定義烷基的烴鏈具有至少一個(gè)烯屬雙鍵(olefinicdouble bond)(包括例如，乙烯基，烯丙基和丁烯基)。
術(shù)語″炔基(alkinyl)″指定義烷基的烴鏈具有至少一個(gè)烯屬三鍵(olefinic triple bond)包括例如丙炔基，丁炔-(1)-基，等)。
術(shù)語″烷氧基″，單獨(dú)或組合，指烷基醚基，其中術(shù)語“烷基”含義如前所述，例如甲氧基，乙氧基，n-丙氧基，異丙氧基，n-丁氧基，異丁氧基，仲丁氧基，叔丁氧基等。
術(shù)語″烷氧基羰基″指式-C(O)Rc的基團(tuán)，其中Rc為前所定義的烷氧基。
術(shù)語″羥基″指基團(tuán)-OH，術(shù)語″氰基″指基團(tuán)-CN。
術(shù)語″羥基烷基″指被羥基取代的前面定義的烷基。
術(shù)語″硫烷基″和″氰基烷基″指分別被-SH基或-CN基取代的前面定義的烷基。
術(shù)語″鹵代烷基″指被一到三個(gè)鹵原子，優(yōu)選氟取代的前面定義的烷基，例如三氟甲基，2，2，2-三氟乙基，等。
術(shù)語″烷基硫烷基″指式烷基-S-烷基的基團(tuán)。
″羧基烷基″指被HOOC-基取代的前面定義的低級(jí)-烷基。
術(shù)語″烷基羰基″，單獨(dú)或組合，指來源于烷烴羧酸的?；赐榛?C(O)-，例如乙酰基，丙酰基，丁?；祯；?，4-甲基戊?；?。
術(shù)語″環(huán)烷基″指具有3-8，優(yōu)選3-6個(gè)碳原子的飽和的、環(huán)烴基，即環(huán)丙基，環(huán)丁基，環(huán)戊基和環(huán)己基等。
術(shù)語″氨基″指基團(tuán)-NH2。
R2的術(shù)語″芳基″-單獨(dú)或組合，指芳香碳環(huán)基，即6或10元芳香的或部分的芳香環(huán)，即苯基，萘基，四氫萘基，芴基或聯(lián)苯基，優(yōu)選苯基或萘基，最優(yōu)選萘基。芳基，特別是苯基，任選地被獨(dú)立地選自以下基團(tuán)的一個(gè)或多個(gè)基團(tuán)取代鹵素優(yōu)選氟，烷基，烷氧基，單-或二烷基氨基，羧基，烷氧基，和烷基羰基氨基。
R2的術(shù)語″雜芳基″單獨(dú)或組合，指具有5到10個(gè)，優(yōu)選5到6個(gè)環(huán)原子的芳香單-或雙環(huán)基，其含有一到三個(gè)雜原子，優(yōu)選一個(gè)雜原子，例如獨(dú)立地選自氮，氧或硫。雜芳基的例子有噻吩基，異噁唑基，噻唑基，吡啶基，吡咯基，咪唑基，四唑基，優(yōu)選噻吩基。任選地，雜芳基可以獨(dú)立地被以下基團(tuán)單-，二-或三-取代烷基，烷基羰基，鹵素優(yōu)選氟，烷氧基羰基，羥基，氨基，烷基氨基，二烷基氨基，羧基，烷氧基羰基烷基，優(yōu)選烷基。優(yōu)選的雜芳基是噻吩基。
R1和R3-R12的術(shù)語″芳基″-單獨(dú)或組合，指芳香碳環(huán)基，即6或10元芳香環(huán)或部分芳香環(huán)，例如苯基，萘基或四氫萘基，優(yōu)選苯基。芳基任選地被獨(dú)立地選自下列基團(tuán)的一個(gè)或多個(gè)基團(tuán)取代鹵素優(yōu)選氟，烷氧基羰基例如甲基羰基，烷基氧羰基烷氧基，羧基，羧基烷氧基，氰基，烷基，烷氧基，苯基，苯氧基，苯基烷基，苯基烷氧基，三氟甲基，三氟甲氧基，羥基，烷基酰氨基，例如乙酰氨基，硝基，烷基磺?；缂谆酋；?yōu)選的取代基是氟，羧基，烷基氧羰基，羥基，羥基烷基，烷氧基羰基烷氧基，羧基烷基，和羧基烷氧基。
術(shù)語″芳氧基″指經(jīng)氧基與母結(jié)構(gòu)結(jié)合的前面定義的芳基，即芳基-O-。
R3和R4-R10的術(shù)語″雜芳基″-單獨(dú)或組合，指具有5-10，優(yōu)選5-6個(gè)環(huán)原子的芳香單-或雙環(huán)基，其含有一到三個(gè)雜原子，優(yōu)選一個(gè)雜原子，例如獨(dú)立地選自氮，氧或硫。雜芳基的例子有噻吩基，異噁唑基，噻唑基，吡啶基，吡咯基，咪唑基，四唑基，吲哚基，苯并咪唑基，噁二唑基，優(yōu)選吡啶基，異噁唑基，苯并二氧雜環(huán)戊烯基和噻唑基，優(yōu)選吲哚基，四唑基，苯并咪唑基，噁二唑基，和苯并二氧雜環(huán)戊烯基。任選地，雜芳基可以獨(dú)立地被以下基團(tuán)單-，二-或三-取代鹵素，烷基，烷基羰基，烷氧基羰基，羥基，氨基，烷基氨基，二烷基氨基，羧基，烷氧基羰基烷基，優(yōu)選烷基或鹵素，鹵素優(yōu)選氟。
術(shù)語″雜環(huán)基″-單獨(dú)或組合，指具有5-10，優(yōu)選5-6個(gè)環(huán)原子的非芳香單-或雙環(huán)基，其含有一到三個(gè)雜原子，優(yōu)選一個(gè)雜原子，例如獨(dú)立地選自氮，氧或硫。任選地，雜環(huán)可以被獨(dú)立地選自以下基團(tuán)的一個(gè)基團(tuán)取代鹵素，烷基，烷氧基，氧羧基(oxocarboxy)，烷氧基羰基等，和/或在仲氮原子(即-NH-)上被烷基，芳基烷氧基羰基，烷基羰基取代，或在叔氮原子(即＝N-)上被環(huán)氧(oxido)取代。雜環(huán)基的例子是嗎啉基，吡咯烷基，哌啶基等。
術(shù)語″二聚體型″指這樣一種化合物，其中式I的兩個(gè)相同化合物的兩個(gè)R1基被一個(gè)共同的單鍵取代，或者其中R1是谷胱甘肽-S-或半胱氨酸-S-，或其酯和/或其烷基羰基或芳基羰基衍生物，例如乙?；腚装彼?S-或苯甲酰基半胱氨酸-S-，優(yōu)選谷胱甘肽-S-，半胱氨酸-S-，乙?；腚装彼?S-或苯甲?；腚装彼?S-。
術(shù)語″藥用鹽″指保留游離堿或游離酸生物有效性和特性的鹽，它們并非生物學(xué)上或者其它方面上不合需要的。這些鹽是通過與無機(jī)酸例如鹽酸、氫溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等和有機(jī)酸例如乙酸、丙酸、羥基乙酸、丙酮酸、oxylic acid、馬來酸、丙二酸、琥珀酸、反丁烯二酸、酒石酸、檸檬酸、苯甲酸、肉桂酸、苯基乙醇酸、甲磺酸、乙磺酸、p-甲苯亞磺酸、水楊酸、N-乙?；腚装彼岬刃纬傻?。另外這些鹽可以通過向游離酸加成無機(jī)堿或有機(jī)堿制備。來源于無機(jī)堿的鹽包括但不限于，鈉鹽、鉀鹽、鋰鹽、銨鹽、鈣鹽、鎂鹽等。來源于有機(jī)堿的鹽包括但不限于，伯胺、仲胺和叔胺鹽，取代的胺包括天然取代的胺，環(huán)胺和堿離子交換樹脂，例如異丙胺、三甲胺、二乙胺、三乙胺、三丙胺、乙醇胺、賴氨酸、精氨酸、N-乙基哌啶，哌啶，聚乙烯亞胺(polymine)樹脂等。
″藥用酯″指通式(I)的化合物可以在功能基團(tuán)上被衍生，得到能夠在體內(nèi)轉(zhuǎn)化恢復(fù)成為原化合物的衍生物。這些化合物的例子包括生理可接受和代謝不穩(wěn)定的酯衍生物，例如甲氧基甲基酯，甲基硫甲基酯和新戊酰氧基甲基酯。另外，通式(I)化合物的任何生理可接受的等價(jià)物、在體內(nèi)能夠產(chǎn)生通式(I)原化合物的類似的代謝不穩(wěn)定酯在本發(fā)明范圍內(nèi)。
式(I)化合物用于抑制哺乳動(dòng)物金屬蛋白酶活性，尤其是鋅水解酶活性。更具體地說，式(I)化合物用作治療和預(yù)防與內(nèi)皮素-轉(zhuǎn)化酶(ECE)活性導(dǎo)致的疾病有關(guān)的病癥的藥物。對(duì)該酶的抑制將在治療以下疾病中有用，心肌缺血、充血性心力衰竭、心律不齊、高血壓、肺動(dòng)脈高血壓、哮喘、腦血管痙攣、蛛網(wǎng)膜下出血、先兆子癇、腎病、動(dòng)脈硬化癥、Buerger’s癥、Takayasu’s關(guān)節(jié)炎、糖尿病并發(fā)癥、肺癌、前列腺癌、胃腸道失調(diào)(gastrointestinal disorders)、內(nèi)毒素休克、和敗血病，以及用于傷口愈合和控制月經(jīng)、青光眼。另外，該化合物還可用作細(xì)胞生長抑制劑和腦保護(hù)劑，用于抑制移植排斥、用于器官保護(hù)，以及用于治療眼科疾病。
更具體地說，本發(fā)明涉及式(I)的化合物 其中R1為氫，烷基羰基，或芳基羰基；R2為烷基，烷基環(huán)烷基，烷基環(huán)烷基烷基，環(huán)烷基，鹵代烷基，羧基烷基，氨基烷基，二烷基氨基烷基，烷氧基烷基，烷氧基羰基烷基，炔基，芳基，芳基烷基，芳基烷基(烷氧基羰基)烷基，芳基羰基烷基，芳氧基烷基，芳基烯基，芳基(烷氧基羰基)烷基，雜芳基，雜芳基烷基，雜環(huán)基或雜環(huán)基烷基；A為-C(O)-R3，-CH(OH)-R4，或-C(O)-NR5R6，其中R3和R4獨(dú)立地選自以下基團(tuán)烷基，芳基，芳基炔基，芳基烷基，或芳基烯基；R5為氫，烷基，環(huán)烷基，環(huán)烷基烷基，羧基烷基，或芳基烷基；R6為烷基，烷基羰基烷基，氰基烷基，羥基烷基，羥基烷基-(羥基烷基)，烷氧基羰基烷基，芳基烷基，芳基羰基烷基，芳基氨基羰基烷基，芳基(烷基)氨基羰基烷基，氨基羰基烷基，芳基，芳基烷基，雜芳基，雜芳基烷基，雜環(huán)基，環(huán)烷基，環(huán)烷基烷基，或羧基烷基，或R6選自式IIa，IIb，或IIc；
或當(dāng)A的-C(O)-NR5R6中-NR5R6代表5或6元飽和環(huán)，任選被以下基團(tuán)取代羧基，烷基氧羰基，羥基，烷氧基羰基烷氧基，苯基烷基，或苯基烷氧基羰基；R7為氫，烷基，烯基，烷基硫烷基，芳基，雜芳基，羧基烷基，羧基，烷氧基羰基烷基，芳基烷基，或雜芳基烷基；或式III的化合物 R7A為氫或烷基R8為-OR9或-NR10R11，其中R9為氫，烷基，芳基烷基；R10為氫或烷基；R11為烷基，芳基，雜芳基，芳基烷基，或基團(tuán)-NR10R11代表5或6元環(huán)，任選被以下基團(tuán)取代羧基，烷基氧羰基，羥基，烷氧基羰基烷氧基，苯基烷基，或苯基烷氧基羰基；R12為烷基，芳基，或芳基烷基；Y為-O-，-O-S(O2)-，-O-C(O)-或-O-C(O)-NH-；m為0，1，或2；X為-SO2，-CO-，-C(O)O-，-SO2NH-，或-C(O)NR13-其中R13為氫，烷基，芳基，或羧基烷基；和其二聚體形式，和/或其藥用酯，和/或其藥用鹽，優(yōu)選其藥用酯，和/或其藥用鹽，最優(yōu)選其藥用鹽。
本發(fā)明特別涉及式(I)的化合物，其中R1為氫或烷基羰基，優(yōu)選R1為氫或乙?；?，更優(yōu)選R1為氫。
進(jìn)一步說，本發(fā)明涉及上述化合物，其中R2為烷基，烷基環(huán)烷基，烷基環(huán)烷基烷基，環(huán)烷基，鹵代烷基，羧基烷基，芳基，芳基烷基，芳基烷基(烷氧基羰基)烷基，芳基羰基烷基，芳氧基烷基，芳基烯基，或芳基(烷氧基羰基)烷基，優(yōu)選其中R2為烷基，芳基或芳基烷基，更優(yōu)選其中R2為烷基，苯基或萘基，最優(yōu)選其中R2為萘基。
本發(fā)明更優(yōu)選的實(shí)施方案是上述化合物，其中R3和R4獨(dú)立地選自烷基，苯基，苯基炔基，苯基烷基，或苯基烯基，優(yōu)選R3為烷基，苯基，苯基炔基，或R4為苯基炔基，苯基烷基，或苯基烯基。
本發(fā)明另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案涉及式(I)的上述化合物，其中A為-C(O)-NR5R6。
本發(fā)明的再一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案涉及上述化合物，其中X優(yōu)選為-SO2-或-C(O)(O)-。
在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，m為0或1，優(yōu)選m為0。
在本發(fā)明的更優(yōu)選的實(shí)施方案中，式(I)化合物的特征在于R5為烷基，環(huán)烷基，環(huán)烷基烷基，羧基烷基，或芳基烷基，優(yōu)選R5為烷基，芳基烷基，或環(huán)烷基。
本發(fā)明特別地涉及上述化合物，其中A的-C(O)-NR5R6中的-NR5R6代表5或6元環(huán)，例如哌啶基或吡咯烷基，優(yōu)選哌啶基，任選被以下基團(tuán)取代羧基，烷基氧羰基，羥基，烷氧基羰基烷氧基，苯基烷基，或苯基烷氧基羰基，優(yōu)選烷氧基羰基或羧基。-NR5R6優(yōu)選為哌啶基或吡咯烷基，任選地被烷氧基羰基或羧基取代，更優(yōu)選-NR5R6為哌啶基。
在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，R6為烷基，烷基羰基烷基，氰基烷基，羥基烷基，羥基烷基-(羥基烷基)，烷氧基羰基烷基，芳基烷基，芳基羰基烷基，芳基氨基羰基烷基，芳基(烷基)氨基羰基烷基，氨基羰基烷基，芳基，芳基烷基，雜芳基，雜芳基烷基，雜環(huán)基，環(huán)烷基，環(huán)烷基烷基，羧基烷基，或基團(tuán)-C(O)-NR5R6中的-NR5R6代表前面定義的5或6元環(huán)，任選被以下基團(tuán)取代羧基，烷基氧羰基，羥基，烷氧基羰基烷氧基，苯基烷基，或苯基烷氧基羰基，或R6為下式的基團(tuán)
其中R7，R7a，R8和R12如前面的定義。優(yōu)選，R7為氫，烷基，烯基，烷基硫烷基，芳基，芳基烷基，雜芳基，雜芳基烷基，羧基烷基，羧基，烷氧基羰基烷基；R7A為氫或烷基，R8為OR9或-NR10R11，其中R9為氫，烷基，芳基烷基；R10為氫或烷基；R11為芳基，雜芳基，芳基烷基，或者基團(tuán)-NR10R11形成如前面所定義的-NR5R6一樣的5或6元飽和環(huán)；Y優(yōu)選為-O-，-O-S(O2)-，-O-C(O)-或-O-C(O)-NH-，更優(yōu)選-O-S(O2)-，-O-C(O)-或-O-C(O)-NH-，R12為烷基，芳基或芳基烷基。
在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，本發(fā)明包括上述化合物，其中R6為烷基，烷基羰基烷基，氰基烷基，羥基烷基，羥基烷基-(羥基烷基)，烷氧基羰基烷基，芳基烷基，芳基羰基烷基，芳基氨基羰基烷基，芳基(烷基)氨基羰基烷基，氨基羰基烷基，芳基，芳基烷基，雜芳基，雜芳基烷基，環(huán)烷基，環(huán)烷基烷基，羧基烷基，或雜環(huán)基，優(yōu)選其中R6為烷基，烷基羰基烷基，芳基烷基，芳基羰基烷基，雜芳基烷基，羧基烷基，更優(yōu)選其中R6為烷基，烷基羰基烷基，芐基，四唑基乙基，苯基羰基甲基，或噁二唑基甲基。
本發(fā)明還包括這樣的化合物，其中R6為式(IIa)或(IIb)的基團(tuán) 其中R7為氫，烷基，烯基，烷基硫烷基，芳基，雜芳基，羧基烷基，羧基，烷氧基羰基烷基，芳基烷基或雜芳基烷基；或R7為式III的基團(tuán)
其中Y為-O-，-O-S(O2)-，-O-C(O)-或-O-C(O)-NH-，R12為芳基，優(yōu)選苯基，R8為OR9或-NR10R11，其中R9為氫，烷基，芳基烷基；R10為氫或烷基；R11為芳基，雜芳基，芳基烷基。
另外，本發(fā)明涉及上述化合物，其中R6為下式的基團(tuán) 其中R7和R8如前面所定義。
在上述化合物中，優(yōu)選R7為氫和R8為-NR10R11，R10和R11如前面所定義。在這些化合物中，R10優(yōu)選為氫或甲基，R11優(yōu)選為芳基，更優(yōu)選R11為苯基，任選被以下基團(tuán)取代烷氧基羰基，羧基，或羥基烷基。
本發(fā)明的另一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案涉及這樣的化合物，其中A為-C(O)-R3或-CH(OH)-R4。R3和R4如前面所定義。
本發(fā)明的一個(gè)最優(yōu)選的實(shí)施方案包括下式的化合物 其中R1，R2，A和X如前面所定義。
本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方案是實(shí)施例中舉例說明的那些化合物。本發(fā)明特別包括下列化合物a)(2S，4S)-1-[4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-哌啶-4-羧酸乙酯；b)(2S，4S)-1-[4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-哌啶-4-羧酸；c)(2S，4R)-4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羧酸芐基-甲基-酰胺；d)(2S，4R)-2-[2-[[4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙?；被鵠-苯甲酸甲酯；e)(2S，4R)-2-[2-[[4-巰基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙?；被鵠-苯甲酸；f(2S，4R)-4-[[[[4-巰基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙?；鵠-甲基-氨基]-苯甲酸；g(2S，4R)-4-[[[[4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙酰基]-甲基-氨基]-苯甲酸甲酯；h(2S，4R)-4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羧酸[[(4-羥基甲基-苯基)-甲基-氨基甲?；鵠-甲基]-甲基-酰胺；i)(2S，4R)-3-{芐基-[4-巰基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-氨基}-丙酸；j)(2S，4R)-4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羧酸環(huán)丙基-[2-(1H-四唑-5-基)-乙基]-酰胺；k)(2S，4R)-1-[4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-基]-3-甲基-丁-1-酮；l)(2S，4R)-[[4-巰基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-(3-甲基-丁基)-氨基]-乙酸；m)(2S，4R)-2-(芐基-甲基-氨基甲?；?-4-巰基-吡咯烷-1-羧酸異丙酯；n)(2S，4R)-2-(芐基-甲基-氨基甲酰基)-4-巰基-吡咯烷-1-羧酸戊酯；o)(2S，4R)-4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羧酸芐基-[2-(1H-四唑-5-基)-乙基]-酰胺；p)(2S，4R)-4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羧酸己基-甲基-酰胺；q)(2S，4R)-4-巰基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸甲基-(2-氧代-2-苯基-乙基)-酰胺；
r)(2S，4R)-4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羧酸甲基-(4-甲基-2-氧代-戊基)-酰胺；s)(2S，4R)-4-巰基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸(3-甲基-丁基)-[1，2，4]噁二唑-3-基甲基-酰胺；t)(2S，4R)-2-((S)或(R)-1-羥基-3-苯基-丙-2-炔基)-4-巰基-吡咯烷-1-羧酸丁酯；u)(2S，4R)-4-巰基-2-(3-苯基-丙?；?-吡咯烷-1-羧酸丁酯；v)(2S，4S)-1-[4-乙?；蛲榛?1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-哌啶-4-羧酸乙酯；和w)(2S，4R)-4-[[[[4-乙酰基硫烷基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-乙酰基]-甲基-氨基]-苯甲酸甲酯。
這些化合物在放射性免疫分析中(對(duì)于ECE-抑制的E(E on ECE-inhibition)，參見下面)顯示IC50值約為5nM到1000nM。
上述化合物的制備方法包括式1化合物(反應(yīng)路線3) 其中R2，X和m如上所定義，和PG為硫保護(hù)基團(tuán)，例如S-三苯甲基，S-對(duì)-甲氧基芐基或S-乙?；?，與胺HNR5R6反應(yīng)，其中R5和R6如上所定義，得到式2化合物(反應(yīng)路線3)。
本發(fā)明還涉及含有上述化合物和藥用賦型劑的的藥物組合物。
本發(fā)明的進(jìn)一步實(shí)施方式涉及上述化合物作為活性成分在生產(chǎn)藥物中的應(yīng)用，該應(yīng)用包括上述化合物用于預(yù)防和治療內(nèi)皮肽轉(zhuǎn)化酶(ECE)活性導(dǎo)致的疾病，特別是心肌缺血、充血性心力衰竭、心律不齊、高血壓、肺動(dòng)脈高血壓、哮喘、腦血管痙攣、蛛網(wǎng)膜下出血、先兆子癇(pre-eclampsia)、腎病、動(dòng)脈粥樣硬化、Buerger’s癥、Takayasu’s關(guān)節(jié)炎、糖尿病并發(fā)癥、肺癌、前列腺癌、腸胃失調(diào)、內(nèi)毒素休克、和敗血病，以及用于傷口愈合和控制月經(jīng)、青光眼、移植排斥、與細(xì)胞抑制的、眼科的和腦保護(hù)性適應(yīng)癥有關(guān)的疾病，以及器官保護(hù)。
本發(fā)明進(jìn)一步涉及上述化合物用于治療或預(yù)防以下疾病的應(yīng)用，與心肌缺血有關(guān)的疾病、充血性心力衰竭、心律不齊、高血壓、肺動(dòng)脈高血壓、哮喘、腦血管痙攣、蛛網(wǎng)膜下出血、先兆子癇、腎病、動(dòng)脈粥樣硬化、Buerger’s癥、Takayasu’s關(guān)節(jié)炎、糖尿病并發(fā)癥、肺癌、前列腺癌、腸胃失調(diào)、內(nèi)毒素休克、和敗血病，以及用于傷口愈合和控制月經(jīng)、青光眼、移植排斥、與細(xì)胞抑制的、眼科的和腦保護(hù)性適應(yīng)癥有關(guān)的疾病，以及器官保護(hù)。
另外，本發(fā)明包括上述化合物用作治療活性物質(zhì)，特別是用做與鋅水解酶活性有關(guān)的疾病的治療活性物質(zhì)，例如心肌缺血、充血性心力衰竭、心律不齊、高血壓、肺動(dòng)脈高血壓、哮喘、腦血管痙攣、蛛網(wǎng)膜下出血、先兆子癇、腎病、動(dòng)脈粥樣硬化、Buerger’s癥、Takayasu’s關(guān)節(jié)炎、糖尿病并發(fā)癥、肺癌、前列腺癌、腸胃失調(diào)、內(nèi)毒素休克、和敗血病，以及用于傷口愈合和控制月經(jīng)、青光眼、移植排斥、與細(xì)胞抑制的、眼科的和腦保護(hù)性適應(yīng)癥有關(guān)的疾病，以及器官保護(hù)的治療活性物質(zhì)。
本發(fā)明還包括治療性和/或預(yù)防性處理以下疾病的方法，心肌缺血、充血性心力衰竭、心律不齊、高血壓、肺動(dòng)脈高血壓、哮喘、腦血管痙攣、蛛網(wǎng)膜下出血、先兆子癇、腎病、動(dòng)脈粥樣硬化、Buerger’s癥、Takayasu’s關(guān)節(jié)炎、糖尿病并發(fā)癥、肺癌、前列腺癌、腸胃失調(diào)、內(nèi)毒素休克、和敗血病，以及用于傷口愈合和控制月經(jīng)、青光眼、移植排斥、與細(xì)胞抑制的、眼科的和腦保護(hù)性適應(yīng)癥有關(guān)的疾病，以及器官保護(hù)，所述方法包括將上述化合物施用給人或動(dòng)物。
本發(fā)明還涉及上述化合物用于抑制鋅水解酶活性的應(yīng)用。
本發(fā)明還涉及通過下述方法制備的上述化合物。
式(I)化合物可以按照本領(lǐng)域已知的方法或如下所述的方法制備。除非另有指明，取代基R1，R2，R3，R4，R5，R6，R7，R7a，R8，R9，R10，R11，R12，A，m，X和Y如上所述。
用于制備式(I)化合物的中間體(酸)的合成如反應(yīng)路線1所示。起始原料可以商業(yè)購買，或按照本領(lǐng)域已知方法從羥基脯氨酸合成，例如在″肽合成實(shí)踐(The Practice of Peptide Synthesis)″，M.Bodanszky和A.Bodanszky，Springer Verlag，Berlin，1984中所描述。
反應(yīng)路線1步驟a描述了羥基和氨基基團(tuán)的全硅烷化(persilylation)，例如通過化合物1與六甲基二硅氮烷在140℃下反應(yīng)，隨后在THF中與R2SO2Cl反應(yīng)，或轉(zhuǎn)化成所有其它的下述R2X或二-叔-丁基碳酸氫鹽，在二噁烷中的NaHCO3，H2O(BOC保護(hù))。
為了使構(gòu)型反轉(zhuǎn)(通過甲磺酸酯)，將得到的醇2用MeSO3H、Ph3P、DIAD或DEAD在甲苯中處理(室溫至80℃)，或(通過溴化物)用LiBr、DEAD、Ph3P在THF中處理(4℃至室溫)，或(通過氯化物)用Ph3P、CCl4在CH2Cl2中處理(3℃至室溫)。如果仍保持該構(gòu)型(通過甲磺酸酯或甲苯磺酸鹽)，醇2可以通過與MeSO2Cl、吡啶、DMAP或TosCl、吡啶、DMAP在CH2Cl2中反應(yīng)，轉(zhuǎn)化成式3化合物(0℃至室溫)。
為了引入保護(hù)的硫醇部分，式3化合物用例如三苯基甲硫醇或4-甲氧基芐基硫醇和K-Ot-Bu在DMF中處理(對(duì)于Br0℃至室溫；對(duì)于Cl0℃；對(duì)于甲磺酸酯室溫至100℃)，或用硫代乙酸鉀在DMF中、室溫至100℃下處理(步驟c)。
如果X-R2＝BOC和R＝/t-丁基，可以用TFA在CH2Cl2中、-20℃至室溫下完成去保護(hù)，得到胺。為了引入新的R2，該胺可以與R2OCOCl/吡啶在THF中反應(yīng)，或與R2OH/Cl3COCl/喹啉反應(yīng)(形成氯甲酸酯)，隨后如果新的R2X是氨基甲酸酯，與NaH反應(yīng)。如果R2X是磺酰胺，該胺任選地在催化的DMAP或DMAP-poly.(在CH2Cl2中)存在下、室溫下用R2SO2Cl，(i-Pr)2EtN處理，或如果R2X是酰胺，該胺可以與R2COOH，EDCI，DMAP反應(yīng)。
應(yīng)用在THF中的含水氫氧化鋰(0℃至室溫)或在乙醇中的氫氧化鈉，可以獲得酯4的水解(PG＝乙酰基，步驟d)，得到酸5，如果是叔-丁基酯，可以用TFA在CH2Cl2中完成皂化。
對(duì)于化合物5到化合物6的反應(yīng)(步驟e)，可以使用Arndt-Eistert反應(yīng)。因此，如果m＝1，可以采用下列步驟在0℃至室溫下加入在CH2Cl2中的(COCl)2，cat DMF，得到相應(yīng)的酰基氯，隨后在0℃至室溫下與三甲基甲硅烷基重氮甲烷在THF，CH3CN中反應(yīng)，得到相應(yīng)的重氮乙酮(diazoethanone)，在-25℃至室溫下應(yīng)用苯甲酸銀重排成甲基酯，隨后通過含水氫氧化鋰在THF中(0℃至室溫)或氫氧化鈉在乙醇中進(jìn)行酯裂解，得到化合物6。對(duì)于m＝2，可以將式5化合物轉(zhuǎn)化成相應(yīng)的Weinreb酰胺(例如HCl.HNMeOMe，NMM，EDCI，HOBT)，和轉(zhuǎn)化成醛(LAH，-78至-30℃，在THF中)?？梢酝ㄟ^Horner-Emmons反應(yīng)(例如(EtO)2P(＝O)CH2COOEt，在THF中的NaH)轉(zhuǎn)化得到的化合物，隨后應(yīng)用含水氫氧化鋰在THF中(0℃至室溫)或氫氧化鈉進(jìn)行雙鍵的還原(例如在MeOH中的Mg)和酯的皂化，得到化合物6。
BOC取代其它的R2X，隨后可以通過BOC-裂解和用上述試劑處理胺。
從S-乙?；Ｗo(hù)的酯4開始，用0.1M LiOH在THF中或1M NaOH在THF中進(jìn)行酯和硫酯部分的皂化，得到硫醇，將其用碘和三乙胺或iPr2NEt在CH2Cl2中處理，得到二硫醚-二酸7(步驟f，反應(yīng)路線1)。

其中o＝1，對(duì)于R7＝H或o＝0，對(duì)于R7＝/H進(jìn)一步修飾在 c.對(duì)于RaCO2Me到CH2OH如d.對(duì)于RaCH2OH到CH2OMee.對(duì)于RaCH2OH到CH2OTBDMS R6＝COOt-Bu R5＝苯乙基 反應(yīng)路線2R6′＝COOtBu，[1，2，4]oxadiazol，CN(參見反應(yīng)路線P)
在偶合成按照反應(yīng)路線1制備的酸之前，可以如反應(yīng)路線2a所描述，容易地連接上側(cè)鏈A。將適當(dāng)保護(hù)的氨基酸用TPTU、在CH2Cl2中的4-甲基嗎啉和適當(dāng)?shù)陌種HR10R11處理，或用2-氯-4，6-二甲氧基-1，3，5-三嗪、4-甲基-嗎啉、胺NHR10R11和在DMF中的4-二甲基氨基-吡啶處理?；蛘撸ㄟ^將酸1轉(zhuǎn)變成相應(yīng)的氯化物(例如在甲苯中的草酰氯)或轉(zhuǎn)變成相應(yīng)的混合的酐(例如在DMF中的異丁基氯甲酸酯和N-乙基嗎啉)，隨后用在DMF中的所需的胺NHR10R11處理；制備酰胺2。
如果是BOC-保護(hù)通過用TFA在CH2Cl2中處理，如果是Z-保護(hù)通過氫化(例如10％Pd/C，H2在MeOH中(在HCl存在下)，或10％Pd/C，H2在MeOH/NEt3中)，可以獲得胺3的去保護(hù)(步驟b)。
在去保護(hù)前可以進(jìn)行側(cè)鏈的進(jìn)一步修飾通過用在THF中的硼氫化鋰處理，芳香環(huán)(Ra)的酯部分可以被還原成羥基甲基基團(tuán)(50℃，2h，步驟c)。應(yīng)用TBDMSCl和咪唑在THF中、5℃至室溫下12h，其可以被保護(hù)作為TBDMS(步驟d)，或者通過用氫化鈉、烷基碘化物在DMF中處理，將其轉(zhuǎn)化成醚(步驟e)。
應(yīng)用反應(yīng)路線2b描述的反應(yīng)路線可以制備其它的胺即胺4與溴衍生物5烷基化得到相應(yīng)的仲胺6(步驟f)。
反應(yīng)路線3
可以如反應(yīng)路線3所描述，從酸1和相應(yīng)的NHR5R6制備式(I)化合物。為了合成硫保護(hù)的酰胺2，可以使用幾種方法TPTU、NMM或iPr2Net、HNR5R6在CH2Cl2中或EDCI、HOBT、HNR5R6在DMF中，將該酸轉(zhuǎn)變成相應(yīng)的氯化物(例如在DMF中的草酰氯)或轉(zhuǎn)變成相應(yīng)的混合的酐(例如在DMF中的1-丙基-或乙基氯甲酸酯)，隨后用在DMF中的HNR3R4處理(步驟a)。
如果PG是p-甲氧基芐基或三苯甲基，應(yīng)用三乙基硅烷在TFA中或三異丙基硅烷在TFA中，如果PG是乙酰基，應(yīng)用氫氧化鋰在THF/水中或醇鈉(sodium alkoholates)在THF中，可以獲得硫基部分的去保護(hù)(步驟b)。
如果PG是同型二聚體，用三-n-丁基膦和水在2，2，2-三-氟乙醇中或DTT、2M aq.K2CO3在MeOH、THF中裂解二硫化物，得到硫醇化合物3。
如果R2X＝BOC，可以通過BOC去保護(hù)(例如TFA、CH2Cl2在0℃至室溫下)引入最終的R2X，得到胺，其可以進(jìn)一步被修飾。
如果R2X是氨基甲酸酯，該胺可以與R2OCOCl、吡啶或(i-Pr)2EtN在THF或CH2Cl2中反應(yīng)，或通過與(a)R2OH、Cl3COCl，喹啉(形成氯甲酸酯)反應(yīng)，隨后與NaH反應(yīng)。如果R2X是磺酰胺，該起始化合物可以與R2SO2Cl、(i-Pr)2EtN、cat DMAP在CH2Cl2中、室溫下反應(yīng)。如果R2X是脲，該起始化合物可以與異氰酸酯在EtOH中、室溫下反應(yīng)。如果R2X是烷基化的脲，該起始化合物可以與異氰酸酯在EtOH中、室溫下反應(yīng)，隨后與相應(yīng)的烷基鹵化物、K-OtBu在0℃至室溫下反應(yīng)。如果R2X是酰胺，該起始化合物可以與R2COOH，EDCI，DMAP反應(yīng)(形成酐)，隨后在-10℃至室溫下加入起始的胺，或者備選地與R2COOH/EDCI/DMAP在室溫下反應(yīng)。如果R2X是磺酰胺(R13為H)，該胺可以在過量的三乙胺存在下與氨磺酰氯在二噁烷中反應(yīng)?？梢詮腞2NH2和氯磺酸在CH2Cl2中、0℃至室溫下反應(yīng)，隨后與PCl5在甲苯中、75℃下反應(yīng)，合成該氨磺酰氯。備選地，可以在乙睛中R2NH2和磺酰氯在0℃至65℃下反應(yīng)，合成該氨磺酰氯。如果R2X是烷基化的磺酰胺(R13不為H)，該磺酰胺R2SONH-可以與NaH、烷基鹵化物在DMF中、0℃至室溫下反應(yīng)。
如果其中R6含有氰基部分，用三乙基硅烷在TFA中、0℃至室溫下處理，可以獲得還原成酰胺，并伴隨有S-PMB-醚裂解。應(yīng)用三乙基硅烷在TFA中、0℃下15分鐘，可以完成選擇性的硫基去保護(hù)。通過用疊氮化鈉和氯化銨在DMF中、70-120℃下處理，隨后如上所述去保護(hù)(例如TFA，Et3SiH，回流)，在R6位的殘基的進(jìn)一步修飾可以將氰基部分轉(zhuǎn)化成四唑。
如果其中R6為式(II)，其中R8為OR9，通過應(yīng)用氫氧化鋰在THF中的酯皂化，隨后通過此前描述的方法之一與胺NHR10R11成酰胺(步驟c，d，反應(yīng)路線3)，可以獲得側(cè)鏈的進(jìn)一步的修飾。化合物5可以按照上述方法進(jìn)行去保護(hù)(步驟e，參見步驟b)。
如果其中殘基R7或R11中的一個(gè)含有酯，其可以在S-去保護(hù)前被水解(對(duì)于S-PMB或S-Tr)，或者對(duì)于同型二聚體，應(yīng)用在THF中的氫氧化鋰或在THF中的氫氧化鈉。
R11修飾的進(jìn)一步的方法包括將酯還原成甲基羥基基團(tuán)(例如用在THF中的硼氫化鋰)，或按照本領(lǐng)域公知的方法對(duì)醇部分去保護(hù)(例如HF乙腈，CH2Cl2)。應(yīng)用例如氫化鈉、烷基鹵化物在THF或DMF中，或2，2，2-三氯乙酰亞胺酸叔-丁酯與三氟甲磺酸在CH2Cl2、c-己烷或CCl4中，可以任選將該烷醇(alkohol)烷基化。
通過處理化合物2，如果R12Y是磺酰胺，應(yīng)用R12SO2Cl、(i-Pr)2EtN、cat DMAP在CH2Cl2中室溫下處理，如果R12Y是氨基甲酸酯，應(yīng)用R12OCOCl、吡啶或(i-Pr)2EtN在THF或CH2Cl2中處理，如果R12Y是脲，起始化合物可以與異氰酸酯在EtOH中室溫下反應(yīng)，如果R12Y是酰胺，應(yīng)用R12COOH、EDCI、DMAP在-10至℃室溫下處理，如果R12Y是醚，應(yīng)用反應(yīng)性烷基鹵化物或者芳基烷基鹵化物處理，可以進(jìn)一步修飾酪氨酸的羥基部分。為了S-PMB和S-Tr應(yīng)用三乙基硅烷、TFA進(jìn)行硫基部分的去保護(hù)，或者應(yīng)用三-n-丁基膦和水在2，2，2-三-氟乙醇中或DTT、2M K2CO3水溶液在MeOH、THF中進(jìn)行二硫化物的裂解，得到化合物7(步驟f，b)。并且，其中A為-CONR5R6的式(I)化合物可以如反應(yīng)路線4所描述制備。用胺H2NR5或H2NR6、EDCI、HOBT在THF中處理該酸1，或應(yīng)用上述描述的成酰胺的其它方法中的一種，隨后用三乙基硅烷在TFA中回流下進(jìn)行硫基部分的去保護(hù)，得到酰胺3(步驟a，b)。通過烷基化可以引入第二個(gè)取代基。因此，可以用反應(yīng)性的R5-鹵化物和氫化鈉在DMF中處理酰胺2，用三乙基硅烷在TFA中S-Tr或S-PMB去保護(hù)后，得到酰胺4。如果R6含有酯，α-烷基化會(huì)導(dǎo)致側(cè)鏈A的修飾(例如a.LiHMDS，b.R5-Br在THF中)。通過去保護(hù)可以獲得酰胺5(步驟d，b)。
反應(yīng)路線4
反應(yīng)路線5
四唑衍生物可以如反應(yīng)路線5所述制備。通過用氨基四唑、HOBT、EDCI在THF中處理，隨后用DBU在CH2Cl2中處理，或應(yīng)用上述的一種方法，可以將酸1轉(zhuǎn)化成含有四唑部分的酰胺2(步驟b)。對(duì)于四唑氨基衍生物的合成，參見例如Sephane De Lombaert，作為中性肽鏈內(nèi)切酶抑制劑的四唑基烷基氨基甲基膦酸酯的制備。美國專利5,273,990 A 931228或S.De Lombaert等，醫(yī)學(xué)化學(xué)雜志(J.Med Chem)，2000，43，488-504等文獻(xiàn)在此引用。在引入側(cè)鏈前，或通過處理酰胺2(例如4-甲氧基芐基氯，NaI，Et3N在丙酮中)，該四唑部分可以被保護(hù)(例如PG2為CH2CH2CN)。
含有PG2-保護(hù)的四唑進(jìn)行烷基化(例如氫化鈉、烷基鹵化物在DMF中)，硫基和四唑部分去保護(hù)(例如三乙基硅烷，TFA，80℃)后，得到化合物3(步驟c，b)。
如果是未保護(hù)的四唑衍生物2(PG2為H)，應(yīng)用氫化鈉、烷基鹵化物在DMF中進(jìn)行烷基化，可以得到二烷基化的區(qū)域異構(gòu)體(regioisomers)的混合物，其可以被分離和去保護(hù)(例如三乙基硅烷，TFA，80℃)，得到化合物5和6(步驟d，b)。
用于修飾殘基R2X的另一種方法如反應(yīng)路線6所描述。
用LDA處理甲基磺酰胺衍生物1，隨后用例如芐基溴進(jìn)行烷基化，然后通過用NHR5R6、HOBT、EDCI在DMF中處理或上述任何其它的成酰胺的方法，轉(zhuǎn)化成酰胺2(步驟a，b)。應(yīng)用LiHMDS，隨后用例如芐基溴處理，可以完成二烷基化，然后轉(zhuǎn)化成酰胺4。在這兩種情況下，應(yīng)用三乙基硅烷在TFA中處理，可以獲得硫醇的去保護(hù)。
在反應(yīng)路線7中描述了備選的合成路線，其中在引入硫基部分前，進(jìn)行成酰胺反應(yīng)。通過TPTU在CH2Cl2、NMM中，或者通過用EDCI、CH2Cl2、NMM在CH2Cl2中處理，隨后用胺NHR3R4處理，或通過前面反應(yīng)路線中所描述的任何其它成酰胺方法，將酸1予活化。為了使構(gòu)型反轉(zhuǎn)(通過甲磺酸酯)，將得到的醇2用MeSO3H、Ph3P、DIAD或DEAD在甲苯中處理(室溫至80℃)，或(通過溴化物)用LiBr、DEAD、Ph3P在THF中處理(4℃至室溫)，或(通過氯化物)用Ph3P、CCl4在CH2Cl2中處理(3℃至室溫)。如果仍保持該構(gòu)型(通過甲磺酸酯或甲苯磺酸鹽)，醇2可以通過與MeSO2Cl、吡啶、DMAP或TosCl、吡啶、DMAP在CH2Cl2中反應(yīng)，轉(zhuǎn)化成式3化合物(0℃至室溫)。
例如通過硫代醋酸鉀在DMF中處理，可以轉(zhuǎn)化成相應(yīng)保護(hù)的硫基化合物4。
如果R2X部分需要進(jìn)一步修飾，如果R2X為BOC，可以應(yīng)用TFA在CH2Cl2中去保護(hù)，隨后通過應(yīng)用反應(yīng)路線1和3中描述的試劑處理，進(jìn)一步修飾去保護(hù)的胺。
通過用在THF中的0.1M氫氧化鋰或在THF中的氫氧化鈉(所有其它的酯裂解)處理，或用在THF中的醇化鈉處理，可以獲得硫酯4的裂解，得到化合物5。
反應(yīng)路線6
反應(yīng)路線7
反應(yīng)路線8
如反應(yīng)路線8所描述，可以制備式(I，A＝-C(O)-R3或-CH(OH)-R4)的酮和醇。在該反應(yīng)路線中，基團(tuán)R3還包括如上所述的R4的定義。通過與NHMeOMe.HCl，Me3Al(過量)在甲苯中反應(yīng)，或者用TPTU，Huenig堿在DMF中、室溫下予活化酸1，隨后與NH(OMe)Me反應(yīng)，可以將起始的酸1轉(zhuǎn)化成Weinreb衍生物。
如果R2X＝BOC，可以通過BOC去保護(hù)(例如TFA、CH2Cl2在0℃至室溫下)引入最終的R2X，得到胺，其可以進(jìn)一步與反應(yīng)路線1或3中化合物的一種試劑反應(yīng)。
可以用金屬有機(jī)化合物(例如R3MgBr在THF中或R3Li在-25℃至室溫下THF中)處理Weinreb衍生物2，得到S-保護(hù)的酮3。通過使用DMSO、Me3SiCl在乙腈中氧化成相應(yīng)的二硫化物，隨后應(yīng)用DTT在碳酸鉀存在下甲醇中或應(yīng)用三乙基硅烷在TFA中，裂解二硫化物，得到酮4。應(yīng)用iPr3SiH、TFA在CH2Cl2中可以獲得去保護(hù)并還原成醇5。
為了合成型12的酮(步驟i，b，c)，通過用TPTU，Huenig堿在DMF中、室溫下予活化酸1，隨后與NHR5CH2NH(OMe)Me反應(yīng)，可以將起始的酸1轉(zhuǎn)化成相應(yīng)的Weinreb衍生物10。用金屬有機(jī)化合物(例如R3MgBr在THF中或R3Li在-25℃至室溫下THF中)處理，隨后用三乙基硅烷在TFA中去保護(hù)，可以從Weinreb衍生物10制備所需的酮。
備選地，可以從酯6制備醇5(m＝0)，它是通過選擇性地還原到醛7(例如二-異丁基鋁氫化物在甲苯、THF中、-78℃下(步驟e))，隨后用金屬有機(jī)化合物(例如R3MgBr在THF中或R3Li在-25℃至室溫下THF中，步驟f)處理，得到非對(duì)映異構(gòu)體混合物的醇8。如果R3含有三鍵，其可以任選被還原(H2/Pd/C在MeOH中、1atm下)。為了引入保護(hù)的硫基部分，可以用乙酸鉀在DMF中、100℃下處理化合物8 2.5小時(shí)。非對(duì)映異構(gòu)體分離后，通過用1N LiOH在EtOH中處理，從S-Ac前藥中解離出單一化合物(步驟h)。
對(duì)于制備式(I)化合物，反應(yīng)路線9，10-樹脂合成的反應(yīng)路徑如下所示如反應(yīng)路線1所描述從羥基脯氨酸合成起始的原料1。TFA、三異丙基去保護(hù)在回流下30分鐘得到硫醇2(步驟a)。在附著到樹脂上之前或樹脂上的酮制備后，可以引入最終的R2X(反應(yīng)路線10)。對(duì)于第二種情況，R2X理想地含有FMOC。按照本領(lǐng)域已知方法，例如在″肽合成實(shí)踐(ThePractice of Peptide Synthesis)″，M.Bodanszky和A.Bodanszky，Springer Verlag，Berlin，1984中所描述，其可以從起始酸1的R2X(＝BOC)到非酸的不穩(wěn)定保護(hù)基團(tuán)(例如R2X＝FMOC，先用40％TFA在CH2Cl2中室溫下選擇性BOC-去保護(hù)，隨后與在二噁烷/水中的Fmoc-Osu和作為堿的NaHCO3反應(yīng))制備。
該樹脂可以從下列制備(步驟b，反應(yīng)路線9)用TPTU、二異丙基乙基胺在DMF中活化連接劑4-(α，α-二苯基羥基甲基)苯甲酸，加入到二苯甲基胺樹脂3中。然后用硫醇2在CH2Cl2、TFA中處理樹脂4，得到樹脂負(fù)載的起始原料5。
最終式(I)化合物的合成如反應(yīng)路線10所示通過預(yù)活化酸1(TPTU、Huenig堿在DMF中室溫下)，隨后通過與NH(OMe)Meo反應(yīng)，將樹脂連接的酸1轉(zhuǎn)化成相應(yīng)的Weinreb衍生物2。用R5MX型的金屬有機(jī)化合物處理化合物2，得到樹脂結(jié)合的酮3，其可以通過用TFA、iPr3SiH在CH2Cl2中室溫下處理進(jìn)行分離(步驟d)。
如果R2X＝FMOC，在該樹脂的化合物分離前，可以完成R2的進(jìn)一步修飾。因此，用20％哌啶在DMF中處理FMOC保護(hù)的化合物2，隨后通過反應(yīng)路線1和3中合成描述的方法引入新的R2X。
反應(yīng)路線9
反應(yīng)路線10
通過應(yīng)用相應(yīng)的酐或?；忍幚砹虼?(例如Ac2O/吡啶在CH2Cl2中室溫下或AcCl/吡啶在CH2Cl2中(步驟a))，可以完成前藥的制備(反應(yīng)路線11)。如果殘基A含有羧酸部分，其可以轉(zhuǎn)化為酯(例如乙醇，EDCI，DMAP，CH2Cl2，步驟b)。
如步驟c所述，通過用Ac-Cys(NPys)-OH在DMF中處理硫醇1，可以制備二硫化物衍生物。
基于式I的化合物抑制金屬蛋白酶活性，特別是鋅水解酶活性的能力，式I的化合物可以用作治療和預(yù)防與血管收縮發(fā)病率的增加有關(guān)的疾病的藥物。這些疾病的例子是高血壓、冠心病、心機(jī)能不全、腎和心肌缺血、腎機(jī)能不全、透析、腦缺血、心肌梗塞、偏頭疼、蛛網(wǎng)膜下出血、Raynaud綜合癥和肺動(dòng)脈高血壓。它們還可以被用于動(dòng)脈粥樣硬化癥、預(yù)防氣泡-誘導(dǎo)的血管膨脹(balloon-induced vascular dilation)后的再狹窄、炎癥、胃和十二指腸潰瘍、腳潰瘍(ulcus cruris)、革蘭氏陰性膿血癥、休克、腎小球腎炎、腎絞痛、青光眼、哮喘，治療和預(yù)防糖尿病并發(fā)癥和在環(huán)孢菌素給藥中的并發(fā)癥，以及其它與內(nèi)皮素活性有關(guān)的疾病。
式I化合物抑制金屬蛋白酶活性，特別是鋅水解酶活性的能力可以通過各種本領(lǐng)域普通技術(shù)人員已知的體外和體內(nèi)分析方法證明。
A)細(xì)胞培養(yǎng)將一株穩(wěn)定的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞系(ECV304)培養(yǎng)于所述的″細(xì)胞工廠″直到鋪滿為止(Schweizer等1997，Biochem.J.328871-878)。在鋪滿狀態(tài)，將細(xì)胞用胰蛋白酶/EDTA溶液脫附，然后經(jīng)低速離心收集。用磷酸鹽緩沖鹽水pH 7.0漂洗細(xì)胞沉淀物一次，于-80℃儲(chǔ)藏直到使用。
B)來自ECV304細(xì)胞的ECE的溶解(solubilization)如果沒有其它說明所有步驟都在0-4℃下進(jìn)行。將1×109個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞沉淀懸浮于50ml緩沖液A(含有5mM MgCl2，100μM PMSF，20μM E64，20μM亮抑酶肽的20mM Tris/HCl，pH 7.5)，然后超聲處理。得到的細(xì)胞勻漿在100,000gav離心60分鐘。棄取上清液，得到的膜沉淀物在50ml緩沖液A中勻漿，然后如上所述離心。膜成分在緩沖液A中的漂洗重復(fù)進(jìn)行兩次。最后的膜制品在50 ml緩沖液B(緩沖液A+0.5％吐溫20(v/v)，0.5％CHAPS(w/v)，0.5％洋地黃皂苷(w/v))中勻漿，在4℃下振蕩2小時(shí)。之后保留的膜成分如上所述沉降。得到的含有溶解的ECE的澄清上清液以1.0ml的整份于-120℃下貯藏，直到使用。
C)ECE的分析該分析法測(cè)定了來自人大ET-1的ET-1的產(chǎn)生量。為了測(cè)定大量樣品，發(fā)明了在96孔平板中進(jìn)行的分析法。酶反應(yīng)和產(chǎn)生的ET-1的放射性免疫檢測(cè)在同一個(gè)孔中進(jìn)行，應(yīng)用特別研制和優(yōu)化的包被技術(shù)。
D)平板的包被將Fluoronunc Maxisorp White(代碼437796)96孔平板在UVStratalinker 2400(Stratagene)中用1焦耳照射30分鐘。然后向96孔平板的每個(gè)孔中加入300μl蛋白A溶液(2μg/ml在0.1M Na2CO3pH 9.5中)，在4℃保溫48小時(shí)。包被的平板在4℃下能夠儲(chǔ)藏高達(dá)3周直到使用。
使用前，棄去蛋白A溶液，在4℃下用0.1M Na2CO3pH 9.5中的0.5％BSA封閉平板2小時(shí)。
用重蒸水洗平板，然后準(zhǔn)備進(jìn)行ECE分析。
E)篩選分析溶解試驗(yàn)化合物，并在DMSO中稀釋。向孔中加入10μl DMSO，然后加入125μl含有200ng大ET-1的分析緩沖液(50mM Tris/HCl，pH 7.0，1μM Thiorphan，0,1％NaN3，0.1％BSA)。加入50μl溶解的ECE(在分析緩沖液中稀釋1∶30到1∶60倍(v/v))起始酶反應(yīng)。在37℃進(jìn)行酶反應(yīng)30分鐘。加入10μl 150mM ETDA，pH 7.0終止酶反應(yīng)。
放射性免疫分析ET-1 RIA原則上按照以前的報(bào)道進(jìn)行(Loffler，B.-M.和Maire，J.-P.1994，Endothelium 1273-286)。向含有EDTA以終止酶反應(yīng)混合物的平板中加入25μl含有20000cpm(3-(125I)Tyr)-內(nèi)皮素-1的分析緩沖液和25μl ET特異性抗血清AS-3(在分析緩沖液中以1∶1000稀釋)。平板混合后在4℃下保溫過夜。之后，用平板清洗器吸出液相，用重蒸水洗一次。向清洗后的平板中加入200μl閃爍混合物(Microscint 40 LSC-Cocktail，Packard，代碼6013641)，然后在Topcount中對(duì)每個(gè)孔記數(shù)2分鐘。
用終濃度為0-3000pg ET-1/孔的合成的ET-1制備平板中的標(biāo)準(zhǔn)曲線。所有平板中都設(shè)置最大ECE活性(10μl DMSO存在下)的對(duì)照和背景產(chǎn)生ET-1免疫反應(yīng)性(在10mM EDTA或100μM膦酰二肽的存在下)的對(duì)照。分析進(jìn)行三次。
F)動(dòng)力學(xué)分析通過改變分析中使用的底物濃度，可以用所述的分析模式確定使用的ECE制劑以及不同ECE抑制劑的動(dòng)力學(xué)特征(即Km，Ki)。
G)細(xì)胞基礎(chǔ)上的ECE分析按照?qǐng)?bào)道將人ECE-1c在MDCK細(xì)胞中穩(wěn)定表達(dá)(Schweizer等1997，Biochem.J.328871-878)。在潮濕空氣/CO2(19∶1)的環(huán)境中，在附加10％(v/v)胎牛血清(FBS)，0.8mg/ml遺傳霉素，100i.u./ml青霉素和100μg/ml鏈霉素的Dulbecco’s改進(jìn)的Eagles’s培養(yǎng)(DMEM)中，在24孔平板中培養(yǎng)細(xì)胞至鋪滿。在ECE分析前，將培養(yǎng)基換成添加0.1％(w/v)BSA的0.5ml DMEM-HBSS 1∶1，10mM HEPES pH 7.0。加入終濃度為1％的DMSO中的抑制劑。加入0.42μM人大ET-1起始酶反應(yīng)，在37℃的培養(yǎng)箱中進(jìn)行1.5小時(shí)。溫育結(jié)束后，迅速移出保溫培養(yǎng)基，如前面所述，通過產(chǎn)生的ET-1的放射性免疫分析對(duì)等份樣進(jìn)行分析。
通過測(cè)定膦酰二肽(IC500.8±0.2uM)和CGS 314447(IC50 20±4nM)的特征性抑制常數(shù)，進(jìn)行ECE篩選分析[De Lombaert，Stephane；Stamford，Lisa B.；Blanchard，Louis；Tan，Jenny；Hoyer，Denton；Diefenbacher，Clive G.；Wei，Dongchu；Wallace，Eli M.；Moskal，Michael A.；等內(nèi)皮肽轉(zhuǎn)化酶和中性內(nèi)肽酶的強(qiáng)效非-肽雙重抑制劑24.11.Bioorg.Med.Chem.Lett.(1997)，7(8)，1059-1064]。測(cè)得這兩個(gè)抑制劑的IC50值與文獻(xiàn)中報(bào)道的但用不同的分析方案測(cè)定的值無明顯不同。在基于細(xì)胞的分析中，膦酰二肽顯示IC50值為4μM。該分析還給出有關(guān)在生理得多的條件下抑制劑的抑制效力的其它信息，例如ECE被包埋入正常質(zhì)膜的環(huán)境。需要重點(diǎn)陳述的是，篩選分析在存在1μM Thiorphan的條件下進(jìn)行，以便阻斷由于NEP24.11的活性導(dǎo)致的任何潛在的大ET-1的降解。當(dāng)測(cè)定在有或無thiorphan條件下的ET-1的產(chǎn)生時(shí)，初步試驗(yàn)中MDCK-ECE-1c轉(zhuǎn)染的細(xì)胞中不存在NEP活性。
按照上述方法，本發(fā)明的化合物在放射性免疫分析(對(duì)于ECE-抑制的E)中顯示IC50值約為5nM-1000μM。優(yōu)選化合物顯示該值為5nM到1000nM。
按照前面所述，含有式I化合物的藥物以及生產(chǎn)該藥物的方法也是本發(fā)明的主題，所述方法包括將式I的一個(gè)或多個(gè)化合物和，必要時(shí)，一種或多種其它有治療價(jià)值的物質(zhì)混合起來制成蓋侖(galenical)給藥劑型。
該藥物組合物可以口服給藥，例如以片劑，包衣的片劑，糖錠劑，硬或者軟明膠膠囊，溶液劑，乳劑或者混懸劑的形式。給藥也可以通過直腸進(jìn)行，例如使用栓劑；局部給藥或者經(jīng)皮膚給藥，例如使用軟膏劑，霜?jiǎng)?，凝膠劑或者溶液劑；或者胃腸外給藥，例如可注射溶液。
對(duì)于制備片劑，包衣的片劑，糖錠劑，硬明膠膠囊，本發(fā)明的化合物可以與藥學(xué)惰性的，有機(jī)或無機(jī)賦形劑一起混合。合適的片劑，糖錠劑，硬明膠膠囊的賦形劑的實(shí)例包括乳糖，玉米淀粉或其衍生物，滑石，或者硬脂酸或者其鹽。
軟明膠膠囊的合適的賦形劑包括例如植物油，蠟，脂肪，半固體或者液體多元醇等；但是，根據(jù)該活性成分的性質(zhì)，可能有軟明膠膠囊根本不需要任何賦形劑的情況。
對(duì)于制備溶液劑和糖漿劑，可以使用的賦形劑包括例如水，多元醇，糖類，轉(zhuǎn)化糖和葡萄糖。
對(duì)于制備注射溶液，可以使用的賦形劑包括例如水，醇，多元醇，甘油，和植物油。
對(duì)于制備栓劑和局部給藥或經(jīng)皮膚給藥用劑，可以使用的賦形劑包括例如天然或者硬化油，蠟，脂肪，半固體或者液體多元醇。
該藥物組合物還可以含有防腐劑，增溶劑，穩(wěn)定劑，潤濕劑，乳化劑，甜味劑，著色劑，調(diào)味劑，改變滲透壓的鹽，緩沖劑，包衣劑或者抗氧化劑。它們也可以含有其它的治療上有價(jià)值的活性劑。
給藥式I化合物的有效量的劑量根據(jù)特殊活性成份的性質(zhì)、患者的年齡和要求以及施用方式來確定。通常，考慮大約0.1-100mg/kg體重/天的劑量，盡管當(dāng)顯示出指征時(shí)可以超過上述上限。
提供下列具體實(shí)施例作為幫助實(shí)施本發(fā)明的指南，而不是為了限制本實(shí)施例一般性注釋和縮略語所有反應(yīng)在氮?dú)鈼l件下進(jìn)行。
縮略語aq.水，鹽水飽和的NaCl水溶液，CH2Cl2二氯甲烷，DBU 1，8-二氮雜雙環(huán)[5.4.0]十一碳-7-烯，DCHA二環(huán)己基胺，DEAD偶氮二羧酸二乙酯，DIAD偶氮二羧酸二異丙酯，DIEA二異丙基乙基胺，DMA二甲基乙酰胺，DMAP 4---甲基氨基吡啶，DMF二甲基甲酰胺，DMSO二甲亞砜，DTT1，4-二硫-DL-蘇糖醇，EDCI N-(3-二甲基氨基丙基)-N’-乙基碳二亞胺·鹽酸鹽，Et2O二乙基醚，EtOAc乙酸乙酯，EtOH乙醇，F(xiàn)moc 9-芴基甲氧基羰基，F(xiàn)moc-OSu N-(9H-芴-2-基甲氧基羰基氧基)琥珀酰亞胺，己烷己烷，HOBT 1-羥基苯并三唑，LAH氫化鋁鋰，LDA二異丙基氨基鋰，LiHMDS雙(三甲基甲硅烷基)氨基鋰，MeOH甲醇，NaH氫化鈉，NaK酒石酸鹽酒石酸鈉鉀，NEM N-乙基嗎啉，NMM N-甲基嗎啉，PMB對(duì)甲氧基芐基，sat.飽和的，TBAF氟化四丁基銨，TBDMSCl叔丁基二甲基甲硅烷基氯，TFA三氟乙酸，THF四氫呋喃，TPTU 0-(1，2-二氫-2-氧代-1-吡啶基)-N，N，N’，N’-四-甲基脲鎓-四氟硼酸鹽。
實(shí)施例1一般方法1.1.用氯甲酸乙酯的酰胺形成在0℃下向1當(dāng)量(10-20ml/mmol)THF中的酸中加入1.1-1.3當(dāng)量4-乙基嗎啉，然后加入1.1-1.3當(dāng)量氯甲酸乙酯。在該溫度下攪拌懸浮液1小時(shí)，之后加入1.1-1.3當(dāng)量THF中的胺。室溫下攪拌混合液過夜，用EtOAc稀釋，然后加入水。用1M HCl，水，NaHCO3水溶液，水，和鹽水洗滌有機(jī)相，通過硫酸鈉干燥，過濾和蒸發(fā)。粗產(chǎn)品經(jīng)快速色譜純化。
1.2.用TPTU作為試劑的酰胺形成向(10-20ml/mmol)CH2Cl2中的1當(dāng)量酸中加入1.1當(dāng)量4-甲基嗎啉，然后加入1.2當(dāng)量TPTU和1.1當(dāng)量胺。在室溫下攪拌該溶液，直到檢測(cè)不到起始原料。濃縮混合液，殘留物溶解于EtOAc。有機(jī)相用1M KHSO4，5％NaHCO3水溶液和鹽水洗滌，通過硫酸鈉干燥，過濾和蒸發(fā)。粗產(chǎn)品經(jīng)快速色譜純化。
1.3.用EDCI作為試劑的酰胺形成向(10-20ml/mmol)THF中的1當(dāng)量酸中加入2-3當(dāng)量4-甲基嗎啉，然后加入0.2當(dāng)量HOBT，和1.2當(dāng)量EDCI和1.1當(dāng)量胺或胺·HCl。在室溫下攪拌該溶液，直到檢測(cè)不到起始原料。用EtOAc稀釋混合液，殘留物溶解于EtOAc。有機(jī)相用1M KHSO4，5％NaHCO3水溶液和鹽水洗滌，通過硫酸鈉干燥，過濾和蒸發(fā)。粗產(chǎn)品經(jīng)快速色譜純化。
2.1.磺酰胺的制備在室溫下，在0.15-1.5當(dāng)量DMAP(任選)存在下，用在(20-30ml/mmol胺)CH2Cl2中的(1.5當(dāng)量/NH2)RSO2Cl處理1當(dāng)量胺，直到TLC檢測(cè)不到起始原料。加入1M HCl，用CH2Cl2萃取無機(jī)相，用1M HCl和鹽水洗滌合并的有機(jī)相，通過硫酸鈉干燥，過濾和蒸發(fā)。粗產(chǎn)物經(jīng)快速色譜純化。
2.2.碳酰胺(carbonamides)的制備在室溫下，在0.15-1.5當(dāng)量DMAP(任選)存在下，用在(20-30ml/mmol胺)CH2Cl2中的(1.5當(dāng)量/NH2)RCOCl處理1當(dāng)量胺，直到TLC檢測(cè)不到起始原料。加入1M HCl，用CH2Cl2萃取無機(jī)相，用1M HCl，飽和NaHCO3溶液和鹽水洗滌合并的有機(jī)相，通過硫酸鈉干燥，過濾和蒸發(fā)。粗產(chǎn)物經(jīng)快速色譜純化。
2.3.脲的制備在室溫下，5當(dāng)量Hüinigs堿存在下，用(5-10ml/mmol胺)CH2Cl2中的(2.1當(dāng)量/NH2)R異氰酸酯處理1當(dāng)量胺·HCl，直到TLC檢測(cè)不到起始原料。加入1M KHSO4，用CH2Cl2萃取無機(jī)相，用鹽水洗滌合并的有機(jī)相，通過硫酸鈉干燥，過濾和蒸發(fā)。粗產(chǎn)物經(jīng)快速色譜純化。
3.1.BOC-裂解用(8-15ml/mmol BOC-胺)CH2Cl2∶TFA(2∶1-10∶1)處理1當(dāng)量Boc-保護(hù)的胺，直到TLC檢測(cè)不到起始原料。將該溶液倒進(jìn)飽和NaHCO3水溶液，用EtOAc或CH2Cl2萃取無機(jī)相。用NaHCO3溶液洗滌合并的有機(jī)相，通過碳酸鈉干燥，過濾和蒸發(fā)。
3.2.在S-三苯甲基存在下選擇性BOC-脫保護(hù)的一般方法在-20℃下用34ml TFA處理30ml CH2Cl2中的15.1mmol N-BOC-S-三苯甲基化合物溶液，5.5小時(shí)內(nèi)升溫至室溫。蒸發(fā)反應(yīng)液，然后用飽和NaHCO3水溶液/EtOAc處理(3x)，有機(jī)相通過硫酸鈉干燥，蒸發(fā)，得到游離氨基-三苯甲基硫烷基(sulfanyl)化合物。
4.1.用三-n-丁基膦的二硫化物裂解在0℃下用1.2-1.5當(dāng)量三-n-丁基膦和(痕量)0.009當(dāng)量H2O處理在(25-30ml/mmol)2，2，2-三氟乙醇中的1當(dāng)量二硫化物，直到TLC檢測(cè)不到起始原料。真空蒸發(fā)溶液，立即通過快速色譜在硅膠上純化。
4.2.用DTT的二硫化物裂解向(15-30ml/mmol)MeOH-任選添加(10-15ml/mmol)THF或(10-15ml/mmol)乙腈中的1當(dāng)量二硫化物中加入飽和K2CO3的MeOH溶液和1.1當(dāng)量DTT。在室溫下攪拌溶液，直到檢測(cè)不到起始原料，用1M KHSO4水溶液(pH 2)酸化溶液，用EtOAc萃取無機(jī)相。用鹽水洗滌合并的有機(jī)相，通過硫酸鈉干燥，過濾和蒸發(fā)。粗產(chǎn)物通過結(jié)晶或柱色譜純化。
4.3.二硫化物和酯的單罐(one-pot)裂解在0℃下向(50-60mmol)THF中的1當(dāng)量二酯中加入(50-60ml/mmol)0.1M LiOH，在室溫下攪拌該溶液直到檢測(cè)不到起始原料。向該溶液中加入3當(dāng)量DTT。在室溫下攪拌該溶液直到檢測(cè)不到中間產(chǎn)物，用1M KHSO4水溶液(pH 2)酸化溶液，用EtOAc萃取無機(jī)相。用鹽水洗滌合并的有機(jī)相，通過硫酸鈉干燥，過濾和蒸發(fā)。粗產(chǎn)物通過結(jié)晶或柱色譜純化。
5.1.對(duì)于二酯應(yīng)用LiOH進(jìn)行酯裂解在0℃下向在THF中的1當(dāng)量二酯(50-60ml/mmol)中加入(50-60ml/mmol)0.1M LiOH，在室溫下攪拌該溶液直到檢測(cè)不到起始原料。用乙醚稀釋該溶液，進(jìn)行相分離，用KHSO4酸化無機(jī)相，EtOAc萃取。通過硫酸鈉干燥有機(jī)層，并蒸發(fā)。
5.2.對(duì)于單酯應(yīng)用LiOH進(jìn)行酯裂解在0℃下向在THF中的1當(dāng)量酯(30-60ml/mmol)中加入(30-60ml/mmol)0.1M LiOH(在反應(yīng)前所有的溶液用氬氣脫氣30分鐘)，在室溫下攪拌該溶液直到檢測(cè)不到起始原料。用乙醚稀釋該溶液，進(jìn)行相分離，用KHSO4酸化無機(jī)相，EtOAc萃取。通過硫酸鈉干燥有機(jī)層，并蒸發(fā)。
5.3.叔-丁酯的裂解將1當(dāng)量的酯在(1-4ml/mmol)CH2Cl2∶CF3CO2H(1∶10-1∶2)的溶液中室溫下攪拌，直到檢測(cè)不到起始原料。濃縮溶液，通過標(biāo)準(zhǔn)方法分離產(chǎn)物。
5.4.用NaOH裂解酯將5.38mmol羧酸甲酯的溶液溶解在150ml EtOH或EtOH/THF(1∶1)中，在室溫下用10.8ml(10.8mmol)1N NaOH水溶液處理。3小時(shí)后(接著進(jìn)行TLC)，蒸發(fā)反應(yīng)，將其倒入10％KHSO4/EtOAc中(3x)。用10％NaCl水溶液洗滌有機(jī)相，通過硫酸鈉干燥，得到羧酸。
6.1.Cbz-基團(tuán)的裂解將在MeOH中的1當(dāng)量Cbz-保護(hù)的胺(10-15ml/mmol)和0.05當(dāng)量披鈀炭在1atm氫氣下攪拌1小時(shí)。通過過濾除去催化劑，通過色譜或結(jié)晶純化粗產(chǎn)物。
7.1.S-乙?；?保護(hù)的硫醇的裂解在0℃下向在THF中的1當(dāng)量硫酯(thioester)(20-40ml/mmol)中加入(20-40ml/mmol)0.1M LiOH(在反應(yīng)前所有的溶液用氬氣脫氣30分鐘)，在室溫下攪拌該溶液直到檢測(cè)不到起始原料。用乙醚稀釋該溶液，進(jìn)行相分離，用KHSO4酸化無機(jī)相，EtOAc萃取。通過硫酸鈉干燥有機(jī)層，并蒸發(fā)。
7.2.S-乙酰基-保護(hù)的硫醇和酯的裂解在0℃下向在THF中的1當(dāng)量硫酯(45-60ml/mmol)中加入(45-60ml/mmol)(6當(dāng)量)0.1M LiOH(在反應(yīng)前所有的溶液用氬氣脫氣30分鐘)，在室溫下攪拌該溶液直到檢測(cè)不到起始原料。用乙醚稀釋該溶液，進(jìn)行相分離，用KHSO4酸化無機(jī)相，EtOAc萃取。通過硫酸鈉干燥有機(jī)層，并蒸發(fā)。
7.3.在乙基/甲基酯存在下裂解S-乙?；?保護(hù)的硫醇在0℃下向在乙醇/甲醇中的1當(dāng)量保護(hù)的化合物(20-30ml/mmol)中加入0.6-0.7M(1.5當(dāng)量)NaOEt/NaOMe(在反應(yīng)前所有的溶液用氬氣脫氣30分鐘)，在0℃下攪拌該溶液直到檢測(cè)不到起始原料。用EtOAc/1MKHSO4稀釋該溶液，進(jìn)行相分離，用EtOAc萃取無機(jī)相，通過硫酸鈉干燥有機(jī)層，并蒸發(fā)。
8.1.PMB-硫醚裂解的一般方法在室溫下向在TFA中的1當(dāng)量PMB硫醚(15-30ml/mmol)中加入10當(dāng)量三乙基硅烷，將該溶液加熱至80℃1分鐘至2小時(shí)，或在室溫下攪拌2天，再冷卻，真空下濃縮，通過快速色譜進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)操作和純化，得到相應(yīng)的硫醇。
9.1.對(duì)于單一化合物(single compounds)應(yīng)用三乙基硅烷進(jìn)行三苯甲基去保護(hù)在0℃下，用0.92ml(5.78mmol)三乙基硅烷處理0.58mmol三苯甲基硫烷基(sulfanyl)在5.8ml TFA中的溶液，在室溫下10-30分鐘后，蒸發(fā)，并通過硅膠快速色譜純化，或從Et2O或Et2O/戊烷中沉淀，得到硫醇-化合物。
9.2.對(duì)于單一化合物應(yīng)用三異丙基硅烷進(jìn)行三苯甲基去保護(hù)在0℃下，用8ml TFA和5.82ml(28mmol)三異丙基硅烷處理2.84mmol三苯甲基-保護(hù)的化合物在30ml CH2Cl2中的溶液。在室溫下30分鐘后，完全蒸發(fā)該溶液，從Et2O/戊烷中沉淀該化合物兩次，或通過硅膠快速色譜純化，得到硫醇。
9.3.對(duì)于平行合成的三苯甲基去保護(hù)將0.32mmol三苯甲基-保護(hù)的化合物溶解在1.5ml乙腈/0.4mlTFA/0.1ml三乙基硅烷中，在室溫下一夜后，通過制備HPLC(RP18，CH3CN/H2O 80∶20至95∶5)純化，得到游離的硫醇。
實(shí)施例2吡咯烷-衍生物的合成2.1.酯的制備將40g(220mmol)L-羥基脯氨酸甲基酯.鹽酸鹽(在甲苯中混懸兩次，減壓下蒸發(fā)除去水)混懸于600ml六甲基二硅氮烷中，回流2小時(shí)。將溶液在減壓下蒸發(fā)，溶解于100ml THF中。緩慢加入在200ml THF中的49.9g(220mmol)2-萘-磺酰氯，在室溫下攪拌16小時(shí)。加入150ml H2O，1小時(shí)后蒸發(fā)溶劑。將殘?jiān)谒?EtOAc中分配(3x)，用10％NaCl洗滌有機(jī)相，通過硫酸鈉干燥，得到60.4g(82％)(2S，4R)-4-羥基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸甲酯，MS335(M+)。
按照類似的方法制備下列化合物L(fēng)-羥基脯氨酸芐基酯·鹽酸鹽和1-萘磺酰氯得到(2S，4R)-4-羥基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羧酸芐基酯，MS411(MH+)；
L-羥基脯氨酸甲酯·鹽酸鹽和1-萘磺酰氯得到(2S，4R)-4-羥基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羧酸甲酯，MS335(M)；L-羥基脯氨酸芐基酯·鹽酸鹽和甲烷磺酰氯得到(2S，4R)-4-羥基-1-甲烷磺?；?吡咯烷-2-羧酸芐基酯，mp 132-133℃，MS300(MH+)；L-羥基脯氨酸甲酯·鹽酸鹽和甲烷磺酰氯得到(2S，4R)-4-羥基-1-甲烷磺酰基-吡咯烷-2-羧酸甲酯，mp 115.5-117℃，MS164(M-COOMe)。
(2S，4R)-4-羥基-吡咯烷-2-羧酸叔-丁酯*和萘基磺酰氯得到(2S，4R)-4-羥基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羧酸叔-丁酯，其直接進(jìn)行下列反應(yīng)。
*按照T.Ken-ichi，S.Hiroyuki TetrahedronAsymmetry 1995，6，7，1641-1656從Z-Hyp-OtBu制備。
通過甲磺酸酯將13.9ml(215mmol)甲烷磺酸、29.8ml(215mmol)三乙胺和58.7g(224mmol)三苯膦在150ml甲苯中的兩相溶液加入到60g(179mmol)(2S，4R)-4-羥基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羧酸甲酯在300ml甲苯中的機(jī)械攪拌下的混懸液中。加入44.9ml(233mmol)of二異丙基偶氮二羧酸酯(放熱！)后，將該溶液加熱至80℃2.5小時(shí)。在室溫下加入300ml水，用乙酸乙酯(3×300ml)萃取。用10％KHSO4(2×100ml)，10％NaCl(2×150ml)水溶液洗滌有機(jī)相，通過硫酸鈉干燥，蒸發(fā)得到180g粗產(chǎn)物?？焖偕V(EtOAc/己烷1∶1)純化，得到63.7g(86％)(4S，2S)-4-甲烷磺?；趸?1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羧酸甲酯。
在室溫下將64.2g(167mmol)三苯基甲烷硫醇緩慢加入到17.9g(160mmol)叔-丁基鉀在300ml DMF的溶液中，機(jī)械攪拌30分鐘。通過末端用冰浴冷卻，在20℃下加入在300ml DMF中的63g(152mmol)of(4S，2S)-4-甲烷磺?；趸?1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸甲酯。在100℃下加熱反應(yīng)1.3小時(shí)，冷卻，蒸發(fā)至400ml，用250ml NH4Cl/EtOAc飽和水溶液(3×300)萃取。用10％NaCl水溶液洗滌有機(jī)相，通過硫酸鈉干燥并蒸發(fā)?？焖偕V(CH2Cl2/MeOH 99∶1)得到(2S，4R)-1-(萘-2-磺?；?-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羧酸甲酯的58.6g(65％，(2S，4R)/(2R，4R)-異構(gòu)體，大約4∶1，1H-NMR)和9.2g(10％)，(2S，4R)/(2R，4R)-異構(gòu)體，大約1∶1，1H-NMR)，MS594(MH+)。
按照類似的方法制備下列化合物(2S，4R)-4-羥基-1-甲烷磺?；?吡咯烷-2-羧酸甲酯經(jīng)80℃下3.75小時(shí)，得到(4S，2S)-4-甲烷磺?；趸?1-(甲基磺?；?-吡咯烷-2-羧酸甲酯，將其與三苯基甲烷硫醇鹽在100℃下加熱45分鐘，得到(2S，4R)-1-甲烷磺酰基-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羧酸甲酯(2S，4R)/(2R，4R)-異構(gòu)體，大約9∶1，1H-NMR)，MS482(MH+)；(2S，4R)-4-羥基-1-甲烷磺酰基-吡咯烷-2-羧酸芐基酯經(jīng)80℃下5小時(shí)，得到(2S，4S)-1-甲烷磺?；?4-甲烷磺?；趸?吡咯烷-2-羧酸芐基酯，將其與4-甲氧基芐基硫醇/叔-丁醇鉀加熱30分鐘，得到(2S，4S)-1-甲烷磺?；?4-甲烷磺?；趸?吡咯烷-2-羧酸芐基酯，mp 91-92℃，MS453(MNH4+)。
(2S，4R)-4-羥基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羧酸甲酯，經(jīng)(2S，4S)-4-甲烷磺?；趸?1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羧酸甲酯，其與4-甲氧基芐基硫醇/叔-丁醇鉀加熱，得到無色油狀(2S，4R)-4-(4-甲氧基-芐基硫烷基)-1-萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羧酸甲酯(Rf 0.4 CH2Cl2∶MeOH 9∶1)，MS472(MH+)。
(2S，4R)-4-羥基-吡咯烷-1，2-二羧酸1-叔-丁酯2-甲酯，經(jīng)(2S，4S)-4-甲烷磺?；趸?吡咯烷-1，2-二羧酸1-叔-丁酯2-甲酯，其與硫代乙酸鉀在DMF中加熱，得到橙色液體狀(2S，4R)-4-乙?；蛲榛?吡咯烷-1，2-二羧酸1-叔-丁酯2-甲酯，MS303(MH+)。
(2S，4R)-4-羥基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羧酸叔-丁酯，經(jīng)(2S，4S)-4-甲烷磺?；趸?1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羧酸叔-丁酯，將其用硫代乙酸鉀在100℃下處理，得到淡黃色固體(2S，4R)-4-乙?；蛲榛?1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸叔-丁酯，MS359(M-HSCOCH3)。
(2S，4R)-4-羥基-吡咯烷-1，2-二羧酸1-芐基酯2-叔-丁酯(Z-Hyp-OtBu*)，經(jīng)(2S，4S)-4-甲烷磺?；趸?吡咯烷-1，2-二羧酸1-芐基酯2-叔-丁酯，將其用硫代乙酸鉀在DMF中、100℃下處理，得到(2S，4R)-4-乙?；蛲榛?吡咯烷-1，2-二羧酸1-芐基酯2-叔-丁酯。通過溴化物在1.5-4.5℃間、0.5小時(shí)內(nèi)，向76.5g(291.6mmol，6當(dāng)量)三苯膦在650ml THF的溶液中，加入在70ml THF中的44.6ml(286.8mmol，5.9當(dāng)量)DEAD。在加入42.2g(486.1mmol，10當(dāng)量)LiBr前，攪拌該溶液0.5小時(shí)，將反應(yīng)混合物再次冷卻至4℃，以加入在75mlTHF中的20g(48.6mmol)(2S，4R)-4-羥基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羧酸芐基酯。攪拌3小時(shí)后，加入水，濃縮混懸液，再溶解于700ml EtOAc和水中。進(jìn)行相分離，有機(jī)相用100ml EtOAc(3x)萃取，用鹽水洗滌合并的有機(jī)相，通過硫酸鎂干燥并蒸發(fā)。通過從EtOAc/己烷中結(jié)晶除去三苯膦氧化物，通過硅膠柱色譜純化母液(己烷∶EtOAc 3∶1)，得到13.4g(62％)無色固體(2S，4S)-4-溴-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸芐基酯，mp 97-98℃，MS473(MH+)。
在0℃下，用4.4ml(31.5mmol，1.15當(dāng)量)4-甲氧基芐基硫醇處理在150ml DMF中的3.38g(30.1mmol，1.1當(dāng)量)叔丁基鉀。在加入在100ml DMF中的12.99g(27.4mmol)(2S，4S)-4-溴-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羧酸芐基酯之前，在室溫下攪拌該溶液1小時(shí)。在室溫下攪拌該溶液過夜，真空下除去DMF，將殘?jiān)偃芙庥贓tOAc和1M KHSO4水溶液中。進(jìn)行相分離，用鹽水洗滌有機(jī)相，通過硫酸鈉干燥并蒸發(fā)。通過硅膠快速色譜純化粗制油，己烷/EtOAc(3∶1-2∶1)作為洗脫劑，得到7.23g淡黃色固體(48％)(2S，4R)-4-(4-甲氧基-芐基硫烷基)-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸芐基酯，mp 90-91℃，MS547(M+)。
按照類似的方法制備下列化合物(2S，4R)-4-羥基-吡咯烷-1，2-二羧酸1-叔-丁酯2-甲酯與4-甲氧基芐基硫醇/叔丁基鉀，得到(2S，4R)-4-(4-甲氧基-芐基硫烷基)-吡咯烷-1，2-二羧酸1-叔-丁酯2-甲酯，MS382(MH+)。
通過氯化物((2S，4R)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-1，2-二羧酸1-叔-丁酯2-甲酯本發(fā)明中間體的合成為本領(lǐng)域已知技術(shù)，例如在國際專利申請(qǐng)WO 9820001和歐洲專利申請(qǐng)公開EP-A-696593中描述)用680g(2.6mol)三苯膦處理374g(1.48mol)(2S，4R)-4-羥基-吡咯烷-1，2-二羧酸1-叔-丁酯2-甲酯在1.61 CH2Cl2中的溶液，冷卻至3-5℃，用1.24升(12.8mol)CCl4處理10分鐘，在該溫度下2小時(shí)后，停止冷卻，在2小時(shí)時(shí)間內(nèi)將反應(yīng)溫度升高至35℃。將其冷卻至20℃，進(jìn)一步攪拌45分鐘。加入4升n-庚烷后，將反應(yīng)蒸發(fā)至2.9升，冷卻至0℃，過濾，將殘?jiān)孟嗤椒ㄌ幚韮纱危谌螌堅(jiān)芙庥?升CH2Cl2中。蒸發(fā)溶劑，并通過硅膠過濾，己烷/叔-丁基(buthyl)-甲基醚9∶1作為洗脫劑。蒸發(fā)溶劑得到347g(89％)(2S，4S)-4-氯-吡咯烷-1，2-二羧酸1-叔-丁酯2-甲酯，MS246(MH+)。
冷卻76g(0.68mol)叔丁基鉀在1.5升DMF中的溶液(-3℃)，緩慢(1.5h)用在1.8升DMF中的202g(0.73mol)三苯基甲烷硫醇處理(最大1℃)。在0℃下2.5小時(shí)后，加入161g(0.61mol)(2S，4S)-4-氯-吡咯烷-1，2-二羧酸1-叔-丁酯2-甲酯在0.35升DMF中的溶液。在2℃下攪拌反應(yīng)過夜，蒸發(fā)，溶解于1.5升EtOAc中，倒入2.7升飽和NH4Cl水溶液中，用EtOAc(2x)萃取。有機(jī)相用飽和NaHCO3水溶液洗滌，通過硫酸鈉干燥并蒸發(fā)。用洗脫劑為己烷/EtOAc(95∶5至7∶3)的硅膠色譜純化，得到268g(87％)(2S，4R)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-1，2-二羧酸1-叔-丁酯2-甲酯，MS504(MH+)。
2.2.胺部分取代類型的修飾從(2S，4R)-4-乙?；蛲榛?吡咯烷-1，2-二羧酸1-叔-丁酯2-甲酯，按照3.1.進(jìn)行BOC-去保護(hù)，隨后分別用萘-2-磺酰氯(2.1.)，4-叔-丁基-苯磺酰氯(2.1.)和萘-2-羰基氯(2.2.)處理，制備下列化合物(2S，4R)-4-乙?；蛲榛?1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羧酸甲酯，白色固體，MS393(MH+)；(2S，4R)-4-乙酰基硫烷基-1-(4-叔-丁基-苯磺?；?-吡咯烷-2-羧酸甲酯，白色固體，MS400(MH+)；(2S，4R)-4-乙酰基硫烷基-1-(萘-2-羰基)-吡咯烷-2-羧酸甲酯，無色油，MS358(MH+)；2.3.酸的制備將14.7g(29.2mmol)(2S，4R)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-1，2-二羧酸1-叔-丁酯2-甲酯的溶液溶解于660ml THF/EtOH(1∶1)中，在室溫下用58.4ml(58.4mmol)1N NaOH水溶液處理。2小時(shí)后，將反應(yīng)倒入10％KHSO4水溶液/EtOAc中(3x)。用10％NaCl水溶液洗滌有機(jī)相，并通過硫酸鈉干燥，得到14.8g(定量)(2S，4R)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-1，2-二羧酸1-叔-丁酯。MS488(M-H)-。
按照類似的方法制備下列化合物(2S，4R)-1-甲烷磺?；?4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羧酸甲酯給出(2S，4R)-1-甲烷磺?；?4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羧酸，mp 64-69℃，MS466(M-H)-；(2S，4R)-1-甲烷磺?；?4-甲烷磺?；趸?吡咯烷-2-羧酸芐基酯給出(2S，4R)-1-甲烷磺?；?4-(4-甲氧基-芐基硫烷基)-吡咯烷-2-羧酸，MS344(M-H)-；(2S，4R)-1-(萘-2-磺?；?-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羧酸甲酯給出(2S，4R)-1-(萘-2-磺?；?-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羧酸，MS578(M-H)-；(2S，4R)-4-(4-甲氧基-芐基硫烷基)-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸芐基酯給出(2S，4R)-4-(4-甲氧基-芐基硫烷基)-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸，MS456(M-H)-；(2S，4R)-4-(4-甲氧基-芐基硫烷基)-吡咯烷-1，2-二羧酸1-叔-丁酯2-甲酯給出(2S，4R)-4-(4-甲氧基-芐基硫烷基)-吡咯烷-1，2-二羧酸1-叔-丁酯，MS366(M-H)-；(2S，4R)-4-(4-甲氧基-芐基硫烷基)-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸甲酯給出無色固體(2S，4R)-4-(4-甲氧基-芐基硫烷基)-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸，MS456(M-H)-。
從(2S，4R)-4-乙酰基硫烷基-吡咯烷-1，2-二羧酸1-芐基酯2-叔-丁酯，按照5.3.制備淡粉色無定形物(2S，4R)-4-乙?；蛲榛?吡咯烷-1，2-二羧酸1-芐基酯，MS322(M-H)-。
酸的制備應(yīng)用其它方法從(2S，4R)-4-乙?；蛲榛?1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羧酸叔-丁酯，按照5.3.制備米黃色固體(2S，4R)-4-乙?；蛲榛?1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸，MS378(M-H)-。
實(shí)施例3二硫化物-二酸在0℃下，向在220ml THF中的1.65g(2S，4R)-4-乙?；蛲榛?1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸甲酯中加入220ml 0.1N LiOH，在室溫下攪拌該溶液1小時(shí)，濃縮，用CH2Cl2洗滌無機(jī)層，酸化，并用EtOAc萃取。用鹽水洗滌有機(jī)層，通過硫酸鈉干燥并蒸發(fā)，得到白色固體(2S，4R)-4-巰基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸，MS337(MH+)。
向在20ml CH2Cl2中的1.41g(4.18mmol)(2S，4R)-4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羧酸1.22ml(8.8mmol，2.2當(dāng)量)三乙胺中，加入0.13M I2在CH2Cl2中的溶液，直到不再消耗碘。通過加入NaHSO3水溶液破壞過量的碘，進(jìn)行相分離，用CH2Cl2萃取無機(jī)層，用鹽水洗滌合并的有機(jī)相，并通過硫酸鈉干燥。殘?jiān)眉和檠兄?，得?.3g淡黃色固體(2S，4R)-4-[(3R，5S)-5-羧基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-3-基二硫烷基]-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羧酸(93％)，MS673(MH+)。
按照類似的方法制備下列化合物從(2S，4R)-4-乙?；蛲榛?1-(4-叔-丁基-苯磺?；?-吡咯烷-2-羧酸甲酯得到黃色泡沫狀(2S，4R)-4-[(3R，5S)-5-羧基-1-(4-叔-丁基-苯磺?；?-吡咯烷-3-基二硫烷基]-1-(4-叔-丁基-苯磺?；?-吡咯烷-2-羧酸。
從(2S，4R)-4-乙酰基硫烷基-1-(萘-2-羰基)-吡咯烷-2-羧酸甲酯得到黃色泡沫狀(2S，4R)-4-[(3R，5S)-5-羧基-1-(萘-2-羰基)-吡咯烷-3-基二硫烷基]-1-(萘-2-羰基)-吡咯烷-2-羧酸。
實(shí)施例4衍生于L-Hyp-OMe的其它立體異構(gòu)體在室溫下，將在250ml CH2Cl2中的4.54g(13.5mmol)(2S，4R)-4-羥基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羧酸甲酯用2.48g(20.3mmol，1.5當(dāng)量)DMAP和3.87g(20.3mmol，1.5當(dāng)量)p-甲苯磺酰氯處理36小時(shí)，倒入1M KHSO4中，用CH2Cl2萃取。用鹽水洗滌有機(jī)相，通過硫酸鈉干燥并蒸發(fā)。通過洗脫劑為EtOAc∶己烷1∶1的柱色譜純化，得到5.43g(82％)(2S，4R)-1-(萘-2-磺酰基)-4-(甲苯-4-磺?；趸?-吡咯烷-2-羧酸甲酯16217B112，其為白色固體。
將5.42g(11mmol)(2S，4R)-1-(萘-2-磺?；?-4-(甲苯-4-磺?；趸?-吡咯烷-2-羧酸甲酯混懸于60ml DMF中，用1.89g(16.55mmol，1.5當(dāng)量)硫代乙酸鉀處理。將反應(yīng)混合物加熱至100℃45分鐘，冷卻至室溫，并濃縮。將殘?jiān)偃芙庥贑H2Cl2/飽和NaHCO3溶液中。用EtOAc萃取無機(jī)相，用鹽水洗滌有機(jī)相，并通過硫酸鈉干燥。殘?jiān)舭l(fā)后，通過柱色譜純化，得到3.6g(83％)橙色油狀(2S，4S)-4-乙酰基硫烷基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羧酸甲酯，MS394(MH+)。
類似地，從(2S，4R)-4-羥基-吡咯烷-1，2-二羧酸1-叔-丁酯2-甲酯制備橙色油狀(2S，4S)-4-乙酰基硫烷基-吡咯烷-1，2-二羧酸1-叔-丁酯2-甲酯，MS304(MH+)。
類似地，為了如前部分描述的二硫化物二酸形成，制備下列化合物從(2S，4S)-4-乙?；蛲榛?1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸甲酯制備(2S，4S)-4-[(3S，5S)-5-羧基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-3-基二硫烷基]-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸，其為米黃色固體，MS671(M-H)-。
從(2S，4S)-4-乙?；蛲榛?吡咯烷-1，2-二羧酸1-叔-丁酯2-甲酯制備(2S，2’S，4S，4S’)-4，4’-二硫烷二基-二-吡咯烷-1，2-二羧酸1，1’-二-叔-丁酯，其為淡黃色固體，MS491(M-H)-。
實(shí)施例5延伸的(Extended)酯的制備5.1.延伸的酯I同型系列[類似于J.Podlech，D.Seebach應(yīng)用Arndt-Eistert反應(yīng)從α-氨基酸制備β-氨基酸范圍、限制和立體選擇性。應(yīng)用到碳水化合物肽。一些β-氨基酸的立體選擇性α-烷基化，Liebigs Ann.(1995)，Issue 7，1217-28]在0℃下，將25g(93mmol)(2S，4R)-1-甲烷磺?；?4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羧酸在265ml CH2Cl2中的溶液用2滴DMF處理，隨后用8ml(99mmol)草酰氯處理。在0℃下15分鐘后，將反應(yīng)在室溫下攪拌2小時(shí)，蒸發(fā)，溶解于260ml THF/CH3CN 1∶1中，然后在0℃下加入58.5ml(117mmol)2M三甲基甲硅烷基重氮甲烷在己烷中的溶液。將反應(yīng)在室溫下攪拌16小時(shí)，蒸發(fā)，倒入H2O/EtOAc中。通過硫酸鈉干燥有機(jī)相，蒸發(fā)，通過快速硅膠柱色譜純化，己烷/EtOAc(7∶3至1∶1)作為洗脫劑，得到12.4g(48％)of(2S，4R)-2-重氮-1-(1-甲烷磺酰基-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-基)-乙酮，MS509(MNH4+)。
按照類似于上面的方法，從(2S，4R)-1-(萘-2-磺酰基)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羧酸(與2.3當(dāng)量三甲基甲硅烷基重氮甲烷)給出(2S，4R)-2-重氮-1-[1-(萘-2-磺?；?-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-基]-乙酮，產(chǎn)率57％，MS621(MNH4+)。
將12g(24.4mmol)(2S，4R)-2-重氮-1-(1-甲烷磺?；?4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-基)-乙酮在96ml MeOH/67ml THF中的溶液冷卻(-25℃)，在暗處用0.62g(2.7mmol)苯甲酸銀在13.9ml(99.7mmol)三乙胺中處理。將反應(yīng)升溫至室溫，在室溫下攪拌1小時(shí)，蒸發(fā)，用H2O/EtOAc萃取，通過快速硅膠柱色譜純化，己烷/EtOAc(7∶3)作為洗脫劑，得到8.7g(72％)(2R，4R)-(1-甲烷磺?；?4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-基)-乙酸甲酯，MS496(MH+)。
按照類似于上面的方法，從(2S，4R)-2-重氮-1-[1-(萘-2-磺?；?-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-基]-乙酮給出(2R，4R)-[1-(萘-2-磺酰基)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-基]-乙酸甲酯，產(chǎn)率72％，MS625(MNH4+)。
5.2.延伸的酯II將在800ml CH2Cl2中的30g(81.6mmol)(2S，4R)-4-(4-甲氧基-芐基硫烷基)-吡咯烷-1，2-二羧酸1-叔-丁酯用62.8ml(571.2，7當(dāng)量)NMM、2.19g(16.24mmol，0.2當(dāng)量)羥基苯并三唑、37.5g(195.84mmol，2.4當(dāng)量)EDCI和17.5g(179.52mmol，2.2當(dāng)量)N，O-二甲基胲基-鹽酸鹽處理。將該溶液在室溫下攪拌3小時(shí)，濃縮，溶解于500ml 1M KHSO4溶液中，加入500ml EtOAc。分離有機(jī)層，用鹽水洗滌，通過硫酸鈉干燥并蒸發(fā)。通過快速硅膠色譜純化，EtOAc∶己烷1∶1作為洗脫劑，得到3.6g(62.4％)淡黃色油狀(2S，4R)-4-(4-甲氧基-芐基硫烷基)-2-(甲氧基-甲基-氨基甲?；?-吡咯烷-1-羧酸叔-丁酯，MS411(MH+)。
向360ml THF中，加入30.8ml LiAlH4溶液(30.8mmol，1M在THF中，1.2當(dāng)量)，將該溶液冷卻至-30℃，在該溫度下加入在100ml THF中的10.9g(25.67mmol)(2S，4R)-4-(4-甲氧基-芐基硫烷基)-2-(甲氧基-甲基-氨基甲?；?-吡咯烷-1-羧酸叔-丁酯，攪拌30分鐘。將該溶液冷卻至-78℃，加入硅膠、MgSO4和10％KHSO4溶液的混懸液，緩慢升溫至室溫。過濾該混懸液，用THF徹底洗滌，并蒸發(fā)。將粗產(chǎn)物再溶解于CH2Cl2中，通過硫酸鈉干燥并蒸發(fā)，得到9g(定量)黃色油狀(2S，4R)-2-甲?；?4-(4-甲氧基-芐基硫烷基)-吡咯烷-1-羧酸叔-丁酯，MS351(M+)。
在-78℃下，向6.2ml(30.82mmol，1.2當(dāng)量)膦酸乙酸三乙酯在80ml THF中的溶液中，加入1.35g(30.82mmol，1.2當(dāng)量，55％)NaH，隨后加入在50ml THF中的9g(25.68mmol，1當(dāng)量)(2S，4R)-2-甲?；?4-(4-甲氧基-芐基硫烷基)-吡咯烷-1-羧酸叔-丁酯。將該溶液升溫至室溫過夜，冷卻至O℃，加入5ml MeOH，隨后加入105ml酒石酸鈉鉀飽和水溶液和105ml 10％NaHCO3溶液。過濾該混懸液，進(jìn)行相分離，用EtOAc萃取無機(jī)相，通過硫酸鈉干燥合并的有機(jī)相，過濾并蒸發(fā)。粗產(chǎn)物通過硅膠柱色譜純化，己烷/EtOAc(9∶1-8∶2)作為洗脫劑，得到6.21g(58％)無色膠狀(E)-和/或(Z)-(2S，4R)-2-(2-乙氧基羰基-乙烯基)-4-(4-甲氧基-芐基硫烷基)-吡咯烷-1-羧酸叔-丁酯，MS422(MH+)。
按照類似于文獻(xiàn)[T.Hudlicky，G.Sinai-Zingde，M.G.Natchus，在烯烴存在下α，β-不飽和酯的選擇性還原，四面體通訊(TetrahedronLett.)(1987)，28(44)，5287-90]的方法在室溫下，用1.32g(54mmol，6當(dāng)量)鎂處理在42ml MeOH中的3.78g(9mmol，1eq)(E)-和/或(Z)-(2S，4R)-2-(2-乙氧基羰基-乙烯基)-4-(4-甲氧基-芐基硫烷基)-吡咯烷-1-羧酸叔-丁酯5小時(shí)。蒸發(fā)溶劑，將粗產(chǎn)物溶解于EtOAc中，從固體顆粒中過濾。重復(fù)該方法，蒸發(fā)溶劑，得到3.67g(定量)(2R，4R)-4-(4-甲氧基-芐基硫烷基)-2-(2-甲氧基羰基-乙基)-吡咯烷-1-羧酸叔-丁酯，其為無色油，MS410(MH+)。
在0℃下，向在40ml CH2Cl2中的1.54g(3.76mmol，1當(dāng)量)(2R，4R)-4-(4-甲氧基-芐基硫烷基)-2-(2-甲氧基羰基-乙基)-吡咯烷-1-羧酸叔-丁酯中加入4.32ml(56.4mmol，15當(dāng)量)TFA，在室溫下攪拌該溶液4小時(shí)。蒸發(fā)溶劑，粗產(chǎn)物(2R，4R)-3-[4-(4-甲氧基-芐基硫烷基)-吡咯烷-2-基]-丙酸甲酯·三氟乙酸鹽不經(jīng)過進(jìn)一步純化直接進(jìn)行下列反應(yīng)。
在室溫下，用0.1ml(0.72mmol，3當(dāng)量)三乙胺和82mg(0.36mmol，1.5當(dāng)量)萘基磺酰氯處理在CH2Cl2中的0.1g(0.24mmol，1當(dāng)量)(2R，4R)-3-[4-(4-甲氧基-芐基硫烷基)-吡咯烷-2-基]-丙酸甲酯·三氟乙酸鹽2小時(shí)。進(jìn)一步加入0.2ml(1.44mmol，6當(dāng)量)三乙胺，將該溶液再攪拌2小時(shí)。將該溶液用10％NaHCO3溶液和水萃取，通過硫酸鈉干燥并蒸發(fā)。分離出0.11g(92％)黃色油狀(2R，4R)-3-[4-(4-甲氧基-芐基硫烷基)-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-基]-丙酸甲酯，MS500(MH+)。
類似地，從(2R，4R)-3-[4-(4-甲氧基-芐基硫烷基)-吡咯烷-2-基]-丙酸甲酯·三氟乙酸鹽和甲基磺酰氯制備(2R，4R)-3-[1-甲烷磺酰基-4-(4-甲氧基-芐基硫烷基)-吡咯烷-2-基]-丙酸甲酯，MS388(MH+)。
實(shí)施例6延伸的酸的制備6.1.延伸的酸I根據(jù)酯5.4.水解的常規(guī)方法，從(2R，4R)-[1-(萘-2-磺?；?-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-基]-乙酸甲酯給出(2R，4R)-[1-(萘-2-磺?；?-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-基]-乙酸，MS592(M-H)-。
根據(jù)酯5.4.水解的常規(guī)方法，從(2R，4R)-(1-甲烷磺?；?4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-基)-乙酸甲酯給出(2R，4R)-(1-甲烷磺?；?4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-基)-乙酸，MS480(M-H)-。
6.2.延伸的酸II在室溫下，用1.85ml 1M NaOH(1.85mmol，5當(dāng)量)處理在5ml EtOH中的185mg(0.37mmol，1當(dāng)量)(2R，4R)-3-[4-(4-甲氧基-芐基硫烷基)-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-基]-丙酸甲酯2小時(shí)，通過加入1M HCl將pH調(diào)節(jié)至7，蒸發(fā)溶劑，將粗產(chǎn)物再溶解于EtOH中，過濾固體并蒸發(fā)，得到170mg(94％)棕色膠狀(2R，4R)-3-[4-(4-甲氧基-芐基硫烷基)-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-基]-丙酸，MS486(MH+)。
類似地，從(2R，4R)-3-[1-甲烷磺酰基-4-(4-甲氧基-芐基硫烷基)-吡咯烷-2-基]-丙酸甲酯制備(2R，4R)-3-[1-甲烷磺酰基-4-(4-甲氧基-芐基硫烷基)-吡咯烷-2-基]-丙酸，MS374(MH+)。
實(shí)施例7側(cè)鏈的制備7.1.衍生于Z-Sar的化合物在氬氣氛下，用11.75ml(88mmol)異丁基氯甲酸酯在3℃下處理在400ml DMF中的18.03g(80mmol)Z-Sar-OH和11.3ml(88mmol，1.1當(dāng)量)N-乙基嗎啉，攪拌2小時(shí)。緩慢加入在100ml DMF中的12.81g(76mmol，0.96當(dāng)量)(4-甲基氨基)苯甲酸甲酯，將該溶液在室溫下攪拌過夜。蒸發(fā)溶劑，將殘?jiān)偃芙庥?00ml水和250ml EtOAc中。用300mlEtOAc(2x)萃取無機(jī)層，合并的有機(jī)層用150ml 1N KHSO4(2x)、200ml水(2x)、200ml稀釋的NaHCO3溶液(2x)、200ml水洗滌，通過硫酸鎂干燥，過濾并蒸發(fā)。應(yīng)用己烷∶EtOAc(4∶1-1∶2)梯度快速硅膠色譜純化，得到24.54g(83％)黃色油狀4-[[(芐氧基羰基-甲基-氨基)-乙?；鵠-甲基-氨基]-苯甲酸甲酯，其按照6.1.去保護(hù)，得到4-(甲基-甲基氨基乙酰基-氨基)-苯甲酸甲酯，MS237(MH+)。
類似地，從Z-Sar-OH和甲基N-甲基制備淡黃色油狀的2-[[(芐氧基羰基-甲基-氨基)-乙酰基]-甲基-氨基]-苯甲酸甲酯(Rf 0.3己烷∶EtOAc1∶2)，MS370(M)，其按照6.1.去保護(hù)，通過用HCl/MeOH處理轉(zhuǎn)化成鹽酸鹽，得到2-(甲基-甲基氨基乙酰基-氨基)-苯甲酸甲酯.鹽酸鹽，MS237(MH+)。
在氬氣氛下，用7.95g(77mmol，1.1當(dāng)量)N-甲基嗎啉在0℃下處理在400ml DMF中的15.784g(70mmol)Z-Sar-OH和13.52g(77mmol，1.1當(dāng)量)2-氯-4，6-二甲氧基-1，3，5-三嗪，攪拌2小時(shí)。加入在100mlDMF中的12.26g(73.5mmol，1.05當(dāng)量)4-氨基苯甲酸乙酯，隨后加入3.41g(28mmol，0.40當(dāng)量)DMAP，升溫至室溫。攪拌該混合物過夜，蒸發(fā)溶劑，將殘?jiān)偃芙庥?00ml水和250ml CH2Cl2中。用250mlCH2Cl2(2x)萃取水層，用水洗滌合并的有機(jī)層，并通過硫酸鎂干燥，過濾并蒸發(fā)。應(yīng)用己烷/EtOAc(4∶1-1∶1-EtOAc)梯度快速硅膠色譜純化，得到21.69g(83.7％)淡黃色固體4-[2-(芐氧基羰基-甲基-氨基)-乙酰基氨基]-苯甲酸乙酯，其按照6.1.去保護(hù)，得到白色漿狀4-(2-甲基氨基-乙酰基氨基)-苯甲酸乙酯，MS237(MH+)。
類似地，制備下列化合物從Z-Sar-OH和3-氨基苯甲酸乙酯，通過3-[2-(芐氧基羰基-甲基-氨基)-乙?；被鵠-苯甲酸乙酯，白色固體(Rf 0.4己烷∶EtOAc 1∶2)，MS371(MH+)，隨后按照6.1.去保護(hù)，用HCl/MeOH處理，得到白色固體3-(2-甲基氨基-乙?；被?-苯甲酸乙酯.鹽酸鹽(1∶1)(Rf 0.05；EtOAc)，MS236(M)；從Z-Sar-OH和氨基苯甲酸甲酯，隨后通過按照6.1.去保護(hù)和用HCl/MeOH處理，得到白色結(jié)晶2-(2-甲基氨基-乙?；被?-苯甲酸甲酯.鹽酸鹽(1∶1)(Rf 0.1；EtOAc)，MS222(M)。
進(jìn)一步處理側(cè)鏈中間體，得到下列化合物7.2.氮的烷基化在氬氣氛下，將在80ml DMF中的2.6g(7.02mmol)3-[2-(芐氧基羰基-甲基-氨基)-乙?；被鵠-苯甲酸乙酯用1.13g(25.97mmol，3.7當(dāng)量)NaH(55％Disp)處理，隨后用7.34ml(116.5mmol)甲基碘化物處理。將該混懸液在室溫下攪拌過夜，加入冰水，并用100ml CH2Cl2(3x)萃取。用水洗滌合并的有機(jī)層，通過硫酸鎂干燥，過濾并蒸發(fā)。應(yīng)用己烷/EtOAc(9∶1-3∶2)梯度快速硅膠色譜純化殘?jiān)玫?.61g(59％)黃色油狀3-[[(芐氧基羰基-甲基-氨基)-乙?；鵠-甲基-氨基]-苯甲酸乙酯(Rf 0.4己烷∶EtOAc 1∶2)，MS384(M)，其按照6.1.去保護(hù)和用HCl/MeOH處理，得到白色結(jié)晶3-(甲基-甲基氨基乙?；?氨基)-苯甲酸乙酯.鹽酸鹽(1∶1)(Rf 0.1；EtOAc)，MS250(M)。
7.3.還原在氬氣氛下，將在35ml THF中的742.7mg(32.4mmol，1.5當(dāng)量)硼氫化鋰加入到在室溫下、100ml THF中的8g(21.6mmol)4-[[(芐氧基羰基-甲基-氨基)-乙?；鵠-甲基-氨基]-苯甲酸甲酯中。在室溫下攪拌該混懸液過夜，加熱至50℃3.25小時(shí)，再冷卻至室溫，緩慢加入21mlMeOH。將該溶液加入到冰水中，用乙醚萃取(3x)，水洗滌合并的有機(jī)層，通過硫酸鎂干燥，過濾并蒸發(fā)。應(yīng)用CH2Cl2/MeOH(100∶0-99.9∶0.1)梯度快速硅膠色譜純化粗產(chǎn)物，得到3.9g(52％){[(4-羥基甲基-苯基)-甲基-氨基甲酰基]-甲基}-甲基-氨基甲酸芐基酯，其為黃色油(Rf 0.4CH2Cl2∶MeOH 9∶1)，MS343(MH+)。
7.4.O-甲硅烷基保護(hù)或醚形成在氬氣氛下，將2.4g(7.0mmol)[[(4-羥基甲基-苯基)-甲基-氨基甲?；鵠-甲基]-甲基-氨基甲酸芐基酯和1.2g(7.7mmol，1.1當(dāng)量)TBDMSCl溶解于35ml DMF中，冷卻至5℃，分小部分加入2.4g(35.0mmol，5.0當(dāng)量)咪唑。在室溫下攪拌該溶液過夜，進(jìn)一步加入435.7mg(2.8mmol，0.4當(dāng)量)TBDMSCl，再攪拌4小時(shí)。將該溶液加入冰水中，進(jìn)行相分離，有機(jī)相用50ml CH2Cl2(3x)萃取，用水洗滌合并的有機(jī)層(2x)，通過硫酸鎂干燥，過濾并蒸發(fā)。應(yīng)用CH2Cl2/MeOH(100∶0-95∶5)梯度快速硅膠色譜純化，得到2.25g(70％)黃色油狀[[[4-(叔-丁基-二甲基-硅烷基氧基甲基)-苯基]-甲基-氨基甲?；鵠-甲基]-甲基-氨基甲酸芐基酯(Rf 0.8CH2Cl2∶MeOH 9∶1)，MS457(MH+)，其按照6.1.去保護(hù)，得到棕色油狀N-[4-(叔-丁基-二甲基-硅烷基氧基甲基)-苯基]-N-甲基-2-甲基氨基-乙酰胺，(Rf 0.3 CH2Cl2∶MeOH 9∶1)，MS323(MH+)。
在氬氣氛下，向在40ml DMF中的1.23g(3.6mmol)[[(4-羥基甲基-苯基)-甲基-氨基甲?；鵠-甲基]-甲基-氨基甲酸芐基酯中，加入580mg(13.3mmol，3.7當(dāng)量，55％disp)氫化鈉，隨后加入3.8ml(59.6mmol，16.6當(dāng)量)甲基碘化物。在室溫下攪拌該混懸液過夜，加入到冰水中。進(jìn)行相分離，有機(jī)相用50ml CH2Cl2(3x)萃取，用水洗滌合并的有機(jī)層(2x)，通過硫酸鎂干燥，過濾并蒸發(fā)。應(yīng)用CH2Cl2/MeOH(100∶0-98∶2)梯度硅膠柱色譜純化，得到0.984g(77％)淡黃色油狀[[(4-甲氧基甲基-苯基)-甲基-氨基甲?；鵠-甲基]-甲基-氨基甲酸芐基酯(Rf 0.07 CH2Cl2∶MeOH 9∶1)，MS356(MH+)，其按照6.1.去保護(hù)，得到黃色油狀N-(4-甲氧基甲基-苯基)-N-甲基-2-甲基氨基-乙酰胺(Rf 0.2 CH2Cl2∶MeOH 9∶1)，MS223(MH+)。
7.5.從BOC-甘氨酸和Z-β-Ala-OH以及其它Z-保護(hù)的氨基酸衍生的化合物在氬氣氛下，將在210ml CH2C12中的1.5g(8.56mmol)BOC-甘氨酸用1.07ml(9.42mmol，1.1當(dāng)量)4-甲基嗎啉、3.08g(10.27mmol，1.2當(dāng)量)TPTU和1.59g(9.42mmol，1.1當(dāng)量)4-氨基苯甲酸乙酯處理。在室溫下攪拌該溶液過夜，并濃縮。通過EtOAc/己烷(1∶2-2∶1)梯度快速硅膠色譜純化殘?jiān)?，得?.28g淡棕色結(jié)晶4-(2-叔-丁氧基羰基氨基-乙?；被?-苯甲酸乙酯，其按照3.1.進(jìn)行BOC-裂解，得到白色固體4-(2-氨基-乙酰基氨基)-苯甲酸乙酯，(Rf 0.1 CH2Cl2∶MeOH 9∶1)，MS222(MH+)。
類似地，制備下列化合物從BOC-甘氨酸和甲基-4-甲基氨基苯甲酸酯按照1.2.，隨后BOC-裂解3.1.，得到橙色膠狀4-(氨基乙酰基-甲基-氨基)-苯甲酸甲酯，(Rf 0.1CH2Cl2∶MeOH 9∶1)，MS222(MH+)。
從Z-β-Ala-OH和乙基-4-氨基苯甲酸酯按照1.2.，隨后按照6.1.去保護(hù)，得到4-(3-氨基-丙?；被?-苯甲酸乙酯，MS236(M)。
從Z-Asp(OtBu)OH和N-芐基甲基胺按照1.2.，隨后按照6.1.去保護(hù)和用HCl/tBuOH、MeOH處理，得到(S)-3-氨基-N-芐基-N-甲基-琥珀酰胺酸叔-丁酯·鹽酸鹽，MS293(MH+)。
從Z-Asp(OtBu)OH和4-異丙基苯胺按照1.2.，隨后按照6.1.去保護(hù)和用HCl/MeOH處理，得到(S)-3-氨基-N-(4-異丙基-苯基)-琥珀酰胺酸叔-丁酯·鹽酸鹽，MS307(MH+)。
從Z-N-Me-Asp(OtBu)-OH DCHA鹽(1∶1)和N-芐基甲基胺按照1.2.，隨后按照6.1.去保護(hù)和用HCl/MeOH處理，得到(S)-N-芐基-N-甲基-3-甲基氨基-琥珀酰胺酸叔-丁酯.鹽酸鹽，MS307(MH+)。
從Z-N-Me-Asp(OtBu)-OH DCHA鹽(1∶1)和4-異丙基苯胺按照1.2.，隨后按照6.1.去保護(hù)和用HCl/MeOH處理，得到(S)-N-(4-異丙基-苯基)-3-甲基氨基-琥珀酰胺酸叔-丁酯.鹽酸鹽，MS321(MH+)。
從Z-MeAla-OH和N-芐基甲基胺按照1.2.，隨后按照6.1.去保護(hù)和用HCl/MeOH處理，得到(S)-N-芐基-N-甲基-2-甲基氨基-丙酰胺.鹽酸鹽，MS206(M)。
7.6.γ-溴-鏈烷酸的酯的側(cè)鏈在室溫下，用7.4ml(200mmol)溴乙酸叔-丁基酯處理12.6ml(100mmol)苯乙胺在50ml甲苯中的溶液，加熱至95℃4小時(shí)。冷卻(0℃)后，過濾并蒸發(fā)濾液，將殘?jiān)鞈矣谖焱橹?，冷卻(0℃)，過濾并蒸發(fā)，得到油狀11.5g(98％)苯乙基氨基-乙酸叔-丁酯，MS236(MH+)。
該油具有作為副產(chǎn)物的伯胺(苯乙胺)，其導(dǎo)致相應(yīng)的副產(chǎn)物，其可以經(jīng)EDCI-偶合后分離。
類似地從3-苯基-1-丙基胺給出(3-苯基-丙基氨基)-乙酸叔-丁酯，MS249(M)；從色胺給出[2-(1H-吲哚-3-基)-乙基氨基]-乙酸叔-丁酯，MS274(M)；從2-氟苯乙胺給出[2-(2-氟-苯基)-乙基氨基]-乙酸叔-丁酯，MS254(MH+)；從4-氟苯乙胺給出[2-(4-氟-苯基)-乙基氨基]-乙酸叔-丁酯，MS254(MH+)；從3-氟苯乙胺給出[2-(3-氟-苯基)-乙基氨基]-乙酸叔-丁酯，MS198(MH+-異丁烯)；從4-甲基苯乙胺給出(2-p-甲苯基-乙基氨基)-乙酸叔-丁酯，MS250(MH+)；從1-氨基-3-甲基丁烷給出(3-甲基-丁基氨基)-乙酸叔-丁酯，MS146(MH+-異丁烯)。
在50分鐘內(nèi)，緩慢將28g(138mmol)N，N-二甲基甲酰胺二-叔-丁基乙縮醛加入到5.3g(34.5mmol)3-溴-丙酸在50ml甲苯的溶液中。進(jìn)一步加熱反應(yīng)30分鐘，冷卻，用H2O/甲苯(2x)、飽和NaHCO3水溶液、和飽和NaCl水溶液萃取，通過硫酸鈉干燥有機(jī)相，小心蒸發(fā)(產(chǎn)品具有低沸點(diǎn))，得到5.8g(80％)3-溴-丙酸叔丁基酯[U.Widmer，叔-丁酯的便利制備，合成(Synthesis)(1983)，Issue 2，135-6]。
類似于該胺的一般性合成方法，3-溴-丙酸叔丁基酯和苯乙胺給出3-苯乙基氨基-丙酸叔-丁酯，MS250(MH+)；3-苯基-1-丙基胺給出3-(3-苯基-丙基氨基)-丙酸叔-丁酯，MS264(MH+)；2-氟芐基胺給出3-(2-氟-芐基氨基)-丙酸叔-丁酯，MS253(M)；2，4，5-三氟芐基胺給出3-(2，4，5-三氟-芐基氨基)-丙酸叔丁酯，MS290(MH+)；2，5-二氟芐基胺給出3-(2，5-二氟-芐基氨基)-丙酸叔-丁酯，MS271(M)；類似于該胺的一般性合成方法，3-(氯甲基)-1，2，4-噁二唑和1-氨基-3-甲基丁烷和NaI在甲苯中給出(3-甲基-丁基)-[1，2，4]噁二唑-3-基甲基-胺(3-甲基-丁基)-[1，2，4]噁二唑-3-基甲基-胺，MS170(MH+)。
將9.55g(48.6mmol)2-氯-1，1，1-三乙氧基乙烷和3.9ml(30mmol)4-甲氧基芐基胺的溶液在40℃下加熱15分鐘。然后在室溫下加入2.92g(45mmol)疊氮化鈉在60ml乙酸中的溶液，在60℃下加熱過夜，80℃下20小時(shí)，100℃下1小時(shí)。用含水和固體NaHCO3/EtOAc(3x)中和反應(yīng)，用10％NaCl水溶液洗滌。通過硫酸鈉干燥有機(jī)相，蒸發(fā)，并通過硅膠快速色譜(己烷/EtOAc 1∶1)純化，得到3.36g(47％)5-氯甲基-1-(4-甲氧基-芐基)-1H-四唑，MS238(M)。[Y.Satoh，S.De Lombaert，N.Marcopulos，J.Moliterni，M.Moskal，J.Tan，E.Wallace，通過α-氨基甲基四唑的希夫氏堿烷基化合成α-氨基酸的四唑類似物，四面體通訊(Tetrahedron Lett.)(1998)，39(21)，3367-3370]類似于該胺的一般性合成方法，5-氯甲基-1-(4-甲氧基-芐基)-1H-四唑和苯乙胺給出[1-(4-甲氧基-芐基)-1H-四唑-5-基甲基]-苯乙基-胺，MS324(MH+)；環(huán)丙基胺經(jīng)50℃下3天后給出環(huán)丙基-[1-(4-甲氧基-芐基)-1H-四唑-5-基甲基]-胺，MS259(M)；類似于該胺的一般性合成方法，3-溴-丙腈和環(huán)丙基胺給出3-環(huán)丙基氨基-丙腈，MS110(M)；芐基胺給出3-芐基氨基-丙腈，MS160(M)；如文獻(xiàn)所描述進(jìn)一步的側(cè)鏈按照文獻(xiàn)L.Alig，A.Edenhofer，P.Hadvary，M.Huerzeler，D.Knopp，M.Mueller，B.Steiner，A.Trzeciak，T.Weller，“低分子量非肽纖維蛋白原受體拮抗劑”，醫(yī)學(xué)化學(xué)雜志(J.Med.Chem.)(1992)，35(23)，4393-407，制備(哌啶-4-基氧)-乙酸叔-丁酯(MH+)。
實(shí)施例8另外的試劑按照給出的文獻(xiàn)制備下列試劑5-氯磺?；?2-乙氧基-苯甲酸DJ.Dale，P.J.Dunn，C.Golightly，M.L.Hughes，P.C.Levett，A.K.Pearce，P.M.Searle，G.Ward，和A.S.Wood有機(jī)方法研究與開發(fā)(Organic Process Research& Development)，2000，4，1，17-22；2-苯基-乙烷磺酰氯Z.Zhong，J.A.Bibbs，W.Yuan，C.-H.Wong，美國化學(xué)協(xié)會(huì)雜志(J.Amer.Chem.Soc.)；113；6；1991；2259-2263；3-苯基-丙烷-1-磺酰氯M.Truce，美國化學(xué)協(xié)會(huì)雜志(J.Amer.Chem.Soc.)；74；1952；974-975。
實(shí)施例9作為離析物的(2S，4R)-4-(4-甲氧基-芐基硫烷基)-吡咯烷-l，2-二羧酸1-叔-丁酯用6.6ml(60mmol，1.1當(dāng)量)4-甲基嗎啉、19.4g(65.3mmol，1.2當(dāng)量)TPTU和12.7g(59.8mmol)肌氨酸芐基酯.鹽酸鹽處理在1.5升CH2Cl2中的20g(54.4mmol)(2S，4R)-4-(4-甲氧基-芐基硫烷基)-吡咯烷-1，2-二羧酸1-叔-丁酯。將該混合物在室溫下攪拌39小時(shí)，濃縮，通過柱色譜純化，其中EtOAc∶CH2Cl24∶1作為洗脫劑，得到14.2g(50％)(2S，4R)-2-(芐氧基羰基甲基-甲基-氨基甲酰基)-4-(4-甲氧基-芐基硫烷基)-吡咯烷-1-羧酸叔-丁酯。
在0℃下，向在150ml CH2Cl2中的24.24g(45.8mmol)(2S，4R)-2-(芐氧基羰基甲基-甲基-氨基甲?；?-4-(4-甲氧基-芐基硫烷基)-吡咯烷-1-羧酸叔-丁酯中，加入30ml TFA，在室溫下攪拌溶液，直到檢測(cè)不到起始原料。將反應(yīng)混合物在真空下濃縮，溶解于甲苯中，并蒸發(fā)三次。將粗制的油再溶解于CH2Cl2中，用22.6ml(205mmol，4.5當(dāng)量)4-甲基嗎啉、15.57g(68.7mmol，1.5當(dāng)量)2-萘基磺酰氯和560mg(4.58mmol，0.1當(dāng)量)DMAP處理。將該混合物在室溫下攪拌過夜，用CH2Cl2稀釋，用150ml 1M KHSO4、鹽水洗滌，通過硫酸鈉干燥，得到27.9g粗制的(2S，4R)-[[4-(4-甲氧基-芐基硫烷基)-1-(萘-1-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙酸芐基酯。
在室溫下，用160ml 0.33M LiOH處理在1升THF中的27.44g粗制的(2S，4R)-[[4-(4-甲氧基-芐基硫烷基)-1-(萘-1-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙酸芐基酯2小時(shí)。加入乙醚，進(jìn)行相分離。用乙醚萃取無機(jī)相，酸化無機(jī)相，并用EtOAc萃取，用鹽水洗滌，并通過硫酸鈉干燥。通過用己烷沉淀，分離產(chǎn)物，得到14.5g(62％)(2S，4R)-[[4-(4-甲氧基-芐基硫烷基)-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙酸，其為淡灰色固體，MS529(MH+)。
最終的產(chǎn)物-酯和酸將100mg(0.19mmol)(2S，4R)-[[4-(4-甲氧基-芐基硫烷基)-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙酸和28mg(0.29mmol)苯酚在1ml TFA中加熱至75℃1小時(shí)。濃縮該混合物，將其溶解于甲苯中，并蒸發(fā)(3x)。殘?jiān)ㄟ^快速色譜純化，得到46mg(59％)(2S，4R)-[[4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙酸，其為白色固體，mp 200-201℃，MS409(MH+)。
在0℃下，用0.08ml(0.63mmol，3.9當(dāng)量)三甲基氯硅烷和23μl(0.32mmol，2當(dāng)量)DMSO處理在0.7ml TFA中的100mg(0.16mmol)(2S，4R)-[[4-(4-甲氧基-芐基硫烷基)-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙酸芐基酯。在室溫下攪拌該混合物45分鐘，濃縮，再溶解于EtOAc/NaHCO3中。用鹽水洗滌有機(jī)相，通過硫酸鈉干燥，通過色譜純化粗產(chǎn)物，得到38mg(47％)(2S，4R)-[[4-[5-(芐氧基羰基甲基-甲基-氨基甲酰基)-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-3-基二硫烷基]-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙酸芐基酯，其為白色泡沫。將其溶解于1ml三氟乙醇中，在0℃下用13μl(0.053mmol)三丁基膦和6.5μl(0.36mmol)H2O處理。1小時(shí)后，在真空下濃縮該反應(yīng)混合物，通過快速色譜純化，得到28mg(73％)(2S，4R)-[[4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙酸芐基酯，其為無色油，MS499(MH+)。
實(shí)施例10進(jìn)一步修飾中間體(2S，4R)-[[4-(4-甲氧基-芐基硫烷基)-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙酸將在1.13ml CH2Cl2中的248mg(0.47mmol)(2S，4R)-[[4-(4-甲氧基-芐基硫烷基)-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙酸用935μl(0.94mmol，2.0當(dāng)量)NMM、在CH2Cl2中的1.1ml 0.085M(0.09mmol，0.2當(dāng)量)HOBT、在CH2Cl2中的3.77ml 0.15M(0.56mmol，1.2當(dāng)量)EDCI和在CH2Cl2中的1.2ml 0.43M(0.52mmol，1.1當(dāng)量)o-甲苯胺處理。振搖該溶液過夜，蒸發(fā)溶劑，將殘?jiān)芙庥贓tOAc中，用1MKHSO4、飽和NaHCO3溶液和鹽水萃取，通過硫酸鈉干燥并蒸發(fā)。
將粗產(chǎn)物溶解于5.8ml TFA中，在80℃下用460μl(2.9mmol)三乙基硅烷處理1小時(shí)。用CH2Cl2和水稀釋溶液，通過加入飽和NaHCO3溶液將pH調(diào)節(jié)至7。用CH2Cl2萃取無機(jī)相，用鹽水洗滌有機(jī)相，并用硫酸鈉干燥。柱色譜純化得到26mg(18％，2步)(2S，4R)-4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羧酸甲基-(o-甲苯基氨基甲酰基-甲基)-酰胺，其為白色結(jié)晶，MS498(MH+)。
類似地，從(2S，4R)-[[4-(4-甲氧基-芐基硫烷基)-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙酸，分別和3，5-二氟苯胺，4-氟苯胺，3-氟苯胺，2-氨基吡啶，2-氟苯胺和2，6-二氟苯胺，苯胺反應(yīng)，制備下列化合物(2S，4R)-4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羧酸[(3，5-二氟-苯基氨基甲?；?-甲基]-甲基-酰胺，其為白色固體，MS520(MH+)；(2S，4R)-4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羧酸[(4-氟-苯基氨基甲酰基)-甲基]-甲基-酰胺，其為白色結(jié)晶，MS502(MH+)；(2S，4R)-4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羧酸[(3-氟-苯基氨基甲?；?-甲基]-甲基-酰胺，其為白色結(jié)晶，MS502(MH+)；(2S，4R)-4-巰基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸甲基-(吡啶-2-基氨基甲?；谆?-酰胺，其為白色無定形物，MS485(MH+)；(2S，4R)-4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羧酸[(2-氟-苯基氨基甲酰基)-甲基]-甲基-酰胺，其為白色固體，MS502(MH+)；(2S，4R)-4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羧酸[(2，6-二氟-苯基氨基甲酰基)-甲基]-甲基-酰胺，其為白色固體，MS520(MH+)；(2S，4R)-4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羧酸甲基-苯基氨基甲酰基甲基-酰胺，其為白色固體，mp 90℃，MS484(MH+)。
實(shí)施例11作為離析物的(2S，4R)-4-(4-甲氧基-芐基硫烷基)-吡咯烷-1，2-二羧酸1-叔-丁酯從(2S，4R)-4-(4-甲氧基-芐基硫烷基)-吡咯烷-1，2-二羧酸1-叔-丁酯和4-(2-甲基氨基-乙?；被?-苯甲酸乙酯(1.2.)，隨后通過BOC裂解(3.1.)，制備(2S，4R)-4-(2-[[4-(4-甲氧基-芐基硫烷基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙?；被?-苯甲酸乙酯。
將(2S，4R)-4-(2-[[4-(-甲氧基-芐基硫烷基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙?；被?-苯甲酸乙酯用2-苯基-乙烷磺酰氯(參見上述試劑的制備)(2.1.)處理，通過(2S，4R)-4-(2-{[4-(4-甲氧基-芐基硫烷基)-1-(2-苯基-乙烷磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基}-乙?；被?-苯甲酸乙酯，其為白色固體，MS654(MH)，隨后按照8.1.描述的一般性方法進(jìn)行PMB醚裂解，得到(2S，4R)-4-[2-[[4-巰基-1-(2-苯基-乙烷磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙酰基氨基]-苯甲酸乙酯，其為白色結(jié)晶，MS534(MH+)。
類似地，將(2S，4R)-4-(2-[[4-(4-甲氧基-芐基硫烷基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙酰基氨基)-苯甲酸乙酯用3-苯基-丙烷-1-磺酰氯處理，隨后按照8.1.描述去保護(hù)，得到無色泡沫狀(2S，4R)-4-[2-[[4-巰基-1-(3-苯基-丙烷-1-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙?；被鵠-苯甲酸乙酯，MS548(MH+)。
按照5.2.，用0.1M LiOH處理157mg(0.24mmol)(2S，4R)-4-(2-{[4-(4-甲氧基-芐基硫烷基)-1-(2-苯基-乙烷磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基}-乙?；被?-苯甲酸乙酯，將粗產(chǎn)物(2S，4R)-4-(2-{[4-(4-甲氧基-芐基硫烷基)-1-(2-苯基-乙烷磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基}-乙?；被?-苯甲酸溶解于1ml TFA中，在23mg(0.24mmol)苯酚存在下加熱至75℃1.5小時(shí)。蒸發(fā)溶劑，將油溶解于甲苯中，并蒸發(fā)(兩次)，將殘?jiān)诩和橹醒兄?，得?5mg(2S，4R)-4-[2-[[4-巰基-1-(2-苯基-乙烷磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙酰基氨基]-苯甲酸，其為淡黃色固體，MS506(MH+)。
類似地，從(2S，4R)-4-(4-甲氧基-芐基硫烷基)-吡咯烷-1，2-二羧酸1-叔-丁酯，通過按照1.3.處理2-(2-甲基氨基-乙?；被?-苯甲酸甲酯.鹽酸鹽，隨后BOC裂解3.1.，然后分別用異氰酸乙酯或異氰酸2-萘基酯處理(2.3.)，隨后PMB硫醚裂解(8.1.)，制備下列化合物(2S，4R)-2-[2-[(1-乙基氨基甲?；?4-巰基-吡咯烷-2-羰基)-甲基-氨基]-乙?；被鵠-苯甲酸甲酯，其為白色結(jié)晶，MS423(MH+)；(2S，4R)-2-[2-[[4-巰基-1-(萘-2-基氨基甲酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙?；被鵠-苯甲酸甲酯，其為白色固體，MS521(MH+)。
類似地，從(2S，4R)-4-(4-甲氧基-芐基硫烷基)-吡咯烷-1，2-二羧酸1-叔-丁酯，通過按照1.3.處理2-(2-甲基氨基-乙?；被?-苯甲酸甲酯.鹽酸鹽，隨后BOC裂解3.1.，然后分別用5-氯磺?；?2-乙氧基-苯甲酸(參見上述試劑的制備)，2-萘基磺酰氯，甲基磺酰氯(2.1.)處理，隨后PMB硫醚裂解(8.1.)，制備下列化合物
(2S，4R)-2-乙氧基-5-[4-巰基-2-[[(2-甲氧基羰基-苯基氨基甲酰基)-甲基]-甲基-氨基甲?；鵠-吡咯烷-1-磺酰基]-苯甲酸，其為白色結(jié)晶，mp 65℃，MS580(MH+)；(2S，4R)-4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羧酸[(2-甲氧基-苯基氨基甲酰基)-甲基]-甲基-酰胺，其為白色固體，mp 72℃，MS514(MH+)；(2S，4R)-2-[2-[(4-巰基-1-甲烷磺酰基-吡咯烷-2-羰基)-甲基-氨基]-乙?；被鵠-苯甲酸甲酯，其為白色固體，mp 48℃，MS430(MH+)。
實(shí)施例12叔酰胺12.1.S酰胺(直接)，方法A將800mg(1.38mmol)(2S，4R)-1-(萘-2-磺?；?-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羧酸和390mg(1.66mmol)粗制的苯乙基氨基-乙酸叔-丁酯在14ml THF中的溶液冷卻至0℃，用318mg(1.66mmol)EDCI和19mg(0.14mmol)HOBT處理。將反應(yīng)升溫至室溫過夜，在10％KHSO4水溶液/乙酸乙酯間分配(3x)。用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌有機(jī)相，并通過硫酸鈉干燥。通過快速硅膠色譜(己烷/EtOAc 4∶1至1∶1)純化，得到290mg(26％)(2S，4R)-{[1-(萘-2-磺?；?-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羰基]-苯乙基-氨基]-乙酸叔-丁酯，MS797(MH+)和90mg(10％)(2S，4R)-1-(萘-2-磺酰基)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羧酸苯乙基-酰胺，MS683(MH+)。
通過方法9.1.或9.2.進(jìn)行三苯甲基-去保護(hù)，如果存在p-甲氧基芐基，使用方法8.1.。
在室溫下，用0.3ml(2mmol)三乙基硅烷處理159mg(0.2mmol)(2S，4R)-{[1-(萘-2-磺?；?-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羰基]-苯乙基-氨基}-乙酸叔-丁酯在2ml TFA中的溶液，進(jìn)一步在室溫下攪拌10分鐘。在室溫、減壓下蒸發(fā)，用Et2O/戊烷沉淀兩次，得到78mg(78％)of(2S，4R)-{[4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-苯乙基-氨基}-乙酸，其為白色粉末，mp198-200℃，MS497(M-H)-。
類似地從(2S，4R)-1-(萘-2-磺?；?-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羧酸苯乙基-酰胺給出(2S，4R)-4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羧酸苯乙基-酰胺，mp138.5-143℃，MS441(MH+)。
此外，制備了按照表1和2的化合物
表2
12.2.酰胺，方法B(間接)按照EDCI-偶合1.3.的一般性方法，(2S，4R)-1-(萘-2-磺?；?-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羧酸與甘氨酸叔-丁酯.鹽酸鹽/N-甲基嗎啉給出(2S，4R)-{[1-(萘-2-磺?；?-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羰基]-氨基}-乙酸叔-丁酯，MS693(MH+)。
類似地(2S，4R)-1-(萘-2-磺?；?-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羧酸和β-丙氨酸叔-丁酯-鹽酸鹽給出(2S，4R)-3-{[1-(萘-2-磺酰基)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羰基]-氨基}-丙酸叔-丁酯，MS707(MH+)；(2S，4R)-1-(萘-2-磺酰基)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羧酸和2，2，2-三氟乙胺給出(2S，4R)-1-(萘-2-磺酰基)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羧酸(2，2，2-三氟-乙基)-酰胺，MS661(MH+)。
在0℃下，用0.24ml(2mmol)芐基溴和35mg(0.8mmol)55％NaH處理346.5mg(0.5mmol)(2S，4R)-{[1-(萘-2-磺?；?-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羰基]-氨基}-乙酸叔-丁酯在3ml DMF中的溶液，升溫至室溫過夜。將反應(yīng)倒入飽和NH4Cl水溶液/EtOAc中(3x)。用10％NaCl水溶液洗滌有機(jī)相，通過硫酸鈉干燥并在減壓下蒸發(fā)。通過硅膠快速色譜(己烷/EtOAc 9∶1)純化，給出277mg(71％)(2S，4R)-[芐基-[1-(萘-2-磺?；?-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羰基]-氨基}-乙酸叔-丁酯，MS781(M-H)-。
按照方法9.2.進(jìn)行三苯甲基去保護(hù)，給出(2S，4R)-{芐基-[4-巰基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-氨基}-乙酸，MS483(M-H)-。
類似地(2S，4R)-{[1-(萘-2-磺?；?-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羰基]-氨基}-乙酸叔-丁酯和環(huán)丙基甲基溴給出(2S，4R)-{環(huán)丙基甲基-[4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-氨基}-乙酸，MS449(MH+)；(2S，4R)-{[-(萘-2-磺?；?-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羰基]-氨基}-乙酸叔-丁酯和溴乙酸甲酯給出(2S，4R)-{[4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-甲氧基羰基甲基-氨基}-乙酸，mp緩慢分解70-78℃，MS465(M-H)-；
(2S，4R)-3-{[1-(萘-2-磺?；?-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羰基]-氨基}-丙酸叔-丁酯和芐基溴給出(2S，4R)-3-{芐基-[4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-氨基}-丙酸，mp緩慢分解58-63℃，MS499(MH+)；(2S，4R)-3-{[1-(萘-2-磺酰基)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羰基]-氨基}-丙酸叔-丁酯和3-溴甲基-吲哚-1-羧酸叔-丁酯[T.K.Venkatachalam，S.Mzengeza，M.Diksic.1-(叔-丁基oxy羰基)-3-(溴甲基)吲哚的一種改進(jìn)的合成，Org.Prep.Proced.Int.1993，25，249-51]，給出(2S，4R)-3-{(1H-吲哚-3-基甲基)-[4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-氨基}-丙酸，mp114-120℃，分解，MS538(MH+)；(2S，4R)-1-(萘-2-磺?；?-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羧酸(2，2，2-三氟-乙基)-酰胺和溴乙酸叔-丁酯給出(2S，4R)-[[4-巰基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-(2，2，2-三氟-乙基)-氨基]-乙酸，MS477(MH+)；(2S，4R)-[芐基-[1-(萘-2-磺?；?-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羰基]-氨基}-乙酸叔-丁酯給出(2S，4R)-{[4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-氨基}-乙酸，MS395(MH+)；(2S，4R)-1-(萘-2-磺?；?-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羧酸(2，2，2-三氟-乙基)-酰胺給出(2S，4R)-4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羧酸(2，2，2-三氟-乙基)-酰胺，MS419(MH+)。
α-烷基化在-78℃下，用1.1ml(1M在THF中，1.1mmol)二(三甲基甲硅烷基)酰胺鋰溶液(LiHMDS)處理346mg(0.5mmol)(2S，4R)-{[1-(萘-2-磺?；?-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羰基]-氨基}-乙酸叔-丁酯在10mlTHF中的溶液。30分鐘后，加入0.127ml(1.5mmol)烯丙基溴化物，將反應(yīng)升溫至室溫過夜。在10％KHSO4水溶液/EtOAc(4x)之間分配反應(yīng)物，用10％NaCl水溶液洗滌有機(jī)相，通過硫酸鈉干燥并蒸發(fā)。通過硅膠快速色譜(己烷/EtOAc 2∶1)純化，用Et2O/戊烷沉淀，給出76mg(21％)(2RS)-2-{(2S，4R)-[1-(萘-2-磺?；?-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羰基]-氨基}-戊-4-烯酸叔-丁酯，MS733(MH+)。
按照方法9.2.進(jìn)行三苯甲基去保護(hù)，給出(R)-和(S)-2-{[(2S，4R)-4-巰基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-氨基}-戊-4-烯酸的1∶1混合物，MS433(M-H)-。
實(shí)施例13四唑衍生物類似于酰胺偶合(1.3.)(2S，4R)-1-(萘-2-磺酰基)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羧酸和3-環(huán)丙基氨基-丙腈給出(2S，4R)-1-(萘-2-磺?；?-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羧酸(2-氰基-乙基)-環(huán)丙基-酰胺，MS672(MH+)。
類似地(2S，4R)-1-(萘-2-磺?；?-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羧酸和3-芐基氨基-丙腈給出(2S，4R)-1-(萘-2-磺?；?-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羧酸芐基-(2-氰基-乙基)-酰胺，MS722(MH+)。
(2S，4R)-1-(萘-2-磺酰基)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羧酸和3-氨基-丙腈給出(2S，4R)-1-(萘-2-磺酰基)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羧酸(2-氰基-乙基)-酰胺，mp86-90℃，MS632(MH+)。
按照方法9.2.進(jìn)行三苯甲基去保護(hù)(在室溫下15分鐘)(2S，4R)-1-(萘-2-磺?；?-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羧酸(2-氰基-乙基)-環(huán)丙基-酰胺給出(2S，4R)-4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羧酸(2-氨基甲酰基-乙基)-環(huán)丙基-酰胺，mp157.9-159.9℃，MS448(MH+)。
(在0℃下30分鐘并在max RT蒸發(fā))(2S，4R)-1-(萘-2-磺酰基)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羧酸(2-氰基-乙基)-酰胺給出(2S，4R)-4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羧酸(2-氰基-乙基)-酰胺，MS412(M+Na+)。
四唑的合成將336mg(0.5mmol)(2S，4R)-1-(萘-2-磺?；?-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羧酸(2-氰基-乙基)-環(huán)丙基-酰胺、267mg(5mmol)NH4Cl和325mg(5mmol)NaN3在10ml DMF中的溶液在70℃下加熱22小時(shí)。加入267mg(5mmol)NH4Cl和325mg(5mmol)NaN3以及40ml DMF，在100℃下加熱24小時(shí)，在120℃下加熱24小時(shí)。將反應(yīng)倒入水(0℃)/EtOAc中(3x)。用10％KHSO4、10％NaCl水溶液洗滌有機(jī)相，并通過硫酸鈉干燥。通過硅膠快速色譜純化(CH2Cl2/MeOH99∶1)給出143mg(40％)(2S，4R)-1-(萘-2-磺?；?-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羧酸環(huán)丙基-[2-(1H-四唑-5-基)-乙基]-酰胺，MS715(MH+)。
按照方法9.2.進(jìn)行三苯甲基去保護(hù)(迅速加熱至80℃)，得到(2S，4R)-4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羧酸環(huán)丙基-[2-(1H-四唑-5-基)-乙基]-酰胺，mp173.5℃，分解MS473(MH+)。
類似地(2S，4R)-1-(萘-2-磺?；?-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羧酸芐基-(2-氰基-乙基)-酰胺給出(2S，4R)-4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羧酸芐基-[2-(1H-四唑-5-基)-乙基]-酰胺，MS523(MH+)。
方法A將520mg(0.9mmol)(2S，4R)-1-(萘-2-磺酰基)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羧酸和315mg(1mmol)(1S)-3-[5-(1-氨基-2-聯(lián)苯基-4-基-乙基)-四唑-1-基]-丙腈[S.De Lombaert.作為中性肽鏈內(nèi)切酶抑制劑的四唑基烷基氨基甲基膦酸酯的制備，U.S.，17pp.CODENUSXXAM.美國專利號(hào)5,273,990 A 931228]在5ml THF中的溶液冷卻至0℃，用206mg(1.1mmol)EDCI和14mg(0.09mmol)HOBT處理。將反應(yīng)在室溫下攪拌3小時(shí)，在10％KHSO4水溶液/乙酸乙酯中分配(3x)。用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌有機(jī)相，并通過硫酸鈉干燥。通過硅膠快速色譜(己烷/EtOAc 1∶1)純化，給出639mg(81％)(2S，4R)-1-(萘-2-磺?；?-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羧酸[(S)-2-聯(lián)苯-4-基-1-[1-(2-氰基-乙基)-1H-四唑-5-基]-乙基]-酰胺，Mp122-133℃，緩慢分解MS880(MH+)。
在0℃下，用0.05ml DBU處理300mg(0.34mmol)(2S，4R)-1-(萘-2-磺酰基)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羧酸[(S)-2-聯(lián)苯基-4-基-1-[1-(2-氰基-乙基)-1H-四唑-5-基]-乙基]-酰胺在10ml二氯甲烷中的溶液，并攪拌3小時(shí)。將反應(yīng)倒入10％KHSO4水溶液/EtOAc中(3x)。用10％NaCl水溶液洗滌有機(jī)相，并通過硫酸鈉干燥，得到220mg(78％)(2S，4R)-1-(萘-2-磺?；?-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羧酸[(S)-2-聯(lián)苯-4-基-1-(1H-四唑-5-基)-乙基]-酰胺.mp135-145℃緩慢分解，MS827(MH+)。
按照方法9.2.進(jìn)行三苯甲基去保護(hù)，得到(2S，4R)-4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羧酸[(S)-2-聯(lián)苯-4-基-1-(1H-四唑-5-基)-乙基]-酰胺，mp245-247.5℃，MS585(MH+)。
類似地從(2S，4R)-1-甲烷磺酰基-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羧酸得到(2S，4R)-4-巰基-1-甲烷磺?；?吡咯烷-2-羧酸[(S)-2-聯(lián)苯-4-基-1-(1H-四唑-5-基)-乙基]-酰胺，mp208.5-213.5℃，MS473(MH+)。
方法B在0℃下，用72mg(0.38mmol)EDCI處理200mg(0.34mmol)(2S，4R)-1-(萘-2-磺?；?-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羧酸和42mg(0.38mmol)N-羥基-2-吡啶酮在15ml二氯甲烷中的溶液。在室溫下3.5小時(shí)后，將其冷卻(0℃)，用37mg(0.38mmol)5-氨基甲基-四唑處理。在室溫下攪拌反應(yīng)過夜，加入2ml DMF，在室溫下4小時(shí)后，用EtOAc/NaHCO3飽和水溶液萃取反應(yīng)。用10％KHSO4水溶液洗滌有機(jī)相，通過硫酸鈉干燥，通過硅膠快速色譜(CH2Cl2/MeOH 9∶1)純化，得到100mg(44％)(2S，4R)-1-(萘-2-磺?；?-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羧酸(1H-四唑-5-基甲基)-酰胺，mp135-145℃緩慢分解，MS661(MH+)。
按照方法9.2.進(jìn)行三苯甲基去保護(hù)，得到(2S，4R)-4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羧酸(1H-四唑-5-基甲基)-酰胺，mp61-73℃緩慢分解，MS419(MH+)。
類似地從(2S，4R)-1-甲烷磺酰基-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羧酸得到(2S，4R)-1-甲烷磺酰基-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羧酸(1H-四唑-5-基甲基)-酰胺，MS549(MH+)；將其進(jìn)行三苯甲基去保護(hù)(方法9.2.)，得到(2S，4R)-4-巰基-1-甲烷磺?；?吡咯烷-2-羧酸(1H-四唑-5-基甲基)-酰胺，MS307(MH+)。
在0℃下，用0.15ml(2.4mmol)碘甲烷和122mg(2.8mmol)55％NaH處理800mg(1.21mmol)(2S，4R)-1-(萘-2-磺酰基)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羧酸(1H-四唑-5-基甲基)-酰胺在15ml DMF中的溶液，升溫至室溫3小時(shí)。用水終止反應(yīng)，用Et2O萃取(3x)。用10％KHSO4水溶液洗滌有機(jī)相，通過硫酸鈉干燥并蒸發(fā)。通過硅膠快速色譜(己烷/EtOAc1∶1至2∶1)純化，得到2異構(gòu)體。從最終產(chǎn)物追溯確定結(jié)構(gòu)(通過CH-COSY)A)180mg(43％)(2S，4R)-1-(萘-2-磺?；?-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羧酸甲基-(2-甲基-2H-四唑-5-基甲基)-酰胺，mp69-80℃緩慢分解，MS689(MH+)；B)190mg(45％)(2S，4R)-1-(萘-2-磺?；?-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羧酸甲基-(1-甲基-1H-四唑-5-基甲基)-酰胺，mp46-56℃緩慢分解，MS689(MH+)。
按照方法9.2.進(jìn)行三苯甲基去保護(hù)從(2S，4R)-1-(萘-2-磺?；?-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羧酸甲基-(2-甲基-2H-四唑-5-基甲基)-酰胺給出(2S，4R)-4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羧酸甲基-(2-甲基-2H-四唑-5-基甲基)-酰胺，MS447(MH+)和從(2S，4R)-1-(萘-2-磺?；?-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羧酸甲基-(1-甲基-1H-四唑-5-基甲基)-酰胺給出(2S，4R)-4-巰基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸甲基-(1-甲基-1H-四唑-5-基甲基)-酰胺，mp103℃，緩慢分解，MS447(MH+)。
將865mg(1.3mmol)(2S，4R)-1-(萘-2-磺酰基)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羧酸(1H-四唑-5-基甲基)-酰胺、0.19ml(1.4mmol)4-甲氧基芐基氯，0.19ml(1.4mmol)三乙胺和一刮勺碘化鈉在10ml丙酮中的溶液在75℃下加熱15小時(shí)。反應(yīng)在10％KHSO4水溶液/Et2O中分配(3x)。通過硫酸鈉干燥有機(jī)相。從Et2O中沉淀，得到(2S，4R)-1-(萘-2-磺?；?-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羧酸1-(4-甲氧基-芐基)-1H-和[2-(4-甲氧基-芐基)-2H-四唑-5-基甲基]-酰胺的1∶1混合物，MS781(MH+)。
在0℃下，用0.11ml(1.7mmol)碘甲烷和31mg(0.7mmol)55％NaH處理350mg(0.44mmol)(2S，4R)-1-(萘-2-磺?；?-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羧酸1-(4-甲氧基-芐基)-1H-和[2-(4-甲氧基-芐基)-2H-四唑-5-基甲基]-酰胺的1∶1混合物的溶液，在3小時(shí)中升溫，在室溫下再攪拌1.5小時(shí)。將反應(yīng)倒入10％KHSO4水溶液/EtOAc中(3x)。用10％NaCl水溶液洗滌有機(jī)相，通過硫酸鈉干燥并在減壓下蒸發(fā)。通過硅膠快速色譜(己烷/EtOAc 1∶1)純化，得到359mg(100％)(2S，4R)-1-(萘-2-磺?；?-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羧酸[1-(4-甲氧基-芐基)-1H-和[2-(4-甲氧基-芐基)-2H-四唑-5-基甲基]-甲基-酰胺的1∶1混合物，MS795(MH+)。
用0.3ml(1.9mmol)三乙基硅烷處理150mg(0.19mmol)(2S，4R)-1-(萘-2-磺酰基)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羧酸[1-(4-甲氧基-芐基)-1H-和[2-(4-甲氧基-芐基)-2H-四唑-5-基甲基]-甲基-酰胺的1∶1混合物在10ml TFA中的溶液，在80℃下回流7分鐘，并蒸發(fā)。從氯甲烷/Et2O中結(jié)晶，得到46mg(57％)(2S，4R)-4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羧酸甲基-(1H-四唑-5-基甲基)-酰胺，mp175℃緩慢分解，MS433(MH+)。
類似地2S，4R)-1-(萘-2-磺?；?-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羧酸1-(4-甲氧基-芐基)-1H-和[2-(4-甲氧基-芐基)-2H-四唑-5-基甲基]-酰胺的1∶1混合物與芐基溴，給出(2S，4R)-4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羧酸芐基-(1H-四唑-5-基甲基)-酰胺，mp152-155℃分解，MS509(MH+)；從(2S，4R)-1-甲烷磺?；?4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羧酸(1H-四唑-5-基甲基)-酰胺，經(jīng)過(2S，4R)-1-甲烷磺?；?4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羧酸[-(4-甲氧基-芐基)-1H-和[2-(4-甲氧基-芐基)-2H-四唑-5-基甲基]-酰胺的1∶1混合物與芐基溴，給出(2S，4R)-4-巰基-1-甲烷磺酰基-吡咯烷-2-羧酸芐基-(1H-四唑-5-基甲基)-酰胺，MS397(MH+)。
實(shí)施例14MeSO2酰胺的烷基化在-78℃下，用0.83ml(1.24mmol，1.5M THF溶液)LDA處理138mg(0.4mmol)(2S，4R)-1-甲烷磺?；?4-(4-甲氧基-芐基硫烷基)-吡咯烷-2-羧酸在8ml THF中的溶液。30分鐘后，加入0.17ml(1.4mmol)芐基溴，升溫至室溫過夜。將反應(yīng)倒入10％KHSO4水溶液/EtOAc中(3x)。用10％NaCl水溶液洗滌有機(jī)相，并通過硫酸鈉干燥，得到242mg(定量)粗制的(2S，4R)-4-(4-甲氧基-芐基硫烷基)-1-(2-苯基-乙烷磺?；?-吡咯烷-2-羧酸。
在0℃下，用0.057ml(0.44mmol)N-芐基甲基胺、92mg(0.48mmol)EDCI、6.1mg(0.04mmol)HOBT處理242mg(0.4mmol)(2S，4R)-4-(4-甲氧基-芐基硫烷基)-1-(2-苯基-乙烷磺?；?-吡咯烷-2-羧酸在4ml THF中的溶液，升溫至室溫過夜。將反應(yīng)倒入10％KHSO4水溶液/EtOAc中(3x)。用10％NaCl水溶液洗滌有機(jī)相，并通過硫酸鈉干燥，經(jīng)快速硅膠柱(己烷/EtOAc 4∶1)得到21mg(10％)(2S，4R)-4-(4-甲氧基-芐基硫烷基)-1-(2-苯基-乙烷磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸芐基-甲基-酰胺，MS539(MH+)。
按照方法9.1.，從(2S，4R)-4-(4-甲氧基-芐基硫烷基)-1-(2-苯基-乙烷磺?；?-吡咯烷-2-羧酸芐基-甲基-酰胺給出(2S，4R)-4-巰基-1-(2-苯基-乙烷磺?；?-吡咯烷-2-羧酸芐基-甲基-酰胺，MS419(MH+)。
類似于上述實(shí)施例，應(yīng)用LiHMDS進(jìn)行(2S，4R)-1-甲烷磺酰基-4-(4-甲氧基-芐基硫烷基)-吡咯烷-2-羧酸的去質(zhì)子化，應(yīng)用芐基溴進(jìn)行烷基化，經(jīng)用N-芐基胺進(jìn)行EDCI/HOBT偶合，得到(2S，4R)-1-(1，3-二苯基-丙烷-2-磺?；?-4-(4-甲氧基-芐基硫烷基)-吡咯烷-2-羧酸芐基-甲基-酰胺，產(chǎn)率7％，MS629(MH+)；按照方法9.1.，從(2S，4R)-1-(1，3-二苯基-丙烷-2-磺?；?-4-(4-甲氧基-芐基硫烷基)-吡咯烷-2-羧酸芐基-甲基-酰胺，給出(2S，4R)-1-(1，3-二苯基-丙烷-2-磺酰基)-4-巰基-吡咯烷-2-羧酸芐基-甲基-酰胺，MS509(MH+)。
實(shí)施例15從二硫化物-二酸(2S，2’S，3S，3S’)-3，3’-二硫烷二基-二-吡咯烷-1，2-二羧酸1，1’-二-叔-丁酯開始在室溫下，用0.45ml(4.08mmol，2當(dāng)量)NMM、0.63ml(4.09mmol，2當(dāng)量)哌啶-4-羧酸乙酯和1.5g(5.05mmol，2.5當(dāng)量)TPTU處理1g(2.03mmol)(2S，2’S，3S，3S’)-3，3’-二硫烷二基-二-吡咯烷-1，2-二羧酸1，1’-二-叔-丁酯在50ml二氯甲烷中的溶液過夜。用二氯甲烷稀釋溶液，用1M KHSO4溶液、5％NaHCO3溶液、鹽水洗滌，并通過硫酸鈉干燥。柱色譜純化得到1.24g(79％)1-[(2S，4R)-4-[(3R，5S)-5-(4-乙氧基羰基-哌啶-1-羰基)-吡咯烷-3-基二硫烷基]-吡咯烷-2-羰基]-哌啶-4-羧酸4-乙酯，其為白色結(jié)晶。
按照3.1.的一般性方法，處理200mg(0.26mmol)1-[(2S，4R)-4-[(3R，5S)-5-(4-乙氧基羰基-哌啶-1-羰基)-吡咯烷-3-基二硫烷基]-吡咯烷-2-羰基]-哌啶-4-羧酸4-乙酯，得到1-[(2S，4R)-4-[(3R，5S)-5-(4-乙氧基羰基-哌啶-1-羰基)-吡咯烷-3-基二硫烷基]-吡咯烷-2-羰基]-哌啶-4-羧酸4-乙酯，將其溶解于10ml二氯甲烷中，在室溫下用176mg(0.78mmol，3當(dāng)量)2-萘磺酰氯和95mg(0.78mmol，3當(dāng)量)DMAP處理30分鐘。將反應(yīng)混合物倒入1M KHSO4和二氯甲烷中。用鹽水洗滌有機(jī)相，通過硫酸鈉干燥，并通過快速色譜純化，得到174mg(70％)1-[(2S，4R)-4-[(3R，5S)-5-(4-乙氧基羰基-哌啶-1-羰基)-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-3-基二硫烷基]-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-哌啶-4-羧酸4-乙酯，其為白色固體，MS951(MH+)。
按照4.1.的一般性方法，將174mg(0.18mmol)1-[(2S，4R)-4-[(3R，5S)-5-(4-乙氧基羰基-哌啶-1-羰基)-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-3-基二硫烷基]-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-哌啶-4-羧酸4-乙酯進(jìn)行二硫化物裂解，得到153mg(88％)(2S，4S)-1-[4-巰基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-哌啶-4-羧酸乙酯，其為白色固體，MS475(M-H)-。
按照5.2.，用LiOH處理(2S，4S)-1-[4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-哌啶-4-羧酸乙酯，得到(2S，4S)-1-[4-巰基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-哌啶-4-羧酸，其為白色凍干固體，MS449(MH+)。
類似地，從1-[(2S，4R)-4-[(3R，5S)-5-(4-乙氧基羰基-哌啶-1-羰基)-吡咯烷-3-基二硫烷基]-吡咯烷-2-羰基]-哌啶-4-羧酸4-乙酯，分別與4-叔-丁基苯磺酰氯、5-二甲基氨基萘1-磺酰氯和1-萘基磺酰氯反應(yīng)，制備下列化合物(2S，4S)-1-[1-(4-叔-丁基-苯磺?；?-4-巰基-吡咯烷-2-羰基]-哌啶-4-羧酸乙酯，其為白色固體，MS483(MH+)；(2S，4S)-1-[1-(5-二甲基氨基-萘-1-磺?；?-4-巰基-吡咯烷-2-羰基]-哌啶-4-羧酸乙酯，其為黃色固體，MS520(MH+)；(2S，4S)-1-[4-巰基-1-(萘-1-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-哌啶-4-羧酸乙酯，其為無色油，MS477(MH+)。
按照5.2.，用LiOH處理(2S，4S)-1-[1-(5-二甲基氨基-萘-1-磺?；?-4-巰基-吡咯烷-2-羰基]-哌啶-4-羧酸乙酯，得到(2S，4S)-1-1-(5-二甲基氨基-萘-1-磺?；?-4-巰基-吡咯烷-2-羰基]-哌啶-4-羧酸，其為黃色固體MS492(MH+)。
形成作為最終產(chǎn)物的脲用82mg(0.69mmol，2.02當(dāng)量)苯基異氰酸酯和70mg(0.69mmol，2.2當(dāng)量)NMM處理180mg(0.31mmol)1-[(2S，4R)-4-[(3R，5S)-5-(4-乙氧基羰基-哌啶-1-羰基)-吡咯烷-3-基二硫烷基]-吡咯烷-2-羰基]-哌啶-4-羧酸4-乙酯在5ml甲苯中的溶液。將混合物在室溫下攪拌2小時(shí)，置于冷凍箱中，通過過濾分離結(jié)晶，并用甲苯洗滌。按照4.1.進(jìn)行粗產(chǎn)物的二硫化物裂解，得到200mg(77％)(2S，4S)-1-(4-巰基-1-苯基氨基甲?；?吡咯烷-2-羰基)-哌啶-4-羧酸乙酯，其為白色固體，MS405(M)。
類似于上述實(shí)施例，下列化合物制備如下從(2S，2’S，3S，3S’)-3，3’-二硫烷二基-二-吡咯烷-1，2-二羧酸1，1’-二-叔-丁酯與4-氨基-苯甲酸乙酯，隨后BOC-裂解(3.1.)，經(jīng)4-[[(2S，4S)-4-[(3S，5S)-5-(4-乙氧基羰基-苯基氨基甲?；?-吡咯烷-3-基二硫烷基]-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-苯甲酸乙酯，其為米黃色固體，MS587(MH+)，隨后分別用萘甲酰氯(naphtoyl chloride)(2.2.)、4-叔-丁基-苯磺酰氯、4-n-丁氧基苯磺酰氯、2-甲氧基羰基苯磺酰氯、4-聯(lián)苯基磺酰氯、1-丁烷磺酰氯、3，4-二甲氧基苯磺?；忍幚?，隨后按照4.1.進(jìn)行二硫化物裂解，得到(2S，4S)-4-[[4-巰基-1-(萘-2-羰基)-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-苯甲酸乙酯，其為白色固體，MS449(MH+)；
(2S，4S)-4-[[1-(4-叔-丁基-苯磺?；?-4-巰基-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-苯甲酸乙酯，其為白色固體，MS489(M-H-)(MH-)；(2S，4S)-4-[[1-(4-丁氧基-苯磺?；?-4-巰基-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-苯甲酸乙酯，其為白色無定形物，MS507(MH+)；(2S，4S)-4-[[4-巰基-1-(2-甲氧基羰基-苯磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-苯甲酸乙酯，其為白色無定形物，MS493(MH+)；(2S，4S)-4-[[1-(聯(lián)苯基-4-磺?；?-4-巰基-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-苯甲酸乙酯，其為白色無定形物，MS511(MH+)；(2S，4S)-4-[[1-(丁烷-1-磺?；?-4-巰基-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-苯甲酸乙酯，其為白色無定形物，MS415(MH+)；(2S，4S)-4-[1-(3，4-二甲氧基-苯磺?；?-4-巰基-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-苯甲酸乙酯，其為白色無定形物，MS495(MH+)；類似地，從(2S，2’S，3S，3S’)-3，3’-二硫烷二基-二-吡咯烷-1，2-二羧酸1，1’-二-叔-丁酯與4-(2-甲基氨基-乙?；被?-苯甲酸乙酯，隨后BOC-裂解(3.1.)，分別用2-萘磺酰氯、8-喹啉磺酰氯、α-甲苯磺酰氯、反式-β-苯乙烯磺酰氯、丙烷-2-磺酰氯處理，隨后進(jìn)行二硫化物裂解(4.1.)，制備下列化合物(2S，4S)-4-(2-[[4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙?；被?-苯甲酸乙酯，其為白色固體，MS554(M-H)-；(2S，4S)-4-[2-[[4-巰基-1-(喹啉-8-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙?；被鵠-苯甲酸乙酯，其為白色固體，MS557(MH+)；(2S，4S)-4-[2-[(4-巰基-1-苯基甲烷磺酰基-吡咯烷-2-羰基)-甲基-氨基]-乙酰基氨基]-苯甲酸乙酯，其為白色固體，MS520(MH+)；(2S，4S)-4-[2-[[4-巰基-1-(2-苯基-乙烯磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙?；被鵠-苯甲酸乙酯，其為白色固體，MS532(MH+)；(2S，4S)-4-[2-[[4-巰基-1-(丙烷-2-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙酰基氨基]-苯甲酸乙酯，其為白色固體，MS471(MH+)。
類似地，從(2S，2’S，3S，3S’)-3，3’-二硫烷二基-二-吡咯烷-1，2-二羧酸1，1’-二-叔-丁酯與4-(2-甲基氨基-乙酰基氨基)-苯甲酸乙酯，隨后BOC-裂解(3.1.)，分別用8-喹啉磺酰氯、α-甲苯磺酰氯、反式-β-苯乙烯磺酰氯處理，按照程序(5.1.)用LiOH裂解酯，進(jìn)行二硫化物裂解(4.1.)，制備下列化合物(2S，4S)-4-[2-[[4-巰基-1-(喹啉-8-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙?；被鵠-苯甲酸，其為白色固體，MS529(MH+)；(2S，4S)-4-[2-[(4-巰基-1-苯基甲烷磺?；?吡咯烷-2-羰基)-甲基-氨基]-乙?；被鵠-苯甲酸，其為白色固體，MS492(MH+)；(2S，4S)-4-[2-[[4-巰基-1-(2-苯基-乙烯磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙?；被鵠-苯甲酸，其為白色固體，MS504(MH+)。
類似地，從(2S，2’S，3S，3S’)-3，3’-二硫烷二基-二-吡咯烷-1，2-二羧酸1，1’-二-叔-丁酯與N-芐基甲基胺，隨后BOC-裂解(3.1.)，用2-萘磺酰氯處理，進(jìn)行二硫化物裂解(4.1.)，制備下列化合物(2S，4S)-4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羧酸芐基-甲基-酰胺，其為白色固體，MS441(MH+)。
按照1.2.用4-氨基苯甲酸乙酯處理(2S，2’S，3S，3S’)-3，3’-二硫烷二基-二-吡咯烷-1，2-二羧酸1，1’-二-叔-丁酯，隨后按照3.1.進(jìn)行BOC水解，分別用2-萘磺酰氯、苯基甲烷磺酰氯、4-甲氧基苯磺酰氯、2-噻吩磺酰氯(2.1.)處理，隨后按照一般性方法4.1.進(jìn)行二硫化物裂解，制備下列化合物(2S，4S)-4-[[4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-苯甲酸乙酯，其為白色固體，MS483(M-H)-；(2S，4S)-4-[(4-巰基-1-苯基甲烷磺酰基-吡咯烷-2-羰基)-氨基]-苯甲酸乙酯，其為白色凍干固體，MS447(M-H)-；(2S，4S)-4-{[4-巰基-1-(4-甲氧基-苯磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-氨基}-苯甲酸乙酯，其為白色固體，MS463(M-H)-；(2S，4S)-4-{[4-巰基-1-(噻吩-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-氨基}-苯甲酸乙酯，其為白色固體，MS441(MH+)。
按照1.2.通過用甲基芐基胺處理(2S，2’S，3S，3S’)-3，3’-二硫烷二基-二-吡咯烷-1，2-二羧酸1，1’-二-叔-丁酯，隨后按照3.1.進(jìn)行BOC水解，用4-叔-丁基-苯磺酰氯(2.1.)處理，隨后按照一般性方法4.1.進(jìn)行二硫化物裂解，制備下列化合物
(2S，4S)-1-(4-叔-丁基-苯磺?；?-4-巰基-吡咯烷-2-羧酸芐基-甲基-酰胺，其為白色固體，MS447(MH+)。
按照1.2.通過用哌啶-4-羧酸乙酯處理(2S，2’S，3S，3S’)-3，3’-二硫烷二基-二-吡咯烷-1，2-二羧酸1，1’-二-叔-丁酯，隨后按照3.1.進(jìn)行BOC水解，分別用4-叔-丁基苯甲酰氯(2.2.)、4-甲氧基苯磺酰氯、苯基甲烷磺酰氯和2-噻吩磺酰氯(2.1.)處理，隨后按照一般性方法4.1.進(jìn)行二硫化物裂解，制備下列化合物(2S，4S)-1-[1-(4-叔-丁基-苯甲?；?-4-巰基-吡咯烷-2-羰基]-哌啶-4-羧酸乙酯，其為白色固體，MS447(MH+)；(2S，4S)-1-[4-巰基-1-(4-甲氧基-苯磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-哌啶-4-羧酸乙酯，其為白色固體，MS457(MH+)；(2S，4S)-1-(4-巰基-1-苯基甲烷磺?；?吡咯烷-2-羰基)-哌啶-4-羧酸乙酯，其為白色固體，MS441(MH+)；(2S，4S)-1-[4-巰基-1-(噻吩-2-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-哌啶-4-羧酸乙酯，其為白色固體，MS433(MH+)。
實(shí)施例16酪氨酸-衍生物類似地，從(2S，2’S，3S，3S’)-3，3’-二硫烷二基-二-吡咯烷-1，2-二羧酸1，1’-二-叔-丁酯和L-酪氨酸-甲酯.鹽酸鹽，隨后進(jìn)行BOC-裂解(3.1.)，制備下列中間體(S)-3-(4-羥基-苯基)-2-[[(2S，4R)-4-[(3R，5S)-5-[(S)-2-(4-羥基-苯基)-1-甲氧基羰基-乙基氨基甲?；鵠-吡咯烷-3-基二硫烷基]-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-丙酸甲酯，其為米黃色無定形物，MS647(MH+)。
在室溫下，將230mg(0.35mmol)(S)-3-(4-羥基-苯基)-2-[[(2S，4R)-4-[(3R，5S)-5-[(S)-2-(4-羥基-苯基)-1-甲氧基羰基-乙基氨基甲酰基]-吡咯烷-3-基二硫烷基]-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-丙酸甲酯用248mg(1.06mmol，3當(dāng)量)4-叔-丁基苯磺酰氯和130mg(1.03mmol)DMAP在6ml二氯甲烷中處理48小時(shí)。濃縮溶液，粗產(chǎn)物按照4.1.進(jìn)行二硫化物裂解，經(jīng)柱色譜純化后得到(S)-2-[[(2S，4S)-1-(4-叔-丁基-苯磺?；?-4-巰基-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-3-(4-羥基-苯基)-丙酸甲酯，其為白色固體，MS521(MH+)，和(S)-2-[[(2S，4S)-1-(4-叔-丁基-苯磺?；?-4-巰基-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-3-[4-(4-叔-丁基-苯磺酰基氧基)-苯基]-丙酸甲酯，其為無色無定形物，MS717(MH+)。
類似地，應(yīng)用1-萘磺酰氯，制備(S)-3-(4-羥基-苯基)-2-[[(2S，4S)-4-巰基-1-(萘-1-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-丙酸甲酯，其為無色無定形物，MS515(MH+)；(S)-2-[[(2S，4S)-4-巰基-1-(萘-1-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-3-[4-(萘-1-磺?；趸?-苯基]-丙酸甲酯，其為無色無定形物，MS705(MH+)；應(yīng)用1-聯(lián)苯基-4-磺酰氯，制備(S)-2-[(2S，4S)-1-(聯(lián)苯基-4-磺?；?-4-巰基-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-3-(4-羥基-苯基)-丙酸甲酯，其為白色固體，MS541(MH+)；(S)-2-[[(2S，4S)-1-(聯(lián)苯基-4-磺?；?-4-巰基-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-3-[4-(聯(lián)苯基-4-磺?；趸?-苯基]-丙酸甲酯，其為白色無定形凍干物，MS757(MH+)；應(yīng)用4-丁氧基-苯磺酰氯，制備(S)-2-[[(2S，4S)-1-(4-丁氧基-苯磺?；?-4-巰基-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-3-(4-羥基-苯基)-丙酸甲酯，其為白色固體，MS537(MH+)；(S)-2-[[(2S，4S)-1-(4-丁氧基-苯磺?；?-4-巰基-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-3-[4-(4-丁氧基-苯磺?；趸?-苯基]-丙酸甲酯，其為無色無定形物，MS749(MH+)；應(yīng)用3，4-二甲氧基-苯磺酰氯，制備(S)-2-[[(2S，4S)-1-(3，4-二甲氧基-苯磺?；?-4-巰基-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-3-(4-羥基-苯基)-丙酸甲酯，其為白色固體，MS525(MH+)；(S)-2-[[(2S，4S)-1-(3，4-二甲氧基-苯磺?；?-4-巰基-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-3-[4-(3，4-二甲氧基-苯磺?；趸?-苯基]-丙酸甲酯，其為無色無定形物，MS742(MNH4+)；
應(yīng)用丁烷-1-磺酰氯，制備(S)-2-[[(2S，4S)-1-(丁烷-1-磺?；?-4-巰基-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-3-(4-羥基-苯基)-丙酸甲酯，其為白色固體，MS462(MNH4+)；應(yīng)用2-甲氧基羰基苯磺酰氯，制備2-[(2S，4S)-2-[(S)-2-(4-羥基-苯基)-1-甲氧基羰基-乙基氨基甲?；鵠-4-巰基-吡咯烷-1-磺?；鵠-苯甲酸甲酯，其為白色結(jié)晶，MS523(MH+)。
應(yīng)用2-萘甲酰氯，制備萘-2-羧酸4-[(S)-2-[[(2S，4S)-4-巰基-1-(萘-2-羰基)-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-2-甲氧基羰基-乙基]-苯基酯，其為白色結(jié)晶MS633(MH+)。
按照一般性方法5.2.處理2-[(2S，4S)-2-[(S)-2-(4-羥基-苯基)-1-甲氧基羰基-乙基氨基甲?；鵠-4-巰基-吡咯烷-1-磺?；鵠-苯甲酸甲酯，得到2-[(2S，4S)-2-[(S)-1-羧基-2-(4-羥基-苯基)-乙基氨基甲酰基]-4-巰基-吡咯烷-1-磺?；鵠-苯甲酸甲酯，其為白色固體，MS509(MH+)。
實(shí)施例17作為離析物的(2S，4S)-4-[(3S，5S)-5-羧基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-3-基二硫烷基]-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羧酸向400mg(0.59mmol)(2S，4S)-4-[(3S，5S)-5-羧基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-3-基二硫烷基]-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸在9ml二氯甲烷的溶液中，加入220mg(2.6mmol，2.2當(dāng)量)4-甲基嗎啉，隨后加入440mg(1.48mmol，1.25當(dāng)量)TPTU和220mg(1.3mmol，1.1當(dāng)量)L-纈氨酸甲酯-鹽酸鹽。將該溶液在室溫下振搖過夜。濃縮溶液，通過快速色譜純化粗產(chǎn)物，得到520mg(98％)(S)-2-{[(2S，4S)-4-[(3S，5S)-5-((S)-1-甲氧基羰基-2-甲基-丙基氨基甲?；?-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-3-基二硫烷基]-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-氨基}-3-甲基-丁酸甲酯，其為白色泡沫，將其按照一般性方法4.1.進(jìn)行二硫化物裂解，得到(S)-2-[[(2S，4S)-4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-3-甲基-丁酸甲酯，其為無色泡沫，MS451(MH+)。
按照一般性過程5.2.，用0.1M LiOH處理(S)-2-[[(2S，4S)-4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-3-甲基-丁酸甲酯，得到(S)-2-[[(2S，4S)-4-巰基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-3-甲基-丁酸，其為白色泡沫，MS437(MH+)。
類似地，從(2S，4S)-4-[(3S，5S)-5-羧基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-3-基二硫烷基]-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羧酸，分別和β-丙氨酸乙酯-鹽酸鹽、L-脯氨酸甲酯.鹽酸鹽、L-酪氨酸甲酯-鹽酸鹽、L-甲硫氨酸甲酯.鹽酸鹽、3，4-(亞甲二氧基)苯胺、4-羥基-L-脯氨酸甲酯.鹽酸鹽、3，4-亞甲二氧芐基胺、(4-氨基苯基)乙酸乙酯、氨基苯甲酸乙酯、3-氨基苯甲酸乙酯-甲烷磺酸酯、4-氨基芐基醇、D，L-二哌啶酸乙酯、3-哌啶甲酸乙酯、p-甲氧基苯胺、4-羥基哌啶、(哌啶-4-基氧)-乙酸叔-丁酯、L-色氨酸甲酯.鹽酸鹽、2-氨基-1，3-丙二醇反應(yīng)，制備下列化合物(2S，4S)-3-[[4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-丙酸乙酯，其為白色固體，MS437(MH+)；(S)-1-[(2S，4S)-4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-吡咯烷-2-羧酸甲酯，其為白色固體，MS449(MH+)；經(jīng)(S)-3-(4-羥基-苯基)-2-{[(2S，4S)-4-[(3S，5S)-5-[(S)-2-(4-羥基-苯基)-1-甲氧基羰基-乙基氨基甲酰基]-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-3-基二硫烷基]-1-(萘-2磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-氨基}-丙酸甲酯，得到(S)-3-(4-羥基-苯基)-2-[[(2S，4S)-4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-丙酸甲酯，其為白色固體，MS515(MH+)；(S)-2-[[(2S，4S)-4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-3-甲基-丁酸甲酯，其為無色泡沫，MS451(MH+)；(S)-2-(2S，4S)-4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-4-甲基硫烷基-丁酸甲酯，其為無色膠狀物，MS483(MH+)；(2S，4S)-4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羧酸苯并[1，3]間二氧雜環(huán)戊烯-5-基酰胺，其為淡粉紅色固體，MS457(MH+)；(2S，4R)-4-羥基-1-[(2S，4S)-4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-吡咯烷-2-羧酸甲酯，其為白色固體，MS465(MH+)；(2S，4S)-4-巰基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸(苯并[1，3]間二氧雜環(huán)戊烯-5-基甲基)-酰胺，其為白色固體，MS471(MH+)；
(2S，4S)-[4-[[4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-苯基]-乙酸乙酯，其為白色固體，MS499(MH+)；(2S，4S)-2-[[4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-苯甲酸乙酯，其為白色固體，MS485(MH+)；(2S，4S)-3-[[4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-苯甲酸乙酯，其為白色固體，MS485(MH+)；(2S，4S)-4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羧酸(4-羥基甲基-苯基)-酰胺，其為白色固體，MS443(MH+)；(R)-和(S)-1-[(2S，4S)-4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-哌啶-2-羧酸乙酯的混合物，其為無色膠狀物，MS477(MH+)；(R)-和(S)-1-[(2S，4S)-4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-哌啶-3-羧酸乙酯的混合物，其為無色膠狀物，MS477(MH+)；(2S，4S)-4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羧酸(4-甲氧基-苯基)-酰胺，其為白色固體，MS443(MH+)；(2S，4S)-(4-羥基-哌啶-1-基)-[4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-基]-甲酮，其為白色固體，MS421(MH+)；(2S，4S)-[1-[4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-哌啶-4-基氧]-乙酸叔-丁酯，其為白色固體，MS535(MH+)；(S)-3-(1H-吲哚-3-基)-2-[[(2S，4S)-4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-丙酸甲酯，其為白色固體，MS538(MH+)；(2S，4S)-4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羧酸(2-羥基-1-羥基甲基-乙基)-酰胺，其為白色固體，MS411(MH+)；相應(yīng)的酸的制備類似地，從(2S，4S)-4-(3S，5S)-5-羧基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-3-基二硫烷基]-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羧酸，分別和β-丙氨酸乙酯-鹽酸鹽、L-脯氨酸甲酯.鹽酸鹽、L-酪氨酸甲酯-鹽酸鹽、L-甲硫氨酸甲酯.鹽酸鹽、4-羥基-L-脯氨酸甲酯.鹽酸鹽、(4-氨基苯基)乙酸乙酯、氨基苯甲酸乙酯、3-氨基苯甲酸乙酯-甲烷磺酸酯、D，L-二哌啶酸乙酯、3-哌啶甲酸乙酯反應(yīng)，隨后如上所述進(jìn)行二硫化物裂解(4.1.)和酯水解(5.2.)，制備下列化合物(2S，4S)-3-[[4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-丙酸，其為白色固體，MS409(MH+)；(S)-1-[(2S，4S)-4-巰基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-吡咯烷-2-羧酸，其為白色固體，MS435(MH+)；(S)-3-(4-羥基-苯基)-2-[[(2S，4S)-4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-丙酸，其為白色固體，MS501(MH+)；(S)-2-[[(2S，4S)-4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-4-甲基硫烷基-丁酸，其為無色膠狀物，MS469(MH+)；(2S，4R)-4-羥基-1-[(2S，4S)-4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-吡咯烷-2-羧酸，其為白色固體，MS451(MH+)；(2S，4S)-[4-[[4-巰基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-amin]-苯基]-乙酸，其為淡黃色固體，MS471(MH+)；(2S，4S)-2-[[4-巰基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-苯甲酸，其為白色固體，MS457(MH+)；(2S，4S)-3-[[4-巰基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-苯甲酸，其為白色固體，MS457(MH+)；(R)-和(S)-1-[(2S，4S)-4-巰基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-哌啶-2-羧酸的混合物，其為白色固體，MS449(MH+)；(R)-和(S)-1-[(2S，4S)-4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-哌啶-3-羧酸的混合物，其為白色固體，MS449(MH+)。
在室溫、209mg(13.5mmol)DTT存在下，用22.5ml 0.1M LiOH處理243mg(4.5mmol)(S)-3-(1H-吲哚-3-基)-2-[[(2S，4S)-4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-丙酸甲酯在13.5ml THF中的溶液72小時(shí)。溶液用1M KHSO4酸化，EtOAc萃取無機(jī)相。用鹽水洗滌合并的有機(jī)相，并用硫酸鈉干燥。通過二氯甲烷∶MeOH 9∶1作為洗脫劑的柱色譜進(jìn)行純化，隨后用己烷研制，得到204mg(86％)(S)-3-(1H-吲哚-3-基)-2-[[(2S，4S)-4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-丙酸，其為白色固體，mp 130℃，MS522(M-H)-。
進(jìn)一步修飾在室溫下，用107mg(0.56mmol，1.5當(dāng)量)2-萘甲酰氯和68mg(0.56mmol，1.5當(dāng)量)DMAP處理在6ml二氯甲烷中的192mg(0.187mmol)(S)-3-(4-羥基-苯基)-2-{[(2S，4S)-4-[(3S，5S)-5-[(S)-2-(4-羥基-苯基)-1-甲氧基羰基-乙基氨基甲?；鵠-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-3-基二硫烷基]-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-氨基}-丙酸甲酯30分鐘。蒸發(fā)溶劑，殘?jiān)ㄟ^二氯甲烷∶EtOAc 8∶1作為洗脫劑的快速色譜進(jìn)行純化，得到218mg(87％)白色泡沫，將其按照一般性過程4.1.進(jìn)行二硫化物裂解，得到萘-2-羧酸4-[(S)-2-[[(2S，4S)-4-巰基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-2-甲氧基羰基-乙基]-苯基酯，其為白色泡沫，MS669(MH+)。
因此，用4-叔丁基苯甲酰氯代替萘甲酰氯，得到4-叔-丁基-苯甲酸4-[(S)-2-[[(2S，4S)-4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-2-甲氧基羰基-乙基]-苯基酯，其為白色泡沫，MS675(MH+)。
在室溫、172mg(1.24mmol，3當(dāng)量)K2CO3存在下，用54μl(0.45mmol，1.1當(dāng)量)芐基溴處理在6ml DMF中的213mg(0.21mmol)(S)-3-(4-羥基-苯基)-2-{[(2S，4S)-4-[(3S，5S)-5-[(S)-2-(4-羥基-苯基)-1-甲氧基羰基-乙基氨基甲?；鵠-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-3-基二硫烷基]-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-氨基}-丙酸甲酯1小時(shí)。過濾混合物并蒸發(fā)。通過二氯甲烷∶EtOAc 8∶1-4∶1作為洗脫劑的柱色譜進(jìn)行純化，得到93mg白色泡沫，將其按照一般性過程4.1.進(jìn)行二硫化物裂解，得到(S)-3-(4-芐氧基-苯基)-2-[[(2S，4S)-4-巰基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-丙酸甲酯，其為白色泡沫，MS605(MH+)。
類似地，應(yīng)用乙基溴和乙基2-溴丙酸酯代替芐基溴，制備下列化合物(S)-3-(4-乙氧基-苯基)-2-[[(2S，4S)-4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-丙酸甲酯，其為白色泡沫，MS543(MH+)；(S)-3-[4-[(R)-和-[(S)-1-乙氧基羰基-乙氧基)-苯基]-2-[[(2S，4S)-4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-丙酸甲酯的混合物，其為白色泡沫，MS615(MH+)。
按照一般性過程5.2.進(jìn)行酯部分的水解，分別得到(S)-3-(4-乙氧基-苯基)-2-[[(2S，4S)-4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-丙酸，其為白色固體，MS529(MH+)；(S)-3-[4-[(R)-和-[(S)-1-羧基-乙氧基]-苯基]-2-[[(2S，4S)-4-巰基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-丙酸的混合物，其為白色固體，MS573(MH+)。
在室溫下，用50μl(0.44mmol，1.2當(dāng)量)異氰酸苯基酯處理在2mlDMF中的200mg(0.19mmol)(S)-3-(4-羥基-苯基)-2-{[(2S，4S)-4-[(3S，5S)-5-[(S)-2-(4-羥基-苯基)-1-甲氧基羰基-乙基氨基甲?；鵠-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-3-基二硫烷基]-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-氨基}-丙酸甲酯48小時(shí)。濃縮溶液，將殘?jiān)ㄟ^二氯甲烷∶EtOAc 4∶1作為洗脫劑的柱色譜純化，得到150mg白色泡沫，將其按照一般性過程4.1.進(jìn)行二硫化物裂解，得到(S)-2-[[(2S，4S)-4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-3-(4-苯基氨基甲?；趸?苯基)-丙酸甲酯，其為白色泡沫，MS634(MH+)。
因此，用異氰酸4-甲氧基苯基酯代替異氰酸苯基酯，得到(S)-2-[[(2S，4S)-4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-3-[4-(4-甲氧基-苯基氨基甲酰基氧基)-苯基]-丙酸甲酯，其為白色泡沫，MS664(MH+)。
實(shí)施例18作為離析物的(2S，4R)-4-[(3R，5S)-5-羧基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-3-基二硫烷基]-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羧酸向8.05g(11.95mmol)(2S，4R)-4-[(3R，5S)-5-羧基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-3-基二硫烷基]-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羧酸在450ml二氯甲烷的溶液中，加入5.8ml(52.8mmol，2.2當(dāng)量)4-甲基嗎啉，隨后加入8.9g(29.9mmol，1.2當(dāng)量)TPTU和6.19g(23.9mmol，1.0當(dāng)量)2-(2-甲基氨基-乙?；被?-苯甲酸甲酯.鹽酸鹽。在室溫下攪拌該溶液過夜，，用1M KHSO4溶液、5％碳酸氫鈉水溶液和鹽水洗滌，通過硫酸鈉干燥，過濾并蒸發(fā)。粗產(chǎn)物通過快速色譜純化，得到8.7g(67％)2-[2-[[(2S，4R)-4-[(3R，5S)-5-[[(2-甲氧基羰基-苯基氨基甲?；?-甲基]-甲基-氨基甲酰基]-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-3-基二硫烷基]-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙?；被鵠-苯甲酸甲酯，其為白色無定形物，(Rf 0.2 EtOAc)，MS1098(MNH4+)。
向在200ml MeOH中的7.6g(7.05mmol)2-[2-[[(2S，4R)-4-[(3R，5S)-5-[[(2-甲氧基羰基-苯基氨基甲?；?-甲基]-甲基-氨基甲酰基]-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-3-基二硫烷基]-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙酰基氨基]-苯甲酸甲酯中加入1ml 2M K2CO3和2.72g(17.6mmol，1.25當(dāng)量)DTT。將該溶液在室溫下攪拌2小時(shí)，用1M KHSO4水溶液(pH 2)酸化該溶液，并用EtOAc萃取無機(jī)相。用鹽水洗滌合并的有機(jī)相，通過硫酸鈉干燥，過濾并蒸發(fā)。將粗產(chǎn)物用Et2O研制，得到6.95g(91％)(2S，4R)-2-[2-[[4-巰基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙?；被鵠-苯甲酸甲酯，其為白色固體，(Rf0.5 EtOAc)，MS559(MNH4+)。
以類似的方式，下列化合物制備如下從(2S，4R)-4-[(3R，5S)-5-羧基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-3-基二硫烷基]-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸和a)3-(2-甲基氨基-乙?；被?-苯甲酸乙酯-鹽酸鹽，隨后按照4.1.進(jìn)行二硫化物裂解，得到(2R，4R)-3-[2-[[4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙酰基氨基]-苯甲酸乙酯，其為白色無定形物，(Rf 0.2己烷∶EtOAc 4∶1)，MS573(MNH4+)；b)2-(甲基-甲基氨基乙?；?氨基)-苯甲酸甲酯-鹽酸鹽，隨后按照4.1.進(jìn)行二硫化物裂解，得到(2S，4R)-2-[[[[4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙?；鵠-甲基-氨基]-苯甲酸甲酯，其為白色固體，(Rf 0.3 EtOAc)，MS556(MH+)；c)3-(甲基-甲基氨基乙?；?氨基)-苯甲酸乙酯.鹽酸鹽，隨后按照4.1.進(jìn)行二硫化物裂解，得到(2S，4R)-3-[[[[4-巰基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙?；鵠-甲基-氨基]-苯甲酸乙酯，其為白色無定形物，(Rf 0.4 EtOAc)，MS570(MH+)；d)N-(4-甲氧基甲基-苯基)-N-甲基-2-甲基氨基-乙酰胺，隨后按照4.1.進(jìn)行二硫化物裂解，得到(2S，4R)-4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羧酸[[(4-甲氧基甲基-苯基)-甲基-氨基甲酰基]-甲基]-甲基-酰胺，其為白色固體，(Rf 0.4二氯甲烷∶MeOH∶AcOH 9∶1∶0.1)，MS542(MH+)。
按照1.2，從(2S，4R)-4-[(3R，5S)-5-羧基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-3-基二硫烷基]-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸和N-[4-(叔-丁基-二甲基-硅烷基氧基甲基)-苯基]-N-甲基-2-甲基氨基-乙酰胺，制備中間體(2S，4R)-4-[(3R，5S)-5-[[[[4-(叔-丁基-二甲基-硅烷基氧基甲基)-苯基]-甲基-氨基甲酰基]-甲基]-甲基-氨基甲?；鵠-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-3-基二硫烷基]-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羧酸[[[4-(叔-丁基-二甲基-硅烷基氧基甲基)-苯基]-甲基-氨基甲?；鵠-甲基]-甲基-酰胺，其為橙色固體，(Rf 0.8二氯甲烷∶MeOH∶AcOH 9∶1∶0.1)，MS1298(MNH4+)。
進(jìn)一步修飾在氬氣氛下，將820mg(0.57mmol)(2S，4R)-4-[(3R，5S)-5-[[[[4-(叔-丁基-二甲基-硅烷基氧基甲基)-苯基]-甲基-氨基甲?；鵠-甲基]-甲基-氨基甲?；鵠-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-3-基二硫烷基]-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羧酸[[[4-(叔-丁基-二甲基-硅烷基氧基甲基)-苯基]-甲基-氨基甲?；鵠-甲基]-甲基-酰胺溶解于9ml乙腈∶二氯甲烷(2∶1)中，緩慢加入502μl HF(40％在水中)。攪拌該溶液4.5小時(shí)，加入冰水和CH2Cl2，然后通過飽和碳酸鈉溶液調(diào)節(jié)pH值至8-9。進(jìn)行相分離，用二氯甲烷(2x)萃取無機(jī)相，用水洗滌合并的有機(jī)相，并通過硫酸鎂干燥，過濾并蒸發(fā)。通過二氯甲烷/MeOH(100∶0-96∶4)梯度硅膠柱色譜純化，得到590mg(98％)(2S，4R)-4-[(3R，5S)-5-[[[(4-羥基-甲基-苯基)-甲基-氨基甲?；鵠-甲基]-甲基-氨基甲?；鵠-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-3-基二硫烷基]-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸[[(4-羥基甲基-苯基)-甲基-氨基甲酰基]-甲基]-甲基-酰胺，其為淡黃色固體，(Rf 0.4二氯甲烷∶MeOH 9∶1)，MS1070(MNH4+)。
在氬氣氛、0℃下，向100mg(0.09mmol)(2S，4R)-4-[(3R，5S)-5-[[[(4-羥基-甲基-苯基)-甲基-氨基甲?；鵠-甲基]-甲基-氨基甲?；鵠-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-3-基二硫烷基]-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸[[(4-羥基甲基-苯基)-甲基-氨基甲?；鵠-甲基]-甲基-酰胺和50μl(0.21mmol，2.2當(dāng)量)2，2，2-三氯亞氨逐乙酸叔-丁基酯的混懸液中，加入1μl(0.01mmol)triflic acid。將反應(yīng)升溫至室溫，攪拌5小時(shí)。加入27μl(0.11mmol，1.2當(dāng)量)2，2，2-三氯亞氨逐乙酸叔-丁基酯，將反應(yīng)在室溫下攪拌12小時(shí)后，再加入27μl(0.11mmol，1.2當(dāng)量)2，2，2-三氯亞氨逐乙酸叔-丁基酯、2ml環(huán)己烷和2ml of CCl4，再攪拌30小時(shí)。將該溶液加入到冰水中，加入飽和碳酸氫鈉水溶液，用二氯甲烷(3x)萃取無機(jī)相，用水洗滌合并的有機(jī)相，并通過硫酸鎂干燥，過濾并蒸發(fā)。將殘?jiān)芙庥?ml二氯甲烷中，冷卻至0℃，過濾并濃縮。用硅膠柱色譜(EtOAc)純化，得到48mg(43％)(2S，4R)-4-[(3R，5S)-5-[[[[(4-叔-丁氧基甲基-苯基)-甲基-氨基甲?；鵠-甲基]-甲基-氨基甲?；鵠-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-3-基二硫烷基]-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羧酸[[(4-叔-丁氧基甲基-苯基)-甲基-氨基甲酰基]-甲基]-甲基-酰胺，其為灰白色無定形物，(Rf 0.2 EtOAc∶MeOH 98∶2)，將其按照4.2.進(jìn)行二硫化物裂解，得到(2S，4R)-4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羧酸[[(4-叔-丁氧基甲基-苯基)-甲基-氨基甲?；鵠-甲基]-甲基-酰胺，其為白色無定形物，(Rf 0.35二氯甲烷∶MeOH 95∶5)，MS584(MH+)。
按照4.2.，進(jìn)行中間體(2S，4R)-4-[(3R，5S)-5-[[[(4-羥基-甲基-苯基)-甲基-氨基甲?；鵠-甲基]-甲基-氨基甲酰基]-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-3-基二硫烷基]-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸[[(4-羥基甲基-苯基)-甲基-氨基甲酰基]-甲基]-甲基-酰胺的二硫化物裂解，得到(2S，4R)-4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羧酸[[(4-羥基甲基-苯基)-甲基-氨基甲?；鵠-甲基]-甲基-酰胺，其為白色固體，(Rf 0.3二氯甲烷∶MeOH∶AcOH 9∶1∶0.1)，MS528(MH+)。
實(shí)施例19從(2S，4R)-4-[(3R，5S)-5-羧基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-3-基二硫烷基]-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羧酸的進(jìn)一步的例子下列酸如下制備從(2S，4R)-4-[(3R，5S)-5-羧基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-3-基二硫烷基]-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羧酸，和
a)2-(2-甲基氨基-乙酰基氨基)-苯甲酸甲酯.鹽酸鹽，按照1.2.，隨后按照5.1.和4.2.，得到(2S，4R)-2-[2-[[4-巰基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙?；被鵠-苯甲酸，其為白色固體，(Rf 0.4二氯甲烷∶MeOH∶AcOH 9∶1∶0.1)，MS526(M-H)-；b)3-(2-甲基氨基-乙酰基氨基)-苯甲酸乙酯.鹽酸鹽，按照1.2.，隨后按照5.1.和4.2.，得到(2S，4R)-3-[2-[[4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙酰基氨基]-苯甲酸，其為淡黃色固體，(Rf0.5二氯甲烷∶MeOH 4∶1)，MS545(MNH4+)；c)2-(甲基-甲基氨基乙酰基-氨基)-苯甲酸甲酯.鹽酸鹽，按照1.2.，隨后按照5.1.和4.2.，得到(2S，4R)-2-[[[[4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙?；鵠-甲基-氨基]-苯甲酸，其為淡藍(lán)色固體，(Rf 0.2二氯甲烷∶MeOH∶AcOH 95∶5∶0.1)，MS540(M-H)-；d)3-(甲基-甲基氨基乙酰基-氨基)-苯甲酸乙酯.鹽酸鹽，按照1.2.，隨后按照5.1.和4.2.，得到(2S，4R)-3-[[[[4-巰基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙酰基]-甲基-氨基]-苯甲酸，其為白色固體，(Rf 0.2二氯甲烷∶MeOH∶AcOH 95∶5∶0.1)，540(M-H)-。
按照1.3.，從(2S，4R)-4-[(3R，5S)-5-羧基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-3-基二硫烷基]-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羧酸，和(S)-3-氨基-N-芐基-N-甲基-琥珀酰胺酸叔-丁酯.鹽酸鹽、(S)-3-氨基-N-(4-異丙基-苯基)-琥珀酰胺酸叔-丁酯、(S)-N-(4-異丙基-苯基)-3-甲基氨基-琥珀酰胺酸叔-丁酯、(S)-N-芐基-N-甲基-3-甲基氨基-琥珀酰胺酸叔-丁酯、(S)-N-芐基-N-甲基-2-甲基氨基-丙酰胺、N-芐基-N-甲基-2-甲基氨基-乙酰胺、(S)-吡咯烷-2-羧酸甲酯、3-環(huán)丙基氨基-丙酸乙酯、(R)-吡咯烷-2-羧酸芐基酯、1-甲基氨基乙?；?哌啶-4-羧酸乙酯、3-甲基氨基-丙酸乙酯、3-氨基-丙酸甲酯、(S)-N-芐基-N-甲基-3-甲基氨基-琥珀酰胺酸叔-丁酯.鹽酸鹽和2-氨基吡啶，隨后按照4.2.進(jìn)行二硫化物裂解，制備下列化合物(S)-N-芐基-3-[[(2S，4R)-4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-N-甲基-琥珀酰胺酸叔-丁酯，其為白色固體，MS612(MH+)；(S)-N-(4-異丙基-苯基)-3-[[(2S，4R)-4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-琥珀酰胺酸叔-丁酯，其為淡黃色固體，MS626(MH+)；(S)-N-(4-異丙基-苯基)-3-[[(2S，4R)-4-巰基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-琥珀酰胺酸叔-丁酯，其為白色固體，MS638(M-H)-；(S)-N-芐基-3-[[(2S，4R)-4-巰基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-N-甲基-琥珀酰胺酸叔-丁酯，其為白色固體，MS626(MH+)；(2S，4R)-4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羧酸(S)-[1-(芐基-甲基-氨基甲酰基)-乙基]-甲基-酰胺，其為白色固體，MS526(MH+)；(2S，4R)-4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羧酸[(芐基-甲基-氨基甲?；?-甲基]-甲基-酰胺，其為白色固體，MS512(MH+)；(2S)-1-[(2S，4R)-4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-吡咯烷-2-羧酸甲酯，其為無色油，mp 80-82℃，MS449(MH+)；(2S，4R)-3-[環(huán)丙基-[4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-丙酸乙酯，其為無色油，MS476(M)；(R)-1-[(2S，4R)-4-巰基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-吡咯烷-2-羧酸芐基酯，其為白色泡沫，MS525(MH+)；(2S，4R)-1-[[[4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙酰基]-哌啶-4-羧酸乙酯，其為白色固體，mp 65-66.5℃，MS548(MH+)；(2S，4R)-3-[[4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-丙酸乙酯，其為無色油，MS451(MH+)；(2S，4R)-3-[[4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-丙酸甲酯，其為無色油，MS421(M-H)-；(S)-N-芐基-3-[[(2S，4R)-4-巰基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-N-甲基-琥珀酰胺酸叔-丁酯，其為白色固體，MS626(MH+)；(2S，4R)-4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羧酸(吡啶-2-基甲基)-酰胺，其為白色結(jié)晶，MS428(MH+)；
按照1.3，從(2S，4R)-4-[(3R，5S)-5-羧基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-3-基二硫烷基]-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羧酸，和(S)-3-氨基-N-(4-異丙基-苯基)-琥珀酰胺酸叔-丁酯、(S)-3-氨基-N-芐基-N-甲基-琥珀酰胺酸叔-丁酯.鹽酸鹽、(S)-N-芐基-N-甲基-3-甲基氨基-琥珀酰胺酸叔-丁酯，隨后按照5.3.進(jìn)行叔-丁酯裂解和按照4.2.進(jìn)行二硫化物裂解，制備下列化合物(S)-N-(4-異丙基-苯基)-3-[[(2S，4R)-4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-琥珀酰胺酸，其為白色固體，MS570(MH+)；(S)-N-芐基-3-[[(2S，4R)-4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-N-甲基-琥珀酰胺酸，其為白色固體，MS554(M-H)-；(3S)-N-芐基-3-[[(2S，4R])-4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-N-甲基-琥珀酰胺酸，其為白色固體，MS570(MH+)；按照1.3.，從(2S，4R)-4-[(3R，5S)-5-羧基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-3-基二硫烷基]-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羧酸，分別和1-甲基氨基乙?；?哌啶-4-羧酸乙酯、(R)-吡咯烷-2-羧酸芐基酯、3-甲基氨基-丙酸乙酯、3-環(huán)丙基氨基-丙酸乙酯和3-氨基-丙酸甲酯反應(yīng)，隨后按照4.3.進(jìn)行二硫化物裂解，制備下列化合物(2S，4R)-1-[[[4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙?；鵠-哌啶-4-羧酸，其為白色固體，mp 105-107℃，MS520(MH+)；(2R)-1-[(2S，4R)-4-巰基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-吡咯烷-2-羧酸，其為白色固體，mp 240-241.5℃，MS435(MH+)；(2S，4R)-3-[[4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-丙酸，其為白色固體，mp 160-162℃421(M-H)-；(2S，4R)-3-[環(huán)丙基-[4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-丙酸，其為白色固體，MS447(M-H)-；(2S，4R)-3-[[4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-丙酸，其為白色固體，mp 88-89℃，MS407(M-H)-。
實(shí)施例20從(2S，4R)-4-[(3R，5S)-5-羧基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-3-基二硫烷基]-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羧酸的進(jìn)一步的例子向在25ml二氯甲烷中的300mg(0.44mmol)(2S，4R)-4-[(3R，5S)-5-羧基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-3-基二硫烷基]-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸中，加入100μl(0.89mmol，1當(dāng)量)4-甲基嗎啉，隨后加入331mg(1.1mmol，1.25當(dāng)量)TPTU和115μl(0.89mmol，1當(dāng)量)N-甲基芐基胺。將該溶液在室溫下攪拌過夜。將混合物加入到1M KHSO4溶液中，用EtOAc萃取，有機(jī)相用5％碳酸氫鈉水溶液和鹽水洗滌。通過硫酸鈉干燥該溶液，過濾并蒸發(fā)，得到313mg(81％)(2S，4R)-4-[(3R，5S)-5-(芐基-甲基-氨基甲?；?-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-3-基二硫烷基]-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羧酸芐基-甲基-酰胺，其為無色泡沫，將其按照一般性過程4.1.進(jìn)行二硫化物裂解，得到(2S，4R)-4-巰基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸芐基-甲基-酰胺，其為白色固體，MS441(MH+)。
類似地，從(2S，4R)-4-[(3R，5S)-5-羧基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-3-基二硫烷基]-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羧酸，分別和異哌啶甲酸乙酯、4-氨基苯甲酸乙酯、L-色氨酸甲酯.鹽酸鹽和4-(3-氨基-丙酰基氨基)-苯甲酸乙酯反應(yīng)，制備下列化合物(2S，4R)-1-[4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-哌啶-4-羧酸乙酯，其為白色固體，MS477(MH+)；(2S，4R)-4-[[4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-苯甲酸乙酯，其為白色固體，MS485(MH+)；(S)-3-(1H-吲哚-3-基)-2-[[(2S，4R)-4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-丙酸甲酯，其為白色固體，MS538(MH+)；(2S，4R)-4-[3-[[4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-丙?；被鵠-苯甲酸乙酯，其為白色固體，MS556(MH+)。
按照一般性過程5.2.，分別對(duì)(2S，4R)-1-[4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-哌啶-4-羧酸乙酯和(S)-3-(1H-吲哚-3-基)-2-[[(2S，4R)-4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-丙酸甲酯進(jìn)行酯裂解，得到(2S，4R)-1-[4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-哌啶-4-羧酸，其為白色固體，MS449(MH+)；
(S)-3-(1H-吲哚-3-基)-2-[[(2S，4R)-4-巰基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-丙酸，其為白色固體，MS522(M-H)-。
實(shí)施例21其它的二硫化物-二酸修飾分別用N-甲基芐基胺和哌啶-4-羧酸乙酯(1.2.)處理(2S，4R)-4-[(3R，5S)-5-羧基-1-(4-叔-丁基-苯磺?；?-吡咯烷-3-基二硫烷基]-1-(4-叔-丁基-苯磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸，隨后按照一般性過程4.1.進(jìn)行二硫化物裂解，得到(2S，4R)-1-(4-叔-丁基-苯磺?；?-4-巰基-吡咯烷-2-羧酸芐基-甲基-酰胺，其為無色油，MS447(MH+)；(2S，4R)-1-[1-(4-叔-丁基-苯磺酰基)-4-巰基-吡咯烷-2-羰基]-哌啶-4-羧酸乙酯，其為無色油，MS483(MH+)；分別用N-甲基芐基胺和哌啶-4-羧酸乙酯(1.2.)處理(2S，4R)-4-[(3R，5S)-5-羧基-1-(萘-2-羰基)-吡咯烷-3-基二硫烷基]-1-(萘-2-羰基)-吡咯烷-2-羧酸，隨后按照一般性過程4.1.進(jìn)行二硫化物裂解，得到(2S，4R)-4-巰基-1-(萘-2-羰基)-吡咯烷-2-羧酸芐基-甲基-酰胺，其為無色油，MS405(MH+)；(2S，4R)-1-[4-巰基-1-(萘-2-羰基)-吡咯烷-2-羰基]-哌啶-4-羧酸乙酯，其為無色油，MS441(MH+)。
實(shí)施例22從AcS-酸開始22.1.作為離析物的(2S，4R)-4-乙?；蛲榛?1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羧酸(a1)用49μl(0.43mmol，1.1當(dāng)量)4-甲基嗎啉、142mg(0.47mmol，1.2當(dāng)量)TPTU和140mg(0.59mmol，1.5當(dāng)量)4-(甲基-甲基氨基乙?；?氨基)-苯甲酸甲酯處理在10ml二氯甲烷中的150mg(0.4mmol)(2S，4R)-4-乙?；蛲榛?1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羧酸。將該溶液在室溫下攪拌過夜。濃縮混合物，通過快速色譜純化，得到233mg(98％)(2S，4R)-4-[[[[4-乙?；蛲榛?1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-乙?；鵠-甲基-氨基]-苯甲酸甲酯，其為白色泡沫，MS598(MH+)。
(a2)按照一般性過程7.2.，將(2S，4R)-4-[[[[4-乙?；蛲榛?1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-乙?；鵠-甲基-氨基]-苯甲酸甲酯轉(zhuǎn)化為(2S，4R)-4-[[[[4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙?；鵠-甲基-氨基]-苯甲酸，其為白色固體，MS542(MH+)。
(a3)在0℃下，用335μl 0.6M(0.2mmol)甲酸鈉(在甲醇中)處理在5ml甲醇中的80mg(0.134mmol)(2S，4R)-4-[[[[4-乙酰基硫烷基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-乙?；鵠-甲基-氨基]-苯甲酸甲酯1小時(shí)。將該溶液倒入EtOAc/1M KHSO4中，用EtOAc萃取無機(jī)相，鹽水洗滌有機(jī)相，通過硫酸鈉干燥并蒸發(fā)。通過柱色譜(EtOAc)純化，得到70mg(定量)(2S，4R)-4-[[[[4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙?；鵠-甲基-氨基]-苯甲酸甲酯，其為白色泡沫，MS556(MH+)。
類似地，從(2S，4R)-4-乙?；蛲榛?1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸，分別和4-甲基氨基苯甲酸甲酯、4-(2-氨基-乙?；被?-苯甲酸乙酯、4-(氨基乙?；?甲基-氨基)-苯甲酸甲酯、4-(2-甲基氨基-乙?；被?-苯甲酸乙酯、4-氨基苯甲酸乙酯、2，3，6-三氟芐基胺反應(yīng)，制備下列化合物(b1)(2S，4R)-4-[[4-乙酰基硫烷基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-苯甲酸甲酯，其為白色固體，MS527(MH+)；(b2)(2S，4R)-4-[[4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-苯甲酸，其為白色固體，MS471(MH+)；(b3)(2S，4R)-4-[[4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-苯甲酸甲酯，其為白色固體，MS485(MH+)；(c1)(2S，4R)-4-[2-[[4-乙酰基硫烷基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-乙酰基氨基]-苯甲酸乙酯，其為白色泡沫，MS584(MH+)；(c2)(2S，4R)-4-[2-[[4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-乙酰基氨基]-苯甲酸，其為白色結(jié)晶，MS514(MH+)；(c3)(2S，4R)-4-[2-[[4-巰基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-乙酰基氨基]-苯甲酸乙酯，其為白色結(jié)晶，MS542(MH+)；(d1)(2S，4R)-4-[[[[4-乙?；蛲榛?1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-乙?；鵠-甲基-氨基]-苯甲酸甲酯，其為白色泡沫，MS584(MH+)；(d2)(2S，4R)-4-[[[[4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-乙酰基]-甲基-氨基]-苯甲酸，其為白色泡沫，MS526(M-H)-；(d3)(2S，4R)-4-[[[[4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-乙?；鵠-甲基-氨基]-苯甲酸甲酯，其為白色結(jié)晶，MS542(MH+)；(e1)(2S，4R)-4-[2-[[4-乙酰基硫烷基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-乙?；被鵠-苯甲酸乙酯，其為白色固體，MS598(MH+)；(e2)(2S，4R)-4-[2-[[4-巰基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙?；被鵠-苯甲酸，其為白色泡沫，MS528(MH+)；(e3)(2S，4R)-4-[2-[[4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙?；被鵠-苯甲酸乙酯，其為白色固體，MS556(MH+)；(f2)(2S，4R)-4-[[4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-苯甲酸，其為白色固體，MS457(MH+)；(f3)(2S，4R)-4-[[4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-苯甲酸乙酯，其為白色固體，MS485(MH+)；(g1)硫代乙酸(3R，5S)-S-[1-(萘-2-磺?；?-5-(2，3，6-三氟-芐基氨基甲?；?-吡咯烷-3-基]酯，MS523(MH+)；(g3)(2S，4R)-4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羧酸2，3，6-三氟-芐基酰胺，其為無色油，MS481(MH+)。
進(jìn)一步的例子按照1.2.，用3-氨基-N-乙基哌啶處理(2S，4R)-4-乙?；蛲榛?1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸，隨后按照7.1.進(jìn)行去保護(hù)，得到(2S，4R)-4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羧酸(R)-和(S)-(1-乙基-哌啶-3-基)-酰胺的1∶1混合物，其為白色固體，MS448(MN+)。
向在10ml甲苯和4ml THF中的200mg(0.52mmol)(2S，4R)-4-乙?；蛲榛?1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羧酸中，加入226μl(2.6mmol，5當(dāng)量)草酰氯，在室溫下攪拌該溶液2小時(shí)，并濃縮。將殘?jiān)軇┯?mlTHF中，在0℃下將該溶液加入到180mg(1.19mmol，2.2當(dāng)量)4-甲基氨基苯甲酸和360mg(2.6mmol，5當(dāng)量)K2CO3在8ml THF的混懸液中。2.5小時(shí)后，通過1M KHSO4酸化該溶液，EtOAc萃取，用鹽水洗滌有機(jī)相并通過硫酸鈉干燥。柱色譜純化，得到91mg(35％)(2S，4R)-4-[[4-乙?；蛲榛?1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-苯甲酸，其為白色固體，MS513(MH+)。
22.2從(2S，4R)-4-乙?；蛲榛?吡咯烷-1，2-二羧酸1-芐基酯開始類似地，按照1.2.，從(2S，4R)-4-乙酰基硫烷基-吡咯烷-1，2-二羧酸1-芐基酯，分別和4-氨基苯甲酸乙酯，L-亮氨酸乙基酯.鹽酸鹽、L-色氨酸甲酯.鹽酸鹽、L-纈氨酸甲酯.鹽酸鹽、L-酪氨酸甲酯.鹽酸鹽、異哌啶甲酸乙酯反應(yīng)，隨后按照7.2.進(jìn)行硫酯裂解，制備下列化合物(2S，4R)-2-(4-羧基-苯基氨基甲酰基)-4-巰基-吡咯烷-1-羧酸芐基酯，其為白色固體，MS399(M-H)-；(2S，4R)-2-[(S)-1-羧基-3-甲基-丁基氨基甲?；鵠-4-巰基-吡咯烷-1-羧酸芐基酯，其為無色無定形物，MS395(MH+)；(2S，4R)-2-[(S)-1-羧基-2-(1H-吲哚-2-基)-乙基氨基甲?；鵠-4-巰基-吡咯烷-1-羧酸芐基酯，其為白色固體，MS468(MH+)；(2S，4R)-2-[(S)-1-羧基-2-甲基-丙基氨基甲酰基]-4-巰基-吡咯烷-1-羧酸芐基酯，其為白色固體，MS381(MH+)；(2S，4R)-2-[(S)-1-羧基-2-(4-羥基-苯基)-乙基氨基甲酰基]-4-巰基-吡咯烷-1-羧酸芐基酯，其為白色固體，MS445(MH+)；(2S，4R)-1-(1-芐氧基羰基-4-巰基-吡咯烷-2-羰基)-哌啶-4-羧酸，其為無色無定形物MS359(M-SH)；類似地，按照1.2.，從(2S，4R)-4-乙?；蛲榛?吡咯烷-1，2-二羧酸1-芐基酯，分別和哌啶、4-氨基-1-芐基哌啶、2-氨基-1，3-丙二醇、N-芐基甲基胺、3-氨基丙腈反應(yīng)，隨后按照7.1.進(jìn)行硫酯裂解，制備下列化合物(2S，4R)-4-巰基-2-(哌啶-1-羰基)-吡咯烷-1-羧酸芐基酯，其為無色無定形物，MS349(MH+)；(2S，4R)-2-(1-芐基-哌啶-4-基氨基甲?；?-4-巰基-吡咯烷-1-羧酸芐基酯，其為無色無定形物，MS454(MH+)；(2S，4R)-2-(2-羥基-1-羥基甲基-乙基氨基甲酰基)-4-巰基-吡咯烷-1-羧酸芐基酯，其為無色無定形物，MS355(MH+)；(2S，4R)-2-(芐基-甲基-氨基甲?；?-4-巰基-吡咯烷-1-羧酸芐基酯，其為無色無定形物，MS351(M-SH)；(2S，4R)-2-(2-氰基-乙基氨基甲?；?-4-巰基-吡咯烷-1-羧酸芐基酯，其為無色無定形物，MS334(MH+)；類似地，按照1.2.，從(2S，4R)-4-乙?；蛲榛?吡咯烷-1，2-二羧酸1-芐基酯，和4-氨基苯甲酸乙酯、L-色氨酸甲酯.鹽酸鹽、L-纈氨酸甲酯.鹽酸鹽、L-亮氨酸乙酯.鹽酸鹽、L-酪氨酸甲酯.鹽酸鹽、異哌啶甲酸乙酯反應(yīng)，隨后按照7.3.進(jìn)行硫酯裂解，制備下列化合物(2S，4R)-2-(4-乙氧基羰基-苯基氨基甲?；?-4-巰基-吡咯烷-1-羧酸芐基酯，其為白色固體，MS429(MH+)；(2S，4R)-2-[(S)-2-(1H-吲哚-2-基)-1-甲氧基羰基-乙基氨基甲?；鵠-4-巰基-吡咯烷-1-羧酸芐基酯，其為白色固體，MS482(MH+)；(2S，4R)-4-巰基-2-[(S)-1-甲氧基羰基-2-甲基-丙基氨基甲?；鵠-吡咯烷-1-羧酸芐基酯，其為無色無定形物，MS395(MH+)；(2S，4R)-2-[(S)-1-乙氧基羰基-3-甲基-丁基氨基甲?；鵠-4-巰基-吡咯烷-1-羧酸芐基酯，其為無色無定形物，MS423(MH+)；(2S，4R)-2-[(S)-2-(4-羥基-苯基)-1-甲氧基羰基-乙基氨基甲?；鵠-4-巰基-吡咯烷-1-羧酸芐基酯，其為白色固體，MS459(MH+)；(2S，4R)-1-(1-芐氧基羰基-4-巰基-吡咯烷-2-羰基)-哌啶-4-羧酸乙酯，其為無色無定形物，MS387(M-SH)。
22.3.(2S，4R)-4-乙?；蛲榛?2-[[[(4-甲氧基羰基-苯基)-甲基-氨基甲?；鵠-甲基]-甲基-氨基甲酰基]-吡咯烷-1-羧酸叔-丁酯-吡咯烷-N位殘基的修飾按照一般性過程1.2.，從(2S，4R)-4-乙酰基硫烷基-吡咯烷-1，2-二羧酸1-叔-丁酯和4-(甲基-甲基氨基乙?；?氨基)-苯甲酸甲酯，制備(2S，4R)-4-乙?；蛲榛?2-[[[(4-甲氧基羰基-苯基)-甲基-氨基甲酰基]-甲基]-甲基-氨基甲?；鵠-吡咯烷-1-羧酸叔-丁酯，其為白色固體。
在0℃下，用15ml TFA處理在60ml二氯甲烷中的2.92g(5.7mmol)(2S，4R)-4-乙?；蛲榛?2-[[[(4-甲氧基羰基-苯基)-甲基-氨基甲?；鵠-甲基]-甲基-氨基甲酰基]-吡咯烷-1-羧酸叔-丁酯，直到檢測(cè)不到起始原料。濃縮溶液，溶解于甲苯中并蒸發(fā)3次，得到2.7g(93％)(2S，4R)-4-[[[(4-乙酰基硫烷基-吡咯烷-2-羰基)-甲基-氨基]-乙?；鵠-甲基-氨基]-苯甲酸甲酯.三氟-乙酸鹽，其為棕色泡沫，MS 408(MH+)。
向在3ml二氯甲烷中的179mg(0.71mmol，1.5當(dāng)量)聯(lián)苯基磺酰氯中，加入248mg(0.47mmol)(2S，4R)-4-[[[(4-乙?；蛲榛?吡咯烷-2-羰基)-甲基-氨基]-乙?；鵠-甲基-氨基]-苯甲酸甲酯三氟-乙酸鹽(在1ml二氯甲烷中)，隨后加入83μl(0.75mmmol，1.6當(dāng)量)NMM和58mg(0.047mmol，0.1當(dāng)量)DMAP。將反應(yīng)振搖30分鐘，直到檢測(cè)不到起始產(chǎn)物。用1M KHSO4、鹽水萃取有機(jī)相，并通過硫酸鈉干燥。通過柱色譜(EtOAc)純化，得到134mg(46％)(2S，4R)-4-[[[[4-乙?；蛲榛?1-(聯(lián)苯基-4-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙?；鵠-甲基-氨基]-苯甲酸甲酯，其為白色泡沫，MS624(MH+)；類似地，用反式-β-苯乙烯磺酰氯、2-(1-萘基)乙烷磺酰氯、8-喹啉磺酰氯、1-萘基磺酰氯、2-三氟甲基磺酰氯、α-甲苯磺酰氯、4-硝基苯磺酰氯、4-氟苯磺酰氯、2-噻吩磺酰氯、苯磺酰氯代替聯(lián)苯基磺酰氯，制備下列化合物(E)-(2S，4R)-4-[[[[4-乙?；蛲榛?1-(2-苯基-乙烯磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙?；鵠-甲基-氨基]-苯甲酸甲酯，其為米黃色泡沫，MS574(MH+)；(2S，4R)-4-[[[[4-乙酰基硫烷基-1-(2-萘-1-基-乙烷磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙?；鵠-甲基-氨基]-苯甲酸甲酯，其為白色泡沫，MS626(MH+)；(2S，4R)-4-[[[[4-乙?；蛲榛?1-(喹啉-8-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙?；鵠-甲基-氨基]-苯甲酸甲酯，其為白色泡沫，MS599(MH+)；(2S，4R)-4-[[[[4-乙?；蛲榛?1-(萘-1-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙?；鵠-甲基-氨基]-苯甲酸甲酯，其為白色泡沫，MS598(MH+)；(2S，4R)-4-[[[[4-乙?；蛲榛?1-(2-三氟甲基-苯磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙酰基]-甲基-氨基]-苯甲酸甲酯，其為白色泡沫，MS616(MH+)；(2S，4R)-4-[[[(4-乙?；蛲榛?1-苯基甲烷磺酰基-吡咯烷-2-羰基)-甲基-氨基]-乙?；鵠-甲基-氨基]-苯甲酸甲酯，其為白色泡沫，MS562(MH+)；(2S，4R)-4-[[[[4-乙酰基硫烷基-1-(4-氟-苯磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙酰基]-甲基-氨基]-苯甲酸甲酯，其為白色泡沫，MS566(MH+)；(2S，4R)-4-[[[[4-乙?；蛲榛?1-(噻吩-2-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙酰基]-甲基-氨基]-苯甲酸甲酯，其為白色泡沫，MS554(MH+)；(2S，4R)-4-[[[(4-乙?；蛲榛?1-苯磺?；?吡咯烷-2-羰基)-甲基-氨基]-乙?；鵠-甲基-氨基]-苯甲酸甲酯，其為白色泡沫，MS548(MH+)；(2S，4R)-4-[[[[4-乙?；蛲榛?1-(4-硝基-苯磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙?；鵠-甲基-氨基]-苯甲酸甲酯，其為白色泡沫，MS593(MH+)；在0℃下，向在10ml THF中的106mg(0.17mmol)(2S，4R)-4-[[[[4-乙?；蛲榛?1-(聯(lián)苯基-4-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙?；鵠-甲基-氨基]-苯甲酸甲酯中，加入10ml 0.1M LiOH，將該溶液在室溫下攪拌2小時(shí)，倒入2ml 1M KHSO4溶液中，用EtOAc萃取。用鹽水洗滌合并的有機(jī)相，硫酸鈉干燥。將殘?jiān)诩和橹醒兄?，得?7mg(69％)(2S，4R)-4-[[[[1-(聯(lián)苯基-4-磺?；?-4-巰基-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙?；鵠-甲基-氨基]-苯甲酸，其為白色固體，MS568(MH+)。
類似地，制備下列化合物從(2S，4R)-4-[[[[4-乙?；蛲榛?1-(2-萘-1-基-乙烷磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙?；鵠-甲基-氨基]-苯甲酸甲酯制備(2S，4R)-4-[[[[4-巰基-1-(2-萘-1-基-乙烷磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙?；鵠-甲基-氨基]-苯甲酸，其為白色固體，MS570(MH+)；從(2S，4R)-4-[[[[4-乙?；蛲榛?1-(喹啉-8-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙酰基]-甲基-氨基]-苯甲酸甲酯制備(2S，4R)-4-[[[[4-巰基-1-(喹啉-8-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙?；鵠-甲基-氨基]-苯甲酸，其為白色固體，MS543(MH+)；從(2S，4R)-4-[[[[4-乙?；蛲榛?1-(萘-1-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙?；鵠-甲基-氨基]-苯甲酸甲酯制備(2S，4R)-4-[[[[4-巰基-1-(萘-1-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙酰基]-甲基-氨基]-苯甲酸，其為白色固體，MS542(MH+)；從(2S，4R)-4-[[[[4-乙?；蛲榛?1-(2-三氟甲基-苯磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙?；鵠-甲基-氨基]-苯甲酸甲酯制備(2S，4R)-4-[[[[4-巰基-1-(2-三氟甲基-苯磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙?；鵠-甲基-氨基]-苯甲酸，其為白色固體，MS560(MH+)；從(2S，4R)-4-[[[(4-乙?；蛲榛?1-苯基甲烷磺酰基-吡咯烷-2-羰基)-甲基-氨基]-乙?；鵠-甲基-氨基]-苯甲酸甲酯制備(2S，4R)-4-[[[(4-巰基-1-苯基甲烷磺酰基-吡咯烷-2-羰基)-甲基-氨基]-乙?；鵠-甲基-氨基]-苯甲酸，其為白色固體，MS506(MH+)；從(2S，4R)-4-[[[[4-乙?；蛲榛?1-(4-氟-苯磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙?；鵠-甲基-氨基]-苯甲酸甲酯制備(2S，4R)-4-[[[[1-(4-氟-苯磺酰基)-4-巰基-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙?；鵠-甲基-氨基]-苯甲酸，其為白色固體，MS510(MH+)；從(2S，4R)-4-[[[[4-乙?；蛲榛?1-(噻吩-2-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙酰基]-甲基-氨基]-苯甲酸甲酯制備(2S，4R)-4-[[[[4-巰基-1-(噻吩-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙?；鵠-甲基-氨基]-苯甲酸，其為白色固體，MS498(MH+)；從(2S，4R)-4-[[[(4-乙酰基硫烷基-1-苯磺?；?吡咯烷-2-羰基)-甲基-氨基]-乙酰基]-甲基-氨基]-苯甲酸甲酯制備(2S，4R)-4-[[[(1-苯磺?；?4-巰基-吡咯烷-2-羰基)-甲基-氨基]-乙?；鵠-甲基-氨基]-苯甲酸，其為白色固體，MS490(M-H)-。
在0℃下，用0.35ml 0.6M(0.21mmol)NaOMe(在MeOH中)處理在3ml MeOH中的85mg(0.142mmol)(2S，4R)-4-[[[[4-乙?；蛲榛?1-(萘-1-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙?；鵠-甲基-氨基]-苯甲酸甲酯1小時(shí)，將該溶液倒入1M KHSO4溶液中，用EtOAc萃取。用鹽水洗滌有機(jī)相，通過硫酸鈉干燥并蒸發(fā)。將殘?jiān)诩和橹醒兄?，得?5mg(60％)(2S，4R)-4-[[[[4-巰基-1-(萘-1-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙?；鵠-甲基-氨基]-苯甲酸甲酯，其為白色固體，MS556(MH+)。
類似地，制備下列化合物從(E)-(2S，4R)-4-[[[[4-乙?；蛲榛?1-(2-苯基-乙烯磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙?；鵠-甲基-氨基]-苯甲酸甲酯制備(E)-(2S，4R)-4-[[[[4-巰基-1-(2-苯基-乙烯磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙?；鵠-甲基-氨基]-苯甲酸甲酯，其為白色固體，MS532(MH+)；從(2S，4R)-4-[[[[4-乙?；蛲榛?1-(喹啉-8-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙?；鵠-甲基-氨基]-苯甲酸甲酯制備(2S，4R)-4-[[[[4-巰基-1-(喹啉-8-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙?；鵠-甲基-氨基]-苯甲酸甲酯，其為白色固體，MS557(MH+)；從(2S，4R)-4-[[[[4-乙?；蛲榛?1-(2-三氟甲基-苯磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙酰基]-甲基-氨基]-苯甲酸甲酯制備(2S，4R)-4-[[[[4-巰基-1-(2-三氟甲基-苯磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙?；鵠-甲基-氨基]-苯甲酸甲酯，其為白色固體，MS574(MH+)；從(2S，4R)-4-[[[[4-乙?；蛲榛?1-(噻吩-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙?；鵠-甲基-氨基]-苯甲酸甲酯制備(2S，4R)-4-[[[[4-巰基-1-(噻吩-2-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙酰基]-甲基-氨基]-苯甲酸甲酯，其為白色固體，MS512(MH+)；從(2S，4R)-4-[[[(4-乙酰基硫烷基-1-苯磺?；?吡咯烷-2-羰基)-甲基-氨基]-乙?；鵠-甲基-氨基]-苯甲酸甲酯制備(2S，4R)-4-[[[(1-苯磺酰基-4-巰基-吡咯烷-2-羰基)-甲基-氨基]-乙?；鵠-甲基-氨基]-苯甲酸甲酯，其為白色泡沫，MS506(MH+)。
實(shí)施例23通過平行合成制備酰胺23.1.中間體的制備在0℃下，用6.71g(35.02mmol)和0.4g(2.92mmol)HOBT處理14.82g(29.2mmol)(2S，4R)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-1，2-二羧酸1-叔-丁酯和4.13ml(32.1mmol)N-芐基甲基胺在300ml THF中的溶液。將反應(yīng)倒入10％KHSO4水溶液/EtOAc中(3x)。用飽和NaHCO3水溶液和10％NaCl溶液洗滌有機(jī)相，并通過硫酸鈉干燥，通過硅膠快速色譜純化(己烷/EtOAc 9∶1至1∶1)后，得到9.68g(56％)(2S，4R)-2-(芐基-甲基-氨基甲酰基)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-1-羧酸叔-丁酯，MS593(MH+)。
19176 B73在-20℃下，用36ml TFA處理9.68g(16.33mmol)(2S，4R)-2-(芐基-甲基-氨基甲酰基)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-1-羧酸叔-丁酯在33ml二氯甲烷中的溶液，在5.5中升溫至室溫，保持在0℃下過夜。蒸發(fā)反應(yīng)，用飽和碳酸氫鈉水溶液/EtOAc處理(3x)，并通過硫酸鈉干燥有機(jī)相，并蒸發(fā)，得到7.59g(95％)(2S，4R)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羧酸芐基-甲基-酰胺，MS493(MH+)。
23.2N-最優(yōu)化，合成的一般性過程氨基甲酸酯用1.2當(dāng)量N-乙基二異丙基胺和1.2當(dāng)量氯甲酸酯處理0.22mmol(2S，4R)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羧酸芐基-甲基-酰胺在1.7ml二噁烷中的溶液。在室溫下16小時(shí)后，過濾反應(yīng)，用二噁烷洗滌，通過制備HPLC(RP-16，CH3CN/H2O，UV 230nm)純化。
三苯甲基-去保護(hù)(9.3.)給出游離的硫醇。
磺酰胺將0.32mmol(2S，4R)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羧酸芐基-甲基-酰胺、1.2當(dāng)量N-乙基二異丙基胺和催化量的DMAP在2ml二氯乙烷中的溶液加入到1.2當(dāng)量磺酰氯中。過夜，蒸發(fā)反應(yīng)，將殘?jiān)偃芙庥贒MF中，通過制備HPLC(RP-16，CH3CN/H2O，UV 230nm)純化。
三苯甲基-去保護(hù)(9.3.)給出游離的硫醇。
脲用0.21mmol適當(dāng)?shù)漠惽杷狨ヌ幚?.11mmol(2S，4R)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羧酸芐基-甲基-酰胺在0.5ml二噁烷中的溶液，將反應(yīng)保持在室溫下30分鐘，通過制備HPLC(RP-18，CH3CN/H2O，UV 230nm)純化。
三苯甲基-去保護(hù)(9.3.)給出游離的硫醇。
酰胺用1.5當(dāng)量EDCI(在1ml二氯甲烷中)處理在1ml二噁烷中的0.25mmol(2S，4R)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羧酸芐基-甲基-酰胺、1.5當(dāng)量酸和催化量的DMAP。攪拌反應(yīng)過夜，蒸發(fā)，并通過制備HPLC(RP-18，CH3CN/H2O，UV 230nm)純化。
三苯甲基-去保護(hù)(9.3.)給出游離的硫醇。
按照表3，4，5和6，制備下列化合物
*5-氯磺?；?2-乙氧基-苯甲酸Dunn，Peter James；Wood，Albert Shaw.
通過環(huán)化制備Sildenafil的方法，歐洲專利申請(qǐng)EP 812845 A11D、1E與1F(本發(fā)明)各包含1重量％聚氨基酰胺(MW＝10,000)、0.1重量％聚氨基酰胺(MW＝10,000)、與1重量％聚氨基酰胺(MW＝80,000)。測(cè)量各化學(xué)-拋光系統(tǒng)對(duì)基底的鉑與氧化硅層的移除速率。移除速率(RR)與選擇性列于下表中表鉑移除速率及鉑/氧化物選擇性
這些結(jié)果證明，依照本發(fā)明使用包含含胺聚合物的CMP系統(tǒng)可得改良的金屬對(duì)氧化物選擇性。
在此所列的所有參考數(shù)據(jù)，包括公告、專利申請(qǐng)與專利，在此以如同將各參考數(shù)據(jù)個(gè)別地且特定地并入作為參考及在此全部敘述的相同程度并入作為參考。
在敘述本發(fā)明的文(特別是以下的申請(qǐng)專利范圍)中的名詞“一(a)”與“一(an)”與“此(the)”及類似符號(hào)視為涵蓋單數(shù)或復(fù)數(shù)，除非在此另有指示或在內(nèi)文中明確地否認(rèn)。名詞“包含”、“具有”、“包括”、及“含”視為開放名詞(即，mmol)(2S，4R)-4-羥基-2-(哌啶-1-基羰基)-吡咯烷-1-羧酸叔-丁酯48小時(shí)。用1M KHSO4溶液、水、5％碳酸氫鈉水溶液、水和鹽水洗滌該溶液，通過硫酸鈉干燥并濃縮。快速色譜純化，得到6.42g(90％)(2S，4R)-2-(哌啶-1-羰基)-4-(甲苯-4-磺?；趸?-吡咯烷-1-羧酸叔-丁酯，其為白色泡沫。
在100℃下，用2.42g(21.18mmol，1.5當(dāng)量)硫代乙酸鉀處理在50ml DMF中的6.39g(14.12mmol)(2S，4R)-2-(哌啶-1-羰基)-4-(甲苯-4-磺?；趸?-吡咯烷-1-羧酸叔-丁酯4小時(shí)。在真空下濃縮該溶液，將殘?jiān)芙庥贓tOAc、NaHCO3溶液中，進(jìn)行相分離，用EtOAc萃取無機(jī)相。用水和鹽水洗滌合并的有機(jī)相，通過硫酸鈉干燥。通過柱色譜純化，得到3.59g(71％)(2S，4S)-4-乙?；蛲榛?2-(哌啶-1-羰基)-吡咯烷-1-羧酸叔-丁酯，其為淡粉紅色固體。
用3ml TFA處理在6ml二氯甲烷中的1.27g(3.56mmol)(2S，4S)-4-乙?；蛲榛?2-(哌啶-1-羰基)-吡咯烷-1-羧酸叔-丁酯，在0℃下處理10分鐘，在室溫下處理20分鐘。將該溶液倒入飽和碳酸氫鈉水溶液中，用二氯甲烷萃取，水和鹽水洗滌，通過硫酸鈉干燥，得到910mg粗產(chǎn)物(3S，5S)-硫代乙酸S-[5-(哌啶-1-羰基)-吡咯烷-3-基]酯，其不經(jīng)過進(jìn)一步進(jìn)行下列反應(yīng)。
在室溫、214mg(1.75mmol，1.5當(dāng)量)DMAP存在下，用398mg(1.75mmol，1.5當(dāng)量)2-萘磺酰氯處理在25ml二氯甲烷中的300mg(1.17mmol)(3S，5S)-硫代乙酸S-[5-(哌啶-1-羰基)-吡咯烷-3-基]酯1.5小時(shí)。將該溶液加入到1M KHSO4溶液中，進(jìn)行相分離，用二氯甲烷萃取無機(jī)相，1M KHSO4溶液、水和鹽水洗滌合并的有機(jī)相，通過硫酸鈉干燥并濃縮，通過快速色譜純化，得到280mg(54％)(3S，5S)-硫代乙酸S-[1-(萘-2-磺?；?-5-(哌啶-1-羰基)-吡咯烷-3-基]酯，其為白色結(jié)晶。
用9ml 0.1M LiOH處理在9ml THF中的148mg(0.33mmol)(3S，5S)-硫代乙酸S-[1-(萘-2-磺?；?-5-(哌啶-1-羰基)-吡咯烷-3-基]酯，在0℃下處理30分鐘，在室溫下處理1小時(shí)。用乙醚萃取該溶液，1M KHSO4溶液酸化無機(jī)相，EtOAc萃取。用鹽水洗滌EtOAc相，通過硫酸鈉干燥，用己烷研制，給出99mg(74％)(2S，4S)-[4-巰基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-基]-哌啶-1-基-甲酮，其為白色固體，MS405(MH+)。
類似地，從(3S，5S)-硫代乙酸S-[5-(哌啶-1-羰基)-吡咯烷-3-基]酯，和4-叔-丁基-苯磺酰氯、4-甲氧基-苯磺酰氯、4-n-丁氧基苯磺酰氯，苯基甲烷磺酰氯(2.1.)、p-甲氧苯酰氯和4-叔-丁基苯甲酰氯(2.2)反應(yīng)，制備下列化合物(2S，4S)-[1-(4-叔-丁基-苯磺?；?-4-巰基-吡咯烷-2-基]-哌啶-1-基-甲酮，其為白色固體，MS411(MH+)；(2S，4S)-[4-巰基-1-(4-甲氧基-苯磺?；?-吡咯烷-2-基]-哌啶-1-基-甲酮，其為白色固體，MS385(MH+)；(2S，4S)-[1-(4-丁氧基-苯磺?；?-4-巰基-吡咯烷-2-基]-哌啶-1-基-甲酮，其為白色固體，MS427(MH+)；(2S，4S)-(4-巰基-1-苯基甲烷磺酰基-吡咯烷-2-基)-哌啶-1-基-甲酮，其為黃色漿狀物，MS369(MH+)；(2S，4S)-[4-巰基-2-(哌啶-1-羰基)-吡咯烷-1-基]-(4-甲氧基-苯基)-甲酮，其為無色漿狀物，MS349(MH+)；(2S，4S)-(4-叔-丁基-苯基)-[4-巰基-2-(哌啶-1-羰基)-吡咯烷-1-基]-甲酮，其為白色固體，MS375(MH+)；23.4.B)-thioac，amid形成，接著R3SO2Cl或R3COCl處理類似地，下列中間體制備如下從N-BOC-L-羥基-脯氨酸和N-甲基芐基胺反應(yīng)，隨后引入S-乙?；瓦M(jìn)行Boc-裂解，得到(3S，5S)-硫代乙酸S-[5-(芐基-甲基-氨基甲酰基)-吡咯烷-3-基]酯。
按照上述例子，用4-甲氧基-苯磺酰氯、2-萘基磺酰氯、4-叔-丁基-苯磺酰氯、4-n-丁氧基苯磺酰氯，苯基甲烷磺酰氯(2.1.)、p-甲氧苯酰氯和4-叔-丁基苯甲酰氯(2.2)處理(3S，5S)-硫代乙酸S-[5-(芐基-甲基-氨基甲?；?-吡咯烷-3-基]酯，隨后進(jìn)行S-乙?；呀?7.1.)，得到(2S，4S)-4-巰基-1-(4-甲氧基-苯磺?；?-吡咯烷-2-羧酸芐基-甲基-酰胺，其為白色固體，MS421(MH+)；(2S，4S)-4-巰基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸芐基-甲基-酰胺，其為白色固體，MS441(MH+)；
(2S，4S)-1-(4-叔-丁基-苯磺?；?-4-巰基-吡咯烷-2-羧酸芐基-甲基-酰胺，其為白色固體，MS447(MH+)；(2S，4S)-1-(4-丁氧基-苯磺?；?-4-巰基-吡咯烷-2-羧酸芐基-甲基-酰胺，其為白色固體，MS463(MH+)；(2S，4S)-4-巰基-1-苯基甲烷磺?；?吡咯烷-2-羧酸芐基-甲基-酰胺，其為無色漿狀物，MS405(MH+)；(2S，4S)-4-巰基-1-(4-甲氧基-苯甲?；?-吡咯烷-2-羧酸芐基-甲基-酰胺，其為無色漿狀物，MS385(MH+)；(2S，4S)-1-(4-叔-丁基-苯甲?；?-4-巰基-吡咯烷-2-羧酸芐基-甲基-酰胺，其為無色漿狀物，MS411(MH+)。
23.5.D-4-巰基吡咯烷衍生物類似于實(shí)施例2或4，從(2R，4R)-4-羥基-吡咯烷-1，2-二羧酸1-叔-丁酯2-甲酯制備(2R，4S)-4-乙酰基硫烷基-吡咯烷-1，2-二羧酸1-叔-丁酯2-甲酯，其為棕色油，MS304(MH+)。
類似地，如在“二硫化物酸”(實(shí)施例3)部分所描述為了形成二硫化物二酸，從(2R，4S)-4-乙?；蛲榛?吡咯烷-1，2-二羧酸1-叔-丁酯2-甲酯制備下列化合物(2R，2’R，4S，4S’)-4，4’-二硫烷二基-二-吡咯烷-1，2-二羧酸1，1’-二-叔-丁酯，其為淡黃色固體。
按照1.2.用芐基甲基胺處理(2R，2’R，4S，4S’)-4，4’-二硫烷二基-二-吡咯烷-1，2-二羧酸1，1’-二-叔-丁酯，隨后按照3.1.用TFA處理，按照2.1.用甲烷磺酰氯處理，按照4.1.進(jìn)行二硫化物裂解，得到(2R，4S)-4-巰基-1-甲烷磺酰基-吡咯烷-2-羧酸芐基-甲基-酰胺，其為淡灰色油，MS329(MH+)；按照1.2.用芐基甲基胺處理(2R，2’R，4S，4S’)-4，4’-二硫烷二基-二-吡咯烷-1，2-二羧酸1，1’-二-叔-丁酯，隨后按照3.1.用TFA處理，按照2.3.用異氰酸2-萘基酯處理，按照4.1.進(jìn)行二硫化物裂解，得到(2R，4S)-4-巰基-吡咯烷-1，2-二羧酸2-(芐基-甲基-酰胺)1-萘-2-基酰胺，其為淡黃色固體，MS420(MH+)。
向6.7ml(103.3mmol)甲烷磺酸、14.4ml(103.3mmol)三乙胺和28.8g(107.6mmol)三苯膦在280ml甲苯的混懸液中，加入21.12g(86.12mmol)(2R，4R)-4-羥基-吡咯烷-1，2-二羧酸1-叔-丁酯2-甲酯[按照“通過锍鹽環(huán)化合成大環(huán)二內(nèi)酯”制備，T.Nakamura，H.Matsuyama，N.Kamigata，M.Iyoda，有機(jī)化學(xué)雜志(J.Org.Chem.)(1992)，57(14)，3783-9]在180ml甲苯中的混懸液。加入21.6ml(112mmol)偶氮二羧酸二異丙基酯(放熱！)，將該溶液在80℃下加熱2.5小時(shí)，在室溫下攪拌1天。在室溫下加入300ml水，用乙酸乙酯(3×300ml)萃取。用1M KHSO4水溶液(2×100ml)、鹽水(2×150ml)洗滌有機(jī)相，通過硫酸鈉干燥并蒸發(fā)，得到作為粗產(chǎn)物的27.85g(2R，4S)-4-甲烷磺?；趸?吡咯烷-1，2-二羧酸1-叔-丁酯，將其溶解于THF中，按照5.2.用LiOH處理，得到(2R，4S)-4-甲烷磺?；趸?吡咯烷-1，2-二羧酸1-叔-丁酯。
從(2R，4S)-4-甲烷磺?；趸?吡咯烷-1，2-二羧酸1-叔-丁酯開始制備，按照1.2.用N-甲基芐基胺處理，隨后用三苯基甲烷硫醇/硫代乙酸鉀處理(參見實(shí)施例2，’通過甲磺酸酯制備酯’)，得到(2R，4R)-2-(芐基-甲基-氨基甲?；?-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-1-羧酸叔-丁酯，其為淡黃色結(jié)晶，MS593(MH+)。
從(2R，4R)-2-(芐基-甲基-氨基甲?；?-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-1-羧酸叔-丁酯，在三苯甲基(3.2.)存在下進(jìn)行BOC-裂解，隨后按照2.1.分別用2-萘基磺酰氯、4-聯(lián)苯基磺酰氯、異丙基磺酰氯、甲烷磺酰氯和5-氯磺?；?2-乙氧基-苯甲酸處理，隨后進(jìn)行三苯甲基裂解(9.1.)，制備下列化合物(2R，4R)-4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羧酸芐基-甲基-酰胺，其為白色固體，MS441(MH+)；(2R，4R)-1-(聯(lián)苯基-4-磺?；?-4-巰基-吡咯烷-2-羧酸芐基-甲基-酰胺，其為白色固體，MS467(MH+)；(2R，4R)-4-巰基-1-(丙烷-2-磺?；?-吡咯烷-2-羧酸芐基-甲基-酰胺，其為淡棕色油，MS357(MH+)；(2R，4R)-4-巰基-1-甲烷磺?；?吡咯烷-2-羧酸芐基-甲基-酰胺，其為白色固體，MS329(MH+)；(2R，4R)-5-[2-(芐基-甲基-氨基甲?；?-4-巰基-吡咯烷-1-磺酰基]-2-乙氧基-苯甲酸，其為白色固體，MS479(MH+)。
從(2R，4R)-2-(芐基-甲基-氨基甲酰基)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-1-羧酸叔-丁酯，在三苯甲基(3.2.)存在下進(jìn)行BOC-裂解，隨后分別用乙?；?，苯基乙?；?2.2.)處理，隨后進(jìn)行三苯甲基裂解(9.1.)，制備下列化合物(2R，4R)-1-乙?；?4-巰基-吡咯烷-2-羧酸芐基-甲基-酰胺，其為淡棕色油，MS293(MH+)；(2R，4R)-4-巰基-1-苯基乙?；?吡咯烷-2-羧酸芐基-甲基-酰胺，其為淡黃色油，MS369(MH+)。
從(2R，4R)-2-(芐基-甲基-氨基甲?；?-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-1-羧酸叔-丁酯，在三苯甲基(3.2.)存在下進(jìn)行BOC-裂解，隨后分別用異氰酸2-萘基酯、異氰酸乙基酯(2.3.)處理，隨后進(jìn)行三苯甲基裂解(9.1.)，制備下列化合物(2R，4R)-4-巰基-吡咯烷-1，2-二羧酸2-(芐基-甲基-酰胺)1-萘-2-基酰胺，其為灰白色固體，MS420(MH+)；(2R，4R)-4-巰基-吡咯烷-1，2-二羧酸2-(芐基-甲基-酰胺)1-乙基酰胺，其為無色油，MS322(MH+)。
23.6.延伸的產(chǎn)物(酰胺)向在0.86ml THF中的75mg(0.154mmol，1當(dāng)量)(2R，4R)-3-[4-(4-甲氧基-芐基硫烷基)-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-基]-丙酸中，加入24μl(0.185mmol，1.2當(dāng)量)芐基甲基胺，將該溶液冷卻至0℃，加入71mg(0.371mmol，2.4當(dāng)量)EDCI和21mg(0.151mmol，1.2當(dāng)量)HOBT。在室溫下攪拌該混合物過夜，用EtOAc稀釋，10％KHSO4溶液、飽和NaHCO3溶液和鹽水洗滌，通過硫酸鈉干燥并蒸發(fā)，得到131mg(50％)(2R，4R)-N-芐基-3-[4-(4-甲氧基-芐基硫烷基)-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-基]-N-甲基-丙酰胺，其為棕色膠狀物，將其不經(jīng)過進(jìn)一步純化進(jìn)行去保護(hù)。
在0℃下，向在8ml TFA中的131mg(0.23mmol)(2R，4R)-N-芐基-3-[4-(4-甲氧基-芐基硫烷基)-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-基]-N-甲基-丙酰胺中，加入0.37ml(2.3mmol，10當(dāng)量)三乙基硅烷，將該溶液在80℃下攪拌60分鐘，蒸發(fā)，混懸于甲苯中兩次并蒸發(fā)。通過應(yīng)用RPC18柱的制備HPLC純化粗產(chǎn)物，得到17mg(2R，4R)-N-芐基-3-[4-巰基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-基]-N-甲基-丙酰胺，其為淡黃色膠狀物，MS469(MH+)。
類似地，制備下列酰胺從(2R，4R)-3-[4-(4-甲氧基-芐基硫烷基)-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-基]-丙酸，分別和芐基胺，芐基甲基胺，苯基胺，2-氟-芐基胺，異丙基胺，苯乙胺，2，3，6-三氟-芐基胺，2，4，5-三氟-芐基胺反應(yīng)，隨后進(jìn)行去保護(hù)，得到(2R，4R)-N-芐基-3-[4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-基]-丙酰胺，MS455(MH+)；(2R，4R)-3-[4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-基]-N-苯基-丙酰胺，其為黃色膠狀物，MS441(MH+)；(2R，4R)-N-(2-氟-芐基)-3-[4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-基]-丙酰胺，其為淡棕色膠狀物，MS473(MH+)；(2R，4R)-N-異丙基-3-[4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-基]-丙酰胺，其為淡棕色膠狀物，MS407(MH+)；(2R，4R)-3-[4-巰基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-基]-N-苯乙基-丙酰胺，其為淡棕色膠狀物，MS469(MH+)；(2R，4R)-3-[4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-基]-N-(2，3，6-三氟-芐基)-丙酰胺，其為淡棕色膠狀物，MS509(MH+)；(2R，4R)-3-[4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-基]-N-(2，4，5-三氟-芐基)-丙酰胺，其為棕色膠狀物，MS509(MH+)；從(2R，4R)-3-[1-甲烷磺?；?4-(4-甲氧基-芐基硫烷基)-吡咯烷-2-基]-丙酸和芐基甲基胺反應(yīng)，隨后去保護(hù)，得到(2R，4R)-(N-芐基-3-(4-巰基-1-甲烷磺?；?吡咯烷-2-基)-N-甲基-丙酰胺，MS457(MH+)；從(2R，4R)-[1-(萘-2-磺酰基)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-基]-乙酸，分別和芐基甲基胺、芐基胺、2，5-二氟芐基胺反應(yīng)，，隨后去保護(hù)，得到(2R，4R)-N-芐基-2-[4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-基]-N-甲基-乙酰胺，其為白色固體，MS455(MH+)；(2R，4R)-N-芐基-2-[4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-基]-乙酰胺，其為白色結(jié)晶，MS441(MH+)；(2R，4R)-N-(2，5-二氟-芐基)-2-[4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-基]-乙酰胺，其為白色結(jié)晶，MS477(MH+)。
實(shí)施例24酮和醇24.1.酮和醇a)在溶液中Weinreb化合物的制備在氬氣氛下，將6.6g(67.4mmol，5.3當(dāng)量)N，O-二甲基羥基胺.鹽酸鹽溶解于100ml甲苯中，在0℃下用32ml(63.5mmol，5當(dāng)量)三甲基鋁處理，并在室溫下攪拌1.5小時(shí)。通過插管向該溶液中加入在250ml甲苯中的6.0g(12.72mmol，1.0當(dāng)量)(2S，4R)-4-(4-甲氧基-芐基硫烷基)-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羧酸甲酯，將反應(yīng)在45℃下攪拌過夜，在0℃下加入到2M HCl中，進(jìn)行相分離，用EtOAc萃取無機(jī)相，鹽水洗滌合并的有機(jī)相，通過硫酸鈉干燥，過濾并蒸發(fā)。通過己烷∶EtOAc 2∶1作為洗脫劑的硅膠快速色譜純化，得到3.09g(49％)(2S，4R)-4-(4-甲氧基-芐基硫烷基)-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羧酸甲氧基-甲基-酰胺其為無色固體，(Rf 0.2己烷∶EtOAc 1∶2)，mp 101-102℃，MS501(MH+)。
按照一般性過程1.2.，從(2S，4R)-4-(4-甲氧基-芐基硫烷基)-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羧酸和N-甲氧基-N-甲基-2-甲基氨基-乙酰胺.TFA[之前按照3.1.從[(甲氧基-甲基-氨基甲酰基)-甲基]-甲基-氨基甲酸叔-丁酯*制備，*D.Jukic，M.Mayer，P.Schmitt，G.Drapeau，D.Regoli，R.Michelot，含有減少的肽鍵的神經(jīng)激肽假肽類似物的合成和生物活性，歐洲醫(yī)學(xué)化學(xué)雜志(Eur.J.Med.Chem.)(1991)，26(9)，921-8.]，制備(2S，4R)-4-(4-甲氧基-芐基硫烷基)-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羧酸[(甲氧基-甲基-氨基甲?；?-甲基]-甲基-酰胺，其為無色膠狀物，MS572(MH+)。
按照一般性方法1.3.，從(2S，4R)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-1，2-二羧酸1-叔-丁酯和N，O-二甲基羥基1胺-鹽酸鹽/N-甲基嗎啉，給出(2S，4R)-2-(甲氧基-甲基-氨基甲?；?-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-1-羧酸叔-丁酯，MS533(MH+)。
通過BOC-去保護(hù)(3.2.)，給出(2S，4R)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羧酸甲氧基-甲基-酰胺，MS433(MH+)。
在0℃下，用4ml(50mmol)吡啶和5.59ml(42mmol)氯甲酸丁基酯處理17.3g(40mmol)(2S，4R)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羧酸甲氧基-甲基-酰胺在120ml THF中的溶液。將反應(yīng)升溫至室溫過夜，蒸發(fā)，并在10％KHSO4水溶液/Et2O中分配(3x)。用飽和NaHCO3水溶液、10％NaCl溶液洗滌有機(jī)相，通過硫酸鈉干燥。通過硅膠快速色譜純化(己烷/EtOAc4∶1)，給出20.4g(96％)(2S，4R)-2-(甲氧基-甲基-氨基甲?；?-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-1-羧酸丁酯，MS533(MH+)。
制備起始原料，醛在40分鐘內(nèi)，將57ml(57mmol，1.2M在甲苯中的溶液)二異丁基鋁氫化物(DIBAH)加入到6g(22.7mmol)(2S，4S)-4-氯-吡咯烷-1，2-二羧酸1-叔-丁酯2-甲酯在180ml THF中的冷凍溶液(-78℃)中。將反應(yīng)在-78℃下攪拌2小時(shí)，用23g硅膠/23g MgSO4.7H2O在70ml 10％KHSO4水溶液的混懸液淬滅。將混懸液在室溫下攪拌15分鐘，過濾，并用THF洗滌。蒸發(fā)THF后，將殘?jiān)糜诙燃淄橹?，通過硫酸鈉干燥并蒸發(fā)，得到5.88g粗制的(2S，4S)-4-氯-2-甲?；?吡咯烷-1-羧酸叔-丁酯。
酮和醇的制備在-78℃下，向在8ml THF中的0.38ml(3mmol)4-溴苯甲醚中加入1.8ml(2.9mmol，1.6M在己烷中)n-丁基鋰，將反應(yīng)混合物在溫度下攪拌1.5小時(shí)，之后加入300mg(0.6mmol)制備的(2S，4R)-4-(4-甲氧基-芐基硫烷基)-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羧酸[(甲氧基-甲基-氨基甲酰基)-甲基]-甲基-酰胺在10ml THF中的溶液。將反應(yīng)在-78℃下攪拌3.5小時(shí)，加入飽和NH4Cl水溶液，緩慢升溫至室溫。通過進(jìn)一步加入1M KHSO4溶液酸化該溶液，用EtOAc萃取該水溶液，鹽水洗滌有機(jī)層，并通過硫酸鈉干燥。柱色譜純化得到140mg(43％)(2S，4R)-[4-(4-甲氧基-芐基硫烷基)-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-基]-(4-甲氧基-苯基)-甲酮其為白色固體。
在室溫下，用0.45ml(6mmol)三甲基甲硅烷基氯化物和0.3ml(6mmol)DMSO處理在2ml TFA中的140mg(0.26mmol)(2S，4R)-[4-(4-甲氧基-芐基硫烷基)-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-基]-(4-甲氧基-苯基)-甲酮2小時(shí)，將其加入到飽和碳酸鈉溶液中，用EtOAc萃取，鹽水洗滌，并干燥。將粗產(chǎn)物溶解于6ml乙腈中，加入在MeOH中的飽和碳酸鉀溶液和100mg(0.65mmol)DTT。將該溶液在室溫下攪拌1.5小時(shí)，用1M KHSO4水溶液酸化該溶液，并用EtOAc萃取無機(jī)相。用鹽水洗滌合并的有機(jī)相，通過硫酸鈉干燥，過濾并蒸發(fā)。快速色譜純化得到89.5mg(81％)(2S，4R)-[4-巰基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-基]-(4-甲氧基-苯基)-甲酮，其為淡黃色固體，MS292(M-C5H9O)+，135(C5H9O)+。
類似地，從制備的(2S，4R)-4-(4-甲氧基-芐基硫烷基)-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羧酸[(甲氧基-甲基-氨基甲?；?-甲基]-甲基-酰胺，分別和異丁基溴化鎂、苯基鋰(從溴-苯和n-丁基鋰制備)和甲基溴化鎂反應(yīng)，隨后按照上述實(shí)施例描述進(jìn)行PMB-硫醚裂解，制備下列化合物(2S，4R)-1-[4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-基]-3-甲基-丁-1-酮，其為無色油，MS292(M-C8H7O2)+，135(C8H7O2)+。
(2S，4R)-[4-巰基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-基]-苯基-甲酮，其為白色固體，MS398(MH+)；(2S，4R)-1-[4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-基]-乙酮，其為無色固體，MS292(M-C2H3O)+，43(C2H3O)+。
類似地，從(2S，4R)-4-(4-甲氧基-芐基硫烷基)-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羧酸[(甲氧基-甲基-氨基甲酰基)-甲基]-甲基-酰胺，分別和苯基鋰(從溴-苯和n-丁基鋰制備)和異丁基溴化鎂反應(yīng)，隨后按照上述實(shí)施例描述進(jìn)行PMB-硫醚裂解，制備下列化合物(2S，4R)-4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羧酸甲基-(2-氧代-2-苯基-乙基)-酰胺，其為淡棕色油，MS469(MH+)；(2S，4R)-4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羧酸甲基-(4-甲基-2-氧代-戊基)-酰胺，其為黃色油，MS449(MH+)。
在-25℃下，用43.8ml(70mol)n-丁基鋰(1.6M，在己烷中)處理7.69ml(70mmol)苯基乙炔在140ml THF中的溶液。將該反應(yīng)升溫至-10℃下1小時(shí)。然后加入7.46g(14mmol)(2S，4R)-2-(甲氧基-甲基-氨基甲?；?-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-1-羧酸丁酯在110ml THF中的溶液。20分鐘后，用190ml 10％KHSO4水溶液中和反應(yīng)。將該混合物用10％KHSO4溶液/Et2O萃取(3x)。用10％NaCl飽和溶液洗滌有機(jī)相，通過硫酸鈉干燥，蒸發(fā)，并通過硅膠快速色譜(己烷/EtOAc 9∶1)純化，得到6.54g(81％)(2S，4R)-2-(3-苯基-丙炔?；?-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-1-羧酸丁酯，MS574(MH+)。
按照一般性過程9.2.，從(2S，4R)-2-(3-苯基-丙炔酰基)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-1-羧酸丁酯給出(2S，4R)-4-巰基-2-(3-苯基-丙炔?；?-吡咯烷-1-羧酸丁酯，MS332(MH+)。
類似地，從(2S，4R)-4-(4-甲氧基-芐基硫烷基)-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羧酸[(甲氧基-甲基-氨基甲酰基)-甲基]-甲基-酰胺和甲基溴化鎂，制備下列化合物(2S，4R)-1-[4-(4-甲氧基-芐基硫烷基)-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-基]-乙酮，其為無色膠狀物，MS456(MH+)。
在80℃下，用0.75ml(4.67mmol，12.56當(dāng)量)處理170mg(0.37mmol)(2S，4R)-1-[4-(4-甲氧基-芐基硫烷基)-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-基]-乙酮在10ml TFA中的溶液10分鐘。濃縮該溶液，在80℃下，用10ml TFA和0.75ml(4.67mmol，12.56當(dāng)量)處理第二次8分鐘。濃縮該溶液，將殘?jiān)ㄟ^快速色譜純化，得到63 mg(51％)(R)和(S)-1-[(2S，4R)-4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-基]-乙醇，其為無色油，MS338(MH+)。
按照一般性過程9.1.(在室溫下45分鐘)，從(2S，4R)-2-(3-苯基-丙炔?；?-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-1-羧酸丁酯給出，經(jīng)快速硅膠色譜(己烷/EtOAc 9∶1)純化后，得到(2S，4R)-2-((S)或(R)-1-羥基-3-苯基-丙-2-炔基)-4-巰基-吡咯烷-1-羧酸丁酯，MS334(MH+)和(2S，4R)-2-((R)或(S)-1-羥基-3-苯基-丙-2-炔基)-4-巰基-吡咯烷-1-羧酸丁酯，MS334(MH+)。
通過醛的合成在-25℃下，用39.3ml(62.9mol)n-丁基鋰(1.6M，在己烷中)處理6.9ml(62.9mmol)苯基乙炔在120ml THF中的溶液。將反應(yīng)保持在-25℃下20分鐘，然后滴加到2.94g(12.6mmol)粗制的(2S，4S)-4-氯-2-甲?；?吡咯烷-1-羧酸叔-丁酯在100ml THF中冷卻到-25℃的溶液中。45分鐘后，用100ml 10％KHSO4水溶液中和反應(yīng)。將該混合物用10％KHSO4溶液/Et2O萃取(3x)。用10％NaCl飽和溶液洗滌有機(jī)相，通過硫酸鈉干燥，蒸發(fā)，并通過硅膠快速色譜(甲苯/乙腈195∶5至9∶1)純化，得到0.58g(14％)(2S，4S)-4-氯-2-((R)或(S)-1-羥基-3-苯基-丙-2-炔基)-吡咯烷-1-羧酸叔-丁酯，MS336(MH+)和0.67g(16％)(2S，4S)-4-氯-2-((S)或(R)-1-羥基-3-苯基-丙-2-炔基)-吡咯烷-1-羧酸叔-丁酯，MS336(MH+)。
三鍵的氫化將在12ml MeOH中的0.2g(0.61mmol)(2S，4S)-4-氯-2-((R)或(S)-1-羥基-3-苯基-丙-2-炔基)-吡咯烷-1-羧酸叔-丁酯和(2S，4S)-4-氯-2-((S)或(R)-1-羥基-3-苯基-丙-2-炔基)-吡咯烷-1-羧酸叔-丁酯的1∶1混合物和20mg Pd/C(10％)氫化(1atm)過夜。(硅藻土)過濾后，得到(2S，4S)-4-氯-2-((R)或(S)1-羥基-3-苯基-丙基)-吡咯烷-1-羧酸叔-丁酯和(2S，4S)-4-氯-2-((S)或(R)-1-羥基-3-苯基-丙基)-吡咯烷-1-羧酸叔-丁酯的1∶1混合物。
向在12ml DMF中的0.4g(1.19mmol)(2S，4S)-4-氯-2-((R)或(S)-1-羥基-3-苯基-丙-2-炔基)-吡咯烷-1-羧酸叔-丁酯和(2S，4S)-4-氯-2-((S)或(R)-1-羥基-3-苯基-丙-2-炔基)-吡咯烷-1-羧酸叔-丁酯的1∶1混合物中，加入0.2g(1.79mmol，1.5當(dāng)量)硫代乙酸鉀，并加熱至100℃下2.5小時(shí)。在真空下濃縮該混合物，將殘?jiān)ㄟ^硅膠快速色譜(己烷/EtOAc9∶1)純化，得到0.12g(27％)(2S，4R)-4-乙?；蛲榛?2-((S)或(R)-1-羥基-3-苯基-丙-2-炔基)-吡咯烷-1-羧酸叔-丁酯，MS376(MH+)和0.13g(28％)(2S，4R)-4-乙?；蛲榛?2-[(R)-或-[(S)-1-羥基-3-苯基-丙-2-炔基)]-吡咯烷-1-羧酸叔-丁酯，MS376(MH+)。
類似地，從(2S，4S)-4-氯-2-((R)或(S)1-羥基-3-苯基-丙基)-吡咯烷-1-羧酸叔-丁酯和(2S，4S)-4-氯-2-((S)或(R)1-羥基-3-苯基-丙基)-吡咯烷-1-羧酸叔-丁酯的1∶1混合物，經(jīng)硅膠快速色譜(CH2Cl2/EtOAc 99∶1至95∶1)純化后，得到30％(2S，4R)-4-乙?；蛲榛?2-((S)或(R)-1-羥基-3-苯基-丙基)-吡咯烷-1-羧酸叔-丁酯，MS380(MH+)和20％(2S，4R)-4-乙酰基硫烷基-2-((R)或(S)-1-羥基-3-苯基-丙基)-吡咯烷-1-羧酸叔-丁酯，MS380(MH+)。
將37.5mg(0.1mmol)(2S，4R)-4-乙?；蛲榛?2-((S)或(R)-1-羥基-3-苯基-丙-2-炔基)-吡咯烷-1-羧酸叔-丁酯和(2S，4R)-4-乙酰基硫烷基-2-[(R)-或-[(S)-1-羥基-3-苯基-丙-2-炔基)]-吡咯烷-1-羧酸叔-丁酯的1∶1混合物溶解于4ml脫氣的(用氬氣)乙醇中，在0℃下，用0.3ml 1N LiOH水溶液處理。在該溫度下1小時(shí)后，在室溫下攪拌反應(yīng)5小時(shí)。冷卻該溶液(0℃)，用10％KHSO4水溶液/Et2O中和(3x)。用10％NaCl水溶液洗滌有機(jī)相，干燥(Na2SO4)，得到32mg(96％)(2S，4R)-2-((S)和(R)-1-羥基-3-苯基-丙-2-炔基)-4-巰基-吡咯烷-1-羧酸叔-丁酯，MS334(MH+)。
與上述類似，從(2S，4R)-4-乙酰基硫烷基-2-((S)或(R)-1-羥基-3-苯基-丙基)-吡咯烷-1-羧酸叔-丁酯，給出定量的(2S，4R)-2-((S)或(R)-1-羥基-3-苯基-丙基)-4-巰基-吡咯烷-1-羧酸叔-丁酯，MS338(MH+)。
24.2.酮和醇b)固相合成樹脂的制備A)結(jié)構(gòu)單元合成用二氯甲烷(120ml)中的TFA(80ml)處理(2S，4R)-4-(4-甲氧基-芐基硫烷基)-吡咯烷-1，2-二羧酸1-叔-丁酯(19.48g，53mmol)15分鐘。在減壓下濃縮反應(yīng)混合物，將得到的暗紅色油在二乙醚/n-己烷(1∶4 v/v，860ml)中研制。收集沉淀的鹽，在減壓下干燥(18.9g)，直接用于下一步。
用Fmoc-OSu(19.7g，58.3mmol)處理在1，4-二噁烷/含有NaHCO3的(17.8g，212mmol)水溶液(300ml)中的(2S，4R)-4-(4-甲氧基-芐基硫烷基)-吡咯烷-2-羧酸的TFA鹽(18.9g，53mmol)，機(jī)械攪拌16小時(shí)。將反應(yīng)混合物用水(400ml)稀釋，二乙醚(2x)洗滌。加入乙酸乙酯(400ml)和HCl(25％，50ml)，萃取有機(jī)相，用水、NaCl飽和溶液洗滌，硫酸鎂干燥。過濾，并在減壓下濃縮，得到泡沫狀物(22.5g)。
將上述泡沫狀物(20.7g，42.3mmol)溶解于TFA(350ml)中，加入三異丙基硅烷(43.5ml)?；亓髟摶旌衔?.5小時(shí)，在減壓下濃縮，加入二乙醚(100ml)和n-己烷(300ml)，得到沉淀。潷析上清液，在減壓和高真空下干燥沉淀，得到白色泡沫狀物(2S，4R)-4-硫烷基-1-(芴基甲氧基羰基)-吡咯烷-2-羧酸(9.6g，MS370MH+)。
B)樹脂衍生化用在DMF(abs.，250ml)中的TPTU(17.8g，60mmol)、DIEA(30.8ml，180mmol)活化連接劑4-(α，α-二苯基羥基甲基)苯甲酸(18.3g，60mmol)3分鐘。將該混合物加入到含有二苯甲基胺樹脂(加載-NH20.9mmol/g，44.4g)的燒瓶中，振搖該燒瓶1小時(shí)。在濾器上收集樹脂，洗滌(3x交替DMF/異丙醇)，二氯甲烷，乙醚，并干燥，得到54.65g，0.65mmol/g(根據(jù)質(zhì)量增加填料)。
向二氯甲烷洗滌的上述樹脂(46.9g，30mmol)中，加入(2S，4R)-4-硫烷基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸12.2g，36mmol)在二氯甲烷(abs.550ml)、TFA(80ml)中的混合物。將該紅色混合物振搖1.5小時(shí)，然后過濾樹脂，用(3x交替DMF/異丙醇)、二氯甲烷、乙醚洗滌，并干燥，得到42g，0.65mmol/g(根據(jù)質(zhì)量增加填料)。
向二氯甲烷洗滌的上述樹脂(33.5g，22mmol)中，加入(2S，4R)-4-硫烷基-1-(芴基甲氧基羰基)-吡咯烷-2-羧酸(9.7g，26mmol)在二氯甲烷(abs.450ml)、TFA(67ml)中的混合物。將該紅色混合物振搖1.5小時(shí)，然后過濾樹脂，用(3x交替DMF/異丙醇)、二氯甲烷、乙醚洗滌，并干燥，得到42g，0.59mmol/g(根據(jù)質(zhì)量增加填料)。
產(chǎn)物的制備固相-酮的平行化學(xué)用DMF(abs.80ml)、TPTU(3.4g，11.46mmol)、DIEA(2.94ml，17.2mmol)處理上述用(2S，4R)-4-硫烷基-1-(芴基甲氧基羰基)-吡咯烷-2-羧酸(9.71g，5.73mmol)衍生的樹脂15分鐘。在真空下除去DMF溶液，在反應(yīng)燒瓶中加入在DMF(abs.80ml)中的N，O-二甲基羥基胺.鹽酸鹽(1.68g，17.2mmol)。振搖該反應(yīng)混合物2小時(shí)。在濾器上收集樹脂，用(3x交替DMF/異丙醇)、DMF洗滌。在氬氣氛過壓下用THF(abs.2x)洗滌該樹脂(1.0g，0.6mmol)，重新混懸于THF(abs.8ml)中，用4-氟苯基溴化鎂(1M在THF中，5.9ml)處理。4小時(shí)后，過濾樹脂，用THF洗滌。加入0.5N KHSO4，將反應(yīng)燒瓶振搖15分鐘。將該樹脂進(jìn)一步用DMF、0.5N KHSO4，(交替DMF，MeOH，H2O)、DMF、二氯甲烷、二乙醚洗滌，并干燥。用40％TFA/CH2Cl2(10ml)、三異丙基硅烷(0.5ml)處理樹脂1小時(shí)，收集濾液，在減壓下濃縮，殘?jiān)ㄟ^制備RP-HPLC純化，合并所需的級(jí)分，從乙酸(10ml)中冷凍干燥，得到(2S，4R)-2-(4-氟-苯甲?；?-4-巰基-吡咯烷-1-羧酸9H-芴-9-基甲酯MS448.3(MH+)。
此外，通過下列步驟獲得Fmoc基團(tuán)的去除應(yīng)用20％哌啶/DMF(2x5分鐘)，和典型的吡咯烷取代反應(yīng)，隨后，例如，向該樹脂(0.33g，0.20mmol)中加入DMF(abs.5ml)、吡啶(0.16ml，1.95mmol)和萘-2-磺酰氯(0.09g，0.39mmol)在DMF(abs.1ml)中的溶液。將該混合物振搖16小時(shí)，在濾器上收集樹脂，用(3x交替DMF/異丙醇)、二氯甲烷、乙醚洗滌，并干燥。將該樹脂(0.25mg)用40％TFA/CH2Cl2(10ml)、三異丙基硅烷(0.5ml)處理1小時(shí)，收集濾液，在減壓下濃縮，殘?jiān)ㄟ^制備RP-HPLC純化，合并所需的級(jí)分，從乙酸(10ml)中冷凍干燥，得到(2S，4R)-(4-氟-苯基)-[4-巰基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-基]-甲酮MS416.3(MH+)。
通過上述過程，平行制備其它化合物，如表7所示。
實(shí)施例25吡咯烷-衍生物的合成25.1.直接合成參見實(shí)施例2225.2.從相應(yīng)的硫醇合成前藥S-乙?；?前藥起始原料(硫醇(mercaptane))的制備如上所述。
在室溫下，用60μl(0.63mmol，2當(dāng)量)醋酐處理在2ml吡啶中的150mg(0.32mmol)(2S，4S)-1-[4-巰基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-哌啶-4-羧酸乙酯5小時(shí)。加入乙醇，將該溶液在室溫下攪拌10分鐘，并濃縮。將殘?jiān)芙庥诙燃淄橹?，?M HCl，5％NaHCO3溶液和鹽水萃取，通過硫酸鈉干燥，并通過柱色譜純化得到60mg(37％)1-[(2S，4S)-4-乙酰基硫烷基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-哌啶-4-羧酸乙酯，其為白色泡沫，MS519(MH+)。
在0℃下，用0.04ml(0.4mmol)乙酰氯處理124mg(0.2mmol)(2S，4R)-{[4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-苯乙基-氨基}-乙酸在3.2ml吡啶中的溶液，病在室溫下攪拌10分鐘。將反應(yīng)倒入冰水中，用1N HCl/EtOAc萃取(3x)。用1N HCl水溶液和10％NaCl溶液洗滌有機(jī)相，通過硫酸鈉干燥并蒸發(fā)。從二氯甲烷/戊烷(4℃)中沉淀，給出30mg(28％)(2S，4R)-{[4-乙酰基硫烷基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-苯乙基-氨基}-乙酸，mp190-193℃；MS539(M-H)-。
在0℃下，用273mg(1.42mmol)EDCI和16mg(0.13mmol)DMAP處理700mg(1.29mmol)(2S，4R)-{[4-乙?；蛲榛?1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-苯乙基-氨基}-乙酸和0.1ml(1.68mmol)EtOH在12ml二氯甲烷中的混懸液。升溫至室溫(1h)后，將反應(yīng)在10％KHSO4水溶液/Et2O間分配(3x)。用飽和KHCO3水溶液、10％NaCl溶液洗滌有機(jī)相，并通過硫酸鈉干燥。通過硅膠快速色譜純化(己烷/EtOAc 9∶1 to 4∶1)，給出0.254mg(34％)(2S，4R)-{[4-乙?；蛲榛?1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-苯乙基-氨基}-乙酸乙酯，mp119-120℃，MS569(MH+)。
25.3二硫化物例如S-Cys-衍生物的合成將(2S，4R)-{[4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-苯乙基-氨基}-乙酸(35.2mg，0.07mmol)和Boc-Cys(Npys)-OH(Bachem A-2825，26.3mg，0.07mmol)溶解于氬氣脫氣的DMF(abs.2ml)中，加入脫氣的0.1M磷酸鹽緩沖液(pH 6.2，2ml)。在氬氣氛下機(jī)械攪拌該反應(yīng)混合物2小時(shí)。加入乙酸乙酯(30ml)、水(20ml)，用水(3×20ml)洗滌有機(jī)相，減壓下濃縮得到黃色油53mg。在0.5小時(shí)中將該油溶解于4M HCl/1，4-二噁烷(5ml)中。加入二乙醚(30ml)，過濾沉淀的產(chǎn)物，用二乙醚洗滌并干燥，得到37mg。制備RP-HPLC純化，隨后收集并冷凍干燥所需的級(jí)分，得到2-氨基-3-[5-(羧基甲基-苯乙基-氨基甲?；?-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-3-基二硫烷基]-丙酸；與三氟-乙酸的化合物，為白色凍干物(26mg)MS616.3(M-H)-(MH-)。
將(2S，4R)-{[4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-苯乙基-氨基}-乙酸(32.6mg，0.07mmol)和Ac-Cys(Npys)-OH(20.6mg，0.07mmol)溶解于氬氣脫氣的DMF(abs.2ml)中，加入脫氣的0.1M磷酸鹽緩沖液(pH 6.2，2ml)。在氬氣氛下機(jī)械攪拌該反應(yīng)混合物2小時(shí)。加入乙酸乙酯(30ml)、水(20ml)，用水(3×20ml)洗滌有機(jī)相，減壓下濃縮得到黃色油37mg。制備RP-HPLC純化，隨后收集并冷凍干燥所需的級(jí)分，得到2-乙酰基氨基-3-[5-(羧基甲基-苯乙基-氨基甲?；?-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-3-基二硫烷基]-丙酸，其為白色凍干物(20mg)MS657.9(M-H)-。
實(shí)施例A可以按照常規(guī)方法制備含有下列成分的片劑。
實(shí)施例B
可以按照常規(guī)方法制備含有下列成分的膠囊。
實(shí)施例C注射溶液可以含有下列成分
實(shí)施例D將500mg式I化合物混懸于3.5ml Myglyol 812和0.08g芐基醇中。將該混懸液填充到具有劑量閥的容器中。通過劑量閥在一定壓力下將5.0g氟利昂12加入到該容器中。通過振搖將氟利昂溶解到Myglyol-芐基醇混合物中。該噴射容器含有大約100個(gè)單劑量，其可以單獨(dú)應(yīng)用。
權(quán)利要求
1.通式I的化合物 其中R1為氫，烷基羰基，或芳基羰基；R2為烷基，烷基環(huán)烷基，烷基環(huán)烷基烷基，環(huán)烷基，鹵代烷基，羧基烷基，氨基烷基，二烷基氨基烷基，烷氧基烷基，烷氧基羰基烷基，炔基，芳基，芳基烷基，芳基烷基(烷氧基羰基)烷基，芳基羰基烷基，芳氧基烷基，芳基烯基，芳基(烷氧基羰基)烷基，雜芳基，雜芳基烷基，雜環(huán)基或雜環(huán)基烷基；A為-C(O)-R3，-CH(OH)-R4，或-C(O)-NR5R6，其中R3和R4獨(dú)立地選自烷基，芳基，芳基炔基，芳基烷基，和芳基烯基；R5為氫，烷基，環(huán)烷基，環(huán)烷基烷基，羧基烷基，或芳基烷基；R6為烷基，烷基羰基烷基，氰基烷基，羥基烷基，羥基烷基-(羥基烷基)，烷氧基羰基烷基，芳基烷基，芳基羰基烷基，芳基氨基羰基烷基，芳基(烷基)氨基羰基烷基，氨基羰基烷基，芳基，芳基烷基，雜芳基，雜芳基烷基，雜環(huán)基，環(huán)烷基，環(huán)烷基烷基，或羧基烷基，或R6選自式IIa，IIb，和IIc； 或者A為-C(O)-NR5R6中的-NR5R6代表5或6元飽和環(huán)，任選被以下基團(tuán)取代羧基，烷基氧羰基，羥基，烷氧基羰基烷氧基，苯基烷基，或苯基烷氧基羰基；R7為氫，烷基，烯基，烷基硫烷基，芳基，雜芳基，羧基烷基，羧基，烷氧基羰基烷基，芳基烷基，或雜芳基烷基；或式III的化合物 R7A為氫或烷基；R8為-OR9或-NR10R11，其中R9為氫，烷基，芳基烷基；R10為氫或烷基；R11為烷基，芳基，雜芳基，芳基烷基，或-NR10R11代表5或6元環(huán)，任選被以下基團(tuán)取代羧基，烷基氧羰基，羥基，烷氧基羰基烷氧基，苯基烷基，或苯基烷氧基羰基；R12為烷基，芳基，或芳基烷基；Y為-O-，-O-S(O2)-，-O-C(O)-或-O-C(O)-NH-；m為0，1，或2；X為-SO2，-CO-，-C(O)O-，-SO2NH-，或-C(O)NR13-其中R13為氫，烷基，芳基，或羧基烷基；以及其二聚體形式，和/或其藥用酯，和/或其藥用鹽。
2.按照權(quán)利要求1的化合物，其中R1為氫或烷基羰基。
3.按照權(quán)利要求1或2的化合物，其中R1為氫或乙酰基。
4.按照權(quán)利要求3或4的化合物，其中R1為氫。
5.按照權(quán)利要求1-4之一的化合物，其中R2為烷基，烷基環(huán)烷基，烷基環(huán)烷基烷基，環(huán)烷基，鹵代烷基，羧基烷基，芳基，芳基烷基，芳基烷基(烷氧基羰基)烷基，芳基羰基烷基，芳氧基烷基，芳基烯基，或芳基(烷氧基羰基)烷基。
6.按照權(quán)利要求1-5之一的化合物，其中R2為烷基，芳基或芳基烷基。
7.按照權(quán)利要求1-6之一的化合物，其中R2為烷基，萘基或苯基。
8.按照權(quán)利要求1-7之一的化合物，其中R2為萘基。
9.按照權(quán)利要求1-8之一的化合物，其中R3和R4為獨(dú)立地選自烷基，苯基，苯基炔基，苯基烷基，和苯基烯基。
10.按照權(quán)利要求1-7之一的化合物，其中A為-C(O)-NR5R6。
11.按照權(quán)利要求1-10之一的化合物，其中X為-SO2-。
12.按照權(quán)利要求1-10之一的化合物，其中X為-C(O)O-。
13.按照權(quán)利要求1-12之一的化合物，其中m為0，1，或2。
14.按照權(quán)利要求1-13之一的化合物，其中m為0。
15.按照權(quán)利要求1-14之一的化合物，其中R5為烷基，環(huán)烷基，環(huán)烷基烷基，羧基烷基，或芳基烷基。
16.按照權(quán)利要求1-15之一的化合物，其中R5為烷基，芳基烷基，或環(huán)烷基。
17.按照權(quán)利要求10-16之一的化合物，其中A的-C(O)-NR5R6中的-NR5R6代表5或6元環(huán)，任選被以下基團(tuán)取代羧基，烷基氧羰基，羥基，烷氧基羰基烷氧基，苯基烷基，或苯基烷氧基羰基。
18.按照權(quán)利要求18的化合物，其中-NR5R6為哌啶基或吡咯烷基，任選被烷氧基羰基或羧基取代。
19.按照權(quán)利要求17的化合物，其中-NR5R6為哌啶基。
20.按照權(quán)利要求1-19之一的化合物，其中R6為烷基，烷基羰基烷基，氰基烷基，羥基烷基，羥基烷基-(羥基烷基)，烷氧基羰基烷基，芳基烷基，芳基羰基烷基，芳基氨基羰基烷基，芳基(烷基)氨基羰基烷基，氨基羰基烷基，芳基，芳基烷基，雜芳基，雜芳基烷基，雜環(huán)基，環(huán)烷基，環(huán)烷基烷基，或羧基烷基，或者基團(tuán)-C(O)-NR5R6中的-NR5R6代表5或6元環(huán)，任選被以下基團(tuán)取代羧基，烷基氧羰基，羥基，烷氧基羰基烷氧基，苯基烷基，或苯基烷氧基羰基，或R6為下式的基團(tuán) 其中R7為氫，烷基，烯基，烷基硫烷基，芳基，芳基烷基，雜芳基，雜芳基烷基，羧基烷基，羧基，烷氧基羰基烷基；R7A為氫或烷基；R8為OR9或-NR10R11其中R9為氫，烷基，芳基烷基；R10為氫或烷基；R11為芳基，雜芳基，芳基烷基，或基團(tuán)-NR10R11構(gòu)成如權(quán)利要求17-19中的-NR5R6所定義的5或6元飽和環(huán)，和Y為-O-，-O-S(O2)-，-O-C(O)-或-O-C(O)-NH-，和R12為烷基，芳基烷基，芳基。
21.按照權(quán)利要求1-20之一的化合物，其中R6為烷基，烷基羰基烷基，氰基烷基，羥基烷基，羥基烷基-(羥基烷基)，烷氧基羰基烷基，芳基烷基，芳基羰基烷基，芳基氨基羰基烷基，芳基(烷基)氨基羰基烷基，氨基羰基烷基，芳基，芳基烷基，雜芳基，雜芳基烷基，雜環(huán)基，環(huán)烷基，環(huán)烷基烷基或羧基烷基。
22.按照權(quán)利要求1-21之一的化合物，其中R6為烷基，烷基羰基烷基，芳基烷基，芳基羰基烷基，雜芳基烷基，羧基烷基。
23.按照權(quán)利要求1-22之一的化合物，其中R6為烷基，烷基羰基烷基，芐基，四唑基乙基，苯基羰基甲基，或噁二唑基甲基。
24.按照權(quán)利要求1-23之一的化合物，其中R6為下式的基團(tuán) 其中R7為氫，烷基，烯基，烷基硫烷基，芳基，雜芳基，羧基烷基，羧基，烷氧基羰基烷基或R7為式III的基團(tuán) 其中Y為-O-，-O-S(O2)-，-O-C(O)-或-O-C(O)-NH-和R12為芳基；R8為OR9或-NR10R11，其中R9為氫，烷基，芳基烷基；R10為氫或烷基；和R11為芳基，雜芳基，芳基烷基。
25.按照權(quán)利要求24的化合物，其中R6為下式的基團(tuán) R7和R8如權(quán)利要求1-24任一所定義。
26.按照權(quán)利要求24或25的化合物，其中R7為氫。
27.按照權(quán)利要求24-26之一的化合物，其中R8為-NR10R11，其中R10和R11如權(quán)利要求24所定義。
28.按照權(quán)利要求24-27之一的化合物，其中R10為氫或甲基。
29.按照權(quán)利要求24-28之一的化合物，其中R11為芳基。
30.按照權(quán)利要求20-29之一的化合物，其中R11為苯基，任選被烷氧基羰基，羧基，或羥基烷基取代。
31.按照權(quán)利要求1-9之一的化合物，其中A為-C(O)-R3。
32.按照權(quán)利要求1-9之一的化合物，其中A為-CH(OH)-R4。
33.按照權(quán)利要求31或32的化合物，其中R3或R4為烷基，芳基炔基，芳基烯基或芳基烷基。
34.具有下式的化合物 其中，R1、R2、A和X如權(quán)利要求1-33任一所定義。
35.選自下組的權(quán)利要求1的化合物a)(2S，4S)-1-[4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-哌啶-4-羧酸乙酯；b)(2S，4S)-1-[4-巰基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-哌啶-4-羧酸；c)(2S，4R)-4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羧酸芐基-甲基-酰胺；d)(2S，4R)-2-[2-[[4-巰基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙?；被鵠-苯甲酸甲酯；e)(2S，4R)-2-[2-[[4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙酰基氨基]-苯甲酸；f(2S，4R)-4-[[[[4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙酰基]-甲基-氨基]-苯甲酸；g(2S，4R)-4-[[[[4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙?；鵠-甲基-氨基]-苯甲酸甲酯；h(2S，4R)-4-巰基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸[[(4-羥基甲基-苯基)-甲基-氨基甲?；鵠-甲基]-甲基-酰胺；i)(2S，4R)-3-{芐基-[4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-氨基)-丙酸；j)(2S，4R)-4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羧酸環(huán)丙基-[2-(1H-四唑-5-基)-乙基]-酰胺；k)(2S，4R)-1-[4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-基]-3-甲基-丁-1-酮；l)(2S，4R)-[[4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羰基]-(3-甲基-丁基)-氨基]-乙酸；m)(2S，4R)-2-(芐基-甲基-氨基甲?；?-4-巰基-吡咯烷-1-羧酸異丙酯；n)(2S，4R)-2-(芐基-甲基-氨基甲?；?-4-巰基-吡咯烷-1-羧酸戊酯；o)(2S，4R)-4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羧酸芐基-[2-(IH-四唑-5-基)-乙基]-酰胺；p)(2S，4R)-4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羧酸己基-甲基-酰胺；q)(2S，4R)-4-巰基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸甲基-(2-氧代-2-苯基-乙基)-酰胺；r)(2S，4R)-4-巰基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸甲基-(4-甲基-2-氧代-戊基)-酰胺；s)(2S，4R)-4-巰基-1-(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2-羧酸(3-甲基-丁基)-[1，2，4]噁二唑-3-基甲基-酰胺；t)(2S，4R)-2-((S)或(R)-1-羥基-3-苯基-丙-2-炔基)-4-巰基-吡咯烷-1-羧酸丁酯；u)(2S，4R)-4-巰基-2-(3-苯基-丙?；?-吡咯烷-1-羧酸丁酯；v)(2S，4S)-1-[4-乙?；蛲榛?1Э(萘-2-磺?；?-吡咯烷-2Э羰基]-哌啶-4-羧酸乙酯；w)(2S，4R)-4-[[[[4-乙?；蛲榛?1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-乙?；鵠-甲基-氨基]-苯甲酸甲酯。
36.含有權(quán)利要求1-35任一的化合物和藥用賦形劑的藥物組合物。
37.權(quán)利要求1-35之一的化合物作為活性成分在制備預(yù)防和治療內(nèi)皮肽轉(zhuǎn)化酶(ECE)活性導(dǎo)致的疾病的藥物的應(yīng)用，所述疾病特別是心肌缺血、充血性心力衰竭、心律不齊、高血壓、肺動(dòng)脈高血壓、哮喘、腦血管痙攣、蛛網(wǎng)膜下出血、先兆子癇、腎病、動(dòng)脈粥樣硬化、Buerger’s癥、Takayasu’s動(dòng)脈炎、糖尿病并發(fā)癥、肺癌、前列腺癌、腸胃失調(diào)、內(nèi)毒素休克、和敗血病，以及用于傷口愈合和控制月經(jīng)、青光眼、移植排斥、與細(xì)胞抑制的、眼科的和腦保護(hù)性適應(yīng)癥有關(guān)的疾病，以及器官保護(hù)。
38.權(quán)利要求1-35之一的化合物作為活性成分在生產(chǎn)用于抑制鋅水解酶活性的藥物中的應(yīng)用。
39.權(quán)利要求1-35之一的化合物用于治療或預(yù)防以下疾病的應(yīng)用，所述疾病是與心肌缺血、充血性心力衰竭、心律不齊、高血壓、肺動(dòng)脈高血壓、哮喘、腦血管痙攣、蛛網(wǎng)膜下出血、先兆子癇、腎病、動(dòng)脈粥樣硬化、Buerger’s癥、Takayasu’s動(dòng)脈炎、糖尿病并發(fā)癥、肺癌、前列腺癌、腸胃失調(diào)、內(nèi)毒素休克、和敗血病，以及用于傷口愈合和控制月經(jīng)、青光眼、青光眼、移植排斥、與細(xì)胞抑制的、眼科的和腦保護(hù)性適應(yīng)癥有關(guān)的疾病，以及器官保護(hù)有關(guān)的疾病。
40.用作治療性活性物質(zhì)的權(quán)利要求1-35之一的化合物，特別用作治療與鋅水解酶活性有關(guān)的疾病，例如心肌缺血、充血性心力衰竭、心律不齊、高血壓、肺動(dòng)脈高血壓、哮喘、腦血管痙攣、蛛網(wǎng)膜下出血、先兆子癇、腎病、動(dòng)脈粥樣硬化、Buerger’s癥、Takayasu’s動(dòng)脈炎、糖尿病并發(fā)癥、肺癌、前列腺癌、腸胃失調(diào)、內(nèi)毒素休克、和敗血病，以及用于傷口愈合和控制月經(jīng)、青光眼、青光眼、移植排斥、與細(xì)胞抑制的、眼科的和腦保護(hù)性適應(yīng)癥有關(guān)的疾病，以及器官保護(hù)的治療性活性物質(zhì)。
41.治療性和/或預(yù)防性治療以下疾病的方法，所述疾病是心肌缺血、充血性心力衰竭、心律不齊、高血壓、肺動(dòng)脈高血壓、哮喘、腦血管痙攣、蛛網(wǎng)膜下出血、先兆子癇、腎病、動(dòng)脈粥樣硬化、Buerger’s癥、Takayasu’s動(dòng)脈炎、糖尿病并發(fā)癥、肺癌、前列腺癌、腸胃失調(diào)、內(nèi)毒素休克、和敗血病，以及用于傷口愈合和控制月經(jīng)、青光眼、移植排斥、與細(xì)胞抑制的、眼科的和腦保護(hù)性適應(yīng)癥有關(guān)的疾病，以及器官保護(hù)，所述方法包括給人或動(dòng)物施用權(quán)利要求1-35之一的化合物。
42.制備權(quán)利要求1-35之一的化合物的方法，包括使式I的化合物(反應(yīng)路線3) 其中R2，X和m如上所定義，和PG為硫保護(hù)基團(tuán)，與胺HNR5R6反應(yīng)，其中R5和R6如上所定義，得到式2化合物(反應(yīng)路線3)。
43.通過權(quán)利要求42的方法準(zhǔn)備的化合物。
44.如前文所定義的發(fā)明。
全文摘要
本發(fā)明涉及式(I)的化合物，其中R
文檔編號(hào)A61P13/12GK1620433SQ01813023
公開日2005年5月25日 申請(qǐng)日期2001年7月10日 優(yōu)先權(quán)日2000年7月19日
發(fā)明者約翰尼斯·埃必, 丹尼絲·布盧姆, 丹尼爾·布爾, 亞歷山大·丘喬樓斯凱, 亨麗埃格·德姆洛, 埃里克·阿爾吉里奧斯·基塔斯, 貝恩德·米夏埃爾·勒夫勒, 烏爾麗克·奧布斯特, 扎比內(nèi)·瓦爾鮑姆 申請(qǐng)人:霍夫曼-拉羅奇有限公司