1.一種制備曬紅煙提取物的方法,其特征在于:包括以下步驟:
(1)曬紅煙葉的兩步酶促增香與生物轉(zhuǎn)化:第一步酶促生香,將曬紅煙葉和水按質(zhì)量比1:10~40的比例混合均勻,檸檬酸調(diào)節(jié)pH至4.5~6.0,在45~60℃條件下,加入占煙葉質(zhì)量0.05~0.3%的β-葡萄糖苷酶,攪拌均勻,溫育1~12小時(shí);第二步生物轉(zhuǎn)化,在上述發(fā)酵液中加入煙葉質(zhì)量0.01~0.1%的蛋白酶、纖維素酶,攪拌均勻,45~60℃條件下,溫育1~12小時(shí),100℃下2~5min酶滅活;
(2)曬紅煙葉自身美拉德反應(yīng)與回流提?。簩⒉襟E(1)中的兩步發(fā)酵液在50~60℃,回流提取1~5h,抽濾,保留濾液,60℃以下減壓濃縮至原體積的1/8~1/15供純化用;
(3)大孔樹(shù)脂分離:
a.樹(shù)脂預(yù)處理:乙醇浸泡樹(shù)脂1~4h后放凈,重復(fù)2~3次,再用清水充分淋洗至不顯渾濁、無(wú)乙醇?xì)馕稙橹梗?/p>
b.大孔樹(shù)脂靜態(tài)吸附:將大孔吸附樹(shù)脂放入瓶中,加入上述步驟(2)的濃縮液,調(diào)節(jié)pH2~4,在25~55℃,在轉(zhuǎn)速70~250rpm條件下震蕩12~48h,進(jìn)一步除去大分子雜質(zhì);
c.大孔樹(shù)脂解吸附:將上述步驟(b)吸附飽和的樹(shù)脂,用蒸餾水淋洗去除表面殘存的濃縮液,然后放入錐形瓶中,加入質(zhì)量百分比濃度為20~90%的乙醇解吸液,在25~55℃,在轉(zhuǎn)速70~250rpm條件下振蕩解吸12~48h,再將該解吸液60℃以下減壓濃縮至相對(duì)密度為1.0~1.2的浸膏,即為曬紅煙提取物。
2.如權(quán)利要求1所述的制備曬紅煙提取物的方法,其特征在于:所述步驟(1)中β-葡萄糖苷酶酶活為100-1000u/g,蛋白酶酶活為2萬(wàn)-20萬(wàn)u/g、淀粉酶酶活為1萬(wàn)-10萬(wàn)u/g,均為食品級(jí)。
3.如權(quán)利要求1所述的制備曬紅煙提取物的方法,其特征在于:所述步驟(1)中大孔樹(shù)脂為HPD100、300、400、450、600、700、750其中的一種。
4.如權(quán)利要求1所述的制備曬紅煙提取物的方法,其特征在于:所述乙醇為食品級(jí),濃度為50~70%。
5.一種如權(quán)利要求1-4任一所述方法制備曬紅煙提取物在再造煙葉中的應(yīng)用,其特征在于:按再造煙葉質(zhì)量的0.1~0.5%的比例添加到涂布液中。