專(zhuān)利名稱(chēng)：食用菌種更新?lián)Q代的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明是食用菌種更新?lián)Q代的方法。
在食用菌栽培中普遍存在一個(gè)問(wèn)題，就是在同樣的栽培條件下，新培育出的一種優(yōu)良菌種在開(kāi)始使用的1～2年內(nèi)能保持原來(lái)的優(yōu)良特性，如產(chǎn)量高，抗雜能力強(qiáng)，子實(shí)體肥厚等，但再繼續(xù)使用其優(yōu)良特性變得越來(lái)越差，這究競(jìng)是什么原因呢？福建三明真菌研究所的黃年來(lái)同志針對(duì)這一生產(chǎn)中存在的問(wèn)題指出了菌種的老化問(wèn)題，并發(fā)表一篇《菌種的退化，老化和復(fù)壯》文章，刊登在《食用菌》雜志1984年第三期上，在談到菌種老化的問(wèn)題時(shí)他指出“大家都知道，食用菌的生活史是從擔(dān)孢子萌發(fā)開(kāi)始的，經(jīng)菌絲產(chǎn)生子實(shí)體，再產(chǎn)生下一代的孢子。因此，孢子最年輕，菌絲比孢子老，子實(shí)體比菌絲老。所以用擔(dān)孢子分離得到的雙核菌絲和用組織分離得到的雙核菌絲，在發(fā)育程序上有差別。播種后出菇的快慢是有差別的，菌絲隨著菌齡的增加，新陳代謝機(jī)能逐漸降低，失去自控能力，最后趨于滅亡。這種衰老的過(guò)程是一種不可拒絕的自然規(guī)律”。也就是說(shuō)上述情況的發(fā)生是由菌種老化而引起的，在生產(chǎn)中不能反復(fù)地進(jìn)行無(wú)性繁殖，即采用組織分離法，從組織到菌絲，到長(zhǎng)出子實(shí)體，如果反復(fù)地進(jìn)行無(wú)性繁殖，菌種就會(huì)老化，生命力減弱，從而導(dǎo)致菌種的優(yōu)良特性變差，即使菌種保存的很好，也存在老化問(wèn)題，因?yàn)槔匣遣豢删芙^的自然規(guī)律，保存得好，只能延緩老化，而不能阻止老化，因此，保存較好的菌種也不能長(zhǎng)期使用，所以，解決菌種老化的問(wèn)題是一個(gè)重要課題，為了解決老化問(wèn)題黃年來(lái)同志又為我們提供了理論指導(dǎo)，他在談到菌種的復(fù)壯問(wèn)題時(shí)指出“復(fù)壯是指恢復(fù)健康，不是恢復(fù)年輕。當(dāng)一個(gè)菌種因環(huán)境條件不適宜，生長(zhǎng)發(fā)育不良時(shí)，如果給與適宜的環(huán)境條件，菌株長(zhǎng)得比原來(lái)旺盛，但實(shí)際上菌齡繼續(xù)增加，也就是說(shuō)只恢復(fù)了健康，不能阻止老化。在自然條件下，食用菌種的“復(fù)壯”只有靠產(chǎn)生新一代才能實(shí)現(xiàn)?！痹谖恼碌淖詈笏€指出“總而言之，為了保證菌種的質(zhì)量，有性繁殖和無(wú)性繁殖要交替使用”。有性繁殖就是從擔(dān)孢子、經(jīng)菌絲到長(zhǎng)出子實(shí)體，再產(chǎn)生擔(dān)孢子，完成一個(gè)生活史，雖然黃年來(lái)同志提出了菌種的“復(fù)壯”只有靠產(chǎn)生新的一代來(lái)實(shí)現(xiàn)，但目前本領(lǐng)域的技術(shù)人員認(rèn)為已有技術(shù)很難實(shí)現(xiàn)，因?yàn)橐惶岬接行苑敝常麄兙蜁?huì)想到生物的變異性，象食用菌一類(lèi)的低等植物變異性更大，一種食用菌的優(yōu)良菌株通過(guò)有性生殖由孢子萌發(fā)成菌絲后，有相當(dāng)一部分已發(fā)生變異，在發(fā)生變異的菌株中，有的可能比原菌種的優(yōu)良特性差，有的可能比原菌種的優(yōu)良特性好，當(dāng)然，根據(jù)生物的遺傳性，也有相對(duì)沒(méi)產(chǎn)生變異的，因此，采用孢子分離而萌發(fā)的菌絲中除去沒(méi)產(chǎn)生變異的還可能存在許多不同株系的菌絲，也有不同種的菌絲，又由于在已有技術(shù)中，鑒定菌種的優(yōu)良指標(biāo)和鑒別菌種品種只能靠栽培實(shí)驗(yàn)來(lái)實(shí)現(xiàn)，所以，人們認(rèn)為在有性生殖產(chǎn)生的后代中用栽培實(shí)驗(yàn)去篩選與原菌種的優(yōu)良特性一致的菌絲真是如大海撈針，其工作量是不可想象的。因此，雖然本領(lǐng)域的技術(shù)人員認(rèn)識(shí)到了菌種老化的問(wèn)題，但總是沒(méi)有提出一個(gè)很好解決辦法，造成種質(zhì)資源的大量浪費(fèi)。
本發(fā)明的目的是為了解決食用菌種的老化問(wèn)題，提供一種簡(jiǎn)單、易行的菌種更新?lián)Q代的方法。
本發(fā)明的解決方案如下先用多孢分離法采收孢子并萌發(fā)菌絲，或者將孢子直接收集到固體培養(yǎng)基上，并萌發(fā)菌絲直到長(zhǎng)出子實(shí)體，實(shí)驗(yàn)表明，食用菌中不同種或不同株系的菌絲相互接觸，便產(chǎn)生拮抗，即出現(xiàn)拮抗線或空白帶，而同一株系的菌絲接觸不產(chǎn)生拮抗，根據(jù)這一實(shí)驗(yàn)原理，將已萌發(fā)的各個(gè)菌落的菌絲或各個(gè)子實(shí)體組織塊分別轉(zhuǎn)接進(jìn)行純化培養(yǎng)，然后利用拮抗線切割提純，初步篩選出生命力強(qiáng)和生長(zhǎng)快的純菌絲;最后再采用兩點(diǎn)接種法把已提純的菌絲和原菌種兩兩進(jìn)行拮抗實(shí)驗(yàn)，發(fā)生拮抗現(xiàn)象的是變異菌絲，未發(fā)生拮抗現(xiàn)象的是非變異菌絲，這樣，就在孢子分離而萌發(fā)的菌絲中找出了與原菌種一樣的非變異菌絲。
本發(fā)明僅利用拮抗現(xiàn)象就從孢子分離的菌絲中篩選出了非變異菌絲，實(shí)現(xiàn)了菌種的更新?lián)Q代，而且方法簡(jiǎn)單，易行、經(jīng)濟(jì)。
下面根據(jù)實(shí)施例詳細(xì)說(shuō)明。
步驟1，用常規(guī)的多孢分離法，如孢子采集器法，鉤懸法，褶上涂抹法等采收孢子，并在黑暗適溫處培養(yǎng)，使其萌發(fā)菌絲，或者將孢子直接收集到木屑或棉殼固體培養(yǎng)基中，讓其萌發(fā)直到長(zhǎng)出子實(shí)體。
步驟2，當(dāng)孢子萌發(fā)的菌落出現(xiàn)時(shí)，將各個(gè)菌落的菌絲挑取一點(diǎn)依次轉(zhuǎn)到試管斜面PDA培養(yǎng)基上，一般可轉(zhuǎn)20～40支試管，若是在上述固體培養(yǎng)基中萌發(fā)的菌絲，須待長(zhǎng)出子實(shí)體后，將各處的子實(shí)體組織塊轉(zhuǎn)接到試管斜面PDA培養(yǎng)基上，被接種的菌絲或組織塊放在試管斜面的尖端，經(jīng)培養(yǎng)后，生活力強(qiáng)或數(shù)量多的菌絲向前延伸至試管底部，而其它長(zhǎng)得慢的不同種或不同株系的菌絲由橫截的拮抗線將其限制住，不能再向前生長(zhǎng)，然后用接種鏟將有拮抗線的菌絲連同培養(yǎng)基一起除去，剩下試管底部的純菌絲，也有可能在試管中出現(xiàn)一直延伸至試管底部的縱向拮抗線，遇到這種情況應(yīng)繼續(xù)進(jìn)行分離提純，直到得到純菌絲為止。
步驟3，把每一個(gè)試管中的純菌絲，依次轉(zhuǎn)接到試管斜面PDA培養(yǎng)基的底端，再把用組織分離的原菌種依次接到試管斜面的尖端，置適溫下培養(yǎng)，若是變異菌株，兩端菌絲連接處出現(xiàn)拮抗現(xiàn)象，若是非變異菌株，兩端菌絲長(zhǎng)連，無(wú)拮抗現(xiàn)象。
上述方法主要是用于食用菌種的更新?lián)Q代。
權(quán)利要求
1.食用菌種更新?lián)Q代的方法，其特征是a、用多孢分離法采收孢子，并萌發(fā)菌絲，或者將孢子直接收集到固體培養(yǎng)基上，并萌發(fā)菌絲直到長(zhǎng)出子實(shí)體。b、將萌發(fā)的各個(gè)菌落的菌絲或者各個(gè)子實(shí)體組織塊分別轉(zhuǎn)接進(jìn)行純化培養(yǎng)，再利用拮抗線切割提純。c、采用兩點(diǎn)接種法把已提純的菌絲和原菌種兩兩進(jìn)行拮抗實(shí)驗(yàn)，利用拮抗現(xiàn)象鑒定出非變異菌絲。
全文摘要
本發(fā)明是食用菌種更新?lián)Q代的方法，先用多孢分離法采收孢子，并萌發(fā)菌絲，或者將孢子直接收集到固體培養(yǎng)基中并萌發(fā)直到長(zhǎng)出子實(shí)體，然后將萌發(fā)的各個(gè)菌落的菌絲或者各個(gè)子實(shí)體組織塊分別轉(zhuǎn)接進(jìn)行純化培養(yǎng)，再利用拮抗線切割提純，最后采用兩點(diǎn)接種法把已提純的純菌絲和原菌種兩兩進(jìn)行拮抗實(shí)驗(yàn)，利用拮抗現(xiàn)象鑒定出非變異菌株，本發(fā)明僅利用拮抗現(xiàn)象就從孢子分離的菌絲中篩選出了非變異菌株，實(shí)現(xiàn)了菌種的更新?lián)Q代，而且方法簡(jiǎn)單、易行、經(jīng)濟(jì)。
文檔編號(hào)C12N1/14GK1056123SQ9010243
公開(kāi)日1991年11月13日 申請(qǐng)日期1990年4月25日 優(yōu)先權(quán)日1990年4月25日
發(fā)明者齊惠琴 申請(qǐng)人:陜西省食用菌專(zhuān)業(yè)協(xié)會(huì)