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乳酸復(fù)合菌及制備具輔助降壓功能的番茄紅素駱駝乳含片的制作方法

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乳酸復(fù)合菌及制備具輔助降壓功能的番茄紅素駱駝乳含片的制作方法與工藝
本發(fā)明涉及食品加工
技術(shù)領(lǐng)域
,具體地說(shuō),本發(fā)明涉及一種自行復(fù)配的乳酸菌群及在駱駝乳含片中應(yīng)用的
技術(shù)領(lǐng)域
。
背景技術(shù)
:在荒漠和半荒漠地區(qū),駝乳占總?cè)樵吹?7%,綿羊乳占35%,山羊乳占23%,牛乳僅占10%,因此駝乳成為這些地區(qū)的主要乳源之一。駱駝的乳汁中含有豐富的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),它們的含量和結(jié)構(gòu)優(yōu)于其他動(dòng)物乳類。駝乳中蛋白質(zhì)含量約為2-5.5%,總蛋白含量與牛乳相似,酪蛋白的組成也和牛乳相差不大,但各組分所占比例不同于牛乳;大多數(shù)酪蛋白粒子的分布范圍明顯寬于牛乳酪蛋白粒子,且直徑較大,駝乳的乳清蛋白含量較高,其中不含乳球蛋白或者含量很少。所以駝乳更適于人體代謝。近年來(lái),發(fā)酵乳制品的保健功能日益受到重視,對(duì)發(fā)酵乳中生物活性因子的研究較為活躍。目前已從乳蛋白中獲得了多種生物活性肽,其中對(duì)具有降血壓活性的血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(Angiotensinconvertingenzyme,ACE)抑制肽的研究得最多、最系統(tǒng)、最深入、潛在應(yīng)用價(jià)值最高。血管緊張素轉(zhuǎn)化酶抑制肽(Angiotensinconvertingenzymeinhibitory,ACEI)是血管緊張素轉(zhuǎn)換酶的抑制劑,對(duì)降低血壓有積極的作用,因而研究開(kāi)發(fā)具有ACEI活性的藥物和功能食品引起人們的關(guān)注,而血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(Angiotensinconvertingenzyme,ACE)。ACE抑制肽對(duì)降低血壓有積極的作用,因而研究開(kāi)發(fā)具有ACE抑制活性的藥物和功能食品引起人們的關(guān)注。研究表明,從牛乳蛋白質(zhì)和發(fā)酵乳制品中可以提取獲得乳源降血壓肽。目前發(fā)酵乳制品的降血壓作用已經(jīng)成為國(guó)內(nèi)外的研究熱點(diǎn),乳酸菌的降血壓作用在于其能夠代謝產(chǎn)生蛋白酶,從而降解蛋白質(zhì),產(chǎn)生ACEI活性肽。而抑制肽活性與所使用的乳酸菌的種類密切相關(guān)。不同乳酸菌發(fā)酵過(guò)程中的代謝產(chǎn)物具有多樣性,蛋白水解產(chǎn)物也不相同,發(fā)酵乳制品的ACEI活性亦有區(qū)別。因此,篩選高產(chǎn)ACE1活性的益生菌是開(kāi)發(fā)降血益生菌發(fā)酵乳的基礎(chǔ)。將降血壓肽和益生菌結(jié)合生產(chǎn)功能性發(fā)酵乳是乳酸菌制品發(fā)展的方向之一,具有較廣闊的前景。食源性的降壓活性物質(zhì)對(duì)正常血壓不起作用,而對(duì)高血壓病人其降壓效果也較溫和,能起到很好的預(yù)防和治療效果。發(fā)酵乳品含有豐富的乳酸菌群,千百年來(lái)的消費(fèi)習(xí)慣證實(shí)了這些菌群的安全性和可靠性。國(guó)外大量的科研工作發(fā)現(xiàn)了益生乳酸菌具有ACE抑制作用,并且在大量的體內(nèi)和體外實(shí)驗(yàn)中都證實(shí)了這一益生功能。歐美和日本市場(chǎng)上已經(jīng)有了類似的具有降低高血壓的益生乳酸菌制品。但在國(guó)內(nèi)在這方面的研究很少,相關(guān)的益生菌制品更少。新疆地域遼闊,自然環(huán)境和氣候差異很大,而且各少數(shù)民族制備傳統(tǒng)發(fā)酵乳制品所采用的原料、工藝等方面的也各不相同,使得新疆乳酸菌資源的生物多樣性和基因多樣性是其他國(guó)家與地區(qū)所沒(méi)有的。自古以來(lái),駱駝是沙漠地區(qū)游牧民族的重要交通運(yùn)輸工具,而駝乳是生活在荒漠和半荒漠地區(qū)牧民的重要奶食品來(lái)源。據(jù)報(bào)道駝乳含有豐富的蛋白質(zhì)、不飽和脂肪酸、維生素和人體必需的礦物質(zhì)元素,其營(yíng)養(yǎng)價(jià)值僅次于人乳,高于馬奶、山羊奶、綿羊奶和牛奶。人們?cè)陂L(zhǎng)期飲用駝乳的實(shí)踐中發(fā)現(xiàn),發(fā)酵駝乳對(duì)肺結(jié)核病、胃腸道疾病、腎病和心血管疾病等有一定輔助治療作用。駝乳除了含有與牛乳相似的營(yíng)養(yǎng)成分外,還含有較高的生物活性成分,如駝乳中含有大量的諸如溶菌酶、乳鐵蛋白和免疫球蛋白等抗微生物因子,在機(jī)體抗病機(jī)制方面起著重要作用。自然發(fā)酵駝乳的營(yíng)養(yǎng)成分更高,其蛋白質(zhì)和脂肪含量均高于鮮駝乳,是人體補(bǔ)充蛋白和必需脂肪酸的良好食品。它不但保留鮮乳的一切營(yíng)養(yǎng)素,而且發(fā)酵生成的乳酸使蛋白質(zhì)結(jié)成微細(xì)的凝乳,從而提高消化吸收率。而且在某些乳酸菌的發(fā)酵過(guò)程中能合成維生素C,因此自然發(fā)酵駝乳的維生素C含量也高于鮮駝乳。駝乳不僅含有很高的營(yíng)養(yǎng)成分,還有許多生理活性物質(zhì)(溶菌酶、過(guò)氧化物酶、乳鐵蛋白和免疫球蛋白等),他們存在于乳清蛋白當(dāng)中,這些保護(hù)性蛋白可以用來(lái)解釋駝乳為什么在炎熱的夏天可以保存幾天不腐敗;如果能適當(dāng)激活這些活性成分將非常利于乳的貯藏,還能起到殺菌和預(yù)防各種疾病的作用。沙漠地區(qū)的牧民們一般會(huì)在駝乳新鮮時(shí)直接飲用,也有人會(huì)在駝乳自然發(fā)酵后食用。當(dāng)新鮮駝乳或自然發(fā)酵后的駝乳不能飲用完時(shí),為了保證駝乳不被氣候影響而使駝乳品質(zhì)變壞,就需要對(duì)其進(jìn)行必要的加工。經(jīng)過(guò)文獻(xiàn)查新結(jié)果表明,目前對(duì)于駱駝乳的加工研究主要是駱駝乳的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值、發(fā)酵駝乳的加工、駝乳奶油的制作、駝乳干酪的制作水,而對(duì)于將番茄紅素和發(fā)酵駝乳進(jìn)行加工制備含片的研究在國(guó)內(nèi)外研究報(bào)道還不多見(jiàn)。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素:針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)中未見(jiàn)有關(guān)將番茄紅素和采用具有顯著降膽固醇率高的活性復(fù)合菌發(fā)酵駝乳進(jìn)行加工制備含片報(bào)道,本發(fā)明旨在提供乳酸復(fù)合菌及制備具輔助降壓功能的番茄紅素駱駝乳含片,采用復(fù)合菌具有高產(chǎn)ACEI活性的益生菌,制備的番茄紅素駱駝乳含片含有大量的益生菌乳酸菌,能夠改善人體的腸道菌群,改善人體的消化功能,且口感細(xì)膩、爽口,風(fēng)味獨(dú)特,食用方便,同時(shí)具有護(hù)肝的功能,具有廣泛而適用的價(jià)值。本發(fā)明采用的主要技術(shù)方案:通過(guò)選用干酪乳桿菌、屎腸球菌、保加利亞乳桿菌、嗜熱鏈球菌、鼠李糖乳桿菌、嗜酸乳桿菌、植物乳桿菌、雙乙酰鏈球菌和雙歧乳桿菌九種組成的優(yōu)良益生乳酸菌群,這六種菌種盡管都是多年從新疆不同地區(qū)、不同民族的傳統(tǒng)發(fā)酵酸奶中豐富乳酸菌群為來(lái)源,分離、篩選、馴化,從中篩選出具有顯著ACE抑制活性菌株,通過(guò)不斷優(yōu)選,從新疆傳統(tǒng)發(fā)酵酸奶及其制品中篩選得到,同時(shí)進(jìn)行了膽固醇降解率、蛋白質(zhì)水解能力、耐酸和耐膽鹽能力的研究,選用的菌株耐酸性好,耐受腸胃環(huán)境。具有顯著降膽固醇率高的活性菌株,同時(shí)進(jìn)行了膽固醇降解率、蛋白質(zhì)水解能力、耐酸和耐膽鹽能力的研究,具有明顯的輔助降壓功能得技術(shù)效果,能夠改善人體的腸道菌群,改善人體的消化功能,且口感細(xì)膩、爽口,風(fēng)味獨(dú)特,食用方便,同時(shí)具有護(hù)肝的功能,具有廣泛而適用的價(jià)值。本發(fā)明具體提供一種制備番茄紅素駱駝乳含片的乳酸復(fù)合菌,乳酸復(fù)合菌由干酪乳桿菌、屎腸球菌、保加利亞乳桿菌、嗜熱鏈球菌、鼠李糖乳桿菌、嗜酸乳桿菌、植物乳桿菌、雙乙酰鏈球菌和雙歧乳桿菌按照體積比2∶1:4:2:1:4:2:1:0.5混合發(fā)酵制備而成益生菌酸乳,ACE抑制率為57%,獲得質(zhì)地細(xì)膩、口感柔和的益生菌酸奶產(chǎn)品,制備的益生菌酸乳具有顯著的輔助降壓功能。進(jìn)一步,本發(fā)明提供發(fā)酵駱駝乳顆粒的制備方法,具體方法步驟如下:(1)原料選擇與預(yù)處理:采用合格無(wú)抗生素的優(yōu)質(zhì)鮮駱駝乳為原料,并用四層紗布進(jìn)行過(guò)濾。(2)殺菌:將步驟(1)預(yù)處理的駱駝乳經(jīng)過(guò)超高壓物料滅菌。(3)菌種的活化:選用乳酸復(fù)合菌由干酪乳桿菌、屎腸球菌、保加利亞乳桿菌、嗜熱鏈球菌、鼠李糖乳桿菌、嗜酸乳桿菌、植物乳桿菌、雙乙酰鏈球菌和雙歧乳桿菌分別進(jìn)行活化和擴(kuò)大培養(yǎng),按照體積比2∶1:4:2:1:4:2:1:0.5混合使得液體培養(yǎng)基中菌種的數(shù)目達(dá)到105個(gè)/ml,制備獲得復(fù)合發(fā)酵劑。(4)發(fā)酵:將步驟(3)制備獲得的復(fù)合發(fā)酵劑接種到步驟(2)中制備的駱駝乳中,并加入1%的CaCl2進(jìn)行發(fā)酵,使乳的酸度達(dá)到0.2%時(shí)停止發(fā)酵,其中發(fā)酵劑的添加量為0.006%,發(fā)酵溫度30℃,CaCl2的添加量為0.006%。(5)添加凝乳酶:添加凝乳酶并攪拌4-5min,靜置凝乳,攪拌,制備獲得駱發(fā)酵駝乳,其中凝乳酶添加量為0.24g/l。(6)真空冷凍干燥:將步驟(4)制備的發(fā)酵駱駝乳進(jìn)行真空冷凍干燥,并進(jìn)行粉碎,制備獲得發(fā)酵駱駝乳凍干粉,其中真空冷凍干燥的條件為溫度-50℃,真空度20Pa,真空干燥時(shí)間為10小時(shí)。(7)制粒:將步驟(5)制備獲得的發(fā)酵駱駝乳凍干粉進(jìn)行干法制粒,篩取得到1-3mm粒徑的發(fā)酵駱駝乳顆粒。進(jìn)一步,本發(fā)明提供番茄紅素顆粒的制備方法,具體制備方法如下:(1)原料的預(yù)處理:挑選成熟、無(wú)蟲(chóng)蝕的番茄,清洗、去蒂,切塊、打漿,利用離心的方法去除水分獲得番茄醬,其中離心的轉(zhuǎn)速為3000r/min、時(shí)間15min。(2)冷凍干燥:將步驟(1)制備獲得的番茄醬在-20℃的冰箱中預(yù)凍12h,進(jìn)行真空冷凍干燥,真空冷凍干燥的條件為冷凍的溫度為-50℃,真空度為0.081Mpa,干燥時(shí)間24h,制備獲得凍干番茄醬。(3)凍干番茄粉的制備:將步驟(2)中制備的凍干番茄醬進(jìn)行超微粉碎,制備獲得凍干番茄粉。(4)番茄紅素提?。豪贸曒o助法提取番茄紅素,超聲提取的條件是液料比41:1mL/g、超聲溫度55℃、超聲功率18W/g,超聲處理時(shí)間15min,其中所選用的溶劑是2%二氯甲烷的石油醚。(5)粉碎:將步驟(4)提取獲得的番茄紅素進(jìn)行真空冷凍干燥,將冷凍干燥后的凍干番茄紅素粉碎至150目,獲得凍干番茄紅素粉。(6)制粒:將步驟(5)制備獲得的番茄紅素粉進(jìn)行干法制粒,篩取得到1-3mm粒徑的番茄紅素顆粒。本發(fā)明提供番茄紅素駱駝乳含片的制備方法,具體制備方法步驟如下:(1)混合:將上述制備的番茄紅素顆粒和駱駝乳干酪顆粒按照1:1的比例分別裝入分層壓片機(jī)的兩個(gè)不同料斗中進(jìn)行壓片,制備獲得雙層片。(2)透明薄膜包衣的制備:按重量份數(shù),取薄膜包衣劑0.5-1份,分散于2-3份無(wú)水乙醇中,完全溶解后,加入6.0-7.5份蒸餾水,配制成質(zhì)量濃度為5-10%的薄膜包衣液,其中薄膜包衣劑的材料選自O(shè)pardyII、OpardyI、Opardyamb和OpardyXY中的一種或多種。(3)含片的制備:用步驟(2)制備的薄膜包衣液對(duì)步驟(1)制備的雙層片進(jìn)行包衣,吹熱風(fēng)溫度30-40℃,使雙層片增重2-3%,干燥固化即可制備獲得番茄紅素駱駝乳含片。本發(fā)明制備的番茄紅素駱駝乳含片一面為紅色,一面為乳白色的雙層含片,制備的駱駝乳產(chǎn)品不僅保留了駱駝乳和番茄紅素的主要營(yíng)養(yǎng)成分,含有大量的益生菌乳酸菌,能夠改善人體的腸道菌群,改善人體的消化功能,且口感細(xì)膩、爽口,風(fēng)味獨(dú)特,食用方便,同時(shí)具有護(hù)肝的功能。本發(fā)明通過(guò)由體外模擬腸胃實(shí)驗(yàn)及ACE抑制率的測(cè)定結(jié)果,本申請(qǐng)采用的干酪乳桿菌、屎腸球菌、保加利亞乳桿菌、嗜熱鏈球菌、鼠李糖乳桿菌、嗜酸乳桿菌、植物乳桿菌、雙乙酰鏈球菌和雙歧乳桿菌組成的復(fù)合菌制備的益生菌酸乳ACE抑制率高,后期用來(lái)發(fā)酵產(chǎn)酸乳進(jìn)行SHR大鼠血壓的體內(nèi)功能性實(shí)驗(yàn)。結(jié)合分子鑒定及降膽固醇、體外模擬腸胃實(shí)驗(yàn)結(jié)果來(lái)看,我們確定了復(fù)合菌混合發(fā)酵產(chǎn)生的發(fā)酵產(chǎn)物來(lái)進(jìn)行后期應(yīng)用尾動(dòng)脈間接測(cè)壓法進(jìn)行發(fā)酵產(chǎn)物對(duì)SHR大鼠血壓的體內(nèi)功能性實(shí)驗(yàn)。通過(guò)生理生化特性和分子水平鑒定,以及采用市場(chǎng)同類菌種的對(duì)比試驗(yàn)可知,本發(fā)明采用的干酪乳桿菌、屎腸球菌、保加利亞乳桿菌、嗜熱鏈球菌、鼠李糖乳桿菌、嗜酸乳桿菌、植物乳桿菌、雙乙酰鏈球菌和雙歧乳桿菌都為常見(jiàn)菌種,本領(lǐng)域公眾可以通過(guò)公眾渠道購(gòu)買獲得。通過(guò)實(shí)施本發(fā)明具體的
發(fā)明內(nèi)容,可以達(dá)到以下有益效果:(1)本發(fā)明提供的番茄紅素駱駝乳含片中,番茄紅素的提取率為87%,在提取過(guò)程中不使用成分復(fù)雜的試劑,得到的最終產(chǎn)品相對(duì)于現(xiàn)有技術(shù)方法純度高,純度為95%;且在蒸餾濃縮過(guò)程中回收到的有機(jī)溶劑可反復(fù)使用,相對(duì)于傳統(tǒng)方法降低了生產(chǎn)成本。(2)本發(fā)明提供的益生菌酸乳在番茄紅素駱駝乳含片中的應(yīng)用,制備的番茄紅素駱駝乳含片口味酸甜細(xì)滑、營(yíng)養(yǎng)成分有較大提高,其中蛋白質(zhì)有20%左右被水解成為小的分子,發(fā)酵駱駝乳中的脂肪酸的含量增加2倍,營(yíng)養(yǎng)素的利用率得以提高,保留了駱駝乳的全部營(yíng)養(yǎng)成分,制備的番茄紅素駱駝乳含片含有大量的高產(chǎn)ACEI活性的益生菌,能夠改善人體的腸道菌群,改善人體的消化功能,且口感細(xì)膩、爽口,風(fēng)味獨(dú)特,食用方便,同時(shí)具有護(hù)肝的功能,具有廣泛而適用的價(jià)值。(3)本發(fā)明提供的番茄紅素駱駝乳含片具有護(hù)肝的功能,正常肝組織肝小葉結(jié)構(gòu)正常,肝索呈放射狀排列整齊,肝細(xì)胞完整,胞漿著色均勻,細(xì)胞核清晰,中央靜脈及匯管區(qū)清晰可見(jiàn)。給予CCl4后,肝組織嚴(yán)重?fù)p傷,肝細(xì)胞呈點(diǎn)狀或小灶性壞死,肝細(xì)胞內(nèi)的ALT和駱駝乳中的營(yíng)養(yǎng)成分對(duì)對(duì)CCl4誘導(dǎo)小鼠肝損傷具有保護(hù)作用。(4)本發(fā)明制備的番茄紅素駱駝乳含片一面為紅色,一面為乳白色的雙層含片,制備的駱駝乳產(chǎn)品不僅保留了駱駝乳和番茄紅素的主要營(yíng)養(yǎng)成分,含有大量的益生菌乳酸菌,能夠改善人體的腸道菌群,改善人體的消化功能,且口感細(xì)膩、爽口,風(fēng)味獨(dú)特,食用方便,同時(shí)具有護(hù)肝的功能。附圖說(shuō)明圖1顯示為選用九種乳酸菌的膽固醇降解率(%)和ACE抑制率(%)的比較圖。圖2顯示為氯化鈣添加量對(duì)凝乳時(shí)間的影響圖。具體實(shí)施方式下面,舉實(shí)施例說(shuō)明本發(fā)明,但是,本發(fā)明并不限于下述的實(shí)施例。本發(fā)明中設(shè)備和材料主要有:PL601-S型電子天平、DL-1型電子萬(wàn)用爐、北京賽多利斯分析天平、HH-S型水浴鍋、紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)、YX280B手提式不銹鋼蒸汽消毒器、GXZ-2AOA型智能光照培養(yǎng)箱、BCD-249CF型美菱牌冰箱、蘇凈集團(tuán)安泰公司超凈工作臺(tái)、1000ul及200ul、10ul規(guī)格的移液槍、EPS-2A200型核酸電泳儀、C100S型PCR儀、Neofug13R型臺(tái)式高速冷凍離心機(jī)、DZF-6020型真空干燥箱、B3200型超聲波儀、佳尼牌CR125-A-N型宜飲水機(jī)、DZF-6020型真空干燥箱、pHS-25型pH計(jì)。本發(fā)明采用的干酪乳桿菌、屎腸球菌、保加利亞乳桿菌、嗜熱鏈球菌、鼠李糖乳桿菌、嗜酸乳桿菌、植物乳桿菌、雙乙酰鏈球菌和雙歧乳桿菌都為常見(jiàn)菌種,本領(lǐng)域公眾可以通過(guò)公眾渠道購(gòu)買獲得。本發(fā)明中選用的所有試劑和儀器都為本領(lǐng)域熟知選用的,但不限制本發(fā)明的實(shí)施,本發(fā)明中涉及到的%都為重量百分比,除非特別指出除外,其他本領(lǐng)域熟知的一些試劑和設(shè)備都可適用于本發(fā)明以下實(shí)施方式的實(shí)施。實(shí)施例一:本發(fā)明提供發(fā)酵駱駝乳顆粒的具體方法步驟如下:(1)原料選擇與預(yù)處理:采用合格無(wú)抗生素的優(yōu)質(zhì)鮮駱駝乳為原料,并用四層紗布進(jìn)行過(guò)濾。(2)殺菌:將步驟(1)預(yù)處理的駱駝乳經(jīng)過(guò)超高壓物料滅菌。(3)菌種的活化:選用乳酸復(fù)合菌由干酪乳桿菌、屎腸球菌、保加利亞乳桿菌、嗜熱鏈球菌、鼠李糖乳桿菌、嗜酸乳桿菌、植物乳桿菌、雙乙酰鏈球菌和雙歧乳桿菌分別進(jìn)行活化和擴(kuò)大培養(yǎng),按照體積比2∶1:4:2:1:4:2:1:0.5混合使得液體培養(yǎng)基中菌種的數(shù)目達(dá)到105個(gè)/ml,制備獲得復(fù)合發(fā)酵劑。(4)發(fā)酵:將步驟(3)制備獲得的復(fù)合發(fā)酵劑接種到步驟(2)中制備的駱駝乳中,并加入1%的CaCl2進(jìn)行發(fā)酵,使乳的酸度達(dá)到0.2%時(shí)停止發(fā)酵,其中發(fā)酵劑的添加量為0.006%,發(fā)酵溫度30℃,CaCl2的添加量為0.006%。(5)添加凝乳酶:添加凝乳酶并攪拌4-5min,靜置凝乳,攪拌,制備獲得駱發(fā)酵駝乳,其中凝乳酶添加量為0.24g/l。(6)真空冷凍干燥:將步驟(4)制備的發(fā)酵駱駝乳進(jìn)行真空冷凍干燥,并進(jìn)行粉碎,制備獲得發(fā)酵駱駝乳凍干粉,其中真空冷凍干燥的條件為溫度-50℃,真空度20Pa,真空干燥時(shí)間為10小時(shí)。(7)制粒:將步驟(5)制備獲得的發(fā)酵駱駝乳凍干粉進(jìn)行干法制粒,篩取得到1-3mm粒徑的發(fā)酵駱駝乳顆粒。實(shí)施例二:本發(fā)明提供番茄紅素顆粒的具體制備方法如下:(1)原料的預(yù)處理:挑選成熟、無(wú)蟲(chóng)蝕的番茄,清洗、去蒂,切塊、打漿,利用離心的方法去除水分獲得番茄醬,其中離心的轉(zhuǎn)速為3000r/min、時(shí)間15min。(2)冷凍干燥:將步驟(1)制備獲得的番茄醬在-20℃的冰箱中預(yù)凍12h,進(jìn)行真空冷凍干燥,真空冷凍干燥的條件為冷凍的溫度為-50℃,真空度為0.081Mpa,干燥時(shí)間24h,制備獲得凍干番茄醬。(3)凍干番茄粉的制備:將步驟(2)中制備的凍干番茄醬進(jìn)行超微粉碎,制備獲得凍干番茄粉。(4)番茄紅素提?。豪贸曒o助法提取番茄紅素,超聲提取的條件是液料比41:1mL/g、超聲溫度55℃、超聲功率18W/g,超聲處理時(shí)間15min,其中所選用的溶劑是2%二氯甲烷的石油醚。(5)粉碎:將步驟(4)提取獲得的番茄紅素進(jìn)行真空冷凍干燥,將冷凍干燥后的凍干番茄紅素粉碎至150目,獲得凍干番茄紅素粉。(6)制粒:將步驟(5)制備獲得的番茄紅素粉進(jìn)行干法制粒,篩取得到1-3mm粒徑的番茄紅素顆粒。實(shí)施例三:本發(fā)明提供番茄紅素駱駝乳含片的具體制備方法步驟如下:(1)混合:將上述制備的番茄紅素顆粒和駱駝乳干酪顆粒按照1:1的比例分別裝入分層壓片機(jī)的兩個(gè)不同料斗中進(jìn)行壓片,制備獲得雙層片。(2)透明薄膜包衣的制備:按重量份數(shù),取薄膜包衣劑0.5-1份,分散于2-3份無(wú)水乙醇中,完全溶解后,加入6.0-7.5份蒸餾水,配制成質(zhì)量濃度為5-10%的薄膜包衣液,其中薄膜包衣劑的材料選自O(shè)pardyII、OpardyI、Opardyamb和OpardyXY中的一種或多種。(3)含片的制備:用步驟(2)制備的薄膜包衣液對(duì)步驟(1)制備的雙層片進(jìn)行包衣,吹熱風(fēng)溫度30-40℃,使雙層片增重2-3%,干燥固化即可制備獲得番茄紅素駱駝乳含片。本發(fā)明制備的番茄紅素駱駝乳含片一面為紅色,一面為乳白色的雙層含片,制備的駱駝乳產(chǎn)品不僅保留了駱駝乳和番茄紅素的主要營(yíng)養(yǎng)成分,含有大量的益生菌乳酸菌,能夠改善人體的腸道菌群,改善人體的消化功能,且口感細(xì)膩、爽口,風(fēng)味獨(dú)特,食用方便,同時(shí)具有護(hù)肝的功能。本發(fā)明通過(guò)由體外模擬腸胃實(shí)驗(yàn)及ACE抑制率的測(cè)定結(jié)果,本申請(qǐng)采用的干酪乳桿菌、屎腸球菌、保加利亞乳桿菌、嗜熱鏈球菌、鼠李糖乳桿菌、嗜酸乳桿菌、植物乳桿菌、雙乙酰鏈球菌和雙歧乳桿菌組成的復(fù)合菌制備的益生菌酸乳ACE抑制率高,后期用來(lái)發(fā)酵產(chǎn)酸乳進(jìn)行SHR大鼠血壓的體內(nèi)功能性實(shí)驗(yàn)。結(jié)合分子鑒定及降膽固醇、體外模擬腸胃實(shí)驗(yàn)結(jié)果來(lái)看,我們確定了復(fù)合菌混合發(fā)酵產(chǎn)生的發(fā)酵產(chǎn)物來(lái)進(jìn)行后期應(yīng)用尾動(dòng)脈間接測(cè)壓法進(jìn)行發(fā)酵產(chǎn)物對(duì)SHR大鼠血壓的體內(nèi)功能性實(shí)驗(yàn)。實(shí)施例四:番茄紅素顆粒的制備番茄紅素顆粒的具體制備方法:(1)原料的預(yù)處理:挑選成熟、無(wú)蟲(chóng)蝕的番茄,清洗、去蒂,切塊、打漿,利用離心的方法去除水分獲得番茄醬,其中離心的轉(zhuǎn)速為3000r/min、時(shí)間15min。(2)冷凍干燥:將步驟(1)制備獲得的番茄醬在-20℃的冰箱中預(yù)凍12h,進(jìn)行真空冷凍干燥,真空冷凍干燥的條件為冷凍的溫度為-50℃,真空度為0.081Mpa,干燥時(shí)間24h,制備獲得凍干番茄醬。(3)凍干番茄粉的制備:將步驟(2)中制備的凍干番茄醬進(jìn)行超微粉碎,制備獲得凍干番茄粉。(4)番茄紅素提取:利用超聲輔助法提取番茄紅素,超聲提取的條件是液料比41:1mL/g、超聲溫度55℃、超聲功率18W/g,超聲處理時(shí)間15min,其中所選用的溶劑是2%二氯甲烷的石油醚。(5)粉碎:將步驟(4)提取獲得的番茄紅素進(jìn)行真空冷凍干燥,將冷凍干燥后的凍干番茄紅素粉碎至150目,獲得凍干番茄紅素粉。(6)制粒:將步驟(5)制備獲得的番茄紅素粉進(jìn)行干法制粒,篩取得到1-3mm粒徑的番茄紅素顆粒。本發(fā)明利用超聲波提取技術(shù)提取番茄紅素,超聲的作用加了快提取過(guò)程滲透溶解和擴(kuò)散的速度,縮短了提取時(shí)間;提取過(guò)程無(wú)須加熱,適用于番茄紅素?zé)崦粑镔|(zhì);同時(shí),本發(fā)明采用真空冷凍干燥技術(shù)對(duì)番茄紅素進(jìn)行干燥,能夠最大程度的保留番茄紅素中的活性成分,保證活性成分不受到破壞。同時(shí),由于嚴(yán)格控制提取番茄紅素時(shí)超聲的條件,因此能夠充分將番茄中的番茄紅素提取出來(lái),本發(fā)明提供提取番茄紅素的方法的提取率為87%;在提取過(guò)程中不使用成分復(fù)雜的試劑,得到的最終產(chǎn)品相對(duì)于現(xiàn)有技術(shù)方法純度高,純度為95%;且在蒸餾濃縮過(guò)程中回收到的有機(jī)溶劑可反復(fù)使用,相對(duì)于傳統(tǒng)方法降低了生產(chǎn)成本。實(shí)施例五:發(fā)酵駱駝乳顆粒的制備(1)原料選擇與預(yù)處理:采用合格無(wú)抗生素的優(yōu)質(zhì)鮮駱駝乳為原料,并用四層紗布進(jìn)行過(guò)濾。(2)殺菌:將步驟(1)預(yù)處理的駱駝乳在50℃條件下進(jìn)行超高壓滅菌,并降溫到30℃。(3)菌種的活化:選用乳酸復(fù)合菌由干酪乳桿菌、屎腸球菌、保加利亞乳桿菌、嗜熱鏈球菌、鼠李糖乳桿菌、嗜酸乳桿菌、植物乳桿菌、雙乙酰鏈球菌和雙歧乳桿菌分別進(jìn)行活化和擴(kuò)大培養(yǎng),按照體積比2∶1:4:2:1:4:2:1:0.5混合使得液體培養(yǎng)基中菌種的數(shù)目達(dá)到105個(gè)/ml,制備獲得復(fù)合發(fā)酵劑。(4)發(fā)酵:將步驟(3)制備獲得的發(fā)酵劑接種到步驟(2)中制備的駱駝乳中,并加入1%的CaCl2進(jìn)行發(fā)酵,使乳的酸度達(dá)到0.2%時(shí)停止發(fā)酵,其中發(fā)酵劑的添加量為0.006%,發(fā)酵溫度30℃,CaCl2的添加量為0.006%。(4)添加凝乳酶:添加凝乳酶并攪拌4-5min,靜置凝乳,攪拌,制備獲得駱發(fā)酵駝乳,其中凝乳酶添加量為0.24g/l。(5)真空冷凍干燥:將步驟(4)制備的發(fā)酵駱駝乳進(jìn)行真空冷凍干燥,并進(jìn)行粉碎,制備獲得發(fā)酵駱駝乳凍干粉,其中真空冷凍干燥的條件為溫度-50℃,真空度20Pa,真空干燥時(shí)間為10小時(shí)。(6)制粒:將步驟(5)制備獲得的發(fā)酵駱駝乳凍干粉進(jìn)行干法制粒,篩取得到1-3mm粒徑的發(fā)酵駱駝乳顆粒。發(fā)酵劑最主要的功能是將乳中的乳糖轉(zhuǎn)化為乳酸。乳酸不僅能使pH降低;也能使不溶性的鈣鹽轉(zhuǎn)變?yōu)榭扇苄缘拟}鹽,形成凝塊應(yīng)有的硬度和質(zhì)地。發(fā)酵劑的另一功能是抑制一些未被殺死的細(xì)菌或后污染細(xì)菌的生長(zhǎng)。這些細(xì)菌有的需要乳糖,有的不耐酸,從而受到抑制。為了使干酪在成熟期間能獲得預(yù)期的效果,達(dá)到正常的成熟,發(fā)酵劑的添加量應(yīng)加以控制,使其在干酪中緩慢生長(zhǎng),產(chǎn)生后階段需要的乳酸。同時(shí),制備的發(fā)酵駱駝乳口味酸甜細(xì)滑、營(yíng)養(yǎng)成分有較大提高,其中蛋白質(zhì)有20%左右被水解成為小的分子,發(fā)酵駱駝乳中的脂肪酸的含量增加2倍,營(yíng)養(yǎng)素的利用率得以提高,保留了駱駝乳的全部營(yíng)養(yǎng)成分,發(fā)酵駱駝乳顆粒還產(chǎn)生人體營(yíng)養(yǎng)所必須的多種維生素,如VB1、VB2、VB6、VB12等。實(shí)施例六:駱駝乳含片的制備(1)混合:將上述實(shí)施例二、四制備的番茄紅素顆粒和實(shí)施例一、五制備的駱駝乳干酪顆粒按照1:1的比例分別裝入分層壓片機(jī)的兩個(gè)不同料斗中進(jìn)行壓片,制備獲得雙層片。(2)透明薄膜包衣的制備:按重量份數(shù),取薄膜包衣劑0.5-1份,分散于2-3份無(wú)水乙醇中,完全溶解后,加入6.0-7.5份蒸餾水,配制成質(zhì)量濃度為5-10%的薄膜包衣液,其中薄膜包衣劑的材料選自O(shè)pardyII、OpardyI、Opardyamb和OpardyXY中的一種或多種。(3)含片的制備:用步驟(2)制備的薄膜包衣液對(duì)步驟(1)制備的雙層片進(jìn)行包衣,吹熱風(fēng)溫度30-40℃,使雙層片增重2-3%,干燥固化即可制備獲得含片。經(jīng)上述制備的番茄紅素駱駝乳含片一面為紅色,一面為乳白色的雙層含片,制備的駱駝乳產(chǎn)品不僅保留了駱駝乳和番茄紅素的主要營(yíng)養(yǎng)成分,含有大量的益生菌乳酸菌,能夠改善人體的腸道菌群,改善人體的消化功能,且口感細(xì)膩、爽口,風(fēng)味獨(dú)特,食用方便,同時(shí)具有護(hù)肝的功能。實(shí)施例七:制備發(fā)酵駱駝乳顆粒的實(shí)驗(yàn)研究實(shí)驗(yàn)過(guò)程1、發(fā)酵劑添加量的確定駝乳進(jìn)行超高壓滅菌,其中發(fā)酵溫度35℃,凝乳酶的添加量是0.2g/L;CaCl2的添加量是0.1g/L的條件下,分別添加不同劑量的發(fā)酵劑(0.002、0.004、0.006、0.008、0.010%)進(jìn)行發(fā)酵,結(jié)合發(fā)酵劑不同添加量下的發(fā)酵時(shí)間和凝乳狀態(tài),確定發(fā)酵劑最佳添加量。2、CaCl2添加量的確定駝乳進(jìn)行超高壓滅菌,其中發(fā)酵溫度35℃,發(fā)酵劑添加量是0.006%,凝乳酶的添加量是0.2g/l的條件下,測(cè)定在不同CaCl2添加量(0.06、0.08、0.1、0.12、0.14g/L)條件下凝乳酶的凝乳時(shí)間和凝乳狀態(tài),確定CaCl2的最佳添加量。3、凝乳酶添加量的確定駝乳進(jìn)行超高壓滅菌,其中發(fā)酵溫度35℃,發(fā)酵劑添加量是0.006%,CaCl2添加量是0.1%的條件下,分別添加不同劑量的凝乳酶(0.16、0.2、0.24、0.28、0.32g/L),測(cè)定凝乳時(shí)間及凝乳狀態(tài),確定凝乳酶的最佳添加量。4、正交試驗(yàn)結(jié)合單因素試驗(yàn)結(jié)果,以發(fā)酵劑、CaCl2、凝乳酶為因素,采用L9(33)正交試驗(yàn),以出品率結(jié)合感官得分為指標(biāo),篩選最佳工藝條件,因素水平如表1。表1:正交試驗(yàn)因素水平表實(shí)驗(yàn)結(jié)果1、發(fā)酵劑添加量的確定發(fā)酵劑添加量為0.002%時(shí),駝乳凝乳差;隨發(fā)酵劑添加量的增大,發(fā)酵速度加快,產(chǎn)生乳酸增多,凝乳時(shí)間隨之縮短;發(fā)酵劑添加量為0.06g/L時(shí),凝乳風(fēng)味較好,且濃厚相宜。2、CaCl2添加量的確定當(dāng)CaCl2添加量在0.01~0.05(g/L)之間時(shí),凝乳時(shí)間總體上看隨CaCl2添加量的增大而縮短,其中CaCl2添加量為0.03g/L時(shí),駝乳凝乳時(shí)間較短,此時(shí)凝乳酶活力較高,參見(jiàn)附圖1,這是由于鈣離子通過(guò)與酪蛋白結(jié)合而減弱膠束表面電荷,導(dǎo)致靜電排斥力變小,促進(jìn)酪蛋白的凝聚。CaCl2添加量為0.05g/L時(shí),凝乳酶活力也較高,但與0.03g/L相比,差異不顯著。3、CaCl2添加量的確定在相同的凝乳時(shí)間內(nèi),隨著氯化鈣添加量的增加凝乳質(zhì)地越來(lái)越好。但當(dāng)它的添加量不足時(shí)凝乳速度變慢;當(dāng)鈣的添加量過(guò)多、凝乳快,質(zhì)地硬,甚至還有苦味產(chǎn)生。結(jié)合凝乳時(shí)間對(duì)凝乳質(zhì)地的影響,以0.03%的添加量較為適中。結(jié)論綜上所述,綜合考慮,得出駝乳發(fā)酵加工工藝的最優(yōu)條件為凝乳溫度35℃、CaCl2添加量0.03g/L。發(fā)酵劑的添加量為0.006%,驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)制得的發(fā)酵駝乳的質(zhì)地細(xì)膩,硬度適宜,感官較好。實(shí)施例八:番茄紅素駱駝乳含片對(duì)化學(xué)性肝損傷保護(hù)作用的實(shí)驗(yàn)研究(1)實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)動(dòng)物選擇SPF級(jí)健康成年雄性小鼠50只,體重18-22g,實(shí)驗(yàn)設(shè)3個(gè)組,本發(fā)明實(shí)施例五制備的乳酸菌的含片組、空白對(duì)照組和模型對(duì)照組。用CC14(分析純)造成肝損傷模型,小鼠CCl4灌胃濃度為1%,以食用植物油稀釋,灌胃量0.05ml/10g。(2)實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)動(dòng)物每日經(jīng)口灌胃給予設(shè)定劑量受試樣品,空白對(duì)照組和模型對(duì)照組給予蒸餾水。將動(dòng)物每周稱重2次,以調(diào)整受試樣品劑量。于實(shí)驗(yàn)第30天將各組動(dòng)物隔夜禁食16h,模型組及樣品組1次灌胃給予CC14空白對(duì)照組給植物油,受試組繼續(xù)給予受試樣品至實(shí)驗(yàn)結(jié)束(與CC14灌胃間隔4h以上)。給予CC14后24h處死動(dòng)物,取血,以3000r/min離心15min,取上清液測(cè)定血清中的丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶(ALT)和天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶(AST)的含量。肝臟病理組織學(xué)檢查:取小鼠肝臟左葉用10%甲醛固定,從肝左葉中部做橫切面取材,常規(guī)病理制片,石蠟包埋,蘇木素-伊紅(HE)染色,在光學(xué)顯微鏡下對(duì)小鼠肝臟病理改變和損傷程度進(jìn)行分級(jí)評(píng)分。(3)實(shí)驗(yàn)結(jié)果駱駝乳對(duì)小鼠體重的影響:樣品劑量組與對(duì)照組相比,體重變化均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。駱駝乳對(duì)CCl4所致急性化學(xué)性肝損傷小鼠血清轉(zhuǎn)氨酶的影響與空白對(duì)照組比較,模型組小鼠血清ALT和AST水平顯著升高(P<0.01),說(shuō)明模型建立成功;與模型組比較,駱駝乳中和高劑量均能顯著降低肝損傷小鼠血清中的ALT和AST含量(P<0.01),結(jié)果見(jiàn)表2。表2:駱駝乳對(duì)CCl4致急性化學(xué)性肝損傷小鼠血清ALT和AST活性的影響(x±s)組別ALT(IU/L-1)AST(IU/L-1)空白對(duì)照組53.52±11.95*94.54±7.67*本發(fā)明番茄紅素駱駝乳含片組2410.42±1048.23910.07±635.84高劑量組182.04±106.64*218.03±129.41*注:與模型組比較,*P<0.01;n=10。駱駝乳肝臟病理組織學(xué)評(píng)分結(jié)果:模型組肝臟組織學(xué)病理評(píng)分高于空白對(duì)照組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)證明模型建立成功。駝乳劑量組肝臟組織學(xué)病理評(píng)分與模型組比降低,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),見(jiàn)表3。表3:駱駝乳含片肝臟病理組織學(xué)評(píng)分結(jié)果(x±s)病理組織學(xué)檢查取小鼠肝組織常規(guī)制片,HE染色,光學(xué)顯微鏡檢查??瞻讓?duì)照組肝小葉結(jié)構(gòu)正常,肝細(xì)胞形態(tài)正常,肝細(xì)胞核清晰,著色均勻,未出現(xiàn)肝細(xì)胞壞死、變性、腫脹及其他異常改變。模型組動(dòng)物肝細(xì)胞每視野下可見(jiàn)多處大片壞死,肝小葉結(jié)構(gòu)紊亂,胞核大小不一,形態(tài)異常,可見(jiàn)大量細(xì)胞核濃縮和破碎。本發(fā)明制備的番茄紅素駱駝乳含片組肝小葉基本完整,肝細(xì)胞核形態(tài)基本接近正常,胞漿染色較均勻,未見(jiàn)明顯肝細(xì)胞壞死、變性。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:正常肝組織肝小葉結(jié)構(gòu)正常,肝索呈放射狀排列整齊,肝細(xì)胞完整,胞漿著色均勻,細(xì)胞核清晰,中央靜脈及匯管區(qū)清晰可見(jiàn)。給予CCl4后,肝組織嚴(yán)重?fù)p傷,肝細(xì)胞呈點(diǎn)狀或小灶性壞死,肝細(xì)胞內(nèi)的ALT和駱駝乳中的營(yíng)養(yǎng)成分與其對(duì)CCl4誘導(dǎo)小鼠肝損傷的保護(hù)作用有密切聯(lián)系實(shí)施例九:乳酸菌ACE抑制活性的測(cè)定選用干酪乳桿菌的代號(hào)為KS-3-a、屎腸球菌的代號(hào)為KS-4-d、保加利亞乳桿菌的代號(hào)為KS-5-b、嗜熱鏈球菌的代號(hào)為HT-b、鼠李糖乳桿菌的代號(hào)為HT-e、嗜酸乳桿菌的代號(hào)為HT-f、植物乳桿菌的代號(hào)為ALT-1-a、雙乙酰鏈球菌的代號(hào)為ALT-2和雙歧乳桿菌的代號(hào)為ALT-2-c。ACE抑制活性的測(cè)定ACE抑制率的測(cè)定采用Cushman和Cheung的方法,紫外分光光度計(jì)測(cè)定228nm處的OD值。ACE的抑制率(%)=[(B-A)/(B-C)]*100%A:含發(fā)酵乳乳清和ACE溶液的吸光度B:不含發(fā)酵乳乳清,但含ACE溶液的吸光度C:蒸餾水,不含ACE溶液的吸光度ACE抑制活性的測(cè)定方法:通過(guò)制備發(fā)酵乳上清液80ul,將250ul的馬尿酸溶液和80ul的乳清混合,37℃,靜置5min,加入20ulACE溶液(活力0.1u/ml),37℃,靜置30min,加入250ul1mol/l的鹽酸終止反應(yīng),加1.7ml乙酸乙酯,振蕩混勻15s,靜止15min,吸取1ml乙酸乙酯,90-100℃烘干,加一定量的滅菌蒸餾水,228nm處測(cè)吸光度。將選用的九種乳酸菌用10%的脫脂乳在37℃的條件下,培養(yǎng)20h。如此,反復(fù)活化3次。對(duì)乳酸菌ACE抑制活性的測(cè)定,是在發(fā)酵培養(yǎng)時(shí)乳酸菌生長(zhǎng)的對(duì)數(shù)期和穩(wěn)定期的前一時(shí)段(大約在5h-15h之間)。每隔兩小時(shí)測(cè)一次乳酸菌ACE抑制活性。發(fā)酵乳清的制備10%的脫脂乳分裝在試管中,在90℃下滅菌15min。殺菌后冷卻到37℃,無(wú)菌條件下,以4%的量接種乳酸菌菌種,37℃恒溫培養(yǎng)24h。如此在10%的脫脂乳上將乳酸菌菌種活化3代。活化后的乳酸菌以4%接種量接種到10%的脫脂乳中,37℃恒溫發(fā)酵培養(yǎng)。分別取發(fā)酵5h,7h,9h,11h,13h,15h后樣品2mL,8000r/min,4℃,離心15min。收集上清液,再用5mol/L的NaOH溶液將pH值調(diào)節(jié)到8.3,8000r/min,4℃,離心15min。收集上清液,測(cè)定ACE抑制率。ACE抑制率的測(cè)定方法ACE抑制率的測(cè)定是利用Cushman和Cheung的方法。根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求,實(shí)驗(yàn)方法稍作改動(dòng)。具體方法如下:10mL試管中加入250μL的5mmol馬尿酸溶液(用0.3mol/LNaOH的0.1mol/L硼酸鹽緩沖液pH8.3,將馬尿酸固體配成5mmol馬尿酸溶液)和80μL的發(fā)酵乳上清液,在37℃下放置5min。再加入20μL的ACE溶液(0.1U/mL),在37℃反應(yīng)30min。之后加入250μL的1mol/L的HCl溶液終止反應(yīng)。再加入1.7mL的乙酸乙酯,15s充分振蕩混勻,靜置10min。用移液管吸取1mL的乙酸乙酯,在真空干燥箱中90-100℃干燥30min左右。加入一定量的蒸餾水,混勻。用紫外分光光度計(jì)在228nm處測(cè)其吸光度(實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次)。ACE抑制率的計(jì)算:A:含發(fā)酵乳乳清和ACE溶液的吸光度B:不含發(fā)酵乳乳清樣品,但含有ACE溶液的吸光度C:蒸餾水,不含ACE溶液的吸光度(空白對(duì)照)測(cè)定結(jié)果如下:在對(duì)上述9株乳酸菌用10%的脫脂乳連續(xù)發(fā)酵20h,分別在1h,3h,5h,7h,9h,11h,13h,15h,17h,19h測(cè)其ACE抑制率。發(fā)現(xiàn),各菌株的ACE抑制率隨發(fā)酵時(shí)間的延長(zhǎng)不斷變化,其變化趨勢(shì)是ACE抑制率先是由低逐漸升高,到達(dá)一定值后又逐漸下降。而且所測(cè)乳酸菌ACE抑制活性最好時(shí),大都出現(xiàn)在發(fā)酵培養(yǎng)了7h-13h之間。因此,在后兩次的ACE抑制活性測(cè)定中,選擇了5h-15h發(fā)酵培養(yǎng)的時(shí)間段。膽固醇降解率的測(cè)定:用硫酸鐵銨方法測(cè)定,紫外分光光度計(jì)測(cè)定560nm處的OD值。(2ml無(wú)水乙醇和2ml硫酸鐵銨顯色液作為空白對(duì)照調(diào)零)降解率(%)=[(B-A)/B]*100%A:含乳酸菌的MRS膽固醇發(fā)酵液在560nm處的吸光值。B:不含乳酸菌的MRS膽固醇發(fā)酵液在560nm處的吸光值膽固醇降解率的測(cè)定方法:制備乳酸菌發(fā)酵液,,4%的量接種在MRS膽固醇液體培養(yǎng)基上,37℃,培養(yǎng)48h,吸取一定量乳酸菌用無(wú)水乙醇稀釋10倍,4℃,4000r/min,15min離心,吸取上清夜2ml,沿壁緩慢加入2ml硫酸鐵銨顯色液,振蕩混勻,冷卻20min,30min內(nèi)在560nm處測(cè)其吸光度。由附圖1可以說(shuō)明,乳酸菌的膽固醇降解率與ACE抑制率不是成正比關(guān)系的。3株KS菌和3株ALT菌明顯表現(xiàn)出菌種的ACE抑制率較高,而膽固醇降解率相對(duì)較低。從3株HT菌可以看出,菌種的膽固醇降解率較高,而ACE抑制率相對(duì)偏低。綜上可見(jiàn),本發(fā)明提供的番茄紅素駱駝乳含片具有顯著降膽固醇率高的活性,采用復(fù)合菌具有高產(chǎn)ACEI活性的益生菌,制備的番茄紅素駱駝乳含片含有大量的益生菌乳酸菌,能夠改善人體的腸道菌群,改善人體的消化功能,且口感細(xì)膩、爽口,風(fēng)味獨(dú)特,食用方便,同時(shí)具有護(hù)肝的功能,具有廣泛而適用的價(jià)值。表4:選用九種乳酸菌的ACE抑制率(%)、蛋白質(zhì)水解能力關(guān)系菌株ACE抑制率(%)膽固醇降解率(%)蛋白質(zhì)水解能力A140KS-3-a71.2144.750.365KS-4-d55.4439.670.412KS-5-b69.1833.890.364HT-b48.3356.920.402HT-e50.1862.800.492HT-f52.9148.960.473ALT-1-a61.7027.560.305ALT-255.0534.960.385ALT-2-b71.4329.130.390上述實(shí)施例僅僅是為清楚地說(shuō)明本發(fā)明所作的舉例,而并非對(duì)實(shí)施方式的限定。對(duì)于所屬領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來(lái)說(shuō),在上述說(shuō)明的基礎(chǔ)上還可以做出其它不同形式的變化或變動(dòng)。這里無(wú)需也無(wú)法對(duì)所有的實(shí)施方式予以窮舉。而由此所延伸出的顯而易見(jiàn)的變化或變動(dòng)仍處于本發(fā)明的保護(hù)范圍之中。當(dāng)前第1頁(yè)1 2 3 
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