大腸菌群選擇性顯色培養(yǎng)基及其檢測試紙的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明提供一種大腸菌群選擇性顯色培養(yǎng)基，其中每1000mL培養(yǎng)基含有如下重量的組分：結(jié)晶紫中性紅膽鹽瓊脂15-25g、特異性酶顯色底物5-25g、二甲基甲酰胺0.05-20g、酵母粉1-5g、乳糖1-8g、氯化鈉5-10g、磷酸氫二鉀3-5g、磷酸二氫鉀0.5-2g、月桂基硫酸鈉0.1-0.3g。本發(fā)明還提供了一種含有所述大腸菌群選擇性顯色培養(yǎng)基的檢測試紙。本發(fā)明采用兩種特異性酶顯色底物進行復(fù)配使用，其對于大腸菌群的特異性和敏感度較單獨使用任何一種顯色底物顯著增強，且檢出率高、檢出時間短。
【專利說明】大腸菌群選擇性顯色培養(yǎng)基及其檢測試紙

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種適用于大腸菌群的選擇性顯色培養(yǎng)基，以及采用該選擇性顯色培 養(yǎng)基的檢測試紙。

【背景技術(shù)】
[0002] 大腸菌群是指在特定的培養(yǎng)條件下可以發(fā)酵乳糖、并能產(chǎn)酸產(chǎn)氣的一類需氧及兼 性厭氧革蘭氏陰性無芽胞桿菌。大腸菌群數(shù)的高低，表明食品受污染的程度，也反映攝入該 食品對人體健康危害性的大小，所以檢測大腸菌群或大腸桿菌在食品衛(wèi)生學(xué)上具有廣泛意 義，如何簡便、準(zhǔn)確、快速地檢測食品中的大腸菌群，也是國內(nèi)外食品衛(wèi)生工作者共同關(guān)注 的課題，目前關(guān)于檢測大腸菌群的方法有許多，例如多管發(fā)酵法、膜過濾技術(shù)、酶活性檢測 法、紙片法、免疫學(xué)方法（酶聯(lián)免疫吸附試驗和免疫熒光）和分子生物學(xué)方法等。這些方法 都有一定的優(yōu)缺點，比如酶活性檢測法雖然比較省時省力，檢測特異性高，但成本較高；紙 片法比較適用于現(xiàn)場監(jiān)測，節(jié)省了大量物力、人力，但準(zhǔn)確性仍有待提高；PCR (Polymerase Chain React ion)檢測法具有快速、特異、敏感等特點，但對實驗環(huán)境有特殊要求，容易受 一些因素干擾，出現(xiàn)假陽性結(jié)果。
[0003] 法國科瑪嘉公司開發(fā)出了用于大腸菌群檢測的顯色培養(yǎng)基，應(yīng)用較為廣泛，這種 培養(yǎng)基主要是利用微生物種屬特異性酶的特點，在培養(yǎng)基中加入相應(yīng)的酶顯色底物，經(jīng)微 生物生長代謝產(chǎn)生的酶水解后游離出色原物質(zhì)，使培養(yǎng)物顯特定顏色從而直接進行目標(biāo)微 生物篩選鑒別。此后，又陸續(xù)出現(xiàn)了其它一些大腸菌群顯色培養(yǎng)基產(chǎn)品，其中生物梅里埃公 司的Coli ID、RapidE_coli、Chromocultcoliforms等顯色培養(yǎng)基也有較大的市場影響。傳 統(tǒng)微生物檢測法中對目標(biāo)菌進行培養(yǎng)后還需要一系列繁瑣的驗證實驗，而顯色培養(yǎng)基克服 了這一缺點，實現(xiàn)一歩培養(yǎng)直接鑒定，基本能夠滿足對大腸菌群初歩鑒定的需要，所以大腸 菌群檢測顯色培養(yǎng)基的出現(xiàn)在大腸菌群實驗室鑒定技術(shù)中有著重要的意義。作為一項新型 技術(shù)不僅要與國家的發(fā)展水平和該行業(yè)的技術(shù)水平及動態(tài)發(fā)展相協(xié)調(diào)，同時還應(yīng)具有一定 的普及推廣性，一個好的食品微生物檢測技術(shù)必須具備快速、準(zhǔn)確、特異性及靈敏度高、省 時省力和成本低等優(yōu)點，目前市面上常用的顯色培養(yǎng)基檢測產(chǎn)品雖然可能會滿足特異、敏 感等檢測要求，但大多數(shù)顯色培養(yǎng)基產(chǎn)品都來源于國外生物試劑公司，其價格昂貴導(dǎo)致檢 測成本增加以及購買的不便利性使這個新技術(shù)成為食品標(biāo)準(zhǔn)檢測方法的瓶頸，也遏制了國 內(nèi)的一些食品檢測行業(yè)對這一產(chǎn)品的實際需求。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明提供一種大腸菌群選擇性顯色培養(yǎng)基，以及采用該選擇性顯色培養(yǎng)基制作 的檢測試紙，以克服現(xiàn)有技術(shù)存在的上述缺陷。
[0005] 本發(fā)明首先涉及一種大腸菌群選擇性顯色培養(yǎng)基，其中每IOOOmL培養(yǎng)基含有如 下重量的組分：
[0006]

【權(quán)利要求】
1. 一種大腸菌群選擇性顯色培養(yǎng)基，其特征在于，其中每IOOOmL培養(yǎng)基含有如下重量 的組分：
2. 如權(quán)利要求1所述的大腸菌群選擇性顯色培養(yǎng)基，其特征在于，所述特異性酶顯色 底物是4-甲基傘形酮-β -D-半乳糖苷和5-溴-4-氯-3-吲哚-β -D-半乳糖苷的混合物。
3. 如權(quán)利要求2所述的大腸菌群選擇性顯色培養(yǎng)基，其特征在于，所述特異性酶顯色 底物中4-甲基傘形酮-β -D-半乳糖苷和5-溴-4-氯-3-吲哚-β -D-半乳糖苷的重量配 比為 0· 2-1 :1。
4. 如權(quán)利要求2所述的大腸菌群選擇性顯色培養(yǎng)基，其特征在于，所述特異性酶顯色 底物中4-甲基傘形酮-β -D-半乳糖苷和5-溴-4-氯-3-吲哚-β -D-半乳糖苷的重量配 比為 0· 5-0. 6 :1。
5. -種大腸菌群選擇性顯色培養(yǎng)基檢測試紙，其特征在于，其中至少含有一吸附有權(quán) 利要求1-4任一項所述大腸菌群選擇性顯色培養(yǎng)基的吸水濾紙。
【文檔編號】C12R1/19GK104388524SQ201410682129
【公開日】2015年3月4日 申請日期:2014年11月24日 優(yōu)先權(quán)日:2014年11月24日
【發(fā)明者】金京勛 申請人:蘇州嘉禧蘿生物科技有限公司