一種促進(jìn)大鼠神經(jīng)干細(xì)胞分化的培養(yǎng)基及其使用方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種促進(jìn)大鼠神經(jīng)干細(xì)胞分化的培養(yǎng)基及其使用方法。該培養(yǎng)基是在Neurobasal-A?medium中含有B-27?Supplement?without?retinoic?acid，L-Glutamine，F(xiàn)BS，β-NGF，BDNF，RA，維生素E。該培養(yǎng)基不僅成本低，而且關(guān)鍵是解決了現(xiàn)有的神經(jīng)干細(xì)胞分化效率低的問(wèn)題，明顯提高了神經(jīng)干細(xì)胞分化成神經(jīng)元的效率。
【專利說(shuō)明】一種促進(jìn)大鼠神經(jīng)干細(xì)胞分化的培養(yǎng)基及其使用方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于神經(jīng)干細(xì)胞培養(yǎng)分化的【技術(shù)領(lǐng)域】，具體涉及一種促進(jìn)大鼠神經(jīng)干細(xì)胞分化的培養(yǎng)基及其使用方法。
【背景技術(shù)】
[0002]傳統(tǒng)觀點(diǎn)普遍認(rèn)為，中樞神經(jīng)系統(tǒng)的自我修復(fù)能力有限，損傷后的神經(jīng)元將不能再生。盡管如此，全世界的學(xué)者們都在努力試圖挑戰(zhàn)這種傳統(tǒng)的觀念。自從Reynolds和Weiss在20世紀(jì)90年代從小鼠的紋狀體組織中分離、培養(yǎng)出神經(jīng)干細(xì)胞以來(lái)，人們不僅從各類動(dòng)物及人的胚胎，而且從成年動(dòng)物及人的中樞神經(jīng)系統(tǒng)組織內(nèi)分離、培養(yǎng)出了神經(jīng)干細(xì)胞，并且證明其具有很強(qiáng)的增殖及自我更新能力，打破了這一傳統(tǒng)觀念。學(xué)術(shù)界目前將神經(jīng)干細(xì)胞的特性概括描述為一類具有增殖、自我更新和多向分化潛能力的母細(xì)胞，它通過(guò)不對(duì)等的分裂方式進(jìn)行增殖，并且根據(jù)培養(yǎng)條件的不同，可分化出神經(jīng)元、星形膠質(zhì)細(xì)胞和少突膠質(zhì)細(xì)胞等神經(jīng)組織的各類細(xì)胞。
[0003]神經(jīng)干細(xì)胞向神經(jīng)細(xì)胞的分化不僅可以應(yīng)用于臨床治療各種神經(jīng)系統(tǒng)的疾病，如帕金森癥、腦卒中、脊髓病變等；另外也可以作為體外研究哺乳動(dòng)物神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育的模型，不但能獲得均勻大量的細(xì)胞，而且能控制增殖速度和分化方向，易與宿主細(xì)胞形成正常的細(xì)胞聯(lián)系。目前基于神經(jīng)細(xì)胞的替代療法主要有兩類，一類是通過(guò)調(diào)控體內(nèi)神經(jīng)干細(xì)胞的增殖分化來(lái)實(shí)現(xiàn)；另一類是通過(guò)神經(jīng)干細(xì)胞移植來(lái)替代丟失的神經(jīng)組織。大腦損傷后，新生的神經(jīng)元數(shù)量非常少，而且可能不具有功能，不能整合到宿主的大腦環(huán)路中。這時(shí)候可以選擇移植神經(jīng)干細(xì)胞到損傷區(qū)域，使其定向分化成神經(jīng)元，但是，移植的細(xì)胞面臨著同樣的問(wèn)題，那就是神經(jīng)元樣分化、成熟以及如何整合到宿主的神經(jīng)功能網(wǎng)絡(luò)中。因此，如何誘導(dǎo)神經(jīng)干細(xì)胞增生并分化為神經(jīng)元，提高神經(jīng)干細(xì)胞分化成神經(jīng)元的效率成為干細(xì)胞移植前非常關(guān)鍵的基礎(chǔ)。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明的目的是提供一種促進(jìn)大鼠神經(jīng)干細(xì)胞分化的培養(yǎng)基及其使用方法，解決現(xiàn)有的神經(jīng)干細(xì)胞分化效率低的問(wèn)題，提高神經(jīng)干細(xì)胞分化成神經(jīng)元的效率。
[0005]一種促進(jìn)大鼠神經(jīng)干細(xì)胞分化的培養(yǎng)基，是在Neurobasal-A medium中含有
[0006]
【權(quán)利要求】
1.一種促進(jìn)大鼠神經(jīng)干細(xì)胞分化的培養(yǎng)基，其特征在于，是在Neurobasal-A medium中含有
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的促進(jìn)大鼠神經(jīng)干細(xì)胞分化的培養(yǎng)基，其特征在于，是在Neurobasal-A medium 中含有
3.權(quán)利要求1所述的促進(jìn)大鼠神經(jīng)干細(xì)胞分化的培養(yǎng)基的使用方法，其特征在于，初始狀態(tài)的細(xì)胞數(shù)為5Χ 105-2X IO6個(gè)細(xì)胞/ml培養(yǎng)液，37°C、5% CO2條件下進(jìn)行培養(yǎng)，分化培養(yǎng)時(shí)間為5-7天，培養(yǎng)過(guò)程中隔天半量換液。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的促進(jìn)大鼠神經(jīng)干細(xì)胞分化的培養(yǎng)基的使用方法，其特征在于,25cm2培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)基用量為5_6ml。
【文檔編號(hào)】C12N5/0797GK104017771SQ201410288590
【公開日】2014年9月3日 申請(qǐng)日期:2014年6月24日 優(yōu)先權(quán)日:2014年6月24日
【發(fā)明者】李志遠(yuǎn), 鄧思浩, 薛志琴, 賀旭, 鐘小林, 胡杏 申請(qǐng)人:中南大學(xué)