一株利用精氨酸且不積累瓜氨酸的嗜鹽四聯(lián)球菌的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一株利用精氨酸且不積累瓜氨酸的嗜鹽四聯(lián)球菌BBER23（Tetragenococcushalophilus）BBER23，屬于微生物領(lǐng)域。所述嗜鹽四聯(lián)球菌已于2013年10月20日保藏于中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心，中國(guó)武漢，武漢大學(xué)，保藏編號(hào)為CCTCCNO:M2013480。這株嗜鹽四聯(lián)球菌BBER23能夠利用精氨酸，并且不積累瓜氨酸。
【專利說(shuō)明】一株利用精氨酸且不積累瓜氨酸的嗜鹽四聯(lián)球菌
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一株利用精氨酸且不積累瓜氨酸的嗜鹽四聯(lián)球菌，屬于微生物領(lǐng)域?！颈尘凹夹g(shù)】
[0002]氨基甲酸乙酯(Ethyl carbamate, EC)是一種致癌物質(zhì)，主要會(huì)引發(fā)肺癌、肝癌等嚴(yán)重性腫瘤疾病，并且對(duì)人體的免疫系統(tǒng)造成傷害。研究發(fā)現(xiàn)，不僅酒類中含有氨基甲酸乙酯，而且在大豆發(fā)酵制品如醬油中同樣不同程度的含有此類物質(zhì)。
[0003]釀造醬油中氨基甲酸乙酯的主要前體物質(zhì)是瓜氨酸與乙醇。因此降低醬油中瓜氨酸的含量是我們降低醬油中氨基甲酸乙酯有效措施之一。
[0004]在醬油生產(chǎn)中，酵母產(chǎn)生乙醇，一大類厭氧或兼性厭氧的乳酸菌可以把精氨酸通過(guò)精氨酸脫亞氨基途徑(ADI途徑)轉(zhuǎn)化成瓜氨酸。ADI途徑主要由三個(gè)基因控制:arcA基因，arcB基因，arcC基因，具體反應(yīng)如下面的反應(yīng)式所示。
[0005]
【權(quán)利要求】
1.一株利用精氨酸且不積累瓜氨酸的嗜鹽四聯(lián)球菌BBER23(Tetragenococcushalophilus) BBER23,于2013年10月20日保藏于中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心(CCTCC)，中國(guó)武漢，武漢大學(xué)，保藏編號(hào)為CCTCCN0: M2013480。
2.權(quán)利要求1所述的嗜鹽四聯(lián)球菌，其特征在于，將單菌落接入含100g/lNaCl的MRS液體培養(yǎng)基，30°C靜置培養(yǎng)四天，離心去上清獲得菌體，用pH7.0的磷酸鹽緩沖液懸浮菌體；向5mL離心管中加入4mL含5g/L精氨酸的氨基酸檢測(cè)培養(yǎng)基,接種400 μ L的懸浮菌液，接種后0D_為7.8 ;30°C靜置培養(yǎng)5天，精氨酸含量降到0，瓜氨酸積累量為0，鳥氨酸積累。
3.權(quán)利要求1所述的嗜鹽四聯(lián)球菌，其特征在于，將單菌落接入含100g/lNaCl的MRS液體培養(yǎng)基，30°C靜置培養(yǎng)四天，離心去上清獲得菌體，用pH7.0的磷酸鹽緩沖液懸浮菌體；向5mL離心管中加入4mL含3g/L瓜氨酸的氨基酸檢測(cè)培養(yǎng)基，接種400 μ L的懸浮菌液，接種后OD6tltl為7.8 ;30°C靜置培養(yǎng)5天后，瓜氨酸含量降低，鳥氨酸積累。
4.權(quán)利要求1所述的嗜鹽四聯(lián)球菌，其特征在于，將單菌落接入含100g/lNaCl的MRS液體培養(yǎng)基，30°C靜置培養(yǎng)四天，離心去上清獲得菌體，用pH7.0的磷酸鹽緩沖液懸浮菌體；向5mL離心管中加入4mL含3g/L瓜氨酸及5g/L精氨酸的氨基酸檢測(cè)培養(yǎng)基，接種400 μ L的懸浮菌液，接種后的0D_為7.8 ;30°C靜置培養(yǎng)5天，精氨酸、瓜氨酸含量降低，鳥氨酸積累。
5.權(quán)利要求2-4任一所述的嗜鹽四聯(lián)球菌，其特征在于，所述氨基酸檢測(cè)培養(yǎng)基為:酵母膏 5g/L,牛肉膏 5g/L,胰蛋白胨 5g/L, NaC1180g/L,葡萄糖 0.5g/L, Tween_801g/L,MgSO4.7Η200.2g/L，MnSO4.H2O0.05g/L，F(xiàn)eSO40.4g/L，檸檬酸三胺 2g/L，CaCO30.lg/L，吡哆醛-5-磷酸 0.05g/L, K2HP042g/L, ρΗ6.0。
6.權(quán)利要求1所述嗜鹽四聯(lián)球菌應(yīng)用于降低發(fā)酵食品中瓜氨酸的含量。
【文檔編號(hào)】C12N1/20GK103695343SQ201310684008
【公開日】2014年4月2日 申請(qǐng)日期:2013年12月13日 優(yōu)先權(quán)日:2013年12月13日
【發(fā)明者】陳堅(jiān), 方芳, 廖淡宜, 堵國(guó)成, 吳惠玲, 周朝暉, 李鐵橋, 黃早成 申請(qǐng)人:江南大學(xué), 廣東珠江橋生物科技股份有限公司