專利名稱：一種以山牛蒡為原料制備多糖皂甙的方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種多糖皂甙的制備方法，具體講是涉及一種以山牛蒡為原料制備多糖皂甙的方法。
背景技術：
隨著人們生活水平的提高，人們對產品的營養(yǎng)價值、保健及藥用價值的追求也日益豐富，所以安全可靠的植物食品營養(yǎng)攝入的消費市場空間極其巨大。從天然產物山牛蒡中提取的有效成份——多糖、皂甙精細化學品，既可作為醫(yī)藥、保健品原料，可以用于抗疲勞、抗衰老以及健腦的藥品、保健品生產，如山牛蒡多糖及皂甙膠囊、片劑或口服液等；也可應用于美容化妝品行業(yè)，可以配制成祛斑、減少皺紋、活化皮膚細胞、增強皮膚彈性的化妝品；還可以用做高檔食品添加劑，用途廣泛，因此市場前景廣闊。目前，我國山牛蒡產品還僅僅停留在鹽潰、切絲等簡單的初加工水平上，產品附加值不高，嚴重制約了山牛蒡種植業(yè)的發(fā)展。

發(fā)明內容
鑒于現有技術存在的問題，本發(fā)明的目的是要提供一種以山牛蒡為原料，通過生物轉化、多糖皂甙浸提和膜過濾等步驟制備多糖皂甙的方法。為了實現上述目的，本發(fā)明所采用的技術方案是一種以山牛蒡為原料制備多糖的方法，其包括四個階段 ，分別為:原料處理階段、生物轉化及提取階段、分離階段和色譜分離階段；
所述原料處理階段的過程為:
1)將選好的山牛蒡用清水進行清洗；
2)將清洗后的山牛蒡超微粉碎:利用行星球研磨機對山牛蒡進行粉碎，并采用氣流粉碎技術；所述行星球研磨機轉速為27(T280r/min,研磨時間為8(T90min,介質填充率為1(Γ15%，被粉碎物料填充率為1(Γ15% ；
所述生物轉化及提取階段采用酶對處理后的原料進行轉化；采用超聲波水提??；所述生物轉化及提取階段采用酶對處理后的原料進行轉化；采用超聲波水提??；所述超聲波提取的條件為:料液比為1:15，時間為l(T20min，溫度為5(T70°C、功率40(T450W ；
所述分離階段的過程為:
1)、膜過濾，去除雜質；
2)、選用大孔樹脂在pH值為6 7，溫度為3(Γ40條件下進行柱上分離；
所述色譜分離階段其采用工業(yè)色譜進行分離，其以牛蒡苷、牛蒡苷元為測定指標，測定了提取物中牛蒡苷和牛蒡苷元的含量；色譜柱為KromasilC18100A(150mmX4.6mm, 5 μ m)；流動相:甲醇-水(采用梯度洗脫方式:0 7min，35% 45%甲醇；7 9min，45% 48%甲醇；9 15min，48% 53% 甲醇；15 24min，53% 80% 甲醇；24 30min，80% 100% 甲醇)；檢測波長為280nm，牛蒡苷及牛蒡苷元的平均回收率分別為97.7%,96.9% ；RSD分別為1.3%、0.9%(n=5);線性方程分別為:
Y=782.6Χ-64.ll(r=0.9998)，Y=1220.217Χ-35.26 (r=0.9998)。一種以山牛蒡為原料制備皂甙的方法，其過程為其包括四個階段，分別為:原料處理階段、生物轉化及提取階段、分離階段和色譜分離階段；
所述原料處理階段的過程為:
1)挑選好的山牛蒡原料；
2)將選好的山牛蒡用清水進行清洗；
3)將清洗后的山牛蒡超微粉碎:利用行星球研磨機對山牛蒡進行粉碎，并采用氣流粉碎技術；所述行星球研磨機轉速為27(T280r/min,研磨時間為8(T90min,介質填充率為1(Γ15%，被粉碎物料填充率為1(Γ15% ；
所述生物轉化及提取階段采用酶對處理后的原料進行轉化；采用超聲波水提??；所述超聲波提取餓條件為:料液比為1:15，時間為l(T20min，溫度為5(T70°C、功率40(T450W ；所述色譜分離階段其采用工業(yè)色譜進行分離，其以牛蒡苷、牛蒡苷元為測定指標，測定了提取物中牛蒡苷和牛蒡苷元的含量；色譜柱為KromasilC18100A(150mmX4.6mm, 5 μ m)；流動相:甲醇-水(采用梯度洗脫方式:0 7min，35% 45%甲醇；7 9min，45% 48%甲醇；9 15min，48% 53% 甲醇；15 24min，53% 80% 甲醇；24 30min，80% 100% 甲醇)；檢測波長為280nm，牛蒡苷及牛蒡苷元的平均回收率分別為97.7%,96.9%。RSD分別為1.3%、0.9%(n=5);線性方程分別為:
Y=782.6Χ-64.ll(r=0.9998)，Y=1220.217Χ-35.26 (r=0.9998 ；
其特征在于:所述分離階段的過程為:
1)、膜過濾，去除雜質；
2)、選用硅膠、C18、sephedax為填料，在pH值為6 7，溫度為3(Γ40條件下進行柱上分離。本發(fā)明的優(yōu)點在于:選擇使用氣流粉碎技術制成了山牛蒡超細微粉，確定了粉碎技術參數，微粉最小平均粒徑可處理到小于0.2微米；山牛蒡多糖粗分離:利用超聲波水提取法對多糖的提取做了初步研究，有效成份的提取率可以提高約10%，純度達到65%以上；建立了適用于工業(yè)色譜分離山牛蒡皂甙類單體化合物的高效液相檢測方法和薄層的檢測方法，實現對產品進行批量制備。
具體實施例方式實施例1
一種以山牛蒡為原料制備多糖的方法，其包括四個階段，分別為:原料處理階段、生物轉化及提取階段、分離階段和色譜分離階段；
所述原料處理階段的過程為:
3)將選好的山牛蒡用清水進行清洗； 4)將清洗后的山牛蒡超微粉碎:利用行星球研磨機對山牛蒡進行粉碎，并采用氣流粉碎技術；所述行星球研磨機轉速為272r/min,研磨時間為85min,介質填充率為12%,被粉碎物料填充率為13% ；
所述生物轉化及提取階段采用酶對處理后的原料進行轉化；采用超聲波水提??；所述生物轉化及提取階段采用酶對處理后的原料進行轉化；采用超聲波水提??；所述超聲波提取餓條件為:料液比為1:15，時間為15min，溫度為60°C、功率420W ；
所述分離階段的過程為:
3)、膜過濾，去除雜質；
4)、選用大孔樹脂在pH值為6.5，溫度為35條件下進行柱上分離；
所述色譜分離階段其采用工業(yè)色譜進行分離，其以牛蒡苷、牛蒡苷元為測定指標，測定了提取物中牛蒡苷和牛蒡苷元的含量；色譜柱為KromasilC18100A(150mmX4.6mm, 5 μ m)；流動相:甲醇-水(采用梯度洗脫方式:0 7min，35% 45%甲醇；7 9min，45% 48%甲醇；9 15min，48% 53% 甲醇；15 24min，53% 80% 甲醇；24 30min，80% 100% 甲醇)；檢測波長為280nm，牛蒡苷及牛蒡苷元的平均回收率分別為97.7%,96.9% ；RSD分別為1.3%、0.9%(n=5);線性方程分別為:
Y=782.6Χ-64.ll(r=0.9998)，Y=1220.217Χ-35.26 (r=0.9998)。實施例2
一種以山牛蒡為原料制備皂甙的方法，其過程包括四個階段，分別為:原料處理階段、生物轉化及提取階段、分離階段和色譜分離階段；
所述原料處理階段的過程為:
1)挑選好的山牛蒡 原料；
2)將選好的山牛蒡用清水進行清洗；
3)將清洗后的山牛蒡超微粉碎:利用行星球研磨機對山牛蒡進行粉碎，并采用氣流粉碎技術；所述行星球研磨機轉速為272r/min,研磨時間為85min,介質填充率為12%,被粉碎物料填充率為13% ；
所述生物轉化及提取階段采用酶對處理后的原料進行轉化；采用超聲波水提?。凰龀暡ㄌ崛〉臈l件為:料液比為1: 15，時間為18min，溫度為65°C、功率430W;
所述色譜分離階段其采用工業(yè)色譜進行分離，其以牛蒡苷、牛蒡苷元為測定指標，測定了提取物中牛蒡苷和牛蒡苷元的含量；色譜柱為KromasilC18100A(150mmX4.6mm, 5 μ m)；流動相:甲醇-水(采用梯度洗脫方式:0 7min，35% 45%甲醇；7 9min，45% 48%甲醇；9 15min，48% 53% 甲醇；15 24min，53% 80% 甲醇；24 30min，80% 100% 甲醇)；檢測波長為280nm，牛蒡苷及牛蒡苷元的平均回收率分別為97.7%,96.9%。RSD分別為
1.3%、0.9%(n=5);線性方程分別為:
Y=782.6Χ-64.ll(r=0.9998)，Y=1220.217Χ-35.26 (r=0.9998)；
其特征在于:所述分離階段的過程為:
1)、膜過濾，去除雜質；
2)、選用硅膠、C18、s印hedax為填料，在pH值為6.5，溫度為35°C條件下進行柱上分離。
權利要求
1.一種以山牛蒡為原料制備多糖的方法，其包括四個階段，分別為:原料處理階段、生物轉化及提取階段、分離階段和色譜分離階段； 所述原料處理階段的過程為: 1)將選好的山牛蒡用清水進行清洗； 2)將清洗后的山牛蒡超微粉碎:利用行星球研磨機對山牛蒡進行粉碎，并采用氣流粉碎技術；所述行星球研磨機轉速為27(T280r/min,研磨時間為8(T90min,介質填充率為1(Γ15%，被粉碎物料填充率為1(Γ15% ； 所述生物轉化及提取階段采用酶對處理后的原料進行轉化；采用超聲波水提取；所述生物轉化及提取階段采用酶對處理后的原料進行轉化；采用超聲波水提?。凰龀暡ㄌ崛〉臈l件為:料液比為1: 15，時間為l(T20min，溫度為5(T70°C、功率40(T450W ； 所述分離階段的過程為: 1)、膜過濾，去除雜質； 2)、選用大孔樹脂在pH值為6 7，溫度為3(Γ40條件下進行柱上分離； 所述色譜分離階段其采用工業(yè)色譜進行分離，其以牛蒡苷、牛蒡苷元為測定指標，測定了提取物中牛蒡苷和`牛蒡苷元的含量；色譜柱為KromasilC18100A(150mmX4.6mm, 5 μ m)；流動相:甲醇-水(采用梯度洗脫方式:0 7min，35% 45%甲醇；7 9min，45% 48%甲醇；9 15min，48% 53% 甲醇；15 24min，53% 80% 甲醇；24 30min，80% 100% 甲醇)；檢測波長為280nm，牛蒡苷及牛蒡苷元的平均回收率分別為97.7%,96.9% ；RSD分別為1.3%、0.9%(n=5)。
2.一種以山牛蒡為原料制備皂甙`的方法，其過程為其包括四個階段，分別為:原料處理階段、生物轉化及提取階段、分離階段和色譜分離階段； 所述原料處理階段的過程為: 1)挑選好的山牛蒡原料； 2)將選好的山牛蒡用清水進行清洗； 3)將清洗后的山牛蒡超微粉碎:利用行星球研磨機對山牛蒡進行粉碎，并采用氣流粉碎技術；所述行星球研磨機轉速為27(T280r/min,研磨時間為8(T90min,介質填充率為1(Γ15%，被粉碎物料填充率為1(Γ15% ； 所述生物轉化及提取階段采用酶對處理后的原料進行轉化；采用超聲波水提??；所述超聲波提取餓條件為:料液比為1:15，時間為l(T20min，溫度為5(T70°C、功率40(T450W ； 所述色譜分離階段其采用工業(yè)色譜進行分離，其以牛蒡苷、牛蒡苷元為測定指標，測定了提取物中牛蒡苷和牛蒡苷元的含量；色譜柱為KromasilC18100A(150mmX4.6mm, 5 μ m)；流動相:甲醇-水(采用梯度洗脫方式:0 7min，35% 45%甲醇；7 9min，45% 48%甲醇；9 15min，48% 53% 甲醇；15 24min，53% 80% 甲醇；24 30min，80% 100% 甲醇)；檢測波長為280nm，牛蒡苷及牛蒡苷元的平均回收率分別為97.7%,96.9%。RSD分別為`1.3%,0.9%(n=5)； 其特征在于:所述分離階段的過程為: 1)、膜過濾，去除雜質； 2)、選用硅膠、C18、sephedax為填料，在pH值為6 7，溫度為3(Γ40條件下進行柱上分離。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種多糖皂甙的制備方法，具體講是涉及一種以山牛蒡為原料，通過生物轉化、多糖皂甙浸提和膜過濾等步驟制備多糖皂甙的方法，其包括四個階段，分別為原料處理階段、生物轉化及提取階段、分離階段和色譜分離階段；選擇使用氣流粉碎技術制成了山牛蒡超細微粉，確定了粉碎技術參數，微粉最小平均粒徑可處理到小于0.2微米；山牛蒡多糖粗分離利用超聲波水提取法對多糖的提取做了初步研究，有效成份的提取率可以提高約10%，純度達到65%以上；建立了適用于工業(yè)色譜分離山牛蒡皂甙類單體化合物的高效液相檢測方法和薄層的檢測方法，實現對產品進行批量制備。
文檔編號C12P17/04GK103159810SQ20131007249
公開日2013年6月19日 申請日期2013年3月7日 優(yōu)先權日2013年3月7日
發(fā)明者孔淑玲, 趙書軍 申請人:孔淑玲, 趙書軍