專利名稱：便于顆粒細(xì)胞分離培養(yǎng)的試劑盒的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本實(shí)用新型涉及一種試驗(yàn)中使用的試劑盒，具體涉及一種便于顆粒細(xì)胞分離培養(yǎng)的試劑盒。
背景技術(shù)：
卵泡中卵母細(xì)胞四周有一層菱形或扁平細(xì)胞圍繞，在卵泡開始發(fā)育、卵細(xì)胞成長的同時，周圍的菱形細(xì)胞變?yōu)榉叫?，并由單層增生成?fù)層，因其細(xì)胞漿內(nèi)含有顆粒，故稱為顆粒細(xì)胞。顆粒細(xì)胞是生殖研究領(lǐng)域常用的細(xì)胞模型?，F(xiàn)階段在進(jìn)行顆粒細(xì)胞分離培養(yǎng)試驗(yàn)時，試劑的配制和準(zhǔn)備對于實(shí)驗(yàn)人員來說增加了實(shí)驗(yàn)過程中的復(fù)雜性，并且因?yàn)橹谱鲗?shí) 驗(yàn)試劑的過程中熟練程度和認(rèn)知水平的不同，可能配制出的試劑也并不相同，從而最終得到的結(jié)果穩(wěn)定性和可靠性也不同。

實(shí)用新型內(nèi)容本實(shí)用新型為解決在顆粒細(xì)胞分離培養(yǎng)試驗(yàn)的過程中配制和準(zhǔn)備試劑所帶來的實(shí)驗(yàn)過程復(fù)雜化的問題，以及所制備出的試劑本身給實(shí)驗(yàn)結(jié)果帶來的穩(wěn)定性和可靠性不高的缺點(diǎn)，而提出了一種便于顆粒細(xì)胞分離培養(yǎng)的試劑盒。本實(shí)用新型為解決上述技術(shù)問題采取的技術(shù)方案是本實(shí)用新型所述的一種便于顆粒細(xì)胞分離培養(yǎng)的試劑盒包括外包裝盒、銅網(wǎng)和四個試劑瓶，所述銅網(wǎng)和四個試劑瓶均置于外包裝盒內(nèi)，所述四個試劑瓶分別為孕馬血清促性腺激素溶液試劑瓶、HBSS緩沖液試劑瓶、DMEM-F12培養(yǎng)液試劑瓶和PBS緩沖液試劑瓶，外包裝盒內(nèi)的盒底上加工有四個圓形凹槽，所述孕馬血清促性腺激素溶液試劑瓶、HBSS緩沖液試劑瓶、DMEM-F12培養(yǎng)液試劑瓶和PBS緩沖液試劑瓶對應(yīng)裝在四個圓形凹槽中，所述四個試劑瓶的頂蓋均為密封蓋，所述銅網(wǎng)為400目，所述四個試劑瓶均為不透光的棕色瓶。本實(shí)用新型的有益效果是本實(shí)用新型的便于顆粒細(xì)胞分離培養(yǎng)的試劑盒在實(shí)驗(yàn)中試劑能夠快捷、穩(wěn)定地進(jìn)行生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室的動物卵巢顆粒細(xì)胞分離培養(yǎng)試驗(yàn)；本實(shí)用新型較傳統(tǒng)方法有效率高、結(jié)果穩(wěn)定可靠，是一種操作簡便的試劑盒。本實(shí)用新型便于顆粒細(xì)胞分離培養(yǎng)的試劑盒提供標(biāo)準(zhǔn)化的試劑和器材，能夠保證穩(wěn)定的試驗(yàn)結(jié)果。

圖I是本實(shí)用新型的立體圖，圖2是具體實(shí)施方式
一中盒底的俯視圖。
具體實(shí)施方式
具體實(shí)施方式
一如圖I和圖2所示，本實(shí)施方式的便于顆粒細(xì)胞分離培養(yǎng)的試劑盒包括外包裝盒6、銅網(wǎng)5和四個試劑瓶，所述銅網(wǎng)5和四個試劑瓶均置于外包裝盒6內(nèi)，四個試劑瓶分別為孕馬血清促性腺激素溶液試劑瓶I、HBSS緩沖液試劑瓶2、DMEM-F12培養(yǎng)液試劑瓶3和PBS緩沖液試劑瓶4，外包裝盒6內(nèi)的盒底上加工有四個圓形凹槽6-1，所述孕馬血清促性腺激素溶液試劑瓶UHBSS緩沖液試劑瓶2、DMEM-F12培養(yǎng)液試劑瓶3和PBS緩沖液試劑瓶4對應(yīng)裝在四個圓形凹槽6-1中，所述四個試劑瓶的頂蓋均為密封蓋，所述銅網(wǎng)5為400目，所述四個試劑瓶均為不透光的棕色瓶。
具體實(shí)施方式
二如圖I和圖2所示，本實(shí)施方式的外包裝盒6的長度L為15cm，外包裝盒6的寬度W為10cm，外包裝盒6的高度H為15cm。其它組成及連接關(guān)系與具體實(shí)施方式
一相同。便于顆粒細(xì)胞分離培養(yǎng)的試劑盒用于實(shí)驗(yàn)的操作步驟(I)、取21天雌性小鼠注射孕馬血清促性腺激素溶液試劑瓶I中的溶液，48小時后 快速取出卵巢，直接置于預(yù)冷的HBSS緩沖液試劑瓶2中的溶液中降溫。(2)、在實(shí)體顯微鏡下剔除卵巢周圍的脂肪，剝離卵巢被膜組織。(3)、將卵巢置于信的HBSS緩沖液試劑瓶2中的溶液中洗滌2次。(4)、在實(shí)體顯微鏡下用針頭穿刺卵泡，擠出顆粒細(xì)胞。(5)、收集顆粒細(xì)胞，用試劑盒提供的400目銅網(wǎng)5過濾，濾掉卵母細(xì)胞和細(xì)胞膜等雜質(zhì)。(6)、將過濾后的顆粒細(xì)胞放入離心管中，離心時間5分鐘，控制轉(zhuǎn)速1000轉(zhuǎn)/分
鐘，倒掉上清液。(7)、用HBSS緩沖液試劑瓶2中的試劑洗滌細(xì)胞沉淀2次后放入離心管中，離心時間5分鐘，控制轉(zhuǎn)速1000轉(zhuǎn)/分鐘。(8)、收集沉淀的細(xì)胞，添加DMEM-F12培養(yǎng)液試劑瓶3中的培養(yǎng)液，在37°C的溫度下，在5%的二氧化碳濃度條件下進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)，即可獲得顆粒細(xì)胞。
權(quán)利要求1.一種便于顆粒細(xì)胞分離培養(yǎng)的試劑盒，其特征在于所述試劑盒包括外包裝盒(6)、銅網(wǎng)(5)和四個試劑瓶，所述銅網(wǎng)(5)和四個試劑瓶均置于外包裝盒￠)內(nèi)，所述四個試劑瓶分別為孕馬血清促性腺激素溶液試劑瓶(I)、HBSS緩沖液試劑瓶(2)、DMEM-F12培養(yǎng)液試劑瓶(3)和PBS緩沖液試劑瓶(4)，外包裝盒￠)內(nèi)的盒底上加工有四個圓形凹槽￠-1)，所述孕馬血清促性腺激素溶液試劑瓶(I)、HBSS緩沖液試劑瓶(2)、DMEM-F12培養(yǎng)液試劑瓶(3)和PBS緩沖液試劑瓶(4)對應(yīng)裝在四個圓形凹槽￠-1)中，所述四個試劑瓶的頂蓋均為密封蓋，所述銅網(wǎng)(5)為400目，所述四個試劑瓶均為不透光的棕色瓶。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述便于顆粒細(xì)胞分離培養(yǎng)的試劑盒，其特征在于所述外包裝盒(6)的長度(L)為15cm，外包裝盒(6)的寬度(W)為10cm，外包裝盒(6)的高度⑶為15cm。
專利摘要便于顆粒細(xì)胞分離培養(yǎng)的試劑盒，它涉及一種試驗(yàn)中使用的試劑盒。本實(shí)用新型為解決顆粒細(xì)胞分離培養(yǎng)試驗(yàn)的過程中，配制和準(zhǔn)備試劑所帶來的實(shí)驗(yàn)過程復(fù)雜化的問題。銅網(wǎng)和四個試劑瓶均置于外包裝盒內(nèi)，四個試劑瓶分別為孕馬血清促性腺激素溶液試劑瓶、HBSS緩沖液試劑瓶、DMEM-F12培養(yǎng)液試劑瓶和PBS緩沖液試劑瓶，外包裝盒內(nèi)的盒底上加工有四個圓形凹槽，所述孕馬血清促性腺激素溶液試劑瓶、HBSS緩沖液試劑瓶、DMEM-F12培養(yǎng)液試劑瓶和PBS緩沖液試劑瓶對應(yīng)裝在四個圓形凹槽中，所述四個試劑瓶的頂蓋均為密封蓋，所述銅網(wǎng)為400目，所述四個試劑瓶均為不透光的棕色瓶。本實(shí)用新型用于顆粒細(xì)胞分離培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)。
文檔編號C12N5/071GK202465710SQ201220108720

公開日2012年10月3日 申請日期2012年3月21日 優(yōu)先權(quán)日2012年3月21日
發(fā)明者侯曉明, 倪華 申請人:東北農(nóng)業(yè)大學(xué)