專利名稱：一種肥料中多種農(nóng)藥的檢測方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于借助于材料的物理化學(xué)性質(zhì)進(jìn)行測試的領(lǐng)域，具體為一種對肥料中的農(nóng)藥進(jìn)行檢測的方法。
背景技術(shù)：
農(nóng)藥指在農(nóng)業(yè)上用于防治病蟲以及調(diào)節(jié)植物生長、除草等藥劑。植物生長調(diào)節(jié)劑，是用于調(diào)節(jié)植物生長發(fā)育的一類農(nóng)藥，包括人工合成的化合物和從生物中提取的天然植物激素。在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上使用，可有效調(diào)節(jié)作物的生育過程，達(dá)到穩(wěn)產(chǎn)增產(chǎn)、改善品質(zhì)、增強作物抗逆性等目的。殺蟲劑主要用于防治農(nóng)業(yè)害蟲和城市衛(wèi)生害蟲的藥品，在二十世紀(jì)，隨著農(nóng)業(yè)的迅速發(fā)展，殺蟲劑令農(nóng)業(yè)產(chǎn)量大升。但是，幾乎所有殺蟲劑都會嚴(yán)重地改變生態(tài)系統(tǒng)，大部分對人體有害，其它的會被集中在食物鏈中。常用的植物生長調(diào)節(jié)劑和殺蟲劑包括:復(fù)硝酹鈉(Sodium Nitrophenolate),主要含有3個成分,包括:1，2-硝基苯酹鈉,分子式:C6H4NO3Na,分子量:161.09 ;2，4-硝基苯酚鈉，分子式=C6H4NO3Na,分子量:161.09 ;3，5_ 硝基愈創(chuàng)木酚鈉，分子式=C7H6NO4Na,分子量:191.12，為廣譜型植物生長調(diào)節(jié)劑，可加速植株生長發(fā)育、促根壯苗、?；ū９?、提高產(chǎn)量、增強抗逆能力等，既可單獨使用，又可與肥料、農(nóng)藥、飼料等復(fù)配使用。胺鮮酯(DA-6, Diethyl aminoethyl hexanoate),分子式:C12H25NO2 ;分子量:215.33，少量的DA-6可使豆類產(chǎn)量增加60%，甜菜等經(jīng)濟(jì)作物增產(chǎn)50%，DA-6不僅在根本上促進(jìn)植物生長，也可明顯增加果品自然香味和色澤，增強植物抗逆能力。萘乙酸鈉(Sodium a -naphthyl acetate),分子式=C12H9O2Na,生長素類植物調(diào)節(jié)劑，明顯促進(jìn)根系的尖端發(fā)育、誘導(dǎo)開花、防止落花落果、形成無核果實、促進(jìn)早熟、增產(chǎn)等作用。赤霉素(Gibberellic acid)，分子式=C19H22O6 ;分子量:346.37，提高無籽葡萄產(chǎn)量，打破馬鈴薯休目民，當(dāng)晚稻遇陰雨低溫而抽穗遲緩時，用赤霉素處理能促進(jìn)抽穗，或在雜交水稻制種中調(diào)節(jié)花期以使父母本花期相遇等。甜菜堿(Betaine)，分子式C14H9C12;分子量354.49，用于棉花、小麥、水稻、玉米、蕃茄、果樹和各種塊根作物上，抗倒伏，促進(jìn)作物生長，可增產(chǎn)10% 30%,也可使馬鈴薯塊莖增大。阿維菌素(Avermectin),分子式:C48H72O14(Bla);分子量:873.09，對螨類和昆蟲具有胃毒和觸殺作用，主要用于農(nóng)作物、家禽、家畜體內(nèi)外寄生蟲和害蟲，如寄生紅蟲、雙翅目、鞘翅目、鱗翅目和有害螨等。氯吡脲(Forchlorfenuro)，分子式:C12H10ClN3O ;分子量:247.68，可用于西瓜、葡萄、獼猴桃，表現(xiàn)在促進(jìn)莖、葉、根、果生長、促進(jìn)結(jié)果，增加西紅柿、茄子、蘋果等水果和蔬菜的產(chǎn)量。通常來說，按照農(nóng)藥登記批準(zhǔn)標(biāo)簽上標(biāo)明的使用劑量、時期和方法，使用植物生長調(diào)節(jié)劑或殺蟲劑對人體健康不會產(chǎn)生危害。但如果使用上出現(xiàn)不規(guī)范，可能會使作物過快增長，對農(nóng)產(chǎn)品品質(zhì)和口感產(chǎn)生一定影響；更重要的是，對于農(nóng)產(chǎn)品生產(chǎn)來說，植物生長調(diào)節(jié)劑的濫用，會最終危害食品安全。一般來說，肥料中不是不允許添加殺蟲劑、殺菌劑以及植物生長調(diào)節(jié)劑，而是要按照規(guī)范條件生產(chǎn)添加。例如，北京已經(jīng)立法嚴(yán)厲打擊在肥料中非法添加使用農(nóng)藥(包括生長調(diào)節(jié)劑)等行為并加強對農(nóng)藥等物質(zhì)的監(jiān)測，檢測和抽查工作。蔬果從使用調(diào)節(jié)劑到上市出售，會經(jīng)過一段時間的間隔期，其殘留基本測不出來，但是對肥料直接進(jìn)行檢測，結(jié)果會準(zhǔn)確很多。

發(fā)明內(nèi)容
針對現(xiàn)有技術(shù)存在的問題，本發(fā)明的目的是提出一種肥料中多種農(nóng)藥的檢測方法。實現(xiàn)本發(fā)明目的的具體技術(shù)方案為:一種肥料中多種農(nóng)藥的檢測方法，包括步驟:1)將肥料樣品溶解，過濾并取濾液；2)用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法檢測濾液；3)用標(biāo)準(zhǔn)曲線外標(biāo)法檢測肥料樣品中農(nóng)藥的含量。其中，所述多種農(nóng)藥為復(fù)硝酚鈉、胺鮮酯、萘乙酸鈉、赤霉素、甜菜堿、矮壯素、阿維菌素和氯吡脲中的一種或多種。其中,所述溶解是用乙腈水溶液溶解。所述過濾是使用0.2-0.4μηι濾膜過濾。

其中，所述步驟2)中液相色譜的流動相為A:含質(zhì)量比例0.1-0.2%甲酸和4-6mmol/L乙酸銨的水溶液，B:乙腈，柱平衡時間4_6min,流速0.2-0.4mL/min,進(jìn)樣量8-12 μ L。其中，所述步驟2)中液相色譜使用梯度洗脫的方法，梯度洗脫的程序為:
序號時間(min)A ( %)B ( % )
1O60-8020-40
22.5-3.55-2080-95
312.0-13.05-2080-95
413.0-14.060-8020-40
517.5-18 560-8020-40 。優(yōu)選地，所述 梯度洗脫的程序為:
序號時間(min)A (%)B (%)
1O65-7525-35
23.08-1288-92
313.08-1288-92
413.165-7525-35
518.065-7525-35 。A和B的％是體積比例。其中，所述步驟2)中質(zhì)譜檢測使用電噴霧質(zhì)譜檢測，電噴霧電壓為-4000至-5000V 和 +5000 至 +5500V。其中，電噴霧電壓為+5000至+5500V條件下質(zhì)譜檢測的農(nóng)藥為胺鮮酯、甜菜堿、矮壯素、阿維菌素和氯吡脲中的一種或多種(正離子掃描)；電噴霧電壓為-4000至-4500V條件下質(zhì)譜檢測的農(nóng)藥為復(fù)硝酚鈉、萘乙酸鈉、赤霉素中的一種或多種(負(fù)離子掃描)。其中，復(fù)硝酚鈉主要含有3個成分，包括:1，2-硝基苯酚鈉，2，4-硝基苯酚鈉，3，5-硝基愈創(chuàng)木酚鈉。其中，步驟2)中檢測所述濾液中各農(nóng)藥的母離子和子離子對，若其離子色譜峰保留時間與標(biāo)準(zhǔn)工作溶液一致；且濾液(樣品)中目標(biāo)化合物的兩個子離子的相對豐度與濃度相當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)溶液的相對豐度在偏差不超過30%范圍內(nèi)一致，則判斷該樣品中存在該種農(nóng)藥；若上述兩個條件不同時滿足，則判斷不含該種農(nóng)藥。其中，所述步驟3)中標(biāo)準(zhǔn)曲線是用不同濃度的所述農(nóng)藥分別配制為標(biāo)準(zhǔn)溶液，用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法檢測其色譜峰面積而得的標(biāo)準(zhǔn)曲線。即以濃度為橫坐標(biāo)，定量離子對的色譜峰面積為縱坐標(biāo)分別繪制各個農(nóng)藥的標(biāo)準(zhǔn)曲線，采用該曲線以外標(biāo)法分別計算待測肥料樣品中10種農(nóng)藥的含量。本發(fā)明的有益效果在于:本發(fā)明的方法可以對肥料中存在的多種農(nóng)藥同時進(jìn)行定性和定量的測定，包括對植物生長調(diào)節(jié)劑和殺蟲劑的測定，為環(huán)境保護(hù)和食品安全提供了有效的控制檢測手段。本方法對4-硝基苯酚鈉和5-硝基愈創(chuàng)木酚鈉的儀器檢出限可達(dá)到0.01mg/L，萘乙酸鈉可達(dá)
0.025mg/L,2-硝基苯酹鈉和赤霉素可達(dá)0.lmg/L。本方法檢出限低，結(jié)果準(zhǔn)確,可一次檢測多種農(nóng)藥，快捷高效。


圖1為5種農(nóng)藥:胺鮮酯、甜菜堿、矮壯素、阿維菌素和氯吡脲的正離子掃描總離子流色譜圖。圖2-6分別為胺鮮酯、甜菜堿、矮壯素、阿維菌素、氯吡脲的離子對提取色譜圖。圖7為5種農(nóng)藥萘乙酸鈉、赤霉素、I，2-硝基苯酚鈉，2，4-硝基苯酚鈉、3，5-硝基愈創(chuàng)木酚鈉的負(fù)離子掃描總離子流色譜圖。圖8-11分別為4-硝基苯酚鈉、2-硝基苯酚鈉、5_硝基愈創(chuàng)木酚鈉、萘乙酸鈉、赤霉素的離子色譜圖。
具體實施例方式現(xiàn)以以下最佳實施例來說明本發(fā)明，但不用來限制本發(fā)明的范圍。實施例中使用的超聲處理設(shè)備為昆山KQ-200KDE型超聲波儀；固相萃取小柱購自美國菲羅門公司；0.22 μ m濾膜購自天津市津騰實驗設(shè)備有限公司。實施例1:水溶性肥料樣品中農(nóng)藥的檢測1.樣品預(yù)處理將水溶性肥料樣品振蕩混勻，稱取約0.5g樣品于IOOmL容量瓶中，用乙腈/水(50/50, v/v)振蕩溶解、定容，混勻后過0.22 μ m濾膜于進(jìn)樣小瓶中，上LC-MS/MS測定。對于含量超過線性范圍的樣品將定容溶液進(jìn)一步稀釋，以使其含量在儀器線性范圍內(nèi)后再上LC-MS/MS測定和定量。2.LC-MS/MS 測定儀器:Agilent 1200高效液相色譜(美國，安捷倫)-API2000三級四極桿串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用儀(美國，AB SCIEX)，配備電噴霧(ESI)離子源；
色譜柱:AgilentXDB C18，4.6X 150mm，粒徑 5 μ m ;流動相:(A)水(含0.1%甲酸和5mmol/L的乙酸銨)；(B)乙腈；流速:0.3mL/min ；進(jìn)樣量:IOyL;柱溫:室溫(約26°C);柱平衡時間(下一個樣品進(jìn)樣前):5min (正離子掃描)和4min (負(fù)離子掃描)；梯度洗脫程序如表I和表2。表1:實施例1正離子檢測的梯度洗脫程序
權(quán)利要求
1.一種肥料中多種農(nóng)藥的檢測方法，包括步驟: 1)將肥料樣品溶解，過濾并取濾液； 2)用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法檢測濾液； 3)用標(biāo)準(zhǔn)曲線外標(biāo)法檢測肥料樣品中多種農(nóng)藥的含量。
2.按權(quán)利要求1所述的檢測方法，其特征在于，所述多種農(nóng)藥為復(fù)硝酚鈉、胺鮮酯、萘乙酸鈉、赤霉素、甜菜堿、矮壯素、阿維菌素和氯吡脲中的一種或多種。
3.按權(quán)利要求1所述的檢測方法，其特征在于，所述步驟I)中的溶解是用乙腈水溶液溶解。
4.按權(quán)利要求1所述的檢測方法，其特征在于，所述步驟2)中液相色譜中，其流動相為A:含質(zhì)量比例0.1-0.2%甲酸和4-6mmol/L乙酸銨的水溶液，B:乙腈，柱平衡時間4_6min。
5.按權(quán)利要求4所述的檢測方法，其特征在于，所述步驟2)中液相色譜使用梯度洗脫的方法，梯度洗脫的程序為:序號時間(min )A ( %)B ( % )1O60-8020-4022.5-3.55-2080-95312.0-13.05-2080-95413.0-14.060-8020-40517.5-18.560-8020-40 。
6.按權(quán)利要求5所述 的檢測方法，其特征在于，所述梯度洗脫的程序為:序號時間(min)A ( %)B (% )1O65-7525-3523.08-1288-92313.08-1288-92413.165-7525-35518.065-7525-35 。
7.按權(quán)利要求1所述的檢測方法，其特征在于，所述步驟2)中質(zhì)譜檢測使用電噴霧質(zhì)譜檢測，電噴霧電壓為-4000至-5000V和+5000至+5500V。
8.按權(quán)利要求7所述的檢測方法，其特征在于，電噴霧電壓為+5000至+5500V條件下質(zhì)譜檢測的農(nóng)藥為胺鮮酯、甜菜堿、矮壯素、阿維菌素和氯吡脲中的一種或多種；電噴霧電壓為-4000至-4500V條件下質(zhì)譜檢測的農(nóng)藥為復(fù)硝酚鈉、萘乙酸鈉、赤霉素中的一種或多種。
9.按權(quán)利要求1-8任一所述的檢測方法，其特征在于，步驟2)中檢測所述濾液中各農(nóng)藥的母離子和子離子對，若其離子色譜峰保留時間與標(biāo)準(zhǔn)工作溶液一致；且目標(biāo)化合物的兩個子離子的相對豐度與濃度相當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)溶液的相對豐度在偏差不超過30%范圍內(nèi)一致，則判斷其中存在該種植物生長調(diào)節(jié)劑；若上述兩個條件不同時滿足，則判斷不含該種農(nóng)藥。
10.按權(quán)利要求1-8任一所述的檢測方法，其特征在于，所述步驟3)中標(biāo)準(zhǔn)曲線是用不同濃度的所述農(nóng)藥分別配制為標(biāo)準(zhǔn)溶液，用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法檢測其色譜峰面積而得的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
全文摘要
本發(fā)明提供一種肥料中多種農(nóng)藥的檢測方法，包括步驟1)將肥料樣品溶解，過濾并取濾液；2)用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法檢測濾液；3)用外標(biāo)法檢測肥料樣品中農(nóng)藥的含量。本發(fā)明的方法可以對肥料中存在的多種農(nóng)藥同時進(jìn)行定性和定量的測定，包括對植物生長調(diào)節(jié)劑和殺蟲劑的測定，為環(huán)境保護(hù)和食品安全提供了有效的控制檢測手段。本方法中胺鮮酯、甜菜堿、矮壯素、阿維菌素、氯吡脲的儀器檢出限均可達(dá)到0.01mg/L，4-硝基苯酚鈉和5-硝基愈創(chuàng)木酚鈉的檢出限可達(dá)0.01mg/L，萘乙酸鈉可達(dá)0.025mg/L，2-硝基苯酚鈉和赤霉素可達(dá)0.1mg/L。本發(fā)明的方法檢出限低，結(jié)果準(zhǔn)確，可一次檢測多種農(nóng)藥，快捷高效。
文檔編號G01N30/88GK103091436SQ20121042973
公開日2013年5月8日 申請日期2012年10月31日 優(yōu)先權(quán)日2012年10月31日
發(fā)明者趙魯, 趙永志, 程言君, 李昌偉, 邱靜, 哈雪嬌, 孫薊鋒, 蔣增, 張騰飛 申請人:輕工業(yè)環(huán)境保護(hù)研究所