專利名稱：一種膠原多肽及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及生物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種膠原多肽及其制備方法。
背景技術(shù)：
膠原多肽是膠原蛋白或明膠蛋白經(jīng)酶解生成的多肽或寡肽的小分子物質(zhì)，具有較高的的消化吸收性，普遍應(yīng)用在食品、醫(yī)藥、美容等領(lǐng)域。膠原多肽富含人體需要的甘氨酸、脯氨酸、羥脯氨酸等氨基酸，營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高，具有多方面功效，如保護(hù)胃黏膜、防止?jié)儾　⒁种蒲獕荷仙?、促進(jìn)成骨作用、預(yù)防骨質(zhì)疏松、促進(jìn)皮膚膠原代謝、美容作用、對(duì)各種骨關(guān)節(jié)疾病的預(yù)防及治療作用以及促進(jìn)鈣的吸收等。當(dāng)膠原多肽不足時(shí)，不僅皮膚及骨骼會(huì)出現(xiàn)問題，對(duì)內(nèi)臟器官也會(huì)產(chǎn)生不利影響。膠原多肽是維持身體正?；顒?dòng)所不可缺少的重要成分，同時(shí)也是使身體保持年輕、防止老化的物質(zhì)。目前，在制備膠原多肽的方法中有利用魚鱗制備膠原多肽的工藝，其工藝流程一般為清洗魚鱗-脫灰-脫鹽-煮膠-酶解-脫色-脫腥-濃縮、干燥，所謂脫灰就是除去魚鱗表面的羥基磷灰石以及少量的鈣，而脫鹽則是除去脫灰后產(chǎn)生的鈣鹽，煮膠則是用水煮沸魚鱗。有關(guān)研究表明，魚鱗含有豐富的蛋白質(zhì)，占魚鱗總重的50-70%，主要為膠原蛋白和角蛋白，可見魚鱗是非常好的膠原多肽的生產(chǎn)原料，無(wú)論在成本上還是膠原蛋白的含量上均具有顯著優(yōu)勢(shì)。然而，現(xiàn)有工藝步驟繁多，魚鱗需要脫灰和脫鹽處理，酶解完后還需要進(jìn)行脫色以及脫腥等處理工藝，極其影響膠原多肽的生產(chǎn)效率。

發(fā)明內(nèi)容
有鑒于此，本發(fā)明的目的在于提供一種膠原多肽及其制備方法，使得該方法能夠減少工藝流程，更加簡(jiǎn)便，同時(shí)保證膠原多肽具有較高品質(zhì)。為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供如下技術(shù)方案一種膠原多肽的制備方法，將魚鱗用堿液浸泡后洗凈，于蒸餾水中加熱煮沸，冷卻后加濃磷酸調(diào)節(jié)PH值為I. 6-1. 8，并加入酸性蛋白酶酶解，然后加入氫氧化鈣調(diào)節(jié)pH值為
5.5-6.0，并加入中性蛋白酶酶解，酶解后滅酶活性、過(guò)濾，濾液濃縮、干燥后所得干粉即為膠原多肽。其中，所述魚鱗與蒸餾水的質(zhì)量比優(yōu)選為I : 10-15。現(xiàn)有工藝在脫灰的時(shí)候采用鹽酸，利用鹽酸與羥基磷灰石反應(yīng)生成氯化鈣和磷酸二氫鈣的原理，溶解羥基磷灰石，并用水洗滌除去鈣鹽，然后進(jìn)行后續(xù)一系列步驟。但是這種工藝步驟過(guò)于繁多，不能提高膠原多肽的生產(chǎn)效率，而且洗滌產(chǎn)生污水污染環(huán)境。為此，本發(fā)明改變脫灰方法，先利用磷酸與羥基磷灰石反應(yīng)生成磷酸二氫鈣和磷酸鈣，再加入氫氧化鈣與磷酸二氫鈣反應(yīng)生成沉淀磷酸鈣，達(dá)到除去羥基磷灰石的目的，同時(shí)在脫灰過(guò)程中進(jìn)行酶解工序，生成的磷酸鈣也能夠作為吸附腥味的物質(zhì)進(jìn)行除腥，最后通過(guò)過(guò)濾除去鈣鹽，使得酶解、脫灰、脫腥一并進(jìn)行，并且不用額外水洗滌脫鹽，減少了工序步驟和廢水排放，提高了膠原多肽的生產(chǎn)效率。、
在脫灰的時(shí)候，由于加入了磷酸和氫氧化鈣，溶液中的pH值會(huì)發(fā)生變化，申請(qǐng)人在經(jīng)過(guò)研究后，通過(guò)限定PH值來(lái)限定磷酸和氫氧化鈣的加入量，最大程度確保反應(yīng)完全生成磷酸鈣沉淀，同時(shí)加入適合PH值的蛋白酶酶解。蛋白酶根據(jù)最適pH值來(lái)分，分為酸性蛋白酶、中性蛋白酶以及堿性蛋白酶，加入磷酸后PH值為I. 6-1. 8，需要酸性蛋白酶，加入量?jī)?yōu)選為占魚鱗總重的O. 8% (即魚鱗與酸性蛋白酶的質(zhì)量比為125 1)，本發(fā)明優(yōu)選胃蛋白酶。加入氫氧化鈣后PH值為5. 5-6. 0，需要中性蛋白酶，加入量?jī)?yōu)選為占魚鱗總重的
0.8% (即魚鱗與中性蛋白酶的質(zhì)量比為125 I)，本發(fā)明優(yōu)選木瓜蛋白酶、菠蘿蛋白酶、端肽酶或沙雷肽酶。配合脫灰工序，本發(fā)明進(jìn)行了兩次酶解，可有效地酶解膠原蛋白成為膠原多肽，保證產(chǎn)品品質(zhì)。其中，用酸性蛋白酶酶解的時(shí)間優(yōu)選為7h，用中性蛋白酶酶解的時(shí)間優(yōu)選為3h。魚鱗表面除了有羥基磷灰石，還附有一些脂肪，為了有效除去脂肪，需要加入堿液浸泡，而本發(fā)明優(yōu)選采用氫氧化鈉溶液、碳酸氫鈉溶液或碳酸鈉溶液為堿液，并且優(yōu)選浸泡 30mino為了便于蛋白酶酶解膠原蛋白，本發(fā)明用水煮沸魚鱗一段時(shí)間，利用沸水熱量初步斷裂膠原蛋白的化學(xué)鍵，使其復(fù)雜三維結(jié)構(gòu)變?yōu)橹辨溄Y(jié)構(gòu)，作為優(yōu)選本發(fā)明煮沸的時(shí)間為3h，且用于煮沸的蒸汽壓強(qiáng)為IMPa。酶解完成后，過(guò)濾溶液除去沉淀，將濾液濃縮、干燥即可得到膠原多肽干粉。其中，濃縮倍數(shù)優(yōu)選為4倍，干燥可采用常規(guī)干燥方法，如噴霧干燥。本發(fā)明所述制備方法制備的膠原多肽經(jīng)理化檢測(cè)，符合各種標(biāo)準(zhǔn)要求，具有較高品質(zhì)。因此，本發(fā)明還提供一種由本發(fā)明所述制備方法制備的膠原多肽。由以上技術(shù)方案可知，本發(fā)明制備方法改變脫灰方法，利用磷酸和氫氧化鈣將羥基磷灰石轉(zhuǎn)變?yōu)榱姿徕}沉淀，過(guò)濾除去，并同時(shí)進(jìn)行酶解和利用沉淀脫腥，減少了工序步驟和廢水排放，提高了膠原多肽的生產(chǎn)效率，并且保證了膠原多肽具有較高品質(zhì)。
具體實(shí)施例方式本發(fā)明公開了一種膠原多肽及其制備方法，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以借鑒本文內(nèi)容，適當(dāng)改進(jìn)工藝參數(shù)實(shí)現(xiàn)。特別需要指出的是，所有類似的替換和改動(dòng)對(duì)本領(lǐng)域技術(shù)人員來(lái)說(shuō)是顯而易見的，它們都被視為包括在本發(fā)明。本發(fā)明所述制備方法已經(jīng)通過(guò)較佳實(shí)施例進(jìn)行了描述，相關(guān)人員明顯能在不脫離本發(fā)明內(nèi)容、精神和范圍內(nèi)對(duì)本文所述的方法和應(yīng)用進(jìn)行改動(dòng)或適當(dāng)變更與組合，來(lái)實(shí)現(xiàn)和應(yīng)用本發(fā)明技術(shù)。以下就本發(fā)明所提供的一種膠原多肽及其制備方法做進(jìn)一步說(shuō)明。實(shí)施例I :用本發(fā)明所述制備方法制備膠原多肽稱取5kg魚鱗加O. 5 %氫氧化鈉溶液浸泡30分鐘,用水反復(fù)沖洗至無(wú)氫氧化鈉殘留。將魚鱗放入提取罐中，加入75kg蒸餾水，煮沸3小時(shí)，蒸汽壓強(qiáng)為IMpa。補(bǔ)加適量蒸餾水(維持魚鱗和蒸餾水質(zhì)量為為I : 10-15)，冷卻至45°C，加入濃磷酸調(diào)pH至I. 62，加入魚鱗總重O. 8%的胃蛋白酶酶解7小時(shí)，加入氫氧化鈣調(diào)pH至5. 60，加入魚鱗總重O. 8%的木瓜蛋白酶酶解3小時(shí)。酶解完畢加熱滅酶活性，過(guò)濾，去渣取濾液濾液真空濃縮(濃縮倍數(shù)4倍)，濃縮液進(jìn)入噴霧干燥機(jī)，進(jìn)風(fēng)溫度180°C，出風(fēng)溫度90°C，即得膠原多肽干粉。取樣進(jìn)行理化檢測(cè)，檢驗(yàn)結(jié)果如表I :
表I檢測(cè)結(jié)果
權(quán)利要求
1.一種膠原多肽的制備方法，其特征在于，將魚鱗用堿液浸泡后洗凈，于蒸餾水中加熱煮沸，冷卻后加濃磷酸調(diào)節(jié)PH值為I. 6-1. 8，并加入酸性蛋白酶酶解，然后加入氫氧化鈣調(diào)節(jié)pH值為5. 5-6. O,并加入中性蛋白酶酶解，酶解后滅酶活性、過(guò)濾，濾液濃縮、干燥后所得干粉即為膠原多肽。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述制備方法，其特征在于，所述堿液為氫氧化鈉溶液、碳酸氫鈉溶液或碳酸鈉溶液。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述制備方法，其特征在于，所述煮沸的時(shí)間為3h。
4.根據(jù)權(quán)利要求I所述制備方法，其特征在于，所述酸性蛋白酶為胃蛋白酶。
5.根據(jù)權(quán)利要求I所述制備方法，其特征在于，所述中性蛋白酶為木瓜蛋白酶、菠蘿蛋白酶、端肽酶或沙雷肽酶。
6.根據(jù)權(quán)利要求I所述制備方法，其特征在于，所述濃縮倍數(shù)為4倍。
7.根據(jù)權(quán)利要求I所述制備方法，其特征在于，所述魚鱗與蒸餾水的質(zhì)量比為I 10-15。
8.根據(jù)權(quán)利要求I所述制備方法，其特征在于，所述魚鱗與酸性蛋白酶的質(zhì)量比為125 I。
9.根據(jù)權(quán)利要求I所述制備方法，其特征在于，所述魚鱗與中性蛋白酶的質(zhì)量比為125 I。
10.權(quán)利要求1-9任意一項(xiàng)所述制備方法制備的膠原多肽。
全文摘要
本發(fā)明涉及生物技術(shù)領(lǐng)域，公開了一種膠原多肽及其制備方法。本發(fā)明所述制備方法將魚鱗用堿液浸泡后洗凈，于蒸餾水中加熱煮沸，冷卻后加濃磷酸調(diào)節(jié)pH值為1.6-1.8，并加入酸性蛋白酶酶解，然后加入氫氧化鈣調(diào)節(jié)pH值為5.5-6.0，并加入中性蛋白酶酶解，酶解后滅酶活性、過(guò)濾，濾液濃縮、干燥后所得干粉即為膠原多肽。本發(fā)明制備方法改變脫灰方法，利用磷酸和氫氧化鈣將羥基磷灰石轉(zhuǎn)變?yōu)榱姿徕}沉淀，過(guò)濾除去，并同時(shí)進(jìn)行酶解和利用沉淀脫腥，減少了工序步驟和廢水排放，提高了膠原多肽的生產(chǎn)效率，并且保證了膠原多肽具有較高品質(zhì)。
文檔編號(hào)C12P21/06GK102643890SQ201210131030
公開日2012年8月22日 申請(qǐng)日期2012年4月28日 優(yōu)先權(quán)日2012年4月28日
發(fā)明者伍增利, 王海生, 韓金光 申請(qǐng)人:韓金光