專利名稱：一種酶法提高大豆醇溶性中磷脂酰膽堿含量的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
一種酶法提高大豆醇溶性中磷脂酰膽堿含量的方法，屬于磷脂領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
磷脂主要包括磷脂酰膽堿、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇、磷脂酰葡萄糖及磷脂酰丙醇等，天然存在的磷脂大多是這些磷脂的混合物，由于這些磷脂結(jié)構(gòu)的相似性，因而要從混合磷脂里分離制備磷脂酰膽堿單體較為困難。工業(yè)上制備的大豆醇溶性磷脂其磷脂酰膽堿含量在45% -55%之間，更高磷脂酰膽堿含量磷脂的制備需要消耗大量醇溶劑進(jìn)行分級。本發(fā)明一種酶法提高大豆醇溶性中磷脂酰膽堿含量的方法，采用酶技術(shù)有效提高產(chǎn)品中磷脂酰膽堿的含量，使大豆醇溶性磷脂中磷脂酰膽堿含量由52.6%提高到61.2%，為提高大豆醇溶性磷脂中磷脂酰膽堿含量提供了一種新的技術(shù)途徑，滿足市場需求。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種酶法提高大豆醇溶性中磷脂酰膽堿含量的方法。大豆醇溶性磷脂溶于氯仿中，加入一定量溶含有2 % -8 %的膽堿溶液，在PH5.6磷脂酶D催化下進(jìn)行堿基交換，經(jīng)過2小時 反應(yīng)，大豆醇溶性磷脂中的磷脂酰乙醇胺等與膽堿進(jìn)行堿基交換后生成大豆磷脂酰膽堿，從而提高其含量。反應(yīng)物通過水洗有機(jī)相，經(jīng)脫水脫溶后，用丙酮充分洗滌，分離出丙酮不溶物，干燥得產(chǎn)品。經(jīng)過HPL測定，產(chǎn)品磷脂酰膽堿含量由52.6%提高到61.2%以上，從而完成了本發(fā)明。本發(fā)明的技術(shù)方案:一種酶法提高大豆醇溶性中磷脂酰膽堿含量的方法，所用的大豆醇溶性磷脂原料來自于油廠油脂加工的副產(chǎn)品，并經(jīng)進(jìn)一步加工所得到的大豆醇溶性磷脂，原料中大豆磷脂酰膽堿含量為52.6%。按大豆醇溶性磷脂:氯仿為1: 10 (W: V)比例配置溶液，加入大豆醇溶性磷脂:水為1: 1(W: V)的溶有2%-8%的膽堿的水溶液，再按大豆醇溶性磷脂:磷脂酶D為1: 40 (W: U)加入磷脂酶D，調(diào)節(jié)PH5.6，于30°C-40°C攪拌反應(yīng)2小時，分離出有機(jī)相，用三倍量氯仿水洗有機(jī)相，真空脫去有機(jī)溶劑，殘留物用五倍原料量的丙酮洗滌，分離出丙酮不溶物，真空干燥得磷脂酰膽堿含量大于61 %的產(chǎn)品。本發(fā)明的有益效果:一種酶法提高大豆醇溶性中磷脂酰膽堿含量的方法，為酶法提高大豆醇溶性磷脂中磷脂酰膽堿的含量提供了一條新的技術(shù)途徑，使用該方法可以有效提高大豆醇溶性磷脂中磷脂酰膽堿的含量。
具體實施例方式實施例1將100克大豆醇溶性磷脂溶于1000毫升氯仿，加入100毫升3%膽堿水溶液，再加入4000U磷脂酶D，調(diào)節(jié)PH5.6，于40°C攪拌反應(yīng)2小時，分離出有機(jī)相，用300毫升水分三次洗滌有機(jī)相，真空脫出氯仿，殘渣用500毫升丙酮分五次洗滌，收集丙酮不容物，真空干燥得到磷脂酰膽堿含量為61.2%的產(chǎn)品。
實施例2將100克大豆醇溶性磷脂溶于1000毫升氯仿，加入100毫升7%膽堿水溶液，再加入4000U磷脂酶D，調(diào)節(jié)PH5.6，于30°C攪拌反應(yīng)2小時，分離出有機(jī)相，用300毫升水分三次洗滌有機(jī)相，真空脫出氯仿，殘渣用500毫升丙酮分五次洗滌，收集丙酮不容物，真空干燥得到磷脂酰膽堿含量為62.5%的產(chǎn)品。實施例3將100克大豆醇溶性磷脂溶于100 0毫升氯仿，加入100毫升3%膽堿水溶液，再加入4000U磷脂酶D，調(diào)節(jié)PH5.6，于35°C攪拌反應(yīng)2小時，分離出有機(jī)相，用300毫升水分三次洗滌有機(jī)相，真空脫出氯仿，殘渣用500毫升丙酮分五次洗滌，收集丙酮不容物，真空干燥得到磷脂酰膽堿含量為61.9%的產(chǎn)品。
權(quán)利要求
1.一種酶法提高大豆醇溶性中磷脂酰膽堿含量的方法，其特征是所用的大豆醇溶性磷脂原料來自于油廠油脂加工的副產(chǎn)品，并經(jīng)進(jìn)一步加工所得到的大豆醇溶性磷脂，原料中大豆磷脂酰膽堿含量為52.6%。按大豆醇溶性磷脂:有機(jī)溶劑為1: 10(W: V)比例配置溶液，所使用的有機(jī)溶劑是氯仿。加入大豆醇溶性磷脂:水為1: 1(W: V)的溶有2%-8%的膽堿水溶液，再按大豆醇溶性磷脂:磷脂酶D為1: 40(W: U)加入磷脂酶D，調(diào)節(jié)PH5.6，于30°C -40V攪拌反應(yīng)2小時，分離出有機(jī)相，用三倍量有機(jī)相的水洗有機(jī)相，真空脫去有機(jī)溶劑，殘留物用五倍原料量的丙酮洗滌，分離出丙酮不溶物，真空干燥得磷脂酰膽堿含量大于61%的產(chǎn)品。
2.依據(jù)權(quán)利要求1所述的一種酶法提高大豆醇溶性中磷脂酰膽堿含量的方法，其特征是所用有機(jī)溶劑為氯仿。
3.依據(jù)如權(quán)利要求1所述的一種酶法提高大豆醇溶性中磷脂酰膽堿含量的方法，其特征是膽堿溶液的濃度為2% -8%。
4.依據(jù)權(quán)利要求1所述的一種酶法提高大豆醇溶性中磷脂酰膽堿含量的方法，其特征是酶促反應(yīng)溫度為30°C -40°C。
5.依據(jù)如權(quán)利要求1所述的一種酶法提高大豆醇溶性中磷脂酰膽堿含量的方法，其特征是所用的原料為大 豆磷脂酰膽堿含量52.6%的大豆醇溶性磷脂原料。
全文摘要
本發(fā)明的目的在于提供一種酶法提高大豆醇溶性中磷脂酰膽堿含量的方法。大豆醇溶性磷脂溶于氯仿中，加入一定量溶含有2％-8％的膽堿溶液，在PH5.6磷脂酶D催化下進(jìn)行堿基交換，經(jīng)過2小時反應(yīng)，大豆醇溶性磷脂中的磷脂酰乙醇胺等與膽堿進(jìn)行堿基交換后生成大豆磷脂酰膽堿，從而提高其含量。反應(yīng)物通過水洗有機(jī)相，經(jīng)脫水脫溶后，用丙酮充分洗滌，分離出丙酮不溶物，干燥得產(chǎn)品。經(jīng)過HPLC測定，產(chǎn)品磷脂酰膽堿含量由52.6％提高到61.2％以上，從而完成了本發(fā)明。
文檔編號C12P13/00GK103074392SQ20111038210
公開日2013年5月1日 申請日期2011年11月26日 優(yōu)先權(quán)日2011年11月26日
發(fā)明者曹棟, 史蘇佳, 曹沛 申請人:江南大學(xué)