專利名稱：一種纖維素酶的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種纖維素酶的制備方法。
背景技術(shù)：
農(nóng)作物秸稈是自然界中最為豐富的可再生資源之一，在我國(guó)目前大部分未被充分利用，而是被燒掉，每年由于秸稈焚燒不僅造成環(huán)境污染，還造成大量的資源浪費(fèi)。農(nóng)作物秸稈的主要成份是纖維素、半纖維素和木質(zhì)素，另外還有一些蠟質(zhì)物質(zhì)。因此，要有效的利用秸稈首先要解決纖維素的降解問(wèn)題，如果能夠?qū)⒗w維素降解為可利用的糖類物質(zhì)，不僅可用作養(yǎng)殖飼料，提高農(nóng)民收入；對(duì)解決我國(guó)所面臨的環(huán)境污染、糧食短缺等問(wèn)題也有重大現(xiàn)實(shí)意義。目前纖維素被徹底分解而又無(wú)污染的一條有效途徑是利用纖維素酶的水解作用。纖維素酶(Cellulase)是降解纖維素生成葡萄糖的一組酶的總稱，可將纖維素水解成葡萄糖。纖維素酶來(lái)源非常廣泛，如昆蟲、軟體動(dòng)物、原生動(dòng)物、細(xì)菌、放線菌、真菌等都能產(chǎn)生纖維素酶。不同來(lái)源的纖維素酶其結(jié)構(gòu)和功能相差很大，來(lái)源于真菌的纖維素酶酶系較全，活性強(qiáng)。目前用于生產(chǎn)纖維素酶的微生物大多屬于真菌，研究較多的有木霉屬、曲霉屬、 根霉屬和漆斑霉屬。特別是綠色木霉(Trichoderma viride)及其近緣菌株最佳，國(guó)內(nèi)外普遍認(rèn)為綠色木霉的纖維素酶產(chǎn)率最高，酶系最全。我國(guó)對(duì)纖維素酶的研究有幾十年的歷史， 采用微生物發(fā)酵法生產(chǎn)纖維素酶的報(bào)道和專利有很多，但是普遍存在酶系不全，和酶活力不高的問(wèn)題。目前主要的發(fā)酵方法有固態(tài)發(fā)酵和液態(tài)發(fā)酵。液態(tài)發(fā)酵生產(chǎn)穩(wěn)定，占地面積小，方法容易掌握近年來(lái)越來(lái)越被重視；但纖維素酶為誘導(dǎo)酶，需要天然的纖維素類物質(zhì)如稻草等為誘導(dǎo)物，所以液態(tài)發(fā)酵酶往往存在酶系不全的缺點(diǎn)，且培養(yǎng)要求條件高，應(yīng)用成本高。固態(tài)發(fā)酵雖然利用天然秸稈資源，成本低，酶系齊全，設(shè)備簡(jiǎn)單，容易推廣，但是占地面積大，發(fā)酵條件難控制。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供了一種纖維素酶的制備方法，它不但可以提高酶的存活率，完善酶系， 而且大大降低了成本。本發(fā)明采用了以下技術(shù)方案一種纖維素酶的制備方法，它包括以下步驟步驟一，斜面孢子制備選擇綠色木霉作為發(fā)酵菌種，將保存的綠色木霉接種于斜面培養(yǎng)基中， 靜置培養(yǎng)，每日觀察，一段時(shí)間后，在綠色木霉培養(yǎng)后的菌絲表面形成一層灰綠色孢子，灰綠色孢子既可用為斜面孢子；步驟二，液體種子制備將斜面孢子接種于種子培養(yǎng)基中，達(dá)到108個(gè)孢子/ml然后進(jìn)一步培養(yǎng)使孢子萌發(fā)，孢子萌發(fā)后即可作為種子；步驟三，將種子與發(fā)酵料質(zhì)量比1 10的比例，均勻的倒在發(fā)酵培養(yǎng)基上進(jìn)行固態(tài)淺盤培養(yǎng)，拌勻、攤平， 放入發(fā)酵培養(yǎng)室進(jìn)行培養(yǎng)，從進(jìn)入培養(yǎng)室開(kāi)始，每隔一段時(shí)間需要向淺盤內(nèi)進(jìn)行澆水，根據(jù)淺盤中物料濕度大小可以減少或增加澆水量；步驟四，當(dāng)培養(yǎng)到第七天、第八天和第九天時(shí)，分別這三天的淺盤內(nèi)的物料進(jìn)行采樣，測(cè)定這三天中淺盤中物料的水分和酶活性，當(dāng)纖維素酶活性大于110U/g干曲時(shí)即可結(jié)束發(fā)酵，發(fā)酵結(jié)束濕曲，無(wú)異味，蛋白含量高，可直接用于牛羊飼喂，酶活力高，牛羊消化率高，效果好。本發(fā)明的步驟一中所述的斜面培養(yǎng)基容量為IL的制備方法稱取去皮新鮮土豆 200克，切成小塊，加水至1L，煮沸30分鐘，用紗布過(guò)濾后加20克葡萄糖、15克瓊脂粉，在電爐上加熱至瓊脂溶化，加水補(bǔ)足1L，分裝至已空消過(guò)的試管中，置滅菌鍋中121°C滅菌20 分鐘，傾斜靜置，待凝固后備用。本發(fā)明的步驟一中所述的綠色木霉接種于斜面培養(yǎng)基中在 350C的條件下靜置培養(yǎng)5天，每日觀察，在5天后，在綠色木霉培養(yǎng)后的菌絲表面形成一層灰綠色孢子。本發(fā)明的步驟二中的所述的種子培養(yǎng)基容量為IL的制備方法葡萄糖20g，蛋白胨10g，酵母膏10g，硫酸銨5. Og,磷酸二氫鉀6g氯化鈣lg，七水硫酸鎂lg，碳酸鈣0. 5g，PH 值為5. 6，分裝，置滅菌鍋中121°C滅菌20分鐘。本發(fā)明的步驟二中斜面孢子接種于種子培養(yǎng)基中時(shí)在溫度為30°C，轉(zhuǎn)速為50r/min萌發(fā)培養(yǎng)6h，萌發(fā)后的孢子數(shù)含量為108個(gè)/ml。本發(fā)明的步驟三中所述的發(fā)酵培養(yǎng)基質(zhì)量為Ikg的制備方法稱取硫酸銨20g，尿素5g，磷酸二氫鉀5g，碳酸鈣5g，七水硫酸鎂2. 5g，氯化鈷0. 5g，七水硫酸鎂Ig溶于2L水， PH自然。再稱取稻草800g，麩皮200g，將2L鹽溶液倒入稻草粉和麩皮混合物中，充分拌勻，裝盤，裝盤厚度為8-10cm，121°C滅菌60min或常壓蒸鍋滅菌16h。本發(fā)明的步驟三中倒在發(fā)酵培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)的種子為步驟二中種子總量的10%，放入發(fā)酵培養(yǎng)室后的溫度控制在^ 30°C，在淺盤中物料的溫度高于室溫2°C左右，濕度控制在80%，培養(yǎng)周期為7-9 天，培養(yǎng)期間可以通過(guò)空調(diào)和加濕裝置來(lái)調(diào)節(jié)室內(nèi)的溫度和濕度，當(dāng)出現(xiàn)發(fā)酵培養(yǎng)室內(nèi)上下溫度不均衡時(shí)，可采用改變淺盤的擺放位置來(lái)調(diào)節(jié)物料溫度、濕度和供氧情況，從進(jìn)入培養(yǎng)室開(kāi)始，每隔12h時(shí)間需要向淺盤內(nèi)進(jìn)行澆水，所澆的水為無(wú)菌水。本發(fā)明的步驟四中結(jié)束發(fā)酵后將物料在50°C熱空氣下烘干，即制得纖維素粗酶， 纖維素粗酶直接應(yīng)用于飼料添加劑。本發(fā)明的步驟四中結(jié)束發(fā)酵后將物料在浸提灌中以5 倍水在30°C下，緩慢攪拌2h，過(guò)濾得到上清夜可作為粗酶液，將粗酶液濃縮，噴霧干燥可得粉狀工業(yè)酶。本發(fā)明具有以下有益效果本發(fā)明以粉碎稻草和麥麩為主要原料，配成發(fā)酵培養(yǎng)料，以綠色木霉為菌種，采用固態(tài)淺盤發(fā)酵培養(yǎng)，所產(chǎn)生的纖維素酶活力高，酶系齊全，濾紙酶活可達(dá)ιιου/g干曲以上，生產(chǎn)穩(wěn)定。本發(fā)明在發(fā)酵結(jié)束后處于濕曲狀態(tài)，這樣無(wú)異味，蛋白含量高，可直接用于牛羊飼喂，酶活力高，牛羊消化率高，效果好。本發(fā)明將稻草、麩皮等農(nóng)業(yè)廢棄物作為原料發(fā)酵生產(chǎn)纖維素酶，發(fā)酵產(chǎn)物可直接應(yīng)用于飼料行業(yè)，發(fā)酵工藝簡(jiǎn)單易行，成本低，具有良好的應(yīng)用前景。本發(fā)明采用萌發(fā)的孢子液接種既有利孢子與發(fā)酵料充分混合，又有利于縮短孢子萌發(fā)時(shí)間，提高發(fā)酵設(shè)備利用率
具體實(shí)施方式
。本發(fā)明公開(kāi)了一種纖維素酶的制備方法，它包括以下步驟步驟一，斜面孢子制備首先制備斜面培養(yǎng)基，IL的斜面培養(yǎng)基的制備方法稱取去皮新鮮土豆200克，切成小塊，加水至1L，煮沸30分鐘，用紗布過(guò)濾后加20克葡萄糖、15克瓊脂粉，在電爐上加熱至瓊脂溶化，加水補(bǔ)足1L，分裝至已空消過(guò)的試管中，置滅菌鍋中121°C滅菌20分鐘，傾斜靜置， 待凝固后備用，選擇綠色木霉作為發(fā)酵菌種，將保存的綠色木霉接種于斜面培養(yǎng)基中，靜置培養(yǎng)5天，每日觀察，在5天后，在綠色木霉培養(yǎng)后的菌絲表面形成一層灰綠色孢子，灰綠色孢子既可用為斜面孢子；步驟二，液體種子制備首先制備種子培養(yǎng)基，IL種子培養(yǎng)基的制備方法葡萄糖20g，蛋白胨10g，酵母膏10g，硫酸銨5. 0g，磷酸二氫鉀6g氯化鈣lg，七水硫酸鎂18，碳酸鈣0.58，？!1值5.6。分裝，置滅菌鍋中121°C滅菌20分鐘，再將斜面孢子接種于種子培養(yǎng)基中，然后進(jìn)一步培養(yǎng)使孢子萌發(fā)，面孢子接種于種子培養(yǎng)基中時(shí)在溫度為 300C，轉(zhuǎn)速為50r/min萌發(fā)培養(yǎng)6h，萌發(fā)后的孢子數(shù)含量為108個(gè)/ml，孢子萌發(fā)后即可作為種子；步驟三，首先制備發(fā)酵培養(yǎng)基，Ikg干料的發(fā)酵培養(yǎng)基制備方法稱取硫酸銨20g， 尿素5g，磷酸二氫鉀5g，碳酸鈣5g，七水硫酸鎂2. 5g，氯化鈷0. 5g，七水硫酸鎂Ig溶于2L 水，PH自然。再稱取稻草800g，麩皮200g，稻草選擇新收割稻草，自然風(fēng)干，無(wú)霉變堆積待用。使用前2兩天，稻草粉碎，過(guò)40目，自然風(fēng)干，備用，將2L鹽溶液倒入稻草粉和麩皮混合物中，充分拌勻，裝盤，裝盤厚度8-lOcm。121°C滅菌60min或常壓蒸鍋滅菌16h，將步驟二中種子按照步驟三中發(fā)酵料總量10%的種子均勻的倒在發(fā)酵培養(yǎng)基上進(jìn)行固態(tài)淺盤培養(yǎng)，拌勻、攤平，放入發(fā)酵培養(yǎng)室進(jìn)行培養(yǎng)，放入發(fā)酵培養(yǎng)室后的溫度控制在觀 30°C，在淺盤中物料的溫度高于室溫2°C左右，濕度控制在80 %，培養(yǎng)周期為7-9天，從進(jìn)入培養(yǎng)室開(kāi)始，每隔1 需要向淺盤內(nèi)進(jìn)行澆水，所澆的水為無(wú)菌水，根據(jù)淺盤中物料濕度大小可以減少或增加澆水量，培養(yǎng)期間可以通過(guò)空調(diào)和加濕裝置來(lái)調(diào)節(jié)室內(nèi)的溫度和濕度，當(dāng)出現(xiàn)發(fā)酵培養(yǎng)室內(nèi)上下溫度不均衡時(shí)，可采用改變淺盤的擺放位置來(lái)調(diào)節(jié)物料溫度、濕度和供氧情況；步驟四，當(dāng)培養(yǎng)到第七天、第八天和第九天時(shí)，分別這三天的淺盤內(nèi)的物料進(jìn)行采樣，測(cè)定這三天中淺盤中物料的水分和酶活性，本發(fā)明中酶活的測(cè)定采用濾紙測(cè)定濾紙是聚合度和結(jié)晶度都居“中等”的纖維性材料，以其為底物經(jīng)纖維素酶水解后生成還原搪的量來(lái)表達(dá)纖維素酶系總的搪化能力的方法得到廣泛應(yīng)用，它反映了三類酶組分的協(xié)同作用， 統(tǒng)稱濾紙酶活(FPA)，比色管底部放入IX 6cm(50 士 Img)的濾紙條，加0. 5mL的稀釋酶液， ImL pH 4. 8的醋酸緩沖液混勻后，50°C水浴60min，DNS法反應(yīng)后根據(jù)540nm處的光密度值測(cè)定還原糖含量，進(jìn)而算的酶活。在上述反應(yīng)條件下(50°CpH 4. 8)，酶液每分鐘水解底物產(chǎn)生Iymol葡萄糖的能力定義為1個(gè)酶活單位(U)。還原糖的測(cè)定采用3，5-二硝基水楊酸法(DNS法)。本發(fā)明中的濾紙酶活采用國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)酶液每分鐘水解底物產(chǎn)生1 μ mol葡萄糖的能力定義為1個(gè)酶活單位(U/g)，此方法與其他一些發(fā)明中的每分鐘水解底物產(chǎn)生 1 μ g葡萄糖的能力定義為1個(gè)酶活單位(U/L)的表示方法不同，本發(fā)明的lU/g = 1 μ mol/g =160 μ g/g ^ 160 μ g/ml = 160000 μ g/L = 1000 μ mol/L，這一段是寫給你查資料對(duì)比的， 不寫進(jìn)去吧？第七天測(cè)定固體酶活達(dá)到103. 5U/g干曲，第八天測(cè)定固體酶活達(dá)到112. 6U/ g干曲，第九天測(cè)定固體酶活達(dá)到117. 3U/g干曲，當(dāng)纖維素酶活性大于110U/g干曲時(shí)即可結(jié)束發(fā)酵，結(jié)束發(fā)酵后將物料在50°C熱空氣下烘干，即制得纖維素粗酶，纖維素粗酶直接應(yīng)用于飼料添加劑，發(fā)酵結(jié)束濕曲，無(wú)異味，蛋白含量高，可直接用于牛羊飼喂，酶活力高，牛羊消化率高，效果好，結(jié)束發(fā)酵后將物料在浸提灌中以5倍水在30°C下，緩慢攪拌池，過(guò)濾得到上清夜可作為粗酶液，將粗酶液濃縮，噴霧干燥可得粉狀工業(yè)酶。
本發(fā)明制備時(shí)的地形要求方正、開(kāi)曠，不要窄長(zhǎng)邊角多。地勢(shì)要求干燥，向陽(yáng)背風(fēng)， 近水源。周圍環(huán)境要求無(wú)有害氣體、廢水和垃圾污染源，如化工廠、農(nóng)藥廠、硫酸廠、印染廠等，并要遠(yuǎn)離廁所、糞堆坑、禽舍、倉(cāng)庫(kù)等場(chǎng)所，有效防止染菌。場(chǎng)地四周最好有綠化帶，起凈化空氣和調(diào)節(jié)小氣候的作用。發(fā)酵場(chǎng)所應(yīng)選擇交通方便的地方，以利原料和產(chǎn)品的運(yùn)輸。 場(chǎng)內(nèi)應(yīng)有一定空地，以供堆料和曬料之用，發(fā)酵培養(yǎng)室要求建造的固體發(fā)酵室應(yīng)具有良好的通風(fēng)條件，通風(fēng)采用無(wú)菌空氣通風(fēng)，不能有死角，但又要防止通風(fēng)時(shí)，冷風(fēng)或熱風(fēng)直襲到發(fā)酵床上；發(fā)酵室頂部裝排氣口。發(fā)酵室內(nèi)墻面及地面光滑整潔易于消毒清洗，發(fā)酵室內(nèi)設(shè)有保溫保濕設(shè)備，室外設(shè)置指示器。室內(nèi)設(shè)置多層金屬架，用于訪置發(fā)酵盤，發(fā)酵盤采用長(zhǎng) 70-100cm寬50cm高15cm的不銹鋼盤或搪瓷盤無(wú)毒且易于消毒清洗，金屬架寬40-80cm，間距1. 2m，兩端距墻面1. 2m方便操作，內(nèi)置接種室與培養(yǎng)室由無(wú)菌通道直接相通。
權(quán)利要求
1.一種纖維素酶的制備方法，它包括以下步驟步驟一，斜面孢子制備選擇綠色木霉作為發(fā)酵菌種，將保存的綠色木霉接種于斜面培養(yǎng)基中，靜置培養(yǎng)，每日觀察，一段時(shí)間后，在綠色木霉培養(yǎng)后的菌絲表面形成一層灰綠色孢子，灰綠色孢子既可用為斜面孢子；步驟二，液體種子制備將斜面孢子接種于種子培養(yǎng)基中，達(dá)到108個(gè)孢子/ml然后進(jìn)一步培養(yǎng)使孢子萌發(fā)，孢子萌發(fā)后即可作為種子；步驟三，將種子與發(fā)酵料質(zhì)量比1 10的比例，均勻的倒在發(fā)酵培養(yǎng)基上進(jìn)行固態(tài)淺盤培養(yǎng)，拌勻、攤平，放入發(fā)酵培養(yǎng)室進(jìn)行培養(yǎng)，從進(jìn)入培養(yǎng)室開(kāi)始，每隔一段時(shí)間需要向淺盤內(nèi)進(jìn)行澆水，根據(jù)淺盤中物料濕度大小可以減少或增加澆水量；步驟四，當(dāng)培養(yǎng)到第七天、第八天和第九天時(shí)，分別這三天的淺盤內(nèi)的物料進(jìn)行采樣， 測(cè)定這三天中淺盤中物料的水分和酶活性，當(dāng)纖維素酶活性大于110U/g干曲時(shí)即可結(jié)束發(fā)酵，發(fā)酵結(jié)束濕曲，無(wú)異味，蛋白含量高，可直接用于牛羊飼喂，酶活力高，牛羊消化率高， 效果好。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的纖維素酶的制備方法，其特征是步驟一中所述的斜面培養(yǎng)基容量為IL的制備方法稱取去皮新鮮土豆200克，切成小塊，加水至1L，煮沸30分鐘，用紗布過(guò)濾后加20克葡萄糖、15克瓊脂粉，在電爐上加熱至瓊脂溶化，加水補(bǔ)足1L，分裝至已空消過(guò)的試管中，置滅菌鍋中121°C滅菌20分鐘，傾斜靜置，待凝固后備用。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的纖維素酶的制備方法，其特征是步驟一中所述的綠色木霉接種于斜面培養(yǎng)基中在35°C的條件下靜置培養(yǎng)5天，每日觀察，在5天后，在綠色木霉培養(yǎng)后的菌絲表面形成一層灰綠色孢子。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的纖維素酶的制備方法，其特征是步驟二中的所述的種子培養(yǎng)基容量為IL的制備方法葡萄糖20g，蛋白胨10g，酵母膏10g，硫酸銨5. 0g，磷酸二氫鉀6g 氯化鈣lg，七水硫酸鎂lg，碳酸鈣0. 5g，PH值為5. 6，分裝，置滅菌鍋中121°C滅菌20分鐘。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的纖維素酶的制備方法，其特征是步驟二中斜面孢子接種于種子培養(yǎng)基中時(shí)在溫度為30°C，轉(zhuǎn)速為50r/min萌發(fā)培養(yǎng)6h，萌發(fā)后的孢子數(shù)含量為108個(gè) /ml。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的纖維素酶的制備方法，其特征是步驟三中所述的發(fā)酵培養(yǎng)基質(zhì)量為Ikg的制備方法稱取硫酸銨20g，尿素5g，磷酸二氫鉀5g，碳酸鈣5g，七水硫酸鎂 2. 5g，氯化鈷0. 5g，七水硫酸鎂Ig溶于2L水，pH自然。再稱取稻草800g，麩皮200g，將2L 鹽溶液倒入稻草粉和麩皮混合物中，充分拌勻，裝盤，裝盤厚度為8-lOcm，121°C滅菌60min 或常壓蒸鍋滅菌16h。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的纖維素酶的制備方法，其特征是步驟三中倒在發(fā)酵培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)的種子為步驟二中種子總量的10%，放入發(fā)酵培養(yǎng)室后的溫度控制在觀 30°C， 在淺盤中物料的溫度高于室溫2°C左右，濕度控制在80%，培養(yǎng)周期為7-9天，培養(yǎng)期間可以通過(guò)空調(diào)和加濕裝置來(lái)調(diào)節(jié)室內(nèi)的溫度和濕度，當(dāng)出現(xiàn)發(fā)酵培養(yǎng)室內(nèi)上下溫度不均衡時(shí)，可采用改變淺盤的擺放位置來(lái)調(diào)節(jié)物料溫度、濕度和供氧情況，從進(jìn)入培養(yǎng)室開(kāi)始，每隔12h時(shí)間需要向淺盤內(nèi)進(jìn)行澆水，所澆的水為無(wú)菌水。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的纖維素酶的制備方法，其特征是步驟四中結(jié)束發(fā)酵后將物料在50°C熱空氣下烘干，即制得纖維素粗酶，纖維素粗酶直接應(yīng)用于飼料添加劑。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的纖維素酶的制備方法，其特征是步驟四中結(jié)束發(fā)酵后將物料在浸提灌中以5倍水在30°C下，緩慢攪拌2h，過(guò)濾得到上清夜可作為粗酶液，將粗酶液濃縮，噴霧干燥可得粉狀工業(yè)酶。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種纖維素酶的制備方法，一，斜面孢子制備選擇綠色木霉作為發(fā)酵菌種，將保存的綠色木霉接種于斜面培養(yǎng)基中在綠色木霉培養(yǎng)后的菌絲表面形成一層灰綠色孢子，灰綠色孢子既可用為斜面孢子；二，液體種子制備將斜面孢子接種于種子培養(yǎng)基中，達(dá)到108個(gè)孢子/ml然后進(jìn)一步培養(yǎng)使孢子萌發(fā)，孢子萌發(fā)后即可作為種子；三，將種子與發(fā)酵料質(zhì)量比1∶10的比例，均勻的倒在發(fā)酵培養(yǎng)基上進(jìn)行固態(tài)淺盤培養(yǎng)，拌勻、攤平，放入發(fā)酵培養(yǎng)室進(jìn)行培養(yǎng)，從進(jìn)入培養(yǎng)室開(kāi)始，每隔一段時(shí)間需要向淺盤內(nèi)進(jìn)行澆水；四，當(dāng)培養(yǎng)到第七天、第八天和第九天時(shí)，分別這三天的淺盤內(nèi)的物料進(jìn)行采樣，測(cè)定這三天中淺盤中物料的水分和酶活性。
文檔編號(hào)C12N9/98GK102154248SQ20111007024
公開(kāi)日2011年8月17日 申請(qǐng)日期2011年3月23日 優(yōu)先權(quán)日2011年3月23日
發(fā)明者張力, 張君勝, 張堯, 張鐸, 楊曉志, 紹喜霞, 韓大勇 申請(qǐng)人:江蘇畜牧獸醫(yī)職業(yè)技術(shù)學(xué)院