專利名稱：一種用于制定個(gè)體化減重方案的分子標(biāo)記試劑盒的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及ー種試劑盒，尤其涉及ー種用于制定個(gè)體化減重方案的分子標(biāo)記試劑盒。
背景技術(shù)：
2007年2月，世界衛(wèi)生組織發(fā)布ー項(xiàng)各國(guó)肥胖比例的調(diào)查報(bào)告。報(bào)告顯示，當(dāng)今65億人ロ中，全球約有17億人超重，其中3億為肥胖。據(jù)統(tǒng)計(jì)顯示中國(guó)目前超重者高達(dá)2億，其中肥胖者也已超過9000萬(wàn)名。專家預(yù)測(cè)，中國(guó)在未來十年里肥胖人群將會(huì)超過2億。
在過去幾十年中，由人們體力活動(dòng)水平逐步減少和食物變得過于豐富，導(dǎo)致人們的生活方式發(fā)生改變，從而引發(fā)了肥胖在世界范圍內(nèi)的蔓延。然而，事實(shí)上，盡管人們處于相同的環(huán)境中，但并不是不是每個(gè)人都變得肥胖，這表明遺傳因素在也會(huì)對(duì)人類的體重變化產(chǎn)生一定影響。也就是說，遺傳能夠決定不同的個(gè)體在處于相同的環(huán)境中時(shí)，是否具有肥胖的易感性，同時(shí)，也決定了不同的個(gè)體對(duì)不同的飲食與運(yùn)動(dòng)干預(yù)的響應(yīng)程度。因此，實(shí)現(xiàn)個(gè)體化體重管理不僅是營(yíng)養(yǎng)學(xué)的發(fā)展方向，而且具有十分重要的社會(huì)意義和經(jīng)濟(jì)價(jià)值。與肥胖相關(guān)度較大的基因如下FTO基因=FTO基因是最近被發(fā)現(xiàn)的能夠編碼一種修飾DNA的酶。另ー項(xiàng)研究還發(fā)現(xiàn)，在肥胖人群中，F(xiàn)TO基因在脂肪組織中的水平増加。但目前仍然還不能準(zhǔn)確的了解到該基因是如何影響B(tài)MI的。這個(gè)基因區(qū)域的SNP位點(diǎn)似乎都與BMI有關(guān)，但還不能夠了解這些SNP位點(diǎn)對(duì)BMI的影響是直接的還是間接地。FTO基因的SNP位點(diǎn)幾乎都只與脂肪組織相關(guān)。這就意味著該基因的風(fēng)險(xiǎn)等位基因是人體體重増加的途徑是使脂肪組織增加，而不是増加肌肉的體積或者骨骼密度。研究數(shù)據(jù)表明人FTO基因變異可能會(huì)導(dǎo)致FTO基因表達(dá)的上調(diào)或者失調(diào)，而攜帯風(fēng)險(xiǎn)等位基因者可能在不改變能量消耗的情況下通過過量攝食造成肥胖。Cecil等研究了FTO基因變異與肥胖、能量消耗和食物攝入的可能聯(lián)系，發(fā)現(xiàn)FTO基因的變異雖然導(dǎo)致了肥胖的易感性卻沒有顯示出其可直接調(diào)控能量消耗，而是可能在控制食物攝取和食物選擇中發(fā)揮作用，表明FTO基因與食欲過剩的表型或者喜好高能量食物有關(guān)系。如果FTO基因只有ー個(gè)副本變異，與無變異副本的人相比，肥胖的幾率也要高出30%。發(fā)生微小變異在肥胖個(gè)體中很普遍。攜帯兩個(gè)變異拷貝的人，平均體重比擁有正?？截惖膫€(gè)體重三公斤。而另ー項(xiàng)關(guān)于FTO基因的研究發(fā)現(xiàn)，攜帯FTO基因但積極參加體育鍛煉的人，他們的體重與非肥胖基因攜帯者一祥，這意味著，攜帯FTO的人群，體育鍛煉將是最好的減肥手段。FABP2基因FABP2基因編碼小腸脂肪酸結(jié)合蛋白，在小腸腔內(nèi)脂肪酸吸收和轉(zhuǎn)運(yùn)的過程中起著重要的作用。這種蛋白在小腸上皮細(xì)胞中被發(fā)現(xiàn)(小腸上皮細(xì)胞的對(duì)脂肪的吸收具有強(qiáng)烈的影響)。而該基因的突變能夠?qū)е缕渚幋a的脂肪酸結(jié)合蛋白結(jié)合脂肪酸的能力大大增加，換句話說，這種突變?cè)斐闪巳梭w吸收脂肪的能力的大大增加。
已經(jīng)有很多臨床研究證明，攜帯風(fēng)險(xiǎn)等位基因的個(gè)體，其腸道吸收膳食脂肪酸的能力得到了加強(qiáng)。且風(fēng)險(xiǎn)等位基因與BMI、體脂的升高、腹部脂肪的増加、肥胖以及瘦素分泌水平有夫。許多臨床膳食干預(yù)研究表明，風(fēng)險(xiǎn)等位基因攜帯者餐后體內(nèi)的甘油三酯和14-18碳長(zhǎng)鏈脂肪酸的濃度水平大大超過不正常個(gè)體。因此，風(fēng)險(xiǎn)等位基因攜帯者，需要嚴(yán)格控制脂肪攝入量。PPARG基因過氧化物酶體增殖物激活受體(PPARs)是核激素受體(NHR)超家族成員，它們是配體激活轉(zhuǎn)錄因子且與脂類代謝，血糖穩(wěn)態(tài)以及細(xì)胞增生與分泌等多種通路相關(guān)。過氧化物酶體増殖物激活受體G(PPARG)在脂肪細(xì)胞中高表達(dá)并在脂肪的形成中起著非常重要的作用，多種參與脂肪酸轉(zhuǎn)運(yùn)和代謝的基因在轉(zhuǎn)錄水平受PPARG調(diào)控，如脂肪細(xì)胞脂肪酸結(jié)合蛋白(AFABP)、脂肪酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(FATP)、脂蛋白脂酶(LPL)等，可以增加脂肪酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白和脂肪酸轉(zhuǎn)運(yùn)酶的表達(dá)，刺激細(xì)胞對(duì)脂肪酸的攝取和向脂酰輔酶A的轉(zhuǎn)化。
到目前為止，大約有30多個(gè)高水平科研論文指出，PPARG基因與肥胖存在密切的關(guān)聯(lián)，其中，該基因的Prol2Ala多態(tài)位點(diǎn)與肥胖的關(guān)聯(lián)性也成為最具代表性的ー個(gè)發(fā)現(xiàn)。Memisoglu等人的研究發(fā)現(xiàn)，Pro等位基因攜帶個(gè)體,對(duì)食物中脂肪的總量更敏感。相比于那些攝入膳食脂肪較少的Pro/Pro純合子等位基因攜帶個(gè)體來說，攝入膳食脂肪較多的個(gè)體，其平均BMI顯著增高，而這種情況在Ala等位基因攜帯者群體中則沒有發(fā)生。在芬蘭的一項(xiàng)關(guān)于糖尿病的大型研究中，科學(xué)家們得到了基因型影響膳食干預(yù)效果的有力證據(jù)。在這項(xiàng)為期3年的運(yùn)動(dòng)膳食干預(yù)實(shí)驗(yàn)中，Ala/Ala等位基因攜帯者(-8. 3Kg)，減重效果優(yōu)于Pro/Ala等位基因攜帶者(-4. OKg);而后者又優(yōu)于Pro/Pro等位基因攜帶者(-3. 4Kg)。這些研究指出，Ala等位基因攜帯者在脂肪的儲(chǔ)存以及轉(zhuǎn)移方面，具有更好的代謝靈活性。并通常具有容易發(fā)胖、飲食及運(yùn)動(dòng)干預(yù)對(duì)其減重更為有效、胰島素敏感性較好以及II型糖尿病低發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)。因此，Pro等位基因?yàn)轱L(fēng)險(xiǎn)等位基因。ADRB2基因ADRB2基因編碼的蛋白腎上腺素能受體蛋白廣泛分布于脂肪細(xì)胞。它與兒茶酚胺結(jié)合后激活腺苷酸環(huán)化酶(AC)使環(huán)磷酸腺苷(cAMP)生成增多，進(jìn)ー步激活蛋白激酶A，作用于多種脂代謝相關(guān)的酶類、離子通道及轉(zhuǎn)錄因子，從而促進(jìn)脂肪分解。該基因的多個(gè)導(dǎo)致氨基酸變化的突變位點(diǎn)已經(jīng)被識(shí)別出來。一些較長(zhǎng)周期的臨床研究表明，ADRB2等位基因的攜帯者，無論是從兒童期到成年期的體重增長(zhǎng)，還是成年期的體重增長(zhǎng)都更多。一項(xiàng)臨床研究表明，高碳水化合物飲食能夠?qū)е翧DRB2基因的SNP位點(diǎn)27Glu等位基因的女性攜帶者的肥胖風(fēng)險(xiǎn)明顯增加，同時(shí)，該飲食方式與未攜帶該等位基因的女性的肥胖風(fēng)險(xiǎn)無關(guān)，這表示，27Glu等位基因増加了個(gè)體肥胖的風(fēng)險(xiǎn)，當(dāng)該個(gè)體長(zhǎng)期采取高碳水化合物的因素方式。ADRB3基因ADRB3受體分布在人的棕色和白色脂肪組織、腹內(nèi)網(wǎng)膜細(xì)胞、膽囊等組織，因?yàn)檫@些組織含有豐富的交感神經(jīng)，它們主要是通過釋放去甲腎上腺素來激動(dòng)ADRB3受體，從而激活線粒體上的偶聯(lián)蛋白，刺激脂肪酸氧化和磷酸化而消耗體內(nèi)過多的脂肪，該受體機(jī)能下降與肥胖的病理生理有夫.β 3腎上腺素受體基因在人群中呈多態(tài)性表達(dá)，目前已發(fā)現(xiàn)該受體基因上有4個(gè)單核苷酸多態(tài)性，其中一個(gè)為功能性變異，這可能是ADRB3基因變異通過綁定ADRB3受體蛋白實(shí)現(xiàn)功能發(fā)揮造成活性下降，降低內(nèi)臟脂肪分解和能量產(chǎn)生，導(dǎo)致脂肪在內(nèi)臟及腹部的堆積。Beta-3腎上腺素能受體蛋白主要表達(dá)在脂肪細(xì)胞，尤其在內(nèi)臟脂肪細(xì)胞，參與調(diào)節(jié)腹腔內(nèi)脂肪組織的脂解及產(chǎn)熱過程。該基因序列上的T — C突變，導(dǎo)致氨基酸多肽序列上的色氨酸被精氨酸取代，由于這ー突變正好位于受體的第一個(gè)細(xì)胞內(nèi)功能區(qū)，可致機(jī)體內(nèi)脂肪分解能力下降，生熱作用減弱。ー項(xiàng)研究中，76個(gè)日本婦女參加了一個(gè)預(yù)防肥胖的研究，包括飲食的改變(在減少能量攝入)和體力活動(dòng)(歩行)，以及個(gè)性化的監(jiān)測(cè)和支持性団體治療。結(jié)果表明，攜兩個(gè)A等位基因的婦女，其體重減輕與減少能量攝入和增加步行量直接相關(guān)。然而，有ー個(gè)或兩個(gè)風(fēng)險(xiǎn)等位等位基因的婦女沒有有明顯的體重減輕，盡管明顯減少了她們的能量攝入，増加了她們的歩行量。因此，需要建立一套以個(gè)體對(duì)肥胖的遺傳易感性為參考的個(gè)性化的減肥方案，以改善減肥和保持體重的成效。而要了解個(gè)體對(duì)肥胖的遺傳易感性、不同飲食和運(yùn)動(dòng)方式的反應(yīng)的差異，就需要建立一套檢測(cè)方法，分辨與人體能量代謝相關(guān)的基因的基因型。通過檢測(cè)這些基因位點(diǎn)，可了解個(gè)體對(duì)肥胖的遺傳易感性、不同飲食和運(yùn)動(dòng)方式的反應(yīng)的差異，并向被檢人提供個(gè)性化的體重管理方案。
目前，商業(yè)用的基因分型方法主要包括有l(wèi))MiCix)array芯片雖然可以高通量、較為準(zhǔn)確地檢測(cè)分型，但成本較高，且儀器價(jià)格昂貴；2)全基因組測(cè)序，雖然能很好分型，但是機(jī)器昂貴，成本高，同時(shí)，用于特異的SNP位點(diǎn)分型顯然過于浪費(fèi)。3)熒光PCR系統(tǒng)雖然較前兩種方法更經(jīng)濟(jì)ー些，但檢測(cè)規(guī)模有限，不利于商業(yè)化。相比較而言，酶切及PCR-SSCP SNP位點(diǎn)分型法更適合商業(yè)機(jī)構(gòu)進(jìn)行目標(biāo)模板的基因分型1)需要的成本較低；2)靈敏度相對(duì)較高；3)特異性強(qiáng)；4)能夠同時(shí)進(jìn)行大量樣品的檢測(cè)，有利于規(guī)?；瘷z測(cè)，適合于商業(yè)應(yīng)用。酶切分型法PCR-RFLP 限制性內(nèi)切酶能特異地結(jié)合于一段被稱為限制性酶識(shí)別序列的DNA序列之內(nèi)或其附近的特異位點(diǎn)上，并切割雙鏈DNA。5' ...G I AATTC...3'3'…CTTAA f G…5'如果SNP產(chǎn)生或消除了某個(gè)限制性內(nèi)切酶位點(diǎn)，則可以通過對(duì)PCR產(chǎn)物酶切，電泳后檢測(cè)。該方法可以針對(duì)已知DNA序列的SNP位點(diǎn)，利用特定限制性內(nèi)切酶特異的識(shí)別SNP位點(diǎn)的不同堿基，從而精確分析出該SNP位點(diǎn)的基因型。結(jié)合序列分析，可做到對(duì)大批量樣品的目的DNA片度的“全掃描”分析，不僅成本低，而且自動(dòng)化程度高，因此，在進(jìn)行基因診斷和多態(tài)性分析，包括單核苷酸多態(tài)(SNP)的檢測(cè)中，PCR-RFLP技術(shù)不失為ー種準(zhǔn)確、快速、簡(jiǎn)便、經(jīng)濟(jì)的技術(shù)手段。PCR-SSCP 分型法DNA 單鏈構(gòu)象多態(tài)性(Single Strand Conformation Polymorphism, SSCP)SSCP是指等長(zhǎng)的單鏈DNA因核昔酸序列的差異而產(chǎn)生構(gòu)象變異，在非變性聚丙烯酞胺中的表現(xiàn)為電泳遷移率的差別。單鏈DNA構(gòu)象分析對(duì)DNA序列的改變非常敏感，常常一個(gè)堿基差別都能顯示出來。在SSCP分析中，利用PCR技術(shù)定點(diǎn)擴(kuò)增基因組DNA中某一目的片段，將擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行變性處理，雙鏈DNA分開成單鏈，再用非變性聚丙烯酞胺凝膠電泳分離，根據(jù)條帶位置變化來判斷目的片段中是否存在突變。PCR-SSCP技術(shù)是檢測(cè)DNA突變最為直觀而精確的實(shí)驗(yàn)技術(shù)手段之一，該方法對(duì)長(zhǎng)度在100-300bp之間的DNA片度突變檢測(cè)的靈敏度可達(dá)100%，結(jié)合序列分析，可做到對(duì)大批量樣品的目的DNA片度的“全掃描”分析，不僅成本低，而且自動(dòng)化程度高，因此，在進(jìn)行基因診斷和多態(tài)性分析，包括單核苷酸多態(tài)(SNP)的檢測(cè)中，PCR-SSCP技術(shù)不失為ー種準(zhǔn)確、快速、簡(jiǎn)便、經(jīng)濟(jì)的技術(shù)手段。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種用于制備個(gè)體化減重方案的分子標(biāo)記試劑盒，其包含SEQ ID NO :1-10所示的核苷酸。所述試劑盒還包含限制性內(nèi)切酶Hha I、Msp I和Bbvl。所述試劑盒還包含DNA提取液。所述DNA提取液包含緩沖液GA、緩沖液GB、緩沖液GD、漂洗液PW、洗脫緩沖液TB和蛋白酶K。所述試劑盒還可以包含吸附柱、收集管和離心管。具體地，SEQ ID NO :1_10所示的核苷酸可用于制備個(gè)體化減重方案的分子標(biāo)記試劑盒，其可用作引物。其中，引物SEQ ID NO :1-2用于擴(kuò)增FTO基因；引物SEQ ID NO 3-4用于擴(kuò)增FABP2基因；引物SEQ ID NO :5_6用于擴(kuò)增ADRB3基因；引物SEQ ID NO :7_8用于擴(kuò)增PPARG基因；引物SEQ ID NO :9_10用于擴(kuò)增ADRB2基因。通過本發(fā)明提供的試劑盒，對(duì)檢測(cè)者SNPs基因型的分析，出具綜合遺傳體質(zhì)分析報(bào)告単，由營(yíng)養(yǎng)師向被測(cè)者推薦適合其減重的飲食方式(低脂飲食、低碳水化合物飲食、平衡飲食)，井根據(jù)被測(cè)者的實(shí)際情況，分析其每天需要的攝入熱量，個(gè)體化地安排三餐中3大營(yíng)養(yǎng)元素(脂肪、蛋白質(zhì)、碳水化合物)的比例，從而達(dá)到健康、科學(xué)、有效減重的目的。而且，本發(fā)明采用的試劑盒，其可以通過酶切及PCR-SSCP SNP位點(diǎn)分型法更適合商業(yè)機(jī)構(gòu)進(jìn)行目標(biāo)模板的基因分型1)需要的成本較低；2)靈敏度相對(duì)較高；3)能夠同時(shí)進(jìn)行大量樣品的檢測(cè)，有利于規(guī)?；瘷z測(cè)，適合于商業(yè)應(yīng)用。為讓本發(fā)明的上述和其它目的、特征和優(yōu)點(diǎn)能更明顯易懂，下文特舉較佳實(shí)施例，并配合附圖，作詳細(xì)說明如下。


圖I是本發(fā)明的試驗(yàn)流程示意圖；圖2是PCR擴(kuò)增結(jié)果，其中M，600bp DNA marker，泳道I為引物SEQ IDNO 1~2對(duì)FTO基因擴(kuò)增的片度；泳道2為引物SEQ ID NO :3_4對(duì)FABP2基因擴(kuò)增的片度；泳道3為引物SEQ ID NO :5-6對(duì)ADRB3基因擴(kuò)增的片度；泳道4為引物SEQID NO :7_8對(duì)PPARG基因擴(kuò)增的片度；泳道5為引物SEQ ID NO 9-10對(duì)ADRB2基因擴(kuò)增的片度；圖3是FABP2基因的rs 1799883位點(diǎn)酶切判型圖，其中M，600bp DNAmarker ;泳道1-3為G等位基因的純合子；泳道4-6為A等位基因的純合子；泳道7-9為G/A等位基因的雜合子；圖4是ADRB3rs4994位點(diǎn)的酶切判型圖，其中，M，600bp DNAmarker泳道1_2為T等位基因的純合子；泳道3為T/C等位基因的雜合子；圖5是ADRB2rsl042714位點(diǎn)的酶切判型圖，其中，M泳道為DNAMarkerDL 1000，泳道1-2為CC純合型；泳道3-4為GC雜合型；泳道5為GG純合型；
圖6是FTO rs9939609位點(diǎn)的聚丙烯酰胺凝膠電泳結(jié)果圖，泳道2、5，A/A等位基因純合子；泳道1、3、6、7，A/T等位基因雜合子；泳道4，T/T等位基因純合子(泳道2、4為參考物)；圖7是FTO rs9939609的A/A等位基因的純合子測(cè)序圖；圖8是FTO rs9939609的T/T等位基因的純合子測(cè)序圖；圖9是PPARG rsl801282位點(diǎn)的聚丙烯酰胺凝膠電泳結(jié)果圖，其中，泳道1、3、7，C/C等位基因純合子；泳道2、5、6，C/G等位基因雜合子；泳道4，G/G等位基因純合子(泳道
1、4為參考物);圖10是PPARG rsl801282的C/C等位基因的純合子測(cè)序圖； 圖11是PPARG rsl801282的G/G等位基因的純合子測(cè)序圖。
具體實(shí)施例方式請(qǐng)參考圖I，其是本發(fā)明的試驗(yàn)流程示意圖，其基本試驗(yàn)流程為I、提取DNA模板；2、PCR擴(kuò)增含有特定SNP位點(diǎn)的片段；3、利用酶切法分別對(duì)FABP2基因的rs 1799883位點(diǎn)，ADRB3基因的rs4994位點(diǎn)，以及ADRB2基因的rsl042714位點(diǎn)進(jìn)行分型；利用PCR-SSCP分型法對(duì)FTO基因的rs9939609位點(diǎn)，PPARG基因的rsl801282位點(diǎn)進(jìn)行分型；最后根據(jù)分型結(jié)果對(duì)受試者給出合理的減肥方案。實(shí)施例I :提取口腔黏膜細(xì)胞DNA用ロ腔黏膜拭子采集受檢者口腔內(nèi)的黏膜細(xì)胞，利用上海天根生物生產(chǎn)的ロ腔拭子基因組DNA提取試劑盒提取受檢者的基因組DNA。步驟如下I.處理材料將在面頰內(nèi)擦拭過的拭子轉(zhuǎn)置于2ml離心管中，用剪刀將棉簽部分從其桿上剪下，加入400 μ I緩沖液GA。2.加入20 μ I蛋白酶K溶液，渦旋10秒混勻，56°C放置60分鐘，其間每15分鐘渦
旋混勻數(shù)次。3.加入400 μ I緩沖液GB，充分顛倒混勻，70°C放置10分鐘，此時(shí)溶液應(yīng)變清亮，
簡(jiǎn)短離心以去除管蓋內(nèi)壁的液滴。4.加200 μ I無水こ醇，充分顛倒混勻，簡(jiǎn)短離心以去除管蓋內(nèi)壁的液滴。5.將上一歩所得溶液和絮狀沉淀都加入一個(gè)吸附柱CR中(吸附柱CR放入收集管中)，12，000rpm ( 13，400Xg)離心30秒，倒掉收集管中的廢液，將吸附柱CR放回收集管中。6.向吸附柱CR中加入500μ I緩沖液⑶(使用前請(qǐng)先檢查是否已加入無水こ醇)，12，OOOrpm( 13，400Xg)離心30秒，倒掉收集管中的廢液，將吸附柱CR放回收集管中。7.向吸附柱CR中加入700μ I漂洗液PW(使用前請(qǐng)先檢查是否已加入無水こ醇)，12，OOOrpm( 13，400Xg)離心30秒，倒掉收集管中的廢液，將吸附柱CR放回收集管。8.向吸附柱CR中加入500 μ I漂洗液Pff, 12，OOOrpm( 13，400 Xg)離心30秒，倒掉收集管中的廢液。
9.將吸附柱CR放回收集管中，12，OOOrpm( 13，400Xg)離心2分鐘，倒掉廢液。將吸附柱CR室溫放置數(shù)分鐘，以徹底晾干吸附材料中殘余的漂洗液。10.將吸附柱CR轉(zhuǎn)入ー個(gè)干凈的離心管中，向吸附膜中間位置懸空滴加20-50 μ I洗脫緩沖液TB，室溫放置2-5分鐘，12，OOOrpm ( 13，400 Xg)離心2分鐘。11.離心后便得到了還有基因組DNA的洗脫液，可直接作為DNA模板使用。實(shí)施例2 =PCR擴(kuò)增含有特定SNP位點(diǎn)的片段I.引物的制備依次為SEQ ID NO :卜10以下第I號(hào)至第5號(hào)引物由深圳華大基因合成表I
權(quán)利要求
1.一種用于制定個(gè)體化減重方案的分子標(biāo)記試劑盒，其特征在于，包含SEQID NO:1-10所示的核苷酸。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒還包含限制性內(nèi)切酶HhaI、Msp I 和 BbvIo
3.根據(jù)權(quán)利要求I或2所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒還包含DNA提取液。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的試劑盒，其特征在于，所述DNA提取液包含緩沖液GA、緩沖液GB、緩沖液GD、漂洗液PW、洗脫緩沖液TB和蛋白酶K。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒還包含吸附柱、收集管和離心管。
6.SEQ ID NO :1-10所示的核苷酸在制備個(gè)體化減重方案的分子標(biāo)記試劑盒中的應(yīng)用。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的應(yīng)用，其特征在于，所述核苷酸用作引物。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的應(yīng)用，其特征在于，引物SEQID NO :1-2用于擴(kuò)增FTO基因；引物SEQ ID NO :3-4用于擴(kuò)增FABP2基因；引物SEQ ID NO :5_6用于擴(kuò)增ADRB3基因；引物SEQ ID NO :7-8用于擴(kuò)增PPARG基因；引物SEQID NO :9_10用于擴(kuò)增ADRB2基因。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種用于制定個(gè)體化減重方案的分子標(biāo)記試劑盒。該試劑盒包含SEQ ID NO1-10所示的核苷酸。還可以包含限制性內(nèi)切酶Hha I、Msp I和BbvI。應(yīng)用該試劑盒，對(duì)檢測(cè)者SNPs基因型的分析，出具綜合遺傳體質(zhì)分析報(bào)告單，由營(yíng)養(yǎng)師向被測(cè)者推薦適合其減重的飲食方式(低脂飲食、低碳水化合物飲食、平衡飲食)，并根據(jù)被測(cè)者的實(shí)際情況，分析其每天需要的攝入熱量，個(gè)體化地安排三餐中3大營(yíng)養(yǎng)元素(脂肪、蛋白質(zhì)、碳水化合物)的比例，從而達(dá)到健康、科學(xué)、有效減重的目的。
文檔編號(hào)C12Q1/68GK102676639SQ20111005485
公開日2012年9月19日 申請(qǐng)日期2011年3月8日 優(yōu)先權(quán)日2011年3月8日
發(fā)明者魯浪 申請(qǐng)人:重慶卡農(nóng)科技有限公司