專利名稱：通過高效液相色譜法分離測定恩替卡韋及其非對映異構(gòu)體的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于分析化學(xué)領(lǐng)域，具體涉及用高效液相色譜法分離測定恩替卡韋及其非對映異構(gòu)體的方法。
背景技術(shù)：
恩替卡韋(Entecavir)是一種高效選擇性乙肝病毒(HBV)多聚酶抑制劑，由美國公司研制開發(fā)上市，用于治療慢性乙型肝炎。其化學(xué)名為2-氨基-9_[(1S，3R， 4S) -4-羥基-3-羥甲基-2-亞甲基環(huán)戊基]-1，9- 二氫-6H-嘌呤-6-酮一水合物，分子式 C12H15N5O3 ·Η20，分子量295. 3。恩替卡韋分子中含有3個(gè)手性碳原子，在化學(xué)合成中會產(chǎn)生 8種立體構(gòu)型不同的光學(xué)異構(gòu)體，其中一個(gè)為對映異構(gòu)體，另外6個(gè)為非對映異構(gòu)體。除恩替卡韋外，其它7個(gè)光學(xué)異構(gòu)體被列為恩替卡韋的雜質(zhì)。本發(fā)明將恩替卡韋、恩替卡韋對映異構(gòu)體及恩替卡韋6個(gè)非對映異構(gòu)體分別簡稱為ET，ETY-I，ΕΤΥ-2，ΕΤΥ-3，ΕΤΥ-4，ΕΤΥ-5， ΕΤΥ-6, ΕΤΥ-7，其中 ET 與 ETY-I，ΕΤΥ-2 與 ΕΤΥ-3，ΕΤΥ-4 與 ΕΤΥ-5，ΕΤΥ-6 與 ΕΤΥ-7 分別兩兩
權(quán)利要求
1.通過高效液相色譜法分離測定恩替卡韋及其非對映異構(gòu)體的方法，其特征在于以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以乙腈-水混合溶液為流動相進(jìn)行線性梯度洗脫。
2.權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述的線性梯度洗脫為初始流動相中乙腈與水的體積比為0 100 5 95，最終流動相中乙腈與水的體積比為5 95 15 85。
3.權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述的線性梯度洗脫為初始流動相中乙腈與水的體積比為0 100 5 95，最終流動相中乙腈與水的體積比為6 94 12 88。
4.權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述的線性梯度洗脫為初始流動相中乙腈與水的體積比為3 97，最終流動相中乙腈與水的體積比為10 90。
5.權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于色譜條件用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以乙腈-水混合溶液為流動相進(jìn)行線性梯度洗脫，檢測波長為2IOnm ^Onm，柱溫為20 45 °C，流動相流速為0. 5 2. Oml/ min ；樣品溶液配制采用極性溶劑制得含恩替卡韋及其各非對映異構(gòu)體各為0. 05 0. 5mg/ml的溶液，所述極性溶劑選自水、甲醇、乙腈中的一種或多種；測定將溶液注入高效液相色譜儀，記錄色譜圖并進(jìn)行分析。
6.權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于所述檢測波長為254nm。
7.權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于所述柱溫為30°C。
8.權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于所述流動相流速為l.Oml/min。
9.權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于所述極性溶劑為甲醇。
10.權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于所述樣品溶液配制為采用極性溶劑制得含恩替卡韋及其各非對映異構(gòu)體各0. lmg/ml的溶液。
全文摘要
本發(fā)明屬于分析化學(xué)領(lǐng)域，涉及通過高效液相色譜法分離測定恩替卡韋及其非對映異構(gòu)體的方法。本發(fā)明提供了以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以乙腈-水混合溶液為流動相進(jìn)行線性梯度洗脫的高效液相色譜法分離測定恩替卡韋及其非對映異構(gòu)體的方法，能準(zhǔn)確的分離和測定恩替卡韋及恩替卡韋制劑的各非對映異構(gòu)體。
文檔編號G01N30/60GK102384946SQ201010272378
公開日2012年3月21日 申請日期2010年9月3日 優(yōu)先權(quán)日2010年9月3日
發(fā)明者儲剛, 劉彩連, 曹芳, 李太松, 李瑋, 范婧, 陳慧, 黃海燕 申請人:南京長澳醫(yī)藥科技有限公司