專利名稱：宮頸部異常細胞檢測用試劑及用該試劑檢測宮頸部異常細胞的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明提供一種用于檢測從子宮頸部采集的生物試樣中所含如癌細胞或異型細 胞等異常細胞的試劑以及使用該試劑檢測采自宮頸部試樣中的異常細胞的方法。
背景技術(shù)：
宮頸癌是發(fā)生于子宮頸部表面上皮的癌，其大部分為扁平上皮癌。通常在宮頸癌 檢查中，首先從宮頸部采集細胞，通過細胞診斷進行篩查，如果發(fā)現(xiàn)異常，再進行組織診斷 等精密檢查。在宮頸部的組織診斷中，作為癌前病變期，根據(jù)出現(xiàn)在上皮內(nèi)的異型細胞的出現(xiàn) 程度分為輕度、中度或重度三個階段的發(fā)育異常。從重度發(fā)育異常再惡化，就進入上皮內(nèi)出 現(xiàn)癌細胞階段。然后，再發(fā)展為癌細胞局限于上皮層內(nèi)的“原位癌”和癌細胞從上皮蔓延到 皮下組織的“浸潤癌(所謂的宮頸癌)。進行細胞診斷，即篩查，以判斷是否進行上述組織診斷。此細胞診斷是將采自子宮 頸部的生物樣本試樣涂抹在玻片上用顯微鏡等觀察。在細胞診斷中，需要根據(jù)檢查人員的觀察來判斷，若檢測試樣制備不好則有可能 看漏宮頸癌，還要依賴于檢查人員的熟練技術(shù)，因此很難快速、精確地檢查大量試樣。而且 很可能缺乏有熟練技術(shù)的檢查人員。因此，人們嘗試著利用自動化系統(tǒng)檢測從子宮頸部采集的生物試樣中所含的異常 細胞，將其作為細胞診斷的補充?？捎糜谧詣踊到y(tǒng)的異常細胞檢測方法中，已知有用熒光色素染色細胞核內(nèi)的 DNA，用流式細胞儀測定熒光，算出DNA量，根據(jù)算出的DNA量檢測癌細胞。W. A. Linden等人(非專利文獻1)用溴化乙錠染色采自宮頸部的細胞的DNA，進行 熒光測定，檢測癌細胞，還在用溴乙錠染色DNA的同時，用異硫氰酸熒光素(FITC)染色蛋白 質(zhì)，基于DNA量和蛋白質(zhì)量檢測癌細胞。B. J. Fowlkes等人(非專利文獻2)則用碘化丙啶(PI)和FITC分別染色細胞核和 細胞質(zhì)，用流式細胞儀測定二種熒光，根據(jù)這些熒光的強度檢測癌細胞。然而，這些方法發(fā)生假陽性和假陰性的概率高，在宮頸癌自動化檢測系統(tǒng)上的應 用未能實現(xiàn)。美國專利第4883867號(專利文獻1)中記載了用以下通式染色并檢測網(wǎng)織紅細 胞的方法[化 1]
權(quán)利要求
1. 一種宮頸部異常細胞檢測用試劑，用于檢測含有米集自子宮頸部的細胞的生物試樣 中所含異常細胞，其特征在于，其包含以通式(I)所示化合物或其鹽 [化1]
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的宮頸部異常細胞檢測用試劑，還包括從碘化丙啶、溴乙錠和 吖啶橙中選擇的插入色素。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的宮頸部異常細胞檢測用試劑，其特征在于，PH為7-8.5。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的宮頸部異常細胞檢測用試劑，其特征在于，具有200-350m0sm 的滲透壓。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的宮頸部異常細胞檢測用試劑，其特征在于，式(I)所示化合物 是鹽，負離子是陰離子。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的宮頸部異常細胞檢測用試劑，其特征在于異常細胞是癌細 胞或異型細胞。
7.—種檢測生物試樣中異常細胞的檢測方法，包括以下步驟將含有采自宮頸部的細胞的生物試樣與權(quán)利要求1所述宮頸部異常細胞檢測用試劑 接觸，制備測定用試樣；讓測定用試樣流過流動室，用激光照射流經(jīng)流動室的測定用試樣，檢測測定用試樣發(fā) 出的熒光；根據(jù)所檢測熒光生成的熒光信號，獲取細胞核的相關(guān)信息；及 根據(jù)獲取的細胞核信息，檢測所述試樣中的異常細胞。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法，其特征在于，細胞核相關(guān)信息是從細胞DNA量的相關(guān)信 息、細胞的染色質(zhì)凝集的相關(guān)信息以及細胞核徑的相關(guān)信息中選擇的至少二種。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的方法，其特征在于，細胞DNA量的相關(guān)信息是熒光信號的波形面積的相應值， 細胞的染色質(zhì)凝集的相關(guān)信息是熒光信號的波形高度的相應值， 細胞核徑的相關(guān)信息是熒光信號的波形寬度的相應值。
10.根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法，其特征在于，異常細胞是癌細胞或異型細胞。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種含有分子式(I)的色素的宮頸部異常細胞檢測用試劑，該試劑用于檢測從宮頸部采集的含細胞的活體試樣中所含異常細胞。
文檔編號C12Q1/04GK102112875SQ200980130218
公開日2011年6月29日 申請日期2009年7月27日 優(yōu)先權(quán)日2008年7月30日
發(fā)明者森田將且, 河合昭典, 辻野幸夫 申請人:希森美康株式會社