專利名稱：一種黑木耳多糖的提取方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種黑木耳多糖的提取方法。
背景技術(shù)：
黑木耳又名木蛾，亦名木雞、樹雞，它是食用菌的主要品種之一，具有很高的營(yíng)養(yǎng) 價(jià)值。黑木耳除了人們生活中的食用以外還具有較高的藥用效果。明代李時(shí)珍在《本草綱 目》中對(duì)黑木耳"益氣不饑，輕身強(qiáng)志，斷谷治痔"的記載表明了黑木耳具有涼血、活血、益氣 強(qiáng)身等功效。黑木耳含豐富的膠質(zhì)，對(duì)于消化系統(tǒng)具有良好的清滑作用。隨著人們對(duì)黑木 耳藥用價(jià)值認(rèn)識(shí)的逐漸深入，發(fā)現(xiàn)黑木耳具有廣泛的生物學(xué)活性，其中對(duì)心腦血管的作用 正逐漸引起人們的重視。其中，從已知的藥理學(xué)作用可知，黑木耳多糖可明顯降低血脂、膽 固醇、血糖及脂褐質(zhì)含量，同時(shí)還具有抗腫瘤、抗炎癥、抗凝血、抗動(dòng)脈粥樣硬化、抗血細(xì)胞 降低、抗放射、抗血栓形成等作用，并且還可增強(qiáng)S0D活力，減少有害物質(zhì)自由基生產(chǎn)并提 高免疫力。 黑木耳的記載已有2000多年的歷史。野生黑木耳的生長(zhǎng)分布非常廣，主要分布在 北半球溫帶地區(qū)的東北亞，我國(guó)幅員廣闊，而大部分地區(qū)屬溫?zé)岬貛В瑲夂驕睾?，雨水充沛?十分適宜黑木耳的生長(zhǎng)發(fā)育。因此，中國(guó)是世界上最早生產(chǎn)和食用黑木耳的國(guó)家，尤其是我 國(guó)的北方地區(qū)產(chǎn)量最多。隨著科學(xué)技術(shù)的不斷進(jìn)步和經(jīng)濟(jì)社會(huì)的發(fā)展，黑木耳的生長(zhǎng)模式 和分布也發(fā)生了根本性的變化，從野生生長(zhǎng)法一椴木打孔接種法-袋料栽培法。目前主要 分布在遼寧、吉林、黑龍江、四川、浙江、河北、福建等地，浙江省以麗水為主產(chǎn)區(qū)。2004年麗 水鮮黑木耳產(chǎn)量達(dá)4萬(wàn)余噸，是景寧縣、龍泉市、慶元縣等農(nóng)民的主要收入來(lái)源之一，資源 十分豐富，但是其產(chǎn)品加工附加值不足10%。麗水學(xué)院和浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)研究組最近在對(duì)黑 木耳多糖的篩選研究中發(fā)現(xiàn)，黑木耳多糖灌胃一周可減小大腦中動(dòng)脈阻斷、再通性局灶性 腦缺血、復(fù)灌導(dǎo)致的大腦梗死面積，改善神經(jīng)功能評(píng)分，減輕全心缺血引起的心肌細(xì)胞死亡 和細(xì)胞損傷性酶的釋放。這一初步觀察表明，黑木耳多糖具有潛在的對(duì)抗缺血性心腦血管 疾病的藥理效應(yīng)。因此，黑木耳多糖可能具有較高的藥用和食用價(jià)值，進(jìn)一步加工和開發(fā)黑 木耳多糖相關(guān)藥品和食品具有較大的社會(huì)效益和經(jīng)濟(jì)價(jià)值。而現(xiàn)在還未見有黑木耳多糖提 出方法的相關(guān)報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
為了提高黑木耳產(chǎn)品的加工附加值，進(jìn)一步開發(fā)與黑木耳多糖相關(guān)的藥品和食 品，本發(fā)明的目的是提供一種方法簡(jiǎn)便的黑木耳多糖的提取方法。 為了達(dá)到上述的目的，本發(fā)明采用了以下的技術(shù)方案一種黑木耳多糖的提取方 法，包括以下的工藝 a)稱取黑木耳、粉碎后，加入80 100倍重量比的水，浸泡20 40分鐘；
b)加入復(fù)合水解酶反應(yīng)20 40分鐘，反應(yīng)溫度保持在40 60攝氏度；
c)再加入木瓜蛋白酶反應(yīng)80 100分鐘，反應(yīng)溫度保持再40 60攝氏度；
3
d)于80 100攝氏度水浴中滅酶，浸提1 2小時(shí)，得提取物； e)取上述步驟d)的黑木耳提取物，用離心機(jī)離心5 15分鐘，去除沉淀，濃縮上
清液； f)取上述的上清液，與體積百分比濃度為90 95%乙醇按1 : 2 1 : 4的體 積比例進(jìn)行沉淀，得黑木耳多糖粗品； g)取上述粗品復(fù)溶于水，加入與樣液按體積比1 : 3 1 : 5的Sevag試劑脫蛋 白； h)濃縮上清夜后用濃體積百分比度90 95%乙醇沉淀、干燥，得精品。 作為優(yōu)選，上述步驟b)中的復(fù)合水解酶含有纖維素酶和果膠酶。 作為優(yōu)選，上述每克纖維酶含有4萬(wàn)酶活單位。 作為優(yōu)選，上述每克果膠酶含有2萬(wàn)酶活單位。 作為優(yōu)選，上述的復(fù)合水解酶的質(zhì)量百分比濃度為2%。 作為優(yōu)選，上述的每克木瓜蛋白酶含有25萬(wàn)酶活單位。 作為優(yōu)選，上述的木瓜蛋白酶的質(zhì)量百分比濃度為1.25%。 作為優(yōu)選，上述乙醇的體積百分比濃度為95% 。 作為選優(yōu)，上述的步驟h)的干燥為真空冷凍干燥。 本發(fā)明的提取方法簡(jiǎn)便，提取出的黑木耳多糖含有3種多糖成分，包括粗多糖 (FA)、酸性多糖(FA-A)和中性多糖(FA-N)。本發(fā)明提取的黑木耳多糖制成作為臨床上的 抗缺血性心腦血管疾病藥物的適合藥劑，有利于進(jìn)一步開發(fā)與黑木耳多糖相關(guān)的藥品和食 品，提高了黑木耳產(chǎn)品的加工附加值，大大提高黑木耳產(chǎn)品的經(jīng)濟(jì)效益，根據(jù)預(yù)算，浙江麗 水市景寧縣黑木耳原料成本為每公斤60元，再加上提取的成本，每克成本再10元以下，黑 木耳的附加值將提高80倍以上。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例一種黑木耳多糖的提取方法，包括以下的工藝
1、黑木耳5g、粉碎后，加入450g的水，浸泡30分鐘； 2、加入質(zhì)量百分比濃度2%復(fù)合水解酶，反應(yīng)30分鐘，反應(yīng)溫度保持再50攝氏度， 其中復(fù)合水解酶含有纖維素酶和果膠酶，每克纖維酶含有4萬(wàn)酶活單位，每克果膠酶含有2 萬(wàn)酶活單位； 3、再加入質(zhì)量百分比濃度1. 25%木瓜蛋白酶反應(yīng)90分鐘，反應(yīng)溫度保持再50攝
氏度；其中每克木瓜蛋白酶含有25萬(wàn)酶活單位； 4、再于90攝氏度水浴種滅酶，浸提1. 5小時(shí)，得提取物； 5、取上述步驟4的黑木耳提取物，用離心機(jī)離心10分鐘，去除沉淀，濃縮上清夜；
6、取上述的上清液，與體積百分比濃度95%乙醇按1 : 3的體積比例進(jìn)行沉淀，得 黑木耳多糖粗品； 7、取上述粗品復(fù)溶于水，加入與樣液按體積比為1 : 4的Sevag試劑脫蛋白；
8、濃縮上清夜后用體積百分比濃度95%乙醇沉淀、放入真空冷凍干燥機(jī)干燥，得
鮮口 不冃口口o 上述制得的精品為灰白色絮團(tuán)狀固體，蓬松柔軟，臨時(shí)用時(shí)加入質(zhì)量百分比濃度
40. 9%生理鹽水或K-H液溶解。
權(quán)利要求
一種黑木耳多糖的提取方法，其特征在于包括以下的工藝a)稱取黑木耳、粉碎后，加入80～100倍重量比的水，浸泡20～40分鐘；b)加入復(fù)合水解酶反應(yīng)20～40分鐘，反應(yīng)溫度保持在40～60攝氏度；c)再加入木瓜蛋白酶反應(yīng)80～100分鐘，反應(yīng)溫度保持再40～60攝氏度；d)于80～100攝氏度水浴中滅酶，浸提1～2小時(shí)，得提取物；e)取上述步驟d)的黑木耳提取物，用離心機(jī)離心5～15分鐘，去除沉淀，濃縮上清液；f)取上述的上清液，與體積百分比濃度為90～95％乙醇按1∶2～1∶4的體積比例進(jìn)行沉淀，得黑木耳多糖粗品；g)取上述粗品復(fù)溶于水，加入與樣液按體積比1∶3～1∶5的Sevag試劑脫蛋白；h)濃縮上清夜后用體積百分比濃度90～95％乙醇沉淀、干燥，得精品。
2. 根據(jù)權(quán)利要求l所述的一種黑木耳多糖的提取方法，其特征在于，所述步驟b)中的 復(fù)合水解酶含有纖維素酶和果膠酶。
3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種黑木耳多糖的提取方法，其特征在于，所述每克纖維酶 含有4萬(wàn)酶活單位。
4. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種黑木耳多糖的提取方法，其特征在于，所述每克果膠酶 含有2萬(wàn)酶活單位。
5. 根據(jù)權(quán)利要求1或2或3或4所述的一種黑木耳多糖的提取方法，其特征在于，所述 的復(fù)合水解酶的質(zhì)量百分比濃度為2%。
6. 根據(jù)權(quán)利要求1或2或3或4所述的一種黑木耳多糖的提取方法，其特征在于，所述 的每克木瓜蛋白酶含有25萬(wàn)酶活單位。
7. 根據(jù)權(quán)利要求6所述的一種黑木耳多糖的提取方法，其特征在于，所述的木瓜蛋白 酶的質(zhì)量百分比濃度為1. 25%。
8. 根據(jù)權(quán)利要求1或2或3或4所述的一種黑木耳多糖的提取方法，其特征在于，所述 乙醇的體積百分比濃度為95%。
9. 根據(jù)權(quán)利要求1或2或3或4所述的一種黑木耳多糖的提取方法，其特征在于，所述 的步驟h)的干燥為真空冷凍干燥。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種黑木耳多糖的提取方法。一種黑木耳多糖的提取方法，包括浸泡，加復(fù)合酶和蛋白酶后提取，經(jīng)離心取上清液，經(jīng)乙醇沉淀得粗品和粗品精致等工藝。本發(fā)明提取方法簡(jiǎn)便，提取出的黑木耳多糖含有3種多糖成分，包括粗多糖(FA)、酸性多糖(FA-A)和中性多糖(FA-N)。本發(fā)明提取的黑木耳多糖制成作為臨床上的抗缺血性心腦血管疾病藥物的適合藥劑，有利于進(jìn)一步開發(fā)與黑木耳多糖相關(guān)的藥品和食品，提高了黑木耳產(chǎn)品的加工附加值，大大提高黑木耳產(chǎn)品的經(jīng)濟(jì)效益。
文檔編號(hào)C12P19/14GK101736055SQ200810162120
公開日2010年6月16日 申請(qǐng)日期2008年11月24日 優(yōu)先權(quán)日2008年11月24日
發(fā)明者葉挺梅 申請(qǐng)人:葉挺梅