專利名稱：長(zhǎng)春花谷胱甘肽轉(zhuǎn)移酶的基因序列的制作方法
所屬領(lǐng)域本發(fā)明屬于生物基因領(lǐng)域，具體涉及長(zhǎng)春花干旱脅迫相關(guān)基因谷胱甘肽轉(zhuǎn)移酶的基因序列。
背景技術(shù)：
由于生態(tài)平衡失調(diào)，地球上有三分之一以上的土地面積屬于干旱和半干旱的地區(qū)，因此迫切需要開發(fā)利用干旱地。研究植物的抗旱機(jī)理，應(yīng)用分子生物學(xué)的方法克隆抗旱基因，運(yùn)用基因工程的技術(shù)培育耐旱物種是利用干旱地的一條經(jīng)濟(jì)而有效的途徑。
在鹽、干旱等逆境條件下，植物體內(nèi)活性氧清除或抗氧化能力的下降是引起活性氧大量積累、含量上升的主要原因?；钚匝醯姆e累能啟動(dòng)膜脂中不飽和脂肪酸的過(guò)氧化，最終導(dǎo)致膜脂和膜蛋白的損傷，破壞膜結(jié)構(gòu)和功能穩(wěn)定性，引起植物的傷害。有關(guān)逆境下活性氧積累、傷害及其清除的研究在許多植物中已有報(bào)道，這些活性氧類除了損傷蛋白質(zhì)、膜脂及其它細(xì)胞組分以外，有些活性氧類還可以充當(dāng)信號(hào)分子。為防止活性氧類的損傷，植物采用了谷胱甘肽轉(zhuǎn)移酶(glutathione S-transferase，GST)、超氧化物歧化酶(SOD)等重要的酶類來(lái)對(duì)體內(nèi)的氧化作用進(jìn)行防御，由這些酶負(fù)責(zé)催化清除植物體內(nèi)的自由基。植物體內(nèi)GST水平的提高不僅與植物對(duì)環(huán)境脅迫的忍耐有關(guān)，而且GST合成的增強(qiáng)可能是植物對(duì)環(huán)境脅迫的內(nèi)在響應(yīng)之一。
谷胱甘肽轉(zhuǎn)移酶GSTs是一個(gè)大的基因家族，在這個(gè)基因家族中，有的對(duì)除草、脫水、熱激、重金屬和病原體侵染等多種逆境起作用，還有的在生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中起重要作用。紫外輻射也可強(qiáng)烈誘導(dǎo)GST表達(dá)，這些GST與細(xì)胞抗逆境基因tpm24有較高的同源性。
GSTs可催化谷胱甘肽(glutathione，GSH)與羥基自由基、膜脂的過(guò)氧化產(chǎn)物和DNA氧化降解產(chǎn)物結(jié)合，從而減少這些物質(zhì)對(duì)細(xì)胞的毒害作用。植物含豐富的GSH。轉(zhuǎn)基因植物中GST大量表達(dá)，增強(qiáng)了GSH與氧自由基、羥基自由基的結(jié)合能力，從而減少了紫外輻射產(chǎn)生的有毒產(chǎn)物的傷害作用。
谷胱甘肽是由谷氨酸、半胱氨酸和甘氨酸所組成的一種特殊的氨基酸衍生物，其活性位點(diǎn)為半胱氨酸的巰基。巰基的存在，使其成為細(xì)胞內(nèi)強(qiáng)有力的還原劑。同時(shí)，在谷氨酸與半胱氨酸之間存在一個(gè)不多見的γ-肽鍵，能夠保護(hù)GSH不被許多肽酶水解，使其具有顯著的穩(wěn)定性。谷胱甘肽的特殊的化學(xué)結(jié)構(gòu)，使其在植物體內(nèi)具有極其重要的生理作用。它是植物控制細(xì)胞重金屬的重要的螯合物前體，并且是植物中重要的抗氧化劑和還原緩沖劑。此外它也具有保護(hù)基因、控制細(xì)胞分裂的氧化還原的作用。作為一種抗氧化劑，GSH可以被氧化為GSSG，GSSG又可在胞質(zhì)、線粒體和葉綠體中的谷胱甘肽還原酶(glutathione reductase，GR)的作用下還原為GSH，因此在植物細(xì)胞中谷胱甘肽主要以還原形式存在。
谷胱甘肽及其衍生物與一系列生理活動(dòng)相關(guān)，例如還原硫的貯存和長(zhǎng)距離運(yùn)輸，信號(hào)傳導(dǎo)清除過(guò)氧化氫以及其它活性氧化合物，去除異生素(如除草劑)的毒性，激活并綴合苯丙酮和激素以及作為底物合成植物螯合肽等。當(dāng)前對(duì)植物谷胱甘肽的研究主要集中在兩個(gè)方面，一是GSH的生物合成是如何被調(diào)控的，另一是胞內(nèi)GSH水平和氧化還原狀態(tài)是如何與環(huán)境脅迫相適應(yīng)的。
轉(zhuǎn)GST/GPX煙草的結(jié)果表明過(guò)量表達(dá)GST/GPX，無(wú)論是在脅迫條件下還是在對(duì)照條件下都可以使轉(zhuǎn)基因煙草的生長(zhǎng)提高。這種表型特征是和在脅迫條件下植物保持高水平的代謝活動(dòng)和低水平的脂類過(guò)氧化作用聯(lián)系在一起的。這些結(jié)論表明由GST/GPX提供的過(guò)氧化物清除能力的提高在防止植物遭受由于脅迫誘導(dǎo)產(chǎn)生的氧化損傷的過(guò)程中可能是一個(gè)關(guān)鍵因子。
經(jīng)檢索，未發(fā)現(xiàn)任何公開或報(bào)道過(guò)長(zhǎng)春花GST蛋白的基因序列及氨基酸序列。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的第一目的在于提供一種來(lái)自于長(zhǎng)春花的第三組LEA蛋白的核苷酸序列，其特征在于，它包括編碼據(jù)有GST的功能區(qū)序列。所述的核苷酸序列與與辣椒全長(zhǎng)基因GST1同源性高達(dá)67.7％，以及大戟屬植物全長(zhǎng)基因GST同源性高達(dá)57.7％。
本發(fā)明的第二目的在于提供一種快速獲得脅迫相關(guān)基因全長(zhǎng)序列的方法。
本發(fā)明的cDNA分子是通過(guò)如下的方法獲得的首先通過(guò)測(cè)定植物葉片水勢(shì)來(lái)尋找植物中度脅迫的處理?xiàng)l件。使植物干旱脅迫下表達(dá)蛋白的豐度富集。
其次，采用最適處理材料進(jìn)行總RNA的提取及mRNA的純化，用mRNA進(jìn)行全長(zhǎng)cDNA表達(dá)文庫(kù)的構(gòu)建。構(gòu)建后cDNA處于真核表達(dá)載體質(zhì)粒pCMV上，可直接進(jìn)行克隆cDNA的表達(dá)文庫(kù)的篩選。
最后，采用3730測(cè)序儀，對(duì)隨機(jī)挑選的克隆進(jìn)行測(cè)序。EST標(biāo)簽在與NCBI數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行比對(duì)后，對(duì)相關(guān)克隆測(cè)通全長(zhǎng)，得到完整的GST基因的完全編碼序列。
本發(fā)明的重要應(yīng)用價(jià)值在于谷胱甘肽(GSH)在植物抵抗氧化脅迫中的主要作用是通過(guò)ASC-GST循環(huán)而使脫氫抗壞血酸再還原實(shí)現(xiàn)的。在這一途徑中，作為H2O2還原的再循環(huán)中間物而存在；而GSH的高效再循環(huán)由谷胱甘肽還原酶(GST)來(lái)完成。在氧化脅迫條件下，H2O2等ROS被GSH還原，同時(shí)GSH被氧化為GSSG；而在正常生理?xiàng)l件下，GSSG在NADPH存在時(shí)可被GST還原為GSH，因而形成一種氧化還原循環(huán)。為防止活性氧類的損傷，植物采用了谷胱甘肽轉(zhuǎn)移酶(GST)、超氧化物歧化酶(SOD)等重要的酶類來(lái)對(duì)體內(nèi)的氧化作用進(jìn)行防御，由這些酶負(fù)責(zé)催化清除植物體內(nèi)的自由基。植物體內(nèi)GST水平的提高不僅與植物對(duì)環(huán)境脅迫的忍耐有關(guān)，而且GST合成的增強(qiáng)可能是植物對(duì)環(huán)境脅迫的內(nèi)在響應(yīng)之一。


附圖1不同植物來(lái)源GST蛋白的同源性比對(duì)圖具體實(shí)施方法實(shí)施例1 長(zhǎng)春花干旱脅迫相關(guān)基因谷胱甘肽轉(zhuǎn)移酶全長(zhǎng)基因的克隆步驟1，植物材料處理長(zhǎng)春花幼苗播種在珍珠巖中，在光照培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，每天澆水，取1個(gè)月苗齡的長(zhǎng)春花植株在光培箱中自然脫水，沒(méi)隔一小時(shí)測(cè)葉片水勢(shì)及滲透勢(shì)，以達(dá)-1.0MPa為標(biāo)準(zhǔn)取材。取葉片液氮速凍，立即放入-70度的超低溫冰箱中。
步驟2，總RNA的提取及mRNA的純化1.利用Trizol(Gibco)一步法提取總RNA，根據(jù)試劑盒說(shuō)明書步驟進(jìn)行。對(duì)總RNA定量并進(jìn)行變性電泳質(zhì)量分析。
2.mRNA的純化利用Oligotex mRNA Purification Kit(Qiagen)從總RNA中純化mRNA并進(jìn)行定量。
步驟3，λZAPExpresscDNA文庫(kù)的構(gòu)建(Stratagene)1.cDNA第一鏈的合成(1)冰上建立如下體系5.0μL 10×buffer 3.0μLdNTP Mix，2.0μL Link-Primer 12.5μL DEPC-H2O，1.0μLRNAsin，混勻，加入mRNA 5μg，加入1.5μL反轉(zhuǎn)錄酶。
(2)輕輕混勻，42℃溫育1hr。
2.cDNA第二鏈的合成(1)在第一鏈反應(yīng)體系中順序加入20μL 10×buffer，6.0μL dNTP Mix，116μLDEPC-H2O，2.0μL RNAseH(1.5U/μL)，11.0μL DNA polymerase I(9.0U/μL)(2)置16℃水浴保溫2.5hr。
3.cDNA末端補(bǔ)平(1)冰上加如下試劑23μL dNTP Mix，2.0μL pfu DNA pol(2.5U/μL)。
(2)72℃溫育30min。
(3)用200μL酚/氯仿抽提一次，室溫高速離心2min，轉(zhuǎn)上清于另一新管中。
(4)用等體積氯仿抽提一次，轉(zhuǎn)上清于另一新管中。
(5)加20μL 3mol/L NaAc，400μL 100％乙醇，混勻，-20℃過(guò)夜。
(6)4℃ 16000g離心60min，收集cDNA沉淀。
(7)加500μL 70％乙醇輕輕洗。
(8)全速離心2min，室溫下抽真空使沉淀干燥。
(9)沉淀重懸于9.0μL EcoR I adapters中。4℃保溫至完全溶解。
4.EcoR I銜接子的連接(1)順序加入1.0μL 10×buffer(Ligase Buffer)。
1.0μL 10mmol/L rATP1.0μL T4DNA ligase(4U/μL)4℃連接2天。
(2)70℃水浴30min，以滅活Ligase。
5.EcoR I連接子末端的磷酸化。
(1)室溫離心2s并放置5min，加入1.0μL 10×Ligase Buffer2.0μL 10mmol/L rATP5.0μL sterile H2O2.0μL T4 Kinase(5U/μL)37℃保溫30min。
(2)70℃加熱30min滅活Kinase
6.Xho I消化加入下列成分28.0μL Xho I buffer3.0μL Xho I(40U/μL)37℃保溫1.5hr。
7.載體連接7.1使用Wizard SV Gel and PCR CLEAn System kit(Promega)回收cDNA片段，對(duì)回收的cDNA進(jìn)行EB定量。
7.2 cDNA與ZAP Express Vector連接在1.5ml離心管中加入2.0μL重懸cDNA0.5μL 10×ligase buffer0.5μL 10mM rATP1.0μL ZAP Express Vector0.5μL ddH2OT4 DNA ligase(4U/μL)0.5μL，4℃連接2天。
8.λ重組DNA的體外包裝(1)加入目的DNA 100ng至包裝蛋白中，混勻，離心匯于管底。
(2)22℃溫育2hr后，加入500μL SM Buffer，在加20μL氯仿，輕輕混勻。
9.λ噬菌體的轉(zhuǎn)染9.1噬菌體文庫(kù)滴度的測(cè)定(1)劃線培養(yǎng)XL1-blue MRF’，37℃過(guò)夜，培養(yǎng)基為L(zhǎng)B(含12.5μg/ml Tet)。
(2)接種至LB broth，30℃，200rpm過(guò)夜搖(OD＜1)，1000×g離心收集菌體，加10mmol/L MgSO4重懸菌體至OD600＝0.5。
(3)在上述包裝體系中各取1.0μL做一系列稀釋，即1→10-2→10-4，各取1.0μL稀釋液于宿主菌中，吸附15min后，加3mL頂層瓊脂，迅速鋪在提前育溫至37℃的底層瓊脂，待凝固后37℃過(guò)夜倒置培養(yǎng)。
(3)待噬菌斑長(zhǎng)出后，計(jì)算滴度。經(jīng)檢測(cè)，初級(jí)文庫(kù)的庫(kù)容達(dá)到1×106pfu/ml。
9.3噬菌體文庫(kù)的擴(kuò)增(1)宿主菌制備同前。
(2)鋪好板后37℃過(guò)夜倒置培養(yǎng)。噬菌斑不超過(guò)1~2mm。
(3)用4mL SM Buffer涂蓋菌板，4℃貯存過(guò)夜。
(4)吸出SM Buffer于無(wú)菌管中，在加1mL SM Buffer洗菌板一次，吸到管中加氯仿至終濃度5％，混勻置室溫培養(yǎng)15min，500g離心10min，移走細(xì)胞碎片。
(5)轉(zhuǎn)上清于另一管中，加氯仿至終濃度0.3％，4℃存放。
(6)測(cè)滴度。經(jīng)擴(kuò)增，文庫(kù)的滴度達(dá)1×108pfu/ml
10噬菌體文庫(kù)的體內(nèi)剪切(1)劃線培養(yǎng)XL1-blue MRF’和XLOLR菌于LB培養(yǎng)基(含12.5μg/ml Tet)。挑單菌落接種至50mL LB broth，30℃，200rpm過(guò)夜培養(yǎng)。
(2)1000×g離心收集XL1-blue MRF’和XLOLR cells，用10mM MgSO4重懸至OD600＝1。
(3)在離心管中加入100倍于初級(jí)庫(kù)的噬菌體量。按10∶1(cells-to-lambdaphage)加入宿主菌XL1-blue在按(10∶1 helper phage-to-cells ratio)加入輔助噬菌體。
(4)37℃吸附15min，加20ml NZY broth with supplements，37℃搖培3hr，65℃熱激20min，1000×g離心10min，轉(zhuǎn)上清于另一管中。
(5)測(cè)滴度取上清1.0μL分別加到200μL XLOLR菌中，37℃吸附15min，再加200μL NZY broth 37℃搖培45min。
(6)從中取出100μL鋪LB(50μg/ml，kana)37℃過(guò)夜培養(yǎng)，得到菌落。
11應(yīng)用PCR反應(yīng)體系檢測(cè)平均插入片段的長(zhǎng)度取載體引物，挑單克隆進(jìn)行PCR驗(yàn)證插入片斷，PCR反應(yīng)條件為95.0℃預(yù)變性5min，然后94.0℃變性30s，50.0℃模板退火30s，72.0℃延伸2min，共30個(gè)循環(huán)，最后，72.0℃最終延伸7min，反應(yīng)結(jié)束后，取PCR產(chǎn)物在1％瓊脂糖凝膠上進(jìn)行電泳檢測(cè)。經(jīng)檢驗(yàn)，平均插入片斷長(zhǎng)為1.2kb。
步驟4，采用3730測(cè)序儀進(jìn)行測(cè)序(ABI)采用T7引物進(jìn)行單向測(cè)序，每個(gè)反應(yīng)可達(dá)800-1200bp。得到的EST序列進(jìn)入NCBI進(jìn)行比對(duì)后，對(duì)干旱脅迫相關(guān)基因質(zhì)粒測(cè)通，得到全長(zhǎng)基因序列。
實(shí)施例2 長(zhǎng)春花GST的序列信息與同源性分析以下部分為克隆的長(zhǎng)春花GST的核苷酸序列g(shù)gcacgagga ttaattcttc cataatcaat cagagaaaag gaaagaaaga aaagaatggg 60gggagaagca attaaggtcc acggaagtgt tctttcccca gcggtattgc gagtttttgc120ttgtctctat gagaaagatc tgtcatcagc tgaatatgtc cctgttaata tggccactgg180agaccacaaa aaggaacctt tccttaccct aaatccattt ggtcaagtcc ctggttttga240agatggagat ctcaagctct tcgagtcaag ggcaattaac caatacatag tacaagcata300cggagacaaa ggcaatcaat tgaatttcca cgacgaccca aagaagaacg ccctcgttta360cgtatggatg gaagtagaag ctcagaggtt cgatcctgct gcatccaaat tgctattcga420actttgcata aaaccaatat taggtatgac aacaaacgat gcagttgtac aagagtacga480ggccaaatta ggagagattc ttgatgtgta cgaggctcgt ttgaagcaat ccaactattt540agctgccgat acttttacac ttgctgatct taaccatatt cctgctatta attacttgat600gggttctaaa gctaaagcag tttttgaagc aaggcctcat gtgaatgctt ggtgtgctga660tatcttggca aggcctgctt ggtctaaggt tcttgagttg cagaagaagc agtcttgata720tcattactgt ctgtccgtct tcctaattct aatggccgcc gctgccctgt gctctattta780tttgtttctg gttttttcct cctctgtact ctactattac tatgttttgg agttgataat840gttcattatc gctctcatcc tagtacttca ttaccggaat aaactccaat aaacgttgtt900atcgttatta aaaaaaaaaa aaaaaaaaa 929其特征在于56bp處具有起始密碼子ATG，718bp處具有終止密碼子TGA，在910bp處具有polyA附加信號(hào)。該序列無(wú)內(nèi)含子，具有663bp完整的開放讀碼框，編碼220個(gè)氨基酸。其編碼的氨基酸序列為MGGEAIKVHGSVLSPAVLRVFACLYEKDLSSAEYVPVNMATGDHKKEPFLTLNPFGQVPGFEDGDLKLFESRAINQYIVQAYGDKGNQLNFHDDPKKNALVYVWMEVEAQRFDPAASKLLFELCIKPILGMTTNDAVVQEYEAKLGEILDVYEARLKQSNYLAADTFTLADLNHIPAINYLMGSKAKAVFEARPHVNAWCADILARPAWSKVLELQKKQS同源性比對(duì)分析結(jié)果標(biāo)明，與辣椒(Gapsicum chinense)全長(zhǎng)基因GST1同源性高達(dá)67.7％，以及大戟屬植物(Euphorbia esula)全長(zhǎng)基因GST同源性高達(dá)57.7％。
本發(fā)明從長(zhǎng)春花中分離出GST基因，即從新的物種中分離該基因，因而具有創(chuàng)新性；長(zhǎng)春花屬耐干旱、耐鹽堿植物，因而預(yù)知該基因有更強(qiáng)的抗旱、耐鹽堿功能，有更新的實(shí)用價(jià)值。
權(quán)利要求
1.一種編碼長(zhǎng)春花谷胱甘肽轉(zhuǎn)移酶(Glutathione S-transferase，GST)的核苷酸序列，其特征在于它具有如下的核苷酸序列及相應(yīng)的氨基酸序列g(shù)gcacgagga ttaattcttc cataatcaat cagagaaaag gaaagaaaga aaagaatggg 60gggagaagca attaaggtcc acggaagtgt tctttcccca gcggtattgc gagtttttgc120ttgtctctat gagaaagatc tgtcatcagc tgaatatgtc cctgttaata tggccactgg180agaccacaaa aaggaacctt tccttaccct aaatccattt ggtcaagtcc ctggttttga240agatggagat ctcaagctct tcgagtcaag ggcaattaac caatacatag tacaagcata300cggagacaaa ggcaatcaat tgaatttcca cgacgaccca aagaagaacg ccctcgttta360cgtatggatg gaagtagaag ctcagaggtt cgatcctgct gcatccaaat tgctattcga420actttgcata aaaccaatat taggtatgac aacaaacgat gcagttgtac aagagtacga480ggccaaatta ggagagattc ttgatgtgta cgaggctcgt ttgaagcaat ccaactattt540agctgccgat acttttacac ttgctgatct taaccatatt cctgctatta attacttgat600gggttctaaa gctaaagcag tttttgaagc aaggcctcat gtgaatgctt ggtgtgctga660tatcttggca aggcctgctt ggtctaaggt tcttgagttg cagaagaagc agtcttgata720tcattactgt ctgtccgtct tcctaattct aatggccgcc gctgccctgt gctctattta780tttgtttctg gttttttcct cctctgtact ctactattac tatgttttgg agttgataat840gttcattatc gctctcatcc tagtacttca ttaccggaat aaactccaat aaacgttgtt900atcgttatta aaaaaaaaaa aaaaaaaaa 929MGGEAIKVHGSVLSPAVLRVFACLYEKDLSSAEYVPVNMATGDHKKEPFLTLNPFGQVPGFEDGDLKLFESRAINQYIVQAYGDKGNQLNFHDDPKKNALVYVWMEVEAQRFDPAASKLLFELCIKPILGMTTNDAVVQEYEAKLGEILDVYEARLKQSNYLAADTFTLADLNHIPAINYLMGSKAKAVFEARPHVNAWCADILARPAWSKVLELQKKQS
2.一種如權(quán)利要求1所述的核苷酸序列，其特征在于56bp處具有起始密碼子ATG，718bp處具有終止密碼子TGA，在910bp處具有polyA附加信號(hào)。該序列無(wú)內(nèi)含子，具有663bp完整的開放讀碼框，編碼220個(gè)氨基酸。
3.一種如權(quán)利要求1所述的長(zhǎng)春花谷胱甘肽轉(zhuǎn)移酶的核苷酸序列的克隆方法，其特征在于首先使用適度的干旱處理?xiàng)l件，使植物抗旱基因表達(dá)富集；然后通過(guò)構(gòu)建全長(zhǎng)的cDNA文庫(kù)，及測(cè)序，在最短的時(shí)間內(nèi)得到抗旱相關(guān)的全長(zhǎng)脅迫基因。獲得的抗旱基因直接構(gòu)建在真核表達(dá)載體pCMV質(zhì)粒上，可通過(guò)真核生物表達(dá)來(lái)直接進(jìn)行篩選?；蚩梢允褂胻3、t7通用引物進(jìn)行測(cè)序。
全文摘要
一種長(zhǎng)春花谷胱甘肽轉(zhuǎn)移酶(Glutathione S－transferase)的基因序列及其編碼產(chǎn)物的氨基酸序列。它涉及一種新的基因序列。其特征在于該基因全長(zhǎng)929bp，在56bp處具有起始密碼子ATG，718bp處具有終止密碼子TGA，在910bp處具有polyA附加信號(hào)。該序列無(wú)內(nèi)含子，具有663bp完整的開放讀碼框，編碼220個(gè)氨基酸。所述的核苷酸序列與辣椒(Capsicum chinense)全長(zhǎng)基因GST1同源性高達(dá)67.7％，以及大戟屬植物(Euphorbia esula)全長(zhǎng)基因GST同源性高達(dá)57.7％。本發(fā)明還提供了一種快速得到全長(zhǎng)脅迫基因的方法。首先使用適度的干旱處理?xiàng)l件，使植物抗旱基因表達(dá)富集；然后通過(guò)構(gòu)建全長(zhǎng)的cDNA文庫(kù)及測(cè)序，在最短的時(shí)間內(nèi)得到抗干旱脅迫相關(guān)的全長(zhǎng)基因。獲得的抗旱基因直接構(gòu)建在真核表達(dá)載體pCMV質(zhì)粒上，可使用t3、t7通用引物進(jìn)行測(cè)序。同時(shí)，可通過(guò)真核生物表達(dá)來(lái)直接進(jìn)行篩選。本發(fā)明從植物cDNA中分離出了谷胱甘肽轉(zhuǎn)移酶的全長(zhǎng)基因，該基因具有較強(qiáng)的抗氧化功能，在植物逆境脅迫過(guò)程中表達(dá)增加，起到去除氧自由基的作用。該基因的克隆擴(kuò)大了植物抗旱研究的基因資源，為運(yùn)用基因工程技術(shù)提高植物抗干旱脅迫及品質(zhì)改良提供了更加豐富的優(yōu)良候選基因。
文檔編號(hào)C12N15/54GK1687422SQ20051000993
公開日2005年10月26日 申請(qǐng)日期2005年4月27日 優(yōu)先權(quán)日2005年4月27日
發(fā)明者祖元?jiǎng)? 聶明珠, 于景華, 唐中華, 王慧梅, 郭曉瑞, 房思梁, 姜洋 申請(qǐng)人:東北林業(yè)大學(xué), 祖元?jiǎng)?br>