專(zhuān)利名稱(chēng)：測(cè)定對(duì)溶解細(xì)胞的抗生素具有抗性的細(xì)菌存在的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及測(cè)定樣品中是否存在一種或一種以上的靶細(xì)菌的方法，其中所述的靶細(xì)菌對(duì)一種或一種以上的溶解細(xì)胞的抗生素具有抗性。本發(fā)明具體但非限制性地涉及測(cè)定在臨床樣品中是否存在一種或一種以上耐甲氧苯青霉素的細(xì)菌的方法。
背景技術(shù)：
對(duì)常用抗生素具有抗性的細(xì)菌的出現(xiàn)是一個(gè)越來(lái)越普遍的問(wèn)題，這個(gè)問(wèn)題與對(duì)感染患者的治療密切相關(guān)。事實(shí)上，這些所謂的超級(jí)病菌例如金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)幾乎對(duì)最有效的抗生素都產(chǎn)生了抗性。在醫(yī)院環(huán)境中，這個(gè)問(wèn)題變得更加嚴(yán)重，因?yàn)槊庖呦到y(tǒng)弱的患者在醫(yī)院內(nèi)感染對(duì)抗生素具有抗性的細(xì)菌時(shí)，可引發(fā)嚴(yán)重的并發(fā)癥，甚至死亡。因此，在這種環(huán)境中需要使感染的危險(xiǎn)性降至最低。使這種危險(xiǎn)性降至最低的方法之一在于早期測(cè)定此類(lèi)細(xì)菌的存在，以對(duì)個(gè)體和環(huán)境進(jìn)行仔細(xì)監(jiān)測(cè)，并且如果必要，進(jìn)行早期治療。
然而，目前測(cè)定對(duì)抗生素具有抗性的細(xì)菌存在的方法耗時(shí)過(guò)多，此類(lèi)方法需要首先培養(yǎng)純態(tài)的細(xì)菌，然后將該細(xì)菌與一系列抗生素接觸，以檢查其生長(zhǎng)是否受到抑制。整個(gè)過(guò)程可能需要至少2天，因而導(dǎo)致在對(duì)患者采取最佳治療方案前的經(jīng)常性的臨界延誤。當(dāng)然，這種延誤不僅僅對(duì)患者的健康不利，而且會(huì)使其在醫(yī)院環(huán)境中逗留更長(zhǎng)的時(shí)間。
因此，需要一種快速測(cè)定存在于患者體內(nèi)或環(huán)境中的、對(duì)某種抗生素具有抗性的細(xì)菌的方法。
申請(qǐng)人同時(shí)待審的專(zhuān)利申請(qǐng)WO 99/37799提供了一種快速測(cè)定已知存在于培養(yǎng)物中的特定細(xì)菌是否對(duì)特定抗生素敏感或具有抗性的方法。然而，該方法的局限性在于其優(yōu)選需要細(xì)菌以純培養(yǎng)物或純分離菌形式存在。然而，所述方法可適用于測(cè)定混合培養(yǎng)物中的特定細(xì)菌對(duì)抗生素的抗性或敏感性。在所述情況下，所述方法通常取決于在用特定抗生素處理前或?qū)ｉT(mén)針對(duì)該特定細(xì)菌的其他作用之前的初步分離步驟。
作為選擇，如果抗生素的作用方式是已知的，所述方法可以揭示已知存在于混合培養(yǎng)物中的特定細(xì)菌對(duì)抗生素的抗性或敏感性。該方法具體采用以下方法，即，從混合培養(yǎng)物獲得四等分培養(yǎng)物，并在下列情況下分別培養(yǎng)這四等分培養(yǎng)物i)無(wú)抗生素、ii)具有抗生素、iii)存在特異性針對(duì)細(xì)菌的噬菌體和iv)存在所述抗生素和噬菌體的混合物，然后比較分析這四等分培養(yǎng)物的細(xì)胞內(nèi)腺苷酸激酶的含量，從而揭示已知存在于混合培養(yǎng)物中的特定細(xì)菌對(duì)抗生素的抗性或敏感性。例如，當(dāng)與僅用噬菌體培養(yǎng)的樣品相比，用抗生素和噬菌體培養(yǎng)的樣品中的細(xì)胞內(nèi)腺苷酸激酶減少時(shí)，基于這種情況可以推斷該細(xì)菌對(duì)溶解細(xì)胞的抗生素敏感。
盡管可假設(shè)WO 99/37799中公開(kāi)的方法可簡(jiǎn)明地顯示混合培養(yǎng)物中存在對(duì)特定抗生素具有抗性的細(xì)菌，但在實(shí)踐中尤其是當(dāng)抗性細(xì)菌的濃度低時(shí)，還是不能明確并且可靠地獲得這種結(jié)果。
甚至，即使能達(dá)到上述目的，顯而易見(jiàn)這種測(cè)定細(xì)菌存在的方法仍需要進(jìn)行許多重復(fù)步驟，包括培養(yǎng)、處理和分析來(lái)自混合培養(yǎng)物的不同的至少四份等分樣品。這樣的重復(fù)步驟是笨拙的而且增加了出錯(cuò)的可能性。另外，由于用噬菌體處理混合培養(yǎng)物的等分樣品時(shí)需要時(shí)間來(lái)確保細(xì)菌已證實(shí)處于其對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期，因此所述方法還存在著固有延遲。
因此，始終需要簡(jiǎn)單而快速地測(cè)定樣品中是否存在耐抗生素的細(xì)菌的方法。具體地，始終需要簡(jiǎn)單而快速地測(cè)定臨床樣品中是否存在耐抗生素的細(xì)菌的方法。

發(fā)明內(nèi)容
因此，本發(fā)明提供了測(cè)定耐抗生素的細(xì)菌是否存在于樣品中尤其是臨床樣品中的方法，該臨床樣品是通過(guò)例如擦拭感染患者來(lái)采集的，該方法簡(jiǎn)單、快速并且包括的必需步驟最少。
本發(fā)明起源于如下認(rèn)識(shí)各種細(xì)菌通常對(duì)溶解細(xì)胞的抗生素敏感，因此，首先可有利地丟棄混合培養(yǎng)物中敏感細(xì)菌的細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)。
因此，本發(fā)明提供了測(cè)定樣品中是否存在對(duì)溶解細(xì)胞的抗生素具有抗性的靶細(xì)胞的方法，該方法包括以下依次進(jìn)行的步驟i)在含有溶解細(xì)胞的抗生素的培養(yǎng)基中培養(yǎng)樣品，ii)在含有捕獲劑的固體載體上捕獲未溶解的靶細(xì)菌細(xì)胞，iii)使未溶解的靶細(xì)菌細(xì)胞與能引起其細(xì)胞溶解的試劑接觸，iv)測(cè)定是否存在來(lái)自所述溶解的靶細(xì)菌細(xì)胞的細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，本方法還包括在步驟iii)之前，進(jìn)行洗滌步驟和/或過(guò)濾步驟，以除去從對(duì)溶解細(xì)胞的抗生素敏感的細(xì)胞獲得的細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)。
應(yīng)理解本申請(qǐng)全文中的短語(yǔ)“溶解細(xì)胞的抗生素”描述的是一種在細(xì)菌復(fù)制過(guò)程中破壞細(xì)菌的細(xì)胞壁合成的試劑。因此，任何β-內(nèi)酰胺抗生素都適用于實(shí)施本發(fā)明的方法。在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，所述的溶解細(xì)胞的抗生素為青霉素，例如氨芐青霉素或甲氧苯青霉素。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，所述的捕獲劑可以?xún)H對(duì)特定種類(lèi)的菌種具有特異性。在另一實(shí)施方案中，所述的捕獲劑可以對(duì)特定株的細(xì)菌具有特異性。在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，所述的捕獲劑是可與金黃色葡萄球菌結(jié)合的纖維蛋白原。作為選擇，所述的捕獲劑為金黃色葡萄球菌的特異性抗體。
當(dāng)然，應(yīng)意識(shí)到本發(fā)明的方法可包括一個(gè)或一個(gè)以上額外的中間步驟以能測(cè)定一種以上靶細(xì)胞的存在。典型地，這些步驟可包括在含有一種或一種以上捕獲劑的固體載體上捕獲未溶解的靶細(xì)菌細(xì)胞。
有利的是，實(shí)施本發(fā)明的培養(yǎng)基包括液體培養(yǎng)基。在該實(shí)施方案中，所述的固體載體可包括包被有合適的抗體或其他捕獲劑的磁珠。作為選擇，所述固體載體可包括至少部分地包被有合適的抗體或其他捕獲劑的刮鏟、槳狀物或過(guò)濾器。
在本發(fā)明的另一實(shí)施方案中，所述能夠引起細(xì)胞溶解的試劑具有對(duì)靶細(xì)菌的選擇性。優(yōu)選所述的試劑具有對(duì)金黃色葡萄球菌的選擇性。更優(yōu)選所述能夠引起細(xì)胞溶解的試劑為溶葡萄球菌素。
在本發(fā)明的另一實(shí)施方案中，所述能夠引起細(xì)胞溶解的試劑為具有對(duì)靶細(xì)菌的選擇性的噬菌體或獲自所述噬菌體的溶胞素。在又一實(shí)施方案中，所述能夠引起細(xì)胞溶解的試劑為大腸桿菌素。
當(dāng)然，也應(yīng)意識(shí)到本發(fā)明的方法還可包括許多測(cè)定是否存在其他靶細(xì)菌的類(lèi)似步驟。
測(cè)定來(lái)自溶解的靶細(xì)菌細(xì)胞的細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)的方法可包括本領(lǐng)域已知的任何合適的分析方法。優(yōu)選地，所述分析方法包括生物發(fā)光分析。更優(yōu)選所述的生物發(fā)光分析是基于腺苷酸激酶(AK)的分析，即，如申請(qǐng)人同時(shí)待審的專(zhuān)利申請(qǐng)WO 94/17202和WO 96/02665中所述。然而，所述分析可選擇性地包括基于細(xì)胞內(nèi)的酶標(biāo)記(例如磷酸酶或過(guò)氧化物酶)的比色測(cè)定分析或熒光測(cè)定分析。
另一方面，本發(fā)明提供了一種用于實(shí)施本發(fā)明方法的檢測(cè)箱。優(yōu)選所述檢測(cè)箱為一次性檢測(cè)箱。所述的檢測(cè)箱可包含合適的組分，以進(jìn)行選定的分析。所述的檢測(cè)箱優(yōu)選包含合適的培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基含有選定的溶解細(xì)胞的抗生素。所述的檢測(cè)箱更優(yōu)選包含含有對(duì)靶細(xì)菌具有特異性的捕獲劑的固體載體、洗滌溶液和能引起靶細(xì)菌細(xì)胞溶解的試劑。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，所述的檢測(cè)箱包含含有甲氧苯青霉素的液體培養(yǎng)基。所述含有甲氧苯青霉素的液體培養(yǎng)基優(yōu)選以冷凍干燥形式提供。
有利的是，所述的檢測(cè)箱可以采用多井式容器的形式提供，例如申請(qǐng)人同時(shí)待審的專(zhuān)利申請(qǐng)GB 0110476.9中所述。
本發(fā)明的方法的一個(gè)優(yōu)點(diǎn)是提供了一種快速(約3個(gè)小時(shí))測(cè)定是否存在對(duì)溶解細(xì)胞的抗生素具有抗性的細(xì)菌的方法，該方法包括對(duì)細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)的簡(jiǎn)單分析。另外，本方法不需要進(jìn)行多次重復(fù)的比較分析，進(jìn)一步的優(yōu)點(diǎn)是可采用明確、獨(dú)立的定性分析方式而不是比較或定量分析方式來(lái)解讀結(jié)果。
將參考非限定性的實(shí)施方案和下列附圖描述本發(fā)明。


圖1概略地顯示了本發(fā)明方法的必要步驟；圖2以圖表形式著重顯示了陰性試驗(yàn)和陽(yáng)性試驗(yàn)的差異；圖3以圖表形式顯示了用50μg/ml氨芐青霉素或4μg/ml甲氧苯青霉素培養(yǎng)三個(gè)半小時(shí)后，檢測(cè)耐甲氧苯青霉素的和對(duì)甲氧苯青霉素敏感的金黃色葡萄球菌菌株的結(jié)果；和圖4為本發(fā)明的檢測(cè)箱的剖視圖。
具體實(shí)施例方式
現(xiàn)在請(qǐng)參考圖1，例如用拭子從患者處采集樣品，該樣品包含一種細(xì)菌混合物，其中含有普遍耐甲氧苯青霉素的細(xì)菌11和普遍對(duì)甲氧苯青霉素敏感的細(xì)菌12。在約1ml體積含有約4μg抗生素的液體培養(yǎng)基中于37℃培養(yǎng)所述樣品。
耐甲氧苯青霉素的細(xì)菌11存活并可繁殖。但是對(duì)甲氧苯青霉素敏感的細(xì)菌12在初始生長(zhǎng)期后產(chǎn)生了弱化的細(xì)胞壁13并且溶解，向液體培養(yǎng)基釋放出其細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)14。
因此，在2至4小時(shí)后，所述的液體培養(yǎng)基中含有由未溶解的耐甲氧苯青霉素的細(xì)菌和溶解的對(duì)甲氧苯青霉素敏感的細(xì)菌組成的混合物。
然后，通過(guò)向液體培養(yǎng)基中加入包被有纖維蛋白原的順磁珠15，測(cè)定特定細(xì)菌如金黃色葡萄球菌是否存在。所述的纖維蛋白原是金黃色葡萄球菌的特異性結(jié)合劑。在2至10分鐘后利用磁性從培養(yǎng)基中取出珠子并在分析步驟前進(jìn)行洗滌。
然后利用能溶解細(xì)胞的去污劑在單獨(dú)的容器中處理磁珠15和所附著的靶細(xì)菌11。利用熒光素-熒光酶生物發(fā)光方法，分析由此獲得的細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)中的腺苷酸激酶。信號(hào)16顯示了耐甲氧苯青霉素的金黃色葡萄球菌的存在。為了確定起見(jiàn)，可將信號(hào)16與合適的空白信號(hào)比較，以排除由腺苷酸激酶的背景濃度引起的異常。
顯而易見(jiàn)，只有始終不受甲氧苯青霉素影響并固定在磁珠上的細(xì)胞才能表現(xiàn)出作為對(duì)腺苷酸激酶分析的響應(yīng)的明顯信號(hào)。
當(dāng)然，通過(guò)替換或增加步驟也可檢測(cè)是否存在其他種類(lèi)的耐甲氧苯青霉素的靶細(xì)菌，所述替換或增加的步驟包括加入包含其它包被層的珠子或加入在其包被層中包含一種或一種以上的捕獲劑的珠子。
替換地或額外地，在最終的細(xì)胞溶解步驟中，將特定的多種細(xì)菌作為目標(biāo)，可在所述方法中引入特異性。例如，可使用對(duì)金黃色葡萄球菌特異的噬菌體或去污劑組合物。
圖2顯示了獲得的生物發(fā)光檢測(cè)結(jié)果，以用于測(cè)定一系列臨床樣品中是否存在金黃色葡萄球菌。如圖所示，可輕易將陽(yáng)性檢測(cè)結(jié)果(樣品編號(hào)M421000M和M421148L)與陰性檢測(cè)結(jié)果(樣品編號(hào)M421117S和M421131P)區(qū)分開(kāi)。
圖3顯示了在氨芐青霉素和甲氧苯青霉素存在下，培養(yǎng)金黃色葡萄球菌的不同株系而獲得的生物發(fā)光檢測(cè)結(jié)果。在每種情況中，本方法將存在的耐抗生素的株系與對(duì)抗生素敏感的株系區(qū)分開(kāi)。
請(qǐng)參考圖4，本發(fā)明的方法中使用的檢測(cè)箱包括注塑的固體聚丙烯外殼(整體定為17)，該固體聚丙烯外殼內(nèi)包含許多小室，即18、19、20、21和22，這些小室可用作各種合適的工具和試劑的貯存室和/或反應(yīng)室(參見(jiàn)如下描述)。
小室18貯存含有溶解細(xì)胞的抗生素的液體培養(yǎng)基22，其適用于培養(yǎng)獲自感染的患者的拭子樣品。小室18具有實(shí)心小棍23，該實(shí)心小棍23帶有用于獲得所述樣品的拭子24。小棍23帶有與其垂直的橫向部分25，該部分可用作小棍18的把柄，小棍23還方便地帶有蓋子26，該蓋子用以封閉小室18中含有溶解細(xì)胞的抗生素的液體培養(yǎng)基22。
相鄰的小室19和20分別貯存含有磁珠的懸液27的水溶液和磷酸鹽緩沖鹽水即洗滌溶液28。合適的磁珠為獲自Dynal公司的商標(biāo)名為DynabeadsTM的磁珠。正如前所述，這些磁珠上包被有能捕獲靶細(xì)菌的試劑。
小室21用作該檢測(cè)箱的反應(yīng)室，其中具有適合進(jìn)行基于腺苷酸激酶的生物發(fā)光分析的緩沖水溶液29。在緩沖水溶液29的上部，該小室還具有用箔密封的小囊30和31，其中分別含有基于熒光素/熒光酶的生物發(fā)光試劑和含有去污劑或能溶解靶細(xì)菌細(xì)胞的試劑的二磷酸腺苷水溶液。在所述用箔密封的小囊之間的空間32具有鎂源，例如乙酸鎂，所述鎂源用作生物發(fā)光分析的促進(jìn)劑。
小室22具有中空棒33，其帶有適用于刺穿箔封閉的小囊30和31的尖銳的錐尖34。棒33具有與其垂直的橫向部分35，該部分35帶有接合裝置(例如狹槽一未顯示)，該接合裝置用于接合適于沿垂直或水平方向移動(dòng)棒33的機(jī)械裝置，所述移動(dòng)是在控制硬件或軟件(未顯示)的控制下進(jìn)行的。與棒33垂直的橫向部分35還具有孔(未顯示)，以便使棒33能容納可縮進(jìn)的圓柱狀磁鐵(未顯示)。
小室19、20、21和22具有金屬箔形式的層壓密封裝置。與小室18具有的密封裝置不同，在所述的層壓密封裝置破裂后，便不打算再使用。
使用時(shí)，通過(guò)把柄25將具有拭子24的實(shí)心小棍23從小室18中手動(dòng)取出，并將其用于從感染的患者處獲得樣品。立即將小棍23放回該室中，以便將拭子24浸沒(méi)于液體培養(yǎng)基22中，并再次形成蓋子26與小室18間的密封狀態(tài)。
將檢測(cè)箱保持在合適的條件下約3小時(shí)，以培養(yǎng)患者的樣品。在該培養(yǎng)階段結(jié)束時(shí)，從小室18中取出小棍23，并將密封小室19、20、21和22的金屬箔除去。
將中空棒33(包含可縮進(jìn)的磁鐵)與移動(dòng)機(jī)械裝置接合。在硬件或軟件的控制下，使棒33移動(dòng)至小室19；在小室19中，用棒33從懸液27中收集磁珠，再?gòu)哪抢镛D(zhuǎn)移至小室18；在小室18中通過(guò)例如蝸桿傳動(dòng)裝置縮回磁鐵，從而使珠子沉在培養(yǎng)基中。
在一段合適的時(shí)間后，并且如果進(jìn)行適當(dāng)?shù)臄嚢瑁勾盆F重新回到棒33中以便用其收集所述珠子。然后將棒33轉(zhuǎn)移至小室20；在小室20中，使所述的珠子沉在洗滌溶液28中，并再過(guò)一段合適的時(shí)間后，按照前面描述的方法取回珠子。
接著，將攜帶著洗過(guò)的珠子的棒33轉(zhuǎn)移至反應(yīng)室21中，從而用尖銳的錐尖34使由箔密封的小囊30和31中的內(nèi)含物釋放到緩沖溶液29中。然后，通過(guò)從棒33中收回磁鐵而將珠子釋放到溶液29中并將該棒返回小室22。
用放置在聚丙烯外殼17的小室21下面的光電倍增管(未顯示)檢測(cè)隨后由生物發(fā)光反應(yīng)發(fā)出的光。(反應(yīng)的詳述見(jiàn)申請(qǐng)人同時(shí)待審的專(zhuān)利申請(qǐng)WO 94/17202和WO 96/02665)。
權(quán)利要求
1.測(cè)定樣品中存在對(duì)溶解細(xì)胞的抗生素具有抗性的靶細(xì)菌的方法，該方法包括以下依次進(jìn)行的步驟i)在含有溶解細(xì)胞的抗生素的培養(yǎng)基中培養(yǎng)樣品，ii)在含有捕獲劑的固體載體上捕獲未溶解的靶細(xì)菌細(xì)胞，iii)使未溶解的靶細(xì)菌細(xì)胞與能引起其細(xì)胞溶解的試劑接觸，iv)測(cè)定存在來(lái)自所述溶解的靶細(xì)菌細(xì)胞的細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)。
2.如權(quán)利要求1所述的方法，其中在步驟iii)之前，進(jìn)行洗滌和/或過(guò)濾步驟。
3.如權(quán)利要求1或2所述的方法，其中所述的捕獲劑為金黃色葡萄球菌的特異性抗體。
4.如權(quán)利要求1或2所述的方法，其中所述的捕獲劑為纖維蛋白原。
5.如權(quán)利要求4所述的方法，其中所述能引起細(xì)胞溶解的試劑對(duì)金黃色葡萄球菌具有選擇性。
6.如權(quán)利要求5所述的方法，其中所述的能引起細(xì)胞溶解的試劑為溶葡萄球菌素。
7.如權(quán)利要求1-4任一項(xiàng)所述的方法，其中所述的能引起細(xì)胞溶解的試劑為噬菌體。
8.如前述任一項(xiàng)權(quán)利要求所述的方法，其中所述的培養(yǎng)基為液體培養(yǎng)基。
9.如前述任一項(xiàng)權(quán)利要求所述的方法，其中所述的固體載體包含磁珠。
10.如權(quán)利要求2-9任一項(xiàng)所述的方法，其中所述的步驟iv)包括生物發(fā)光分析。
11.如權(quán)利要求10所述的方法，其中所述的生物發(fā)光分析為基于腺苷酸激酶的生物發(fā)光分析。
12.如權(quán)利要求2-9任一項(xiàng)所述的方法，其中所述的步驟iv)包括基于細(xì)胞內(nèi)的酶標(biāo)記的比色測(cè)定分析或熒光測(cè)定分析。
13.如前述任一項(xiàng)權(quán)利要求所述的方法，其中所述的溶解細(xì)胞的抗生素為甲氧苯青霉素。
14.一種測(cè)定存在靶細(xì)菌的檢測(cè)箱，該檢測(cè)箱包含含有溶解細(xì)胞的抗生素的培養(yǎng)基、一種或一種以上的含有特異性地針對(duì)靶細(xì)菌的捕獲劑的固體載體、一種或一種以上的能引起靶細(xì)菌細(xì)胞溶解的試劑和用于測(cè)定存在來(lái)自溶解的靶細(xì)菌細(xì)胞的細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)的試劑。
15.如權(quán)利要求14所述的檢測(cè)箱，其中所述的溶解細(xì)胞的抗生素為甲氧苯青霉素。
16.如權(quán)利要求14或15所述的檢測(cè)箱，其中所述的一種或一種以上的捕獲劑包括對(duì)金黃色葡萄球菌具有特異性的捕獲劑。
17.如權(quán)利要求14-16任一項(xiàng)所述的檢測(cè)箱，其中所述用于測(cè)定存在來(lái)自溶解的靶細(xì)菌細(xì)胞的細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)的試劑適用于進(jìn)行細(xì)胞內(nèi)酶標(biāo)記的生物發(fā)光分析、比色測(cè)定分析或熒光測(cè)定分析。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種基于靶細(xì)菌對(duì)溶解細(xì)胞的抗生素的抗性來(lái)測(cè)定是否存在所述靶細(xì)菌的方法。將所述的抗生素用于溶解樣品中非靶細(xì)菌的細(xì)胞，因此在采用已知的方法進(jìn)行檢測(cè)前，有利于靶細(xì)菌的分離。
文檔編號(hào)C12Q1/14GK1556860SQ02818402
公開(kāi)日2004年12月22日 申請(qǐng)日期2002年9月2日 優(yōu)先權(quán)日2001年9月21日
發(fā)明者大衛(wèi)·詹姆斯·斯奎勒爾, 雷切爾·路易絲·萊斯莉, 凱文·J·鮑恩, 路易絲 萊斯莉, J 鮑恩, 大衛(wèi) 詹姆斯 斯奎勒爾 申請(qǐng)人:英國(guó)國(guó)防部