一種南酸棗的組織培養(yǎng)方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及植物無性繁殖領(lǐng)域，具體為一種南酸棗的組織培養(yǎng)方法。
【背景技術(shù)】
[0002]南酸棗是我國(guó)南方優(yōu)良速生用材樹種，其木材結(jié)構(gòu)略粗，心材寬，淡紅褐色，邊材狹，白色至淺紅褐色，花紋美觀，刨面光滑。材質(zhì)柔韌，收縮率小，可加工成工藝品。果實(shí)甜酸，可生食、釀酒和加工酸棗糕；果核可做活性炭原料；樹葉可做綠肥；樹皮還可作為鞣料和栲膠的原料。分布于浙江、福建、湖北、湖南、廣東、廣西、云南、貴州等處。南酸棗果實(shí)營(yíng)養(yǎng)豐富，含糖量多，并含有鈣、蛋白質(zhì)、脂肪鐵、磷、鈣及維生素等，尤其是維生素C和P每100克鮮果分別高達(dá)1200毫克和2000毫克，比山楂高12.4倍，比獼猴桃高2倍，比蘋果高幾十倍。
[0003]由于南酸棗的經(jīng)濟(jì)價(jià)值高，現(xiàn)在有大量的地區(qū)開始發(fā)展南酸棗的種植，使得南酸棗的樹苗供應(yīng)緊張。南酸棗為雌雄異株，這就使得自然種植繁殖時(shí)，雌雄樹木的數(shù)量難以控制，造成結(jié)果的南酸棗比例偏低，不利于南酸棗作為果樹來種植；因此發(fā)展現(xiàn)代科技育苗技術(shù)運(yùn)用在南酸棗育苗上大有可為。現(xiàn)代育苗技術(shù)中，組織培養(yǎng)運(yùn)用是很好的選擇，組織培養(yǎng)是在無菌的條件下將活器官、組織或細(xì)胞放置在適宜的培養(yǎng)基內(nèi)，并放在適宜的環(huán)境中，進(jìn)行培養(yǎng)而重新形成的細(xì)胞、組織或個(gè)體。還可以控制該技術(shù)已廣泛應(yīng)用于農(nóng)業(yè)生產(chǎn)、醫(yī)藥開發(fā)等研究。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明的目的是提供一種南酸棗的組織培養(yǎng)方法。
[0005]本發(fā)明的目的是通過以下技術(shù)方案來實(shí)現(xiàn)的:
[0006]本發(fā)明的一種南酸棗的組織培養(yǎng)方法，包括以下步驟:
[0007](I)取3月份的南酸棗腋芽，標(biāo)記樹木的性別，外表面消毒，剝外層芽孢，取基部和內(nèi)皮，放入已滅菌的裝有MS培養(yǎng)基的廣口培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，黑暗培養(yǎng)5天，棄去感染的腋芽，余下為消毒腋芽；
[0008](2)將南酸棗果消毒腋芽放入誘導(dǎo)培養(yǎng)基中培養(yǎng)，培養(yǎng)條件:溫度10-12°C、光照1800LX、8h/d ;培養(yǎng) 6 周；
[0009]所述誘導(dǎo)培養(yǎng)基為MS培養(yǎng)基加入1.5mg/L的6_BA、0.03mg/L的TDZ、0.3mg/L的IBA、1%的蔗糖、2.0g/L的瓊脂，調(diào)整PH值6.0，培養(yǎng)基121°C滅菌15min ;
[0010](3)將步驟(2)中誘導(dǎo)培養(yǎng)后的腋芽轉(zhuǎn)入繼代培養(yǎng)基中培養(yǎng)，培養(yǎng)條件:溫度15-20°C、光照 2000LX、8h/d ;培養(yǎng) 4 周；
[0011]所述繼代培養(yǎng)基為MS培養(yǎng)基加入1.0mg/L的6_BA、0.01mg/L的TDZ、0.4mg/L的IBA,0.02%。的活性炭、0.01 %。的Vc、2 %的蔗糖、2.5g/L的瓊脂，調(diào)整PH值6.0，培養(yǎng)基121°C 滅菌 15min ；
[0012](4)將步驟(3)中繼代培養(yǎng)基中培養(yǎng)的腋芽轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基中培養(yǎng)，培養(yǎng)條件??溫度 15-20°C、光照 2500LX、10h/d ;培養(yǎng) 4 周；
[0013]所述生根培養(yǎng)基為1/2MS培養(yǎng)基加入1.0mg/L的6_BA、0.0lmg/L的TDZ、0.6mg/L的IBA,0.5%。的活性炭、0.01%。的Vc、3%的蔗糖、2.5g/L的瓊脂，調(diào)整PH值6.0，培養(yǎng)基121°C 滅菌 15min ；
[0014]優(yōu)選的，步驟(I)中的南酸棗腋芽外表面消毒是先用無菌水沖洗20min，再分別用75%的乙醇和0.1 %的氯化汞浸泡1min。
[0015]本發(fā)明的南酸棗桑的組織培養(yǎng)方法的優(yōu)點(diǎn):
[0016]1.本發(fā)明的南酸棗的組織培養(yǎng)方法，可以通過記錄采集母本的性別，來定向控制培育南酸棗苗木的性別。
[0017]2.本發(fā)明的南酸棗的組織培養(yǎng)方法，不受季節(jié)的限制，可以最大程度的保留原植株的生物學(xué)特性。繁殖速度快，生根率在98%以上。
[0018]3.本發(fā)明的南酸棗的組織培養(yǎng)方法，在繼代培養(yǎng)基和生根培養(yǎng)基中添加0.5%。的活性炭、0.01%。的Vc可以很好防止在培養(yǎng)的過程中發(fā)生褐化。
【具體實(shí)施方式】
[0019]以下結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說明:
[0020]實(shí)施例
[0021]配制各步驟的培養(yǎng)基:
[0022]誘導(dǎo)培養(yǎng)基:量取MS培養(yǎng)基，按比例加入L 5mg/L的6-BA、0.03mg/L的TDZ、
0.3mg/L的IBA、1%的蔗糖、2.0g/L的瓊脂，調(diào)整PH值6.0，培養(yǎng)基121°C滅菌15min ;
[0023]繼代培養(yǎng)基:量取MS培養(yǎng)基，按比例加入1.0mg/L的6_BA、0.01mg/L的TDZ、
0.4mg/L的ΙΒΑ、0.02%。的活性炭、0.01%。的Vc、2%的蔗糖、2.5g/L的瓊脂，調(diào)整PH值6.0，培養(yǎng)基121。。滅菌15min ；
[0024]生根培養(yǎng)基:量取1/2MS培養(yǎng)基，按比例加入1.0mg/L的6_BA、0.01mg/L的TDZ、
0.6mg/L的ΙΒΑ、0.5%。的活性炭、0.01%。的Vc、3%的蔗糖、2.5g/L的瓊脂，調(diào)整PH值6.0，培養(yǎng)基121°C滅菌15min ；
[0025]實(shí)驗(yàn)操作:
[0026](I)取3月份的南酸棗腋芽，標(biāo)記樹木的性別，外表面消毒，剝外層芽孢，取基部和內(nèi)皮，放入已滅菌的裝有MS培養(yǎng)基的廣口培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，黑暗培養(yǎng)5天，棄去感染的腋芽，余下為消毒腋芽；
[0027](2)將南酸棗果消毒腋芽放入誘導(dǎo)培養(yǎng)基中培養(yǎng)，培養(yǎng)條件:溫度10-12°C、光照1800LX、8h/d ;培養(yǎng) 6 周；
[0028](3)將步驟(2)中誘導(dǎo)培養(yǎng)后的腋芽轉(zhuǎn)入繼代培養(yǎng)基中培養(yǎng)，培養(yǎng)條件:溫度15-20°C、光照 2000LX、8h/d ;培養(yǎng) 4 周；
[0029](4)將步驟(3)中繼代培養(yǎng)基中培養(yǎng)的腋芽轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基中培養(yǎng)，培養(yǎng)條件:溫度 15-20°C、光照 2500LX、10h/d ;培養(yǎng) 4 周。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種南酸棗的組織培養(yǎng)方法，其特征在于:包括以下步驟: (1)取3月份的南酸棗腋芽，標(biāo)記樹木的性別，外表面消毒，剝外層芽孢，取基部和內(nèi)皮，放入已滅菌的裝有MS培養(yǎng)基的廣口培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，黑暗培養(yǎng)5天，棄去感染的腋芽，余下為消毒腋芽； (2)將南酸棗果消毒腋芽放入誘導(dǎo)培養(yǎng)基中培養(yǎng)，培養(yǎng)條件:溫度10-12°C、光照1800LX、8h/d ;培養(yǎng) 6 周； 所述誘導(dǎo)培養(yǎng)基為MS培養(yǎng)基加入1.5mg/L的6-BA、0.03mg/L的TDZ、0.3mg/L的IBA、I %的蔗糖、2.0g/L的瓊脂，調(diào)整PH值6.0，培養(yǎng)基121°C滅菌15min ; (3)將步驟(2)中誘導(dǎo)培養(yǎng)后的腋芽轉(zhuǎn)入繼代培養(yǎng)基中培養(yǎng)，培養(yǎng)條件:溫度15-20°C、光照2000LX、8h/d ;培養(yǎng)4周； 所述繼代培養(yǎng)基為MS培養(yǎng)基加入1.0mg/L的6-BA、0.01mg/L的TDZ、0.4mg/L的IBA、0.02%。的活性炭、0.01%。的Vc、2%的蔗糖、2.5g/L的瓊脂，調(diào)整PH值6.0，培養(yǎng)基121。。滅菌 15min ； (4)將步驟(3)中繼代培養(yǎng)基中培養(yǎng)的腋芽轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基中培養(yǎng)，培養(yǎng)條件:溫度15-20°C、光照 2500LX、10h/d ;培養(yǎng) 4 周； 所述生根培養(yǎng)基為1/2MS培養(yǎng)基加入1.0mg/L的6_BA、0.01mg/L的TDZ、0.6mg/L的IBA,0.5%。的活性炭、0.01%。的Vc、3%的蔗糖、2.5g/L的瓊脂，調(diào)整PH值6.0，培養(yǎng)基121。。滅菌15min02.根據(jù)權(quán)利要求1所述的南酸棗的組織培養(yǎng)方法，其特征在于:所述步驟(I)中的南酸棗腋芽外表面消毒是先用無菌水沖洗20min，再分別用75%的乙醇和0.1 %的氯化汞浸泡 1min0
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種南酸棗的組織培養(yǎng)方法，包括：取南酸棗腋芽，外表面消毒，MS培養(yǎng)基培養(yǎng)，篩選消毒腋芽；將消毒腋芽放入誘導(dǎo)培養(yǎng)基中培養(yǎng)，培養(yǎng)條件：溫度10-12℃、光照1800LX、8h/d；培養(yǎng)6周；轉(zhuǎn)入繼代培養(yǎng)基中培養(yǎng)，繼續(xù)增殖，培養(yǎng)4周；轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基中培養(yǎng)，生根培養(yǎng)，培養(yǎng)4周；該組織培養(yǎng)方法可以通過記錄采集母本的性別，來定向控制培育南酸棗苗木的性別，不受季節(jié)的限制，最大程度的保留原植株的生物學(xué)特性，繁殖速度快，生根率在98％以上，可以很好防止在培養(yǎng)的過程中發(fā)生褐化。
【IPC分類】A01H4/00
【公開號(hào)】CN104996300
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510456557
【發(fā)明人】孟祥松, 王雨艨
【申請(qǐng)人】合肥一諾生物科技有限公司
【公開日】2015年10月28日
【申請(qǐng)日】2015年7月27日