本發(fā)明涉及農(nóng)業(yè)生物
技術(shù)領(lǐng)域：
，具體是一種球孢白僵菌菌株的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
：隨著生活水平的不斷提高，人們對食品質(zhì)量的要求也越來越高，對食品安全和環(huán)境污染問題也越來越關(guān)注，無公害食品和綠色食品生產(chǎn)應(yīng)運(yùn)而生。農(nóng)產(chǎn)品安全問題往往是國際貿(mào)易壁壘中的籌碼，綠色植保也倍受關(guān)注?，F(xiàn)有的糧食作物上害蟲，如稻水象甲、玉米螟、刺吸式害蟲粉虱、蚜蟲繁殖力強(qiáng)，長期以來，我國主要依賴于化學(xué)農(nóng)藥防治以上害蟲，由于化學(xué)殺蟲劑的大量、連年施用，使農(nóng)產(chǎn)品、土壤和水域受到農(nóng)藥殘留污染，對人類健康已構(gòu)成嚴(yán)重威脅和損害；害蟲抗藥性的增強(qiáng)，使得用藥量不斷增加，防治費(fèi)用倍增；有益天敵生物被大量損傷，生態(tài)環(huán)境遭到嚴(yán)重破壞，導(dǎo)致害蟲的再增猖獗。為保護(hù)生態(tài)環(huán)境，保證食品和飼料的產(chǎn)量、品質(zhì)和安全性，應(yīng)用生物防治技術(shù)大面積控制農(nóng)業(yè)害蟲，采取害蟲可持續(xù)治理措施勢在必行。昆蟲病原真菌是最重要的殺蟲微生物類群，在自然條件下約70％的昆蟲病害是真菌引起的。其致病機(jī)制復(fù)雜，不會引起害蟲產(chǎn)生抗性，對解決害蟲的抗藥性問題極具潛力。因此，昆蟲病原真菌作為重要的替代農(nóng)藥，近年來受到廣泛關(guān)注。球孢白僵菌是一種昆蟲病原真菌，分布廣泛，可以用于防治蟒槽、小地老虎、粉虱、蚜蟲、薊馬、葉甲、棉鈴蟲、玉米螟、天牛等害蟲，其中著名的應(yīng)用是防治螃槽、玉米螟、松毛蟲、茶小綠葉蟬，具有很好的應(yīng)用效果。球孢白僵菌作為一種活體生物農(nóng)藥，具有不同于化學(xué)殺蟲劑的全新的作用機(jī)理、對環(huán)境友好的特征，可以作為防治某些對化學(xué)殺蟲劑產(chǎn)生抗藥性的害蟲的替代防治藥物，開發(fā)利用球孢白僵菌具有重要的經(jīng)濟(jì)意義?？茖W(xué)研究表明，不同地理種群或不同株系的球孢白僵菌對害蟲的毒力存在較大的差異，即使同一株系的球孢白僵菌對不同種類害蟲的毒力也不相同，因此在應(yīng)用真菌進(jìn)行生物防治的過程中針對不同種類的害蟲經(jīng)常要篩選高毒力菌株。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本發(fā)明的目的在于提供一種球孢白僵菌菌株的應(yīng)用，以解決上述
背景技術(shù)：
中提出的問題。為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供如下技術(shù)方案：一種球孢白僵菌菌株用于防治糧食作物上害蟲的應(yīng)用。一種球孢白僵菌菌株作為制備防治糧食作物上害蟲藥物的應(yīng)用。作為本發(fā)明進(jìn)一步的方案：所述的糧食作物為水稻、豆類、薯類、青稞、蠶豆或小麥，所述的害蟲為稻水象甲、玉米螟、刺吸式害蟲粉虱、蚜蟲、松毛蟲、蠐螬、蝗蟲、馬鈴薯甲蟲、松褐天牛、白蟻、茶小綠葉蟬、桃小食心蟲。作為本發(fā)明進(jìn)一步的方案：所述球孢白僵菌菌株的培養(yǎng)方法，是將菌株接種于培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)，保持溫度為25-30℃培養(yǎng)5-10d，生產(chǎn)出活化好的孢子粉。作為本發(fā)明進(jìn)一步的方案：所述培養(yǎng)基含有1-3%的蛋白胨、2-4%的碳源、0.5-1.5%的酵母粉、1-2%的酪蛋白、1-3%的牛肉膏以及0.3-0.7%的無機(jī)鹽。作為本發(fā)明進(jìn)一步的方案：所述碳源選自淀粉、黃豆餅粉、大米粉、可溶性淀粉、葡萄糖、蔗糖中一種或幾種。作為本發(fā)明再進(jìn)一步的方案：所述無機(jī)鹽選自氯化鈉、磷酸氫鉀、硫酸鎂或碳酸鈣。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果是：本發(fā)明的菌株產(chǎn)孢能力強(qiáng)、其生產(chǎn)性狀好、生長迅速，具有毒力強(qiáng)、殺蟲速度快、對環(huán)境友好的特點(diǎn)，利用該菌株生產(chǎn)的殺蟲真菌制劑，可有效控制稻水象甲及玉米螟等糧食作物上害蟲的種群數(shù)量。具體實(shí)施方式下面結(jié)合具體實(shí)施方式對本專利的技術(shù)方案作進(jìn)一步詳細(xì)地說明。一種球孢白僵菌菌株用于防治糧食作物上害蟲的應(yīng)用。一種球孢白僵菌菌株作為制備防治糧食作物上害蟲藥物的應(yīng)用。所述的糧食作物為水稻、豆類、薯類、青稞、蠶豆或小麥，所述的害蟲為稻水象甲、玉米螟、刺吸式害蟲粉虱、蚜蟲、松毛蟲、蠐螬、蝗蟲、馬鈴薯甲蟲、松褐天牛、白蟻、茶小綠葉蟬、桃小食心蟲。所述球孢白僵菌菌株的培養(yǎng)方法，是將菌株接種于培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)，保持溫度為25-30℃培養(yǎng)5-10d，生產(chǎn)出活化好的孢子粉；所述培養(yǎng)基含有1-3%的蛋白胨、2-4%的碳源、0.5-1.5%的酵母粉、1-2%的酪蛋白、1-3%的牛肉膏以及0.3-0.7%的無機(jī)鹽；所述碳源選自淀粉、黃豆餅粉、大米粉、可溶性淀粉、葡萄糖、蔗糖中一種或幾種；所述無機(jī)鹽選自氯化鈉、磷酸氫鉀、硫酸鎂或碳酸鈣。所述球孢白僵菌菌株的形態(tài)特征：將球孢白僵菌菌株接種在pda平板上，28℃培養(yǎng)觀察菌落形態(tài)特征、產(chǎn)孢結(jié)構(gòu)和孢子形狀與大小。結(jié)果顯示在pda培養(yǎng)基上培養(yǎng)初期菌落呈白色絨毛狀至棉絮狀，產(chǎn)孢后變成淡黃色；菌絲透明，具有分隔和分支，直徑為3.0-3.5μm；分生孢子梗濃密簇生、輪生或單生，呈帚狀分支，大小2.5～5.5×1.5～2.5μm，其末端產(chǎn)生瓶形小梗，大小15.5～25.5×1.5～3.0μm；從瓶梗的末端以向基式連續(xù)形成長串鏈的分生孢子，分生孢子為單細(xì)胞，呈球形或近球形，大小2～3×2～2.5umμm。所述的球孢白僵菌菌株的培養(yǎng)特性：在培養(yǎng)基（培養(yǎng)基含有1-3%的蛋白胨、2-4%的碳源、0.5-1.5%的酵母粉、1-2%的酪蛋白、1-3%的牛肉膏以及0.3-0.7%的無機(jī)鹽）中，分別換用淀粉、黃豆餅粉、大米粉、可溶性淀粉、葡萄糖、蔗糖作為碳源。不同碳源上的菌絲生長和產(chǎn)孢量的結(jié)果顯示，球孢白僵菌菌株菌絲生長偏好蔗糖，第14天時在蔗糖培養(yǎng)基上菌落直徑為5.82cm（見表1）：產(chǎn)孢也偏好蔗糖，第14天時在蔗糖上產(chǎn)孢量為14.12×109個孢子/ml（見表2）。表1：不同碳源上球孢白僵菌菌株的菌落生長特征碳源種類第6天第8天第10天第12天第14天淀粉1.23±0.021.82±0.042.61±0.063.78±0.044.19±0.10黃豆餅粉1.25±0.071.93±0.062.59±0.013.82±0.064.78±0.06大米粉1.21±0.041.89±0.042.72±0.063.76±0.015.11±0.07可溶性淀粉1.30±0.061.88±0.052.64±0.023.81±0.064.17±0.04葡萄糖1.22±0.051.87±0.012.63±0.053.85±0.094.83±0.06蔗糖1.71±0.052.84±0.023.71±0.034.54±0.085.82±0.04注：表中數(shù)據(jù)為3次重復(fù)的平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤（s.e）。表2不同碳源上球飽白僵菌菌株的產(chǎn)孢特征碳源種類第14天的產(chǎn)孢量（109個孢子/ml）淀粉4.98±0.44黃豆餅粉5.11±0.71大米粉3.94±0.39可溶性淀粉2.49±0.42葡萄糖3.57±0.18蔗糖14.12±0.33注：表中數(shù)據(jù)為3次重復(fù)的平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤（s.e）。用葡萄糖替代基礎(chǔ)培養(yǎng)基中的蔗糖，選用氯化鈉、磷酸氫鉀、硫酸鎂或碳酸鈣作為不同的無機(jī)鹽源，不同無機(jī)鹽上的菌絲生長和產(chǎn)孢量的結(jié)果顯示，球孢白僵菌菌株菌絲生長偏好氯化鈉，第14天時在氯化鈉培養(yǎng)基上的菌落直徑為5.33cm（見表3），產(chǎn)孢偏好磷酸氫鉀，第14天時在磷酸氫鉀培養(yǎng)基上產(chǎn)孢量為6.13×108個孢子/ml（見表4）。表3：不同無機(jī)鹽上球孢白僵菌菌株的菌落生長特征無機(jī)鹽種類第6天第8天第10天第12天第14天氯化鈉1.31±0.042.13±0.052.92±0.063.69±0.015.33±0.02磷酸氫鉀1.09±0.031.97±0.032.44±0.023.24±0.024.52±0.08硫酸鎂1.14±0.071.92±0.092.38±0.053.33±0.055.01±0.04碳酸鈣1.27±0.091.98±0.042.61±0.033.47±0.074.37±0.05注：表中數(shù)據(jù)為3次重復(fù)的平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤（s.e）。表4不同無機(jī)鹽上球飽白僵菌菌株的產(chǎn)孢特征無機(jī)鹽種類第14天的產(chǎn)孢量（109個孢子/ml）氯化鈉4.28±0.36磷酸氫鉀6.13±0.54硫酸鎂4.19±0.55碳酸鈣3.74±0.61注：表中數(shù)據(jù)為3次重復(fù)的平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤（s.e）。在培養(yǎng)基上，不同溫度下的菌絲生長和產(chǎn)孢量的結(jié)果顯示，球孢白僵菌菌株菌落生長最適溫度為28℃，在此溫度下第14天時的菌落生長直徑為5.66cm（見表5）；產(chǎn)孢最適溫度也是28℃，在此溫度下第14天時的產(chǎn)孢量為128.71×106個孢子/ml（見表6）。表5：不同溫度下球孢白僵菌菌株的菌落生長特征溫度（℃）第6天第8天第10天第12天第14天150.22±0.030.45±0.051.13±0.041.38±0.051.45±0.04180.61±0.061.07±0.071.64±0.032.11±0.072.64±0.01220.89±0.051.33±0.062.15±0.082.59±0.033.02±0.01251.13±0.011.34±0.052.52±0.092.69±0.083.42±0.02281.12±0.012.77±0.033.45±0.014.89±0.045.66±0.06301.02±0.021.54±0.012.68±0.023.01±0.043.42±0.05注：表中數(shù)據(jù)為3次重復(fù)的平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤（s.e）。表6：不同溫度下球飽白僵菌菌株的產(chǎn)孢特征溫度（℃）第14天的產(chǎn)孢量（109個孢子/ml）1513.65±3.841819.78±2.452254.92±11.232562.74±15.7728128.71±18.723088.65±20.16注：表中數(shù)據(jù)為3次重復(fù)的平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤（s.e）。所述球孢白僵菌菌株在防治糧食作物上害蟲的應(yīng)用：球孢白僵菌菌株產(chǎn)生的分生孢子，對糧食作物上害蟲具有高侵染能力，孢子能附著在昆蟲的表皮，并萌發(fā)產(chǎn)生芽管，菌株借助芽管從昆蟲的節(jié)間膜侵入，繼而消化和破壞昆蟲的組織，殺死昆蟲。菌株孢子的應(yīng)用制劑，可配制成10%球孢白僵菌可濕性粉劑進(jìn)行植物葉面噴霧殺蟲，其配方組成含量比例（重量比）為：球孢白僵菌純孢粉（200億孢子/克）10%,葡萄糖（粉末）2%、木質(zhì)素磺酸鈉1%,淀粉3%，分散劑bd553%,洗衣粉3%、高嶺土補(bǔ)至100%。田間應(yīng)用時將該制劑加水稀釋2000倍，其懸浮液中蠟蟻輪枝菌孢子的濃度為106個/ml，使用大容量噴霧器均勻噴灑在有害蟲的糧食作物表面，在相對濕度85%的溫室環(huán)境中，對糧食作物上害蟲7天的累計防治效果達(dá)到98.9%，可有效控制害蟲種群，可用于無公害蔬菜和綠色食品蔬菜的生產(chǎn)溫室。上面對本專利的較佳實(shí)施方式作了詳細(xì)說明，但是本專利并不限于上述實(shí)施方式，在本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員所具備的知識范圍內(nèi)，還可以在不脫離本專利宗旨的前提下作出各種變化。當(dāng)前第1頁12