本發(fā)明涉及植物組織培養(yǎng)育苗技術領域,具體涉及一種捕蠅草組織培養(yǎng)育苗方法。
背景技術:
捕蠅草(Dionaea muscipula),英文名稱為Venus Flytrap,是原產(chǎn)于北美洲的一種多年生草本植物,是一種非常有趣的食蟲植物。隨著人們生活水平日益改善,越來越多的花友開始種植捕蠅草。然而,在原產(chǎn)地的捕蠅草在生存上卻受到人類活動的威脅。人口快速增加因而剝奪捕蠅草的生存空間,而且因為人為干預、自然野火的發(fā)生,使得這些原產(chǎn)地開始長出一些小型灌木,遮蔽捕蠅草的陽光,造成一些捕蠅草品種的瀕臨滅絕。
捕蠅草的繁殖方式主要是播種繁殖和葉插繁殖。
采用播種繁殖存在的問題為:捕蠅草可以自花授粉,但通常得進行人工授粉才確實會結果,捕蠅草因雌雄蕊不會一起成熟,人工授粉較難成功,捕蠅草的種子不耐保存,且種子非常細小直徑不到一毫米,不易保存,極易損壞。
采用葉插繁殖存在的問題為:采用葉插繁殖新芽形成很慢,并且不同品種對溫濕度,光照等要求不一樣,葉插繁殖難以成功。
采用傳統(tǒng)播種繁殖、葉插繁殖,有著成功率極低,繁殖效率緩慢等缺點,難以滿足捕蠅草市場需求。目前,關于捕蠅草的繁殖研究很少,國內(nèi)進行工廠化生產(chǎn)捕蠅草的企業(yè)很少,還沒有一種關于捕蠅草組織培養(yǎng)育苗的方法,因此在一定程度上制約了捕蠅草的工廠化生產(chǎn)。
技術實現(xiàn)要素:
本發(fā)明要解決的技術問題是:提供一種捕蠅草組織培養(yǎng)育苗方法,提高捕蠅草組培苗栽培的成活率,節(jié)約成本,為捕蠅草工廠化生產(chǎn)提供關鍵技術。
本發(fā)明的目的是通過以下技術方案實現(xiàn)的:
一種捕蠅草組織培養(yǎng)育苗方法,包括以下步驟:
(1)培養(yǎng)基制備:培養(yǎng)基包括誘導增殖培養(yǎng)基和生根培養(yǎng)基,誘導增殖培養(yǎng)基為2/3MS+6-BA01mg/L+IBA0.2mg/ml+蔗糖30g/L+瓊脂5g/L+ph5.9;生根培養(yǎng)基為1/2MS+NAA0.1mg/L+蔗糖30g/L+活性碳0.2g/L+瓊脂5g/L+ph5.9;將配制好的誘導增殖培養(yǎng)基和生根培養(yǎng)基分別以每瓶80ml裝入培養(yǎng)瓶中,采用121℃、0.5MPa進行滅菌25min后冷卻凝固備用;
(2)外植體制備:在春夏季節(jié),選用成熟健壯4年以上的捕蠅草作為外植體母體,取新發(fā)出且鮮綠的芽頭作為外植體,并進行消毒、清洗;
(3)誘導培養(yǎng):接種器具進行滅菌,雙手消毒后,將步驟(2)中制備得到的外植體在超凈工作臺內(nèi),按無菌操作要求把外植體置于步驟(1)制備得到的誘導增殖培養(yǎng)基中,外植體傷口處接觸到誘導增殖培養(yǎng)基,蓋好培養(yǎng)瓶蓋后放置于消毒后的培養(yǎng)室內(nèi)進行培養(yǎng)30天,即可誘導培養(yǎng)出完整小植株;
(4)生根培養(yǎng):將誘導培養(yǎng)得到的完整小植株在超凈工作臺內(nèi)按無菌要求轉(zhuǎn)接入步驟(1)制備得到的生根培養(yǎng)基中進行生根培養(yǎng)2~3個月;
(5)套袋馴化:將生根培養(yǎng)得到幼苗取出,用1000倍多菌靈浸泡10min后流水沖洗后種植于泥炭土與珍珠巖混合基質(zhì)中,用透光的袋子罩住整株植株,放置在散光通風處悶養(yǎng)20-30天后取走袋子即可。
優(yōu)選的,步驟(2)中外植體消毒、清洗步驟是:先用流水沖洗30min,之后用吸水紙吸干水份,然后于超凈工作臺上用75%的乙醇浸泡1~3min,期間不斷搖晃外植體,再用無菌水沖洗3~5遍后用無菌鑷子取出放置在濃度為0.1~0.2%升汞中浸泡3~5min,期間不斷搖晃外植體,再用無菌水沖洗5~8遍后用無菌鑷子取出放置在無菌吸水紙上吸干水份,即可。
優(yōu)選的,步驟(3)中,進行誘導培養(yǎng)時,培養(yǎng)室溫度控制在25℃,濕度40~50%,光照4500Lux每天10小時。
優(yōu)選的,步驟(4)中,生根培養(yǎng)的溫度控制在25℃,光照5500Lux每天12小時。
優(yōu)選的,步驟(5)中,泥炭土與珍珠巖混合基質(zhì)中泥炭土與珍珠巖的體積比為4:1。
本發(fā)明的有益效果:采用上述方法后,本發(fā)明解決了傳統(tǒng)播種繁殖、葉插繁殖成功率極低、繁殖效率緩慢等問題,運用本發(fā)明進行捕蠅草組織培養(yǎng)育苗,培養(yǎng)基繁殖系數(shù)達到4~5,繁殖一批僅需4~6個月的時間,具有繁殖系數(shù)高、繁殖速度快的特點,而且繁育出來的種苗具有與母體相同的植物特征,抗性好。大大解決了捕蠅草繁殖困難的問題,有利于捕蠅草進行規(guī)?;⒐S化生產(chǎn)。
具體實施方式
下面結合具體的實施例對發(fā)明進行進一步介紹:
一種捕蠅草組織培養(yǎng)育苗方法,包括以下步驟:
(1)培養(yǎng)基制備:培養(yǎng)基包括誘導增殖培養(yǎng)基和生根培養(yǎng)基,誘導增殖培養(yǎng)基為2/3MS+6-BA01mg/L+IBA0.2mg/ml+蔗糖30g/L+瓊脂5g/L+ph5.9;生根培養(yǎng)基為1/2MS+NAA0.1mg/L+蔗糖30g/L+活性碳0.2g/L+瓊脂5g/L+ph5.9;將配制好的誘導增殖培養(yǎng)基和生根培養(yǎng)基分別以每瓶80ml裝入培養(yǎng)瓶中,采用121℃、0.5MPa進行滅菌25min后冷卻凝固備用;
(2)外植體制備:在春夏季節(jié),選用成熟健壯4年以上的捕蠅草作為外植體母體,取新發(fā)出且鮮綠的芽頭作為外植體,并進行消毒、清洗;其中,外植體消毒、清洗步驟是:先用流水沖洗30min,之后用吸水紙吸干水份,然后于超凈工作臺上用75%的乙醇浸泡1~3min,期間不斷搖晃外植體,再用無菌水沖洗3~5遍后用無菌鑷子取出放置在濃度為0.1~0.2%升汞中浸泡3~5min,期間不斷搖晃外植體,再用無菌水沖洗5~8遍后用無菌鑷子取出放置在無菌吸水紙上吸干水份,即可;
(3)誘導培養(yǎng):接種器具進行滅菌,雙手消毒后,將步驟(2)中制備得到的外植體在超凈工作臺內(nèi),按無菌操作要求把外植體置于步驟(1)制備得到的誘導增殖培養(yǎng)基中,外植體傷口處接觸到誘導增殖培養(yǎng)基,蓋好培養(yǎng)瓶蓋后放置于消毒后的培養(yǎng)室內(nèi)進行培養(yǎng)30天,培養(yǎng)室溫度控制在25℃,濕度40~50%,光照4500Lux每天10小時,即可誘導培養(yǎng)出完整小植株;
(4)生根培養(yǎng):將誘導培養(yǎng)得到的完整小植株在超凈工作臺內(nèi)按無菌要求轉(zhuǎn)接入步驟(1)制備得到的生根培養(yǎng)基中進行生根培養(yǎng)2~3個月,生根培養(yǎng)的溫度控制在25℃,光照5500Lux每天12小時;
(5)套袋馴化:將生根培養(yǎng)得到幼苗取出,用1000倍多菌靈浸泡10min后流水沖洗后種植于泥炭土與珍珠巖混合基質(zhì)中,泥炭土與珍珠巖的體積比為4:1,用透光的袋子罩住整株植株,放置在散光通風處悶養(yǎng)20-30天后取走袋子即可。
以上內(nèi)容是結合具體的優(yōu)選實施方式對本發(fā)明所作的進一步詳細說明,不能認定本發(fā)明的具體實施只局限于這些說明。對于本發(fā)明所屬技術領域的普通技術人員來說,在不脫離本發(fā)明構思的前提下,還可以做出若干簡單推演或替換,都應當視為屬于本發(fā)明的保護范圍。