本發(fā)明涉及植物組織培養(yǎng)技術(shù)領(lǐng)域，特別是涉及一種扁桃斑鳩菊的簡化組培快繁方法。

背景技術(shù)：
扁桃斑鳩菊(VernoniaamygdalinaDel.)又名桃葉斑鳩菊、杏葉斑鳩菊、神奇樹、苦樹、南非樹，為菊科斑鳩菊屬植物，原產(chǎn)于非洲。其葉片可以安全食用，在尼日利亞等地被當作一種蔬菜，可入藥，在治療腫瘤尤其是防治乳腺癌、降血壓方面極具潛力。扁桃斑鳩菊在東南亞及臺灣等地民間應(yīng)用較多，而中國大陸則相對比較陌生，近年來兩廣地區(qū)陸續(xù)有引進，但相關(guān)研究較少。采用組織培養(yǎng)技術(shù)生產(chǎn)種苗，可以實現(xiàn)周年生產(chǎn)、保障種苗的品質(zhì)，加快推進種苗的標準化生產(chǎn)，但生產(chǎn)工藝繁瑣、需要經(jīng)過誘導(dǎo)無菌芽、叢生芽誘導(dǎo)繼代和生根培養(yǎng)等環(huán)節(jié)。因此建立并優(yōu)化組培快繁技術(shù)體系，不斷改進培養(yǎng)基配方、簡化生產(chǎn)流程，對加快產(chǎn)業(yè)化、降低生產(chǎn)成本具有重要意義。目前，尚無扁桃斑鳩菊組培快繁技術(shù)的相關(guān)報道。

技術(shù)實現(xiàn)要素：
本發(fā)明的目的是提供一種扁桃斑鳩菊的簡化組培快繁方法，該方法在同一種培養(yǎng)基上進行扁桃斑鳩菊的繼代培養(yǎng)和生根培養(yǎng)，實現(xiàn)了繼代培養(yǎng)和生根培養(yǎng)同時進行的一步成苗，大大簡化了生產(chǎn)流程，節(jié)約了物料成本和人工成本，為扁桃斑鳩菊的規(guī)?；M培快繁提供了工藝方法。本發(fā)明所述的一種扁桃斑鳩菊的簡化組培快繁方法，包括以下步驟：1)外植體采集：選取生長健壯、無病蟲害的優(yōu)良植株，剪取木質(zhì)化程度較輕的當年生嫩枝為外植體；2)外植體消毒：對步驟1)得到的外植體進行浸泡消毒，并用無菌水沖洗；3)無菌芽誘導(dǎo)：將步驟2)完成消毒的外植體莖段接種于誘導(dǎo)培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)；4)繼代-生根培養(yǎng)：將步驟3)培養(yǎng)得到無菌芽分段切割，轉(zhuǎn)入附加有特定植物生長調(diào)節(jié)劑的MS-z培養(yǎng)基進行培養(yǎng)；5)移栽：待根系發(fā)育完成，洗凈基部培養(yǎng)基，移栽到備用的基質(zhì)中。本發(fā)明步驟2)所述的外植體消毒，優(yōu)選將步驟1)得到的外植體截成長1.2-1.5cm的帶節(jié)小段，剪去葉片，只保留葉柄基部(長約0.5cm)，流水沖洗20min備用；在超凈工作臺上，用75％(v/v)酒精浸泡10s，0.1％升汞溶液振蕩消毒8min，再用無菌水沖洗5次洗去殘留藥液，用無菌濾紙吸干水分后，切去莖段兩端和葉柄上部少許(保留長度約0.2cm)，備用。步驟3)所述的誘導(dǎo)培養(yǎng)基為MS基本培養(yǎng)基附加6-芐氨基腺嘌呤(6-BA)0.5mg/L和萘乙酸(NAA)0.05mg/L，即MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.05mg/L，蔗糖和瓊脂粉添加量分別為每L培養(yǎng)基30g、6g，滅菌前培養(yǎng)基pH調(diào)整為6.0，培養(yǎng)室溫度為(23±2)℃，光照強度1500-2500lx，光照時間為12h/d。在誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，側(cè)芽易于誘導(dǎo)且生長迅速，誘導(dǎo)率可達70％，以春夏季消毒效果更佳，以莖段消毒誘導(dǎo)的無菌芽多為腋芽，即“以芽繁芽”的方式獲得無菌芽，雖有愈傷組織產(chǎn)生，但愈傷組織很少成苗，降低了變異率，保證了種苗的品質(zhì)。步驟4)所述的繼代-生根培養(yǎng)，優(yōu)選待無菌芽生長至2cm時，將其分段切割，轉(zhuǎn)入附加有特定植物生長調(diào)節(jié)劑的繼代-生根培養(yǎng)基進行培養(yǎng)，培養(yǎng)周期為35天，培養(yǎng)室光照時間為16h/d，光照強度2000-3500lx，培養(yǎng)室溫度控制在(21±2)℃以減少玻璃化、促使組培苗健壯；所用繼代-生根培養(yǎng)基即MS-z+6-BA0.3mg/L+IBA0.15mg/L+PP333(多效唑)0.1mg/L，所述的MS-z培養(yǎng)基每升中所含的組分及濃度(mg/L)如下：大量元素：硝酸鉀1900、硝酸銨412.5、二水氯化鈣880、七水硫酸鎂370、磷酸二氫鉀170、七水硫酸亞鐵27.8、乙二胺四乙酸二鈉37.3；微量元素：四水硫酸錳22.3、七水硫酸鋅8.6、硼酸3.1、二水鉬酸鈉0.25、碘化鉀0.83、五水硫酸銅0.025、六水氯化鈷0.025；有機物：肌醇100.0、甘氨酸2.0、鹽酸吡哆醇(VB6)0.5、煙酸0.5、鹽酸硫胺素(VB1)0.1；其它：瓊脂8000、蔗糖40000、pH6.0；若要繼續(xù)擴增，應(yīng)在培養(yǎng)20-25天時繼代，此時苗高3cm左右，根系較短，通過分段切割重新轉(zhuǎn)入MS-z+6-BA0.3mg/L+IBA0.15mg/L+PP3330.1mg/L培養(yǎng)基即可；若要生根移栽，則應(yīng)繼續(xù)培養(yǎng)至35天，此時苗高3-5cm，植株健壯、根系良好，移入煉苗棚煉苗10天后即可移栽。步驟5)所述...