本發(fā)明涉及植物組織培養(yǎng)技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及涉及葉藝蘭花品種的組織培養(yǎng)繁殖方法。

背景技術(shù)：
葉藝蘭是蘭花的一個(gè)重要觀賞種類，在蘭花的選育、馴化、栽培中出現(xiàn)了一類以賞葉為主的蘭花品種，這些品種的葉片出現(xiàn)了金邊、金心、銀邊、銀心、縞藝、斑藝等葉藝，具有極高的觀賞價(jià)值。這些葉色的變異多數(shù)是由于部分細(xì)胞變異引起葉色的變化，形成嵌合體植株，這種性狀是不能通過種子繁殖保持的，只能通過無性繁殖保存，其性狀多不穩(wěn)定，但部分葉藝性狀如銀邊、銀拖等在分株繁殖時(shí)是比較穩(wěn)定的；植物組織培養(yǎng)其實(shí)質(zhì)也是無性繁殖，但在葉藝蘭組織培養(yǎng)時(shí)，葉藝性狀丟失頻率較高，失藝植株的觀賞性下降，直接影響到商品的價(jià)格。如果在葉藝蘭組培苗生產(chǎn)時(shí)減少失藝頻率，可以大大提高生產(chǎn)效率。目前有少量這方面的研究報(bào)道，但在生產(chǎn)實(shí)踐中仍存在較大的問題。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明的目的是針對大花蕙蘭葉藝品種在組培過程中出現(xiàn)失藝的問題，通過調(diào)整培養(yǎng)基配方，結(jié)合培養(yǎng)物前期形態(tài)選擇，提供一種葉藝蘭組培生產(chǎn)方法，以降低葉藝品種組培失藝的頻率。本發(fā)明的葉藝蘭組培生產(chǎn)方法，其特征包括以下步驟：步驟1、材料選擇：葉藝蘭組培增殖的PLB（類原球莖）；步驟2、PLB（類原球莖）增殖：與常規(guī)PLB增殖方式中對PLB進(jìn)行水平和垂直切割不同，本發(fā)明自基部將完整的PLB切下后，整個(gè)接種到增殖培養(yǎng)基上，通過完整的PLB表面分化出新PLB進(jìn)行增殖，繼代操作中，只選擇鮮綠色的PLB進(jìn)行增殖，將顏色深綠和白化的PLB丟棄。本發(fā)明不采用通常所用的將PLB進(jìn)行多次切割形成小塊的增殖方法，以保持其嵌合狀態(tài)，降低葉藝丟失的頻率。本發(fā)明所采用的增殖培養(yǎng)基上，所接材料的PLB在嵌合狀態(tài)、白化狀態(tài)和正常狀態(tài)下顏色差異明顯，可通過顏色將大部分失藝材料篩選出來，在繼代過程中將顏色深綠和白化的PLB丟棄，保證增殖材料處于嵌合狀態(tài)。步驟3、PLB分化：將經(jīng)過篩選增殖的PLB轉(zhuǎn)接到液體分化培養(yǎng)基上，震蕩培養(yǎng)14～21天后PLB上端分化出苗。本發(fā)明所采用的分化培養(yǎng)基上分化出的苗85%以上保持了葉藝性狀。步驟4、生根壯苗培養(yǎng)：將分化培養(yǎng)基上形成的1cm左右高的帶藝小苗轉(zhuǎn)接到生根培養(yǎng)基上，培養(yǎng)7天左右可見小苗下端生根，繼續(xù)培養(yǎng)30～50天可形成健壯植株。步驟5、試管苗移栽：當(dāng)植株約3～5cm高時(shí)，將培養(yǎng)瓶轉(zhuǎn)移到自然光下煉苗7～10天，然后將其從培養(yǎng)容器中取出，洗凈根部的培養(yǎng)基，移入經(jīng)發(fā)酵的松樹皮培養(yǎng)基質(zhì)中，保持適當(dāng)通風(fēng)和足夠的濕度，移栽的成活率均可達(dá)95%以上。其中，步驟2的培養(yǎng)條件為培養(yǎng)溫度22～24℃，光照度1500～2000lx，光照12小時(shí)/天。步驟3中的培養(yǎng)條件為培養(yǎng)溫度25～28℃，光照度1500～2000lx，光照12小時(shí)/天，搖床轉(zhuǎn)速100rpm。步驟4中的培養(yǎng)條件為培養(yǎng)溫度25～28℃，光照度1500～2000lx，光照12小時(shí)/天。進(jìn)一步的，步驟2中增殖培養(yǎng)基采用大量和微量元素減半的MS培養(yǎng)基（1/2MS）為基本培養(yǎng)基，附加蛋白胨（Peptone）0.5～3g.L-1、水解酪蛋白（CH）0.2～0.5g.L-1、萘乙酸（NAA）0.1～1mg.L-1、多效唑（PP333）0.1～0.5mg.L-1、香蕉勻漿50～200g.L-1，蔗糖15～30g.L-1，瓊脂6～7g.L-1，活性炭（AC）0.5～2g.L-1；pH5.4～5.6。步驟3中分化培養(yǎng)...