本發(fā)明涉及育種技術(shù)領(lǐng)域,尤其涉及一種水稻一年多代的育種方法。
背景技術(shù):
水稻是世界主要糧食作物之一,其產(chǎn)量和品質(zhì)深刻地影響著國際糧食的供應(yīng)和人民生活水平的提高。水稻是一年生喜溫短日性作物,適合在溫度較高的低緯度地區(qū)或者溫度較高的季節(jié)生長繁殖。低溫使生長發(fā)育遲緩,較高的溫度使生長發(fā)育加快,除溫度之外,水稻生育期長短主要還是受光照長短的制約,當(dāng)水稻具備了一定的營養(yǎng)生長量時(shí),如果處在較短日照的光周期內(nèi),發(fā)育加快抽穗提前,反之若處在日照較長的光周期內(nèi),發(fā)育緩慢抽穗延遲,甚至不能抽穗。海南省最南部的幾個(gè)縣市地處北緯18度左右,一年中除4~6月之外,其余季節(jié)日照都比較短,尤其是冬季氣溫也適宜水稻生長,依據(jù)水稻喜溫、短日性的特點(diǎn),可以滿足水稻正常生長又能快速繁殖的氣候條件。培育新的水稻品種是一個(gè)把來自不同親本的有利基因聚合起來,再通過漫長的鏈鎖交換和分離穩(wěn)定的過程。按現(xiàn)有的水稻雜交育種技術(shù),培育一個(gè)新品種,從雜交配組到性狀穩(wěn)定進(jìn)入測產(chǎn)鑒定圃,一般說來至少需要7~8個(gè)世代的促進(jìn),而對于一些性狀差異較大或親緣關(guān)系較遠(yuǎn)的雜交后代,則需要更多的世代促進(jìn)方能趨以穩(wěn)定,這么漫長的培育過程,尤其是占據(jù)我國水稻面積最大的中晚稻,由于具有較強(qiáng)的感光性,一年只能在當(dāng)?shù)赝瓿梢患荆词乖偃ギ惖貧鉁剌^高的地方冬繁一季,每年只能完成兩季,因此,培育一個(gè)穩(wěn)定的新品系少則4~5年,多則6~7年甚至更長時(shí)間。如此漫長的時(shí)間大大制約了新品種的培育速度,傳統(tǒng)的繁殖技術(shù)急需改進(jìn)。目前,關(guān)于作物一年多代繁育技術(shù)的研究有少量報(bào)道,具體如下:申請?zhí)枮?9100489.2的發(fā)明專利授權(quán)文獻(xiàn)公開了一種一年多代的植物快速育種方法,該方法將離體幼胚直接誘發(fā)成苗與縮短發(fā)育進(jìn)程相結(jié)合,省去種子后期發(fā)育所耗的時(shí)間并躲避相應(yīng)過程中的抑制物積累,增強(qiáng)接受處理的敏感性;幼苗移栽前采用KT處理,移栽后用硝態(tài)氮作唯一氮源,并給予可忍受的高溫干早和光照處理,控制植物營養(yǎng)體生長,加速發(fā)育進(jìn)程;利用分子標(biāo)記在幼苗其進(jìn)行篩選,使快速發(fā)育技術(shù)與分子標(biāo)記選擇相得益彰。申請?zhí)枮?01310075688.5的發(fā)明專利申請文獻(xiàn)公開了一種大豆當(dāng)?shù)匾荒甓啻N方法,具體包括如下步驟:1)大豆開花后18~26天采摘豆莢,干燥處理2~6天;2)取步驟1)干燥處理后的豆莢,取出豆莢中的幼胚,直接放在培養(yǎng)基上使幼胚萌發(fā);所述培養(yǎng)基為MSB+谷氨酰胺400-500mg/L+蔗糖30~50g/L+瓊脂6.5g/L,pH=5.85的固體培養(yǎng)基;3)幼胚萌發(fā)后將其移栽到蛭石中,通過澆灌Hoagland營養(yǎng)液,使其成苗并且生長;4)至大豆開花,重復(fù)步驟1~3。該方法將大豆幼胚培養(yǎng)在適宜的培養(yǎng)基上,使其直接快速成苗或經(jīng)過移栽成苗,節(jié)省了種子成熟所消耗的時(shí)間,縮短大豆植株的發(fā)育周期,加快了育種的進(jìn)程,提高了育種的效率。上述方法均對幼胚進(jìn)行處理以縮短成苗時(shí)間,進(jìn)而縮短作物全生育期,但上述方法并未考慮實(shí)際生產(chǎn),需在實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行,無法應(yīng)用于大田,更無法大面積推廣。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素:
本發(fā)明提供了一種水稻一年多代育種方法,該方法從作物栽培的角度來解決水稻育種周期過長的問題,縮短了水稻的生育期,使水稻能夠一年完成3~5個(gè)選種周期,加快了育種進(jìn)程,該方法利于大面積的推廣。水稻一年多代育種方法,包括以下步驟:(1)取水稻種子,破除休眠、催芽后進(jìn)行直播;(2)待水稻進(jìn)入揚(yáng)花期,對母本剪穎去雄、授粉操作;(3)至灌漿成熟期,選取最早成熟的谷種或糙米種作為下一代親本;(4)按照步驟(1)~(3)重復(fù)多代。常規(guī)水稻育種或水稻栽培過程中,水稻種子直接浸種催芽,即可進(jìn)行播種;對水稻進(jìn)行破除休眠處理,可以縮短水稻萌發(fā)時(shí)間,縮短整個(gè)種子播種前處理的時(shí)間。直播作為水稻栽培的一種方式,無需進(jìn)行本田移栽,避免了水稻幼苗返青所花費(fèi)的時(shí)間,縮短水稻全生育期10~15天。雜交水稻育種中,水稻進(jìn)入揚(yáng)花期后,母本需進(jìn)行去雄,而去雄的方式多種多樣,例如:溫水、溫氣殺雄,剪穎去雄,化學(xué)殺雄等。本發(fā)明所述的剪穎去雄為選用已有少量開花的稻穗,取中上部支梗的頂端穎花和基部穎花(即第二天將會(huì)開花的優(yōu)勢穎花),于開花閉穎2小時(shí)后,剪穎去雄、套袋。剪穎時(shí),剪去穎殼上部的1/3,將露出的雄蕊剪去,保留雌蕊。剪穎后進(jìn)行授粉。由于采用剪穎去雄的方式,穎殼不完整,造成籽粒的灌漿進(jìn)程加快,即提前成熟,一般情況下可縮短10~15天的生育期。水稻親本生育期的長短對實(shí)現(xiàn)一年多代育種具有重要作用,在水稻親本生育期短的情況下再配合上述方法,可以進(jìn)一步縮短育種進(jìn)程。作為優(yōu)選,采用具感光性且全生育期為70~100天的水稻品種。該水稻品種既可采用粳稻,也可采用秈稻;可采用東亞地區(qū)中、晚粳稻品種,也可采用中國南方早秈稻。水稻產(chǎn)量與水稻生育期的長短有一定影響,但仍存在生育期短且產(chǎn)量高的水稻品種,以生育期短的親本篩選生育期短且產(chǎn)量高的水稻品種,不僅能夠?qū)崿F(xiàn)一年多代的培育,還能夠滿足水稻品比中對產(chǎn)量的要求。作為優(yōu)選,水稻品種為嘉991、單測56、嘉33、嘉0664以及嘉64。例如:以嘉991為母本、單測56為父本進(jìn)行雜交、篩選后獲得的水稻品種比嘉991高產(chǎn),產(chǎn)量增幅大。優(yōu)選地,所述水稻親本的組合為嘉991與單測56、嘉33與嘉0664、嘉64與嘉33。種子破除休眠的方法有多種,例如:預(yù)先冷凍處理、赤霉素處理和雙氧水處理等,上述方法的著重點(diǎn)在于提高種子的發(fā)芽勢和發(fā)芽率,對于快速打破種子休眠、加快種子發(fā)芽方面,采用硝酸溶液的效果最佳,故,作為優(yōu)選,所述破除休眠的方法為用硝酸水溶液浸種。更優(yōu)選,浸種時(shí)間為58~60小時(shí)。直播過程中,植株間的種植密度對水稻生長、產(chǎn)量以及生育期長短都有影響。種植密度過密使得植株單位面積的分蘗數(shù)增加,引起倒伏和疾病,并會(huì)延緩水稻的成熟,進(jìn)而延長水稻生育期。作為優(yōu)選,水稻直播時(shí)的行株距為8cm×8cm。雜交育種過程中,只有保證母本、父本的同步培育,才能最大化的實(shí)現(xiàn)一年多代育種;母本剪穎去雄過程會(huì)縮短其灌漿期,故,父本也應(yīng)進(jìn)行剪穎。故,步驟(2)中,通過調(diào)節(jié)播期,保證父本與母本同時(shí)進(jìn)入揚(yáng)花期,對父本剪穎。待水稻進(jìn)入灌漿后期,水稻各分蘗上的籽粒開始成熟,但成熟時(shí)間不同,且成熟時(shí)間間隔差距較大,選擇成熟最早的一部分谷種或糙米種進(jìn)行后續(xù)種子處理,然后直接播種,可以縮短時(shí)間。由于揚(yáng)花期期間,水稻穎殼被剪,造成籽粒成熟時(shí)部分籽粒谷殼脫落,形成糙米。糙米更易破除休眠和快速催芽,花費(fèi)時(shí)間更短。然而,從水稻成熟后進(jìn)行脫粒開始,到谷種或糙米種預(yù)處理,再到播種,期間需要花費(fèi)額外的時(shí)間,易造成兩代水稻種植期間出現(xiàn)空擋時(shí)間,如能夠縮短該空擋時(shí)間,也能夠縮短水稻種植全周期的時(shí)間。作為優(yōu)選,步驟(3)中,選取最早成熟的稻穗作為下一代的親本。直接取稻穗進(jìn)行干燥,可使支梗變脆,在后續(xù)的破除休眠和催芽過程中,可以直接脫落,省去了脫粒的過程。摘穗過程中,部分糙米會(huì)從稻殼中脫落下來,可將其與谷種一同進(jìn)行破除休眠和催芽,并進(jìn)行直播。作為優(yōu)選,所述水稻種子的含水量小于≤13%,催芽至種子破胸率不低于80%時(shí)進(jìn)行直播。實(shí)現(xiàn)一年多代育種中,選擇適宜的育種地點(diǎn),即選擇高溫、短日照地區(qū),對于感光性水稻可明顯縮短其全生育期。在中國,海南是作物育種的最佳選擇之地,根據(jù)海南的氣候特點(diǎn),選擇適合的播期,可以進(jìn)一步的配合本發(fā)明方法,以縮短育種周期。與現(xiàn)有技術(shù)相比,本發(fā)明具有以下有益效果:本發(fā)明采用直播栽培、剪穎去雄、糙米催芽播種,硝酸溶液浸種快速打破種子休眠、加速種子萌發(fā)的育種栽培方式,縮短了水稻的全生育期,進(jìn)而縮短育種進(jìn)程,實(shí)現(xiàn)水稻一年多代育種,解決了現(xiàn)有技術(shù)中育種周期長的問題。具體實(shí)施方式下面結(jié)合具體實(shí)施方式對本發(fā)明作進(jìn)一步的闡述和說明。下列實(shí)施例水稻育種方式中未做詳細(xì)說明的均為常規(guī)技術(shù)手段。實(shí)施例1一年五代繁育一、實(shí)驗(yàn)地點(diǎn):嘉興市農(nóng)科院本部試驗(yàn)田和海南陵水縣椰林鎮(zhèn)南嶺育種基地二、實(shí)驗(yàn)材料:光身晚粳稻嘉64(母本)、早熟晚粳非光葉品種嘉33(父本)三、播期:第一季:2009年5月25日播種(第一季在嘉興,其余在海南);第二季:2009年9月22日播種;第三季:2009年11月26日播種;第四季:2010年2月23日播種;第五季:2010年5月上旬日播種。四、育種方法(1)取水稻親本種子,置于硝酸水溶液中浸種58小時(shí),徹底消除種子休眠,采用清水淋洗3~5次后,放入30℃的恒溫箱中催芽,至80%的種子破胸后,進(jìn)行直播。硝酸水溶液的制備方法為:用量筒量取,按1000mL清水加3.5mL、36%分析純濃硝酸原液的比例配制。直播方法為:取播種用的小樣本材料,按秧板寬110cm、溝寬30cm的規(guī)格劃線做畦平整秧板,把秧板一分為二,按50cm劃出播種區(qū),每份材料按8×8cm規(guī)格的行株距實(shí)行點(diǎn)播50粒,要求行株距均勻。水稻三葉期時(shí),進(jìn)行灌水、重施肥料促水稻早發(fā)。大群體直播的材料在分蘗開始前進(jìn)行刪密間苗,保證分離世代的每個(gè)單株獨(dú)立生長,便于單株選擇和檢測。高溫短日性較強(qiáng)的中粳或晚粳,特別是秋、春氣溫較高季節(jié)加代、發(fā)育良好的個(gè)體,5~6葉期就能開始幼穗分化,40多天開始抽穗,宜在分蘗期追施一次肥料,之后不再施肥,以保健壯、早熟,抽穗整齊不倒伏。(2)待水稻進(jìn)入揚(yáng)花期,進(jìn)行雜交操作,對母本剪穎去雄,授粉操作;剪穎去雄和授粉的具體過程為:水稻進(jìn)入揚(yáng)花期,待出現(xiàn)少量開花的稻穗后,取中上部支梗的頂端穎花和基部穎花30粒,用剪刀將選好的母本穗子先進(jìn)行整穗,然后,將已開花和2~3天內(nèi)不會(huì)開花的穎花用小剪刀剪去,僅留成熟的但尚未開放的穎花,再將穎殼上端1/3-1/4剪掉,然后用鑷子夾除雄蕊。為保證母本與父本生育期一致,采用上述方法對父本進(jìn)行剪穎去雄。(3)至灌漿成熟期,選取最早成熟的稻穗(即第二代種子),不進(jìn)行脫粒,直接置于50℃的電熱干燥箱中快速干燥24小時(shí)至種子含水量小于等于13%,再將其置于硝酸水溶液(配制方法同上)中浸種60小時(shí),打破種子休眠,清水淋洗后,30℃恒溫催芽,至80%種子破胸后,進(jìn)行播種。由于揚(yáng)花期時(shí),穎殼會(huì)被剪去一部分,所以,在稻穗干燥、破除休眠、催芽的過程中,部分籽粒會(huì)從穎殼中脫落,即為糙米。糙米與未脫落的谷種的處理方法相同。(4)按照步驟(1)~(3)重復(fù)多代。表1光身稻嘉64近等系建立流程說明:P1是早熟晚粳光身稻嘉64,P2是早熟晚粳非光葉品種嘉33,已經(jīng)通過江蘇、浙江和上海審定。該試驗(yàn)成功實(shí)現(xiàn)了一年連續(xù)5季的繁育工作。表1是光身晚粳稻嘉64光葉基因近等系快速建立的過程,自2009年9月1日利用嘉興單晚種植的F1(光身稻嘉64與高產(chǎn)推廣品種嘉33雜交),繼續(xù)與嘉33回交,9月22日在海南省陵水縣椰林鎮(zhèn)南門嶺育種基地播種B1F1至2010年4月20日的213天內(nèi)連續(xù)快速繁育3代,平均1代71天,第4代已于4/23連同P2繼續(xù)播種加代,進(jìn)入夏秋季水稻的生育期還會(huì)縮短更多,以上述的繁育方法,一年可望完成5~6季。實(shí)施例2一年四代繁育一、實(shí)驗(yàn)地點(diǎn):嘉興市農(nóng)科院本部試驗(yàn)田和海南陵水縣椰林鎮(zhèn)南嶺育種基地二、實(shí)驗(yàn)材料:光身晚粳稻嘉0664(父本)、早熟晚粳品種嘉33(母本)三、播期:第一季:2006年10月初海南播種;第二季:2006年12月30日海南播種;第三季:2007年3月20日海南播種;第四季:2007年6月10日嘉興播種。四、育種方法(1)取水稻親本種子,置于硝酸水溶液中浸種60小時(shí),徹底消除種子休眠,采用清水淋洗3~5次后,放入30℃的恒溫箱中催芽,至80%的種子破胸后,進(jìn)行直播。硝酸水溶液的制備方法為:用量筒量取,按1000mL清水加2.5mL、質(zhì)量分?jǐn)?shù)為36%分析純濃硝酸原液的比例配制。直播方法為:取播種用的小樣本材料,按秧板寬180cm、溝寬35cm的規(guī)格劃線做畦平整秧板,把秧板一分為二,每50cm劃出播種區(qū),按8×8cm規(guī)格的行株距實(shí)行點(diǎn)播50粒并進(jìn)行稀播栽培。水稻三葉期時(shí),進(jìn)行灌水、重施肥料促水稻早發(fā)。大群體直播的材料在分蘗開始前進(jìn)行刪密間苗,保證分離世代的每個(gè)單株獨(dú)立生長,便于單株選擇和檢測。高溫短日性較強(qiáng)的中粳或晚粳,特別是秋、春氣溫較高季節(jié)加代、發(fā)育良好的個(gè)體,5~6葉期就能開始幼穗分化,40多天開始抽穗,宜在分蘗期追施一次肥料,之后不再施肥,以保健壯、早熟,抽穗整齊不倒伏。(2)待水稻進(jìn)入揚(yáng)花期,進(jìn)行雜交操作,對母本剪穎去雄,授粉操作;剪穎去雄和授粉的具體過程為:水稻進(jìn)入揚(yáng)花期,待出現(xiàn)少量開花的稻穗后,取中上部支梗的頂端穎花和基部穎花25粒,用剪刀將選好的母本穗子先進(jìn)行整穗,然后,將已開花和2~3天內(nèi)不會(huì)開花的穎花用小剪刀剪去,僅留成熟的但尚未開放的穎花,再將穎殼上端1/3-1/4剪掉,然后用鑷子夾除雄蕊。為保證母本與父本生育期一致,采用上述方法對父本進(jìn)行剪穎去雄。(3)至灌漿成熟期,選取最早成熟的稻穗(即第二代種子),不進(jìn)行脫粒,直接置于50℃的電熱干燥箱中快速干燥24小時(shí)至種子含水量小于等于13%,再將其置于硝酸水溶液(配制方法同上)中浸種60小時(shí),打破種子休眠,清水淋洗后,30℃恒溫催芽,至80%種子破胸后,進(jìn)行播種。由于揚(yáng)花期時(shí),穎殼會(huì)被剪去一部分,所以,在稻穗干燥、破除休眠、催芽的過程中,部分籽粒會(huì)從穎殼中脫落,即為糙米。糙米與未脫落的谷種的處理方法相同。(4)按照步驟(1)~(3)重復(fù)多代。該試驗(yàn)成功實(shí)現(xiàn)了一年4代的繁育工作。嘉興2006年9月初嘉33與嘉0664雜交;2006年10月初瓊F1直播加代;2006年12月30日瓊F2直播加代,選擇200個(gè)單穗;2007年3月20日瓊F3穗行播繼續(xù)加代,同年6月10日嘉興F4假單季直播栽培,如此可實(shí)現(xiàn)一年四代的繁育。實(shí)施例3一年三代繁育一、實(shí)驗(yàn)地點(diǎn):嘉興市農(nóng)科院本部試驗(yàn)田和海南陵水縣椰林鎮(zhèn)南嶺育種基地二、實(shí)驗(yàn)材料:優(yōu)質(zhì)晚粳稻品種嘉991(母本),矮稈大穗高產(chǎn)晚粳品系單測56(父本)三、播期:1999年秋嘉興雜交,1999年10月海南F1播種,1999年12月海南F2播種,2000年5月嘉興F3播種,2000年10月海南F4播種,2000年12月海南F5播種,2001年5月嘉興F6播種,基本定型。四、育種方法(1)取水稻親本種子,置于硝酸水溶液中浸種58小時(shí),徹底消除種子休眠,采用清水淋洗3~5次后,放入30℃的恒溫箱中催芽,至80%的種子破胸后,進(jìn)行直播。硝酸水溶液的制備方法為:用量筒量取,按1000mL清水加3.5mL、36%分析純濃硝酸原液的比例配制。直播方法為:取播種用的小樣本材料,按秧板寬110cm、溝寬30cm的規(guī)格劃線做畦平整秧板,把秧板一分為二,按50cm劃出播種區(qū),每份材料按8×8cm規(guī)格的行株距實(shí)行點(diǎn)播50粒,要求行株距均勻。水稻三葉期時(shí),進(jìn)行灌水、重施肥料促水稻早發(fā)。大群體直播的材料在分蘗開始前進(jìn)行刪密間苗,保證分離世代的每個(gè)單株獨(dú)立生長,便于單株選擇和檢測。高溫短日性較強(qiáng)的中粳或晚粳,特別是秋、春氣溫較高季節(jié)加代、發(fā)育良好的個(gè)體,5~6葉期就能開始幼穗分化,40多天開始抽穗,宜在分蘗期追施一次肥料,之后不再施肥,以保健壯、早熟,抽穗整齊不倒伏。(2)待水稻進(jìn)入揚(yáng)花期,進(jìn)行雜交操作,對母本剪穎去雄,授粉操作;剪穎去雄和授粉的具體過程為:水稻進(jìn)入揚(yáng)花期,待出現(xiàn)少量開花的稻穗后,取中上部支梗的頂端穎花和基部穎花30粒,用剪刀將選好的母本穗子先進(jìn)行整穗,然后,將已開花和2~3天內(nèi)不會(huì)開花的穎花用小剪刀剪去,僅留成熟的但尚未開放的穎花,再將穎殼上端1/3-1/4剪掉,然后用鑷子夾除雄蕊。為保證母本與父本生育期一致,采用上述方法對父本進(jìn)行剪穎去雄。(3)至灌漿成熟期,選取最早成熟的稻穗(即第二代種子),不進(jìn)行脫粒,直接置于50℃的電熱干燥箱中快速干燥24小時(shí)至種子含水量小于等于13%,再將其置于硝酸水溶液(配制方法同上)中浸種60小時(shí),打破種子休眠,清水淋洗后,30℃恒溫催芽,至80%種子破胸后,進(jìn)行播種。由于揚(yáng)花期時(shí),穎殼會(huì)被剪去一部分,所以,在稻穗干燥、破除休眠、催芽的過程中,部分籽粒會(huì)從穎殼中脫落,即為糙米。糙米與未脫落的谷種的處理方法相同。該試驗(yàn)成功實(shí)現(xiàn)了一年3代的繁育工作。1999年秋嘉興嘉991與單測56雜交,1999年10月海南F1直播播種,1999年12月海南F2加代,2000年5月嘉興F3加代,抗性、品質(zhì)篩選,2000年10月海南F4加代,抗性、品質(zhì)、耐低溫篩選,2000年12月海南F5加代抗性、品質(zhì)篩選,2001年5月嘉興F6代基本定型,如此可實(shí)現(xiàn)一年3代的繁育。