一種辣木的無性快速繁殖方法
【專利摘要】一種辣木的無性快速繁殖方法,包括以下步驟:步驟一,外植體選擇;步驟二,誘導(dǎo)培養(yǎng)基制定;步驟三,外植體處理;步驟四,外植體接種及腋芽誘導(dǎo);步驟五,增殖培養(yǎng);步驟六,壯苗培養(yǎng);該辣木的無性快速繁殖方法,采用三種不同的培養(yǎng)基進(jìn)行辣木培養(yǎng),它可以使辣木在相對短的時間內(nèi)大規(guī)模繁殖出外觀整齊的植株,再生植株變異低;再生體系非常高效;平均單株再生苗的成本極低,適合辣木的大批量高效快速繁殖,非常適用于工廠化生產(chǎn)。
【專利說明】一種辣木的無性快速繁殖方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及無性繁殖應(yīng)用【技術(shù)領(lǐng)域】,尤其是一種辣木的無性快速繁殖方法。
【背景技術(shù)】
[0002]無性生殖(asexual reproduct1n),是指生物體不通過生殖細(xì)胞的結(jié)合,也就是不經(jīng)由減數(shù)分裂來產(chǎn)生配子,直接由母體細(xì)胞分裂后產(chǎn)生出新個體的生殖方式。主要分為孢子繁殖、分裂生殖、出芽生殖、斷裂生殖和營養(yǎng)器官繁殖等。這種生殖的速度通常都較有性生殖快很多。但是,行這種生殖方式的生物常常會因為其后代無法適應(yīng)新環(huán)境而滅絕,這也是行無性生殖的缺點之一。
[0003]現(xiàn)有技術(shù)對于辣木的快速繁殖一般沒有一種或者幾種比較適宜的培養(yǎng)基作為誘導(dǎo),導(dǎo)致其在快速繁殖出現(xiàn)以下不良情況:植株的生長不整齊,植株變異率較高,進(jìn)而給后期的種植帶來較多的麻煩。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0004]現(xiàn)有技術(shù)不能滿足人們的需要,為彌補現(xiàn)有技術(shù)的不足,本發(fā)明旨在提供一種辣木的無性快速繁殖方法。
[0005]為實現(xiàn)該技術(shù)目的,本發(fā)明的方案是:一種辣木的無性快速繁殖方法,包括以下步驟:步驟一,外植體選擇;步驟二,誘導(dǎo)培養(yǎng)基制定;步驟三,外植體處理;步驟四,外植體接種及腋芽誘導(dǎo);步驟五,增殖培養(yǎng);步驟六,壯苗培養(yǎng)。
[0006]其中在步驟一中:選取辣木幼嫩的頂芽為外植體。
[0007]在步驟二中:采用改良MS+6-BA 0.5mg/L+NAA 0.02mg/L+蔗糖30g/L+瓊脂作為誘導(dǎo)培養(yǎng)基。
[0008]在步驟三中:將采回的枝條剪去葉片,用2%洗衣粉浸泡清洗5分鐘,再用自來水沖洗干凈,在超凈工作臺上用75%乙醇震蕩漂洗30秒,用無菌水沖洗I次后,用0.1%升汞溶液消毒7分鐘,用無菌水沖洗5次,吸干水。
[0009]在步驟四中,截取帶I?2個腋芽莖段接種于誘導(dǎo)培養(yǎng)基上,進(jìn)行暗培養(yǎng)7天后轉(zhuǎn)到光照下培養(yǎng)每天12小時燈光,光照強度1500?2000Lux,20°C?30°C,25?30天繼代一次。
[0010]在步驟五中:選擇改良MS+6-BA 0.5mg/L+NAA0.02mg+KT0.01mg/l 蔗糖 30g/L+ 瓊脂為增殖培養(yǎng)基,使得步驟三中誘導(dǎo)的芽胚得到增殖培養(yǎng)。
[0011]在步驟六中:選取1/2改良MS+NAA0.2mg/L+IBA0.2mg/L蔗糖20g/l+卡拉膠為壯苗生根培養(yǎng)基,對步驟五處理后的芽胚進(jìn)行壯苗生根培育。
[0012]與現(xiàn)有技術(shù)相比,本發(fā)明的有益效果是:該辣木的無性快速繁殖方法,采用三種不同的培養(yǎng)基進(jìn)行辣木培養(yǎng),它可以使辣木在相對短的時間內(nèi)大規(guī)模繁殖出外觀整齊的植株,再生植株變異低;再生體系非常高效;平均單株再生苗的成本極低,適合辣木的大批量高效快速繁殖,非常適用于工廠化生產(chǎn)。
【具體實施方式】
[0013]下面將對本發(fā)明實施例中的技術(shù)方案進(jìn)行清楚、完整地描述,顯然,所描述的實施例僅僅是本發(fā)明一部分實施例,而不是全部的實施例。基于本發(fā)明中的實施例,本領(lǐng)域普通技術(shù)人員在沒有做出創(chuàng)造性勞動前提下所獲得的所有其它實施例,都屬于本發(fā)明保護(hù)的范圍。
[0014]本發(fā)明實施例中,一種辣木的無性快速繁殖方法,包括以下步驟:步驟一,外植體選擇;步驟二,誘導(dǎo)培養(yǎng)基制定;步驟三,外植體處理;步驟四,外植體接種及腋芽誘導(dǎo);步驟五,增殖培養(yǎng);步驟六,壯苗培養(yǎng)。
[0015]其中在步驟一中:選取辣木幼嫩的頂芽為外植體。
[0016]在步驟二中:采用改良MS+6-BA 0.5mg/L+NAA 0.02mg/L+蔗糖30g/L+瓊脂作為誘導(dǎo)培養(yǎng)基。
[0017]在步驟三中:將采回的枝條剪去葉片,用2%洗衣粉浸泡清洗5分鐘,再用自來水沖洗干凈,在超凈工作臺上用75%乙醇震蕩漂洗30秒,用無菌水沖洗I次后,用0.1%升汞溶液消毒7分鐘,用無菌水沖洗5次,吸干水。
[0018]在步驟四中,截取帶I?2個腋芽莖段接種于誘導(dǎo)培養(yǎng)基上,進(jìn)行暗培養(yǎng)7天后轉(zhuǎn)到光照下培養(yǎng)每天12小時燈光,光照強度1500?2000Lux,20°C?30°C,25?30天繼代一次。
[0019]在步驟五中:選擇改良MS+6-BA 0.5mg/L+NAA0.02mg+KT0.01mg/l 蔗糖 30g/L+ 瓊脂為增殖培養(yǎng)基,使得步驟三中誘導(dǎo)的芽胚得到增殖培養(yǎng)。
[0020]在步驟六中:選取1/2改良MS+NAA0.2mg/L+IBA0.2mg/L蔗糖20g/l+卡拉膠為壯苗生根培養(yǎng)基,對步驟五處理后的芽胚進(jìn)行壯苗生根培育。
[0021]實施例一(采用以下培養(yǎng)基的效果為)
[0022]誘導(dǎo)培養(yǎng)基:選擇改良MS+6-BA 0.5mg/L+NAA 0.02mg/L+蔗糖30g/L+瓊脂誘導(dǎo)率70% -75% ;
[0023]增殖培養(yǎng)基:改良MS+6-BA 0.5mg/L+NAA 0.02mg+KT0.01mg/l 蔗糖 30g/L+瓊脂增殖倍數(shù)9.86 ;
[0024]壯苗生根培養(yǎng)基:1/2改良MS+NAA0.2mg/L+IBA0.2mg/L蔗糖20g/l+卡拉膠生根率 90% ;
[0025]實施例二(以辣木種子為例)
[0026]辣木種子預(yù)處理:選擇飽滿無皺縮的辣木種子,用2%洗衣粉浸泡清洗5分鐘,再用自來水沖洗干凈,在超凈工作臺上用75%乙醇震蕩漂洗30秒,用無菌水沖洗I次后,用0.1 %升萊溶液消毒15分鐘,無菌水沖洗4?5次,每次5mim,用干燥的無菌濾紙吸干種子表面的水分后,去掉外殼(紙質(zhì)白翼),將種子取出,接種到l/2MS+30g/L蔗糖+6g/L瓊脂培養(yǎng)基中。
[0027]將辣木發(fā)芽得到的無菌苗剪成兩段,接種在誘導(dǎo)培養(yǎng)基中:改良MS+6-BA0.2mg/L+NAA 0.01mg/L+KT0.05mg/L外植體基部腫大,愈傷組織明顯.誘導(dǎo)成功率達(dá)100% ;
[0028]增殖改良MS+6-BA 0.5mg/L+NAA 0.2mg/L+蔗糖30 % +瓊脂6g/L繼代增殖增殖倍數(shù)達(dá)9.6 ;
[0029]生根誘導(dǎo)在1/2MS+NAA0.2mg/L+IBA0.2mg/L+蔗糖20g+卡拉膠6g/L培養(yǎng)基上能獲得健壯的生根苗,生根率達(dá)90 %以上。
[0030]對于本領(lǐng)域技術(shù)人員而言,顯然本發(fā)明不限于上述示范性實施例的細(xì)節(jié),而且在不背離本發(fā)明的精神或基本特征的情況下,能夠以其它的具體形式實現(xiàn)本發(fā)明。因此,無論從哪一點來看,均應(yīng)將實施例看作是示范性的,而且是非限制性的,本發(fā)明的范圍由所附權(quán)利要求而不是上述說明限定,因此旨在將落在權(quán)利要求的等同要件的含義和范圍內(nèi)的所有變化囊括在本發(fā)明內(nèi)。不應(yīng)將權(quán)利要求中的任何標(biāo)記視為限制所涉及的權(quán)利要求。
[0031]以上所述,僅為本發(fā)明的較佳實施例,并不用以限制本發(fā)明,凡是依據(jù)本發(fā)明的技術(shù)實質(zhì)對以上實施例所作的任何細(xì)微修改、等同替換和改進(jìn),均應(yīng)包含在本發(fā)明技術(shù)方案的保護(hù)范圍。
【權(quán)利要求】
1.一種辣木的無性快速繁殖方法,包括以下步驟:步驟一,外植體選擇;步驟二,誘導(dǎo)培養(yǎng)基制定;步驟三,外植體處理;步驟四,外植體接種及腋芽誘導(dǎo);步驟五,增殖培養(yǎng);步驟六,壯苗培養(yǎng);其特征在于: . 51.在步驟一中:選取辣木幼嫩的頂芽為外植體; . 52.在步驟二中:采用改良MS+6-BA0.5mg/L+NAA 0.02mg/L+蔗糖30g/L+瓊脂作為誘導(dǎo)培養(yǎng)基; .53.在步驟三中:將采回的枝條剪去葉片,用2%洗衣粉浸泡清洗5分鐘,再用自來水沖洗干凈,在超凈工作臺上用75%乙醇震蕩漂洗30秒,用無菌水沖洗I次后,用0.1%升汞溶液消毒7分鐘,用無菌水沖洗5次,吸干水; . 54.在步驟四中,截取帶I?2個腋芽莖段接種于誘導(dǎo)培養(yǎng)基上,進(jìn)行暗培養(yǎng)7天后轉(zhuǎn)到光照下培養(yǎng)每天12小時燈光,光照強度1500?2000Lux,20°C?30°C,25?30天繼代一次; . 55.在步驟五中:選擇改良MS+6-BA 0.5mg/L+NAA0.02mg+KT0.01mg/l 蔗糖 30g/L+ 瓊脂為增殖培養(yǎng)基,使得步驟三中誘導(dǎo)的芽胚得到增殖培養(yǎng); . 56.在步驟六中:選取1/2改良MS+NAA0.2mg/L+IBA0.2mg/L蔗糖20g/l+卡拉膠為壯苗生根培養(yǎng)基,對步驟五處理后的芽胚進(jìn)行壯苗生根培育。
【文檔編號】A01H4/00GK104396757SQ201410714597
【公開日】2015年3月11日 申請日期:2014年11月24日 優(yōu)先權(quán)日:2014年11月24日
【發(fā)明者】王立 申請人:王立