一種液基細(xì)胞處理保存液的制備方法及其應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種液基細(xì)胞處理保存液的制備方法及其應(yīng)用，其特征在于按如下步驟進(jìn)行制備：將枸櫞酸鈉和氯化鈉混合，在其中加入純水至枸櫞酸鈉、氯化鈉完全溶解后，再加入甲醛和冰醋酸，混合均勻后再加入乙醇，搖勻后加純水定量，混合均勻即得處理保存液；存放有本發(fā)明液基細(xì)胞處理保存液的存放瓶，與樣本刷及樣本保存管組裝成液基細(xì)胞處理試劑盒，樣本刷可拆卸的安裝在樣本保存管的瓶蓋內(nèi)。本發(fā)明的液基細(xì)胞處理保存液能夠處理宮頸、胸腹水、痰液、尿液、膿腫等不同樣本，同時具備裂解紅細(xì)胞、炎癥細(xì)胞和消除黏液的功能，可以去除血液、膿液、黏液及微生物雜質(zhì)等影響檢驗結(jié)果的干擾因素。
【專利說明】一種液基細(xì)胞處理保存液的制備方法及其應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種能夠適用于對宮頸、胸腹水、痰液、尿液、膿腫的脫落細(xì)胞或組織的處理和保存的液基細(xì)胞處理保存液及其應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002]液基細(xì)胞制片檢查系統(tǒng)處理技術(shù)誕生于1991年美國等國家，率先應(yīng)用于婦科細(xì)胞學(xué)檢查，國內(nèi)從2001年開始作液基細(xì)胞學(xué)篩查宮頸癌的研究，使該項技術(shù)得到迅速發(fā)展，被稱之為一場細(xì)胞學(xué)制片技術(shù)的革命。在該技術(shù)運用中，傳統(tǒng)的細(xì)胞學(xué)檢查方法巴氏涂片法(即宮頸刮片)制成的涂片，細(xì)胞大量重疊，并且涂片存在著大量的紅細(xì)胞、白細(xì)胞、粘液及脫落壞死組織等，病理醫(yī)生在判讀時非常困難，會出現(xiàn)15% -40%的假陰性率。
[0003]液基細(xì)胞處理保存液技術(shù)是當(dāng)今科技含量較高的宮頸癌篩查制片方法，該技術(shù)克服了傳統(tǒng)巴氏手工涂片細(xì)胞太厚、細(xì)胞堆積、結(jié)構(gòu)模糊、染色不佳等傳統(tǒng)技術(shù)原因的限制。細(xì)胞采集后投入細(xì)胞處理保存液中，使腫瘤和非腫瘤細(xì)胞保持細(xì)胞采集時的原始細(xì)胞形態(tài)，并通過制片使細(xì)胞均勻涂布在載玻片上制成薄層細(xì)胞涂片。染色后細(xì)胞結(jié)構(gòu)在顯徵鏡下清晰易辨，同時把血液、粘液和炎癥細(xì)胞減少到最底程度，從而易發(fā)現(xiàn)和確認(rèn)異常細(xì)胞。提高異常細(xì)胞的檢出率，大大提高宮頸癌篩查方法的特異性和診斷的準(zhǔn)確率。
[0004]但是，現(xiàn)存液基細(xì)胞處理保存液對細(xì)胞或組織的保存時間短，長期保持會使細(xì)胞或組織樣本產(chǎn)生霉變，需現(xiàn)取樣現(xiàn)處理；此外現(xiàn)存液基細(xì)胞處理保存液對細(xì)胞或組織中的血液、膿液、黏液及微生物雜質(zhì)無處理能力，影響測試結(jié)果。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明是為避免上述現(xiàn)有技術(shù)所存在的不足之處，提供一種液基細(xì)胞處理保存液的制備方法及其應(yīng)用，以期可以在沿用已有細(xì)胞學(xué)制片技術(shù)的方便性的基礎(chǔ)上，還能達(dá)到延長細(xì)胞或組織的保存時間，使被處理細(xì)胞或組織保持采集時的原始形態(tài)，便于制成薄層細(xì)胞或組織涂片的效果。
[0006]本發(fā)明解決技術(shù)問題采用如下技術(shù)方案 [0007]本發(fā)明液基細(xì)胞處理保存液的制備方法，其特點在于:所述液基細(xì)胞處理保存液是按如下步驟進(jìn)行制備:將4g枸櫞酸鈉和0.85g氯化鈉混合，在其中加入純水至枸櫞酸鈉、氯化鈉完全溶解后，再加入甲醛2ml和冰醋酸1ml，混合均勻后再加入體積濃度為95%的乙醇50ml，搖勻后加純水至總量為100ml，混合均勻即得處理保存液。
[0008]本發(fā)明液基細(xì)胞處理保存液的應(yīng)用，其特點在于:存放有所述液基細(xì)胞處理保存液的存放瓶，與樣本刷及樣本保存管組裝成液基細(xì)胞處理試劑盒；所述樣本刷可拆卸的安裝在樣本保存管的瓶蓋內(nèi)；使用時，將液基細(xì)胞處理保存液加入到樣本保存管中，然后用樣本刷取得待處理樣品并加入到所述樣品保存管中。
[0009]與已有技術(shù)相比，本發(fā)明有益效果體現(xiàn)在:
[0010]1、本發(fā)明的液基細(xì)胞處理保存液能夠處理宮頸、胸腹水、痰液、尿液、膿腫等不同樣本，同時具備裂解紅細(xì)胞、炎癥細(xì)胞和消除黏液的功能，可以去除血液、膿液、黏液及微生物雜質(zhì)等影響檢驗結(jié)果的干擾因素；
[0011]2、本發(fā)明的液基細(xì)胞處理保存液含有固定細(xì)胞成分，能快速對樣品中的白細(xì)胞、脫落上皮細(xì)胞等有檢驗價值的細(xì)胞進(jìn)行固定保存，防止有效細(xì)胞發(fā)生自溶，經(jīng)該液基細(xì)胞處理保存液固定保存的細(xì)胞，細(xì)胞形態(tài)完好，能保持樣品采集時細(xì)胞的原始形態(tài)，不會發(fā)生膨脹、固縮等形態(tài)變化，保證檢驗對有效細(xì)胞的數(shù)量和質(zhì)量要求；經(jīng)該液基細(xì)胞處理保存液處理后，細(xì)胞形態(tài)能夠穩(wěn)定保存6個月以上。
[0012]3、本發(fā)明的液基細(xì)胞處理保存液添加了冰醋酸和枸櫞酸鈉，并與體積濃度為95%的乙醇、甲醛、氯化鈉、純水有效組合，大大地降低了液基薄層細(xì)胞的制片成本。
[0013]4、本發(fā)明液基細(xì)胞處理保存液中的裂解成分能對紅細(xì)胞進(jìn)行裂解，去除紅細(xì)胞對檢驗結(jié)果造成的干擾；同時試劑中的固定成分能保存固定白細(xì)胞、脫落上皮細(xì)胞等有價值的細(xì)胞；并使包裹在黏液中的有效細(xì)胞充分分離出來，防止有價值細(xì)胞的丟失。
[0014]5、本發(fā)明液基細(xì)胞處理保存液使細(xì)胞或組織樣本易于著色，便于觀察。
[0015]6、本發(fā)明制備方法簡單，無三廢污染產(chǎn)生；使用中不產(chǎn)生需特殊處理的醫(yī)療垃圾。
[0016]7、本發(fā)明液基細(xì)胞處理保存液在使用中其配件即樣本保存管設(shè)計為樣本刷、樣本保存管一體結(jié)構(gòu)，使用中可避免樣本被污染，并便于完整長期保存樣本，為疾病診療過程及時提供參考。
[0017]8、本發(fā)明液基細(xì)胞處理保存液能夠殺滅樣本中含有的微生物雜質(zhì)，具有抑菌作用，可確保樣本保存期間不霉變，不影響制片觀察結(jié)果。
[0018]9、本發(fā)明液基 細(xì)胞處理保存液組裝成試劑盒，在臨床使用中便于操作，從樣本處理到制片觀察全過程中無須使用到試劑盒以外的試劑或組件，為臨床提供及時便利的POCT(P0CT意為床旁即時檢測)服務(wù)。
【具體實施方式】
[0019]本實施例液基細(xì)胞處理保存液是按如下步驟進(jìn)行制備:將枸櫞酸鈉4g和氯化鈉
0.85g混合，在其中加入純水至枸櫞酸鈉、氯化鈉完全溶解后，再加入甲醛2ml和冰醋酸lml，混合均勻后再加入95%乙醇50ml，搖勻后加純水至總量為100ml，混合均勻即得處理保存液。經(jīng)測定其PH值為5-8之間。
[0020]受試方法:本實施例所制備的液基細(xì)胞處理保存液
[0021]對照方法:巴氏涂片法
[0022]實驗方案:臨床采集宮頸分泌物樣本10份，隨機分成兩組，每組5份，分別在兩種制片方法制片，顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)、狀況；同時將樣本保存6個月再次觀察。
[0023]實驗結(jié)果:采用液基細(xì)胞處理保存液進(jìn)行制片組細(xì)胞形態(tài)完好，能保持樣品采集時細(xì)胞的原始形態(tài)，未發(fā)生膨脹、固縮等形態(tài)變化；6個月后仍保持完好。而對照組采用巴氏涂片法結(jié)果顯示，細(xì)胞大量重疊，并且涂片存在著大量的紅細(xì)胞、白細(xì)胞、粘液及脫落壞死組織等，病理醫(yī)生在判讀時非常困難；6個月后樣本已霉變，無法制片觀察。
[0024]結(jié)果判定:采用液基細(xì)胞處理保存液制片明顯好于對照組，兩者有顯著性差異。
[0025]具體實施中，本發(fā)明所采用的具體質(zhì)量與體積關(guān)系可等比例增加，如下表所示。
[0026]
【權(quán)利要求】
1.一種液基細(xì)胞處理保存液的制備方法，其特征在于按如下步驟進(jìn)行制備:將4g枸櫞酸鈉和0.85g氯化鈉混合，在其中加入純水至枸櫞酸鈉、氯化鈉完全溶解后，再加入甲醛2ml和冰醋酸1ml，混合均勻后再加入體積濃度為95%的乙醇50ml，搖勻后加純水至總量為100ml，混合均勻即得處理保存液。
2.—種權(quán)利要求1所述液基細(xì)胞處理保存液的應(yīng)用，其特征在于:存放有所述液基細(xì)胞處理保存液的存放瓶，與樣本刷及樣本保存管組裝成液基細(xì)胞處理試劑盒；所述樣本刷可拆卸的安裝在樣本保存管的瓶蓋內(nèi)；使用時，將液基細(xì)胞處理保存液加入到樣本保存管中，然后用樣本刷取得待處理樣品并加入到所述樣品保存管中。
【文檔編號】A01N1/00GK103583508SQ201310602847
【公開日】2014年2月19日 申請日期:2013年11月25日 優(yōu)先權(quán)日:2013年11月25日
【發(fā)明者】陳奉玲, 張超 申請人:張超