專利名稱：真姬菇新菌株的制作方法
真姬菇新菌株
技術領域：
本發(fā)明涉及了食用菌技術領域，更確切的說，涉及一種真姬菇新菌株。
背景技術：
真姬燕(拉丁文名稱Hypsizygus marmoreus),隸屬擔子菌亞門、層菌綱、傘菌目、白蘑科、離褶菌族、玉蕈屬，因它具有獨特的蟹鮮味，故又稱它為蟹味菇。最初的人工栽培于1978年前后開始于日本，其味道鮮美、食感脆嫩、營養(yǎng)豐富，其味比平菇鮮，其肉比滑菇厚，其質比香菇韌，口感甚佳，其干品還香味濃溢。真姬菇含有豐富維生素和17種氨基酸，子實體中提取的β -L 3-D葡聚糖具有很高的抗腫瘤活性，是一種低熱量、低脂肪的保健食品。
真姬菇從栽培伊始，基本走的就是工廠化生產的路線。由于工廠化栽培具有周年連續(xù)生產、規(guī)?；a的特點，大多實現半機械化、機械化以致智能化，生長環(huán)境控制得較好，產量品質有了很好的保證。眾所周知，菌種對食用菌的工廠化栽培起著至關重要的作用。目前市場上真姬菇菌種有很多種，但是主要使用的比較優(yōu)良的菌種有Η0ΚΤ0-18、博多Α-264及TNN-1l等。Η0ΚΤ0-18是有日本北斗株式會社公司(HOKTO)培育的一種菌種，雖然該菌種在日本HOKTO公司的種植比較成功，但是其他公司實際種植過程中發(fā)現其存在如下缺陷(I)容易出現瘤蓋菇，導致良品率大幅下降；(2)單產較低，經濟效益較差；這在一定程度上反映該菌種的適應性較差，不適合大面積推廣。博多Α-264在國內種植廣泛，雖然其具備培養(yǎng)周期短、栽培周期短的優(yōu)點，但是多數消費者反映該菌株味道比較苦，口感較差，消費者的接受度較低。TNN-1l具備子實體形狀好、無苦味的優(yōu)點，但是其培養(yǎng)及栽培周期長，且對栽培環(huán)境參數比如光強、通風、濕度等具有較高的要求，這無疑給生產者帶來較高的生產成本，從而大幅度消弱了其在市場上的競爭力。

發(fā)明內容本發(fā)明解決的技術問題是提供一種真姬菇新菌株Finc-Β-Ι，該菌株具有培養(yǎng)及栽培周期短、單產高、子實體外觀好、無苦味、保鮮期長等特點。本發(fā)明是通過以下技術方案實現的，本發(fā)明真姬菇新菌株Finc-B-1是通過TNN-1l和博多A-264單單雜交育種的方法獲得，該菌株已經于2012年8月13日保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心，地址中國武漢市武漢大學，其保藏號為CCTCC M 2012308。本發(fā)明真姬菇新菌株Finc-B-1的特征在于1、形態(tài)特征菌蓋幼菇時，整個菇蓋表面布滿獨特的圓形花紋、顏色深褐色、均勻分布小水珠，隨著菇蓋的生長，具有花紋區(qū)域的比例縮小、顏色變淺，最終只在菇蓋的頂部有花紋；成熟時，菇蓋直徑Icm 2cm、菇蓋斷面圓山型、菇蓋中部顏色深灰黃褐色、菇蓋邊緣顏色黃茶色、肉厚、肉質硬、斑紋數量中等、斑紋大小中等、斑紋分布菇蓋中央、斑紋清晰、菇蓋無龜裂。菌褶黃白色、菌褶正常排列、幅寬一般、密度一般。菌柄高度5cm 7cm、菌柄直徑O. 8cm 1cm，菌蓋與菌柄連接方式為中心生、中粗、白色、無毛，菇蓋直徑與菌柄長的比率中等、肉質硬。菌絲潔白濃密、氣生菌絲發(fā)達、子實體群生型、有效莖數平均80個。2、生物學特性營養(yǎng)成分來源玉米芯40 50%(重量百分比，下同)、雜木屑20 30%、米糠10 15%、麩皮15 20%，玉米粉5%，其中，含水量64 66%。菌絲體培養(yǎng)溫度21 25°C，濕度75%，CO2濃度2500 4000ppm，培養(yǎng)周期80 85天。適宜出菇溫度為13 15°C，濕度90 95%，CO2濃度1000 2000ppm，前I 7天光照強度50 lOOLux，后8 20天光照強度200 300Lux，每天間隙式開啟層架燈刺激 出菇，栽培周期20 23天。與現有技術相比，本發(fā)明真姬菇新菌株Finc-B-1有效地縮短了培養(yǎng)及栽培周期，降低了生產成本；且該菌株單產高、子實體外觀好，無苦味，保鮮期長，具有大面積推廣種植的優(yōu)良特點。

圖1是Finc-B-1、TNN-1I和博多A-264產量隨菌齡變化的曲線圖。圖2為引物ITSl和ITS4對6個菌株的PCR擴增電泳圖譜，其中2為菌株博多A-264，3為Finc-B-1，4為TNN-11，1、5、6是收集的其它真姬菇菌株。圖3為Finc-B-1的ITS系統(tǒng)發(fā)育樹，其中3代表Finc-B-l。圖4為引物S29對6個菌株的PCR擴增電泳圖譜，圖中編號1-6代表的含義同圖2。圖5為引物S37對6個菌株的PCR擴增電泳圖譜，圖中編號1_6代表的含義同圖2。圖6為引物S45對6個菌株的PCR擴增電泳圖譜，圖中編號1-6代表的含義同圖2。圖7為引物S 121對6個菌株的PCR擴增電泳圖譜，圖中編號1-6代表的含義同圖2。
具體實施方式下面通過具體實施例對本發(fā)明作進一步說明。實施例1雜交獲得Finc-B-1本實施例說明了真姬菇新菌株Finc-B-1的育種過程。具體步驟如下I)選擇親本菌株選取TNN-1I和博多A-264為雜交親本，這兩個親本的子實體能在市場上購買到，在上海市農業(yè)科學院菌種保藏中心也有保藏。2)配制培養(yǎng)基PDA培養(yǎng)基 每IL培養(yǎng)基用馬鈴薯200g，葡萄糖20g，瓊脂20g。原種培養(yǎng)基木屑55%_70%、米糠15%_20%、麩皮5%_10%、玉米粉8-35%作為培養(yǎng)原材料。補充水分，使培養(yǎng)基中的含水量達到60 62%。栽培種培養(yǎng)基玉米芯40 50%、大豆皮20 30%、米糠10 15%、麩皮15 20%，玉米粉5%，含水量64 66%。
3)獲得孢子親本經過試管種活化、轉三角瓶種、轉原種、轉栽培種、培養(yǎng)、搔菌、栽培出菇，在開傘后采用鉤懸法收孢子，在17°C環(huán)境種放置2天即獲得孢子。4)孢子涂布用無菌水稀釋孢子獲得孢子懸液，通過無菌水的加入量來調節(jié)孢子濃度，在10X40顯微鏡下觀察，當每個視野有3-4個孢子時既是所需濃度，每平皿I滴孢子懸液，用涂布器均勻地涂布在PDA培養(yǎng)基上。5)獲得單孢菌絲21°C培養(yǎng)10天左右，在稀疏部位挑取單孢菌落，轉到斜面培養(yǎng)基上。6)單核菌絲鏡檢在10X40顯微鏡視野中，在不同的區(qū)域尋找3 5個視野，無鎖狀聯合則為單核菌絲。7)配對雜交選擇發(fā)菌速度快，菌絲濃密潔白的單核菌絲配對。
8)雜合子鏡檢在10X40顯微鏡視野中，在不同的區(qū)域尋找3 5個視野，若有鎖狀聯合，則是雜合子。9)雜合子挑取在雜交區(qū)域挑取菌絲轉到試管斜面培養(yǎng)基上。10)栽培試驗把獲得的雜合子根據發(fā)明目的進行栽培試驗和篩選。11)通過TNN-1l和博多A-264的雜交(雜合子命名為“TM”)，獲得400個雜合子，從400個雜合子中篩選培養(yǎng)及栽培周期短、單產高、子實體形狀好、無苦味等的目的菌株，編號為 “TN4-52”，命名為 “Finc-B-l ”。本發(fā)明真姬菇新菌株Finc-B-1已于2012年8月13日保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏編號為CCTCC M 2012308，菌株經檢測存活，分類地位為玉蕈屬真姬菇。實施例2菌齡試驗本實施例通過對本發(fā)明真姬菇新菌株Finc-B-1與現有的TNN-11、博多A-264進行培養(yǎng)周期、栽培周期以及單產的對比，來說明本發(fā)明真姬菇新菌株Finc-B-1的優(yōu)勢和特點。本實施例米用的栽培種培養(yǎng)基為玉米芯40 50%、雜木屑20 30%、米糠10 15%、麩皮15 20%，玉米粉5%，其
中，含水量64 66%。以TNN-1l為對照，從70天到100天設置6個菌齡，每5天為一菌齡，每菌齡64瓶。培養(yǎng)及栽培環(huán)境條件培養(yǎng)溫度為21 25°C，濕度75%，CO2濃度2500 4000ppm。栽培室溫度設定為13 15°C，濕度90 95%，CO2濃度1000 2000ppm，前I 7天光照強度50 lOOLux，后8 20天光照強度200 300LUX，每天間隙式開啟層架燈。請一并參閱圖1和表I，對照TNN-11、博多A-264和Finc-B-1的最佳菌齡分別是95天、85天和85天，因為它們在這兩個菌齡分別獲得最高的單產。同時在它們獲得最高單產時，TNN-11、博多A-264和Finc-B-1各菌株的平均栽培周期分別為24天、22天和21. 5天。當菌齡從75天延續(xù)到95天時，TNN-1l的栽培周期大約為24天，而Finc-B-1的栽培周期從23天減少到20天。在75天到95天的菌齡范圍內，Finc-B-1的每一個菌齡的單產都高于TNN-1l和博多A-264。由此可見，相同栽培條件下，相比親本菌株TNN-1l和博多A-264，Finc-B-1子實體生長速率具有明顯優(yōu)勢。表I菌齡試驗
權利要求
1.一種真姬燕細新菌株Finc-B-1，其保藏編號是CCTCC NO:M 2012308。
全文摘要
本發(fā)明提供一種真姬菇(Hypsizygusmarmoreus)新菌株Finc-B-1，其保藏編號是CCTCCNO:M2012308。Finc-B-1有效地縮短了培養(yǎng)及栽培周期，降低了生產成本；且該菌株單產高、子實體外觀好，無苦味，保鮮期長，具有大面積推廣種植的優(yōu)良特點。
文檔編號A01G1/04GK103004464SQ20121045200
公開日2013年4月3日 申請日期2012年11月12日 優(yōu)先權日2012年11月12日
發(fā)明者劉玉, 程繼紅 申請人:上海豐科生物科技股份有限公司