專利名稱：核黃素及其衍生物組合物暗反應(yīng)產(chǎn)生自由基的方法和應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于自由基化學領(lǐng)域，具體涉及一種利用核黃素及其衍生物組合物暗反應(yīng)產(chǎn)生自由基的方法，和將其在殺菌劑和降解環(huán)境污染物制劑等中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
核黃素(Riboflavin)又名維生素B2、維生素乙2、黃素(Lactoflavin)、卵黃素(Ovoflavin)、維生素G(Vitamin G)、維生素庚；核黃素廣泛地分布在所有的葉菜，溫血動物和魚的肉中；為橙黃色結(jié)晶性粉末，微臭，味微苦；在平常的濕度下，它是穩(wěn)定的，而且不受空氣中氧和漫射光影響。在中性或酸性溶液中穩(wěn)定在堿性條件下或者暴露于可見光或紫外線中時不穩(wěn)定；在水、乙醇、氯仿或乙醚中幾乎不溶；在熱水、表面活性劑膠束溶液或稀氫氧化鈉溶液中溶解。一百多年來，人們對其生理活性和化學性質(zhì)進行了廣泛的研究。1879年英國著名化學家布魯斯(A.Wynter Blyth)發(fā)現(xiàn)牛奶的上層乳清中存在一種黃綠色的熒光色素(J.Chem.Soc.35530-539，1879)，其后幾十年中，許多科學家從不同來源的動植物都發(fā)現(xiàn)這種黃色物質(zhì)。1933年，美國科學家R.Kuhn，P.Gyorgy及T.Wagner-Jauregg等從牛奶中提純到這種物質(zhì)，后來人們因為其分子式上有一個核糖醇，命名為核黃素。
核黃素為黃素酶類的輔酶組成部分，在生物氧化的呼吸鏈中起遞氫作用，對神經(jīng)細胞、視網(wǎng)膜代謝、腦垂體促腎上腺皮質(zhì)激素的釋放和胎兒的生長發(fā)育亦有影響。碳水化合物，脂肪和氨基酸的代謝與核黃素密切相關(guān)。若缺乏時，可出現(xiàn)舌炎、口角炎、脂溢性皮炎和陰囊炎、眼結(jié)膜炎、畏光等。
已往的研究表明，核黃素可以在光照條件下產(chǎn)生活性氧，這一現(xiàn)象可以用于清除環(huán)境污染物(Pajares et al，Journal of Photochemistry and Photobiology AChemistry，139199-204，2001)，但目前尚沒有關(guān)于核黃素暗反應(yīng)產(chǎn)生自由基的報道。我們發(fā)現(xiàn)，當核黃素分布于非均相體系中并添加還原劑時，在沒有光照的情況下，也有大量自由基產(chǎn)生。由于自由基是化學性質(zhì)十分活潑的基團，可以有效殺菌或降解環(huán)境污染物，因此我們這一發(fā)現(xiàn)為核黃素在生產(chǎn)和生活中的廣泛應(yīng)用奠定了基礎(chǔ)。而且，我們還注意到核黃素的一系列衍生物，如黃素單核苷酸(FMN)、黃素腺嘌呤二核苷酸(FAD)、5’-磷酸核黃素鈉(5’-Phosphate RiboflavinSodium)、月桂酸核黃素(Riboflavin laurate)、核黃素四丁酯(Riboflavin tetrabutylester)等，也具有類似的活性。
此前，我們曾根據(jù)醌類化合物在有光照和無光照(黑暗)兩種條件下產(chǎn)生自由基的特性發(fā)明了基于自由基機理的生物殺菌劑和降解環(huán)境污染物制劑，并申請了3項國家發(fā)明專利苝醌衍生物光敏生物殺菌劑及其制法(申請?zhí)?21110386.0)、一株產(chǎn)苝醌類化合物真菌的液體發(fā)酵工藝(申請?zhí)?1135155.1)、醌類衍生物組合物暗反應(yīng)產(chǎn)生自由基的方法及其應(yīng)用(申請?zhí)?3143313.8)和1項國際發(fā)明專利Fungioidal Composition Containing PQDs.(PCT/CN02/00884 and American patent10/277，076)。本項發(fā)明使用核黃素這一人體必需維生素作為產(chǎn)生自由基的有效組份，與使用醌類化合物的前述發(fā)明相比，對人體毒副作用更小，對環(huán)境更無害，而且生產(chǎn)工藝更簡單，因此具有更廣闊的應(yīng)用前景。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的，在于拓寬核黃素的應(yīng)用范圍，提供一種在黑暗條件下，利用核黃素及其衍生物組合物暗反應(yīng)產(chǎn)生自由基的方法，以及根據(jù)此方法得到的暗反應(yīng)自由基發(fā)生組合物在殺菌劑和降解環(huán)境污染物制劑等中的應(yīng)用。
本發(fā)明采用的技術(shù)方案是研制一種利用核黃素及其衍生物組合物暗反應(yīng)產(chǎn)生自由基的方法，其特征是所述的核黃素及其衍生物包括核黃素及核黃素的衍生物；所述的核黃素及其衍生物分散在表面活性劑膠束溶液中，加低氧化還原電位的還原劑混勻，獲得暗反應(yīng)自由基發(fā)生組合物其質(zhì)量組成是核黃素及其衍生物∶表面活性劑膠束溶液∶低氧化還原電位的還原劑＝1∶10～3000∶0.1～20。
上述的核黃素見結(jié)構(gòu)式I，其化學名稱為7，8-二甲基-10-(1-右旋-核糖基)-異咯嗪〔7，8-dimethyl-10-(1-D-ribityl)-isoalloxazine〕，是具有一個核糖醇側(cè)鏈的異咯嗪的衍生物。目前核黃素生產(chǎn)方法有化學合成法和發(fā)酵法，一般醫(yī)用核黃素用化學法合成，飼用核黃素用發(fā)酵法生產(chǎn)，我國有多家公司生產(chǎn)，來源充足。
結(jié)構(gòu)式I上述的核黃素及其衍生物是核黃素，黃素單核苷酸，黃素腺嘌呤二核苷酸，5’-磷酸核黃素鈉，月桂酸核黃素和/或核黃素四丁酯；它們都是現(xiàn)有技術(shù)的產(chǎn)物。
上述的表面活性劑膠束溶液，是從非離子型表面活性劑、陰離子型表面活性劑、陽離子型表面活性劑、兩性表面活性劑和生物表面活性劑制備的表面活性劑膠束溶液；其中，1)非離子表面活性劑包括多元醇部分脂肪酸酯(Partial fatty-acid ester of polyol)、聚氧乙烯脂肪醇醚(Polyoxyethylene-aliphatic alcohol ester)、聚氧乙烯烷代酚醚(Polyoxyethylene-alkylphenol ester)、脂肪酸聚氧乙烯型和聚氧乙烯失水山梨醇脂肪酸酯型；如OP(烷基苯酚聚氧乙烯醚Alkylphenol ethoxylates)型、平平加O(Peregal O，脂肪醇聚氧乙烯醚)型、P(苯酚聚氧乙烯醚)型、聚醚(Pluronic，聚丙二醇聚氧乙烯醚)型、吐溫(Tween，聚氧乙烯失水山梨醇脂肪酸酯)型等；2)陰離子表面活性劑是從硬脂酸鈉、月桂酸鉀、十二烷基苯磺酸鈉、琥珀酸酯磺酸鈉、烷基乙氧基磺酸鈉、石油磺酸鈉、十二烷基硫酸鈉、聚氧乙烯十二醇硫酸酯鈉、月桂酰肌氨酸鈉中選擇；3)陽離子表面活性劑是從十六烷基三甲基季銨溴化物、十八烷基二甲基芐基季銨氯化物、十二烷基三甲基氯化銨、十二烷基二甲基芐基氯化銨、氯化十六烷基吡啶、氯化十二烷基吡啶、溴化十六烷基吡啶、氯化十七酰甲胺基吡啶、十匹酰丙胺基二甲基芐基氯化銨、雙十八烷基二甲基氯化銨中選擇；4)兩性表面活性劑是從甜菜堿、十二烷基叔胺鹽、脂肪烴基咪唑啉衍生物，十二烷基氨基酸鈉、十二烷基二甲基甜菜堿、十二烷基二羥乙基甜菜堿、烷基二甲基氧化胺、烷基二乙醇基氧化胺、烷酰丙胺基二甲基氧化銨中選擇；5)生物表面活性劑是從鼠李脂、海藻糖脂、槐糖脂、甘露糖赤醇脂、卵磷脂、柯立諾麥克酸(Corynomycolic acids)、斯匹克斯堡酸(spiculisporic acid)、海藻糖霉菌酸雙脂、脂雜多糖、海藻糖二分枝菌酸脂、α-支鏈-β-羥基脂肪酸海藻糖脂、棒桿霉菌酸中選擇。
上述的低氧化還原電位的還原劑，為氧化還原電位低于相應(yīng)的核黃素及其衍生物的有機和無機化合物，它們是氨基酸及其衍生物、細胞活性組分、有機化合物、無機化合物和天然產(chǎn)物；其中氨基酸及其衍生物是從半胱氨酸、組氨酸、蛋氨酸和/或乙酰半胱氨酸中選擇；細胞活性組分是從谷胱甘肽，金屬硫蛋白，輔酶I，輔酶II，輔酶Q，維生素E和/或維生素C中選擇；有機化合物是從多酚類、黃酮類化合物，巰基化合物和胺類化合物，如兒茶酚、黃芩素、漢黃芩素、槲皮素、桑色素、香豆素、二巰基丙磺酸、二巰基丁二酸、二巰基丙醇、丙二胺、甲基苯丙胺、二氯苯胺和/或氨水中選擇；無機化合物是從亞硫酸鹽、亞硝酸鹽類，如亞硫酸鈉、亞硫酸鉀、亞硫酸銨、亞硫酸氫鈉、亞硫酸氫鉀、連二亞硫酸鈉、甲基次硫酸氫鈉、亞硝酸鉀、亞硝酸鈉、亞硝酸銨中選擇；天然產(chǎn)物是從各種植物根、莖、葉、果實的汁和/或提取液中選擇。
上述的暗反應(yīng)產(chǎn)生自由基的核黃素衍生物組合物具有廣闊的應(yīng)用前景和市場，例如，在制備殺菌劑和降解暗環(huán)境污染物制劑中的應(yīng)用等等。
我們在實驗中發(fā)現(xiàn)，將核黃素衍生物分散在表面活性劑膠束中，并添加低氧化還原電位的還原劑，該混合物在沒有光照的條件下也具有較高的自由基產(chǎn)率，可有效抑制多種真菌的生長，效果優(yōu)于常用化學殺菌劑，且不易使致病菌產(chǎn)生抗性。
本發(fā)明所述的暗反應(yīng)自由基發(fā)生組合物具有廣闊的應(yīng)用前景，根據(jù)其在黑暗條件下產(chǎn)生自由基的活性可用于制備殺菌劑，將暗反應(yīng)自由基發(fā)生組合物制備成為微膠囊型緩釋劑，再結(jié)合其他制劑技術(shù)，可定點、高效地治療微生物引起的疾病和農(nóng)作物病害。該暗反應(yīng)組合物還可用來在暗環(huán)境中滅菌和降解暗環(huán)境中的污染物，如污濁度較高，透光性能很差的污水或管道內(nèi)運輸?shù)奈鬯奈廴疚锝到獾取?br> 本發(fā)明的有益效果在于，提供了一種黑暗條件下核黃素衍生物產(chǎn)生自由基的方法，使核黃素衍生物在黑暗條件下能夠大量產(chǎn)生自由基；根據(jù)此方法制備的暗反應(yīng)自由基發(fā)生組合物能夠有效地抑制真菌的生長，旦不易產(chǎn)生抗性，可用作防治微生物引起的疾病和農(nóng)作物病害的藥物，也可用作黑暗環(huán)境下的滅菌和環(huán)境處理，為核黃素衍生物的廣泛應(yīng)用奠定了基礎(chǔ)。


圖1是核黃素在無光照條件下的活性氧產(chǎn)率的對照示意圖。
具體實施例方式
圖中，縱座標顯示核黃素在無光照條件下的活性氧相對產(chǎn)率；橫座標顯示時間(min)。右上角標注顯示三條曲線的含義Potato添加土豆汁，Cys添加半胱氨酸，Control不加還原劑的對照品。
實施例1 制備核黃素暗反應(yīng)自由基發(fā)生組合物所述的組合物包含核黃素(化學合成或發(fā)酵獲得)、表面活性劑膠束(選用Triton X-100)和低氧化還原電位的還原劑(選用土豆汁)。
其質(zhì)量組成是核黃素∶表面活性劑膠束∶低氧化還原電位的還原劑＝1∶21.63∶18.5(注為語句簡明，在以下敘述中均改用簡稱，核黃素及其衍生物簡稱“核黃素”；表面活性劑膠束溶液簡稱“膠束”；低氧化還原電位的還原劑簡稱“還原劑”。)操作核黃素膠束溶液制備取1.264克表面活性劑Triton X-100，溶于200毫升磷酸緩沖液中，輕輕攪拌，不使起泡，定容至250ml，備用。稱取0.058g核黃素粉末，加入膠束溶液中，電磁攪拌40至60min，即得。
還原劑制備土豆汁取新鮮土豆按1∶3左右的質(zhì)量比加水，煎約1小時，煎余液，7000rpm離心分離20min，取上清液50ml，按配比加入核黃素膠束溶液中，三者常溫下混勻，獲得暗反應(yīng)自由基發(fā)生組合物。
應(yīng)用1.自由基發(fā)生檢測將該暗反應(yīng)自由基發(fā)生組合物加入氯化硝基氮藍四唑(NBT)，于560nm測定光吸收，并與不加土豆汁的體系作對比，發(fā)現(xiàn)前者產(chǎn)生了大量活性氧自由基。(參見說明書附圖)自由基的半衰期很短，一般用間接測量的方法，如化學光譜法(用分光光度計測定)，檢測到了活性氧自由基的產(chǎn)生。
2.核黃素暗反應(yīng)自由基發(fā)生組合物的抑菌率該核黃素暗反應(yīng)自由基發(fā)生組合物與PSA(土豆蔗糖瓊脂培養(yǎng)基，potato-sucrose-agarmedium)培養(yǎng)基混合，進行農(nóng)作物致病真菌培養(yǎng)，測定抑菌圈的大小，結(jié)果如下對黃瓜枯萎病菌濃度(μg/mL) 0.125 0.25 0.5 1525抑菌率(％)25.0 41.4 56.0 60.1 63.1 64.3半有效濃度EC50＝0.90g/mL對蘋果輪斑病菌濃度(μg/mL) 0.125 0.5 2832 64抑菌率(％)26.7 50.2 63.2 70.2 71.4 73.0半有效濃度EC50＝0.717g/mL本發(fā)明所述的暗反應(yīng)自由基發(fā)生組合物具有廣闊的應(yīng)用前景，根據(jù)其在黑暗條件下產(chǎn)生自由基的活性可用于制備殺菌劑，將暗反應(yīng)自由基發(fā)生組合物制備成為微膠囊型緩釋劑，再結(jié)合其他制劑技術(shù)，可定點、高效地治療微生物引起的疾病和農(nóng)作物病害。該暗反應(yīng)組合物還可用作暗環(huán)境滅菌和降解暗環(huán)境污染物，如污濁度較高、透光性很差的污水或管道內(nèi)的污染物降解等。
實施例2 制備核黃素暗反應(yīng)自由基發(fā)生組合物所述的組合物包含核黃素(化學合成或發(fā)酵獲得，下同)、膠束(選用聚氧乙烯失水山梨醇脂肪酸酯中的吐溫-20)和還原劑(選用半胱氨酸)。其質(zhì)量組成是核黃素∶膠束∶還原劑＝1∶50∶20；其余同實施例1。
實施例3 制備核黃素暗反應(yīng)自由基發(fā)生組合物所述的組合物包含核黃素、膠束(選用吐溫-40)和還原劑(選用半胱氨酸)。其質(zhì)量組成是核黃素∶膠束∶還原劑＝1∶200∶2。其余同實施例1。
實施例4 制備核黃素暗反應(yīng)自由基發(fā)生組合物所述的組合物包含核黃素、膠束(選用吐溫-60)和還原劑(選用組氨酸)。其質(zhì)量組成是核黃素∶膠束∶還原劑＝1∶100∶5。其余同實施例1。
實施例5所述的組合物包含核黃素、膠束(選用吐溫-65)和還原劑(選用蛋氨酸)。其質(zhì)量組成是核黃素∶膠束∶還原劑＝1∶500∶3。其余同例1。
實施例6所述的組合物包含核黃素、膠束(選用吐溫-80)和還原劑(選用乙酰半胱氨酸)。其質(zhì)量組成是核黃素∶膠束∶還原劑＝1∶250∶1。其余同例1。
實施例7所述的組合物包含核黃素、膠束(選用吐溫-81)和還原劑(選用谷胱甘肽)。其質(zhì)量組成
核黃素∶膠束∶還原劑＝1∶10∶4。其余同實施例1。
實施例8所述的組合物包含核黃素、膠束(選用吐溫-85)和還原劑(選用金屬硫蛋白)。其質(zhì)量組成是核黃素∶膠束∶還原劑＝1∶1000∶6。其余同實施例1。
實施例9所述的組合物包含核黃素、膠束(選用聚醚——聚丙二醇聚氧乙烯醚型)和還原劑(選用金屬硫蛋白)。其質(zhì)量組成是核黃素∶膠束∶還原劑＝1∶1500∶0.2。其余同實施例1。
實施例10所述的組合物包含核黃素、膠束(選用苯酚聚氧乙烯醚型)和還原劑(選用輔酶I)。其質(zhì)量組成是核黃素∶膠束∶還原劑＝1∶2000∶10。其余同實施例1。
實施例11所述的組合物包含核黃素、膠束(選用生物表面活性劑鼠李脂)和還原劑(選用輔酶I或輔酶II)。其質(zhì)量組成是核黃素∶膠束∶還原劑＝1∶2500∶0.1。其余同例1。
實施例12 制備核黃素暗反應(yīng)自由基發(fā)生組合物所述的組合物包含核黃素、膠束(選用海藻糖脂)和還原劑(選用輔酶Q或輔酶II)。其質(zhì)量組成是核黃素∶膠束∶還原劑＝1∶3000∶0.1。其余同實施例1。
實施例13所述的組合物包含黃素單核苷酸、膠束(選用槐糖脂)和還原劑(選用輔酶I或輔酶Q)。其質(zhì)量組成是黃素單核苷酸∶膠束∶還原劑＝1∶10∶19。其余同實施例1。
實施例14所述的組合物包含黃素腺嘌呤二核苷酸、膠束(選用甘露糖赤醇脂)和還原劑(選用VC或輔酶II)。其質(zhì)量組成是黃素腺嘌呤二核苷酸∶膠束∶還原劑＝1∶900∶18。其余同實施例1。
實施例15所述的組合物包含黃素單核苷酸、膠束(選用脂肪酸聚氧乙烯型)和還原劑(選用VE或輔酶II)。其質(zhì)量組成是黃素單核苷酸∶膠束∶還原劑＝1∶800∶17。其余同實施例1。
實施例16所述的組合物包含黃素腺嘌呤二核苷酸、膠束(選用多元醇部分脂肪酸脂型)和還原劑(選用卵磷脂柯立諾麥克酸)。其質(zhì)量組成是黃素腺嘌呤二核苷酸∶膠束∶還原劑＝1∶600∶7。其余同實施例1。
實施例17所述的組合物包含黃素單核苷酸、膠束(選用聚氧乙烯脂肪醇醚中的平平加O型)和還原劑(選用斯匹克斯堡酸)。其質(zhì)量組成是黃素單核苷酸∶膠束∶還原劑＝1∶10∶9。其余同例1。
實施例18
所述的組合物包含黃素腺嘌呤二核苷酸、膠束(選用聚氧乙烯烷代酚醚型)和還原劑(選用維生素C或海藻糖霉菌酸雙脂)。其質(zhì)量組成是黃素腺嘌呤二核苷酸∶膠束∶還原劑＝1∶60∶0.1。其余同實施例1。
實施例19所述的組合物包含黃素單核苷酸、膠束(選用脂肪醇聚氧乙烯醚型)和還原劑(選用維生素C或脂雜多糖)。其質(zhì)量組成是黃素單核苷酸∶膠束∶還原劑＝1∶40∶0.2。其余同實施例1。
實施例20所述的組合物包含黃素腺嘌呤二核苷酸、膠束(選用OP型)和還原劑(選用維生素C或海藻糖二分枝菌酸脂)。其質(zhì)量組成是黃素腺嘌呤二核苷酸∶膠束∶還原劑＝1∶30∶0.3。其余同實施例1。
實施例21所述的組合物包含黃素單核苷酸、膠束(選用硬脂酸鈉)和還原劑(選用棒桿霉菌酸或α-支鏈-β-羥基脂肪酸海藻糖脂)。其質(zhì)量組成是黃素單核苷酸∶膠束∶還原劑＝1∶20∶0.8。其余同實施例1。
實施例22所述的組合物包含黃素腺嘌呤二核苷酸、膠束(選用十二烷基苯磺酸鈉)和還原劑(選用槲皮素或桑色素)。其質(zhì)量組成是黃素腺嘌呤二核苷酸∶膠束∶還原劑＝1∶10∶8。其余同實施例23所述的組合物包含5’-磷酸核黃素鈉、膠束(選用月桂酸鉀)和還原劑(選用多酚類或蘆丁)。其質(zhì)量組成是5’-磷酸核黃素鈉∶膠束∶還原劑＝1∶20∶11。其余同實施例1。
實施例24所述的組合物包含月桂酸核黃素、膠束(選用十二烷基苯磺酸鈉)和還原劑(選用兒茶酚或黃芩素)。其質(zhì)量組成是月桂酸核黃素∶膠束∶還原劑＝1∶10∶11。其余同實施例1。
實施例25所述的組合物包含5’-磷酸核黃素鈉、膠束(選用多元醇部分脂肪酸酯型)和還原劑(選用漢黃芩素或香豆素)。其質(zhì)量組成是5’磷酸核黃素鈉∶膠束∶還原劑＝1∶3000∶20。其余同實施例1。
實施例26所述的組合物包含月桂酸核黃素、膠束(選用琥珀酸酯磺酸鈉)和還原劑(選用二巰基丙磺酸或二巰基丁二酸)。其質(zhì)量組成是月桂酸核黃素∶膠束∶還原劑＝1∶700∶16。其余同實施例27所述的組合物包含5’-磷酸核黃素鈉、膠束(選用烷基乙氧基磺酸鈉)和還原劑(選用二巰基丙醇或丙二胺)。其質(zhì)量組成是5’-磷酸核黃素鈉∶膠束∶還原劑＝1∶400∶13。其余同實施例1。
實施例28所述的組合物包含月桂酸核黃素、膠束(選用石油磺酸鈉)和還原劑(選用甲基苯丙胺)。其質(zhì)量組成是月桂酸核黃素∶膠束∶還原劑＝1∶300∶0.1。其余同實施例1。
實施例29所述的組合物包含5’-磷酸核黃素鈉、膠束(選用十二烷基硫酸鈉)和還原劑(選用二氯苯胺)。其質(zhì)量組成是5’-磷酸核黃素鈉∶膠束∶還原劑＝1∶90∶14。其余同實施例1。
實施例30所述的組合物包含月桂酸核黃素、膠束(選用聚氧乙烯十二醇硫酸酯鈉)和還原劑(選用氨水)。其質(zhì)量組成是月桂酸核黃素∶膠束∶還原劑＝1∶80∶20。其余同實施例1。
實施例31所述的組合物包含月桂酸核黃素、膠束(選用月桂酰肌氨酸鈉)和還原劑(選用亞硫酸鈉或丙二胺)。其質(zhì)量組成是月桂酸核黃素∶膠束∶還原劑＝1∶70∶13。其余同實施例1。
實施例32所述的組合物包含5’-磷酸核黃素鈉、膠束(選用十六烷基三甲基季銨溴化物)和還原劑(選用亞硫酸鉀或亞硫酸銨)。其質(zhì)量組成是5’-磷酸核黃素鈉∶膠束∶還原劑＝1∶45∶13。其余同實施例1。
實施例33所述的組合物核黃素四丁酯、膠束(選用十八烷基二甲基芐基季銨氯化物)和還原劑(選用亞硫酸氫鈉或亞硫酸氫鉀)。其質(zhì)量組成是核黃素四丁酯∶膠束∶還原劑＝1∶50∶20。其余同例1。
實施例34所述的組合物核黃素四丁酯、膠束(選用十二烷基三甲基氯化銨)和還原劑(選用亞硫酸氫鈉或亞硫酸氫鉀)。其質(zhì)量組成是核黃素四丁酯∶膠束∶還原劑＝1∶1000∶40。其余同實施例1。
實施例35所述的組合物核黃素四丁酯、膠束(選用十二烷基二甲基芐基氯化銨)和還原劑(選用連二亞硫酸鈉或甲基次硫酸氫鈉)。其質(zhì)量組成是核黃素四丁酯∶膠束∶還原劑＝1∶500∶3。其余同例1。
實施例36所述的組合物核黃素四丁酯、膠束(選用氯化十六烷基吡啶)和還原劑(選用亞硝酸鉀)。其質(zhì)量組成是核黃素四丁酯∶膠束∶還原劑＝1∶50∶4。其余同實施例1。
實施例37所述的組合物核黃素四丁酯、膠束(選用氯化十二烷基吡啶)和還原劑(選用亞硝酸鈉)。其質(zhì)量組成是核黃素四丁酯∶膠束∶還原劑＝1∶45∶5。其余同實施例1。
實施例38所述的組合物包含月桂酸核黃素、膠束(選用溴化十六烷基吡啶)和還原劑(選用亞硝酸銨)。其質(zhì)量組成是月桂酸核黃素∶膠束∶還原劑＝1∶50∶5。其余同實施例1。
實施例39所述的組合物包含月桂酸核黃素、膠束(選用氯化十七酰甲胺基吡啶)和還原劑(選用氨水)。其質(zhì)量組成是月桂酸核黃素∶膠束∶還原劑＝1∶500∶10。其余同實施例1。
實施例40所述的組合物包含包含月桂酸核黃素、膠束(選用十四酰丙胺基二甲基芐基氯化銨)和還原劑(選用亞硫酸鹽類或亞硝酸鹽類)。其質(zhì)量組成是月桂酸核黃素∶膠束∶還原劑＝1∶50∶1。其余同例1。
實施例41所述的組合物包含包含月桂酸核黃素、膠束(選用甜菜堿)和還原劑(選用亞硫酸鹽類或亞硝酸鹽類)。其質(zhì)量組成是月桂酸核黃素∶膠束∶還原劑＝1∶400∶20。其余同實施例1。
實施例42所述的組合物包含月桂酸核黃素、膠束(選用十二烷基叔胺鹽)和還原劑(選用亞硫酸鹽類或亞硝酸鹽類)。其質(zhì)量組成是月桂酸核黃素∶膠束∶還原劑＝1∶40∶1。其余同實施例1。
實施例43所述的組合物包含5’-磷酸核黃素鈉、膠束(選用脂肪烴基咪唑啉衍生物)和還原劑(選用半胱氨酸)。其質(zhì)量組成是5’-磷酸核黃素鈉∶膠束∶還原劑＝1∶15∶3。其余同實施例1。
實施例44所述的組合物包含5’-磷酸核黃素鈉、膠束(選用十二烷基氨基酸鈉)和還原劑(選用連二亞硫酸鈉或甲基次硫酸氫鈉)。其質(zhì)量組成是5’-磷酸核黃素鈉∶膠束∶還原劑＝1∶20∶1。余同例1。
實施例45所述的組合物包含5’-磷酸核黃素鈉、膠束(選用十二烷基二甲基甜菜堿)和還原劑(選用甲基次硫酸氫鈉)。其質(zhì)量組成是5’-磷酸核黃素鈉∶膠束∶還原劑＝1∶300∶10。其余同實施例1。
實施例46所述的組合物包含5’-磷酸核黃素鈉、膠束(選用十二烷基二羥乙基甜菜堿)和還原劑(選用連二亞硫酸鈉)。其質(zhì)量組成是5’-磷酸核黃素鈉∶膠束∶還原劑＝1∶50∶2。其余同實施例1。
實施例47所述的組合物包含5’-磷酸核黃素鈉、膠束(選用烷基二甲基氧化胺)和還原劑(選用甲基次硫酸氫鈉)。其質(zhì)量組成是5’-磷酸核黃素鈉∶膠束∶還原劑＝1∶10∶2。其余同實施例1。
實施例48所述的組合物包含黃素腺嘌呤二核苷酸、膠束(選用烷基二乙醇基氧化胺)和還原劑(選用丙二胺)。其質(zhì)量組成是黃素腺嘌呤二核苷酸∶膠束∶還原劑＝1∶25∶5。其余同實施例1。
實施例49所述的組合物包含黃素腺嘌呤二核苷酸、膠束(選用烷酰丙胺基二甲基氧化銨)和還原劑(選用組氨酸)。其質(zhì)量組成是黃素腺嘌呤二核苷酸∶膠束∶還原劑＝1∶20∶4。其余同實施例1。
實施例50所述的組合物包含黃素腺嘌呤二核苷酸、膠束(選用鼠李脂)和還原劑(選用蛋氨酸)。其質(zhì)量組成是黃素腺嘌呤二核苷酸∶膠束∶還原劑＝1∶50∶1。其余同實施例1。
實施例51所述的組合物包含黃素腺嘌呤二核苷酸、膠束(選用海藻糖脂)和還原劑(選用蛋氨酸和/或乙酰半胱氨酸)。其質(zhì)量組成是黃素腺嘌呤二核苷酸∶膠束∶還原劑＝1∶40∶2。其余同實施例1。
實施例52所述的組合物包含黃素腺嘌呤二核苷酸、膠束(選用槐糖脂或甘露糖赤醇脂)和還原劑(選用兒條酚或黃芩素)。其質(zhì)量組成是黃素腺嘌呤二核苷酸∶膠束∶還原劑＝1∶250∶5。其余同實施例1。
實施例53所述的組合物包含黃素單核苷酸、膠束(選用卵磷脂或柯立諾麥克酸)和還原劑(選用多漢黃芩素或槲皮素)。其質(zhì)量組成是黃素單核苷酸∶膠束∶還原劑＝1∶2000∶5。其余同實施例1。
實施例54所述的組合物包含黃素單核苷酸、膠束(選用α-支鏈-β-羥基脂肪酸海藻糖脂)和還原劑(選用各種植物根、莖、葉、果實的汁和/或提取液)。其質(zhì)量組成是黃素單核苷酸∶膠束∶還原劑＝1∶2000∶4。其余同實施例1。
實施例55所述的組合物包含黃素單核苷酸、膠束(選用棒桿霉菌酸)和還原劑(選用各種植物根、莖、葉、果實的汁和/或提取液)。其質(zhì)量組成是
黃素單核苷酸∶膠束∶還原劑＝1∶1500∶3。其余同實施例1。
實施例56所述的組合物包含黃素單核苷酸、膠束(選用海藻糖二分枝菌酸脂)和還原劑(選用各種植物根、莖、葉、果實的汁和/或提取液)。其質(zhì)量組成是黃素單核苷酸∶膠束∶還原劑＝1∶100∶2。其余同實施例1。
實施例57所述的組合物包含黃素單核苷酸、膠束(選用脂雜多糖)和還原劑(選用各種植物根、莖、葉、果實的汁和/或提取液)。其質(zhì)量組成是黃素單核苷酸∶膠束∶還原劑＝1∶50∶1。其余同實施例1。
實施例58所述的組合物包含核黃素、膠束(選用海藻糖霉菌酸雙脂)和還原劑(選用各種植物根、莖、葉、果實的汁和/或提取液)。其質(zhì)量組成是核黃素∶膠束∶還原劑＝1∶60∶3。其余同實施例1。
實施例59所述的組合物包含核黃素、膠束(選用斯匹克斯堡酸)和還原劑(選用半胱氨酸)。其質(zhì)量組成是核黃素∶膠束∶還原劑＝1∶12∶2。其余同實施例1。
實施例60 所述的組合物包含核黃素、膠束(選用卵磷脂或柯立諾麥克酸)和還原劑(選用各種植物根、莖、葉、果實的汁和/或提取液)。其質(zhì)量組成是核黃素∶膠束∶還原劑＝1∶10∶3。其余同實施例1。
實施例61 所述的組合物包含核黃素、膠束(選用卵磷脂或柯立諾麥克酸)和還原劑(選用各種植物根、莖、葉、果實的汁和/或提取液)。其質(zhì)量組成是核黃素∶膠束∶還原劑＝1∶15∶4。其余同例1。
實施例62 所述的組合物包含核黃素、膠束(選用槐糖脂或甘露糖赤醇脂)和還原劑(選用各種植物根、莖、葉、果實的汁和/或提取液)。其質(zhì)量組成是核黃素∶膠束∶還原劑＝1∶50∶5。其余同實施例1。
實施例63 所述的組合物包含核黃素、膠束(選用鼠李脂或海藻糖脂)和還原劑(選用各種植物根、莖、葉、果實的汁和/或提取液)。其質(zhì)量組成是核黃素∶膠束∶還原劑＝1∶100∶1。其余同例1。
實施例64 所述的組合物包含包含核黃素、膠束(選用鼠李脂或海藻糖脂)和還原劑(選用各種植物根、莖、葉、果實的汁和/或提取液)。其質(zhì)量組成是核黃素∶膠束∶還原劑＝1∶20∶5。其余同例1。
權(quán)利要求
1.一種核黃素及其衍生物組合物暗反應(yīng)產(chǎn)生自由基的方法，其特征是所述的核黃素及其衍生物包括核黃素及核黃素的衍生物；所述的核黃素及其衍生物分散在表面活性劑膠束溶液中，加低氧化還原電位的還原劑混勻，獲得暗反應(yīng)自由基發(fā)生組合物；其質(zhì)量組成是核黃素及其衍生物∶表面活性劑膠束溶液∶低氧化還原電位的還原劑＝1∶10～3000∶0.1～20。
2.按照權(quán)利要求1所述的核黃素及其衍生物組合物暗反應(yīng)產(chǎn)生自由基的方法，其特征是所述的核黃素及其衍生物是核黃素，黃素單核苷酸，黃素腺嘌呤二核苷酸，5’-磷酸核黃素鈉，月桂酸核黃素和/或核黃素四丁酯。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的核黃素及其衍生物組合物暗反應(yīng)產(chǎn)生自由基的方法，其特征是所述的表面活性劑膠束溶液，是從非離子型表面活性劑、陰離子型表面活性劑、陽離子型表面活性劑、兩性表面活性劑或生物表面活性劑選擇制備的表面活性劑膠束溶液；其中，1)非離子型表面活性劑是從多元醇部分脂肪酸酯、聚氧乙烯脂肪醇醚、聚氧乙烯烷代酚醚、脂肪酸聚氧乙烯型和聚氧乙烯失水山梨醇脂肪酸酯型由選擇；2)陰離子表面活性劑是從硬脂酸鈉、月桂酸鉀、十二烷基苯磺酸鈉、琥珀酸酯磺酸鈉、烷基乙氧基磺酸鈉、石油磺酸鈉、十二烷基硫酸鈉、聚氧乙烯十二醇硫酸酯鈉、月桂酰肌氨酸鈉中選擇；3)陽離子表面活性劑是從十六烷基三甲基季銨溴化物、十八烷基二甲基芐基季銨氯化物、十二烷基三甲基氯化銨、十二烷基二甲基芐基氯化銨、氯化十六烷基吡啶、氯化十二烷基吡啶、溴化十六烷基吡啶、氯化十七酰甲胺基吡啶、十四酰丙胺基二甲基芐基氯化銨中選擇；4)兩性表面活性劑是從甜菜堿、十二烷基叔胺鹽、脂肪烴基咪唑啉衍生物，十二烷基氨基酸鈉、十二烷基二甲基甜菜堿、十二烷基二羥乙基甜菜堿、烷基二甲基氧化胺、烷基二乙醇基氧化胺、烷酰丙胺基二甲基氧化銨中選擇；5)生物表面活性劑是從鼠李脂、海藻糖脂、槐糖脂、甘露糖赤醇脂、卵磷脂、柯立諾麥克酸(Corynomycolic acids)、斯匹克斯堡酸(spjculisporic acid)、海藻糖霉菌酸雙脂、脂雜多糖、海藻糖二分枝菌酸脂、α-支鏈-β-羥基脂肪酸海藻糖脂、棒桿霉菌酸中選擇。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的核黃素及其衍生物組合物暗反應(yīng)產(chǎn)生自由基的方法，其特征是所述的低氧化還原電位的還原劑，為氧化還原電位低于相應(yīng)的核黃素及其衍生物的有機和無機化合物，它們是氨基酸及其衍生物、細胞活性組分、有機化合物、無機化合物和天然產(chǎn)物；其中氨基酸及其衍生物是從半胱氨酸、組氨酸、蛋氨酸和/或乙酰半胱氨酸中選擇；細胞活性組分是從谷胱甘肽，金屬硫蛋白，輔酶I，輔酶II，輔酶Q，維生素F和/或維生素C中選擇；有機化合物是從多酚類、黃酮類化合物，巰基化合物和胺類化合物，如兒茶酚、黃芩素、漢黃芩素、槲皮素、桑色素、香豆素、二巰基丙磺酸、二巰基丁二酸、二巰基丙醇、丙二胺、甲基苯丙胺、二氯苯胺和/或氨水中選擇；無機化合物是從亞硫酸鹽、亞硝酸鹽類，如亞硫酸鈉、亞硫酸鉀、亞硫酸銨、亞硫酸氫鈉、亞硫酸氫鉀、連二亞硫酸鈉、甲基次硫酸氫鈉、亞硝酸鉀、亞硝酸鈉、亞硝酸銨中選擇；天然產(chǎn)物是從各種植物根、莖、葉、果實的汁和/或提取液中選擇。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的核黃素及其衍生物組合物暗反應(yīng)產(chǎn)生自由基的方法的應(yīng)用，其特征是所述的暗反應(yīng)產(chǎn)生自由基的核黃素及其衍生物組合物在制備殺菌劑中的應(yīng)用。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的核黃素及其衍生物組合物暗反應(yīng)產(chǎn)生自由基的方法的應(yīng)用，其特征是所述的暗反應(yīng)產(chǎn)生自由基的核黃素及其衍生物組合物在制備降解暗環(huán)境污染物制劑中的應(yīng)用。
全文摘要
一種利用核黃素及其衍生物組合物暗反應(yīng)產(chǎn)生自由基的方法和應(yīng)用，其所述的核黃素及其衍生物分散在表面活性劑膠束溶液中，加低氧化還原電位的還原劑混勻，獲得暗反應(yīng)自由基發(fā)生組合物；其質(zhì)量組成是核黃素及其衍生物∶表面活性劑膠束溶液∶低氧化還原電位的還原劑＝1∶10～3000∶0.1～20。該組合物在黑暗條件下能夠大量產(chǎn)生自由基，能夠有效地抑制真菌的生長，且不易產(chǎn)生抗性，可用作防治微生物引起的疾病和農(nóng)作物病害的藥物，也可在制備殺菌劑和降解暗環(huán)境污染物制劑中的應(yīng)用；作黑暗環(huán)境下的滅菌和環(huán)境處理，為核黃素衍生物的廣泛應(yīng)用奠定了基礎(chǔ)。
文檔編號A01N43/90GK1605253SQ200310109610
公開日2005年4月13日 申請日期2003年10月10日 優(yōu)先權(quán)日2003年10月10日
發(fā)明者張紅雨, 孫振令 申請人:山東省生物信息工程技術(shù)研究中心, 張紅雨