一種用于毛細管電泳的在線固相萃取聯(lián)用裝置的制造方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本實用新型涉及一種對樣品進行預(yù)處理和定量分析的裝置，尤其涉及一種用于毛 細管電泳的在線固相萃取聯(lián)用裝置。
【背景技術(shù)】
[0002] 毛細管電泳因其具有分離效率高、分析速度快、樣品用量少、操作模式多等優(yōu)點被 廣泛應(yīng)用于眾多研宄領(lǐng)域。然而由于毛細管進樣體積小以及在柱檢測光程短，導(dǎo)致檢測靈 敏度較低，這使得毛細管電泳在實際樣品痕量組分的分析應(yīng)用中受到限制。因此，提高毛細 管電泳的檢測靈敏度是一個重要研宄方向。
[0003] 固相萃取與毛細管電泳聯(lián)用是提高毛細管電泳檢測靈敏度的有效途徑。目前已有 的聯(lián)用模式中，毛細管電泳在線固相萃取聯(lián)用模式通過使用連接裝置實現(xiàn)物理連接和液流 切換，萃取過程和電泳分離過程可以相對獨立地操作與優(yōu)化。ThomThomStroink等使用六 通閥和自制微量注射瓶將固相萃取和毛細管電泳在線聯(lián)用（ThomStroink，GerardWiese, JanTeeuwsen,HenkLingeman,JoopC.M.ffaterval,AukeBult,GerhardusJ.de Jong,WillyJ.M.Underberg,Electrophoresis, 2003，24，897-903)，固相萃取洗 脫液流入注射瓶后電動進樣至毛細管前端，多余部分經(jīng)廢液管路流出。F.W.Alexander Tempels等使用兩個六通閥實現(xiàn)聯(lián)用，其中第一六通閥切換流路，第二六通閥用于進樣（F. ff.AlexanderTempels,WillyJ.M.Underberg,Govertff.Somsen,GerhardusJ. deJong,AnalyticalChemistry, 2004, 76, 4432-4436)〇F.ff.AlexanderTempels 等還使用六通閥和一個T形三通作為連接裝置，固相萃取洗脫液經(jīng)T形三通流入分離毛細 管和廢液毛細管（F.W.AlexanderTempels,GerardWiese,WillyJ.M.Underberg, Govertff.Somsen,GerhardusJ.deJong,JournalofChromatographyB, 2006, 839, 30-35)。以上三種方式雖可實現(xiàn)毛細管電泳的在線固相萃取聯(lián)用，但也存在一些問題：微量 注射瓶制作復(fù)雜，不易推廣；第二六通閥定量環(huán)容積相對于毛細管電泳進樣量偏大，需使用 電動進樣方式，操作繁瑣；T形三通接口將廢液導(dǎo)入毛細管，需在毛細管電泳另一端使用反 壓將廢液壓出，電泳進樣量取決于分離毛細管和廢液毛細管的相對壓力，進樣相對標準偏 差較大。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本實用新型的目的是解決上述問題而提供一種結(jié)構(gòu)簡單、操作簡便、進樣精密度 高的毛細管電泳在線固相萃取聯(lián)用裝置。
[0005] 本實用新型提出的毛細管電泳在線固相萃取聯(lián)用裝置，由攜帶有試劑瓶的輸液 泵、六通閥、萃取柱、T形三通、納升級四通閥、分離毛細管和連接管路經(jīng)連接組成，其結(jié)構(gòu)如 圖1所示。其中，六通閥3上連接有兩個攜帶試劑瓶的輸液泵1和2,六通閥3上還連接有 萃取柱4 ;六通閥3通過管線6和T形三通接口 7與納升級四通閥9相連，納升級四通閥9 上連接有毛細管電泳中的分離毛細管11和12,分離毛細管11和12分別接通毛細管電泳的 正負極。
[0006] 上述納升級四通閥9的進樣體積為10nL，也可為5nL或20nL。
[0007] 上述六通閥3、T形三通接口 7和納升級四通閥9上還分別設(shè)有廢液出口 5、8、10。
[0008] 與現(xiàn)有技術(shù)相比，本實用新型取得了以下的技術(shù)效果：
[0009] 1、本實用新型可以實現(xiàn)固相萃取和毛細管電泳的在線聯(lián)用，裝置構(gòu)建較為簡單， 操作方便。
[0010] 2、該聯(lián)用裝置使用納升級四通閥實現(xiàn)進樣，進樣量可以維持恒定，從根本上解決 了進樣量精密度差的問題。
[0011] 3、該裝置可以通過程序控制實現(xiàn)樣品的自動處理，萃取用的材料可以更換，有較 大的靈活性。
[0012] 4、六通閥、T形接口和納升級四通閥上分別設(shè)有廢液出口，方便裝置的清洗，減少 裝置內(nèi)部剩余殘留物對測量結(jié)果的影響。
【附圖說明】
[0013] 圖1為本實用新型平面結(jié)構(gòu)示意圖。
[0014] 圖2為使用本實用新型分析水樣中六種磺胺類抗生素得到的電泳圖。
[0015] 圖中標號：1-攜帶有試劑瓶的輸液泵、2-攜帶有試劑瓶的輸液泵、3-六通閥、4-萃 取柱、5-廢液出口、6-連接管線、7-T形三通接口、8-廢液出口、9-納升級四通閥、10-廢液 出口、11-分離毛細管、12-分離毛細管。
【具體實施方式】
[0016] 下面通過實施例進一步具體描述本實用新型。
[0017] 實施例1，結(jié)合圖1，使用本實用新型進行分析的步驟如下。
[0018] 活化：萃取柱活化液經(jīng)攜帶有試劑瓶的輸液泵1驅(qū)動，在六通閥3處于載樣 (LOAD)位置時，將活化液以所需流速通過萃取柱4,對其進行活化。
[0019] 萃取及清洗：攜帶有試劑瓶的輸液泵1將一定體積樣品溶液注入萃取柱4,萃取 完成后使用清洗液對萃取柱4進行清洗，防止未被吸附的物質(zhì)進入分離毛細管影響后續(xù)分 析。
[0020] 解吸及分析：清洗完畢后，六通閥3切換至進樣（INJECT)位置，攜帶有試劑瓶的輸 液泵2將解吸液注入萃取柱4,使攜帶有被分析物的解吸液通過連接管線6流入納升級四通 閥9。由于解吸液流量相對于納升級進樣量較大，使用T形三通接口 7對攜帶有被分析物 的解吸液進行分流。當濃度最大的一段解吸液進入納升級四通閥9后，切換納升級四通閥 9將該段液柱引入分離毛細管，進行電泳分離和檢測。分離毛細管12后接毛細管電泳的檢 測器。
[0021] 為了便于理解本實用新型，申請人提供了一個在線固相萃取毛細管電泳運行程序 表。同時對于分析過程中輸液泵流速和流路的變化可由軟件控制自動完成，本領(lǐng)域技術(shù)人 員可以根據(jù)需求具體設(shè)計，這種自動控制軟件為公知常識，在此不另做具體描述。
[0022] 表1在線固相萃取毛細管電泳運行程序表
[0024] 下面以分析水樣中的六種磺胺類抗生素為例說明本發(fā)明的使用效果。六種磺胺類 抗生素分別為：磺胺二甲基嘧啶（SM2)、磺胺甲基嘧啶（SM1)、磺胺對甲氧嘧啶（SMT)、磺胺 二甲氧基嘧啶（SDM)、磺胺嘧啶（SD)、磺胺甲惡唑（SMZ)。
[0025] 毛細管電泳分析條件：分尚毛細管長度100cm，有效分尚長度60cm，內(nèi)徑75ym; 電泳緩沖溶液為50mia^H3P04_Na3P04緩沖溶液，pH7. 20;分離電壓20kV;分離溫度 25°C;二極管陣列檢測波長范圍190-600nm;萃取柱為含有OasisHLB填料的填充柱，內(nèi)徑 2.1謹，長度5.0cm;用純甲醇解吸。
[0026] 水樣分析：將六種磺胺類抗生素標準溶液用超純水稀釋得到200ng/mL的測試溶 液。經(jīng)在線固相萃取后進行分析，與同濃度水樣直接進樣進行比較，六種磺胺類抗生素得到 明顯富集。圖2為使用本實用新型分析水樣中六種磺胺類抗生素得到的電泳圖。A為10nL 水樣（200ng/mL)直接進樣的電泳圖，B為10mL水樣（200ng/mL)經(jīng)固相萃取富集后的 電泳圖。圖中峰編號：1，磺胺二甲基嘧啶（SM2) ;2,磺胺甲基嘧啶（SM1) ;3,磺胺對甲氧嘧 啶（SMT) ;4,磺胺二甲氧基嘧啶（SDM) ;5,磺胺嘧啶（SD) ;6,磺胺甲惡唑（SMZ)。
[0027] 我們考察了使用本實用新型進行萃取分析的重現(xiàn)性，被分析物迀移時間的相對標 準偏差（RSD) < 3. 6%，/? = 6 ;峰面積的相對標準偏差（RSD) < 4. 9%，/? = 6。說明該裝置 重現(xiàn)性好，精密度高，可滿足日常分析的需要。
【主權(quán)項】
1. 一種用于毛細管電泳的在線固相萃取聯(lián)用裝置，其特征在于：它由攜帶有試劑瓶的 輸液泵、六通閥、萃取柱、T形三通接口、納升級四通閥、分離毛細管和連接管路經(jīng)連接組成， 其中六通閥（3)上連接有兩個攜帶試劑瓶的輸液泵（1)和（2)，六通閥（3)上還連接有萃取 柱（4);六通閥（3)通過管線（6)和T形三通接口（7)與納升級四通閥（9)相連，納升級四 通閥（9)上連接有毛細管電泳中的分離毛細管（11)和（12)，分離毛細管（11)和（12)分別 接通毛細管電泳的正負極。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于毛細管電泳的在線固相萃取聯(lián)用裝置，其特征在于納升 級四通閥（9)的進樣體積為10nL，也可為5nL或20nL。3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于毛細管電泳的在線固相萃取聯(lián)用裝置，其特征在于六通 閥（3)、T形三通接口（7)和納升級四通閥（9)上還分別設(shè)有廢液出口（5)、（8)、（10)。
【專利摘要】本實用新型公開了一種用于毛細管電泳的在線固相萃取聯(lián)用裝置，它由攜帶有試劑瓶的輸液泵、六通閥、萃取柱、T形三通接口、納升級四通閥、分離毛細管和連接管路經(jīng)連接組成。本實用新型結(jié)構(gòu)簡單，操作方便，進樣由納升級四通閥完成，進樣精密度好。
【IPC分類】G01N27/447, G01N1/40
【公開號】CN204630976
【申請?zhí)枴緾N201520373678
【發(fā)明人】張子興, 張嫻
【申請人】中國科學(xué)院城市環(huán)境研究所
【公開日】2015年9月9日
【申請日】2015年6月3日