一種替格瑞洛中異構(gòu)體雜質(zhì)含量的檢測方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于化學(xué)中的分析檢測領(lǐng)域，具體涉及一種替格瑞洛中異構(gòu)體雜質(zhì)含量的 檢測方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 替格瑞洛(Ticagrelor商品名：BRILINTA)，化學(xué)名為（lS，2S，3R，5S)-3-[7-[[(lR， 23)-2-(3,4-二氟苯基)環(huán)丙基]氨基]-5-丙硫基-3!1-1，2,3-三唑基[4,5-(1]嘧啶-3-基]-5-(2-羥乙氧基）-1，2_環(huán)戊烷二醇（分子式：C 23H28F2N604S)，是由阿斯利康制藥有限公司 (AstraZeneca AB)開發(fā)的一種選擇性的二磷酸腺苷(ADP)受體詰抗劑，通過激活P2Y12-受 體，可逆性的阻滯ADP介導(dǎo)的血小板活化和聚集。
[0003] 由于受生產(chǎn)工藝和控制水平的限制，生產(chǎn)所得的替格瑞洛產(chǎn)品中，往往存在有多 種雜質(zhì)，例如，（11?，21?，35,51〇-3-[7-{[(11?，25)-2-(3,4-二氟苯基)環(huán)丙基]氨基}-5-丙硫 基-3H-1，2,3-三唑[4,5-d]嘧啶-3-基]-5-(2-羥乙氧基）環(huán)戊烷-1,2-二醇、（1R，2R，3S， 51〇-3-[7-{[(13,210-2-(3,4-二氟苯基)環(huán)丙基]氨基}-5-丙硫基-3!1-1，2,3-三唑[4,5-(1] 嘧啶-3-基]-5-(2-羥乙氧基)環(huán)戊烷-1,2-二醇、（lS，2S，3R，5S)-3-[7-{[(lS，2R)-2-(3,4-二氟苯基)環(huán)丙基]氨基}-5_丙硫基-3H-1，2,3-三唑[4,5-d]嘧啶-3-基]-5-(2-羥乙氧基） 環(huán)戊燒-1,2-二醇等（參見：替卡格雷雜質(zhì)列表，http://wenku.baidu.com/view/ 69885bd8fd0a79563cle72aa.html?re = view，公開時間為2014年 10月 17日），嚴(yán)重影響替格 瑞洛的產(chǎn)品質(zhì)量和患者的用藥安全。
[0004] 然而，對于檢測替格瑞洛而言，目前僅有一篇專利文獻(xiàn)CN 104634887A檢測了替格 瑞洛中的一種雜質(zhì)含量：（13,25,31?，55)-3-(7-((15,21〇-2-(3,4-二氟苯基)環(huán)丙胺基)-5-(丙硫基)-3H- [ 1，2，3 ]三唑[4，5-d ]嘧啶-3-基)-5- (2-羥基乙氧基)環(huán)戊烷-1，2-二醇，很難 全面地反映替格瑞洛的產(chǎn)品質(zhì)量。
[0005] 為了對替格瑞洛中更多的雜質(zhì)進(jìn)行檢測，同時，也為了更全面地監(jiān)控替格瑞洛的 產(chǎn)品質(zhì)量，進(jìn)一步保證患者的用藥安全，需要發(fā)明一種新的檢測方法。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 本發(fā)明的目的在于提供一種替格瑞洛中異構(gòu)體雜質(zhì)含量的檢測方法。
[0007] 本發(fā)明提供的一種替格瑞洛中異構(gòu)體雜質(zhì)含量的檢測方法，它包括以下步驟：
[0008] a、取異構(gòu)體雜質(zhì)的對照品，制備對照品溶液；
[0009] b、取待檢的替格瑞洛樣品，制備供試品溶液；
[0010] c、采用高效液相色譜方法分別對對照品溶液、供試品溶液進(jìn)行檢測，所述高效液 相色譜方法的檢測條件為：
[0011] 色譜柱：固定相為直鏈淀粉-三(3，5-二甲苯基氨基甲酸酯）；
[0012] 流動相:正己烷-乙醇溶液，正己烷與乙醇的體積比為88% :12%~92% :8%，所述 的乙醇中含有〇.1%~〇.5%1111/1111的二乙胺；
[0013] 檢測波長：200nm ~300nm;
[0014] d、按外標(biāo)法以峰面積計算，或者根據(jù)峰面積與濃度之間的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算，得到替 格瑞洛樣品中的異構(gòu)體雜質(zhì)含量。
[0015]進(jìn)一步的，所述的異構(gòu)體雜質(zhì)至少包括（lR，2R，3S，5R)-3-[7-{[(lR，2S)-2-(3,4-二氟苯基)環(huán)丙基]氨基}-5_丙硫基-3H-1，2,3-三唑[4,5-d]嘧啶-3-基]-5-(2-羥乙氧基） 環(huán)戊燒_1，2-二醇。
[0016] 進(jìn)一步的，所述的異構(gòu)體雜質(zhì)至少包括（lR，2R，3S，5R)-3-[7-{[(lR，2S)-2-(3,4-二氟苯基)環(huán)丙基]氨基}-5_丙硫基-3H-1，2,3-三唑[4,5-d]嘧啶-3-基]-5-(2-羥乙氧基） 環(huán)戊燒 _1，2-二醇和（1R,2R，3S,5R)-3_[7_{ [ (IS,2R)_2_(3，4_二氣苯基)環(huán)丙基]氨基}_5_ 丙硫基-3H-1，2，3-三唑[4，5-d ]嘧啶-3-基]-5-( 2-羥乙氧基)環(huán)戊烷-1，2-二醇；
[0017] 優(yōu)選的，所述的異構(gòu)體雜質(zhì)同時包括（lR，2R，3S，5R)-3-[7-{[(lR，2S)-2-(3,4-: 氟苯基)環(huán)丙基]氨基}-5_丙硫基-3H-1，2,3-三唑[4,5-d]嘧啶-3-基]-5-(2-羥乙氧基)環(huán) 戊燒-1，2-二醇、（1R, 2R, 3S，5R)-3_[7_{ [ (IS，2R)_2_(3，4_二氣苯基)環(huán)丙基]氨基}_5_丙 硫基-3H-1，2，3-三唑[4，5-d ]嘧啶-3-基]-5- (2-羥乙氧基)環(huán)戊烷-1，2-二醇和（1S，2S，3R， 5S)-3_[7_{ [ (IS, 2R)_2_(3，4_ 二氣苯基)環(huán)丙基]氛基}_5_ 丙硫基-3H-1，2，3_ 二唑[4,5_d] 嘧啶-3-基]-5-(2-羥乙氧基)環(huán)戊烷-1，2-二醇。
[0018] 進(jìn)一步的，步驟a中，制備對照品溶液的溶劑為步驟c中的流動相;步驟b中，制備供 試品溶液的溶劑為步驟c中的流動相。
[0019] 進(jìn)一步的，步驟c中，所述的色譜柱為CHIRALPAK^_AD-H，長度為250mm，內(nèi)徑為 4 · 6mm，填料的粒徑為5μηι。
[0020] 進(jìn)一步的，步驟C中，所述色譜柱的柱溫為25°C~35°C。
[0021] 進(jìn)一步的，步驟c中，正己烷與乙醇的體積比為9 0 % : 10 % ;所述的乙醇中含有 0· 2%ml/ml的二乙胺。
[0022] 進(jìn)一步的，步驟c中，所述流動相的流速為0.9ml/min~1. lml/min;優(yōu)選的，所述流 動相的流速為1 .〇ml/min。
[0023]進(jìn)一步的，步驟c中，所述的檢測波長為230nm~250nm;優(yōu)選的，所述的檢測波長為 242nm〇
[0024] 進(jìn)一步的，步驟c中，進(jìn)樣體積為10μ1~50μ1;優(yōu)選的，進(jìn)樣體積為20μ1。
[0025] 本發(fā)明提供了一種替格瑞洛中異構(gòu)體雜質(zhì)含量的新檢測方法，各色譜峰之間的分 離度高，相互之間無干擾，可以同時實現(xiàn)對雜質(zhì)Β和雜質(zhì)Α、雜質(zhì)C的準(zhǔn)確檢測，而且，操作簡 便，容易控制，檢測成本低，并具有良好的線性關(guān)系、專屬性、精密度、穩(wěn)定性、靈敏度和重復(fù) 性，加樣回收率高，檢測結(jié)果準(zhǔn)確、可靠，為監(jiān)控替格瑞洛藥物中異構(gòu)體雜質(zhì)的含量提供了 一種行之有效的檢測方法，進(jìn)一步保證了替格瑞洛的產(chǎn)品質(zhì)量和患者的用藥安全。
[0026] 顯然，根據(jù)本發(fā)明的上述內(nèi)容，按照本領(lǐng)域的普通技術(shù)知識和慣用手段，在不脫離 本發(fā)明上述基本技術(shù)思想前提下，還可以做出其它多種形式的修改、替換或變更。
[0027]以下通過實施例形式的【具體實施方式】，對本發(fā)明的上述內(nèi)容再作進(jìn)一步的詳細(xì)說 明。但不應(yīng)將此理解為本發(fā)明上述主題的范圍僅限于以下的實例。凡基于本發(fā)明上述內(nèi)容 所實現(xiàn)的技術(shù)均屬于本發(fā)明的范圍。
【附圖說明】
[0028]圖1為本發(fā)明檢測條件下雜質(zhì)A對照品溶液的HPLC圖。
[0029]圖2為本發(fā)明檢測條件下雜質(zhì)B對照品溶液的HPLC圖。
[0030]圖3為本發(fā)明檢測條件下雜質(zhì)C對照品溶液的HPLC圖。
[0031]圖4為本發(fā)明檢測條件下雜質(zhì)A、雜質(zhì)B、雜質(zhì)C混合溶液的HPLC圖。
[0032]圖5為本發(fā)明檢測條件下替格瑞洛供試品溶液的HPLC圖。
[0033]圖6為本發(fā)明檢測條件下替格瑞洛和雜質(zhì)A、雜質(zhì)B、雜質(zhì)C混合溶液的HPLC圖。
[0034]圖7為對比試驗1色譜條件下雜質(zhì)A對照品溶液的HPLC圖。
[0035]圖8為對比試驗1色譜條件下雜質(zhì)B對照品溶液的HPLC圖。
[0036]圖9為對比試驗1色譜條件下雜質(zhì)C對照品溶液的HPLC圖。
[0037]圖10為對比試驗1色譜條件下替格瑞洛供試品溶液的HPLC圖 [