] 可用于測(cè)定神經(jīng)降壓素原或其片段的水平的結(jié)合劑展現(xiàn)的與神經(jīng)降壓素原的 親和常數(shù)為至少K^M-1，優(yōu)選KfM-1，優(yōu)選親和常數(shù)大于K^M- 1，最優(yōu)選大于KrM-1。本 領(lǐng)域技術(shù)人員了解，可考慮通過(guò)施用較高劑量的化合物來(lái)補(bǔ)償較低的親和力，并且這 一措施不會(huì)導(dǎo)致本發(fā)明超范圍?？墒褂肂iacore法測(cè)定結(jié)合親和力，所述方法在例如 Biaffin, Kassel, Germany (http: //www. biaffin. com/de/)處作為服務(wù)分析提供。根據(jù) 本發(fā)明的方法，用于測(cè)定女性對(duì)象患乳腺癌的風(fēng)險(xiǎn)或診斷女性對(duì)象的乳腺癌的閾值大于 78pmol/l PNT，優(yōu)選100pmol/l，更優(yōu)選150pmol/l。在一個(gè)具體的實(shí)施方案中，所述閾值約 100pm〇l/l。這些閾值與以上提及的校準(zhǔn)方法相關(guān)。P-NT值大于所述閾值意味著對(duì)象具有 增加的患癌癥風(fēng)險(xiǎn)或已患癌癥。
[0099] 在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，為了監(jiān)測(cè)女性對(duì)象患乳腺癌的風(fēng)險(xiǎn)，或?yàn)榱吮O(jiān)測(cè)治 療過(guò)程，實(shí)施所述方法多于一次。在一個(gè)具體的實(shí)施方案中，為了評(píng)估所述女性對(duì)象對(duì)采取 的預(yù)防性和/或治療性措施的反應(yīng)而進(jìn)行所述監(jiān)測(cè)。
[0100] 在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，使用所述方法以將所述女性對(duì)象分級(jí)為風(fēng)險(xiǎn)組。
[0101] 在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，癌癥選自乳腺癌和肺癌。
[0102] 本發(fā)明的主題還為用于測(cè)定樣品中的腦啡肽原和腦啡肽原片段的分析，其包含 與腦啡肽原區(qū)中的兩個(gè)不同區(qū)域即氨基酸133-140仏1^〇^16,5￡0 10勵(lì).22)和氨基酸 152-159 (SDNEEEVS，SEQ ID N0. 23)結(jié)合的兩種結(jié)合劑，其中所述區(qū)域中的每個(gè)包含至少4 或5個(gè)氨基酸。
[0103] 在根據(jù)本發(fā)明的用于測(cè)定樣品中的腦啡肽原或腦啡肽原片段的分析的一個(gè)實(shí) 施方案中，所述分析的分析靈敏度能夠定量健康對(duì)象的腦啡肽原或腦啡肽原片段，并且 <15pmol/，優(yōu)選〈10pmol/l，并且更優(yōu)選 L〈6pmol/L〇
[0104] 在根據(jù)本發(fā)明的用于測(cè)定樣品中的腦啡肽原或腦啡肽原片段的分析的一個(gè)實(shí)施 方案中，所述結(jié)合劑展現(xiàn)的與其結(jié)合伴侶的結(jié)合親和力為至少10 7M'優(yōu)選108M'優(yōu)選地親 和常數(shù)小于i〇9m'最優(yōu)選小于io^t1。本領(lǐng)域技術(shù)人員了解，可考慮通過(guò)施用較高劑量的 化合物來(lái)補(bǔ)償較低的親和力，并且這一措施不會(huì)導(dǎo)致本發(fā)明的超范圍，可按如上所述測(cè)定 結(jié)合親和力。
[0105] 在根據(jù)本發(fā)明的用于測(cè)定樣品中的腦啡肽原或腦啡肽原片段的分析的一個(gè)實(shí) 施方案中，該為三明治型分析，優(yōu)選為全自動(dòng)化的分析。其可為ELISA全自動(dòng)化的或手 動(dòng)的。其可為所謂的P0C檢測(cè)（現(xiàn)場(chǎng)護(hù)理（point-of-care))。自動(dòng)化或全自動(dòng)化的分 析的實(shí)例包括可用于如下體系中一種的分析：Roche Elecsys?、Abbott Architect?、Siemens Centauer?、Brahms ryptor?、Biomerieux Vidas?、Alere Triage?。檢測(cè)形 式的實(shí)例在上文有提供。
[0106] 在根據(jù)本發(fā)明的用于測(cè)定樣品中的腦啡肽原或腦啡肽原片段的分析的一個(gè)實(shí)施 方案中，所述兩種結(jié)合劑中的至少一種被標(biāo)記以被檢測(cè)。標(biāo)記的實(shí)例在上文有提供。
[0107] 在根據(jù)本發(fā)明的用于測(cè)定樣品中的腦啡肽原或腦啡肽原片段的分析的一個(gè)實(shí)施 方案中，所述兩種結(jié)合劑中的至少一種與固相結(jié)合。固相的實(shí)例在上文有提供。
[0108] 在根據(jù)本發(fā)明的用于測(cè)定樣品中的腦啡肽原或腦啡肽原片段的分析的一個(gè)實(shí)施 方案中，所述標(biāo)記選自：化學(xué)發(fā)光標(biāo)記、酶標(biāo)記、熒光標(biāo)記、放射碘標(biāo)記。
[0109] 本發(fā)明的其他方面為試劑盒，其包含根據(jù)本發(fā)明的分析，其中所述分析的組分可 包含在一個(gè)或多個(gè)容器中。 實(shí)施例
[0110] 實(shí)施例1
[0111] 抗體的開(kāi)發(fā)
[0112] 肽
[0113] 合成了肽（JPT Technologies, Berlin, Germany) 〇
[0114] 用于免痔的肽/綴合物:
[0115] 利用用于將肽與牛血清白蛋白（BSA)綴合的另外的N端半胱氨酸氨基合成了用于 免疫的肽（JPT Technologies, Berlin, Germany)。通過(guò)使用硫代 SMCC(Perbio_science，Bo nn, Germany)將肽與BSA共價(jià)連接。根據(jù)Perbio手冊(cè)進(jìn)行偶聯(lián)方案。
[0116] 表1:
[0117]
[0118]
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 預(yù)測(cè)未患癌癥的女性對(duì)象患癌癥的風(fēng)險(xiǎn)或診斷女性對(duì)象的癌癥的方法，包括： ?測(cè)定獲自所述女性對(duì)象的體液中的腦啡肽原或其具有至少5個(gè)氨基酸的片段的水 平；以及 ?將所述腦啡肽原或其片段的水平與患癌癥的風(fēng)險(xiǎn)相關(guān)聯(lián)，其中降低的水平預(yù)測(cè)增加 的患癌癥風(fēng)險(xiǎn)，或者診斷癌癥，其中降低的水平與癌癥的診斷相關(guān)。
2. 如權(quán)利要求1所述的方法，其中所述癌癥為乳腺癌或肺癌。
3. 如權(quán)利要求1-2中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述女性對(duì)象在從所述女性對(duì)象采集所 述體液樣品時(shí)從未有過(guò)癌癥診斷史。
4. 如權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述女性對(duì)象有過(guò)癌癥診斷史并且在從 所述女性對(duì)象采集所述體液樣品時(shí)已被治愈，并且確定了患乳腺癌的復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)，或者診斷 了乳腺癌的復(fù)發(fā)。
5. 如權(quán)利要求1-4中任一項(xiàng)所述的方法，其中在從所述女性對(duì)象采集體液樣品時(shí)，所 述女性對(duì)象已被診斷為患有心血管疾病或糖尿病。
6. 如權(quán)利要求1-5中任一項(xiàng)所述的方法，其中另外確定了選自以下的至少一項(xiàng)臨床參 數(shù)：年齡、存在糖尿病、當(dāng)前在抽煙。
7. 如前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的方法，其中利用免疫分析測(cè)量腦啡肽原的水平。
8. 如權(quán)利要求1-7中任一項(xiàng)所述的方法，其中為了監(jiān)測(cè)女性對(duì)象患乳腺癌的風(fēng)險(xiǎn)或?yàn)?了監(jiān)測(cè)治療過(guò)程，實(shí)施所述方法多于一次。
9. 如權(quán)利要求8所述的方法，其中為了評(píng)估所述女性對(duì)象對(duì)采取的預(yù)防性和/或治療 性措施的反應(yīng)而進(jìn)行所述監(jiān)測(cè)。
10. 如權(quán)利要求1-9中任一項(xiàng)所述的方法，其用于將所述女性對(duì)象分級(jí)為風(fēng)險(xiǎn)組。
11. 如權(quán)利要求1-10中任一項(xiàng)所述的方法，其中包括如下步驟： ?測(cè)定獲自所述女性對(duì)象的體液中的神經(jīng)降壓素原或其具有至少5個(gè)氨基酸的片段的 水平；以及 ?將所述腦啡肽原或其片段和神經(jīng)降壓素原或其具有至少5個(gè)氨基酸的片段的水平與 患癌癥的風(fēng)險(xiǎn)相關(guān)聯(lián)，其中腦啡肽原的降低的水平預(yù)測(cè)增加的患癌癥風(fēng)險(xiǎn)，或者診斷癌癥， 其中降低的水平與癌癥的診斷相關(guān)，并且其中增加的神經(jīng)降壓素原的水平預(yù)測(cè)增加的患癌 癥風(fēng)險(xiǎn)，或者診斷癌癥，其中增加的水平與癌癥的診斷相關(guān)。
12. 如權(quán)利要求1-11中任一項(xiàng)所述的方法，其中降低的腦啡肽原或其片段的水平為低 于閾值的水平，其中所述閾值小于IOOpmoI/1。
13. 如權(quán)利要求11和12所述的方法，其中增加的神經(jīng)降壓素原或其片段的水平為高于 閾值的水平，其中所述閾值大于78pmol/l。
14. 如權(quán)利要求1-13中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述體液為血液、或血漿、或血清。
15. 如權(quán)利要求1-14中任一項(xiàng)所述的方法，其中測(cè)定了MR-腦啡肽原（SEQIDNo. 6) 和/或神經(jīng)降壓素原1-117(SEQIDNo. 17)的水平。
16. 用于進(jìn)行權(quán)利要求1-15中任一項(xiàng)所述的方法的現(xiàn)場(chǎng)護(hù)理裝置。
17. 用于測(cè)定樣品中的腦啡肽原和腦啡肽原片段的試劑盒，其包含與腦啡肽 原區(qū)中的兩個(gè)不同區(qū)域即氨基酸133-140 (LKELLETG，SEQIDNO. 22)和氨基酸 152-159 (SDNEEEVS，SEQIDNO. 23)結(jié)合的兩種結(jié)合劑，其中所述區(qū)域中的每一個(gè)包含至少 4或5個(gè)氨基酸。
18. 如權(quán)利要求17所述的試劑盒，其中所述試劑盒對(duì)于定量健康對(duì)象的腦啡肽原或腦 啡肽原片段足夠靈敏，并且具有<15pmol/L的分析測(cè)定靈敏度。
19. 如權(quán)利要求17或18中任一項(xiàng)所述的試劑盒用于預(yù)測(cè)未患癌癥的女性對(duì)象患癌癥 的風(fēng)險(xiǎn)或者診斷女性對(duì)象的癌癥，和/或用于將所述女性對(duì)象分級(jí)為風(fēng)險(xiǎn)組的用途。
20. 如權(quán)利要求17或18中任一項(xiàng)所述的試劑盒用于預(yù)測(cè)未患癌癥的女性對(duì)象患癌癥 的風(fēng)險(xiǎn)或者診斷女性對(duì)象的癌癥，和/或用于所述女性對(duì)象分級(jí)為應(yīng)當(dāng)接受阿片生長(zhǎng)因子 (OGF)治療的組的用途。
20.如權(quán)利要求17或18所述的試劑盒，其中所述腦啡肽原和腦啡肽原片段的水平被用 于預(yù)測(cè)未患癌癥的女性對(duì)象患癌癥的風(fēng)險(xiǎn)或者診斷女性對(duì)象的癌癥。
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明的主題為預(yù)測(cè)未患癌癥的女性對(duì)象患癌癥的風(fēng)險(xiǎn)或診斷女性對(duì)象的癌癥的方法，包括：測(cè)定獲自所述女性對(duì)象的體液中的腦啡肽原或其具有至少5個(gè)氨基酸的片段(包括Leu-腦啡肽和Met-腦啡肽)的水平；以及·將所述腦啡肽原或其片段的水平與患癌癥風(fēng)險(xiǎn)相關(guān)聯(lián)，其中降低的水平預(yù)測(cè)增加的患癌癥風(fēng)險(xiǎn)，或者診斷癌癥，其中降低的水平與癌癥的診斷相關(guān)。
【IPC分類(lèi)】G01N33-574
【公開(kāi)號(hào)】CN104781672
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201380051613
【發(fā)明人】安德里亞斯·伯格曼, 歐勒·梅蘭德
【申請(qǐng)人】斯弗因高泰克有限公司
【公開(kāi)日】2015年7月15日
【申請(qǐng)日】2013年10月1日
【公告號(hào)】CA2886814A1, EP2904398A1, US20150268240, WO2014053502A1