基于膜結(jié)構(gòu)的血型檢測方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種血型判定檢測技術(shù)，特別是一種基于膜結(jié)構(gòu)的血型檢測方法。
【背景技術(shù)】
[0002]血型檢驗已廣泛應(yīng)用于各級醫(yī)療機構(gòu)，其中ABO血型系統(tǒng)和抗Rh(D)的檢測已經(jīng)作為常規(guī)檢測。通常用IgM類型的抗A，抗B和抗D試劑分別和紅細胞反應(yīng)，根據(jù)是否形成凝聚反應(yīng)來給紅細胞分型。A型紅細胞表面有A抗原,會和抗A抗體發(fā)生凝聚反應(yīng)。B型紅細胞表面有B抗原，會和抗B抗體發(fā)生凝聚反應(yīng)。根據(jù)這兩個反應(yīng)的結(jié)果可以給紅細胞的ABO血型系統(tǒng)分型。用抗D試劑確定Rh (D)陽性和陰性。其它血型系統(tǒng)的檢測也在醫(yī)療機構(gòu)中有應(yīng)用。如Rh系統(tǒng)的DCcEe分型，麗系統(tǒng)，duffy和lewis系統(tǒng)的檢測等。
[0003]目前臨床檢測中用平板法和柱凝集技術(shù)最多。平板法缺乏客觀判斷的依舊，有時容易造成錯誤判斷。柱凝集法結(jié)果客觀，易于標準化，目前在逐漸替代前者。柱凝集法需要用到離心機，耗時長，限制了在緊急狀況下的應(yīng)用。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明的目的是為了解決上述問題，設(shè)計了一種基于膜結(jié)構(gòu)的血型檢測方法。
[0005]實現(xiàn)上述目的本發(fā)明的技術(shù)方案為，一種基于膜結(jié)構(gòu)的血型檢測方法，該方法選用能夠允許單個紅細胞通過的濾膜作為核心材料，將血型抗體結(jié)合到濾膜上，濾膜的周邊包圍有吸水材料，檢測時將一定濃度的紅細胞滴加在濾膜表面，再用沖洗液沖洗，未發(fā)生抗原抗體結(jié)合的紅細胞將會隨沖洗液液體滲出，而發(fā)生抗原抗體結(jié)合的紅細胞則會留在膜表面形成肉眼可見的紅色團塊，操作人員可依據(jù)紅細胞是否在濾膜形成肉眼可見的紅色團塊來判斷結(jié)果，確定紅細胞的血型。
[0006]所述該方法選用能夠允許單個紅細胞通過的濾膜作為核心材料，而濾膜材質(zhì)可以是玻璃纖維膜或硝酸纖維膜或硅酸鹽顆粒等能夠形成特定連續(xù)液流通道的固體，且濾膜的內(nèi)徑在2-20微米之間。
[0007]所述濾膜的周邊包圍有吸水材料，濾膜的形狀為方形或者圓形，吸水材料包圍濾膜的方式為全部包圍或者部分包圍。
[0008]所述血型抗體結(jié)合到濾膜上，血型抗體結(jié)合到濾膜上的方法為物理吸附法或者化學交聯(lián)法。
[0009]所述檢測時將一定濃度的紅細胞滴加在濾膜表面，其中一定濃度的紅細胞為全血或者不同濃度的紅細胞懸液。而制備紅細胞懸液的液體可以是生理鹽水或其它等滲溶液，也可以是紅細胞保存液。
[0010]該方法還包括檢測試劑盒，檢測試劑盒內(nèi)設(shè)有能夠允許單個紅細胞通過的濾膜，將血型抗體結(jié)合到濾膜上，濾膜下面墊有吸水墊，吸水墊的面積要大于濾膜，且濾膜和吸水墊都通過檢測試劑盒內(nèi)的塑料固體結(jié)構(gòu)來做固定和支撐；
[0011]檢測時將一定濃度的紅細胞滴加到檢測試劑盒內(nèi)結(jié)合了血型抗體的濾膜表面，隨后將沖洗液滴加到同一濾膜表面上，沖洗液將未發(fā)生抗原抗體結(jié)合的紅細胞從反應(yīng)區(qū)沖洗掉。而發(fā)生抗原抗體結(jié)合的紅細胞則截留在濾膜表面形成肉眼可見的紅色團塊。
[0012]所述沖洗液為生理鹽水。
[0013]利用本發(fā)明的技術(shù)方案制作的基于膜結(jié)構(gòu)的血型檢測方法，具有無需特殊設(shè)備，檢測時間短，結(jié)果客觀等優(yōu)勢，具有較好的臨床推廣價值。
【附圖說明】
[0014]圖1是本發(fā)明所述基于膜結(jié)構(gòu)的血型檢測方法的實施例1的結(jié)構(gòu)示意圖；
[0015]圖中，1、試劑盒底板；2、濾膜；3、吸水墊；4、帶有抗原或抗體的濾膜區(qū)域。
[0016]圖2是本發(fā)明所述基于膜結(jié)構(gòu)的血型檢測方法的實施例2的結(jié)構(gòu)示意圖；
[0017]圖中，1、濾膜；2、吸水墊。
[0018]圖3是本發(fā)明所述基于膜結(jié)構(gòu)的血型檢測方法的實施例3的結(jié)構(gòu)示意圖；
[0019]圖中，1、試劑盒底板；2、帶有ABD抗體的濾膜；3、吸水墊。
[0020]圖4是本發(fā)明所述基于膜結(jié)構(gòu)的血型檢測方法的實施例4的兩種結(jié)構(gòu)示意圖；
[0021]圖中，1、試劑盒底板；2、帶有抗人球蛋白的濾膜；3、吸水墊。
[0022]圖5是本發(fā)明所述基于膜結(jié)構(gòu)的血型檢測方法的實施例5的結(jié)構(gòu)示意圖；
[0023]圖中，1、試劑盒底板；2、帶有不同MN抗體的濾膜；3、吸水墊。
[0024]圖6是本發(fā)明所述基于膜結(jié)構(gòu)的血型檢測方法的實施例6的結(jié)構(gòu)示意圖；
[0025]圖中，1、試劑盒底板；2、帶有掛A抗原和掛B抗原的濾膜；3、吸水墊；A為掛A抗原；B為掛B抗原。
【具體實施方式】
[0026]下面結(jié)合附圖對本發(fā)明的進行具體描述，一種基于膜結(jié)構(gòu)的血型檢測方法，該方法選用能夠允許單個紅細胞通過的濾膜作為核心材料，將血型抗體結(jié)合到濾膜上，濾膜的周邊包圍有吸水材料，檢測時將一定濃度的紅細胞滴加在濾膜表面，再用沖洗液沖洗，未發(fā)生抗原抗體結(jié)合的紅細胞將會隨沖洗液液體滲出，而發(fā)生抗原抗體結(jié)合的紅細胞則會留在膜表面形成肉眼可見的紅色團塊，操作人員可依據(jù)紅細胞是否在濾膜形成肉眼可見的紅色團塊來判斷結(jié)果，確定紅細胞的血型。其中，所述該方法選用能夠允許單個紅細胞通過的濾膜作為核心材料，而濾膜材質(zhì)可以是玻璃纖維膜或硝酸纖維膜或硅酸鹽顆粒等能夠形成特定連續(xù)液流通道的固體，且濾膜的內(nèi)徑在2-20微米之間；所述濾膜的周邊包圍有吸水材料，濾膜的形狀為方形或者圓形，吸水材料包圍濾膜的方式為全部包圍或者部分包圍；所述血型抗體結(jié)合到濾膜上，血型抗體結(jié)合到濾膜上的方法為物理吸附法或者化學交聯(lián)法；所述檢測時將一定濃度的紅細胞滴加在濾膜表面，其中一定濃度的紅細胞為全血或者不同濃度的紅細胞懸液。而制備紅細胞懸液的液體可以是生理鹽水或其它等滲溶液，也可以是紅細胞保存液；該方法還包括檢測試劑盒，檢測試劑盒內(nèi)設(shè)有能夠允許單個紅細胞通過的濾膜，將血型抗體結(jié)合到濾膜上，濾膜下面墊有吸水墊，吸水墊的面積要大于濾膜，且濾膜和吸水墊都通過檢測試劑盒內(nèi)的塑料固體結(jié)構(gòu)來做固定和支撐；檢測時將一定濃度的紅細胞滴加到檢測試劑盒內(nèi)結(jié)合了血型抗體的濾膜表面，隨后將沖洗液滴加到同一濾膜表面上，沖洗液將未發(fā)生抗原抗體結(jié)合的紅細胞從反應(yīng)區(qū)沖洗掉。而發(fā)生抗原抗體結(jié)合的紅細胞則截留在濾膜表面形成肉眼可見的紅色團塊；所述沖洗液為生理鹽水。
[0027]實施例1
[0028]一種基于膜結(jié)構(gòu)的血型檢測方法，該方法選用能夠允許單個紅細胞通過的濾膜作為核心材料，將血型抗體結(jié)合到濾膜上，濾膜的周邊包圍有吸水材料，檢測時將一定濃度的紅細胞滴加在濾膜表面，再用沖洗液沖洗，未發(fā)生抗原抗體結(jié)合的紅細胞將會隨沖洗液液體滲出，而發(fā)生抗原抗體結(jié)合的紅細胞則會留在膜表面形成肉眼可見的紅色團塊，操作人員可依據(jù)紅細胞是否在濾膜形成肉眼可見的紅色團塊來判斷結(jié)果，確定紅細胞的血型。其中，所述該方法選用能夠允許單個紅細胞通過的濾膜作為核心材料，而濾膜材質(zhì)可以是玻璃纖維膜或硝酸纖維膜或硅酸鹽顆粒等能夠形成特定連續(xù)液流通道的固體，且濾膜的內(nèi)徑在2-20微米之間；所述濾膜的周邊包圍有吸水材料，濾膜的形狀可以為方形或者圓形，吸水材料包圍濾膜的方式為全部包圍或者部分包圍；所述血型抗體結(jié)合到濾膜上，血型抗體結(jié)合到濾膜上的方法為物理吸附法或者化學交聯(lián)法；所述檢測時將一定濃度的紅細胞滴加在濾膜表面，其中一定濃度的紅細胞為全血或者不同濃度的紅細胞懸液。而制備紅細胞懸液的液體可以是生理鹽水或其它等滲溶液，也可以是紅細胞保存液；該方法還包括檢測試劑盒，檢測試劑盒內(nèi)設(shè)有能夠允許單個紅細胞通過的濾膜，將血型抗體結(jié)合到濾膜上，濾膜下面墊有吸水墊，吸水墊的面積要大于濾膜，吸水墊的寬度與濾膜相同，但是長度要大于濾膜，如圖1所示，且濾膜和吸水墊都通過檢測試劑盒內(nèi)的塑料固體結(jié)構(gòu)來做固定和支撐；檢測時將一定濃度的紅細胞滴加到檢測試劑盒內(nèi)結(jié)合了血型抗體的濾膜表面，隨后將沖洗液滴加到同一濾膜表面上，沖洗液將未發(fā)生抗原抗體結(jié)合的紅細胞從反應(yīng)區(qū)沖洗掉。而發(fā)生抗原抗體結(jié)合的紅細胞則截留在濾膜表面形成肉眼可見的紅色團塊；所述沖洗液為生理鹽水。
[0029]實施例2
[0030]該方法還包括檢測試劑盒，檢測試劑盒內(nèi)設(shè)有能夠允許單個紅細胞通過的濾膜，將血型抗體結(jié)合到濾膜上，濾膜下面墊有吸水墊，吸水墊的面積要大于濾膜，吸水墊的長度和寬度都大于濾膜，即濾膜位于吸水墊的中心區(qū)域，如圖2所示，其他與實施例1相同。
[0031]實施例3
[0032]ABO及Rh (D)血型檢測試劑盒，選取玻璃纖維膜為濾膜；
[0033]I在玻璃纖維膜上固定血型抗體(抗A、抗B、抗D)
[0034]血型抗體固定:取高效價的血型單克隆抗體(抗A、抗B、抗D)，以加入抗體保護劑。抗體保護劑可以是含5 %牛血清白蛋白、5 %蔗糖、5 % PVP、5 %的小牛血清的5mM磷酸鹽緩沖液(PH7.4)。抗體保護液能夠輔助抗體固定在玻璃纖維膜上，并且增強抗體的有效期。用抗體保護液的作為稀釋液，稀釋抗體，使其終效價為128。將150 μ L的稀釋后的抗體滴加到1.5cmX 1.5cm玻璃纖維膜的中心，讓抗體呈圓形在玻璃纖維膜上鋪展，然后37°C烘干處理并密封保存。
[0035]2快速檢測試劑條的組裝:
[0036]在一帶有4個個孔(孔徑為0.5cm)的方形的塑料板背部貼上帶有4片抗體的
1.5cmX 1.5cm玻璃纖維膜，使塑料版上的孔與玻璃纖維膜上的抗體中心對映。然后將
2.5cm寬的吸水紙貼在玻璃纖維膜的周邊(如圖3A)所示。玻璃纖維膜和吸水紙都是使用防水膠黏貼在聚酯版上，防止加樣和沖洗過程玻璃纖維膜和吸水紙脫落或串位置，最后扣上后蓋。
[0037]組裝后ABO及Rh (D)血型檢測試劑盒如圖1所示，其中加樣孔I為抗A抗體，加樣孔II為抗B抗體，加樣孔