本發(fā)明涉及生物化學(xué)和環(huán)境科學(xué)，具體是涉及一種厭氧發(fā)酵液中檢測新碳源正丙醇的方法。

背景技術(shù)：

1、現(xiàn)階段污水生物過程由于原水中碳源不能滿足反硝化脫氮要求，需添加碳源，碳源的來源主要可分為內(nèi)源碳源和外源碳源，內(nèi)源碳源來源于微生物在自身代謝過程中產(chǎn)生的可生物降解的溶解性物質(zhì)，傳統(tǒng)外部碳源主要以甲醇、乙酸鈉和葡萄糖等簡單有機(jī)物為主，由于簡單有機(jī)物分子量低，在作為反硝化碳源時代謝途徑相對簡單，更容易被反硝化相關(guān)微生物利用，進(jìn)而擁有相對較高的反硝化速率。

2、根據(jù)已有碳源研究成果，新型碳源主要有固體有機(jī)碳源、高濃度有機(jī)廢水和厭氧發(fā)酵產(chǎn)物，餐廚垃圾厭氧發(fā)酵制備碳源成本低，截至目前，尚未在餐廚垃圾厭氧發(fā)酵液中發(fā)現(xiàn)存在正丙醇，尚未有固定標(biāo)準(zhǔn)化檢測方法和檢測標(biāo)準(zhǔn)方法作為指引，對此，我們提出了一種厭氧發(fā)酵液中檢測新碳源正丙醇的方法。

技術(shù)實現(xiàn)思路

1、為解決上述技術(shù)問題，提供一種厭氧發(fā)酵液中檢測新碳源正丙醇的方法，本技術(shù)方案解決了上述的問題。

2、為達(dá)到以上目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案為：

3、一種厭氧發(fā)酵液中檢測新碳源正丙醇的方法，檢測發(fā)酵液中新碳源正丙醇的方法為：

4、檢查并確保檢測儀器經(jīng)過維護(hù)已達(dá)到最佳狀態(tài)；

5、按標(biāo)準(zhǔn)點(diǎn)50mg/l、100mg/l、200mg/l、400mg/l、800mg/l、1000mg/l配置正丙醇標(biāo)準(zhǔn)液；

6、使用氣相色譜儀對每個濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行進(jìn)樣檢測，記錄每個濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液的峰面積，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線；

7、獲取厭氧發(fā)酵反應(yīng)器的發(fā)酵液經(jīng)10000r/min高速離心10min，過0.22μm膜得到濾液，將濾液稀釋20倍裝進(jìn)樣品瓶；

8、使用氣相色譜儀對稀釋液進(jìn)行進(jìn)樣檢測，記錄稀釋液的峰面積，繪制稀釋液曲線；

9、將標(biāo)準(zhǔn)曲線與稀釋液曲線進(jìn)行比對，檢測出發(fā)酵液中含有新碳源正丙醇。

10、優(yōu)選地，檢測儀器包括：氣相色譜儀、氫火焰離子化檢測器、db-fatwax?ui色譜柱、空氣發(fā)生器和氫氣發(fā)生器。

11、優(yōu)選地，檢測儀器維護(hù)方法為：

12、根據(jù)目標(biāo)物峰形、分離度、峰形基線的情況和以襯管使用次數(shù)作為量化指標(biāo)評估儀器維護(hù)內(nèi)容；

13、若襯管使用次數(shù)大于220次，更換襯管和隔墊，分別使用甲醇和水，清洗進(jìn)樣針、超聲針底座、清洗瓶以及廢液瓶。

14、若襯管使用次數(shù)低于220次，每次進(jìn)樣結(jié)束后，分別使用甲醇和水，清洗進(jìn)樣針、超聲針底座、清洗瓶以及廢液瓶。

15、若出現(xiàn)間斷進(jìn)樣的情況，清洗進(jìn)樣針或更換進(jìn)樣針；

16、若峰形出現(xiàn)鬼峰、分離度較差和基線噪音大時，清洗分流平板和切割色譜柱或通過增大稀釋倍數(shù)較少基質(zhì)干擾，增加數(shù)據(jù)準(zhǔn)確性；

17、若點(diǎn)火信號達(dá)到幾十萬pa且吹掃無效時，清潔檢測器的收集極、噴嘴和陶瓷片。

18、優(yōu)選地，配置正丙醇標(biāo)準(zhǔn)液的方法為：

19、準(zhǔn)備純凈的正丙醇標(biāo)準(zhǔn)品，準(zhǔn)備去離子水作為稀釋液，準(zhǔn)備清潔過的容量瓶和移液器；

20、使用移液器取正丙醇標(biāo)準(zhǔn)品，分別加入6個容量瓶中，采用倍比稀釋法用稀釋液稀釋，稀釋濃度分別為50mg/l、100mg/l、200mg/l、400mg/l、800mg/l和1000mg/l的標(biāo)準(zhǔn)溶液。

21、優(yōu)選地，氣相色譜儀檢測條件為：設(shè)置進(jìn)樣口溫度為280℃，檢測器溫度為300℃，分流裝置的分流比為10:1，組分的進(jìn)樣量在0.5μl，溫度控制系統(tǒng)中柱箱升溫程序設(shè)定為初始溫度100℃保持2min，以10℃速率升至200℃保持10min。

22、優(yōu)選地，標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制步驟為：

23、以正丙醇的濃度為x軸，對應(yīng)的峰面積為y軸，繪制散點(diǎn)圖；

24、使用線性回歸擬合散點(diǎn)，得到標(biāo)準(zhǔn)曲線方程，方程計算公式為：

25、

26、式中，y表示峰面積，a表示斜率，x表示正丙醇濃度，b表示截距。

27、優(yōu)選地，進(jìn)行正丙醇標(biāo)準(zhǔn)溶液標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制，曲線相關(guān)系數(shù)大于0.999，標(biāo)液精密度為2%以內(nèi)，標(biāo)液準(zhǔn)確回收率100%左右；

28、優(yōu)選地，樣品精準(zhǔn)度控制范圍要求為：

29、襯管使用次數(shù)100次以內(nèi)，樣品誤差范圍在5%以內(nèi)；

30、襯管使用次數(shù)100—150次，樣品誤差范圍在5%-10%以內(nèi)；

31、襯管使用次數(shù)150—220次，樣品誤差范圍在10%-20%以內(nèi)。

32、優(yōu)選地，發(fā)酵液樣品進(jìn)樣檢測時，需在樣品間穿插一針空白檢測，并經(jīng)過三個平行數(shù)據(jù)。

33、優(yōu)選地，在繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線時引入內(nèi)標(biāo)物，將內(nèi)標(biāo)物與正丙醇標(biāo)準(zhǔn)溶液混合后進(jìn)行檢測，以內(nèi)標(biāo)物的峰面積作為參照，對正丙醇的峰面積進(jìn)行校正。

34、與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果在于：

35、本發(fā)明提出一種厭氧發(fā)酵液中檢測新碳源正丙醇的方法，通過毛細(xì)管氣相色譜法，檢測出餐廚垃圾厭氧發(fā)酵液中存在正丙醇，現(xiàn)有文獻(xiàn)資料未發(fā)現(xiàn)厭氧發(fā)酵液正丙醇作為碳源的相關(guān)研究內(nèi)容，該檢測方法證得正丙醇可作為餐廚垃圾、廚余垃圾厭氧發(fā)酵的新碳源，并制定了一套檢測標(biāo)準(zhǔn)化流程，也可用于厭氧發(fā)酵液中揮發(fā)性脂肪酸檢測。

技術(shù)特征：

1.一種厭氧發(fā)酵液中檢測新碳源正丙醇的方法，其特征在于，檢測發(fā)酵液中新碳源正丙醇的方法為：

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的厭氧發(fā)酵液中檢測新碳源正丙醇的方法，其特征在于，檢測儀器包括：氣相色譜儀、氫火焰離子化檢測器、db-fatwax?ui色譜柱、空氣發(fā)生器和氫氣發(fā)生器。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的厭氧發(fā)酵液中檢測新碳源正丙醇的方法，其特征在于，檢測儀器維護(hù)方法為：

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的厭氧發(fā)酵液中檢測新碳源正丙醇的方法，其特征在于，配置正丙醇標(biāo)準(zhǔn)液的方法為：

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的厭氧發(fā)酵液中檢測新碳源正丙醇的方法，其特征在于，氣相色譜儀檢測條件為：設(shè)置進(jìn)樣口溫度為280℃，檢測器溫度為300℃，分流裝置的分流比為10:1，組分的進(jìn)樣量在0.5μl，溫度控制系統(tǒng)中柱箱升溫程序設(shè)定為初始溫度100℃保持2min，以10℃速率升至200℃保持10min。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的厭氧發(fā)酵液中檢測新碳源正丙醇的方法，其特征在于，標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制步驟為：

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的厭氧發(fā)酵液中檢測新碳源正丙醇的方法，其特征在于：進(jìn)行正丙醇標(biāo)準(zhǔn)溶液標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制，曲線相關(guān)系數(shù)大于0.999，標(biāo)液精密度為2%以內(nèi)，標(biāo)液準(zhǔn)確回收率100%左右。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的厭氧發(fā)酵液中檢測新碳源正丙醇的方法，其特征在于，樣品精準(zhǔn)度控制范圍要求為：

9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的厭氧發(fā)酵液中檢測新碳源正丙醇的方法，其特征在于：發(fā)酵液樣品進(jìn)樣檢測時，需在樣品間穿插一針空白檢測，并經(jīng)過三個平行數(shù)據(jù)。

10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的厭氧發(fā)酵液中檢測新碳源正丙醇的方法，其特征在于：在繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線時引入內(nèi)標(biāo)物，將內(nèi)標(biāo)物與正丙醇標(biāo)準(zhǔn)溶液混合后進(jìn)行檢測，以內(nèi)標(biāo)物的峰面積作為參照，對正丙醇的峰面積進(jìn)行校正。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開了一種厭氧發(fā)酵液中檢測新碳源正丙醇的方法，涉及生物化學(xué)和環(huán)境科學(xué)技術(shù)領(lǐng)域，檢測發(fā)酵液中新碳源正丙醇的方法為：檢查并確保檢測儀器經(jīng)過維護(hù)已達(dá)到最佳狀態(tài)；按標(biāo)準(zhǔn)點(diǎn)50mg/l、100mg/l、200mg/l、400mg/l、800mg/l、1000mg/l配置正丙醇標(biāo)準(zhǔn)液；使用氣相色譜儀對每個濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行進(jìn)樣檢測，記錄每個濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液的峰面積，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。本發(fā)明通過毛細(xì)管氣相色譜法，檢測出餐廚垃圾厭氧發(fā)酵液中存在正丙醇，現(xiàn)有文獻(xiàn)資料未發(fā)現(xiàn)厭氧發(fā)酵液正丙醇作為碳源的相關(guān)研究內(nèi)容，該檢測方法證得正丙醇可作為餐廚垃圾、廚余垃圾厭氧發(fā)酵的新碳源，并制定了一套檢測標(biāo)準(zhǔn)化流程，也可用于厭氧發(fā)酵液中揮發(fā)性脂肪酸檢測。

技術(shù)研發(fā)人員：陳銀娣,伍青霞,伍漢堅,黃玉茂,冼威澄,劉勇勁
受保護(hù)的技術(shù)使用者：廣東瀚正檢測科技有限公司
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2024/12/30