本發(fā)明涉及分析測試，尤其涉及一種螺旋霉素在分析多種膽汁酸同分異構(gòu)體中的應(yīng)用及其分析方法。

背景技術(shù)：

1、膽汁酸是一種重要的生物分子，在動物體內(nèi)擔(dān)負(fù)著重要的生物功能，特別是消化功能等。研究表明，體內(nèi)膽汁酸的種類有多種，如同分異構(gòu)體等，每一種或每一個同分異構(gòu)體的含量都不相同。體內(nèi)膽汁酸的含量或種類的變化不僅可能引起某些疾病，而且一些疾病也可能引起膽汁酸含量或種類的變化。由于膽汁酸的重要生物功能，某些膽汁酸也成為治療某些疾病的藥物，如熊膽粉和豬膽粉即為常見的藥物。因此，準(zhǔn)確分析膽汁酸的種類，化學(xué)結(jié)構(gòu)和含量，對生命科學(xué)，制藥等方面都具有重要意義。

2、分子的同分異構(gòu)體是指分子的化學(xué)分子式相同但化學(xué)結(jié)構(gòu)不同的一類分子，如圖1(a，b，c)給出的膽汁酸的同分異構(gòu)體，它們的化學(xué)分子式都是c28h43no6，以及圖1(d，e)它們的化學(xué)分子式都是c26h45no6s，但不同異構(gòu)體的化學(xué)結(jié)構(gòu)卻有明顯的差別。由于分子的化學(xué)性質(zhì)，物理性質(zhì)以及生物功能等與分子的結(jié)構(gòu)十分相關(guān)，搞清楚一個的分子結(jié)構(gòu)也十分重要。在過去的一百多年里，分子的結(jié)構(gòu)分析一直是科學(xué)家們工作的目標(biāo)之一，產(chǎn)生了各種分析分子結(jié)構(gòu)的科學(xué)方法，如光譜、質(zhì)譜、核磁共振等。分子同分異構(gòu)體的結(jié)構(gòu)分析是分子結(jié)構(gòu)分析的難點之一，這是因為同分異構(gòu)體的分子具有完全相同的分子質(zhì)量，因此無法用質(zhì)譜方法直接分析，有的同分異構(gòu)體由于結(jié)構(gòu)差異非常小，如手性異構(gòu)體，一般的光譜和核磁共振也無法區(qū)分。由于不同異構(gòu)體分子在生命科學(xué)，制藥，化工等領(lǐng)域的廣泛存在，對不同異構(gòu)體分子結(jié)構(gòu)的準(zhǔn)確、快速和高靈敏識別一直是分析測試領(lǐng)域內(nèi)大家感興趣的方向之一。

技術(shù)實現(xiàn)思路

1、本發(fā)明的目的是針對現(xiàn)有技術(shù)中的不足，提供一種螺旋霉素在分析多種膽汁酸同分異構(gòu)體中的應(yīng)用及其分析方法。

2、為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采取的技術(shù)方案是：

3、本發(fā)明的第一方面是提供一種多種膽汁酸同分異構(gòu)體的分析方法，步驟包括：

4、s1、將待測樣品與螺旋霉素溶液混合，待測樣品中的膽汁酸與螺旋霉素非共價結(jié)合，制得混合溶液；

5、s2、采用離子化裝置處理混合溶液，產(chǎn)生氣相復(fù)合物離子；

6、s3、采用離子遷移譜分析裝置分析氣相復(fù)合物離子的離子遷移譜，獲得對應(yīng)于不同同分異構(gòu)體膽汁酸的離子遷移譜或離子碰撞截面，區(qū)分膽汁酸的同分異構(gòu)體。

7、優(yōu)選地，步驟s1中，螺旋霉素溶液的溶劑包括：甲醇以及甲酸水。

8、優(yōu)選地，步驟s1中，待測樣品中的膽汁酸包括：glycochenodeoxycholic?acid、glycoursodeoxycholic?acid、glycohyodeoxycholic?acid、taurochenodeoxycholicacid、tauroursodeoxycholic?acid。

9、優(yōu)選地，步驟s2中，離子化裝置包括：電噴霧電離離子化源、激光輔助的脫附電離離子源、解吸電噴霧電離離子源。

10、優(yōu)選地，步驟s2中，氣相復(fù)合物離子包括：膽汁酸分子和螺旋霉素分子的帶正電荷的離子、膽汁酸分子和螺旋霉素分子的帶負(fù)電荷的離子。

11、更優(yōu)選地，步驟s2中，氣相復(fù)合物離子包括：[tcdca/tudca+spm+h]+、[gudca/gcdca/ghdca+spm+h]+、[2gudca/gcdca/ghdca+spm+h]+、[2gcdca+spm+h]+、[2gudca+spm+h]+、[2ghdca+spm+h]+、[tcdca/tudca+spm-h]-、[gudca/gcdca/ghdca+spm-h]-、[2gudca/gcdca/ghdca+spm-h]-。

12、更優(yōu)選地，步驟s2中，氣相復(fù)合物離子還包括金屬離子；金屬離子包括：li+、na+、k+、rb+、ca2+、ni2+、sr2+、cu2+。

13、優(yōu)選地，步驟還包括：

14、s4、繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線后，對照標(biāo)準(zhǔn)曲線，讀取待測樣品中不同膽汁酸的含量。

15、更優(yōu)選地，標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制步驟包括：配制包含各種膽汁酸濃度與一定濃度螺旋霉素的標(biāo)準(zhǔn)溶液，測量不同膽汁酸樣品濃度下膽汁酸復(fù)合物的離子遷移譜譜峰強(qiáng)度，獲得每種異構(gòu)體的膽汁酸濃度與對應(yīng)的復(fù)合物離子遷移譜信號強(qiáng)度的關(guān)系，即得用于定量分析的標(biāo)準(zhǔn)曲線。

16、本發(fā)明的第二方面是提供螺旋霉素在分析多種膽汁酸同分異構(gòu)體中的應(yīng)用。

17、本發(fā)明采用以上技術(shù)方案，與現(xiàn)有技術(shù)相比，具有如下技術(shù)效果：

18、本發(fā)明首先將幾種膽汁酸異構(gòu)體與螺旋霉素配制成一定比例的混合溶液，然后利用離子化裝置制備和產(chǎn)生由待分析膽汁酸分子和螺旋霉素的氣相復(fù)合物離子，然后利用離子遷移譜分析裝置測量這些氣相復(fù)合物離子的離子遷移譜；由于包含不同膽汁酸異構(gòu)體的復(fù)合物離子具有不同的碰撞截面，因此可根據(jù)離子遷移的測量結(jié)果獲得樣品中所含有的膽汁酸的同分異構(gòu)體種類，還可以根據(jù)各種膽汁酸異構(gòu)體復(fù)合物的離子遷移譜信號強(qiáng)度獲得它們在混合物樣品中的相對含量；與現(xiàn)有的膽汁酸異構(gòu)體分析方法比，本發(fā)明給出的分析方法簡單，分析結(jié)果準(zhǔn)確，分析速度快，可在臨床醫(yī)學(xué)，生命科學(xué)，制藥、食品和環(huán)境科學(xué)中獲得應(yīng)用。

技術(shù)特征：

1.多種膽汁酸同分異構(gòu)體的分析方法，其特征在于，步驟包括：

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的分析方法，其特征在于，步驟s1中，螺旋霉素溶液的溶劑包括：甲醇以及甲酸水。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的分析方法，其特征在于，步驟s2中，離子化裝置包括：電噴霧電離離子化源、激光輔助的脫附電離離子源、解吸電噴霧電離離子源。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的分析方法，其特征在于，步驟s2中，氣相復(fù)合物離子包括：膽汁酸分子和螺旋霉素分子的帶正電荷的離子、膽汁酸分子和螺旋霉素分子的帶負(fù)電荷的離子。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的分析方法，其特征在于，步驟還包括：

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的分析方法，其特征在于，標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制步驟包括：配制包含各種膽汁酸濃度與一定濃度螺旋霉素的標(biāo)準(zhǔn)溶液，測量不同膽汁酸樣品濃度下膽汁酸復(fù)合物的離子遷移譜譜峰強(qiáng)度，獲得每種異構(gòu)體的膽汁酸濃度與對應(yīng)的復(fù)合物離子遷移譜信號強(qiáng)度的關(guān)系，即得用于定量分析的標(biāo)準(zhǔn)曲線。

7.螺旋霉素在分析多種膽汁酸同分異構(gòu)體中的應(yīng)用。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明涉及分析測試技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種螺旋霉素在分析多種膽汁酸同分異構(gòu)體中的應(yīng)用及其分析方法；本發(fā)明將幾種膽汁酸異構(gòu)體與螺旋霉素配制成一定比例的混合溶液，利用離子化裝置制備和產(chǎn)生由待分析膽汁酸分子和螺旋霉素的氣相復(fù)合物離子，利用離子遷移譜分析裝置測量這些氣相復(fù)合物離子的離子遷移譜；由于包含不同膽汁酸異構(gòu)體的復(fù)合物離子具有不同的碰撞截面，因此可根據(jù)離子遷移的測量結(jié)果獲得樣品中膽汁酸的同分異構(gòu)體種類，還可以根據(jù)各種膽汁酸異構(gòu)體復(fù)合物的離子遷移譜信號強(qiáng)度獲得它們在混合物樣品中的相對含量；本發(fā)明給出的分析方法簡單，分析結(jié)果準(zhǔn)確，分析速度快，可在臨床醫(yī)學(xué)，生命科學(xué)，制藥、食品和環(huán)境科學(xué)中獲得應(yīng)用。

技術(shù)研發(fā)人員：丁傳凡
受保護(hù)的技術(shù)使用者：常州華班亞生物科技有限公司
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2024/12/30