本發(fā)明屬于醫(yī)藥生產(chǎn)技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種維生素b6殘留溶劑的檢測(cè)方法。

背景技術(shù)：

新版gmp對(duì)殘留溶劑有要求，維生素b6出口外貿(mào)客戶對(duì)殘留溶劑要求也比較高，再者，殘留溶劑基本都需要檢測(cè)。我們用的是丹尼hss86.50頂空進(jìn)樣器和gc-2014島津氣相色譜儀。

頂空氣相色譜法是一種聯(lián)合操作技術(shù)，通常采用進(jìn)樣針在一定條件下一定溫度下對(duì)固體、液體、氣體等進(jìn)行萃取吸附，然后在氣相色譜分析儀上進(jìn)行脫附注射。

用待測(cè)組分的純品作對(duì)照物質(zhì)，以對(duì)照物質(zhì)和樣品中待測(cè)組分的響應(yīng)信號(hào)相比較進(jìn)行定量的方法稱為外標(biāo)法；此法可分為工作曲線法及外標(biāo)一點(diǎn)法等；工作曲線法是用對(duì)照物質(zhì)配制一系列濃度的對(duì)照品溶液確定工作曲線，求出斜率、截距；在完全相同的條件下，準(zhǔn)確進(jìn)樣與對(duì)照品溶液相同體積的樣品溶液，根據(jù)待測(cè)組分的信號(hào)，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出其濃度，或用回歸方程計(jì)算，工作曲線法也可以用外標(biāo)二點(diǎn)法代替；通常截距應(yīng)為零，若不等于零說明存在系統(tǒng)誤差；工作曲線的截距為零時(shí)，可用外標(biāo)一點(diǎn)法(直接比較法)定量，外標(biāo)一點(diǎn)法是用一種濃度的對(duì)照品溶液對(duì)比測(cè)定樣品溶液中i組分的含量；將對(duì)照品溶液與樣品溶液在相同條件下多次進(jìn)樣，測(cè)得峰面積的平均值，用下式計(jì)算樣品中i組分的量：

w＝a(w)/(a)

式中w與a分別代表在樣品溶液進(jìn)樣體積中所含i組分的重量及相應(yīng)的峰面積。(w)及(a)分別代表在對(duì)照品溶液進(jìn)樣體積中含純品i組分的重量及相應(yīng)峰面積。外標(biāo)法方法簡便，不需用校正因子，不論樣品中其他組分是否出峰，均可對(duì)待測(cè)組分定量。但此法的準(zhǔn)確性受進(jìn)樣重復(fù)性和實(shí)驗(yàn)條件穩(wěn)定性的影響。此外，為了降低外標(biāo)一點(diǎn)法的實(shí)驗(yàn)誤差，應(yīng)盡量使配制的對(duì)照品溶液的濃度與樣品中組分的濃度相近。

外標(biāo)法是色譜分析中的一種定量方法，它不是把標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)加入到被測(cè)樣品中，而是在與被測(cè)樣品相同的色譜條件下單獨(dú)測(cè)定，把得到的色譜峰面積與被測(cè)組分的色譜峰面積進(jìn)行比較求得被測(cè)組分的含量。外標(biāo)物與被測(cè)組分同為一種物質(zhì)但要求它有一定的純度，分析時(shí)外標(biāo)物的濃度應(yīng)與被測(cè)物濃度相接近，以利于定量分析的準(zhǔn)確性。

gc儀器參數(shù)峰面積：儀器參和方法數(shù)見下面，我們?cè)摲椒ú捎玫氖峭鈽?biāo)法，在計(jì)算時(shí)不用校準(zhǔn)曲線，而校準(zhǔn)曲線是驗(yàn)證該方法可行時(shí)，在驗(yàn)證線性及范圍用到了。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的是針對(duì)現(xiàn)有的技術(shù)存在的上述問題，提供一種維生素b6殘留溶劑的檢測(cè)方法，本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是如何準(zhǔn)確檢測(cè)維生素b6中的殘留溶劑含量。

本發(fā)明的目的可通過下列技術(shù)方案來實(shí)現(xiàn)：一種維生素b6殘留溶劑的檢測(cè)方法，其特征在于，具體方法如下：

本方法需要如下試劑和試液：

乙醇(gc)；二甲基亞砜(gc)；甲苯(gc)；苯(gc)；50％二甲基亞砜水溶液：取50ml二甲基亞砜置于100ml容量瓶中，用水稀釋至刻度，混勻獲得。

進(jìn)行檢測(cè)所需的色譜系統(tǒng)及色譜條件

色譜系統(tǒng)

采用gc主機(jī)，型號(hào)為島津gc-2014，其自動(dòng)頂空進(jìn)樣器的型號(hào)為danihss86.50，其工作站及版本號(hào)為島津gcsolution2.3。

色譜條件

gc的參數(shù)如下：

柱溫：40℃下保持8min，然后以8℃/min的速度升溫至120℃，保持10min；

檢測(cè)器溫度：280℃；進(jìn)樣口溫度：250℃；

載氣為n2；柱流量wei1ml/min；

分流比為100:1；運(yùn)行時(shí)間為28min；

氫氣壓力為55kpa；空氣壓力為45kpa；

色譜柱型號(hào)：sh-rtx-624柱；檢測(cè)器類型為fid；

色譜柱規(guī)格為：30m×0.32mm×1.8μm；

頂空進(jìn)樣器參數(shù)如下：

平衡溫度為90℃；定溫管溫度為95℃；

傳輸線溫度為100℃；頂空瓶振搖方式為無；

頂空瓶平衡時(shí)間為30min；

溶液配制

乙醇儲(chǔ)備液：精密稱取乙醇2.5g至100ml容量瓶中，用50％二甲基亞砜水溶液稀釋至刻度，混勻。

甲苯儲(chǔ)備液：精密稱取苯0.445g至100ml容量瓶中，用50％二甲基亞砜水溶液稀釋至刻度，混勻。

苯儲(chǔ)備液：精密稱取苯100mg至100ml容量瓶中，用50％二甲基亞砜水溶液稀釋至刻度，混勻。精密量取1ml至100ml容量瓶中，用50％二甲基亞砜水溶液稀釋至刻度，混勻。

標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液：精密量取乙醇儲(chǔ)備液10ml、甲苯儲(chǔ)備液10ml、苯儲(chǔ)備液10ml置100ml容量瓶中，用50％二甲基亞砜水溶液稀釋至刻度，混勻。

標(biāo)準(zhǔn)溶液：精密量取標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液10ml置100ml容量瓶中，用50％二甲基亞砜水溶液稀釋至刻度，混勻。即得乙醇250μg/ml、甲苯44.5μg/ml、苯0.1μg/ml。

標(biāo)準(zhǔn)品測(cè)試溶液：精密量取5.0ml標(biāo)準(zhǔn)溶液，置頂空瓶中，密閉，混勻。

供試品溶液：精密稱取0.25g維生素b6樣品，置于頂空瓶中，加50％二甲亞砜5.0ml溶解，密封瓶蓋。

空白溶液：取50％二甲亞砜水溶液5.0ml置頂空瓶中，密封瓶蓋。

系統(tǒng)適用性溶液：移取5.0ml標(biāo)準(zhǔn)溶液，置頂空瓶中，密封瓶蓋，混勻。

系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn)：

系統(tǒng)穩(wěn)定60min以上，進(jìn)樣空白溶液，確認(rèn)圖譜中無其他雜質(zhì)；根據(jù)需要可多進(jìn)幾針空白。

取標(biāo)準(zhǔn)溶液頂空1.0ml，記錄色譜圖，各色譜峰之間的分離度不小于1.5；要求是：重復(fù)進(jìn)樣6次各殘留溶劑對(duì)應(yīng)峰的峰面積rsd應(yīng)不大于10％，理論塔板數(shù)不小于5000。

測(cè)定方法：

分別取標(biāo)準(zhǔn)品測(cè)試溶液、供試品溶液頂空1.0ml，按以下順序進(jìn)樣分析：

空白溶液進(jìn)針后，依次進(jìn)六針系統(tǒng)適應(yīng)性溶液、進(jìn)兩針標(biāo)準(zhǔn)品測(cè)試溶液、進(jìn)一針供試品溶液、再進(jìn)一針供試品溶液、進(jìn)一針標(biāo)準(zhǔn)品測(cè)試溶液，分別記錄色譜圖。

在檢驗(yàn)vb6成品中我們檢驗(yàn)其中可能殘留的溶劑：苯(一類)、甲苯(二類)、乙醇。

采用外標(biāo)法對(duì)上述的色譜圖進(jìn)行分析可得殘留染劑的含量。

與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有以下優(yōu)點(diǎn)：

1、可以看出，本法較傳統(tǒng)外標(biāo)法，在開始進(jìn)針標(biāo)準(zhǔn)品測(cè)試溶液和供試品溶液之間，先將系統(tǒng)穩(wěn)定60min以上，然后進(jìn)樣空白溶液，確認(rèn)圖譜中無其他雜質(zhì)，根據(jù)需要可多進(jìn)幾針空白，能夠確保圖譜的準(zhǔn)確性。

2、進(jìn)針方式為：進(jìn)兩針標(biāo)準(zhǔn)品測(cè)試溶液、進(jìn)一針供試品溶液、再進(jìn)一針供試品溶液、進(jìn)一針標(biāo)準(zhǔn)品測(cè)試溶液，連續(xù)進(jìn)針兩次供試品溶液，確保獲得的圖譜無異常，連續(xù)進(jìn)針能夠最大程度減少外界因素和系統(tǒng)本身因素對(duì)圖譜的影響。

具體實(shí)施方式

以下是本發(fā)明的具體實(shí)施例，對(duì)本發(fā)明的技術(shù)方案作進(jìn)一步的描述，但本發(fā)明并不限于這些實(shí)施例。

本方法需要如下試劑和試液：

乙醇(gc)；二甲基亞砜(gc)；甲苯(gc)；苯(gc)；50％二甲基亞砜水溶液：取50ml二甲基亞砜置于100ml容量瓶中，用水稀釋至刻度，混勻獲得。

進(jìn)行檢測(cè)所需的色譜系統(tǒng)及色譜條件

色譜系統(tǒng)采用gc主機(jī)，型號(hào)為島津gc-2014，其自動(dòng)頂空進(jìn)樣器的型號(hào)為danihss86.50，其工作站及版本號(hào)為島津gcsolution2.3。

色譜條件

gc的參數(shù)如下：

柱溫：40℃下保持8min，然后以8℃/min的速度升溫至120℃，保持10min；

檢測(cè)器溫度：280℃；進(jìn)樣口溫度：250℃；

載氣為n2；柱流量wei1ml/min；

分流比為100:1；運(yùn)行時(shí)間為28min；

氫氣壓力為55kpa；空氣壓力為45kpa；

色譜柱型號(hào)：sh-rtx-624柱；檢測(cè)器類型為fid；

色譜柱規(guī)格為：30m×0.32mm×1.8μm；

頂空進(jìn)樣器參數(shù)如下：

平衡溫度為90℃；定溫管溫度為95℃；

傳輸線溫度為100℃；頂空瓶振搖方式為無；

頂空瓶平衡時(shí)間為30min；

溶液配制

乙醇儲(chǔ)備液：精密稱取乙醇2.5g至100ml容量瓶中，用50％二甲基亞砜水溶液稀釋至刻度，混勻。

甲苯儲(chǔ)備液：精密稱取苯0.445g至100ml容量瓶中，用50％二甲基亞砜水溶液稀釋至刻度，混勻。

苯儲(chǔ)備液：精密稱取苯100mg至100ml容量瓶中，用50％二甲基亞砜水溶液稀釋至刻度，混勻。精密量取1ml至100ml容量瓶中，用50％二甲基亞砜水溶液稀釋至刻度，混勻。

標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液：精密量取乙醇儲(chǔ)備液10ml、甲苯儲(chǔ)備液10ml、苯儲(chǔ)備液10ml置100ml容量瓶中，用50％二甲基亞砜水溶液稀釋至刻度，混勻。

標(biāo)準(zhǔn)溶液：精密量取標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液10ml置100ml容量瓶中，用50％二甲基亞砜水溶液稀釋至刻度，混勻。即得乙醇250μg/ml、甲苯44.5μg/ml、苯0.1μg/ml。

標(biāo)準(zhǔn)品測(cè)試溶液：精密量取5.0ml標(biāo)準(zhǔn)溶液，置頂空瓶中，密閉，混勻。

供試品溶液：精密稱取0.25g維生素b6樣品，置于頂空瓶中，加50％二甲亞砜5.0ml溶解，密封瓶蓋。

空白溶液：取50％二甲亞砜水溶液5.0ml置頂空瓶中，密封瓶蓋。

系統(tǒng)適用性溶液：移取5.0ml標(biāo)準(zhǔn)溶液，置頂空瓶中，密封瓶蓋，混勻。

系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn)：

系統(tǒng)穩(wěn)定60min以上，進(jìn)樣空白溶液，確認(rèn)圖譜中無其他雜質(zhì)；根據(jù)需要可多進(jìn)幾針空白。

取標(biāo)準(zhǔn)溶液頂空1.0ml，記錄色譜圖，各色譜峰之間的分離度不小于1.5；要求是：重復(fù)進(jìn)樣6次各殘留溶劑對(duì)應(yīng)峰的峰面積rsd應(yīng)不大于10％，理論塔板數(shù)不小于5000。

測(cè)定方法：

分別取標(biāo)準(zhǔn)品測(cè)試溶液、供試品溶液頂空1.0ml，按以下順序進(jìn)樣分析：

空白溶液進(jìn)針后，依次進(jìn)六針系統(tǒng)適應(yīng)性溶液、進(jìn)兩針標(biāo)準(zhǔn)品測(cè)試溶液、進(jìn)一針供試品溶液、再進(jìn)一針供試品溶液、進(jìn)一針標(biāo)準(zhǔn)品測(cè)試溶液，分別記錄色譜圖。

在檢驗(yàn)vb6成品中我們檢驗(yàn)其中可能殘留的溶劑：苯(一類)、甲苯(二類)、乙醇，同時(shí)可以檢測(cè)生產(chǎn)中的副產(chǎn)物正丁醛等。

本文中所描述的具體實(shí)施例僅僅是對(duì)本發(fā)明精神作舉例說明。本發(fā)明所屬技術(shù)領(lǐng)域的技術(shù)人員可以對(duì)所描述的具體實(shí)施例做各種各樣的修改或補(bǔ)充或采用類似的方式替代，但并不會(huì)偏離本發(fā)明的精神或者超越所附權(quán)利要求書所定義的范圍。