本發(fā)明涉及一種檢測嬰幼兒米粉中維生素或維生素衍生物的方法，具體涉及一種同時(shí)檢測嬰幼兒米粉中多種維生素或維生素衍生物的方法。屬于食品營養(yǎng)檢測領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
：維生素可分為脂溶性維生素和水溶性維生素兩大類，前者包括維生素a、d、e、k，后者包括維生素b族和維生素c。它們是生物體所需要的微量營養(yǎng)成分，而一般又無法由生物體自己生產(chǎn)，需要通過飲食等手段獲得。正常人每日需要攝入維生素a2500～3000國際單位，維生素d300～400國際單位。機(jī)體如果缺乏維生素，就會(huì)出現(xiàn)免疫力下降，容易患病。6月齡以上的嬰幼兒建議添加?jì)胗變好追?，嬰幼兒米粉在我國具有很大的市場需求。國家質(zhì)檢總局2012年第三季度抽查結(jié)果表明，嬰幼兒米粉產(chǎn)品抽樣合格率僅為54.2％，集中的問題表現(xiàn)在沒有添加營養(yǎng)強(qiáng)化劑或營養(yǎng)強(qiáng)化劑不足。其中維生素是嬰幼兒米粉中必不可少的營養(yǎng)成分。在嬰幼兒米粉種類繁多、質(zhì)量參差不齊的今天如何能快速、準(zhǔn)確地測定嬰幼兒米粉中維生素的含量顯得尤為重要。但是采用現(xiàn)有方法測定嬰幼兒米粉中維生素的含量的時(shí)候，存在前處理操作繁瑣，檢測周期長，試劑消耗量大，且不能同時(shí)檢測多種維生素的問題。超臨界流體萃取(supercriticalfluidextraction，sfe)是一種物理分離和純化的方法，利用壓力和溫度對(duì)超臨界流體co2(scco2)的溶解能力的影響而進(jìn)行的，由于scco2具有類似氣體的擴(kuò)散系數(shù)和液體的溶解力，表面張力為零，能迅速滲透進(jìn)固體物質(zhì)之中進(jìn)行萃取，且具有高效、不易氧化、純天然、無化學(xué)污染等特點(diǎn)而在眾多領(lǐng)域有所應(yīng)用。超臨界流體色譜(supercriticalfluidchromatography，sfc)是以超臨界流體做流動(dòng)相，依靠流動(dòng)相的溶解能力進(jìn)行分離、分析的色譜過程。該技術(shù)兼有氣相色譜和液相色譜的特點(diǎn)，既可以分析不適用氣相色譜分析的高沸點(diǎn)、低揮發(fā)性樣品，又具有比高效液相色譜更快的分析速度。但是，現(xiàn)有的超臨界流體萃取技術(shù)存在樣品容易堵塞萃取管路的問題，易造成設(shè)備損壞和原料浪費(fèi)等問題。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本發(fā)明的目的是為克服上述現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種前處理簡單、快速、準(zhǔn)確、環(huán)保并且可同時(shí)測定嬰幼兒米粉中多種維生素或維生素衍生物的檢測方法。為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用下述技術(shù)方案：一種同時(shí)檢測嬰幼兒米粉中多種維生素或維生素衍生物的方法，是以無水硫酸鈉為分散劑，采用超臨界流體萃取-超臨界流體色譜-質(zhì)譜(sfc-sfe-ms)聯(lián)用的檢測方法。所述維生素為維生素b3，維生素d2，維生素d3，維生素e，維生素k1，維生素k2。其中，維生素b3為水溶性維生素，其余均為脂溶性維生素。所述維生素衍生物為維生素a乙酸酯(維a乙酸酯)。此方法可以同時(shí)檢測嬰幼兒米粉中維生素a乙酸酯、維生素d2和維生素e。包括以下步驟：(1)標(biāo)準(zhǔn)工作曲線的建立：取維生素或維生素衍生物標(biāo)準(zhǔn)品，以異丙醇為溶劑，配制成含維a乙酸酯、維生素d2、維生素d3、維生素e、維生素k1、維生素k2、維生素b3濃度分別為232.5、242.5、260、255、262.5、240、265mg/l的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液。稱取一定質(zhì)量的無水硫酸鈉作為分散劑放入樣品舟中，在分散劑表面分別加入體積為2μl、4μl、20μl、40μl、60μl、80μl的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，待溶劑自然揮干后，將分散劑與揮干后的維生素或維生素衍生物標(biāo)準(zhǔn)品攪拌均勻，裝入體積為5ml的萃取罐中，使用sfe-sfc-ms進(jìn)行分析，以維生素或維生素衍生物的質(zhì)量為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)，外標(biāo)法建立標(biāo)準(zhǔn)工作曲線。(2)實(shí)際樣品檢測：稱取一定質(zhì)量的無水硫酸鈉作為分散劑放入樣品舟中，加入相應(yīng)質(zhì)量為m的市售嬰幼兒米粉混勻，裝入體積為5ml的萃取罐中，使用sfe-sfc-ms進(jìn)行分析。根據(jù)sfc和ms可以測定樣品中所含的維生素或維生素衍生物的種類，根據(jù)sfc峰面積并按照(1)中的標(biāo)準(zhǔn)曲線可以得到所測樣品中維生素或維生素衍生物的質(zhì)量m1。根據(jù)公式x＝m1/m計(jì)算得到所測樣品中的維生素或維生素衍生物的含量x(mg/kg)。優(yōu)選的，步驟(1)和步驟(2)中，無水硫酸鈉的質(zhì)量均為5g。如果質(zhì)量少于5g，會(huì)造成co2的湍流，多于5g，則會(huì)使萃取罐密封不嚴(yán)，都會(huì)造成萃取效率降低，檢測結(jié)果不準(zhǔn)確。進(jìn)一步優(yōu)選的，步驟(2)中，實(shí)際樣品的取樣量優(yōu)選為0.05g～1g，即無水硫酸鈉和市售嬰幼兒米粉的質(zhì)量比為5：0.05～1，取樣量過小將無法保證取樣的代表性，取樣量過大將導(dǎo)致明顯的基質(zhì)效應(yīng)。更進(jìn)一步優(yōu)選的，實(shí)際樣品取樣量為0.2g，即無水硫酸鈉和市售嬰幼兒米粉的質(zhì)量比為5：0.2。優(yōu)選的，步驟(1)中，溶解維a乙酸酯、維生素d2、維生素d3、維生素e、維生素k1、維生素k2標(biāo)準(zhǔn)品的溶劑為正己烷，溶解維生素b3標(biāo)準(zhǔn)品的溶劑為純水。優(yōu)選的，步驟(1)和步驟(2)中sfe-sfc-ms的分析條件如下：sfe萃取條件：萃取劑：scco2；夾帶劑：甲醇；夾帶劑體積濃度：5％；填充劑：a-scco2，b-甲醇；填充劑比例：a/b＝85/15(v/v)；萃取流速：3ml/min；萃取方式：靜態(tài)萃取3分鐘+動(dòng)態(tài)萃取2分鐘，循環(huán)3次；萃取溫度：40℃；萃取背壓：a-14.8mpa，b-15mpasfc色譜條件：色譜柱：glsciencecn-3(4.6mmi.d.×250mml.,3μm)；流動(dòng)相：a-scco2，b-甲醇；流動(dòng)相流速：3ml/min；柱溫：40℃；背壓：a-15mpa，b-40mpa；洗脫方式：17-24分鐘，5％b；24-27分鐘，10％b；27-32分鐘，50％b*17分鐘之前為填充和sfe萃取過程質(zhì)譜(ms)條件：質(zhì)譜補(bǔ)償液：甲醇；補(bǔ)償液流速：0.2ml/min。目標(biāo)分析物的質(zhì)譜參數(shù)見表1：表1維生素質(zhì)譜參數(shù)*表示定量離子本發(fā)明的有益效果：(1)本發(fā)明利用sfe-sfc-ms系統(tǒng)，建立了嬰幼兒米粉中多種維生素或維生素衍生物的檢測方法。該方法準(zhǔn)確度高、重復(fù)性好，可以滿足定性、定量檢測維生素或維生素衍生物的要求。(2)本發(fā)明中的檢測方法將原本需要多種前處理和分析手段才能分析的多種維生素和維生素衍生物實(shí)現(xiàn)了同時(shí)分析，且可以同時(shí)檢測脂溶性和水溶性維生素。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本方法具有前處理簡單、高效快速、低耗環(huán)保、自動(dòng)化程度高等優(yōu)點(diǎn)。(3)本發(fā)明中的檢測方法中加入無水硫酸鈉作為分散劑有效地解決了樣品易堵塞萃取管路的問題，對(duì)于提高設(shè)備和原材料的利用率起到了重要作用。(4)無水硫酸鈉與樣品的質(zhì)量比優(yōu)選為5：0.05～1，可以有效避免co2湍流的產(chǎn)生，使萃取效率更高。附圖說明圖1a是維生素或維生素衍生物混合標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)sfe-sfc-ms系統(tǒng)檢測的色譜圖；圖1b是維生素或維生素衍生物混合標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)sfe-sfc-ms系統(tǒng)檢測的色譜圖的局部放大圖；圖2a是優(yōu)選萃取條件下維a乙酸酯標(biāo)準(zhǔn)品連續(xù)四次萃取的色譜圖；圖2b是優(yōu)選萃取條件下維生素b3標(biāo)準(zhǔn)品連續(xù)四次萃取的色譜圖；圖2c是優(yōu)選萃取條件下維生素d2標(biāo)準(zhǔn)品連續(xù)四次萃取的色譜圖；圖3a是市售某品牌嬰幼兒米粉中維a乙酸酯的色譜圖；圖3b是市售某品牌嬰幼兒米粉中維生素d2的色譜圖；圖3c是市售某品牌嬰幼兒米粉中維生素e的色譜圖。具體實(shí)施方式下面結(jié)合附圖和實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一步的闡述，應(yīng)該說明的是，下述說明僅是為了解釋本發(fā)明，并不對(duì)其內(nèi)容進(jìn)行限定。實(shí)施例：(1)標(biāo)準(zhǔn)工作曲線的建立精密稱定維a乙酸酯、維生素d2、維生素d3、維生素e、維生素k1、維生素k2標(biāo)準(zhǔn)品9.3、9.7、10.4、10.2、10.5、9.6mg，用正已烷定容到1ml，配制維a乙酸酯、維生素d2、維生素d3、維生素e、維生素k1，維生素k2濃度分別為9300、9700、10400、10200、10500、9600mg/l的單一標(biāo)準(zhǔn)溶液。精密稱定維生素b3標(biāo)準(zhǔn)品10.6mg，用純水定容到1ml，配制維生素b3濃度為10600mg/l的單一標(biāo)準(zhǔn)溶液。分別準(zhǔn)確移取以上7種單一標(biāo)準(zhǔn)溶液各1ml，用異丙醇定容到10ml，配制維a乙酸酯、維生素d2、維生素d3、維生素e、維生素k1、維生素k2、維生素b3濃度分別為930、970、1040、1020、1050、960、1060mg/l的初始混合標(biāo)準(zhǔn)溶液。再移取上述初始混合標(biāo)準(zhǔn)溶液2.5ml，用異丙醇定容到10ml，配制維a乙酸酯、維生素d2、維生素d3、維生素e、維生素k1、維生素k2、維生素b3濃度分別為232.5、242.5、260、255、262.5、240、265mg/l的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液。稱取5g無水硫酸鈉作為分散劑放入樣品舟中，在分散劑表面分別加入體積為2μl、4μl、20μl、40μl、60μl、80μl的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，待溶劑自然揮干后，將分散劑與揮干后的維生素或維生素衍生物標(biāo)準(zhǔn)品攪拌均勻，裝入體積為5ml的萃取罐中，使用sfe-sfc-ms進(jìn)行分析，以維生素或維生素衍生物的質(zhì)量為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)，外標(biāo)法建立標(biāo)準(zhǔn)工作曲線。維生素或維生素衍生物混合標(biāo)準(zhǔn)品的色譜圖見圖1a和圖1b。sfe-sfc-ms系統(tǒng)的配置為：lc-30adsf(co2輸液泵)，lc-20adxr(輸液泵，含lpge低壓梯度比例閥)，lc-20ad(補(bǔ)償液輸送泵)，dgu-20a5(在線脫氣機(jī))，sfe-30a(超臨界流體萃取單元)，sil-30ac(自動(dòng)進(jìn)樣器，5μl定量環(huán))，cto-20ac(柱溫箱)，sfc-30a×2(背壓調(diào)節(jié)單元)，cbm-20a(系統(tǒng)控制器)，lcms-8045(三重四極桿質(zhì)譜儀)，labsolutionsver5.86(色譜工作站)sfe萃取條件：萃取劑：scco2；夾帶劑：甲醇；夾帶劑體積濃度：5％；填充劑：a-scco2，b-甲醇；填充劑比例：a/b＝85/15(v/v)；萃取流速：3ml/min；萃取方式：靜態(tài)萃取3分鐘+動(dòng)態(tài)萃取2分鐘，循環(huán)3次；萃取溫度：40℃；萃取背壓：a-14.8mpa，b-15mpasfc色譜條件：色譜柱：glsciencecn-3(4.6mmi.d.×250mml.,3μm)；流動(dòng)相：a-scco2，b-甲醇；流動(dòng)相流速：3ml/min；柱溫：40℃；背壓：a-15mpa，b-40mpa；洗脫方式：17-24分鐘，5％b；24-27分鐘，10％b；27-32分鐘，50％b*17分鐘之前為填充和sfe萃取過程質(zhì)譜條件：質(zhì)譜補(bǔ)償液：甲醇；補(bǔ)償液流速：0.2ml/min。(2)線性關(guān)系考察對(duì)上述標(biāo)準(zhǔn)工作曲線進(jìn)行線性回歸，結(jié)果見表2。結(jié)果表明各標(biāo)準(zhǔn)品在各自的質(zhì)量范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，證明本發(fā)明方法在所選線性范圍內(nèi)準(zhǔn)確度高。表2標(biāo)準(zhǔn)工作曲線及相關(guān)系數(shù)序號(hào)名稱線性范圍(μg)線性方程相關(guān)系數(shù)準(zhǔn)確度(％)1維a乙酸酯0.465-18.6y＝473334x-1149980.997492.6-113.22維生素b30.485-19.4y＝9684000x-22850000.995594.6-102.03維生素d20.520-20.8y＝16893900x-7650140.995692.7-108.94維生素d30.510-20.4y＝0.159397x-0.005754470.998490.8-111.95維生素e0.525-21.0y＝25640000x-148500000.993590.9-118.06維生素k10.480-19.2y＝22900000x+229700000.995196.3-111.17維生素k20.530-21.2y＝21080000x+115800000.998391.2-116.8(3)本實(shí)施例萃取條件下維生素或維生素衍生物標(biāo)準(zhǔn)品的萃取效率稱取5g無水硫酸鈉作為分散劑，在分散劑表面加入維生素或維生素衍生物混合標(biāo)準(zhǔn)溶液80μl，待溶劑自然揮干后，將分散劑與維生素或維生素衍生物混合標(biāo)準(zhǔn)品攪拌均勻，加入萃取罐中，重復(fù)對(duì)同一萃取罐的混合標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行連續(xù)四次sfe-sfc-ms系統(tǒng)分析，檢測條件如本實(shí)施例步驟(1)中所述。以每次萃取維生素或維生素衍生物標(biāo)準(zhǔn)品的峰面積對(duì)多次萃取峰面積之和做比，計(jì)算萃取效率，維生素或維生素衍生物標(biāo)準(zhǔn)品在此萃取條件下的首次萃取效率在82.13～100.00％之間，見表3。本實(shí)施例萃取條件下維a乙酸酯、維生素b3和維生素d2標(biāo)準(zhǔn)品連續(xù)四次萃取的色譜圖見圖2a～圖2c。表3維生素或維生素衍生物標(biāo)準(zhǔn)品的萃取效率(％)序號(hào)名稱第一次第二次第三次第四次1維a乙酸酯100.00------2維生素b382.138.346.193.343維生素d299.170.640.20--4維生素d398.740.800.310.155維生素e99.600.280.090.046維生素k199.040.690.200.077維生素k298.870.820.230.08(4)重復(fù)性考察：稱取5g無水硫酸鈉作為分散劑放入樣品舟中，在分散劑表面加入維生素或維生素衍生物混合標(biāo)準(zhǔn)溶液33μl，待溶劑自然揮干后，將分散劑與維生素或維生素衍生物混合標(biāo)準(zhǔn)品攪拌均勻，加入萃取罐中，按照本實(shí)施例步驟(1)中所述的分析條件，使用sfe-sfc-ms系統(tǒng)進(jìn)行分析。平行制備六份樣品，連續(xù)進(jìn)樣，考察sfe-sfc-ms分析系統(tǒng)的重復(fù)性。結(jié)果如表4所示，保留時(shí)間和峰面積的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差在0.08～0.79％和7.33～11.50％之間。表明sfe-sfc-ms分析系統(tǒng)具有良好的重復(fù)性。表4保留時(shí)間和峰面積重復(fù)性(n＝6)(5)加標(biāo)回收率考察：①糯米粉基質(zhì)加標(biāo)回收率考察：稱取5g無水硫酸鈉作為分散劑放入樣品舟中，加入已測定的不含待測維生素和維生素衍生物的市售糯米粉0.2g，再加入維生素或維生素衍生物混合標(biāo)準(zhǔn)溶液80μl，待溶劑自然揮干后，將分散劑、糯米粉與維生素或維生素衍生物混合標(biāo)準(zhǔn)品攪拌均勻，再加入萃取罐中，按照本實(shí)施例步驟(1)中所述的分析條件，使用sfe-sfc-ms系統(tǒng)進(jìn)行分析。平行制備六份樣品進(jìn)行連續(xù)測試，計(jì)算平均加標(biāo)回收率和相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差，結(jié)果見表5。結(jié)果顯示維生素或維生素衍生物的平均加標(biāo)回收率在74.12％～107.79％之間，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差在4.93％～10.74％，能夠滿足樣品定量分析的要求。表5糯米粉加標(biāo)回收率(n＝6)②嬰幼兒米粉基質(zhì)加標(biāo)回收率考察：稱取5g無水硫酸鈉作為分散劑放入樣品舟中，加入已測定的市售嬰幼兒米粉0.2g，再加入維生素或維生素衍生物混合標(biāo)準(zhǔn)溶液20μl，待溶劑自然揮干后，將分散劑、嬰幼兒米粉和與維生素或維生素衍生物混合標(biāo)準(zhǔn)品攪拌均勻，再加入萃取罐中，按照本實(shí)施例步驟(1)中所述的分析條件，使用sfe-sfc-ms系統(tǒng)進(jìn)行分析。平行制備六份樣品進(jìn)行連續(xù)測試，扣除樣品中維生素或維生素衍生物的實(shí)際含量(n＝4)，計(jì)算平均加標(biāo)回收率和相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差，結(jié)果見表6。結(jié)果顯示維生素或維生素衍生物的平均加標(biāo)回收率在62.92％～114.19％之間，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差6.59％～10.03％，能夠滿足樣品定量分析的要求。表6嬰幼兒米粉加標(biāo)回收率(6)實(shí)際樣品檢測：稱取5g無水硫酸鈉作為分散劑放入樣品舟中，加入質(zhì)量(m)為0.2g的市售嬰幼兒米粉混勻，裝入萃取罐，按照本實(shí)施例步驟(1)中所述的分析條件，使用sfe-sfc-ms系統(tǒng)進(jìn)行分析。平行制備4份樣品進(jìn)行連續(xù)測試。檢測出此嬰幼兒米粉中含有維a乙酸酯、維生素d2和維生素e，由峰面積根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)工作曲線得到質(zhì)量m1，根據(jù)公式x＝m1/m計(jì)算得到此嬰幼兒米粉中維a乙酸酯、維生素d2和維生素e的質(zhì)量含量分別為：28.55mg/kg、22.3mg/kg和2.75mg/kg。此嬰幼兒米粉樣品中維a乙酸酯、維生素d2和維生素e的色譜圖見圖3a～3c。對(duì)比例1：稱取5g無水硫酸鈉作為分散劑，在分散劑表面加入維生素或維生素衍生物混合標(biāo)準(zhǔn)溶液80μl，待溶劑自然揮干后，將分散劑與維生素或維生素衍生物混合標(biāo)準(zhǔn)品攪拌均勻，加入萃取罐中，重復(fù)對(duì)同一萃取罐的混合標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行連續(xù)四次sfe-sfc-ms分析。以每次萃取維生素或維生素衍生物標(biāo)準(zhǔn)品的峰面積對(duì)多次萃取峰面積之和做比，計(jì)算萃取效率。填充劑中超臨界流體二氧化碳和甲醇的體積比選擇85：15，萃取劑中夾帶劑的體積濃度選擇15％，萃取方式為：靜態(tài)萃取3分鐘+動(dòng)態(tài)萃取2分鐘，重復(fù)3次，其他檢測條件如實(shí)施例步驟(1)中所述。此對(duì)比例條件下得到的維生素或維生素衍生物標(biāo)準(zhǔn)品的萃取效率見表7。表7對(duì)比例1條件下維生素或維生素衍生物標(biāo)準(zhǔn)品的萃取效率(％)序號(hào)名稱第一次第二次第三次第四次1維a乙酸酯87.007.272.663.082維生素b318.1737.8225.7618.253維生素d296.622.860.300.234維生素d397.072.100.82--5維生素e95.204.190.61--6維生素k185.6511.432.92--7維生素k298.411.040.54--對(duì)比例2：稱取5g無水硫酸鈉作為分散劑，在分散劑表面加入維生素或維生素衍生物混合標(biāo)準(zhǔn)溶液80μl，待溶劑自然揮干后，將分散劑與維生素或維生素衍生物混合標(biāo)準(zhǔn)品攪拌均勻，加入萃取罐中，重復(fù)對(duì)同一萃取罐的混合標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行連續(xù)四次sfe-sfc-ms分析。以每次萃取維生素或維生素衍生物標(biāo)準(zhǔn)品的峰面積對(duì)多次萃取峰面積之和做比，計(jì)算萃取效率。填充劑中超臨界流體二氧化碳和甲醇的體積比選擇70：30，萃取劑中夾帶劑的體積濃度為30％，萃取方式為：靜態(tài)萃取3分鐘+動(dòng)態(tài)萃取2分鐘，重復(fù)3次，其他檢測條件如實(shí)施例步驟(1)中所述。此對(duì)比例條件下得到的維生素或維生素衍生物標(biāo)準(zhǔn)品的萃取效率見表8。表8對(duì)比例2條件下維生素或維生素衍生物標(biāo)準(zhǔn)品的萃取效率(％)序號(hào)名稱第一次第二次第三次第四次1維a乙酸酯71.8716.206.835.102維生素b346.6036.1012.464.843維生素d2--------4維生素d3--------5維生素e91.482.983.132.426維生素k1--------7維生素k278.1512.225.604.03對(duì)比例3：稱取5g無水硫酸鈉作為分散劑，在分散劑表面加入維生素或維生素衍生物混合標(biāo)準(zhǔn)溶液80μl，待溶劑自然揮干后，將分散劑與維生素或維生素衍生物混合標(biāo)準(zhǔn)品攪拌均勻，加入萃取罐中，重復(fù)對(duì)同一萃取罐的混合標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行多次sfe-sfc-ms系統(tǒng)分析。以每次萃取維生素或維生素衍生物標(biāo)準(zhǔn)品的峰面積對(duì)多次萃取峰面積之和做比，計(jì)算萃取效率。填充劑中超臨界流體二氧化碳和甲醇的體積比選擇85：15，萃取劑中夾帶劑的體積濃度選擇5％，萃取方式為：靜態(tài)萃取3分鐘+動(dòng)態(tài)萃取2分鐘，重復(fù)1次，其他檢測條件如實(shí)施例步驟(1)中所述。此對(duì)比例條件下得到的維生素或維生素衍生物標(biāo)準(zhǔn)品的萃取效率見表9。表9對(duì)比例3條件下維生素或維生素衍生物標(biāo)準(zhǔn)品的萃取效率(％)序號(hào)名稱第一次第二次第三次第四次1維a乙酸酯89.069.870.730.342維生素b359.1127.898.634.373維生素d286.7112.530.590.174維生素d387.3212.000.560.125維生素e93.506.450.040.016維生素k190.648.740.490.137維生素k287.3311.800.670.20試驗(yàn)例：以維生素或維生素衍生物的首次萃取效率為優(yōu)化目標(biāo)，分析實(shí)施例、對(duì)比例1、對(duì)比例2和對(duì)比例3的檢測結(jié)果，見表10。表10不同萃取條件下維生素或維生素衍生物的首次萃取效率對(duì)比序號(hào)名稱實(shí)施例對(duì)比例1對(duì)比例2對(duì)比例31維a乙酸酯100.0087.0071.8789.062維生素b382.1318.1746.6059.113維生素d299.1796.62--86.714維生素d398.7497.07--87.325維生素e99.6095.2091.4893.506維生素k199.0485.65--90.647維生素k298.8798.4178.1587.33由表10可以看出，對(duì)比例1中水溶性維生素b3的首次萃取效率最低。對(duì)比例2中雖然維生素b3的首次萃取效率較對(duì)比例1有所提高，但是由于夾帶劑體積濃度過高導(dǎo)致極性雜質(zhì)共萃取，使得脂溶性維生素d2、維生素d3和維生素k1譜圖雜亂，無法積分。對(duì)比例3中維生素b3的首次萃取效率相對(duì)于對(duì)比例1和對(duì)比例2有所提高，但相對(duì)于實(shí)施例，萃取效率仍然較低，并且維a乙酸酯、維生素d2、維生素d3、維生素e、維生素k1和維生素k2的首次萃取效率均低于實(shí)施例。上述雖然結(jié)合附圖對(duì)本發(fā)明的具體實(shí)施方式進(jìn)行了描述，但并非對(duì)本發(fā)明保護(hù)范圍的限制，在本發(fā)明的技術(shù)方案的基礎(chǔ)上，本領(lǐng)域技術(shù)人員不需要付出創(chuàng)造性勞動(dòng)即可做出的各種修改或變形仍在本發(fā)明的保護(hù)范圍以內(nèi)。當(dāng)前第1頁12