本發(fā)明屬于食品檢測領域，具體地涉及一種紅棗中甜蜜素的殘留量的檢測方法。
背景技術：
：甜蜜素，別名環(huán)己基氨基磺酸鈉，化學分子式C6H11NHSO3Na，屬于一種非營養(yǎng)型合成添加劑，其甜度是蔗糖的30倍，而價格卻是蔗糖的3倍，因而作為常用的食品添加劑用于飲料、糕點、蜜餞等食品中。有研究表明，食用甜蜜素過量不僅會對人體肝臟和神經系統(tǒng)造成很大危害，而且其代謝物環(huán)己胺對心血管系統(tǒng)和睪丸也有毒理作用，因此部分國家已經禁止使用該種添加劑。我國雖然未禁止此類添加劑的使用，但在國家標準GB2760中明確規(guī)定安賽蜜在各類食品中的最大添加限量。紅棗，是一種藥食同源的果品，其含有蛋白質、糖類、有機酸、脂肪、人體所必需的18種氨基酸以及鐵、鋅、磷、鈣、硒等。紅棗最突出的特點是維生素含量非常高，可達400～600mg/kg，如含維生素B1、B2、尼克酸等，素有“活性維生素”之稱，并有“天然維生素丸”的美譽，具有很高的營養(yǎng)保健價值。紅棗不但含有豐富的營養(yǎng)物質，而且還含有豐富的藥用物質，具有養(yǎng)胃健脾、補血益氣、和解藥毒、保護肝臟、增強肌力等功效，可潤肺、止咳、治虛、養(yǎng)胃。因此，紅棗是一種不同于一般的果品，它集藥用、保健、食用等多功能于一體，而成為果中珍品。紅棗深受人們的喜愛，隨著人們對健康越來越重視，對紅棗是否經過甜蜜素處理的問題產生了質疑。技術實現(xiàn)要素：有鑒于此，確有必要提供一種紅棗中甜蜜素的殘留量的檢測方法，以解決上述問題。一種紅棗中甜蜜素的殘留量的檢測方法，其包括以下步驟：配制甜蜜素標準溶液，繪制甜蜜素標準溶液曲線；將10～15g鮮紅棗清洗干凈后去核，得到無核紅棗和紅棗核；對所述無核紅棗進行打漿處理，得到紅棗漿；將所述紅棗核干燥后破碎研磨成粉，獲得棗核粉；將所述紅棗漿和所述棗核粉混合置于50mL離心管中，并加入10mL純凈水；然后，先超聲提取15～18min，在以1×104～2.5×104r/min的轉速離心分離8～10min，獲得首次上清液和首次沉淀物，并收集全部所述首次上清液；向所述首次沉淀物中加入10mL純凈水并超聲提取8～12min，再離心分離5～7min，收集全部二次上清液；將該二次上清液與所述首次上清液均勻混合，得到紅棗上清液；將所述紅棗上清液過0.22μm膜，得到紅棗樣品溶液；采用液相色譜-質譜法檢測所述紅棗樣品溶液，并將所述紅棗樣品溶液的測定結果與所述標準溶液曲線進行比對，得到所述紅棗樣品溶液中的甜蜜素含量。其中，所述液相色譜-質譜法的檢測條件為：所用色譜柱采用：反相C18色譜柱、直徑2.1mm、柱長50mm、填料粒徑1.7μm；流動相：乙腈-0.02mol/L乙酸銨溶液（10/90，υ/υ）；流速：0.25mL/min；柱溫:40℃；進樣量：10μL；液相色譜分析時間不超過3min；質譜離子源：ESI；掃描方式：負離子模式；毛細管電壓：3.0kV；離子源溫度：110℃；脫溶劑氣溫度：350℃；脫溶劑氣流量：600L/h；錐孔反吹氣流量：50L/h；錐孔電壓：40V?；谏鲜?，繪制所述甜蜜素標準溶液曲線的方法為：首先，量取濃度為1mg/ml的甜蜜素原液200μL，并轉移至100ml的容量瓶中，用純凈水定容，配制成濃度為2μg/mL的甜蜜素標準儲備液；其次，分別量取所述甜蜜素標準儲備液0.5mL、1mL、2.5mL、5mL、15mL、30mL并轉移至六個100mL的容量瓶中，再分別用純凈水定容，配制成濃度分別為10μg/L、20μg/L、50μg/L、100μg/L、300μg/L、600μg/L的甜蜜素標準溶液系列；然后，采用色譜-串聯(lián)質譜檢測器對上述六個甜蜜素標準溶液系列進行檢測，得到甜蜜素標準溶液的六次平行測量結果；最后，以上述六次平行測量結果中的目標峰的峰面積為縱坐標(y)，甜蜜素標準溶液系列的濃度為橫坐標(x)，建立標準曲線。在本發(fā)明提供的紅棗中甜蜜素的殘留量的檢測方法中，在對無核紅棗進行打漿處理的過程中，紅棗中的纖維受到剪切、揉搓及梳理等作用，并產生細纖維化團聚，而紅棗中的甜蜜素及其他成分則由于受到機械外力而被擠出來，并部分吸附在纖維上，形成所述紅棗漿；在所述紅棗漿加入棗核粉，由于棗核粉具有粗糙的摩擦面和較大的硬度，在超聲萃取過程中可以增強因超聲波輻射壓強而產生的機械振動幅度、擾動效應強度、擊碎強度和攪拌作用等，增大物質分子運動頻率和速度，增加溶劑穿透力，從而紅棗中的營養(yǎng)成分更加容易進入純凈水中，達到加快萃取速度、縮短萃取時間、提高萃取效果的目的。另外，由于紅棗經過打漿處理，其中的纖維比較難于進入紅棗樣品溶液中，而且也有利于幫助離心分離產物上清液和沉淀物分離，使得紅棗樣品溶液中的各組分含量更加接近鮮紅棗中對應組分的真實含量，從而提高檢測結果的準確度，能夠更加準確判斷紅棗是否經過甜蜜素處理。具體實施方式圖1為本發(fā)明實施例提供的甜蜜素標準溶液建立的標準曲線圖。圖2為本發(fā)明實施例提供的甜蜜素標準溶液的色譜圖。圖3為本發(fā)明實施例提供的紅棗樣品溶液中的甜蜜素的色譜圖。具體實施方式下面通過具體實施方式，對本發(fā)明的技術方案做進一步的詳細描述。本發(fā)明實施例提供一種紅棗中甜蜜素的殘留量的檢測方法，其包括以下步驟：（一）配制甜蜜素標準溶液，繪制甜蜜素標準溶液曲線；該步驟（一）具體包括以下分步驟：首先，量取濃度為1mg/ml的甜蜜素原液200μL，并轉移至100ml的容量瓶中，用純凈水定容，配制成濃度為2μg/mL的甜蜜素標準儲備液。其次，分別量取所述甜蜜素標準儲備液0.5mL、1mL、2.5mL、5mL、15mL、30mL并轉移至六個100mL的容量瓶中，再分別用純凈水定容，配制成濃度分別為10μg/L、20μg/L、50μg/L、100μg/L、300μg/L、600μg/L的甜蜜素標準溶液系列。然后，采用色譜-串聯(lián)質譜檢測器對上述六個甜蜜素標準溶液系列進行檢測，其中，該液相色譜-質譜法的檢測條件為：所用色譜柱采用：反相C18色譜柱、直徑2.1mm、柱長50mm、填料粒徑1.7μm；流動相：乙腈-0.02mol/L乙酸銨溶液（10/90，υ/υ）；流速：0.25mL/min；柱溫:40℃；進樣量：10μL；液相色譜分析時間不超過3min；梯度洗脫程序見表1。質譜離子源：ESI；掃描方式：負離子模式；毛細管電壓：3.0kV；離子源溫度：110℃；脫溶劑氣溫度：350℃；脫溶劑氣流量：600L/h；錐孔反吹氣流量：50L/h；錐孔電壓：45V；母離子(m/z)177.4；子離子(m/z)80.12、95.9；對應的碰撞能量為20.0V、15.0V；定量離子(m/z)80.12。表1梯度洗脫程序上述六個甜蜜素標準溶液系列的六次平行測量結果如表2所示。甜蜜素標準溶液的色譜圖如圖2所示。表2甜蜜素標準溶液系列的測量結果濃度（μg/L）102050100300600峰面積515498642394247382141298282104最后，以上述表2中的峰面積為縱坐標(y)，甜蜜素標準溶液系列的濃度為橫坐標(x)，建立繪制圖1所示的標準曲線，得到甜蜜素標準溶液的線性回歸方程：y=469.4x+464.5，相關系數(shù)平方1.0，線性范圍10～600μg/L，檢出限0.9μg/L。（二）將12.6g鮮紅棗清洗干凈后去核，得到無核紅棗和紅棗核；對所述無核紅棗進行打漿處理，得到紅棗漿；將所述紅棗核干燥后破碎研磨成粉，獲得棗核粉。（三）將所述紅棗漿和所述棗核粉混合置于50mL離心管中，并加入10mL純凈水；然后，先超聲提取15min，在以2.5×104r/min的轉速離心分離10min，獲得首次上清液和首次沉淀物，并收集全部所述首次上清液；向所述首次沉淀物中加入10mL純凈水并超聲提取8min，再離心分離7min，收集全部二次上清液；將該二次上清液與所述首次上清液均勻混合，得到紅棗上清液；將所述紅棗上清液過0.22μm膜，得到紅棗樣品溶液。（四）采用與步驟（一）相同條件的檢測條件檢測所述紅棗樣品溶液，所述紅棗樣品溶液的色譜圖如3所示，從圖3中可以看出在1.52min處有甜蜜素的特征峰，且所述紅棗樣品溶液中甜蜜素的峰面積為11903，帶入上述甜蜜素標準溶液的線性回歸方程中，即可得到紅棗樣品中的甜蜜素的濃度為24.37μg/L。由于我國不允許鮮水果中添加甜蜜素，所以本發(fā)明實施例提供的鮮紅棗的甜味異常，有影響消費者身體健康的隱患。本發(fā)明提供的檢測方法的空白加標回收率試驗按照現(xiàn)有的空白加標回收試驗方法，制得甜蜜素濃度為50μg/L、200μg/L的加標溶液，按照步驟（一）中提供的檢測方法進行檢測，檢測結果為：濃度為50μg/L的峰面積為24241，計算得出加標回收率為101.3%，相對標準偏差為1%；濃度為200μg/L的峰面積為95683，計算得出加標回收率為101.4%，相對標準偏差為2%。最后應當說明的是：以上實施例僅用以說明本發(fā)明的技術方案而非對其限制；盡管參照較佳實施例對本發(fā)明進行了詳細的說明，所屬領域的普通技術人員應當理解：依然可以對本發(fā)明的具體實施方式進行修改或者對部分技術特征進行等同替換；而不脫離本發(fā)明技術方案的精神，其均應涵蓋在本發(fā)明請求保護的技術方案范圍當中。當前第1頁1 2 3